CN1917895A - 鱼腥草和插田泡的提取物及其用于预防和治疗过敏性疾病的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及鱼腥草(Houttuynia cordata)和插田泡(Rubus coreanus)的提取物以及包含所述提取物的用于预防和治疗过敏性疾病的组合物。本发明所述的提取物和包含该提取物的组合物通过抑制肥大细胞脱颗粒和释放组胺而具有预防和治疗过敏性疾病的效果。此外,它们没有显示出细胞毒性,因而可以在体内安全使用。
Description
技术领域
本发明涉及鱼腥草(Houttuynia cordata)和插田泡(Rubus coreanus)的提取物及其用于预防和治疗过敏性疾病的组合物和用途。更具体地,本发明涉及鱼腥草和插田泡的水提取物或有机溶剂提取物、还涉及包含所述提取物的用于预防和治疗过敏性疾病的组合物及方法。
背景技术
近来,随着工业发展所引起的环境污染的加剧和居住环境的变化,过敏性疾病正日益增加。
过敏症是在人免疫***对在绝大多数人中没有显示反应的外来物质显示出过敏反应时所引起的症状的统称。在过敏反应过程中产生的临床症状包括早期的特异性免疫反应和晚期的炎症反应等。早期的特异性免疫反应大多由肥大细胞所介导并被位于肥大细胞的细胞膜上的具有高亲合性的免疫球蛋白E(IgE)受体(FcεRI)所激活。
肥大细胞广泛分布于包括皮肤、呼吸器官、胃肠道粘膜和脑在内的***器官中以及***和血管周围。当结合到位于细胞膜上的IgE受体的IgE抗体与外部引入的抗原或过敏原形成交联(bridge)时,肥大细胞则被激活而脱颗粒,从而释放储存在肥大细胞内的颗粒中的化学物质,例如组胺、肝素和蛋白酶。在这些化学物质中,组胺释放最为迅速,从而显示出各种作用,例如末梢血管舒张、支气管平滑肌收缩和腺细胞分泌加速,因而导致速发型过敏反应和炎症反应。
已知引起肥大细胞脱颗粒激活的因素包括:抗原;化合物48/80(Panton,British Journal of Pharmacology,1951);IgE抗体;IgE受体抗体;IgE二聚体;Con A;外用抗生素多粘菌素B;聚赖氨酸多肽;诸如α-胰凝乳蛋白酶和猪胰腺磷脂酶A2等酶的刺激;Ca2+偶联刺激性分泌的刺激(Ischizaka T等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,77,1903,1980);环核苷酸水平的变化;由蛋白激酶激活引起的磷酸化的增加(Dagmar B等,CancerResearch,35,2056,1975);以及由肌动蛋白丝、中间丝和微管组成的肥大细胞骨架的改变(LagunoffD和Chi EY,J.Cell Biol.71,182,1976)。
同时,从肥大细胞中释放的化学介质会引起各种过敏性疾病,例如哮喘、过敏性鼻炎、过敏性耳炎、过敏性休克和过敏性皮肤病。其中,过敏性皮肤病是常见的皮肤病,由于慢性进行性发痒,这种皮肤病会影响到患者情绪的变化、良好的睡眠和日常的生活,因而导致严重的精神和肉体上的痛苦。过敏性皮肤病通常包括特应性皮炎、接触性皮炎、荨麻疹和牛皮癣。特应性皮炎是在2~6个月龄的婴儿中发生的慢性湿疹,对其发病机理还没有清楚地了解。对于特应性皮炎的治疗,最重要的是从一出生就确定并消除引起过敏症的物质。在症状严重的情况下,或者将抗组胺制剂作为全身性药物施用,或者局部施用肾上腺皮质激素。接触性皮炎是湿疹的一类,是皮肤的一种超敏反应,在外来物质与皮肤接触时发生。根据所接触的物质,将接触性皮炎分为日光接触性皮炎、汞接触性皮炎和金属接触性皮炎。荨麻疹是由于炎症使上层皮肤发生水肿而使皮肤产生暂时肿胀的现象,是一种伴随有发痒的皮肤超敏反应。而且,已知荨麻疹是以下情形中发生:各种化学介质由于各种原因和机制从肥大细胞和嗜碱细胞释放,并作用在真皮的微脉管***上,使所述微脉管***舒张并增加血管透过性,从而使富含蛋白质的液体从血管渗出到真皮组织中。牛皮癣是慢性炎症皮肤病,其特征在于形成大小不一的、具有清晰的边界并覆盖有银白色鳞屑的红斑状丘疹和斑块,和组织学中的上皮增生。而且,牛皮癣是一种原因不明的疾病,其中症状的改善和恶化反复发生。根据牛皮癣症状的严重性,已经研究和使用了各种疗法。但都难以根治。
目前,抗组胺药或类固醇药经常用于治疗过敏性疾病。然而,这些药大多只具有临时性效果,并经常具有严重的副作用。因此,需要开发对过敏性疾病具有预防和治疗效果,同时具有较小副作用以及具有持续的效果的新的治疗剂。
发明内容
因此,在研究能够有效地预防或治疗过敏性疾病的组合物的过程中,本发明人已经从草药提取物中选择了具有优异的抗过敏活性的物质,并发现所选择的草药提取物具有预防或治疗过敏性疾病的效果。基于这些发现,完成了本发明。
本发明的一个目的是提供一种对肥大细胞脱颗粒和释放组胺具有抑制活性的草药提取物,该草药提取物是通过用水或有机溶剂对鱼腥草和插田泡进行提取而得到的。
本发明的另一个目的是提供用作药物的所述草药提取物以及所述草药提取物在制备抗过敏性疾病的治疗剂或者对肥大细胞脱颗粒和释放组胺具有抑制活性的抑制剂中的用途。
本发明的又一个目的是提供用于预防或治疗过敏性疾病的药物组合物,该药物组合物含有所述草药提取物作为活性成分。
本发明的又一个目的是提供用于预防和改善过敏性疾病的食品组合物,该食品组合物含有所述草药提取物作为活性成分。
本发明的又一个目的是提供用于预防或治疗过敏性疾病的方法,该方法包括对所需要的患者施用有效量的所述草药提取物的步骤。
本发明的另一个目的是提供抑制肥大细胞脱颗粒和释放组胺的方法,该方法包括对所需要的患者施用有效量的所述草药提取物的步骤。
为实现上述目的,一方面,本发明提供对肥大细胞脱颗粒和释放组胺具有抑制活性的草药提取物,所述草药提取物通过用水或有机溶剂对鱼腥草和插田泡进行提取而获得。
另一方面,本发明提供用作药物的所述草药提取物以及所述草药提取物在制备抗过敏性疾病的治疗剂或者对肥大细胞脱颗粒和释放组胺具有抑制活性的抑制剂中的用途。
另一方面,本发明提供用于预防或治疗过敏性疾病的药物组合物,该药物组合物含有所述草药提取物作为活性成分。
另一方面,本发明提供用于预防或改善过敏性疾病的食品组合物,该食品组合物含有所述草药提取物作为活性成分。
又一方面,本发明提供用于预防或治疗过敏性疾病的方法,该方法包括对所需要的患者施用有效量的所述草药提取物的步骤。
另一方面,本发明提供抑制肥大细胞脱颗粒和释放组胺的方法,该方法包括对所需要的患者施用有效量的所述草药提取物的步骤。
下文将对本发明进行详细描述。
本文使用的术语″过敏性疾病″是指人体对任何物质的超敏反应,即,机体免疫***对外来物质产生的超敏反应所引起的疾病。优选地,该术语是指介质物质(如组胺)因外来物质而释放,从而引起疾病的超敏反应。这些过敏性疾病的例子包括过敏性哮喘、过敏性鼻炎、过敏性耳炎、过敏性休克和过敏性皮肤病。所述的过敏性皮肤病包括特应性皮炎、牛皮癣、接触过敏性皮炎和荨麻疹。
为了研究能够预防或治疗过敏性疾病的组合物,本发明人分析了11种草药提取物的抗过敏活性,这些草药提取物包括桑叶(Mori folium)提取物、牛蒡(Arctii fructus)提取物、五味子(Schizandra chinensis)提取物、枸杞(Lycium chinense)提取物、肉桂(Cinnamomum cassia)提取物、山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc)提取物、山楂(Crataegi fructus)提取物、柳根皮(Salicis Radicis Cortex)提取物、黑芝麻提取物、鱼腥草提取物和插田泡提取物。抗过敏活性通过下述方法测定:用化合物48/80(已知是诱导肥大细胞脱颗粒的强有力的物质)处理大鼠腹膜的肥大细胞,然后测量草药提取物是否抑制由化合物48/80诱导的肥大细胞脱颗粒。由测试结果可以看出,包括鱼腥草提取物、插田泡提取物、山茱萸提取物,山楂提取物和桑叶提取物在内的5种草药提取物具有抑制由化合物48/80诱导的大鼠腹膜肥大细胞的肥大细胞脱颗粒的活性(见测试例1)。
而且,本发明人对确定具有抗过敏活性的鱼腥草提取物、插田泡提取物、山茱萸提取物、山楂提取物和桑叶提取物是否具有细胞毒性进行了测定。结果证实所有这些草药提取物都没有显示出细胞毒性,表明它们能够在体内安全使用(见测试例2)。
而且,本发明人在所述5种草药提取物中选择抗过敏活性最高的鱼腥草提取物和插田泡提取物,制备所选择的鱼腥草和插田泡的混合提取物,并分析所述混合提取物的抗过敏活性。
在本发明的一个测试例中,用鱼腥草和插田泡的混合提取物对大鼠的腹膜肥大细胞进行预处理,然后以化合物48/80进行处理。结果表明所述混合提取物具有抑制肥大细胞释放组胺的效果。而且结果还表明,混合提取物的组胺释放抑制效果明显优于鱼腥草提取物或插田泡提取物(见测试例3)。由此效果可见,据信所述混合提取物增加了肥大细胞的胞内环AMP水平,并降低了细胞的钙吸收,从而抑制了肥大细胞的脱颗粒和组胺释放。
在本发明的另一个测试例中,用鱼腥草和插田泡的混合提取物对过敏性休克的小鼠模型进行预处理,结果发现,所述混合提取物具有优异的抑制小鼠因过敏性休克而死亡的效果,并具有100%存活率。而且结果还表明,鱼腥草和插田泡的混合提取物有效地抑制了过敏性休克的小鼠模型的肠系膜的肥大细胞的脱颗粒(见测试例4)。
在本发明的另一个测试例中,用鱼腥草和插田泡的混合提取物对皮肤反应的大鼠模型进行预处理,由结果可以发现,所述混合提取物降低了由化合物40/80诱导的皮肤反应,并有效地抑制了血管透过性的增加(见测试例5)。
另外,本发明人还对除包含鱼腥草和插田泡的提取物以外还包含经证实具有抗过敏活性的山茱萸、山楂和桑叶的提取物在内的混合提取物的抗过敏活性进行测定。结果表明所述混合物具有抑制化合物48/80诱导的大鼠腹膜肥大细胞释放组胺的活性(见测试例6)。
另外,在本发明的另一个测试例中,对患有特应性皮炎的患者施用含有鱼腥草和插田泡的混合提取物的胶囊制剂或者含有鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶的混合提取物的胶囊制剂。然后,测量患者血清中的IgE和组胺的浓度,并对病变进行临床观察。由结果可以看出,本发明的制剂与现有技术中已经使用的类固醇药和抗组胺药具有相同的治疗效果(见测试例7)。
因此,本发明的鱼腥草和插田泡的混合提取物的特征在于,所述混合提取物具有有效地抑制肥大细胞脱颗粒和释放组胺的活性,以及抑制因过敏性休克导致死亡的活性,和降低由化合物40/80诱导的皮肤反应并有效地抑制血管透过性的增加。
因此,本发明的用于预防或治疗过敏性疾病的药物组合物的特征在于,所述药物组合物含有鱼腥草和插田泡的提取物作为活性成分。
而且,本发明的用于预防或治疗过敏性疾病的药物组合物特征在于,所述组合物除了含有鱼腥草和插田泡的提取物之外,还进一步含有选自山茱萸提取物、山楂提取物和桑叶提取物的至少一种提取物。
优选地,本发明的药物组合物含有其中鱼腥草和插田泡以1∶4至4∶1的重量比混合的提取物。更优选的是,本发明的药物组合物含有其中鱼腥草和插田泡以1∶1的重量比混合的提取物。此外,当本发明的组合物进一步含有山茱萸提取物、山楂提取物、桑叶提取物或者它们的混合物时,这些附加的组分的含量以本发明组合物的总重量计可以为1重量%~20重量%,优选为5重量%~10重量%。
鱼腥草是三白草属(Saururus chinensis)多年生草本植物,广泛分布于亚洲的东南部。已知鱼腥草具有减轻发烧以及治疗肿胀和直肠突出的效果,并具有排除毒物和中和重金属的活性。
插田泡(Rubus coreanus Miq.)是蔷薇科(Rosaceae)落叶阔叶灌木,原生于中国,并分布在韩国的济州岛(Jejudo)、韩国南部和中部、日本、美国、欧洲等。在中药中,使用插田泡的未熟果实。已知插田泡的药效包括:通过保护肝脏免于因疲劳而受损来防止视力的下降;促进排尿;改善由于精力(阳气、肾气)不足所致的遗精、***不足、阳痿和性功能;使身体发热;增强精力;促进头发生长;和预防白发。
所述山茱萸是属山茱萸科(Cornus officinalis)的落叶树的山茱萸树的果实。它对各种成人疾病有效,所述成人疾病例如肾病、糖尿病、高血压、关节炎和妇科病,并具有营养、收敛、抗细菌和抗真菌活性。它含有莫诺苷、马钱素、sworoside、山茱萸苷、没食子酸、酒石酸和苹果酸等。
所述山楂是蔷薇科植物的果实,含有杏苷、熊果酸、绿原酸、柠檬酸、外消旋酸、类黄酮和维生素C等。在山楂的药效中,它降低了心脏和血管的紧张度并具有强心作用。此外,它还具有改善血液循环、促进消化和降低胆固醇含量的效果。
桑叶是桑树的叶子,并已知具有补血和健体的功效(神农本草经(ShenNong′s Materia Medica))。此外,已知它还对糖尿病、神经痛和高血压有效,具有减少休克和降低发热的效果,并对耳鸣和头痛有效(中药大字典(Chinese Material medica))。根据日本最近的研究发现,桑叶具有抑制血液葡萄糖水平上升和预防糖尿病的效果。
用于本发明的鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶可从自然界收集或商购获得。本发明的组合物可以含有通过混合所述混合草药原料然后一起提取该混合草药原料而获得的混合物或者通过根据各所述草药原料的药效组分的物理化学性质而对其进行提取,然后相互混合各提取物而获得的混合物。本发明的草药提取物可以通过本领域已知的溶剂提取方法进行制备。例如,提取可采用选自以下物质的一种来进行:水、醇(例如乙醇和甲醇)、有机溶剂(例如丙酮、乙酸乙酯、正己烷、二乙基醚、丙酮或苯)以及它们的混合物。当提取物是利用溶剂提取方法制得时,可以采用热水提取方法、超声提取方法和回流提取方法。在本发明的一个实施例中,热水提取物通过将纯净水加入到所述草药原料中,加热并提取一定的时间,然后过滤而制得(见实施例1)。在本发明另一个实施例中,甲醇提取物通过将70%甲醇加入到所述草药原料中,对所得材料提取一定的时间,然后过滤而制得(见实施例2)。测定热水提取物和甲醇提取物对化合物40/80诱导的大鼠的肥大细胞脱颗粒的抑制作用,结果表明,所述热水提取物和甲醇提取物在抑制肥大细胞脱颗粒上没有明显的差异(见测试例1)。
同时,本发明的具有预防或治疗过敏性疾病效果的药物组合物可以仅含有所述草药提取物或者可以通过加入至少一种药学可接受的载体、赋形剂或稀释剂而配制。本文使用的术语“药学可接受的”是指所述组合物在生理学上是可接受的,并且当施用于人体时,其剂量不会引发诸如胃肠病和头晕等过敏反应或类似反应。而且,为预防或治疗过敏性疾病,可以通过适当的途径施用如上所述配制的本发明的药物组合物。适当的施用途径包括口服途径、眼内途径、透皮途径、皮下途径、静脉内途径和肌肉内途径。
本发明的药物组合物可制成口服制剂或肠胃外制剂,这取决于所选择的施用途径。在肠胃外制剂的情况下,本发明的药物组合物可由本领域已知的方法制成粉末、颗粒、片剂、丸剂、糖衣片剂、胶囊、液剂、凝胶、糖浆、膏剂和悬浮液等。例如,口服制剂可通过使活性组分与固体赋形剂混合,粉碎该混合物,加入合适的辅剂,然后将该混合物加工成颗粒混合物而作为片剂或糖衣片剂获得。适当的赋形剂的例子包括糖类,所述糖类包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓醇和麦芽糖醇;淀粉类,例如玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉和马铃薯淀粉;纤维素类,例如纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和羟丙基甲基纤维素;和填料,例如明胶和聚乙烯基吡咯烷酮。如果需要,可使用崩解剂,例如交联的聚乙烯基吡咯烷酮、琼脂、海藻酸或海藻酸钠。而且,本发明的药物组合物可另外含有抗凝剂、润滑剂、润湿剂、香料、乳化剂和/或防腐剂。在肠胃外制剂的情况下,本发明的药物组合物可由本领域已知的任意方法制成注射剂、乳膏、洗剂、外用软膏、油即、保湿剂和经鼻吸入剂。例如,在注射剂的情况下,本发明的组合物可通过将本发明的草药提取物溶解在生理可接受的缓冲液(如Hanks溶液,林格氏溶液或生理缓冲盐水)中而配制。
本文使用的术语″有效量″是指药物组合物在施用于患者时显示出预防或治疗效果的量。以鱼腥草和插田泡的提取物的量计,根据本发明的药物组合物的有效量优选为约1毫克/千克体重/天~100毫克/千克体重/天,更优选为约10毫克/千克体重/天~30毫克/千克体重/天。然而,本发明的药物组合物的剂量可以根据诸如施用途径、患者的年龄、性别、体重和疾病严重程度等各种因素而进行适当的选择。
此外,本发明的药物组合物可在其有效量的优选范围内施用一次或多次。然而,可以根据施用途径和受试对象、以及患者的年龄、性别、体重和疾病情况对本发明所述的提取物的剂量进行适当的选择。在含有本发明的提取物的组合物显示出本发明的效果的情况下,对该组合物的制剂、施用途径和施用方式没有特别的限制。
本文使用的术语″受试对象″是指哺乳动物,尤其是包括人在内的动物。受试对象也可以是需要治疗的患者。
本发明的药物组合物可与任意的对过敏性疾病具有预防或治疗效果的已知物质或草药提取物组合施用,所述已知物质例如免疫调节剂或抗组胺药,所述草药提取物例如桑根提取物。
此外,鱼腥草和插田泡的提取物可以以用于预防或治疗过敏性疾病的食品组合物的形式提供。而且,所述食品组合物可进一步含有选自山茱萸提取物、山楂提取物和桑叶提取物的至少一种提取物。另外,所述食品组合物可以还含有现有技术中已知可以预防或改善过敏性疾病的草药提取物,例如桑根提取物。本发明的食品组合物可以包括所有可能的形式,例如功能性食品、营养补充剂、健康食品和食品添加剂。这些形式的食品组合物可由本领域已知的任何常规方法制备。
例如,在健康食品的情况下,本发明的草药提取物本身可制成茶、果汁或饮料以供饮用,或者为摄取而进行颗粒化、胶囊化或粉末化。
此外,功能食品可以通过将本发明的草药提取物加入到下列物质中而制得:饮料(包括酒精饮料);水果和它们的加工食品(如罐装水果、瓶装水果、果酱、甜果酱(marmalade)等);鱼、肉和它们的加工食品(例如,火腿、香肠、咸牛肉等);面包和面条(例如日本面条、荞麦面条、拉面、意大利面条、通心面等);果汁、各种饮料;小甜饼;小麦面筋;奶制品(例如黄油和奶酪)、可食用的植物脂肪和油、人造黄油;植物蛋白质;干馏食品(retort food)、冷冻食品和各种调味料(例如味噌、酱油和沙司等)。
此外,为了用作食品添加剂,本发明的草药提取物可制成粉末或浓缩物。
本发明的草药提取物在本发明食品组合物的含量以该组合物的总重量计,优选为1重量%~90重量%,更优选为10重量%~50重量%。而且,本发明的食品组合物含有鱼腥草和插田泡的混合提取物,其中鱼腥草和插田泡优选以1∶4至4∶1的重量比混合。
而且,本发明提供鱼腥草和插田泡的提取物的治疗用途。具体地,本发明提供用于预防或治疗过敏性疾病的方法,该方法包括对所需要的受试对象施用有效量的鱼腥草和插田泡的提取物的步骤。此外,本发明提供抑制肥大细胞脱颗粒和释放组胺的方法,该方法包括对所需要的受试对象施用有效量的鱼腥草和插田泡的提取物的步骤。
本发明提供用作药物的所述草药提取物以及该草药提取物在制备治疗过敏性疾病的药剂或者抑制肥大细胞脱颗粒和释放组胺的药剂中的用途。
除了鱼腥草和插田泡的提取物以外,治疗过敏性疾病的药剂或者抑制肥大细胞脱颗粒和释放组胺的药剂还可以进一步含有药学可接受的载体。药学可接受的载体的例子如上所述。此外,本发明的用于治疗过敏性疾病的药剂可以口服施用或肠胃外施用,口服施用或肠胃外施用的例子如上所述。
附图说明
图1为光学显微照片,显示用本发明的草药提取物和化合物48/80(组胺释放诱导剂)处理的大鼠腹膜肥大细胞形态变化的观察结果。(A:未处理组;B:用化合物48/80处理的组;C:用鱼腥草和插田泡的混合提取物处理的组;和D:用鱼腥草和插田泡的混合提取物和化合物48/80处理的组。
图2显示了对鱼腥草提取物、插田泡提取物、山茱萸提取物、山楂提取物和桑叶提取物进行细胞毒性测试的结果。
图3是显示对过敏性皮肤病患者施用含有本发明的鱼腥草和插田泡提取物的制剂进行治疗前和治疗后的病变的照片(A:对特应性皮炎患者进行治疗前;B:对特应性皮炎患者进行治疗后;C:对特应性皮炎患者进行治疗前;和D:对特应性皮炎患者进行治疗后)。
图4是显示对过敏性皮肤病患者施用现有技术的治疗剂进行治疗前和治疗后的病变的照片(A:对特应性皮炎患者进行治疗前;B:对特应性皮炎患者进行治疗后)。
具体实施方式
下文将通过以下实施例来详细描述本发明。然而应当理解,这些实施例是用于说明本发明而不应理解为是用于限制本发明的范围。在下述实施例中,固体/固体混合物、液体/液体混合物和液体/固体混合物的百分比分别以重量/重量、体积/体积和重量/体积计,而且除非有其它的指示,否则所有的反应都在室温进行。
实施例1:制备草药原料的热水提取物
为了选择具有抗过敏活性的草药提取物,分别制备了桑叶、牛蒡、五味子、枸杞、肉桂、山茱萸、山楂、柳根皮、黑芝麻、鱼腥草和插田泡的热水提取物。上述制备所用的草药原料全部以干燥状态购自韩国农业合作社(Korean Agriculture Cooperative)。
首先,将草药原料洗涤干净,并切成小于1cm×1cm×1cm的一致尺寸。将所述草药原料以每一种300g分别加入到3升的纯净水中,并在加压下于100℃提取4小时。提取完成后,将各提取物滤过100目的过滤膜,并用真空旋转蒸发仪(EYELA,Tokyo,Rikakikai Co.Ltd.)将滤液浓缩至25白利(brix)。在真空下干燥浓缩物并将其粉碎成80目的尺寸。将干燥粉末用盐水稀释为各种浓度以用于测试。
实施例2:制备草药原料的甲醇提取物
分别将桑叶、牛蒡、五味子、枸杞、肉桂、山茱萸、山楂、柳根皮、黑芝麻、鱼腥草和插田泡洗涤干净,并切成小于1cm×1cm×1cm的固定尺寸。将所述草药原料以每一种500g分别加入到5升70%的甲醇中,并在50℃提取72小时。提取完成后,过滤,并以与实施例1相同的方式真空干燥,以获得甲醇提取物。
测试例1:选择具有抗过敏活性的草药提取物
分别测定桑叶、牛蒡、五味子、枸杞、肉桂、山茱萸、山楂、柳根皮、黑芝麻、鱼腥草和插田泡各自的热水提取物和甲醇提取物的抗过敏活性。
为此目的,从大鼠腹腔获得肥大细胞。该肥大细胞用所述草药提取物和化合物48/80(组胺释放诱导剂)处理。然后观察肥大细胞的形态,并测量肥大细胞的组胺释放量。
1-1)从大鼠腹腔获得肥大细胞
肥大细胞由根据本领域已知方法(Cochrane DE和Douglas WW,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,71,408,1974)进行改进和补充的下述方法获得。用***麻醉重约为250g~300g的健康成熟的Sprague-Dawley雄性大鼠并重击头后部以杀死所述大鼠。然后将约10ml的HEPES-Tyrode缓冲液注射入大鼠腹腔,并对腹壁轻微按摩90秒。沿腹壁中心线切开,用玻璃吸管(spoid)收取腹腔灌洗液并在200×g离心10分钟。弃去上清液,并将留下物质于HEPES-Tyrode缓冲液中重新悬浮成1×106个细胞/毫升。将该肥大细胞悬浮液用于对肥大细胞进行观察。采用已知的方法(Hachisuka等,Arch.Dermatol.Res.,280:358,1988)从腹膜肥大细胞悬浮液中纯化分离肥大细胞。将3.5ml的percoll(硅石胶态悬浮液)等渗溶液(isotonicpercoll solution,1ml的10×Hank′s溶液和9ml的percoll)加入到15ml离心试管中。将0.75ml的肥大细胞悬浮液小心地置于percoll等渗液上,并将0.5ml的HEPES-Tyrode缓冲液加入到试管的上层。然后,将试管中的内容物静置约10分钟,接着以125×g离心15分钟。离心后,用吸液管取出2ml的上清液,并用4℃的HEPES-Tyrode缓冲液洗两次,从而制得纯的肥大细胞悬浮液。利用锥虫蓝和Kimura染色液测定肥大细胞的存活率和纯度,只有存活率和纯度大于90%的肥大细胞悬浮液才被用于测试。
1-2)观察大鼠腹膜肥大细胞受到草药提取物处理的形态
以25μl的桑叶、牛蒡、五味子、枸杞、肉桂、山茱萸、山楂、柳根皮、黑芝麻、鱼腥草、插田泡的热水提取物或甲醇提取物与25μl的HEPES-Tyrode缓冲液分别对200μl的在测试例1-1)中获得的腹部肥大细胞悬浮液进行处理,并37℃于培养箱中反应30分钟。此外,为了测定所述草药提取物是否具有抑制由化合物48/80诱导的肥大细胞脱颗粒的活性,分别将所述草药提取物的热水提取物或甲醇提取物25μl加入到肥大细胞悬浮液中,并在37℃于培养箱中反应10分钟。然后,将25μl的化合物48/80加入到反应物质中,并在37℃于培养箱中反应20分钟。
对于为与测试组比较而使用的阳性对照组,用25μl的HEPES-Tyrode缓冲液和25μl(5μl/ml)的化合物48/80对200μl的肥大细胞悬浮液进行处理,并在37℃于培养箱中反应30分钟。作为阴性对照组,使用未处理的肥大细胞悬浮液。
反应结束后,将200μl的肥大细胞培养物滴到置于倒置显微镜台的载波片上(22mm×60mm),接着在室温静置10分钟,以使肥大细胞能够沉淀。接着在×1,000的放大倍数观察肥大细胞。
通常,正常的肥大细胞大多呈圆形或椭圆形,轮廓清楚并在细胞质中填充有许多的颗粒。肥大细胞的直径约为10μm~20μm,比其它细胞(淋巴细胞或嗜中性白细胞)大两倍以上。因而,呈圆形或椭圆形、轮廓清楚并在细胞质中填充有高光学折射率的颗粒的肥大细胞被归为正常肥大细胞。另一方面,细胞轮廓不清楚并且细胞质中的颗粒或者突出细胞表面或者分散在细胞周围的肥大细胞被归为脱颗粒的肥大细胞。
由测试结果可以看出,在未处理的阴性对照组的情况下,肥大细胞的尺寸约比悬浮液中的淋巴细胞大两倍,而且肥大细胞呈圆形或椭圆形。而且,正常肥大细胞的观测结果显示出清晰的轮廓,并且细胞质填充有高光学折射率的颗粒,以至于不能清楚地观察到细胞核(见图1A)。
在用化合物48/80溶液处理的阳性对照组的情况下,可以观察到脱颗粒现象,其中细胞质中的颗粒的光学折射率在数分钟内降低,细胞逐渐膨胀,以至于细胞膜变得不规则,同时,具有降低的折射率的颗粒突出于细胞表面(见图1B)。
在仅用各所述草药原料的热水提取物处理肥大细胞的情况下,肥大细胞的形态、尺寸和表面轮廓与正常肥大细胞的观测结果没有明显差异,而且在加入热水提取物的30分钟的过程中,没有观察到其它变化(图1C)。
同时,在分别用鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶的热水提取物处理肥大细胞,然后加入化合物48/80溶液的情况下,可看出肥大细胞脱颗粒受到抑制,使得它们的形态、尺寸和表面轮廓与正常肥大细胞相同(见图1D)。另外,在分别用鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶的甲醇提取物处理的情况下,可以发现肥大细胞脱颗粒受到抑制(数据未示出)。另一方面,当用牛蒡、五味子、枸杞、肉桂、柳根皮和黑芝麻的热水提取物或甲醇提取物处理肥大细胞培养物,然后加入化合物48/80溶液时,肥大细胞脱颗粒未受到抑制(见表1)。
由以上结果可以看出,鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶各自的热水提取物或甲醇提取物都没有影响肥大细胞的形态,但是抑制了化合物48/80诱导的肥大细胞脱颗粒并使肥大细胞形状保持为正常肥大细胞的形状。
表1:用草药提取物的热水提取物或甲醇提取物处理对化合物48/80诱导的肥大细胞脱颗粒的抑制作用
草药原料种类 | 肥大细胞脱颗粒 | |
热水提取物 | 甲醇提取物 | |
桑叶 | - | - |
牛蒡 | + | + |
五味子 | + | + |
枸杞 | + | + |
肉桂 | + | + |
山茱萸 | - | - |
山楂 | - | - |
柳根皮 | + | + |
黑芝麻 | + | + |
鱼腥草 | - | - |
插田泡 | - | - |
+:观察到肥大细胞脱颗粒。
-:没有观察到肥大细胞脱颗粒。
测试例2:鱼腥草提取物、插田泡提取物、山茱萸提取物、山楂提取物和桑叶提取物的细胞毒性
对测试例1-2)中已经证实具有抗过敏活性的鱼腥草提取物、插田泡提取物、山茱萸提取物、山楂提取物和桑叶提取物的细胞毒性进行测定。
向225μl(7×105个细胞/0.225ml)由实施例1-1)获得的含有肥大细胞和其它细胞的小白鼠腹腔悬浮液中,分别加入25μl的鱼腥草提取物、插田泡提取物、山茱萸提取物、山楂提取物和桑叶提取物(各提取物的浓度为100mg/ml)。然后,使肥大细胞悬浮液在37℃于培养箱中反应2小时,测定细胞存活率。作为所用的对照组,以缓冲液代替提取物来处理肥大细胞悬浮液。在4℃以400×g对反应溶液进行离心,弃掉上清液。向留下的细胞中加入50μl的MTT(1mg/ml的3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基-溴化四唑,Sigma-Aldrich),并在37℃于培养箱中反应1小时。反应完成后,加入100μl的DMSO(二甲亚砜,C2H6SO,Sigma-Aldrich)。然后,用分光光度计测量混合物在570nm处的光学密度(O.D.),细胞存活率计算如下:
存活率(%)=(测试组的光学密度/对照组的光学密度)×100
在测试结果中,鱼腥草提取物、插田泡提取物、山茱萸提取物、山楂提取物和桑叶提取物没有显示出细胞毒性(见图2)。
实施例3:制备鱼腥草和插田泡的混合提取物
以1∶1的重量比混合鱼腥草和插田泡,以下述方式由混合的鱼腥草和插田泡制备混合提取物。将干燥的鱼腥草和插田泡洗涤干净,并切成小于1cm×1cm×1cm的固定尺寸。然后按每一种原料150g的量混合切过的草药原料。将300g的混合草药原料放在3升纯净水中,并在加压下于100℃提取4小时。
测试例3:测定鱼腥草和插田泡的混合提取物抑制大鼠腹膜肥大细胞释放组胺的效果
为了测定在实施例3制备的鱼腥草和插田泡的混合提取物是否具有抑制由化合物48/80诱导的腹部肥大细胞释放组胺的效果,进行了下述测试。利用测试例1-1)中获得的大鼠腹膜肥大细胞测量抑制组胺释放的效果。首先,为了测量正常肥大细胞的组胺释放量,用50μl的盐水处理200μl的腹膜肥大细胞。此外,为了测量化合物48/80所致的组胺释放量,向腹膜肥大细胞中加入25μl的盐水,10分钟后,加入25μl的化合物48/80溶液(5μg/ml)。为了测定鱼腥草提取物、插田泡提取物以及鱼腥草和插田泡的混合提取物是否可以诱导肥大细胞释放组胺,分别向肥大细胞中加入25μl的各提取物(浓度为1mg/ml),10分钟后,加入25μl的盐水(最终浓度为0.1mg/ml)。而且,为了测定草药提取物是否可以抑制由化合物48/80诱导的肥大细胞的组胺释放,以如上所述相同的方式用各提取物处理肥大细胞,10分钟后,加入25μl的化合物48/80溶液(5μg/ml)。
反应完成后,在4℃以400×g对所述反应溶液进行离心,收集上清液,并用按已知方法(Harvima等,Clinica Chimica Acta.171:247,1988)进行了改进的方法测量肥大细胞的组胺释放量。换句话说,使10μl所收集的上清液、1.5μl的S-腺苷(甲基-14C)甲硫氨酸(2μCi(居里)/ml)、40μl的Tris-甘氨酸缓冲液(300mM,pH 8.3)和5μl的组胺N-甲基转移酶在37℃于培养箱中相互反应90分钟,加入20μl的3N高氯酸中止反应。为了中和高氯酸,加入20μl的10N NaOH,并加入1ml甲苯-异戊醇,提取该混合物而获得700μl的上清液。向该上清液中加入3ml的混合溶液(Cocktail solution,ULTIMA GOLDTM,Packard Bioscience Company,美国)。接着使用β-计数器(liquid scintillation Analyzer,Acanberra company,澳大利亚)测量每分钟的计数(CPM),并采用组胺标准曲线测定组胺的量。组胺量以组胺的总量计采用百分比表示。组胺的总量按如下方法进行确定:通过用50μl的盐水处理200μl的腹部肥大细胞,获得250μl的肥大细胞悬浮液,在100℃对该肥大细胞悬浮液加热10分钟,离心经加热的悬浮液,将经测得的上清液的组胺量确定为100。组胺释放(%)由下式计算:
组胺释放(%)=(测试组中的组胺释放量/组胺释放总量)×100
根据如上所述计算的组胺量,由下式计算用草药提取物处理的肥大细胞的组胺释放抑制率:
组胺释放抑制率(%)=[1-(草药提取物和化合物48/80处理的组胺释放量-草药提取物处理的组胺释放量)/(化合物48/80处理的组胺释放量-盐水处理的组胺释放量)]×100
在测试结果中,在仅用盐水处理的肥大细胞悬浮液的情况下,组胺释放为2.7%。在用鱼腥草提取物、插田泡提取物或鱼腥草和插田泡的混合提取物处理肥大细胞的情况下,组胺释放类似于仅用盐水处理的情况。另一方面,在仅用化合物48/80处理的肥大细胞的情况下,组胺释放高达60.2%。而在用草药原料的热水提取物处理肥大细胞,然后用化合物48/80处理的情况下,可以发现由化合物48/80诱导的肥大细胞的组胺释放受到抑制。
换句话说,在用鱼腥草和插田泡的混合提取物处理肥大细胞,然后用化合物48/80处理的情况下,组胺释放为9.4±1.6%,组胺释放抑制率为88%。另一方面,在单独用鱼腥草提取物处理肥大细胞,然后用化合物48/80处理的情况下,组胺释放为41.0±2.1%,组胺释放抑制率为33%。在单独用插田泡提取物处理肥大细胞,然后用化合物48/80处理的情况下,组胺释放为37.4±3.2%,组胺释放抑制率为39%(见表2)。
由上述测试结果可以看出,与单独用鱼腥草提取物进行处理或者单独用提取物进行处理的情况相比,鱼腥草和插田泡的混合提取物在抑制化合物48/80诱导肥大细胞释放组胺中具有良好的效果。
表2:鱼腥草和插田泡的混合提取物处理对化合物48/80-诱导肥大细胞释放组胺的抑制作用
提取物种类 | 化合物48/80 | 组胺释放(%) | 组胺释放抑制(%) |
盐水 | - | 2.7±0.31) | |
+ | 60.2±3.2 | ||
鱼腥草 | - | 2.5±0.2 | |
+ | 41.0±2.1 | 33 | |
插田泡 | - | 2.4±0.4 | |
+ | 37.4±3.2 | 39 | |
鱼腥草和插田泡的混合提取物 | - | 3.9±0.3 | |
+ | 9.4±1.6 | 88 |
+:处理,-:未处理
1):各个值均表示为平均值±标准误差(n=10)
测试例4:用过敏性休克小鼠模型测定鱼腥草和插田泡的混合提取物的抗过敏活性
用过敏性休克小鼠模型测定鱼腥草和插田泡的混合提取物的抗过敏活性。过敏性休克小鼠模型通过对ICR小鼠的腹腔施用化合物48/80以诱导过敏性休克而获得。在本测试中,根据小鼠的死亡率和小鼠肠系膜的肥大细胞脱颗粒,测定本发明鱼腥草和插田泡的混合提取物对过敏性休克模型的处理效果。
4-1)测定鱼腥草和插田泡的混合提取物对因过敏性休克引起的小鼠死亡率的效果
小鼠过敏性休克由已知的利用化合物48/80的方法(Byoung-Duek,Jeon等,The Korean Journal of Biological Response Modifier,2,169,1992)引发。选择重约20g~30g的健康的ICR小鼠,以15微克/克体重的量对小鼠的腹腔施用一次化合物48/80。作为对照组,以盐水代替化合物48/80进行注射。在施用化合物48/80之前24小时、12小时和1小时,分3次对小鼠的腹腔分别施用300μl的10mg/ml或1mg/ml鱼腥草提取物、插田泡提取物以及鱼腥草和插田泡的混合提取物。另外还对小鼠仅施用化合物48/80而未以提取物进行预处理,然后观察至少3天,直至小鼠死亡。通过将由于过敏性休克而死亡的小鼠数量除以测试中使用的小鼠总数量,计算鱼腥草提取物、插田泡提取物、鱼腥草和插田泡的混合提取和化合物48/80的小鼠死亡率。而且,测量注射化合物48/80后小鼠因过敏性休克而死亡所需的平均时间(分钟)。
在测试结果中,仅用施用盐水而没有施用化合物48/80的小鼠均得以存活。此外,施用盐水和化合物48/80的小鼠全部死亡(100%死亡率),死亡所需的平均时间为17.8分钟。
在施用化合物48/80前施用鱼腥草提取物的小鼠的情况下,死亡率为30%(鱼腥草提取物的浓度为10mg/ml)或70%(鱼腥草提取物的浓度为1mg/ml),死亡所需的平均时间为57.4分钟(鱼腥草提取物的浓度为10mg/ml)或42.3分钟(鱼腥草提取物的浓度为1mg/ml)。
此外,在施用化合物48/80前施用插田泡提取物的小鼠的情况下,小鼠死亡率为30%(插田泡提取物的浓度为10mg/ml)或80%(插田泡提取物的浓度为1mg/ml),死亡所需的平均时间为53.4分钟(插田泡提取物的浓度为10mg/ml)或39.8分钟(插田泡提取物的浓度为1mg/ml)。
同时,在施用化合物48/80前施用鱼腥草和插田泡的混合提取物的小鼠的情况下,小鼠死亡率为0%(全部存活;混合提取物的浓度为10mg/ml)或10%(混合提取物的浓度为1mg/ml),死亡所需的平均时间为65.5分钟(见表3)。
由上述测试结果可以看出,即使在单独使用鱼腥草提取物或插田泡提取物时,由化合物48/80诱导的过敏性休克引发的小鼠死亡也能够得到抑制,不过在使用鱼腥草和插田泡的混合提取物时,小鼠死亡能够得到有效的抑制。而且,提取物的治疗浓度越高,对由化合物48/80诱导的过敏性休克引发的小鼠死亡的抑制效果越好。
表3:鱼腥草和插田泡的混合提取物对过敏性休克引发的小鼠死亡的抑制作用
处理(mg/ml) | 化合物48/80 | 死亡小鼠的数量/测试中使用的小鼠数量 | 死亡率(%) | 死亡所需的平均时间(分钟) | |
盐水 | - | 0/10 | 0 | - | |
盐水 | + | 10/10 | 100 | 17.8 | |
鱼腥草提取物 | 10 | + | 3/10 | 30 | 57.4 |
1 | + | 7/10 | 70 | 42.3 | |
插田泡提取物 | 10 | + | 3/10 | 30 | 53.4 |
1 | + | 8/10 | 80 | 39.8 | |
鱼腥草和插田泡的混合提取物 | 10 | + | 0/10 | 0 | - |
1 | + | 1/10 | 10 | 65.5 |
+:处理,-:未处理
4-2)测定鱼腥草和插田泡的混合提取物对小鼠肠系膜肥大细胞因过敏性休克引发的脱颗粒的效果
按照实施例4-1)所述的相同方法,仅注射化合物48/80到小鼠的腹腔中,或者分别用鱼腥草提取物、插田泡提取物以及鱼腥草和插田泡的混合提取物对小鼠进行三次预处理,然后施用化合物48/80。15分钟后,通过颈脱臼杀死小鼠。
沿死亡小鼠的腹壁中心线切开,直接将甲醇注入腹腔中,然后固定20分钟。取出经固定的肠系膜并将其放到玻片上。然后用水洗涤,用0.1%甲苯胺蓝(pH 4.0)染色1分钟,用水洗涤,脱水并密封。为每只动物制备两个玻片。在×400光学显微镜下观察肥大细胞的脱颗粒现象,肥大细胞可分为正常肥大细胞、中等脱颗粒肥大细胞和严重脱颗粒肥大细胞。对肥大细胞进行计数,以计算肥大细胞的脱颗粒指数。在此情况下,未脱颗粒的肥大细胞归为正常肥大细胞,周围存在一些颗粒的肥大细胞归为中等脱颗粒,周围分散有许多颗粒的肥大细胞归为严重脱颗粒。对每一肠系膜部分(segment)的肥大细胞的数量进行两次随机计数,每次10个视域(field),并取平均值。为了减少个体误差,结合两个人对同一样品所观察的结果并计算平均值。脱颗粒指数(%)和脱颗粒抑制率(%)通过下式计算:
脱颗粒指数(%)=[(正常肥大细胞的数量×0)+(中等脱颗粒肥大细胞的数量×50)+(严重脱颗粒肥大细胞的数量×100)]/肥大细胞的总数
脱颗粒抑制率(%)=[1-(鱼腥草和插田泡的混合提取物和化合物48/80所致的脱颗粒指数/化合物48/80所致的脱颗粒指数)]×100
在测试结果中,在仅施用盐水的对照组中的肥大细胞脱颗粒指数为6.3,而在仅施用化合物48/80的小鼠组中的肥大细胞脱颗粒指数为92.7。
在施用化合物48/80前施用鱼腥草提取物的小鼠的情况下,肥大细胞脱颗粒指数为42.0(鱼腥草提取物的浓度为10mg/ml)或82.1(鱼腥草提取物的浓度为1mg/ml)。同样在此情况下,肥大细胞脱颗粒抑制率为54.6%(鱼腥草提取物的浓度为10mg/ml)或11.4%(鱼腥草提取物的浓度为1mg/ml)。
在施用化合物48/80前施用插田泡提取物的小鼠组的情况下,肥大细胞脱颗粒指数为42.7(插田泡提取物的浓度为10mg/ml)或80.6(插田泡提取物的浓度为10mg/ml),而且肥大细胞脱颗粒抑制率为53.9%(浓度为1mg/ml)或13%(浓度为1mg/ml)。
在施用化合物48/80前施用鱼腥草和插田泡的混合提取物的小鼠组的情况下,肥大细胞脱颗粒指数为9.1(混合提取物的浓度为10mg/ml)或27.2(混合提取物的浓度为1mg/ml),而且肥大细胞脱颗粒抑制率分别为90.1%或70.6%(见表4)。
从上述测试结果可以看出,即使在单独使用鱼腥草提取物或插田泡提取物时,也能抑制化合物48/80诱导的肥大细胞脱颗粒,不过在使用鱼腥草和插田泡的混合提取物时,肥大细胞脱颗粒可以得到有效的抑制。
表4:鱼腥草和插田泡的混合提取物抑制小鼠肠系膜肥大细胞的脱颗粒的效果
处理(mg/ml) | 化合物48/80 | 肥大细胞(%) | 脱颗粒指数 | 脱颗粒抑制率(%) | |||
正常 | 中等脱颗粒 | 严重脱颗粒 | |||||
盐水 | - | 88.9±1.61) | 9.6±2.6 | 1.5±1.2 | 6.3 | - | |
+ | 2.4±0.8 | 9.9±1.4 | 87.7±4.8 | 92.7 | - | ||
鱼腥草提取物 | 10 | + | 40.4±3.3 | 35.1±3.7 | 24.5±2.9 | 42.0 | 54.6 |
1 | + | 8.8±1.9 | 16.3±3.3 | 73.9±2.9 | 82.1 | 11.4 | |
插田泡提取物 | 10 | + | 39.4±5.3 | 39.8±4.0 | 22.8±2.6 | 42.7 | 53.9 |
1 | + | 9.3±4.6 | 20.3±4.2 | 70.4±3.2 | 80.6 | 13.0 | |
鱼腥草和插田泡的混合提取物 | 10 | + | 84.9±2.3 | 11.9±2.0 | 3.2±1.5 | 9.1 | 90.1 |
1 | + | 60.4±5.3 | 24.8±4.0 | 14.8±3.6 | 27.2 | 70.6 |
+:处理,-:未处理
1):各个值由平均值±标准误差表示(n=10)
测试例5:使用皮肤反应大鼠模型测定鱼腥草和插田泡的混合提取物的抗过敏活性
将化合物48/80施用于重为250g~300g的健康而成熟的Sprague-Dawley大鼠的真皮中,以引发皮肤反应。然后测定本发明的鱼腥草和插田泡的混合提取物是否可以抑制皮肤反应和皮肤血管透过性。
引发大鼠皮肤反应的实验是利用对已知方法(Byoung-Duek,Jeon等,The Korean Journal of Biological Response Modifier,2,169,1992)改进和补充的下述方法来进行的。除去雄性大鼠背部的毛,然后在***麻醉下,分别将50μl的盐水(浓度0.9%)、以及50ml的鱼腥草提取物、插田泡提取物以及鱼腥草和插田泡的混合提取物(提取物的浓度分别为10mg/ml)注入至背部皮肤的真皮中。10分钟后,注射50μl的化合物48/80(浓度5μg/ml)。作为对照组,注射50μl的盐水代替化合物48/80溶液。在注射化合物48/80后20分钟,将400μl的0.5%依文思蓝(Evan’s blue)溶液注入大鼠***背侧的静脉中。在用依文思蓝溶液注射后30分钟,切开背部的皮肤,然后观察真皮上是否出现蓝斑以确定是否产生皮肤反应以及阳性反应。切下显示出蓝斑的皮肤部分并称量其重量。然后,细致地将皮肤部分切成约3mm~4mm的小片,放入2ml甲酰胺溶液中,并在80℃烘箱中反应3小时,以释放依文思蓝溶液。用分光光度计(spectraMAX plus,Molecular Devices,美国)测定所释放的依文思蓝溶液在620nm处的密度,根据依文思蓝标准曲线计算依文思蓝的浓度。此外,根据所算出的依文思蓝浓度,通过下式计算血管透过性抑制率(%):
血管透过性抑制率(%)=[1-(施用草药提取物和化合物48/80的依文思蓝浓度-施用草药提取物的依文思蓝浓度)/(仅施用化合物48/80的依文思蓝浓度-仅施用盐水的依文思蓝浓度)]×100
在测试结果中,仅施用盐水的对照组在皮肤上没有出现蓝斑,但仅施用化合物48/80的组显现蓝斑,表明引发了皮肤反应。此外,仅分别施用鱼腥草提取物、插田泡提取物以及鱼腥草和插田泡的混合提取物的组没有显现蓝斑。因此可以看出,盐水和各提取物在皮肤上不引发皮肤反应,而化合物48/80在皮肤上引发皮肤反应。同时,与仅施用相同浓度的化合物48/80的组相比,分别鱼腥草提取物、插田泡提取物以及鱼腥草和插田泡的混合提取物而后施用化合物48/80的组出现的蓝斑减少了。
对皮肤反应引发位点的皮肤血管透过性进行定量分析,结果,在仅施用化合物48/80的情况下,依文思蓝浓度显示为36.7±2.7μg/g。施用鱼腥草提取物然后施用化合物48/80的组所显示的依文思蓝浓度为25.8±1.7μg/g,对化合物48/80诱导的血管透过性的抑制率为37%。在施用插田泡提取物然后施用化合物48/80的组中,依文思蓝浓度为23.3±1.5μg/g,抑制了45%由化合物48/80诱导的血管透过性。在施用鱼腥草和插田泡的混合提取物然后施用化合物48/80的组中,依文思蓝浓度为8.7±0.8μg/g,抑制了93%由化合物48/80造成的血管透过性(见表5)。
由上述测试结果可以看出,即使在单独使用鱼腥草提取物或插田泡提取物时,也可获得抑制由化合物48/80诱导的皮肤反应和血管透过性的增加的效果。此外还可以看出,当使用鱼腥草和插田泡的混合提取物时,皮肤反应和血管透过性的增加可以得到更有效的抑制。
表5:鱼腥草和插田泡的混合提取物对皮肤反应和血管透过性的抑制效果
处理 | 化合物48/80 | 依文思蓝浓度(μg/g) | 血管透过性的抑制率(%) |
盐水 | - | 6.4±0.81) | |
盐水 | + | 36.7±2.7 | |
鱼腥草提取物 | - | 6.8±0.7 | |
+ | 25.8±1.7 | 37 | |
插田泡提取物 | - | 6.6±0.9 | |
+ | 23.3±1.5 | 45 | |
鱼腥草和插田泡的混合提取物 | - | 6.7±0.8 | |
+ | 8.7±0.8 | 93 |
+:处理,-:未处理
1):各个值均由平均值±标准误差表示(n=10)。
实施例4:制备鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶的混合提取物
除了鱼腥草提取物和插田泡提取物以外,还进一步加入在测试例1中已证实对肥大细胞脱颗粒具有抑制效果的山茱萸、山楂和桑叶而制备混合提取物。以16∶16∶1∶1∶1的重量比使实施例1中的鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶相互混合,由此按下述方式制备混合提取物。将测试例1中所选择的鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶洗涤干净,并切成小于1cm×1cm×1cm的固定尺寸。然后,将350g由160g鱼腥草、160g插田泡、10g山茱萸、10g山楂和10g桑叶组成的草药混合物放在3升纯净水中,并在加压下于100℃提取4小时。
测试例6:测定鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶的混合提取物抑制肥大细胞释放组胺的效果
测定在实施例4中制备的鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶的混合提取物是否具有抑制肥大细胞释放组胺的效果。组胺释放抑制效果的测定以与测试例3相同的方式进行。在此情况下,对肥大细胞进行处理的混合提取物的最终处理浓度分别为0.01mg/ml、0.025mg/ml、0.05mg/ml、0.1mg/ml、1.0mg/ml和10.0mg/ml。
在测试结果中,在加有盐水的肥大细胞悬浮液的情况下,组胺释放为3.1%。在仅用鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶的混合提取物处理的肥大细胞的情况下,组胺释放类似于仅用盐水处理的肥大细胞的情况。另一方面,仅用化合物48/80处理的肥大细胞显示出非常高的组胺释放,为56.7%。此外,在用混合提取物处理然后用化合物48/80处理的肥大细胞的情况下,由化合物48/80诱导的肥大细胞的组胺释放受到抑制(见表6)。
表6:鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶的混合提取物对组胺释放的抑制效果
混合提取物的最终处理浓度 | 化合物48/80的最终处理浓度 | 组胺释放(%) | 组胺释放抑制率(%) |
0 | 0 | 3.1±0.91) | |
0 | 0.5 | 56.7±2.5 | |
0.01 | 0.5 | 37.2±2.8 | 37 |
0.025 | 0.5 | 20.2±1.9 | 68 |
0.05 | 0.5 | 19.7±1.5 | 69 |
0.1 | 0.5 | 17.4±0.5 | 74 |
1 | 0.5 | 15.0±0.9 | 79 |
10 | 0.5 | 11.5±0.3 | 86 |
1):各个值均由平均值±标准误差表示(n=10)。
实施例5:制备含有本发明的草药原料的混合提取物的胶囊
制备含有作为活性成分的鱼腥草和插田泡的混合提取物的胶囊。此外,制备含有作为活性成分的鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶的混合提取物的胶囊。
以下述方式制备包含鱼腥草和插田泡的混合提取物的胶囊。准确称取在实施例1中制备的100mg粉末化的鱼腥草提取物和100mg粉末化的插田泡提取物以及100mg乳糖,并在搅拌器中均匀混合。然后,用胶囊自动填充机以每个胶囊300mg将该混合物填入到硬明胶胶囊(Su-Heung Capsule,Co.,Ltd.,韩国)中。
以下述方式制备包含鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶的混合提取物的胶囊。准确称取在实施例1中制备的80mg粉末化的鱼腥草、80mg粉末化的插田泡提取物、10mg粉末化的山茱萸提取物、10mg粉末化的山楂提取物和10mg粉末化的桑叶提取物以及110mg乳糖,并在搅拌器中均匀混合。然后,用胶囊自动填充机以每个胶囊300mg将该混合物填入到硬明胶胶囊(Su-Heung Capsule,Co.,Ltd.,韩国)中。
测试例7:通过临床试验检验本发明的草药提取物制剂的抗过敏效果
通过临床试验检验在实施例5中制备的草药提取物制剂对过敏性疾病患者的抗过敏效果。
7-1)临床试验组的分类
对20名10~70岁患有特应性皮炎的男性患者和女性患者进行临床试验。首先,将所述20名患者分成4组:一组施用本发明制剂1(含有鱼腥草和插田泡的混合提取物,见表7),一组施用本发明制剂2(含有鱼腥草、插田泡、山茱萸、山楂和桑叶的混合提取物,见表7),一组施用常规治疗剂(见表8),一组施用本发明制剂1(含有鱼腥草和插田泡混合提取物)和常规治疗剂(见表9),每组由5名患者组成。
作为常规治疗剂,使用以下类固醇药:例如艾维顿(Schering Ltd.)、乐蒂克果酸(lacticare,Stifel Laboratories)、去氧米松凝胶(Handokpharmaceuticals Co.Ltd.)、oradexion(Choong Wae Pharma Corporation)、dexcosil(Yungjin Paramaceutical Co.Ltd.);抗组胺药,例如保乐康(plokon,Yungjin Parama.Co.Ltd.)、玻丽玛朗(primalan,Bukwang pharmaceutical Co.Ltd.)、艾来锭(allegra,Handok pharmaceuticals Co.Ltd.)、噻喘酮(zaditen,Novartis pharmaceuticals)、依美斯汀(remicut,Kolon pharmaceuticals,Inc.);以及作为辅助治疗剂用以抗特应性皮炎的月见草油制剂(epogam,Handokpharmaceuticals Co.Ltd.)。
表7:施用本发明制剂的组
年龄/性别 | 剂量/施用方式 | 施用时间 | |
病例1 | 8岁/男 | 2胶囊/天(600mg/天),口服 | 超过2周 |
病例2 | 12岁/女 | 2胶囊/天(600mg/天),口服 | 超过2周 |
病例3 | 22岁/男 | 4胶囊/天(1.2g/天),口服 | 超过2周 |
病例4 | 27岁/女 | 4胶囊/天(1.2g/天),口服 | 超过2周 |
病例5 | 7岁/男 | 2胶囊/天(600mg/天),口服 | 超过2周 |
表8:施用常规治疗剂的组
年龄/性别 | 治疗剂的种类和剂量 | 施用方式 | |
病例1 | 8岁/男 | 2.5mg oradexion和1.5mg保乐康,1次/周,2次/周(严重情况) | 肌肉注射 |
乐蒂克果酸软膏,2~3次/周 | 透皮 | ||
玻丽玛朗糖浆,2次/大,每次12.5ml | 口服 | ||
病例2 | 10岁/女 | 2.5mg oradexion和1.5mg保乐康,1次/周,2次/周(严重情况) | 肌肉注射 |
艾维顿软膏,2次/天,严重部位 | 透皮 | ||
乐蒂克果酸软膏,2~3次/天,非严重部位 | 透皮 | ||
月见草油制剂,2次/天,每次320mg | 口服 | ||
艾来锭,2次/天,每次60mg | 口服 | ||
病例3 | 35岁/男 | 5mg oradexion和3mg保乐康,1次/周,3次/周(严重情况) | 肌肉注射 |
艾维顿软膏,2次/天 | 透皮 | ||
乐蒂克果酸软膏,2~3次/天 | 透皮 | ||
月见草油制剂,2次/天,每次320mg | 口服 | ||
艾来锭,2次/天,每次180mg | 口服 | ||
病例4 | 22岁/女 | 5mg oradexion和3mg保乐康,1次/周,2次/周(严重情况) | 肌肉注射 |
艾维顿软膏,2次/天(严重部位) | 透皮 | ||
乐蒂克果酸软膏,2~3次/天(全身) | 透皮 | ||
月见草油制剂,2次/天,每次320mg | 口服 | ||
艾来锭,2次/天,每次180mg | 口服 | ||
病例5 | 24岁/女 | 5mg oradexion和3mg保乐康,1次/周,2次/周(严重情况) | 肌肉注射 |
去氧米松凝胶,2次/天(严重部位) | 透皮 | ||
月见草油制剂,2次/天,每次320mg | 口服 | ||
艾来锭,2次/天,每次180mg | 口服 | ||
噻喘酮,2次/天,每次2mg | 口服 |
表9:施用本发明制剂和常规治疗剂的组
年龄/性别 | 剂量/施用方式 | 给药时间 | ||
本发明制剂 | 常规治疗剂 | |||
病例1 | 31个月/女 | 2胶囊/天(600mg/天),口服 | 艾维顿软膏,1次/天(严重部位) | 超过2周 |
Dexcosil软膏,1次/天(脸、眼周围) | ||||
乐蒂克果酸软膏,1~2次/天(非严重部位) | ||||
月见草油制剂,2次/天,160mg/次 | ||||
玻丽玛朗糖浆,2次/天,每次7.5ml | ||||
病例2 | 37岁/男 | 4胶囊/天(1.2g/天),口服 | 3mg保乐康注射剂,1次/周(严重部位)两次/周(严重情况) | 超过2周 |
艾维顿软膏,2次/天(严重部位) | ||||
乐蒂克果酸软膏,2~3次/天(全身) | ||||
艾来锭,1次/天,每次180mg | ||||
依美斯汀,2次/天,每次2mg | ||||
病例3 | 9岁/女 | 2胶囊/天(600mg/天),口服 | 2.5mg oradexion和1.5mg保乐康注射剂,1次/周 | 超过2周 |
乐蒂克果酸软膏,2~3次/天(全身) | ||||
玻丽玛朗糖浆,2次/天,每次12.5ml | ||||
病例4 | 25岁/女 | 4胶囊/天(1.2g/天),口服 | 5mg oradexion和3mg保乐康,1次/周,2次/周(严重情况) | 超过2周 |
去氧米松凝胶,2次/天(病变部位) | ||||
病例5 | 22岁/男 | 4胶囊/天(1.2g/天),口服 | 5mg oradexion和3mg保乐康,1次/周 | 超过2周 |
去氧米松凝胶,2次/天(病变部位) |
7-2)测定过敏性疾病患者血清中的IgE和组胺的水平
在治疗前和治疗后收集测试例7-1)中每个测试组的患者的血液,测定血清中IgE和组胺的水平。IgE水平的测定通过ECLIA(电化学发光免疫测定)进行。在测定中使用了含有生物素化的单克隆IgE特异性抗体和钌标记的单克隆IgE特异性抗体的复合物的分析试剂盒。以与测试例3相同的方式对患者血清的组胺水平进行测定。
在测试结果中,治疗后所有测试组都显示出比治疗前较低的血清IgE水平和组胺水平(见表10和11)。此外,在施用本发明制剂组、施用常规治疗剂组以及施用本发明制剂和常规治疗剂组之间没有明显差异。
表10:过敏性疾病患者的血清的IgE水平(IU/ml)
病例/组 | 施用本发明制剂组 | 施用常规治疗剂组 | 施用本发明制剂和常规治疗剂组 | |||
治疗前 | 治疗后 | 治疗前 | 治疗后 | 治疗前 | 治疗后 | |
1 | 192.6 | 150.2 | 26.5 | 23.1 | 41.1 | 36.1 |
2 | 57.4 | 48.2 | 460.7 | 409.9 | 500 | 487 |
3 | 75.9 | 68.4 | 47.5 | 41.9 | 135.1 | 121.8 |
4 | 42.5 | 40.3 | 32.7 | 29.7 | 28.7 | 25.9 |
5 | 339.6 | 305.4 | 55.7 | 55.0 | 19.3 | 16.7 |
表11:过敏性疾病患者的血清的组胺水平(nM)
病例/组 | 施用本发明制剂组 | 施用常规治疗剂组 | 施用本发明制剂和常规治疗剂组 | |||
治疗前 | 治疗后 | 治疗前 | 治疗后 | 治疗前 | 治疗后 | |
1 | 135±5 | 125±5 | 140±10 | 135±5 | 145±15 | 145±5 |
2 | 140±5 | 135±10 | 165±5 | 140±10 | 140±10 | 140±10 |
3 | 150±15 | 145±10 | 135±10 | 130±10 | 135±5 | 130±10 |
4 | 135±10 | 130±10 | 140±15 | 140±5 | 140±5 | 130±10 |
5 | 155±5 | 145±10 | 125±10 | 120±10 | 130±10 | 125±10 |
7-3)过敏性疾病患者的临床观察
对测试例7-1)中每个测试组的患者的病变进行临床观察。特应性皮炎的特征在于各种病变,这些病变包括带有严重搔痒症的红斑性丘疹和小疱的发生,擦伤所致的渗出性病变的产生,表皮脱落、红斑性丘疹或鳞屑丘疹和斑点的产生,以及重复擦伤和摩擦导致的苔藓样变的发生。通过观察上述特征和症状的增加和减少来确定特应性皮炎的好转程度。
在测试结果中,施用发明制剂1或2的特应性皮炎患者显示出包括手掌裂缝的苔藓样病变有了好转(见图3的A和B),并显示出膝后弯凹处的圆形红斑性斑疹有了好转(见图3的C和D)。此外,施用常规治疗剂的测试组显示出前肘凹处的圆形红斑性斑点和脸部伴随有鳞屑的湿疹性病变有了好转(见图4的A和B)。另外,施用常规治疗剂和本发明制剂的测试组显示出脸部伴随有鳞屑的湿疹性病变有了好转。
由此可见,对于过敏性疾病的治疗,含有本发明的草药提取物的制剂实质上具有与传统的类固醇药相同的效果。
实施例6:制备含有本发明的草药提取物的饮料组合物
饮料组合物通过混合以下物质而制备:20%鱼腥草提取物,20%的插田泡提取物,0.15%维生素A,0.2%维生素D,0.15%维生素B2,2.0%维生素C,3.0%牛磺酸,2.5%聚葡萄糖,余量为纯净水。
于2004年2月5日提出的韩国专利申请号2004-0007404全部公开内容(包括它的说明书、权利要求书、附图和摘要)全部引入本文作为参考。
工业实用性
由前述可见,本发明的鱼腥草和插田泡的混合提取物以及包含该混合提取物的组合物通过抑制肥大细胞脱颗粒和释放组胺而具有预防和治疗过敏性疾病的效果。此外,它们没有显示出细胞毒性,因而可以在体内安全使用。
Claims (13)
1.一种对肥大细胞脱颗粒和释放组胺具有抑制活性的草药提取物,该草药提取物通过用水或有机溶剂对鱼腥草和插田泡进行提取而获得。
2.如权利要求1所述的草药提取物,其中所述鱼腥草和插田泡以1∶4至4∶1的重量比混合。
3.如权利要求1或2所述的草药提取物,该草药提取物进一步包含选自山茱萸、山楂和桑叶中的至少一种。
4.如权利要求1所述的草药提取物,该草药提取物用作药物。
5.权利要求1所述的草药提取物在制备抗过敏性疾病的治疗剂中的用途。
6.权利要求1所述的草药提取物在制备抑制肥大细胞脱颗粒和释放组胺的抑制剂中的用途。
7.一种用于预防或治疗过敏性疾病的药物组合物,该药物组合物包含权利要求1所述的草药提取物作为活性成分。
8.一种用于预防或改善过敏性疾病的食品组合物,该食品组合物包含权利要求1所述的草药提取物作为活性成分。
9.如权利要求7或8所述的组合物,该组合物进一步包含选自山茱萸提取物、山楂提取物和桑叶提取物中的至少一种。
10.如权利要求7或8所述的组合物,其中所述过敏性疾病选自由过敏性哮喘、过敏性鼻炎、过敏性耳炎、过敏性休克和过敏性皮肤病组成的组。
11.如权利要求10所述的组合物,其中所述过敏性皮肤病选自由特应性皮炎、牛皮癣、接触过敏性皮炎和荨麻疹组成的组。
12.一种预防或治疗过敏性疾病的方法,该方法包括对所需要的患者施用有效量的权利要求1所述的草药提取物的步骤。
13.一种抑制肥大细胞脱颗粒和释放组胺的方法,该方法包括对所需要的患者施用有效量的权利要求1所述的草药提取物的步骤。
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Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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KR101226758B1 (ko) * | 2010-09-28 | 2013-01-25 | 한국 한의학 연구원 | 생약 추출물 또는 이의 유산균 발효물을 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물 |
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Family Cites Families (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0368515A (ja) * | 1989-08-08 | 1991-03-25 | Tsumura & Co | 抗アレルギー剤 |
JP3257710B2 (ja) * | 1992-12-21 | 2002-02-18 | 株式会社三香堂 | 肥満細胞からのヒスタミン遊離抑制剤 |
JPH0717859A (ja) * | 1993-06-30 | 1995-01-20 | Tsumura & Co | アラキドン酸代謝異常疾患治療剤 |
JPH0797311A (ja) * | 1993-09-29 | 1995-04-11 | Ken Suzawa | 化粧水 |
JPH0873342A (ja) * | 1994-09-05 | 1996-03-19 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | 覆盆子抽出物含有皮膚外用剤または浴用剤 |
ES2179892T3 (es) * | 1994-11-05 | 2003-02-01 | Schaper & Brummer Gmbh & Co Kg | Extracto de crataegus y su utilizacion. |
JPH09124498A (ja) * | 1995-02-10 | 1997-05-13 | Suntory Ltd | Godタイプのエラジタンニンを有効成分とする抗アレルギー作用剤並びにこれを配合した食品及び医薬品 |
JPH09143090A (ja) * | 1995-11-22 | 1997-06-03 | Kyodo Nyugyo Kk | 抗アレルギー性物質 |
JPH1053532A (ja) * | 1996-08-08 | 1998-02-24 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | 植物抽出物含有抗アレルギー剤 |
JPH10120583A (ja) * | 1996-10-21 | 1998-05-12 | Noevir Co Ltd | 抗アレルギー剤、ケミカルメディエーター遊離抑制剤及びこれを含有する抗アレルギー性化粧料,医薬品並びに食品 |
JPH11199500A (ja) * | 1998-01-07 | 1999-07-27 | Nissin Food Prod Co Ltd | アトピー性皮膚炎治療剤 |
JP2000290189A (ja) * | 1999-04-09 | 2000-10-17 | Janifu Tekku:Kk | 抗アレルギー剤 |
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KR20030092519A (ko) * | 2002-05-30 | 2003-12-06 | 주식회사 리젠 바이오텍 | 알레르기성 피부질환의 개선 또는 예방용 조성물 |
KR100504767B1 (ko) * | 2002-10-02 | 2005-07-29 | 김경렬 | 알레르기성 질환 증상의 개선 기능을 갖는 생약조성물을함유하는 기능성 식품 |
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