CN203101400U - 一种使用拭子采集体液检测乙型肝炎的检测试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本实用新型是涉及生物应用技术领域，特别是涉及一种使用拭子采集体液检测乙型肝炎的检测试剂盒，采用拭子采集口腔液，用胶体金标记抗乙肝核心抗体(鼠单抗)，包被乙肝核心抗原实现对口腔液中抗乙型肝炎病毒核心抗体的竞争性检测。具有操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测和经济实用等优点。
Description
技术领域
本实用新型是涉及生物应用技术领域，特别是涉及一种使用拭子采集体液检测乙型肝炎的检测试剂盒。
背景技术
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus)是指引起人类急、慢性肝炎的DNA病毒，也称丹氏颗粒，简称HBV。
乙型肝炎病毒(HBV)属嗜肝DNA病毒科(hepadnaviridae)，基因组长约3.2kb，为部分双链环状DNA。HBV的抵抗力较强，我国的乙肝病毒感染率约较高；乙肝表面抗原携带率约占总人口的7.18％，以此计算，全国约有9300万人携带乙肝病毒，其中乙肝患者大约有3000万。
乙肝核心抗体(HBcAb)是乙肝病毒核心抗原的对应抗体，它不是保护性抗体，它的存在反而是受到乙肝病毒侵害的指标之一。它包括IgM、IgA、IgG三种类型。IgM型是判定急性乙肝的重要指标，是机体感染乙肝病毒后在血液中最早出现的特异性抗体，一般持续3-6个月。假如HBcAb-IgM持续高滴度，表明乙肝有慢性化倾向。如果在慢性活动性乙肝患者中，HBcAb-IgM滴度高，说明乙肝病毒正在体内复制活跃，是传染性强的指标之一。HBcAb-IgG出现较晚，不是保护性抗体，检测HBcAb-IgG具有流行病学调查意义。
目前对乙型肝炎病毒检测的主要方法是对血液样本进行采集检测抗体，在胶体金的检测方法中，有检测乙型肝炎病毒核心抗体的报道，但使用口腔液拭子进行IgG检测尚未有相关报道。和传统试剂相比，使用口腔液拭子进行IgG检测具有采样容易，减少患者的痛苦，减少检测人员的工作量的优点。
发明内容。
本实用新型的目的是提供一种使用拭子采集体液检测乙型肝炎的检测试剂盒，具有采样容易、操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测等优点。
本实用新型提供一种使用拭子采集体液检测乙型肝炎的检测试剂盒，其特征在于塑料支撑板(7)一端连接上样垫(1)，上样垫(1)的一端紧密压接含有标记乙肝核心抗体(鼠单抗)的胶体金垫(2)，胶体金垫(2)一端紧密压接硝酸纤维素(NC)膜(3)，硝酸纤维素膜包被有相互分离的检测线T线(5)和质控C线(6)，检测线T(5)为包被在NC膜上的乙肝核心抗原，质控(C)线(6)为包被在NC膜上的羊抗鼠IgG抗体，硝酸纤维素膜的另一端连接吸样垫(4)形成试纸。
所述的一种使用拭子采集体液检测乙型肝炎的检测试剂盒，其特征在于其抗原、抗体的包被方法为：以0.01M pH7.2磷酸盐缓冲液(PBS)将乙肝核心抗原配制成5mg/ml的溶液，用喷膜仪在NC膜下部以1-1.5ul/cm的参数进行划线，包被T线，同时在NC膜上部包被羊抗鼠IgG抗体作为C线，划线后将NC膜在干燥间，温度20-25℃，湿度小于30％，干燥2-5小时。
将标记好的乙肝核心抗体(鼠单抗)胶体金颗粒制成胶体金垫，与包被抗体的硝酸纤维素膜和其他辅料制备成试纸条。
所述的一种使用拭子采集体液检测乙型肝炎的检测试剂盒，其特征在于其检测方法为：用口腔拭子尼龙垫端从嘴的上牙龈一角开始，从左慢慢压拭到右，用时5到6秒，然后，从右慢慢压拭到左，用时5到6秒，反复3次，然后反转口腔拭子，从嘴的下牙龈一角开始，重复上述过程，压拭力度，以受检者有酸胀感，且无明显不适为准；压拭后，立即将口腔拭子浸入样本缓冲液中，先后让拭子的两面紧贴试管壁，上下刮擦6-8次，管内液体即为口腔液样本，将试纸条平放，在上样垫上加入100ul样品，使胶体金溶解并在NC膜上层析，然后用肉眼直接观察在15分钟内C、T线的出现情况，并判定检测结果。
本实用新型的有益效果是：提供一种使用拭子采集体液检测乙型肝炎的检测试剂盒。和传统试剂相比，使用口腔液拭子进行IgG检测具有采样容易，减少患者的痛苦，减少检测人员的工作量的优点。
附图说明：
图1使用拭子采集体液检测乙型肝炎的检测试剂盒试纸结构示意图。
附图符号说明：1：上样垫；2：胶体金垫；3：NC膜；4：吸样垫
5：检测线T1；6：质控(C)线；7：塑料支撑板。
图2采集口腔液拭子结构示意图
附图符号说明：1：尼龙垫端；2：手持端。
具体实施方式
实施例：制备乙型肝炎的检测试剂盒试纸
将乙肝核心抗体(鼠单抗)使用原实用胶体金标记，制成胶体金垫，以0.01M pH7.2磷酸盐缓冲液(PBS)将乙肝核心抗原配制成5mg/ml的溶液，用喷膜仪在NC膜下部以1-1.5ul/cm的参数进行划线，包被T线，同时在NC膜上部包被羊抗鼠IgG抗体作为C线，划线后将NC膜在干燥间，温度20-25℃，湿度小于30％，干燥2-5小时。将胶体金垫和包被好的NC膜和其他辅料装配成试纸条。
将50例已确诊乙型肝炎病毒核心抗体阳性的病人作为待检者，将50例已确诊乙型肝炎病毒核心抗体的健康人作为对照组待检者。用口腔拭子尼龙垫端从嘴的上牙龈一角开始，从左慢慢压拭到右，用时5到6秒，然后，从右慢慢压拭到左，用时5到6秒，反复3次，然后反转口腔拭子，从嘴的下牙龈一角开始，重复上述过程，压拭力度，以受检者有酸胀感，且无明显不适为准；压拭后，立即将口腔拭子浸入样本缓冲液中，先后让拭子的两面紧贴试管壁，上下刮擦6-8次，管内液体即为口腔液样本，将试纸条平放，在上样垫上加入100ul样品，使胶体金溶解并在NC膜上层析，然后用肉眼直接观察在15分钟内C、T线的出现情况，并判定检测结果。
检测结果的解释：
如果对照区内的对照线没有出现，检测结果无效，如果仅在对照区出现一条线对照线，结果为阳性。如果检测线和对照线都出现，即试纸上出现两条线，则检测结果为阴性。
通过临床血清检测，乙型肝炎病毒核心抗体阳性的样本和乙型肝炎病毒核心抗体阴性的样本，本试剂检测和临床诊断结果完全一致。临床检测表明本试剂的性能和现有诊断手段相比无显著性差异，适合用于临床检测。
Claims (1)
1.一种使用拭子采集体液检测乙型肝炎的检测试剂盒，其特征在于塑料支撑板(7)一端连接上样垫(1)，上样垫(1)的一端紧密压接含有标记乙肝核心抗体(鼠单抗)的胶体金垫(2)，胶体金垫(2)一端紧密压接硝酸纤维素膜(3)，硝酸纤维素膜(NC)包被有相互分离的检测线T线(5)和质控C线(6)，检测线T(5)为包被在硝酸纤维素膜上的乙肝核心抗原，质控(C)线(6)为包被在硝酸纤维素膜上的抗乙型肝炎病毒核心抗原的抗体，硝酸纤维素膜的另一端连接吸样垫(4)形成试纸。
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