CN1969653A - 家蚕抗病毒型微生物添加剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明家蚕抗病毒型微生物添加剂，它是由地衣芽孢杆菌SHK3、Bacillus licheniformis SHK3，经发酵而成；保藏号为CCTCC NO：206115。本发明克服了现有养蚕过程中，家蚕经消化道感染或经外物传染的病毒性、细菌性疾病以及肠道病等仍经常爆发，且无防治良方的不足。本发明是一种集抗菌、抗病毒、增强家蚕免疫力，提高蚕茧的一种纯天然抗病型微生物添加剂。本发明还同时公开了这种家蚕抗病毒型微生物添加剂(水剂和粉剂)的制备方法。
Description
技术领域
本发明是涉及一种家蚕抗病毒型微生物添加剂。本发明还涉及这种微生物添加剂的制备方法。
背景技术
蚕丝生产，在我国已有5500多年历史，是中国传统的特色产业，也是我国对外出口贸易中能够垄断国际市场的一种特色商品。对蚕业经济的发展，各级政府均予以高度重视，科技界对科学养蚕也进行了不断研究和探讨，并在桑、蚕品种选育，蚕病防治等方面取得了很大的进展。但在养蚕过程中，家蚕经消化道感染或经外物传染的病毒性、细菌性疾病以及肠道病等仍经常爆发，且无防治良方，严重影响家蚕成活发育、上蔟、结茧以及蚕茧产量和茧丝质量，也影响着蚕农和丝绸加工出口企业的经济效益。
从事蚕业研究或养蚕实践都知道：细菌性疾病易治，病毒性疾病难防。家蚕一旦发病，治疗为时已晚，靠化学药物治疗，其收效甚微，特别是病毒性疾病：如消化道疾病、血液疾病，根本无药可治。可见，家蚕发病后的药物治疗是被动的，也难于达到降低病亡率，增加蚕茧产量，提高茧丝质量的目的。
因此，本领域中迫切需要有能够主动有效增强家蚕抗体，抗菌抗病毒，降低病亡率，增加产茧量，提高蚕丝质量的蚕用复合微生物添加剂。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有背景技术的不足之处，而提供一种家蚕抗病毒型微生物添加剂。
本发明的另一个目的在于提供这种家蚕抗病毒型微生物添加剂的制备方法。
本发明的目的是通过如下措施来达到的：家蚕抗病毒型微生物添加剂，它是由地衣芽孢杆菌SHK3、Bacillus licheniformis SHK3，经发酵而成；保藏号为CCTCC NO：M206115，保藏日期为2006年10月31日。
地衣芽孢杆菌SHK3、Bacillus licheniformis SHK3，保藏号为CCTCC NO：M206115的菌种鉴定报告
菌种来源：武汉农大生物科技有限公司
检测结果：
| 检测项目 | 结果 | 检测项目 | 结果 |
| 革兰氏染色细胞形状细胞直径＞1.0μm形成内生孢子芽孢形成孢囊膨大芽孢圆形伴孢晶体接触酶氧化酶厌氧生长VP试验VP＜pH6VP＞pH7甲基红试验 | +杆状-+亚端生---+-++-- | 产酸：D-葡萄糖D-木糖L-***糖D-甘露醇利用葡萄糖产气利用柠檬酸盐硝酸盐还原50℃生长pH 5.7生长7％NaCl生长淀粉水解明胶液化水解酪朊尿素 | ++++-++++++++- |
定名：Bacillus licheniformis SHK3，地衣芽孢杆菌SHK3
微生物的特征区别：菌落较扁平、圆形、边缘整齐、皱纹、粗糙、中央出现小圆圈、浅褐色。
家蚕抗病毒型微生物添加剂的制备方法，它包括如下步骤：
①菌种培养：将地衣芽孢杆菌SHK3、Bacillus lichenifomisSHK3菌种移植到营养琼脂斜面培养基上，置于36℃温箱中，培养24小时，使地衣芽孢杆菌复壮；
②摇床培养：取上述斜面培养基菌种接种至5瓶500毫升三角烧瓶内，每瓶三角烧瓶内装120毫升营养肉汤培养基，每瓶接种3环，接种后移至摇床培养18-24小时，温度为36℃，然后接种至50升种子发酵罐培养，发酵罐内装35升培养液；
③50升种子发酵罐培养：用菜油或豆油作消泡剂，以121℃灭菌30min，待冷至37℃时，在通气比为0.4-2∶1，转速为300-500r/min，温度为35-37℃的条件下，发酵18-24小时；
④1吨发酵罐培养：内装700升培养液，用菜油或豆油作消泡剂，以121℃灭菌35min，待冷至37℃时，将上述50升发酵罐中培养的种子菌接种到1吨发酵罐中，进行发酵；在通气比为0.4-1∶1，转速为100-350r/min，温度为35-37℃的条件下，发酵时间36-48小时；调PH值3.5-5，即为家蚕抗病毒型微生物添加剂水剂。
在上这技术方案中，所述发酵罐内的培养基成份为：酵母膏0.2％、蛋白胨1％、葡萄糖1％、蔗糖1％、氯化钙0.2％、磷酸氢二钠0.1％、磷酸二氢钾0.1％、其余为水。
在上这技术方案中，它还包括如下步骤：在微生物添加剂水剂中加入载体，经干燥后再经混匀成固体粉状物，即为抗病毒细菌组合物固体制剂。
在上这技术方案中，所述是用干燥淀粉为载体，以发酵液1重量份加干燥淀粉1.25重量份在不断搅拌下加入，搅拌均匀成颗粒状，再经干燥至含水量在10-12％之间即可。
本发明是利用抗菌、抗病毒的微生物及其分泌的代谢产物等组成，可增强蚕体免疫力，阻止病毒吸入和病毒的复制，从而达到抗菌、抗病毒的目的。另外，微生物分泌的多种消化酶，为纤维素酶，半纤维素酶，蛋白酶和淀粉酶等，能促进家蚕消化吸收，提高桑叶的利用效率，增加蚕茧的重量。同时，微生物添加剂是纯天然的蚕丝改善剂，对家蚕和人无任何毒副作用。因此，本发明是集抗菌、抗病毒、增强家蚕免疫力，提高蚕茧品质，为广大蚕农增产增收，为丝绸加工企业增效的一种纯天然抗病型微生物添加剂。
具体实施方式
实施例1
家蚕抗病毒型复合微生物添加剂(水剂)的制备方法，它包括如下步骤：
①菌种培养：将地衣芽孢杆菌SHK3、Bacillus licheniformisSHK3菌种移植到营养琼脂斜面培养基上，置于36℃温箱中，培养24小时，使地衣芽孢杆菌复壮；
②摇床培养：取上述斜面培养基菌种接种至5瓶500毫升三角烧瓶内，每瓶三角烧瓶内装120毫升营养肉汤培养基，每瓶接种3环，接种后移至摇床培养18小时，温度为36℃，然后接种至50升种子发酵罐培养，发酵罐内装35升培养液；
③50升种子发酵罐培养：用菜油或豆油作消泡剂，以121℃灭菌30min，待冷至37℃时，在通气比为0.4∶1，转速为300r/min，温度为35℃的条件下，发酵18小时；
④1吨发酵罐培养：内装700升培养液，用菜油或豆油作消泡剂，以121℃灭菌35min，待冷至37℃时，将上述50升发酵罐中培养的种子菌接种到1吨发酵罐中，进行发酵；在通气比为0.4∶1，转速为100r/min，温度为35℃的条件下，发酵时间36小时；调PH值3.5，即为家蚕抗病毒型微生物添加剂水剂。
所述发酵罐内的培养基成份为：酵母膏0.2％、蛋白胨1％、葡萄糖1％、蔗糖1％、氯化钙0.2％、磷酸氢二钠0.1％、磷酸二氢钾0.1％、其余为水。
实施例2
家蚕抗病毒型复合微生物添加剂(水剂)的制备方法，它包括如下步骤：
①菌种培养：将地衣芽孢杆菌SHK3、Bacillus licheniformisSHK3菌种移植到营养琼脂斜面培养基上，置于36℃温箱中，培养24小时，使地衣芽孢杆菌复壮；
②摇床培养：取上述斜面培养基菌种接种至5瓶500毫升三角烧瓶内，每瓶三角烧瓶内装120毫升营养肉汤培养基，每瓶接种3环，接种后移至摇床培养24小时，温度为36℃，然后接种至50升种子发酵罐培养，发酵罐内装35升培养液；
③50升种子发酵罐培养：用菜油或豆油作消泡剂，以121℃灭菌30min，待冷至37℃时，在通气比为2∶1，转速为500r/min，温度为37℃的条件下，发酵24小时；
④1吨发酵罐培养：内装700升培养液，用菜油或豆油作消泡剂，以121℃灭菌35min，待冷至37℃时，将上述50升发酵罐中培养的种子菌接种到1吨发酵罐中，进行发酵；在通气比为1∶1，转速为350r/min，温度为37℃的条件下，发酵时间48小时；调PH值5，即为家蚕抗病毒型微生物添加剂水剂。
所述发酵罐内的培养基成份为：酵母膏0.2％、蛋白胨1％、葡萄糖1％、蔗糖1％、氯化钙0.2％、磷酸氢二钠0.1％、磷酸二氢钾0.1％、其余为水。
实施例3
家蚕抗病毒型复合微生物添加剂(水剂)的制备方法，它包括如下步骤：
①菌种培养：将地衣芽孢杆菌SHK3、Bacillus licheniformisSHK3菌种移植到营养琼脂斜面培养基上，置于36℃温箱中，培养24小时，使地衣芽孢杆菌复壮；
②摇床培养：取上述斜面培养基菌种接种至5瓶500毫升三角烧瓶内，每瓶三角烧瓶内装120毫升营养肉汤培养基，每瓶接种3环，接种后移至摇床培养21小时，温度为36℃，然后接种至50升种子发酵罐培养，发酵罐内装35升培养液；
③50升种子发酵罐培养：用菜油或豆油作消泡剂，以121℃灭菌30min，待冷至37℃时，在通气比为1.2∶1，转速为400r/min，温度为36℃的条件下，发酵21小时；
④1吨发酵罐培养：内装700升培养液，用菜油或豆油作消泡剂，以121℃灭菌35min，待冷至37℃时，将上述50升发酵罐中培养的种子菌接种到1吨发酵罐中，进行发酵；在通气比为0.4-1∶1，转速为225r/min，温度为36℃的条件下，发酵时间42小时；调PH值4，即为家蚕抗病毒型微生物添加剂水剂。
所述发酵罐内的培养基成份为：酵母膏0.2％、蛋白胨1％、葡萄糖1％、蔗糖1％、氯化钙0.2％、磷酸氢二钠0.1％、磷酸二氢钾0.1％、其余为水。
实施例4
将上述实施例1或实施例2或实施例3中的水剂加入干燥淀粉，以发酵液1重量份加干燥淀粉1.25重量份在不断搅拌下加入并搅拌均匀成颗粒状，再经干燥至含水量在10-12％之间，即为固体制剂。应用实例及使用方法：
抗病型蚕用微生物添加剂用于家蚕添食，使用方法：将1毫升本剂(水剂或粉剂)倒入清洁的瓶中，再加入8毫升至10毫升冷开水(或纯净水)，充分摇动后放置浸泡5-8小时(一般情况下，32-34℃时，浸泡5小时，26-28℃时，浸泡8小时。若温度过低，则浸泡延长，温度高，则浸泡时间相对缩短)，用小型喷雾器喷洒桑叶，边喷边抄动，使桑叶西面沾上本剂溶液，以不滴水为宜喂蚕。从三龄期开始，隔天添食一次，至上蔟为止。一般1斤浸泡后的水剂可喷洒10斤桑叶，供一张蚕(22000-30000头，一般为25000头)食用一次。
本发明抗病型蚕用复合微生物添加剂水剂的保质期为半年，固体粉剂的保质期为1年。
应用本剂对家蚕的生长发育，预防蚕病，蚕茧产量的对比效果为表1、表2、表3。
本发明可预防家蚕细菌性和病毒性疾病，从而逐渐替代传统化学药物，达到预防家蚕细菌性和病毒性疾病，增加蚕茧重量，提高茧丝质量，缩短饲养周期，节省桑叶，提高经济效益。
表1抗病毒型蚕用复合微生物添加剂对家蚕的病害预防效果
| 试验次序 | 实验批次(I) | 实验批次(II) | |
| 试验时间 | 8月3日-8月25日 | 8月17日-9月8日 | |
| 处理 | 项目 | 头数，发病率 | 头数，发病率 |
| 复合微生物添加剂1∶8 | 供试头数(头) | 60 | 60 |
| 发病头数(头) | 0 | 1 | |
| 发病率％ | 0 | 1.67 | |
| 复合微生 | 供试头数(头) | 60 | 60 |
| 发病头数(头) | 0 | 0 | |
| 物添加剂1∶10 | 发病率％ | 0 | 0 |
| 对照(清水) | 供试头数(头) | 60 | 60 |
| 发病头数(头) | 15 | 21 | |
| 发病率％ | 25 | 35 |
表2抗病毒型蚕用复合微生物添加剂对家蚕生长发育及茧质影响
表3抗病型复合微生物流回对家蚕的产量效果
经统计分析可知：采用本发明抗病毒型蚕用微生物添加剂养蚕后有如下效果：(1)添食本发明添加剂可节约桑叶15％；(2)增加蚕茧产量12.5％；(3)提高家蚕抗病率18％；(4)缩短饲养时间10小时；(5)提高蚕茧质量1个等组级。从而提高养蚕户的经济效益15％左右。
Claims (5)
1、家蚕抗病毒型微生物添加剂，其特征在于它是由地衣芽孢杆菌SHK3、Bacillus licheniformis SHK3，经发酵而成；保藏号为CCTCCNO：M206115。
2、家蚕抗病毒型微生物添加剂的制备方法，其特征在于它包括如下步骤：
①菌种培养：将地衣芽孢杆菌SHK3、Bacillus licheniformisSHK3菌种移植到营养琼脂斜面培养基上，置于36℃温箱中，培养24小时，使地衣芽孢杆菌复壮；
②摇床培养：取上述斜面培养基菌种接种至5瓶500毫升三角烧瓶内，每瓶三角烧瓶内装120毫升营养肉汤培养基，每瓶接种3环，接种后移至摇床培养18-24小时，温度为36℃，然后接种至50升种子发酵罐培养，发酵罐内装35升培养液；
③50升种子发酵罐培养：用菜油或豆油作消泡剂，以121℃灭菌30min，待冷至37℃时，在通气比为0.4-2∶1，转速为300-500r/min，温度为35-37℃的条件下，发酵18-24小时；
④1吨发酵罐培养：内装700升培养液，用菜油或豆油作消泡剂，以121℃灭菌35min，待冷至37℃时，将上述50升发酵罐中培养的种子菌接种到1吨发酵罐中，进行发酵；在通气比为0.4-1∶1，转速为100-350r/min，温度为35-37℃的条件下，发酵时间36-48小时；
调PH值3.5-5，即为家蚕抗病毒型微生物添加剂水剂。
3、根据权利要求2所述的一种家蚕抗病毒型微生物添加剂的制备方法，其特征在于所述发酵罐内的培养基成份为：酵母膏0.2％、蛋白胨1％、葡萄糖1％、蔗糖1％、氯化钙0.2％、磷酸氢二钠0.1％、磷酸二氢钾0.1％、其余为水。
4、根据权利要求2所述的一种家蚕抗病毒型微生物添加剂的制备方法，其特征在于它还包括如下步骤：在微生物添加剂水剂中加入载体，经干燥后再经混匀成固体粉状物，即为抗病毒细菌组合物固体制剂。
5、根据权利要求4所述的一种家蚕抗病毒型微生物添加剂的制备方法，其特征在于所述是用干燥淀粉为载体，以发酵液1重量份加干燥淀粉1.25重量份在不断搅拌下加入，搅拌均匀成颗粒状，再经干燥至含水量在10-12％之间即可。
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