CN1864717A - 挂金灯甾类化合物的提取方法及其药物组合物 - Google Patents

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CN1864717A CN 200610010153 CN200610010153A CN1864717A CN 1864717 A CN1864717 A CN 1864717A CN 200610010153 CN200610010153 CN 200610010153 CN 200610010153 A CN200610010153 A CN 200610010153A CN 1864717 A CN1864717 A CN 1864717A
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杨宝峰
初文峰
方志伟
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Abstract

挂金灯甾类化合物的提取方法及其药物组合物,它涉及一种药物成分的提取方法及其药物组合物。挂金灯甾类化合物的提取方法:(一)用醇或水提取挂金灯果实、根茎和/或宿萼;(二)提取液纯化;(三)进行洗脱,将洗脱液浓缩成浸膏或干粉;(四)浸膏或干粉再用醇溶解,过滤,滤液经干燥即得到挂金灯甾类化合物。挂金灯甾类化合物用于制备治疗心脑血管疾病的药物组合物。本发明提取挂金灯甾类化合物的方法简单,挂金灯甾类化合物纯度高达50%以上。本发明中含挂金灯甾类化合物的药物组合物可用于治疗心律失常或心肌缺血,有效率分别为85%、90%和85%。

Description

挂金灯甾类化合物的提取方法及其药物组合物
技术领域
本发明涉及一种药物成分的提取方法及其药物组合物。
背景技术
目前市场上治疗心脑血管疾病的药物多为西药,容易产生耐药性和较强的毒副作用,而且在治疗心律失常的同时西药本身又导致心律失常的产生。中药在治疗心脑血管疾病方面近几年取得了可喜的进步,但多以中医成方为研究对象,新中药方剂的研究很少。挂金灯甾类化合物来源于挂金灯(锦灯笼),中医认为挂金灯性味微苦,归肺经,具有清热解毒,利咽化痰,利尿的功效;用于治骨蒸劳热,痰热咳嗽,咽喉肿痛,喑哑,黄疸,水肿,小便不利,天泡湿疮。所以,目前尚没有用挂金灯甾类化合物治疗心脑血管疾病的报道。
发明内容
本发明的发明人在挂金灯的研究中发现挂金灯甾类化合物对心律失常、心肌缺血、心脑血管硬化、心脑血管栓塞和高血压等心脑血管疾病有预防和治疗的作用。挂金灯甾类化合物按以下方法提取:(一)将挂金灯果实、根茎和/或宿萼清洗、粉碎后用醇或水提取;(二)过滤收集的提取液,再依次通过甲壳素和大孔吸附树脂柱进行吸附纯化;(三)用浓度为50%~90%的醇对大孔吸附树脂柱进行洗脱,收集洗脱液,在减压或常压条件下浓缩成浸膏或干粉;(四)浸膏或干粉再用浓度为60%~90%的醇溶解,过滤,滤液经减压干燥即得到挂金灯甾类化合物。含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由65~75%的挂金灯甾类化合物、15~25%的苦参碱和5~15%的大黄制成。含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由45~55%的挂金灯甾类化合物、25~35%的苦参碱和15~25%的小檗碱制成。含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由55~65%的挂金灯甾类化合物、30~40%的苦参碱和1~10%的麝香制成。本发明提取挂金灯甾类化合物的方法简单,挂金灯甾类化合物纯度高达50%以上。本发明中含挂金灯甾类化合物的药物组合物可用于治疗心律失常或心肌缺血,有效率分别为85%、90%和85%。
具体实施方式
具体实施方式一:本实施方式挂金灯甾类化合物按以下方法提取:(一)将挂金灯果实、根茎和/或宿萼清洗、粉碎后用醇或水提取;(二)过滤收集的提取液,再依次通过甲壳素和大孔吸附树脂柱进行吸附纯化;(三)用浓度为50%~90%的醇对大孔吸附树脂柱进行洗脱,收集洗脱液,在减压或常压条件下浓缩成浸膏或干粉;(四)浸膏或干粉再用浓度为60%~90%的醇溶解,过滤,滤液经减压干燥即得到挂金灯甾类化合物。
用本实施方式提取的挂金灯甾类化合物进行动物试验(本试验使用的挂金灯甾类化合物的纯度相同纯度为70%;试验中挂金灯甾类化合物都溶解于浓度为5%的葡萄糖后再注射,注射剂量均为10mL):
(1)缺氧存活试验:本实验分4组进行,每组10只、体重为18~22g的昆明种小鼠,第1组小鼠按体重每千克静脉注射10mL生理盐水;第2组小鼠按体重每千克静脉注射5mg挂金灯甾类化合物;第3组小鼠按体重每千克静脉注射15mg挂金灯甾类化合物;第4组小鼠按体重每千克静脉注射75mg挂金灯甾类化合物;注射30min后将小鼠放入含3g钠石灰的500mL磨口瓶里,瓶口途凡士林后改瓶盖,记录小鼠死亡时间。各组小鼠死亡时间如表1所示。
表1
  组别   存活时间(min)
  1   47.44±11.69
  2   57.88±13.21
  3   64.97±15.06
  4   73.99±15.21
第2、3和4组与第1组相比具有显著差异P<0.05。试验结果说明挂金灯甾类化合物可以延长完全密闭小鼠存活时间,并增加抗缺氧能力。
(2)挂金灯甾类化合物对乌头碱诱发的心律失常的影响:本实验分4组进行,每组10只、体重为200~230g的健康雌性Wistar大鼠,第1组雌性Wistar大鼠按体重每千克静脉注射10mL生理盐水;第2组雌性Wistar大鼠按体重每千克静脉注射5mg挂金灯甾类化合物;第3组雌性Wistar大鼠按体重每千克静脉注射15mg挂金灯甾类化合物;第4组雌性Wistar大鼠按体重每千克静脉注射75mg挂金灯甾类化合物;30min后按体重每千克腹腔注射5mg、20%的乌拉坦进行麻醉;然后将大鼠仰位固定并与BL-420生物机能实验***相连扫描心电,待大鼠心电显示稳定后在第1组大鼠舌下静脉注射生理盐水,在第2、3和4组大鼠按体重每千克舌下静脉注射1mL、0.04%的乌头碱,注射5s内完成;记录室性早搏(VP)的发生时间,并统计室性心动过速(VT)、室颤(VF)的发生率和窦性节律恢复率。各组大鼠VP发生时间、VT发生率、VF发生率和窦性节律恢复率如表2所示。
表2
  组别   VT发生率   VF发生率   窦性节律恢复率   VP发生时间(min)
  1   8/10   2/10   6/10   1.43±0.52
  2   4/10   1/10   8/10   2.03±0.87
  3   2/10   1/10   9/10   3.23±0.97
  4   1/10   0   10/10   4.26±1.19
第3和4组与第1组相比具有显著差异P<0.05。试验结果说明挂金灯甾类化合物具有抗乌头碱诱发的心律失常作用。
(3)挂金灯甾类化合物对氯仿诱发的室颤的影响:本实验分4组进行,每组10只、体重为18~22g的昆明种小鼠,第1组小鼠按体重每千克静脉注射10mL生理盐水;第2组小鼠按体重每千克静脉注射5mg挂金灯甾类化合物;第3组小鼠按体重每千克静脉注射15mg挂金灯甾类化合物;第4组小鼠按体重每千克静脉注射75mg挂金灯甾类化合物;注射2~3min内将小鼠逐个放入含有氯仿、倒置的烧杯中(用5mL氯仿浸湿棉球后放入500mL的烧杯,每次换鼠向棉球补加0.5mL氯仿),小鼠停止呼吸后立即取出,与BL-420生物机能实验***相连扫描心电,记录室颤发生率。各组小鼠室颤发生率如表3所示。
表3
  组别   试验小鼠(只)   发生室颤小鼠(只)   室颤发生率(%)
  1   10   9   90
  2   10   3   30
  3   10   3   30
  4   10   1   10
第2、3和4组与第1组相比具有显著差异P<0.05。试验结果说明挂金灯甾类化合物具有抗氯仿诱发的心律失常作用。
(4)挂金灯甾类化合物对垂体后叶素诱发的心肌缺血的保护作用:本实验分4组进行,每组14只、体重为200~230g的健康Wistar大鼠,第1组健康Wistar大鼠按体重每千克静脉注射10mL生理盐水;第2组健康、对垂体后叶素敏感(按体重每千克舌下静脉注射垂体后叶素1U后心电图T波明显抬高,ST段抬高超过0.1mV)的Wistar大鼠按体重每千克静脉注射10mL生理盐水;第3组健康、对垂体后叶素敏感的Wistar大鼠按体重每千克静脉注射5mg挂金灯甾类化合物;第4组健康、对垂体后叶素敏感的Wistar大鼠按体重每千克静脉注射15mg挂金灯甾类化合物;第5组健康、对垂体后叶素敏感的Wistar大鼠按体重每千克静脉注射75mg挂金灯甾类化合物;1h以后按体重每千克腹腔注射5mg、20%的乌拉坦进行麻醉;然后将大鼠仰位固定并与BL-420生物机能实验***相连扫描心电,在第1组大鼠舌下静脉注射生理盐水,在第2、3、4和5组大鼠按体重每千克舌下静脉注射1U垂体后叶素。垂体后叶素注射60min后腹主动脉取血,离心分离血清,再测定血清中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。各组大鼠LDH、SOD和MDA的含量如表4所示。
表4
  组别   LDH(U/L)   SOD(nmol/mL)   MDA(U/mL)
  1   8803.33±1494.82bcde   2.80±0.79b   95.81±9.85bc
  2   10923.42±1258.82acde   4.91±1.66acde   76.41±8.30ade
  3   9203.33±1694.52abe   3.25±0.84b   80.93±8.65abe
  4   9434.36±2111.03abe   3.12±1.46b   88.37±10.63ab
  5   9003.52±1584.37bcd   2.92±0.80b   91.81±9.85bc
a表示与第1组相比具有显著差异P<0.05;b表示与第2组比具有显著差异P<0.05;c表示与第3组相比具有显著差异P<0.05;d表示与第4组相比具有显著差异P<0.05;e表示与第5组相比具有显著差异P<0.05。试验结果说明挂金灯甾类化合物具有抗心肌缺血作用。
具体实施方式二:本实施方式与具体实施方式一的不同点是:醇为乙醇、丙醇或丁醇。其它与实施方式一相同。
具体实施方式三:本实施方式与具体实施方式一的不同点是:步骤(一)中醇或水的重量是挂金灯果实、根茎和/或宿萼总重量的4~10倍。其它步骤与
实施方式一相同。
具体实施方式四:本实施方式与具体实施方式一的不同点是:步骤(三)中用大孔吸附树脂柱体积4~5倍、温度为50~70℃的醇回流洗脱1.8~2.2h。其它步骤与实施方式一相同。
具体实施方式五:本实施方式与具体实施方式一的不同点是:步骤(三)中减压或常压浓缩温度始终低于70℃;减压浓缩压力小于10-3Pa。其它步骤与
实施方式一相同。
具体实施方式六:本实施方式与具体实施方式一的不同点是:步骤(四)中减压干燥压力小于10-3Pa,温度低于70℃。其它步骤与实施方式一相同。
具体实施方式七:本实施方式与具体实施方式一、三或四的不同点是:醇是体积浓度为70%的乙醇。其它与实施方式一、三或四相同。
具体实施方式八:本实施方式与具体实施方式一的不同点是:步骤(一)中用重量是挂金灯果实、根茎和/或宿萼总重量的5~9倍的水加热煮沸挂金灯果实、根茎和/或宿萼3次,每次35~45min。其它步骤与实施方式一相同。
具体实施方式九:本实施方式与具体实施方式一的不同点是:步骤(二)中大孔吸附树脂柱为DM130大孔吸附树脂柱。其它步骤与实施方式一相同。
具体实施方式十:本实施方式挂金灯甾类化合物按以下方法提取:(一)将挂金灯果实、根茎和/或宿萼清洗、粉碎后用醇或水提取;(二)过滤收集的提取液,再进行甲壳素吸附;(三)收集吸附液,在减压或常压条件下浓缩成浸膏或干粉;(四)浸膏或干粉再用浓度为60%~90%的醇溶解,过滤,滤液经减压干燥即得到挂金灯甾类化合物。
具体实施方式十一:本实施方式含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由65~75%的挂金灯甾类化合物、15~25%的苦参碱和5~15%的大黄制成。
本实施方式制成的药物组合物用于治疗心律失常。表5是本实施方式药物组合物治疗心律失常的临床药效学报告。
用法用量:每日服三次,每次按病人体重每千克服用本实施方式药物组合物45mg。
对30例年龄55~60岁的男性心律失常患者进行10~20天治疗,患者病情明显好转的占55%(室性早搏消失、室性心动过速消失、窦性节律恢复),患者病情轻度改善的占30%(室性早搏次数减少、室性心动过速次数减少),治疗无效患者的占15%。本实施方式药物治疗心律失常的效果如表5所示,其中病情诊断采信正规医院出具心电图。
表5
  序号   年龄   疾病或症状   治疗时间   治疗效果
  1   56   心律失常   12   明显好转
  2   56   心律失常   17   明显好转
  3   60   心律失常   12   明显好转
  4   55   心律失常   19   明显好转
  5   58   心律失常   12   明显好转
  6   58   心律失常   15   明显好转
  7   57   心律失常   18   明显好转
  8   59   心律失常   20   明显好转
  9   60   心律失常   16   明显好转
  10   58   心律失常   17   明显好转
  11   56   心律失常   17   明显好转
  12   58   心律失常   11   明显好转
  13   57   心律失常   13   明显好转
  14   55   心律失常   13   明显好转
  15   60   心律失常   10   明显好转
  16   57   心律失常   19   明显好转
  17   56   心律失常   20   明显好转
  18   57   心律失常   14   轻度改善
  19   58   心律失常   14   轻度改善
  20   58   心律失常   13   轻度改善
  21   57   心律失常   15   轻度改善
  22   56   心律失常   14   轻度改善
  23   60   心律失常   17   轻度改善
  24   57   心律失常   18   轻度改善
  25   57   心律失常   17   轻度改善
  26   59   心律失常   15   轻度改善
  27   57   心律失常   15   无效
  28   55   心律失常   14   无效
  29   59   心律失常   14   无效
  30   57   心律失常   13   无效
具体实施方式十二:本实施方式与具体实施方式十一的不同点是:含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由66~74%的挂金灯甾类化合物、16~24%的苦参碱和6~14%的大黄制成。
具体实施方式十三:本实施方式与具体实施方式十一的不同点是:含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由70%的挂金灯甾类化合物、20%的苦参碱和10%的大黄制成。
具体实施方式十四:本实施方式含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由45~55%的挂金灯甾类化合物、25~35%的苦参碱和15~25%的小檗碱制成。
本实施方式制成的药物组合物用于治疗心律失常。表6是本实施方式药物组合物治疗心律失常的临床药效学报告。
用法用量:每日服三次,每次按病人体重每千克服用本实施方式药物组合物45mg。
对30例年龄55~60岁的男性心律失常患者进行10~20天治疗,患者病情明显好转的占60%(室性早搏消失、室性心动过速消失、窦性节律恢复),患者病情轻度改善的占30%(室性早搏次数减少、室性心动过速次数减少),治疗无效患者的占10%。本实施方式药物治疗心律失常的效果如表6所示,其中病情诊断采信正规医院出具心电图。
表6
  序号   年龄   疾病或症状   治疗时间   治疗效果
  1   57   心律失常   15   明显好转
  2   59   心律失常   14   明显好转
  3   57   心律失常   17   明显好转
  4   55   心律失常   18   明显好转
  5   59   心律失常   17   明显好转
  6   57   心律失常   15   明显好转
  7   57   心律失常   15   明显好转
  8   59   心律失常   14   明显好转
  9   60   心律失常   14   明显好转
  10   58   心律失常   13   明显好转
  11   56   心律失常   17   明显好转
  12   58   心律失常   11   明显好转
  13   57   心律失常   13   明显好转
  14   55   心律失常   13   明显好转
  15   58   心律失常   10   明显好转
  16   58   心律失常   19   明显好转
  17   57   心律失常   20   明显好转
  18   59   心律失常   14   明显好转
  19   60   心律失常   13   轻度改善
  20   58   心律失常   13   轻度改善
  21   60   心律失常   15   轻度改善
  22   58   心律失常   14   轻度改善
  23   56   心律失常   11   轻度改善
  24   58   心律失常   13   轻度改善
  25   57   心律失常   13   轻度改善
  26   55   心律失常   10   轻度改善
  27   60   心律失常   19   轻度改善
  28   57   心律失常   20   无效
  29   56   心律失常   14   无效
  30   60   心律失常   11   无效
具体实施方式十五:本实施方式与具体实施方式十四的不同点是:含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由46~54%的挂金灯甾类化合物、26~34%的苦参碱和16~24%的小檗碱制成。
具体实施方式十六:本实施方式与具体实施方式十四的不同点是:含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由50%的挂金灯甾类化合物、30%的苦参碱和20%的小檗碱制成。
具体实施方式十七:本实施方式含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由55~65%的挂金灯甾类化合物、30~40%的苦参碱和1~10%的麝香制成。
本实施方式制成的药物组合物用于治疗心肌缺血。表7是本实施方式药物组合物治疗心肌缺血的临床药效学报告。
用法用量:每日服三次,每次按病人体重每千克服用本实施方式药物组合物45mg。
对30例年龄55~60岁的男性心肌缺血患者进行10~20天治疗,患者病情明显好转的占75%(心电T波恢复、ST段恢复),患者病情轻度改善的占10%(心电T波高度降低、ST段减小),治疗无效患者的占15%。本实施方式药物治疗心肌缺血的效果如表7所示,其中病情诊断采信正规医院出具心电图。
表7
  序号   年龄   疾病或症状   治疗时间   治疗效果
  1   59   心肌缺血   17   明显好转
  2   57   心肌缺血   14   明显好转
  3   57   心肌缺血   17   明显好转
  4   59   心肌缺血   10   明显好转
  5   60   心肌缺血   19   明显好转
  6   58   心肌缺血   20   明显好转
  7   56   心肌缺血   14   明显好转
  8   58   心肌缺血   13   明显好转
  9   57   心肌缺血   13   明显好转
  10   55   心肌缺血   15   明显好转
  11   58   心肌缺血   14   明显好转
  12   58   心肌缺血   11   明显好转
  13   57   心肌缺血   13   明显好转
  14   55   心肌缺血   13   明显好转
  15   58   心肌缺血   10   明显好转
  16   58   心肌缺血   19   明显好转
  17   57   心肌缺血   20   明显好转
  18   59   心肌缺血   18   明显好转
  19   60   心肌缺血   13   明显好转
  20   58   心肌缺血   13   明显好转
  21   60   心肌缺血   15   明显好转
  22   58   心肌缺血   14   明显好转
  23   56   心肌缺血   11   明显好转
  24   60   心肌缺血   13   轻度改善
  25   58   心肌缺血   13   轻度改善
  26   56   心肌缺血   10   轻度改善
  27   58   心肌缺血   19   无效
  28   57   心肌缺血   20   无效
  29   55   心肌缺血   15   无效
  30   60   心肌缺血   17   无效
具体实施方式十八:本实施方式与具体实施方式十七的不同点是:含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由56~64%的挂金灯甾类化合物、31~39%的苦参碱和2~9%的麝香制成。
具体实施方式十九:本实施方式与具体实施方式十七的不同点是:含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由60%的挂金灯甾类化合物、35%的苦参碱和5%的麝香制成。

Claims (10)

1、挂金灯甾类化合物的提取方法,其特征在于挂金灯甾类化合物按以下方法提取:(一)将挂金灯果实、根茎和/或宿萼清洗、粉碎后用醇或水提取;(二)过滤收集的提取液,再依次通过甲壳素和大孔吸附树脂柱进行吸附纯化;(三)用浓度为50%~90%的醇对大孔吸附树脂柱进行洗脱,收集洗脱液,在减压或常压条件下浓缩成浸膏或干粉;(四)浸膏或干粉再用浓度为60%~90%的醇溶解,过滤,滤液经减压干燥即得到挂金灯甾类化合物。
2、根据权利要求1所述的挂金灯甾类化合物的提取方法,其特征在于醇为乙醇、丙醇或丁醇。
3、根据权利要求1所述的挂金灯甾类化合物的提取方法,其特征在于步骤(一)中醇或水的重量是挂金灯果实、根茎和/或宿萼总重量的4~10倍。
4、根据权利要求1所述的挂金灯甾类化合物的提取方法,其特征在于步骤(三)中用大孔吸附树脂柱体积4~5倍、温度为50~70℃的醇回流洗脱1.8~2.2h。
5、含挂金灯甾类化合物的药物组合物,其特征在于含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由65~75%的挂金灯甾类化合物、15~25%的苦参碱和5~15%的大黄制成。
6、根据权利要求5所述的含挂金灯甾类化合物的药物组合物,其特征在于含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由66~74%的挂金灯甾类化合物、16~24%的苦参碱和6~14%的大黄制成。
7、含挂金灯甾类化合物的药物组合物,其特征在于含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由45~55%的挂金灯甾类化合物、25~35%的苦参碱和15~25%的小檗碱制成。
8、根据权利要求7所述的含挂金灯甾类化合物的药物组合物,其特征在于含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由46~54%的挂金灯甾类化合物、26~34%的苦参碱和16~24%的小檗碱制成。
9、含挂金灯甾类化合物的药物组合物,其特征在于含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由55~65%的挂金灯甾类化合物、30~40%的苦参碱和1~10%的麝香制成。
10、根据权利要求9所述的含挂金灯甾类化合物的药物组合物,其特征在于含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由56~64%的挂金灯甾类化合物、31~39%的苦参碱和2~9%的麝香制成。
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