CN1846692A - 多烯紫杉醇长循环脂质体剂型及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种多烯紫杉醇长循环脂质体，它以磷脂，胆固醇等辅料为膜材，用长循环辅料进行表面修饰，亦可加入电荷调节剂或表面活性剂，制备成多烯紫杉醇的长循环脂质体，分散相的平均粒径为≤600nm。脂质与药物的摩尔比为1∶1－20∶1，长循环辅料与普通磷脂的摩尔比为1∶5－1∶50，制剂中多烯紫杉醇的最终浓度为1－10mg/ml。本发明采用薄膜分散法或有机溶剂注入法制备脂质体后采用超声，高压均质或挤出的方法可使制备的脂质体粒径较小且分布较均匀。显著提高了脂质体在体内的循环时间，使药物更有效地靶向于肿瘤部位，可以更好地发挥药效，降低毒性。

Description

多烯紫杉醇长循环脂质体剂型及其制备方法

技术领域：

本发明涉及医药技术领域，涉及药品给药领域的靶向给药制剂，更具体是指一种半合成紫杉烷类抗癌药—多烯紫杉醇与适当辅料制成的长循环脂质体，多烯紫杉醇通过制备成长循环脂质体而达到肿瘤靶向的作用。本发明还涉及该长循环脂质体的制备方法。

背景技术：

脂质体是靶向给药***的一种新剂型，这种***是目前药剂学最新、最有前途的给药***。脂质体作为这个***的一员一直是药剂学研究的热点，它可以将药物选择性地运送到肿瘤部位，发挥治疗作用，同时又不影响正常细胞、组织或器官的功能，从而达到提高疗效、减少毒副作用的目的。

普通脂质体进入体内后很快被体内网状内皮***吞噬，而主要靶向在肝、脾、骨髓等网状内皮***器官中，对其他部位的靶向性较差，而且其在体内易受蛋白、酶等的作用而发生渗漏，影响疗效并使毒性增大。为了解决这个问题，近年来抗癌药长循环脂质体制剂的开发成为国际、国内研究的热点，因为该制剂具有高效、长效、靶向、低毒的特点，对提高抗癌药的疗效、减轻毒性具有重要的意义，极大地提高了患者的生活质量。长循环脂质体相对普通脂质体来说，用一定的材料对其表面进行了修饰，增加了脂质体的亲水性和空间位阻，可以避免被体内网状内皮***吞噬，并且在体内不易渗漏，具有更长的体内循环时间，更高的血药浓度，使药物有效的富集在肿瘤部位，因此可以更好的发挥疗效，减轻毒性。

多烯紫杉醇(进口品的商品名为泰索帝)是由欧洲浆果紫杉的针叶中提取的无活性化合物，该产品由法国安万特公司开发的一个半合成紫杉醇衍生物，是微管解聚抑制剂，其作用于微管/微管蛋白***，通过促进微管双聚体装配成微管，且通过防止去多聚化过程而使微管稳定，阻滞细胞于G2和M期，从而抑制癌细胞的有丝***和增殖。多烯紫杉醇对晚期乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、胰腺癌、肝癌、头颈部肿瘤等有效。

多烯紫杉醇难溶于水，即使配制成注射液，在临床应用中的毒副作用也较大，容易引起较多的并发症，如过敏反应、骨髓抑制、神经毒性、心血管毒性、脱发等等，同时药物的体内生物利用度较低，且需长期使用。目前对其结构改造以减少不良反应的尝试尚无大的进展。

目前多烯紫杉醇主要是以聚氧乙烯氢化蓖麻油和乙醇等配制而成注射液，注射后对人体有毒副作用，特别是在使用多烯紫杉醇注射液前，必须先服用抗过敏药物或注射抗过敏药物来帮助缓解由于多烯紫杉醇注射液的使用而产生的严重过敏等毒副作用，常常给病人带来痛苦，直接影响了该药的使用。

中国专利(公开号：CN 1660073A)一种多烯紫杉醇纳米粒及其制备方法。用生物可降解性材料制备的纳米粒靶向性虽然较普通多烯紫杉醇注射液好，但并不是长效靶向制剂。

中国专利(公开号：CN 1709236A)一种含有多西他赛的脂肪乳剂及其制备方法。该方法制备的脂肪乳剂载药量较小，最大1.0mg/ml，并且在体内不具有长循环的特性，影响疗效的发挥。

以上两个专利在充分发挥多烯紫杉醇的药效、降低毒性方面还存在一定的不足。

发明内容：

本发明的目的在于提供多烯紫杉醇的长循环脂质体注射剂和长循环脂质体的冷冻干燥制剂，并提供制备方法。本发明制剂可用葡萄糖注射液进行分散，用于静脉给药。

本发明的特点是将多烯紫杉醇制备成脂质体并用PEG修饰的磷脂或其他脂质材料来修饰脂质体，

本发明中的多烯紫杉醇长循环脂质体是用磷脂，胆固醇及长循环脂质材料将多烯紫杉醇载入脂质体，分散相的平均粒径≤500nm。本发明制备脂质体所用的磷脂可以是大豆磷脂，蛋黄卵磷脂，氢化大豆磷脂，合成磷脂或其任何组合形式，长循环材料可以用PEG修饰的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)或其他材料。脂质材料与药物的重量比为1∶1-20∶1，长循环辅料与普通磷脂的摩尔比为1∶5-1∶30，制剂中多烯紫杉醇的最终浓度为1-10mg/ml。膜材中可加入一定量的电荷调节剂或表面活性剂以提高脂质体的稳定性。本发明制备的多烯紫杉醇脂质体包封率大于80％。制备方法为用薄膜分散法，有机溶剂注入法制备脂质体，其后可进行超声，挤出或高压均质。制备的多烯紫杉醇长循环脂质体可直接以液体形式保存或进行冷冻干燥后制成多烯紫杉醇长循环脂质体冻干粉针。冻干保护剂可为蔗糖，海藻糖，甘露醇，氯化钠，葡萄糖，乳糖，山梨醇，右旋糖苷，甘油，甘氨酸、赖氨酸或其任何组合形式。本发明制备多烯紫杉醇长循环脂质体，其分散介质可以是水、磷酸盐缓冲液、TriS缓冲液、碳酸盐缓冲液、5％葡萄糖水溶液等。

本发明的优点是：显著提高了脂质体在体内的循环时间，使药物更有效地靶向于肿瘤部位，可以更好地发挥药效，降低毒性；本发明采用薄膜分散法或有机溶剂注入法制备脂质体后采用超声，高压均质或挤出的方法可使制备的脂质体粒径较小且分布较均匀。

具体实施方式：

本发明的具体实施方式，由以下的实施实例说明，但本发明的保护范围不局限于此。

实施例1

将10mg多烯紫杉醇，150mg大豆磷脂，15mg胆固醇，20mg聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)、0.68mg维生素E超声溶解于10ml无水乙醇中，得溶液A。

将A于50℃水浴中旋转蒸发成膜，得膜B。

将磷酸盐缓冲液(pH7.4)5ml与膜B充分混合水化30分钟，超声震荡5分钟，过0.22μm微孔滤膜，充氮，灌封既得。

实施例2

将100mg多烯紫杉醇，1200mg大豆磷脂，300mg氢化饱和磷脂、100mg胆固醇，200mg聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)、6.5mg维生素E超声溶解于100ml无水乙醇中，得溶液A。

将A于50℃水浴中旋转蒸发成膜，得膜B。

将磷酸盐缓冲液(pH7.4)50ml与膜B充分混合水化30分钟，高压均质机循环均质5～6次，然后过0.22μm微孔滤膜，分装，充氮，灌封既得。

实施例3

将100mg多烯紫杉醇，1000mg大豆磷脂，250mg胆固醇，100mg聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)、6.2mg维生素E、油酸100mg超声溶解于100ml无水乙醇中，得溶液A。

将A于50℃水浴中旋转蒸发成膜，得膜B。

将注射用水50ml与膜B充分混合水化30分钟，高压均质机循环均质5～6次，然后过0.22μm微孔滤膜，分装，充氮，灌封既得。

实施例4

将100mg多烯紫杉醇，1000mg大豆磷脂，200mg氢化饱和磷脂、200mg胆固醇，200mg聚乙二醇一二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPE-PEG)、6.5mg维生素E、油酸100mg超声溶解于10ml无水乙醇中，得溶液A。

将A于50℃水浴中旋转蒸发成膜，得膜B。

将注射用水50ml与膜B充分混合水化30分钟，高压均质机循环均质5～6次，然后过0.22μm微孔滤膜，分装，充氮，灌封既得。

实施例5

将250mg多烯紫杉醇，1300mg大豆磷脂，250mg氢化饱和磷脂、250mg胆固醇，200mg聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)、7.2mg维生素E、油酸100mg超声溶解于10ml无水乙醇中，得溶液A。

将A于50℃水浴中旋转蒸发成膜，得膜B。

将注射用水50ml与膜B充分混合水化30分钟，高压均质机循环均质5～6次，然后过0.22μm微孔滤膜，分装，充氮，灌封既得。

实施例6

将250mg多烯紫杉醇，1300mg大豆磷脂，250mg氢化饱和磷脂、250mg胆固醇，200mg聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)、7.2mg维生素E、油酸100mg超声溶解于2ml无水乙醇中，得溶液A。

将A注入50℃水浴加热的磷酸盐缓冲液50ml中，真空旋转蒸发去除乙醇，定容至50ml得溶液B。

将溶液B经高压均质机循环均质5～6次，然后过0.22μm微孔滤膜，分装，充氮，灌封既得。

实施例7

将250mg多烯紫杉醇，1300mg大豆磷脂，250mg氢化饱和磷脂、250mg胆固醇，200mg聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)、7.2mg维生素E、油酸100mg超声溶解于5ml无水乙醇中，得溶液A。

将A注入50℃水浴加热的磷酸盐缓冲液50ml中，真空旋转蒸发去除乙醇，定容至50ml得溶液B。

将溶液B经高压均质机循环均质5～6次，加入冻干保护剂蔗糖4g、甘露醇1g溶解，然后过0.22μm微孔滤膜，分装，冷冻干燥既得。

实施例8

将200mg多烯紫杉醇，800mg大豆磷脂，600mg氢化饱和磷脂、200mg胆固醇，200mg聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)、7.2mg维生素E、泊洛沙姆80mg超声溶解于5ml无水乙醇中，得溶液A。

将A注入50℃水浴加热的磷酸盐缓冲液50ml中，真空旋转蒸发去除乙醇，定容至50ml得溶液B。

将溶液B经高压均质机循环均质5～6次，加入冻干保护剂甘露醇3g、葡萄糖1.5g溶解，然后过0.22μm微孔滤膜，分装，冷冻干燥既得。

Claims (9)

1、多烯紫杉醇长循环脂质体，其特征在于：以磷脂，胆固醇等辅料为膜材，用长循环辅料进行表面修饰，亦可加入电荷调节剂或表面活性剂，制备成多烯紫杉醇的长循环脂质体，分散相的平均粒径为≤600nm。

2、根据权利要求1所述的多烯紫杉醇长循环脂质体，其特征在于：所述的磷脂可采用天然磷脂大豆磷脂，蛋黄卵磷脂，或氢化大豆磷脂，或合成磷脂二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱，以及他们的各种组成形式。

3、根据权利要求1所述的多烯紫杉醇长循环脂质体，其特征在于：长循环辅料可采用聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺、聚乙二醇-二棕榈酰磷脂酰胆碱、神经节苷脂、聚丙烯酰胺或壳聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇。

4、根据权利要求1所述的多烯紫杉醇长循环脂质体，其特征在于：膜材中可加入电荷调节剂或表面活性剂，油酸、十八酸、葡萄糖醛酸、磷酸二鲸蜡酯、泊洛沙姆、汴泽。

5、根据权利要求1所述的多烯紫杉醇长循环脂质体，其特征在于其分散介质可以是水、磷酸盐缓冲液、TriS缓冲液、碳酸盐缓冲液、5％葡萄糖水溶液。

6、多烯紫杉醇长循环脂质体制剂，其特征在于：脂质与药物的摩尔比为1∶1-20∶1，长循环辅料与普通磷脂的摩尔比为1∶5-1∶50，制剂中多烯紫杉醇的最终浓度为1-10mg/ml。

7、根据权利要求6所述的多烯紫杉醇长循环脂质体制剂，其特征在于：可直接以液体形式保存或进行冷冻干燥后制成多烯紫杉醇长循环脂质体冻干粉针。

8、根据权利要求7所述的多烯紫杉醇长循环脂质体制剂，其特征在于：冻干粉针中冻干保护剂为蔗糖，海藻糖，甘露醇，氯化钠，葡萄糖，乳糖，山梨醇，右旋糖苷，甘油，甘氨酸或其组合形式。

9、多烯紫杉醇长循环脂质体的制备方法，其特征在于：其制备方法为薄膜分散法，有机溶剂注入法制备脂质体，其后可进行超声或高压均质。