CN213680675U - 一种病毒运送保存管 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种病毒运送保存管，所述病毒运送保存管包括管体，所述管体内部存储有细胞培养液，所述管体内壁贴设有由宿主细胞组成的宿主细胞层；所述细胞培养液用于培养宿主细胞，所述宿主细胞层用于培养病毒；本实用新型通过宿主细胞培养病毒样本，实现病毒样本在运送过程中进行增殖，降低因为病毒滴度在运送过程中发生下降导致漏检的几率，提高了检出病毒的阳性率，而且无需低温保存，降低了成本。

Description

一种病毒运送保存管

〖技术领域〗

本实用新型涉及病毒检测技术领域，尤其涉及一种病毒运送保存管。

〖背景技术〗

病毒是一种由核酸分子(DNA或RNA)与蛋白质构成的非细胞形态，靠寄生生活的、介于生命体及非生命体之间的有机物种。它由一个保护性外壳包裹一段DNA或者RNA，借由感染的机制，利用宿主的细胞***进行自我复制，但无法独立生长和复制。

近年来，人们发现了越来越多的新病毒，比如SARS冠状病毒、人高致病性禽流感病毒、新甲型H1N1流感病毒、新型冠状病毒COVID-19等。而面对新病毒引发的传染病，能否及时地做出准确的实验室病原学诊断，则是有效控制疫情的关键。病毒的病原学诊断涉及病毒的分离与鉴定、感染单位的测定、颗粒的检测、血清学检测以及核酸的检测；其中，病毒样本的保存运送则是这些检测过程中非常重要的一个环节，对病毒样本的质量有着极其重要的影响。

目前，病毒检测方法是用采样拭子对病毒进行采样后，放入病毒运送保存液，比如以运送培养基为基础改良的病毒维持液，以核酸提取裂解液为基础改良的病毒保存液中，以待后续检测。虽然现有的病毒检测方法采用病毒运送保存液提供营养物质或者减少降解病毒及核酸的因素。但是，由于液体成分的局限、个体样本的差异及运送条件的差别，病毒滴度及核酸物质在运送的过程中还是很容易出现不同程度的下降。与此同时，现有的病毒检测方法需要低温保存病毒，而低温保存运送成本较高。

〖实用新型内容〗

本实用新型的目的旨在提供一种病毒运送保存管，降低病毒滴度及核酸物质在样本运送的过程下出现下降的几率。

为了实现本实用新型的目的，本实用新型采用了如下技术方案：

一种病毒运送保存管，包括管体，所述管体内部存储有细胞培养液，所述管体内壁贴设有由宿主细胞组成的、采用单层细胞培养法生成的宿主细胞层；所述细胞培养液用于培养宿主细胞，所述宿主细胞层用于培养病毒。

进一步地，所述病毒运送保存管还包括筛网，所述筛网装配在所述管体内部，与所述管体内壁间隔设置；所述筛网用于容纳沾有病毒样本的拭子。

作为具体的实施方式，所述筛网包括筛网安装部以及筛网主体；所述筛网安装部的外径大于所述筛网主体的外径，用于将所述筛网主体卡设在所述管体内部；所述管体的管口内壁上开设有承接所述筛网安装部的阶梯孔；所述筛网主体的侧壁上开设有筛孔。

作为具体的实施方式，所述筛网主体包括第一筛网部和第二筛网部；所述第一筛网部位于所筛网安装部和第二筛网部之间；所述筛网安装部呈环状，所述第一筛网部呈圆筒状，所述第二筛网部呈上大下小的圆锥状。

作为具体的实施方式，所述阶梯孔包括第一圆柱孔和第二圆柱孔；所述第一圆柱孔位于所述第二圆柱孔的上方，且所述第一圆柱孔的直径大于或等于所述筛网安装部的外径，第二圆柱孔的直径小于所述筛网安装部的外径。

作为具体的实施方式，所述第二圆柱孔的直径小于所述管体在管口邻近下侧的内径。

进一步地，所述病毒运送保存管还包括放置在所述筛网内的多颗玻璃珠或滚珠。

进一步地，所述病毒运送保存管还包括管盖；所述管盖套设在所述管体的管口上，与所述管体可拆卸地连接。

进一步地，所述病毒运送保存管还包括胶塞；所述管盖的顶端面开设有胶塞安装孔，所述胶塞从所述管盖内部嵌入所述胶塞安装孔。

作为具体的实施方式，所述胶塞的纵向截面呈“凸”字形，包括从上到下排布的第一胶塞部和第二胶塞部；所述第一胶塞部的直径等于所述胶塞安装孔的内径；所述第二胶塞部的直径等于所述管盖的环形侧壁的内径。

本实用新型的有益效果：

本实用新型公开的病毒运送保存管通过宿主细胞培养病毒样本，实现病毒样本在运送过程中进行增殖，降低因为病毒滴度在运送过程中发生下降导致漏检的几率，提高了检出病毒的阳性率。进一步地，本实用新型通过筛网隔离拭子与管体内壁，避免病毒运送保存管在运送过程中发生振荡，导致拭子接触管体内壁，损坏贴设在管体内壁的宿主细胞层，导致病毒无法侵入宿主细胞进行增殖。进一步地，本实用新型通过设置第二圆柱孔的直径小于管体的内部侧壁，实现筛网***管体内部时，筛网的第一筛网部和第二筛网部被限制在第二圆柱孔的围设的范围内，不会与管体的内部侧壁接触，避免筛网***的过程中，接触管体的内部侧壁，损坏贴设在管体内壁的宿主细胞层。进一步地，本实用新型通过玻璃珠在振荡的过程中与拭子多次摩擦接触，便于洗脱拭子上面的病毒样本。进一步地，本实用新型通过在管盖嵌入可刺破的胶塞，实现无需拧开管盖，便可向管体内注入物质。进一步地，本实用新型通过第二胶塞部进行密封，保障病毒运送管内混有病毒样本和宿主细胞的细胞培养液在运送过程中不会发生泄漏，达到安全操作的目的。

〖附图说明〗

为了更清楚地说明本实用新型实施例，下面对实施例中所需要使用的附图做简单的介绍。下面描述中的附图仅仅是本实用新型中的实施例，对于本领域的普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他附图。

图1是本实用新型实施例提供的病毒运送保存管的立体示意图；

图2是本实用新型实施例提供的病毒运送保存管的剖面图；

图3是本实用新型实施例提供的病毒运送保存管的***图；

图4是本实用新型实施例提供的病毒运送保存管管体的剖面图；

图5是本实用新型实施例提供的病毒运送保存管(静置状态下)的宿主细胞层的局部检测图；

图6是取下筛网后，本实用新型实施例提供的病毒运送保存管(经过振荡后)的宿主细胞层的局部检测图；

图7是本实用新型实施例提供的病毒运送保存管(经过振荡后)的宿主细胞层的局部检测图；

图8是本实用新型实施例提供的病毒运送保存管制作方法的流程示意图；

图9是本实用新型实施例提供的病毒运送保存方法的流程示意图；

附图标记说明：100-管体，110-内螺纹，120-阶梯孔，121-第一圆柱孔，122-第二圆柱孔，200-管盖，210-内螺纹，220-胶塞安装孔，300-筛网，310-筛网安装部；320-筛网主体；321-第一筛网部，322-第二筛网部，400-胶塞，410-第一胶塞部，420-第二胶塞部。

〖具体实施方式〗

下面结合附图，对本实用新型进行详细的说明。

为了使本实用新型的目的、技术方案、优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例对本实用新型进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本实用新型，并不用于限定本实用新型。

如图1-3所示，一种病毒运送保存管，包括管体100、管盖200、筛网 300以及胶塞400；管体100和管盖200均采用聚丙烯材料经过表面改性处理制作；管体100的内壁(包括侧面内壁以及底部内壁)上贴设有一层待运送病毒的宿主细胞层(未图示)，管体100内部存储有用于培养宿主细胞的细胞培养液(未图示)，细胞培养液在管体100内部的高度足够浸泡放入管体100内部的拭子；宿主细胞层是由宿主细胞在单层细胞培养法的培养下，贴壁生长形成的致密的单层宿主细胞；细胞培养液用于提供宿主细胞生长所需的营养物质；筛网300装配在管体100内部，与管体100的内壁间隔设置；筛网300内部的容纳空间用于放置沾有病毒样本的拭子；管盖200套设在管体100的管口上，与管体100可拆卸地连接；管盖200 的顶端面开设有胶塞安装孔220，胶塞400从管盖200内部嵌入胶塞安装孔 220，用于刺穿后加入裂解液。

在本实施例中，针对不同的病毒样本，可以在管体100内选择不同种类的宿主细胞，比如商品化细胞、基因编辑细胞或原代细胞进行培养，用于病毒样本的转染，实现病毒样本在运送过程中进行增殖，降低因为病毒滴度在运送过程中发生下降导致漏检的几率，提高了检出病毒的阳性率(如下表4-6所示)。

在本实施例中，细胞培养液由基础粉末、HEPES、BSA、苯酚红、蔗糖、氯化钠、抑菌剂等配制而成。

表1采用普通的病毒运送保存管(在甲型流感病毒样本的运送过程中，未采用宿主细胞对甲型流感病毒样本进行培养)与采用本实施例提供的病毒运送保存管(在甲型流感病毒样本运送过程中，采用宿主细胞对甲型流感病毒样本进行培养)运送甲型流感标本的临床试验结果。

如表1所示，采用普通的病毒运送保存管运送甲型流感病毒样本时，没能检出甲型流感阳性，而采用本实施例提供的病毒运送保存管运送甲型流感病毒样本时，通过胶体金结果检出甲型流感阳性4例，检测阳性率了提高40％。

表2采用普通的病毒运送保存管(在乙型流感病毒样本的运送过程中，未采用宿主细胞对乙型流感病毒样本进行培养)与采用本实施例提供的病毒运送保存管(在乙型流感病毒样本的运送过程中，采用宿主细胞对乙型流感病毒样本进行培养)运送甲型流感病毒样本的临床试验结果。

如表2所示，采用普通的病毒运送保存管运送乙型流感病毒样本时，通过胶体金结果检出乙型流感阳性4例，而采用本实施例提供的病毒运送保存管运送乙型流感病毒样本时，通过胶体金结果检出乙型流感阳性20 例，检测阳性率了提高72％。

表3采用普通的病毒运送保存管(在腺病毒样本的运送过程中，未采用宿主细胞对腺病毒样本进行培养)与采用本实施例提供的病毒运送保存管(在腺病毒样本的运送过程中，采用宿主细胞对腺病毒病毒样本进行培养)运送腺病毒样本的临床试验结果。

如表3所示，采用普通的病毒运送保存管运送腺病毒样本时，通过胶体金结果检出腺病毒阳性48例，而采用本实施例提供的病毒运送保存管运送腺病毒样本时，通过胶体金结果检出腺病毒阳性22例，检测阳性率了提高45％。

如表1-3所示，本实施例提供的病毒运送培养管能为甲型流感，乙型流感，腺病毒的qPCR，免疫荧光，胶体金等检测结果起到增敏作用，提高了检测阳性率，进而降低因为病毒滴度在运送过程中发生下降导致漏检的几率。

在本实施例中，因为病毒在运送的过程中进行增殖，而常温和高温更利于病毒侵染宿主细胞，本实施例提供的病毒运送培养管无需低温冷链运输，即可保证病毒滴度不会下降，降低了成本。含细胞运送管不仅解决了原有病毒样本运送方法需要进行低温冷链运输的问题，并且将常温或高温对于样品保存的劣势变成优势，因常温或者高温运输更有利于样本中病毒侵染宿主细胞，达到让病毒滴度增殖的作用。这样，病毒样本在没有冷链条件的运输过程中，不仅滴度不会减少，还可增加，最终提高检出阳性率，减少因样本质量下降产生漏检。

在本实施例中，培养宿主细胞的细胞培养液运送保存液采用无血清培养液；无血清培养液不含血清而含有支持细胞增殖和生物反应的多种营养成分(如生长因子、组织提取物等)，不仅可以更好地保护病毒，减少血清对于病毒感染的影响，利于病毒侵染宿主细胞，而且无需洗涤宿主细胞，便可直接接种，便于病毒侵染宿主细胞进行增殖。

如图2，4所示，管体100的管口外部侧壁上设有外螺纹110，管盖200 的环形侧壁内部设有内螺纹210，管体100与管盖200通过螺纹连接实现可拆卸连接，便于装配与拆卸。

如图2，3，4所示，筛网300包括从上往下依次排布的筛网安装部310 以及筛网主体320；筛网主体320包括第一筛网部321和第二筛网部322；筛网安装部310呈环状，用于将筛网300卡设在管体100内；第一筛网部 321呈圆筒状，第二筛网部322呈上大下小的圆锥状；第一筛网部321和第二筛网部322的侧壁上均开设有用于与管体100内部连通的筛孔340；筛网安装部310的外径大于第一筛网部321的外径，第一筛网部321的外径等于第二筛网部322顶部的外径；管体100的纵向截面大致呈U字形，管体 100内壁结构流畅，更利于宿主细胞贴壁生长；管体100的内部侧壁直径大于第一筛网部321的外径；管体100的管口内部侧壁开设有用于承接筛网安装部310的阶梯孔120；阶梯孔120包括第一圆柱孔121以及第二圆柱孔122，第一圆柱孔121位于第二圆柱孔122的上方，且第一圆柱孔121的直径大于筛网安装部310的外径，筛网安装部310的外径大于第二圆柱孔122 的直径；第一圆柱孔121和第二圆柱孔122之间形成的台阶面用于承接筛网安装部310。

在本实施例中，病毒运送保存管还包括用于洗脱病毒样本的玻璃珠(未图示)，玻璃珠置在筛网300内；拭子放入筛网300后，首先拧紧管盖200，然后振荡病毒运送管，玻璃珠在振荡的过程中与拭子多次摩擦接触，便于将拭子上面的病毒样本洗脱下来。

如图2，4所示，在本实施例中，管体100的内部侧壁直径大于第二圆柱孔122的直径，实现筛网300***管体100内部时，筛网300的第一筛网部321和第二筛网部322被限制在第二圆柱孔122的围设的范围内，不会与管体100的内部侧壁接触，避免筛网300***的过程中，接触管体100 的内部侧壁，损坏贴设在管体100内壁的宿主细胞层。

在本实施例中，沾有病毒样本的拭子放入筛网300内部的容纳空间后，在筛网300的隔离作用不会接触管体100内壁，避免病毒运送保存管在运送过程中发生振荡，拭子晃动接触管体100内壁，损坏贴设在管体100内壁的宿主细胞层，导致病毒无法侵入宿主细胞进行增殖。

如图5所示，将拭子放入病毒运送保存管，在2-8℃温度条件下静置一段时间后，视野中可见细胞致密饱满，边界清晰，贴壁良好；如图6所示，采用振荡器对未装筛网，且放入了拭子的病毒运送保存管进行低速振荡，4 个小时以后，视野中可见细胞已脱落、悬浮，部分已经破碎，大量细胞碎片；如图7所示，采用振荡器对装有筛网，且放入了拭子的病毒运送保存管进行低速振荡，4个小时以后，视野中可见细胞基本保持与静置时的状态相当，极少量细胞脱落。

如图3所示，胶塞400的纵向截面呈“凸”字形，包括从上到下排布的第一胶塞部410和第二胶塞部420；第一胶塞部410的直径等于胶塞安装孔220的内径，用于嵌入胶塞安装孔220，将胶塞400固定在管盖200的同时，便于刺穿后加入裂解液；第二胶塞部420的直径等于管盖200的环形侧壁的内径，用于进行密封。

在本实施例中，由于第二胶塞部420的密封作用，病毒运送保存管具有良好的密封性，保障病毒运送管内混有病毒样本和宿主细胞的细胞培养液在运送过程中不会发生泄漏，达到安全操作的目的；当检测人员需要向病毒运送保存管内再注入其它物质，比如裂解液时，无需打开管盖200，只需用注射器刺破胶塞400，即可完成注入。

在本实施例中，裂解液由变性剂、表面活性剂、蛋白酶、螯合剂等制作而成。

如图8所示，一种病毒运送保存管制作方法包括以下步骤：

拧开管盖，在管体内部加入细胞培养液以及宿主细胞；

采用单层细胞培养法培养细胞，使宿主细胞贴壁生长形成的致密的宿主细胞层；

将筛网装入管体，拧紧管盖。

如图9所示，一种病毒运送保存方法包括以下步骤：

拧开管盖，将拭子放入筛网，拧紧管盖；

振荡病毒运送保存管，洗脱病毒样本；

将病毒运送保存管常温运输至检测地点。

在本实施例中，病毒运送保存方法还包括在病毒运送保存管上贴上标签，并在标签上标注标本信息，便于管理；病毒运送保存管常温运输至检测地点，比如实验室之后，可以直接对其进行检测或升温至37℃，12至48 小时再进行检测；如果需要进行裂解处理，可通过穿刺胶塞，将裂解液注入管体。

以上所述仅是本实用新型的优选实施例，本实用新型的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本实用新型思路下的技术方案均属于本实用新型的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本实用新型的保护范围。

Claims (10)

1.一种病毒运送保存管，包括管体，其特征在于：所述管体内部存储有细胞培养液，所述管体内壁贴设有由宿主细胞组成的宿主细胞层；所述细胞培养液用于培养宿主细胞，所述宿主细胞层用于培养病毒；还包括筛网，所述筛网装配在所述管体内部，与所述管体内壁间隔设置；所述筛网用于容纳沾有病毒样本的拭子；所述筛网包括筛网安装部以及筛网主体；所述筛网安装部的外径大于所述筛网主体的外径，用于将所述筛网主体卡设在所述管体内部。

2.根据权利要求1所述的病毒运送保存管，其特征在于：所述管体的管口内壁上开设有承接所述筛网安装部的阶梯孔；所述筛网主体的侧壁上开设有筛孔。

3.根据权利要求2所述的病毒运送保存管，其特征在于：所述筛网主体包括第一筛网部和第二筛网部；所述第一筛网部位于所筛网安装部和第二筛网部之间；所述筛网安装部呈环状，所述第一筛网部呈圆筒状，所述第二筛网部呈上大下小的圆锥状。

4.根据权利要求2所述的病毒运送保存管，其特征在于：所述阶梯孔包括第一圆柱孔和第二圆柱孔；所述第一圆柱孔位于所述第二圆柱孔的上方，且所述第一圆柱孔的直径大于或等于所述筛网安装部的外径，第二圆柱孔的直径小于所述筛网安装部的外径。

5.根据权利要求4所述的病毒运送保存管，其特征在于：所述第二圆柱孔的直径小于所述管体在管口邻近下侧的内径。

6.根据权利要求1-5任意一项所述的病毒运送保存管，其特征在于：还包括多颗滚珠；所述滚珠放置在所述筛网。

7.根据权利要求6所述的病毒运送保存管，其特征在于：所述滚珠采用玻璃珠。

8.根据权利要求1-5任意一项所述的病毒运送保存管，其特征在于：还包括管盖；所述管盖套设在所述管体的管口上，与所述管体可拆卸地连接。

9.根据权利要求8所述的病毒运送保存管，其特征在于：还包括胶塞；所述管盖的顶端面开设有胶塞安装孔，所述胶塞从所述管盖内部嵌入所述胶塞安装孔。

10.根据权利要求9所述的病毒运送保存管，其特征在于：所述胶塞的纵向截面呈“凸”字形，包括从上到下排布的第一胶塞部和第二胶塞部；所述第一胶塞部的直径等于所述胶塞安装孔的内径；所述第二胶塞部的直径等于所述管盖的环形侧壁的内径。

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