CN1939316A - 含阿霉素的微球,其用途及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种符合药用标准以聚乳酸－羟基乙酸共聚物为材料制备的阿霉素微球及其制备方法，可以用于动脉栓塞、瘤内注射、瘤旁注射、腹腔注射等多种给药途径和用途，在提高药效、降低毒副作用方面表现了较好的性能。

Description

含阿霉素的微球，其用途及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种阿霉素微球，其用途和其制备方法。

背景技术

阿霉素(Adriamycin)是当今公认的强效广谱抗癌药。本品能直接嵌入DNA核碱对之间，干扰转录过程，阻止mRNA的形成，起到抗肿瘤作用。它既抑制DNA的合成又抑制RNA的合成，所以对细胞周期各阶段均有作用，为一细胞周期非特异性药物，对S期作用最强，对M、G1和G2期也有作用。此外，还可导致自由基的生成，能与金属离子结合，与细胞膜结合。对乏氧细胞也有作用。阿霉素对机体可产生广泛的生物化学效应，具有强烈的细胞毒性作用。临床上用于急性白血病(淋巴细胞性和粒细胞性)、霍奇金病及恶性淋巴瘤、乳腺癌、支气管肺癌、卵巢癌、软组织肉瘤、成骨肉瘤、横纹肌肉瘤、尤文肉瘤、肾母细胞瘤、神经母细胞瘤、膀脱癌、甲状腺癌、***癌、头颈部鳞癌、睾丸癌、胃癌、肝癌等。阿霉素有广谱抑瘤作用，主要因为它既含有脂溶性的蒽环配基，又有水溶性的柔红糖胺，有酸性酚羟基和碱性氨基，易于通过细胞膜，在多靶点起作用，故疗效广泛。

传统的抗肿瘤药物是通过各种途径给药后，达到一定的血药浓度分布于全身而产生治疗作用。这种治疗方法最大的缺陷是缺乏选择性，体内药物行为由其理化性质及解剖生理学特点决定。大多数常用抗肿瘤药物分子量低，在体内容易扩散，导致相对平均的组织分布，往往在治疗的同时产生毒副作用，严重影响这些药物的抗肿瘤治疗价值。同样，阿霉素用于临床后最严峻的问题也是不良反应，目前临床上使用的阿霉素主要不良反应是常见脱发、骨髓抑制(白细胞约于用药后10日～14日下降至最低点)，心肌毒性发生率和严重程度与本品累积量成正比，迟发的严重喷射性心力衰竭大多在用药后半年以后或总剂量逾700mg时发生。常见恶心、呕吐、口腔炎、食管炎及白细胞减少、脱发。偶见心肌毒性，并应警惕充血性心力衰竭的可能，有时可发生淬死。亦可出现胃痛、腹泻或全胃肠炎、高尿酸血症和肾脏损害等。静脉外溢可出现疼痛、组织坏死甚至峰窝组织炎。阿霉素的不良反应大大限制了阿霉素的临床使用。

为了降低毒性，提高疗效，近年来国内外开发了一系列阿霉素新剂型：阿霉素脂质体、阿霉素微球、阿霉素磁性微球、阿霉素毫微粒、阿霉素乳剂。具有长效作用的贮库式生物降解的微球，为疾病的治疗提供了新的给药途径。生物降解缓释微球注射剂，可每月或数月注射一次，在体内通过聚合物生物降解作用，持续释放药物，维持正常生理活动所需达到的血药浓度，同时经皮下或肌肉注射给药，避免了口服制剂的肝脏首过效应，具有较好的生物利用度，提高了制剂的顺应性，具有显著的药物经济学效益。

聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)和聚乳酸(PLA)具有优良的生物降解性和组织相容性，作为外科缝合线和药物载体已经使用多年，作为长效控释载体也有很好的前景。药物从聚合物微球中缓慢连续释放，主要取决于聚合物降解对药物释放产生的限速作用。聚乳酸-羟基乙酸是由乳酸和羟基乙酸铵一定比例聚合而成的共聚物，通过调整其分子量大小、两单体的比例等即可调节聚乳酸-羟基乙酸的亲水性及降解周期等。

赵瑞玲等在中国医院药学杂志2004年第24卷第2期P74《阿霉素聚乳酸微球的制备及体外释药特性研究》中公开了一种阿霉素聚乳酸微球的制备方法。该微球制备方法包括将阿霉素粉末混悬于聚乳酸的二氯甲烷溶液中，将混悬剂加入含PVA水溶液中乳化，再经溶剂挥发得到微球。所制备的药物包封率为73.2％，12小时体外累积释药量36％。按中华人民共和国药典2005版第二部附录XIX E微囊、微球与脂质体制剂指导原则中规定药物包封率不得小于80％，因此以上公开的制备阿霉素聚乳酸微球的方法制备的聚乳酸微球包封率未达到药典的要求，且作者只报道了该微球在体外12小时的累积释放曲线。

而且，聚乳酸是由乳酸聚合而成，其疏水性较强，较难制备水溶性较大的药物如阿霉素，且在体液中释放较慢，在聚乳酸主链中嵌入羟基乙酸，使主链化学键组成发生变化，导致聚合物降解速率加快。聚合物的降解是双分子水解反应，由水和不稳定化学键共同参与，反应速率受两者浓度的影响。对于疏水性较强的聚乳酸，由于其对水分的摄取受到限制，故降解速率缓慢；而聚乳酸与羟基乙酸共聚后，聚合物主链亲水性增强，酯键数量增多，导致降解速率加快。尤其是在后期，自催化作用使产生的乳酸量显著增加。

进一步讲，由于聚乳酸的疏水性较强，制备载亲水性药物微球在体内的释放较难控制，易引起药物释放不规则，导致血药浓度在有效浓度下或接近或超过中毒剂量。

载阿霉素微球可以采用多种给药途径进行局部缓释给药，达到降低全身血药浓度，提高局部肿瘤组织内血药浓度，从而降低了阿霉素的毒副作用如心脏毒性、骨髓抑制、肾脏毒性等，并且提高了药物的局部疗效。目前文献报道载阿霉素微球使用较多的给药途径是动脉栓塞给药，微球使用的载体材料包括明胶、羧甲基化葡聚糖、乙基纤维素、白蛋白等。这些微球的载体材料亲水性强，对于水溶性药物如阿霉素的控释作用较差，12小时内药物释放均大于80％，较难在局部长时间缓释给药。

发明内容

根据前述，为了达到以上目的，本发明得到一种阿霉素微球，该阿霉素微球能够符合中华人民共和国药典中有关微囊、微球与脂质体制剂指导原则中的有关规定：药物包封率不得小于80％，药物开始0.5小时内的释放量要求低于40％。该阿霉素微球以聚乳酸-羟基乙酸为微球材料。

因此，本发明涉及一种含阿霉素的微球，其包括阿霉素和聚乳酸-羟基乙酸。

根据本发明所述的阿霉素微球，其中聚乳酸-羟基乙酸分子量在5000-100000之间，优选在10000-50000之间。

根据本发明所述的阿霉素微球，其中聚乳酸-羟基乙酸中乳酸和羟基乙酸的比例为10∶90至90∶10，优选的两者比例为25∶75至75∶25。

根据本发明所述的阿霉素微球，更优选的聚乳酸-羟基乙酸的分子量在10000-50000之间，乳酸和羟基乙酸的比例为50∶50。

根据本发明，本发明单位剂量微球中阿霉素含量为1-20mg，优选5mg。

本发明的再一方面涉及该微球的制备方法，其包括以下步骤：

a.将阿霉素溶于水中，将该水溶液加入聚乳酸-羟基乙酸的有机溶剂溶液中；

b.制成初乳，将该初乳加到含乳化剂的水溶液中，搅拌得复乳(W/O/W)；

c.再加入蒸馏水，继续搅拌，使有机溶剂挥发完全，得微球；

d.干燥，得到干燥的微球粉末。

在所述的阿霉素微球的制备方法中，有机溶剂为可以溶解聚乳酸-羟基乙酸的有机溶剂或两种以上该有机溶剂的混合溶剂，优选为二氯甲烷、乙酸乙酯或两者按比例的混合溶剂。

在所述的阿霉素微球的制备方法中，制成初乳的方法优选为高速匀浆或超声分散均匀。

在所述的阿霉素微球的制备方法中，该乳化剂可为聚乙烯醇、明胶、聚乙二醇或类似物，优选为聚乙烯醇，更优选为6％的聚乙烯醇水溶液。

本发明的另一方面涉及该微球的用途。用该方法可以通过调整处方和制备工艺制备得到具有不同粒径分布范围和不同释药速度的微球，这些微球可以有不同的用途。这些用途包括瘤内注射、瘤旁注射、腹腔注射、动脉栓塞等。例如可用这种方法制备得到80％以上粒径在40-120μm之间的微球，再过筛除去小于40μm和大于120μm的微球，即可得动脉栓塞用微球。

附图说明

图1为实施例1所得含阿霉素微球的体外释放曲线。

图2为实施例2所得含阿霉素微球的体外释放曲线。

图3为实施例3所得含阿霉素微球的体外释放曲线。

图4为实施例4所得含阿霉素微球的体外释放曲线。

图5为实施例5所得含阿霉素微球的体外释放曲线。

图6为阿霉素注射液和实施例5所得阿霉素栓塞用微球的血药浓药曲线。

具体实施方式

实施例1.含5mg的阿霉素微球

将阿霉素5mg溶于0.1ml水中，将该水溶液加入聚乳酸-羟基乙酸(分子量10000，乳酸、羟基乙酸比例为50∶50)的二氯甲烷溶液(200mg/ml)中，高速匀浆制成初乳，将该初乳加入4％聚乙烯醇(PVA)水溶液中，搅拌得复乳(W/O/W)，再加入蒸馏水，继续搅拌4小时，使有机溶剂挥发完全，得微球。冷冻干燥得到干燥的微球粉末。该微球包封率为81％，体外释放曲线见图1。

实施例2.含5mg阿霉素微球

将阿霉素5mg溶于0.1ml水中，将该水溶液加入聚乳酸-羟基乙酸(分子量10000，乳酸、羟基乙酸比例为50∶50)的二氯甲烷溶液(400mg/ml)中，高速匀浆制成初乳，将该初乳加入6％聚乙烯醇(PVA)水溶液中，搅拌得复乳(W/O/W)，再加入蒸馏水，继续搅拌4小时，使有机溶剂挥发完全，得微球。冷冻干燥得到干燥的微球粉末。该微球包封率为87％，体外释放曲线见图2。

实施例3.含5mg阿霉素微球

将阿霉素5mg溶于0.1ml水中，将该水溶液加入聚乳酸-羟基乙酸(分子量10000，乳酸、羟基乙酸比例为75∶25)的二氯甲烷溶液(300mg/ml)中，高速匀浆制成初乳，将该初乳加入6％聚乙烯醇(PVA)水溶液中，搅拌得复乳(W/O/W)，再加入蒸馏水，继续搅拌4小时，使有机溶剂挥发完全，得微球。冷冻干燥得到干燥的微球粉末。该微球包封率为92％，体外释放曲线见图3。

实施例4.含5mg阿霉素微球

将阿霉素5mg溶于0.1ml水中，将该水溶液加入聚乳酸-羟基乙酸(分子量10000，乳酸、羟基乙酸比例为75∶25)的二氯甲烷溶液(400mg/ml)中，高速匀浆制成初乳，将该初乳加入6％聚乙烯醇(PVA)水溶液中，搅拌得复乳(W/O/W)，再加入蒸馏水，继续搅拌4小时，使有机溶剂挥发完全，得微球。冷冻干燥得到干燥的微球粉末。该微球包封率为92％，体外释放曲线见图4。

实施例5.含5mg阿霉素的栓塞用微球

将阿霉素5mg溶于0.1ml水中，将该水溶液加入聚乳酸-羟基乙酸(分子量10000，乳酸、羟基乙酸比例为50∶50)的二氯甲烷溶液(500mg/ml)中，高速匀浆制成初乳，将该初乳加入8％聚乙烯醇(PVA)水溶液中，搅拌得复乳(W/O/W)，再加入蒸馏水，继续搅拌4小时，使有机溶剂挥发完全，得微球。冷冻干燥得到干燥的微球粉末。过筛除去小于40μm和大于120μm的微球。该微球包封率为97％，体外释放曲线见图5。

实施例6.犬肝动脉栓塞的药代动力学试验

将12只试验犬随机分为A、B两组，每组6只，A组为阿霉素溶液组，B组为阿霉素栓塞微球组。将动物用戊巴比妥钠麻醉，仰卧固定于手术台上，一侧腹股沟区剪毛、消毒、铺巾。切开腹股沟皮肤约3cm长，分离皮下组织和肌肉，暴露并分离股动脉、静脉和神经，用静脉留置针穿刺股动脉前壁，引入导丝和导管。在X射线透视下，插管至肝左动脉。在透视监视下，缓慢灌注阿霉素溶液或阿霉素栓塞微球。给药后按规定时间进行股静脉取血，测定血药浓度。测得的血药浓度曲线见图6。

体外释放方法：

精密称取载阿霉素微球5mg，置于50ml释放介质中，放置到37℃、100rpm速度振荡的恒温摇床中，定时取样1ml，并补充1ml释放介质。将释放介质3000rpm离心10min，用FLUO star OPTIMA荧光分析仪，选择460-12滤光片作为激发波长滤光片，545-10滤光片作为发射波长滤光片，测定阿霉素含量，并计算微球的累积释放百分率。

Claims (6)

1.一种阿霉素微球，其含有阿霉素和聚乳酸-羟基乙酸聚合物。

2.如权利要求1所述的阿霉素微球，该微球为用于动脉栓塞、瘤内注射、瘤旁注射、腹腔注射的微球。

3.权利要求1或2的微球，其中单位剂量微球含1-20mg阿霉素。

4.权利要求1-3任一的微球，其中聚乳酸-羟基乙酸聚合物的分子量为5000-100000，聚乳酸-羟基乙酸中乳酸和羟基乙酸比例为10∶90至90∶10。

5.权利要求4的微球，其中聚乳酸-羟基乙酸聚合物的分子量为1000-50000，聚乳酸-羟基乙酸中乳酸和羟基乙酸比例为50∶50，阿霉素的量为5mg。

6.如权利要求1所述阿霉素微球的制备方法，其包括：

a将阿霉素溶于水中，将该水溶液加入聚乳酸-羟基乙酸的有机溶剂溶液中；

b制成初乳，将该初乳加到含乳化剂的水溶液中，搅拌得复乳(W/O/W)；

c再加入蒸馏水，继续搅拌，使有机溶剂挥发完全，得微球；

d干燥，得到干燥的微球粉末。

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