CN1787812A - 不溶球蛋白的可注射植入体 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种可注入或植入人或动物体的制剂，含有作为主要成分的球蛋白，所述球蛋白在生理pH下不溶，并且是生物相容和无菌的。

Description

不溶球蛋白的可注射植入体
发明领域
本发明的目的是提供给人使用的球蛋白制剂。这些制剂可以特别是可注射的糊剂或可植入的固体材料，或植入体的形式。
发明背景
已经描述了胶原蛋白的很多医学应用，不管是例如用于填充的糊剂形式，还是液体或固体剂型的形式，例如薄膜或敷剂，或是各种植入体的形式。事实上，通常只使用动物胶原蛋白。
优于动物胶原蛋白的人体胶原蛋白预期可以来自人的皮肤组织。然而，由于从尸体中获得人体组织样品引发重要的伦理问题并且需要昂贵的实验以消除传染性疾病、病毒性疾病等传播的危险，因此很困难。由胎盘制备人体胶原蛋白昂贵、复杂并难以组织。利用现代的基因重组或细胞培养方法制备人体胶原蛋白也是非常昂贵的，这必定会削弱该产品的商业开发。
球蛋白是构成血红蛋白的蛋白质，其自身含有4个肽链(2个α-链，2个β-链)，每一个与血红素相连。血红素由含有一个带正电荷的铁原子的四吡咯结构组成。每个分子具有4个血红素，是造成血红蛋白红色的原因。
很长时间以来都已知制备球蛋白的方法，其随着饮食应用的目的或为了制备可注射的药物溶液得到发展。
与在生理pH下完全溶解的血红蛋白不同，球蛋白在相同的条件下明显不溶。球蛋白在生理条件下不溶的特性至今仍损害它在药物应用中的开发。由于上述原因，大多数实验都寻求制备在生理pH下溶解的球蛋白衍生物，特别是通过使用琥珀酸酐的琥珀酰化或使用醋酸酐的乙酰化，或在碱性pH下酰胺作用进行水解，这些过程增加球蛋白的负电荷并减少它的等电pH。已经开发、获得专利并上市了结合酸性球蛋白的可溶制剂和胰岛素的可注射产品：Reiner(1939)；Reiner等(1939)。允许注射后，从该复合物中逐步释放出胰岛素：Rabinowitch等(1947)；Berg等(1953)。球蛋白不是该产品的活性成分或主要成分。
发明内容
本发明意在提供新的材料和注射制剂或可植入有机体的制剂，其中球蛋白是主要的活性成分，并且其不具有已知材料和制剂，例如胶原蛋白等的缺点。
本发明的主题是球蛋白的糊剂或固体制剂，所述球蛋白在生理pH下不溶，生物相容，无菌，优选可生物降解，特别为可注射糊剂、固体材料，例如颗粒或薄膜，或不溶植入体的形式。
本发明提出例如通过收集、离心，通过将沉淀物悬浮在可药用载体中形成球蛋白的蛋白沉淀物，保留球蛋白在中性pH下天然不溶的特性，所述可药用载体例如是含有9g/lNaCl，在6.8至7.5中性pH之间缓冲的PBS型生理水溶液。这样形成的糊剂匀化后可使用细针头注射。可以在有粘合剂和润滑剂的情况下制备该糊剂，该粘合剂和润滑剂例如甘油三酯，聚乙二醇，透明质酸盐，特别是透明质酸钠，透明质酸或其它多糖或粘多糖或氧化纤维素的溶液。这样的添加剂有助于糊状沉淀物通过最细的针头(直径30g)从而作为皮内植入体进行注射。
该产品的创造性和益处在于这样一种事实，该产品是一种蛋白质糊剂，其与被注入的周围组织完全生物相容。所述蛋白质没有改变或进行化学修饰，它从处于生理环境的时刻起就是天然不溶的。人体球蛋白的蛋白质糊剂可以在人体中使用，用于填充皮肤空洞、皱纹或疤痕，或增加某些组织的体积(泌尿或消化道***，声带等)。该糊剂可以用于填充骨或软骨缺陷，并促进其愈合。不溶球蛋白的颗粒也可以用于动物或人体细胞培养。所述带有负电荷的细胞，附着到带有正电荷的球蛋白颗粒的表面，并在其表面上增殖。球蛋白载体逐渐降解，与其接触的细胞逐渐将其消化，这可以另外提供一种为细胞提供营养的方法，这补充了或是至今使用的液体培养基的替代物。
因而所述球蛋白糊剂可能的填充应用有很多，对于所述蛋白质来说是出人意料的。
优选同源的人体球蛋白，以避免在注射时或之后被治疗的患者出现任何免疫反应。因而所述产品比胶原蛋白显示出更大的优势，所述胶原蛋白迄今为止还是从动物皮肤(小牛，猪等)上制备，并且为了避免患者出现免疫反应，所述胶原蛋白需要一定大量的预防措施和条件。
·需要对每个患者测试对动物胶原蛋白可能的过敏反应。
·不可能治疗过敏的个体。
然而，球蛋白在酸性或碱性pH下仍然可溶，并且在这些条件下，可以通过多孔膜进行无菌过滤。对于20至300mg/ml适宜的浓度，这样的溶液可以像蛋白质溶液一样进行处理，并且使用或结合干燥、冻干、交联和沉淀技术，可能制成产品例如：海绵，薄膜或颗粒。下面提供一些实施例。
容易从来源于动物或人血液的红细胞中纯化出球蛋白。从捐献品可得到足够数量的人红细胞，所述捐献品已经过了保存期，在输血中心有库存，对于所述捐献品在采样时完成了所有的早期健康检查。因而制备不溶的可注射球蛋白或其它基于球蛋白的生物材料提供了新的生物医学用途，可能回收未使用的血液或已经过了保存期的供血，以避免或减少对其进行破坏。
也可以如下实现本发明：通过使用从待治疗的患者取大约5至100ml的血样，用与进行大体积相同的方法将其转变成自体球蛋白，接着注射得到的糊剂，用于对同一患者矫正皱纹或其它应用例如慢性伤口愈合。使用来自患者的样品制备的注射器数量可以是相当大的，可以允许患者治疗几年。
同样的，含有血液的分娩后的人体胎盘通常被焚化破坏，而这也可以用于本发明。
凭借生物化学、细菌学和血清学的检查和各种病毒和其它感染介质的筛选实验，输血机构官方控制着来自献血者的袋装血液。至于胎盘血，很显然必须在从原材料采集、保藏和提取血液之前，对来自脐带或母亲的血液样品进行同样的检查。对于自体血液，可以简化要进行的检测。
实现本发明的第一步需要用已知的简单操作来收集和纯化这些血样或血液中的红细胞。用低速离心来回收红细胞。用PBS型的生理盐水液体来分离和替***上清液，该生理盐水液体中含9g/l的NaCl并缓冲pH至中性。
几次洗涤后(3到5次)，血浆蛋白质被从红细胞悬浮液中除去。向纯化后的红细胞小丸中加入一或两体积的蒸馏水，以进行渗压震扰使血细胞膜溶解，血红蛋白释放到溶液中，浓缩和纯化。通过高速离心步骤(10到20000rpm)可能除去小丸中的细胞膜和细胞碎片。最后的步骤包括用孔隙度为0.2微米的膜过滤上清液，从而可能得到经过纯化和除菌的血红蛋白溶液，并且不含原组织、细胞或细胞膜的微粒和衍生物。
早在1898年Schulz就描述了在酒精存在下在于酸性pH中来裂分血红素-球蛋白。Anson和Mirsky在1930年，以及Rossi-Fanelli等在1958年，在酸存在下于0℃使用了丙酮。Teale(1957年)优选使用了甲基乙基酮来代替丙酮。Autio等(1984年)利用可溶的羧甲基纤维素来吸附和沉淀血红素，在酸性pH下分离球蛋白。由此制备的球蛋白在酸性或碱性pH下可溶，但一旦将水溶液的pH中和至pH6到8之间就不溶了。
1951和1952年，Strumia等进行了中性pH下的增溶实验，他们采用延长碱处理的方法，导致球蛋白的天门冬酰胺和谷氨酰胺残基部分脱酰胺，各自转化成天冬氨酸和谷氨酸(Vars，1952)。另外，1988年Volckmann通过琥珀酰化进行了其它增溶实验。
球蛋白在生理性介质中不溶的特性解释了其在组织植入后的持留性，也使其能够抵抗酶的降解，尤其是在用于填充或组织扩张的应用中，如果注射量相当大的情况下。
另一方面，多数其它蛋白质只能通过高浓度的盐或醇沉淀，这就使它们的沉淀物不具备生物相容性，不能用于组织内注射。另外，由于和组织中的生理性介质相接触，沉淀剂被扩散并且沉淀物逐渐溶解，这些植入物会很快消失。
使用一种兔源球蛋白制剂可以很容易地验证本发明的优点。将由此制备的生理性球蛋白沉淀糊剂皮下注射到兔子背部和体侧的不同部位。由于没有局部红斑，容易验证无毒。随着时间的变化，可以通过触诊观察本产品的皮下持留性。可以使用或不使用Freund佐剂，通过兔子皮下或肌内注射免疫以验证该产品无抗原性。通过常规对照试验，免疫后采集的血样可以验证缺乏抗球蛋白或抗血红蛋白的抗体。
生产本发明产品的实施例
实施例1：制备兔球蛋白
通过心脏穿刺对五只麻醉的兔子进行取血。在存在肝素或存在柠檬酸钠的情况下回收血液以避免其凝固。如上得到210ml血液，2500rpm离心30分钟。用移液管除去含有血浆的上清液，将小丸用3倍体积的PBS缓冲液冲洗5次，该PBS缓冲液含有9g/l NaCl并缓冲至pH 7.2。为了溶解红细胞，向洗过的最终的小丸中搅拌加入等体积的蒸馏水。为了除去细胞和膜碎片，12000rpm离心最终的悬浮液。将上清液通过孔隙率为0.22微米的醋酸纤维素膜进行过滤。得到82ml，含有97g/l血红蛋白。
根据Tayot和Veron描述的方法(1983)将血红蛋白转化成球蛋白。将所述血红蛋白溶液搅拌倒入275ml含有1ml浓HCl的96％的乙醇中。将pH调至3。最终浓度为酸性pH下74％乙醇和22g/l血红蛋白。加入3g CECA L4S活性炭，4℃剧烈搅拌15分钟。
悬浮液于15000rpm下离心30分钟除去丸状活性炭。包含脱色酸性球蛋白的上清液通过一系列微孔膜，直至最小孔隙率(0.2微米)膜进行过滤，以除去活性炭细颗粒。滤液用等体积的蒸馏水稀释，加NaOH调pH至7.4后，球蛋白全部被沉淀下来。15小时后，离心得到球蛋白沉淀物，接着用3倍体积的包含9g/l NaCl且pH缓冲为7.4的PBS生理盐水洗涤两次。在pH7.4下获得58.2g球蛋白沉淀物。通过连续推动每个注射器的活塞使沉淀物在两个容积为5ml的注射器之间连续传送，从而使得沉淀物由一个进入另一个注射器，所述两个注射器通过一个内径1到0.2mm的连接器连接，由此使所述沉淀物匀化。
最后，将匀化的沉淀物吸入1ml的注射器。可能通过直径24或27g的细针头将沉淀的球蛋白糊剂推出注射器。糊剂中球蛋白的浓度可以调节为30至150mg/g之间。
实施例2：人体球蛋白的制备
将200ml已过保存期且添加了柠檬酸钠的的人血，于2500rpm离心30分钟。用移液管吸去含血浆的上清液，也吸走了与白细胞相应的表面白色细胞层。通过连续离心法，将红细胞小丸用3倍体积的含9g/l NaCl且pH缓冲为7.2的PBS生理盐水冲洗5次。向最后的小丸中加入2倍体积的蒸馏水以溶解红细胞。将溶血的悬浮液在12000rpm离心30分钟使其澄清，并用孔隙率为0.2微米的膜进行过滤。得到含有52g/l的血红蛋白210ml，于4℃保存。
于4℃加入210ml等体积的0.1N HCl，将整个混合液倒入含40ml 1N HCl的4升丙酮中。在化学罩下，用力搅拌悬浮液并在室温下静置1小时。用多孔布过滤除去溶解在丙酮中的血红素，回收球蛋白沉淀，用酸性丙酮洗涤并用气流烘干。
一种可变化的形式是，例如可以使用不同的无机酸(硫酸、磷酸等)，或羧酸，如乙酸、草酸或柠檬酸，来替代盐酸，以便在脱色前酸化血红蛋白溶液。
此过程中另一种可变化的形式包括可以在脱色前沉淀血红蛋白的酸性溶液。可以加入浓度为40到60g/l的NaCl来进行沉淀。接着将酸性血红蛋白沉淀通过悬浮于足量的乙醇和/或丙酮中进行脱色。色素溶解在乙醇和/或丙酮中；球蛋白以沉淀形式存在，可以用多孔布过滤收集。由于除去了任何水相，这种改变形式可能使需要的乙醇和/或丙酮的体积减少为至少是5因子。
将球蛋白再次溶解于pH为2到3之间的水溶液中。此酸性球蛋白水溶液用孔隙率为0.2微米的膜无菌过滤，然后用加入NaOH中和溶液直到pH值为7.4来进行沉淀。如前述实施例，可制备在中性pH下沉淀的球蛋白糊剂注射器。可以在碱性pH下加入透明质酸钠，以进行中和酸性球蛋白溶液的操作。在这种情况下，就形成了一种与透明质酸盐复合并浸渗的不溶性球蛋白糊剂，且具有润滑作用，提高了基在极细针头(直径30g)中的可注射性。
实施例3：其它人体球蛋白的制备
用从血液中心得到的、已过保存期的可控的血细胞小丸按实施例1方法进行处理。最后得到的注射器中含沉淀的人球蛋白糊剂，其在注射时具有生物相容性和可植入性。
实施例4：用0.1或1M氢氧化钠于20℃碱处理1小时来制备人体球蛋白
洗涤之前按实施例1或2方法进行处理，直至得到在pH7.4时的球蛋白沉淀。用3倍体积0.1M到1M的NaOH在20℃搅拌1小时使沉淀再次溶解。
接着加入同样摩尔浓度等体积的HCl来中和溶液，并调节悬浮液的pH值在7到7.4之间。离心收集球蛋白沉淀，接着如前面实施例用PBS生理盐水进行洗涤。将沉淀的球蛋白糊置于注射器中，所述球蛋白糊中可能加入了透明质酸或其它生物相容的粘性和润滑产品：甘油三酯、聚乙二醇、氧化纤维素、壳聚糖等，并再次证实得到的产品通过极细针头用于皮下的可注射性。对球蛋白进行碱性处理有可能提高产品的卫生安全保证，而不用显著改变球蛋白在中性pH下的不溶特性。
实施例5：沉淀的和戊二醛交联球蛋白糊剂的制备
本处理方法可以增加植入体的吸收时间。最终的球蛋白沉淀悬浮于2％PBS中。按1mg/g沉淀的浓度搅拌下加入戊二醛。20℃孵育1小时后，如前述实施例所述洗涤球蛋白沉淀并将其置于注射器内。
可以使用其它交联剂，如二醛类或聚醛类，尤其是高碘酸氧化的多糖，如氧化葡聚糖，氧化淀粉，或氧化透明质酸。
实施例6：无菌球蛋白糊状沉淀注射器的制备
为了生产无菌注射器，在使用孔隙率为0.2微米的膜无菌过滤酸性球蛋白溶液后即刻，必须在无菌条件下进行操作。可以在100或1000级无菌区的层流净化罩下，或从外部易于通过灵活的橡胶手套操作的无菌室内进行。沉淀，沉淀后的分离，或离心沉淀的操作应该在包裹着保护膜的无菌容器内进行。
另一个方法是将无菌过滤的可溶球蛋白的酸性溶液分装进第一支注射器内，将无菌过滤的第二碱性溶液装入第二支注射器内。每支注射器的pH都用如下方式调节：其后混合液的pH为中性。由于这两支注射器之间的连接利用了无菌连接器，所以可以通过从一支注射器到另一支注射器的连续转移得到中性pH的无菌匀化混合物。通过球蛋白的自然沉降可以得到无菌沉淀。经挤压通过细针头可使所得悬浮液被浓缩，该针头仅允许水相通过。向浓缩球蛋白的注射器中任意加入透明质酸钠或其它任何粘性剂和润滑剂，可以将其结合入最终的球蛋白中。一种可变化的形式是，在最初两支注射器进行混合时，也可以掺合一种交联剂，以延长球蛋白的体内吸收时间。
实施例7：沉淀球蛋白糊剂的注射器的最后消毒
可以用5到30千戈瑞剂量辐射对按上述任何一个实施例制备的注射器进行消毒。用辐射对其消毒前或消毒后，各种球蛋白制剂都是不溶的。在两种情况下，如果用任何酸性水溶液进行酸化至pH为3，在中性pH下不溶的球蛋白变成可溶。
实施例8：用未修饰的可溶性球蛋白制备不溶性胶或薄膜
在pH3水溶液中溶解丙酮基球蛋白粉末以制备可溶性球蛋白溶液，浓度为20到120mg/ml。该溶液经孔隙度为0.2μ的膜无菌过滤，然后搅拌下加入无菌的1N NaOH调节pH为5。
在pH3.5下，每分子最少包括5个碳原子的氧化淀粉，或另一种醛，或交联的聚醛，以0.5％浓度加入混合液，搅拌5分钟。于20到37℃温度下，层流下，将无菌混合液倾倒在一平坦表面上，得到厚度为1到3mm的液体。
如果想得到薄膜，利用氧化淀粉产生球蛋白链的交联，使液体产品逐渐胶化，接着在气流下脱水。
根据材料的初始浓度，厚度在20到200μ之间的最后的薄膜可以用β-或γ-辐射或用环氧乙烷消毒。可以加入众所周知的成膜剂，如胶原，明胶，透明质酸，氧化纤维素或其它多糖或粘多糖，聚乙二醇，甘油等。这样的添加剂可以使薄膜柔韧和/或强韧。根据已知的已经用于其它产品的技术，这种薄膜可以单独用于保护皮肤或手术创伤，或促进愈合，或与不同的假体联合(血管假体，加固架，多孔基质)从而使其不可渗透，或增强生物相容性，或使粘性具有抗粘着特性，或加速这些假体的细胞定殖。
在一种变化形式中，可能和先前一样，由pH为5的可溶的球蛋白产生薄膜，但是没有引入任何交联剂。通过最后进行辐射，干燥薄膜进行最终交联，该辐射能在球蛋白链之间产生共价键。接着，采用与球蛋白的氨基进行反应的生物学上相容的粘合剂将这种薄膜结合到组织上。优选，可以使用将多糖高碘氧化得到的聚醛。例如，优选氧化葡聚糖或氧化淀粉。
实施例9：不溶球蛋白颗粒作为细胞培养载体的生物医学用途
将前述任意一个实施例中得到的中性pH下的球蛋白沉淀物的无菌糊剂用例如，用于细胞培养的DMEM基质在大约37℃温度下进行培养。得到一种悬浮液，将其中加入密度为10000至100000细胞/ml的细胞。搅拌30分钟后，沉淀分离1小时至15小时进行分离，在培养期间细胞附着到球蛋白颗粒上，并在其表面上繁殖，持续时间为3至12天。根据目前公开的知识，根据细胞类型选择细胞培养基。
在繁殖结束时，通过自然的沉淀分离可以将附着到球蛋白颗粒上的细胞悬浮液进行浓缩。可以将得到的细胞糊剂置于注射器中，作为生物相容的含有细胞的植入体进行注射，用于当时已知的各种治疗用途。
根据该方法培养皮肤成纤维细胞，可以允许制备含有细胞的植入体，应用于皮肤愈合或***填充。
根据该方法培养软骨细胞，可以允许制备含有细胞的植入体，应用于包括填充和愈合表面软骨损伤。
根据该方法培养成骨细胞，可以允许制备含有细胞的植入体，应用于包括填充和愈合骨折或骨质疏松。
相似的，干细胞，特别是来自于胚胎，或脐带血或骨髓，或从各种成年人组织中分离的，可以在这些球蛋白颗粒中进行培养，可以在注入或植入含有细胞的糊剂后达到想要的作用。
对于生物医学应用例如生产培养后细胞可以从它们的球蛋白载体中分离的病毒或衍生的疫苗，可以采用常规的胰蛋白酶处理方法。没有降解的球蛋白颗粒自然沉淀在***底部，通过沉析可以从细胞中分离出来。
在某些变化形式中，可能用含有不溶球蛋白的膜取代球蛋白颗粒。因而对于现在已知的任何膜或薄膜上的细胞培养来说，可以通过持续循环与这些平膜接触的培养基进行细胞培养。这种方法也可能生产含有细胞的膜，该膜可以被植入以用于特殊的医学用途。
实施例10：可注射的不溶球蛋白的植入体的医学应用
根据本发明的制剂，特别是根据实施例1至7中任意一种实施例制备的不溶球蛋白注射器，可以在下列非限制性的用途中使用：
-填充皮肤的皱纹和缺陷。
-在泌尿学中使用，填充***或***：儿童膀胱输尿管回流，女性压力性尿失禁；用于ENT：矫正声带体积。
-用作经皮动脉伤口的止血塞。
-皮肤愈合，单独使用球蛋白糊剂或与其它愈合产品或生长因子结合使用。
-软骨或骨愈合，单独使用球蛋白或与其它愈合产品结合使用：磷酸钙，碳酸钙，羟磷灰石，BMP型生长因子。
-在植入体移植和降解期间，为了抑制细菌生长，与抗生素相结合。
本发明的主题也是治疗人或动物体的方法，包括至少一个将有效治疗量的根据本发明的注射或植入制剂给需要这种制剂的患者使用的步骤。
这些方法包括特别是与上述用途相应的给药，通过注射或植入的非肠道或外科，或皮肤进行给药。
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Claims (28)

1.可注入及植入人或动物体的制剂，其包括作为主要成分的球蛋白，所述球蛋白在生理pH下不溶，并且是生物相容和无菌的。
2.权利要求1所述的制剂，其中所述球蛋白是人源球蛋白。
3.权利要求1和2中任一项所述的制剂，其中所述制剂中的球蛋白处于沉淀状态。
4.权利要求1至3中任一项所述的生物相容的可注射制剂，其含有匀化的球蛋白。
5.权利要求4所述的制剂，其中所述球蛋白为可注射的匀化糊剂的形式。
6.权利要求4和5中任一项所述的制剂，其中该匀化的糊剂可以通过皮下注射器针头进行注射。
7.权利要求4至6中任一项所述的制剂，其中可注射制剂中球蛋白的浓度在30至150mg/g之间。
8.权利要求4至7中任一项所述的制剂，其中该制剂的pH在6至8之间。
9.权利要求1至8中任一项所述的制剂，其中该球蛋白处于悬浮液中。
10.权利要求1或2所述的制剂，其中该球蛋白处于溶液中，pH小于6或大于8，位于可药用液体载体中。
11.权利要求1至3中任一项所述的制剂，其中该球蛋白存在于凝胶形式的制剂中。
12.权利要求1至11中任一项所述的制剂，其还含有润滑剂。
13.权利要求12所述的制剂，其中该润滑剂选自甘油三酯，聚乙二醇，透明质酸盐，透明质酸，氧化纤维素，或多糖，或粘多糖的溶液。
14.权利要求1至13中任一项所述的制剂，其含有交联剂。
15.权利要求14所述的制剂，其中该交联剂选自戊二醛，二醛类以及聚醛类，特别是被高碘酸氧化的多糖，包括氧化葡聚糖，氧化淀粉或氧化透明质酸。
16.权利要求1至3中任一项所述的制剂，其包括或由球蛋白膜组成，该制剂可能任选含有成膜剂，特别是例如胶原蛋白，明胶，透明质酸，氧化纤维素，聚乙二醇或甘油。
17.权利要求16所述的制剂，其中通过将凝胶或溶液脱水得到该膜。
18.权利要求1至3中任一项所述的制剂，其以固体植入体的形式被生产。
19.权利要求15至18中任一项所述的制剂，其被交联。
20.权利要求19所述的制剂，其通过加入交联剂和/或辐射被交联。
21.权利要求1至20中任一项所述的制剂，其还含有下列至少一种活性成分：愈合产品，生长因子，抗生素。
22.权利要求1至21中任一项所述的制剂，其在注入或植入前含有细胞，特别是使用球蛋白制剂作为培养载体培养的细胞，细胞可以特别是皮肤成纤维细胞，软骨细胞，成骨细胞或干细胞。
23.权利要求1至22中任一项所述制剂的用途，用于生产组织填充材料。
24.权利要求23所述的用途，用于填充皮肤空腔，皱纹或疤痕，以及骨或软骨空腔和骨折。
25.权利要求1至22中任一项所述制剂的用途，用于增加组织体积。
26.权利要求25所述的用途，其用于增强***，特别是泌尿或消化道***或声带。
27.权利要求16至22中任一项所述制剂的用途，用于生产膜和/或敷布，用于保护和/或分离外科或非外科，外部或内部伤口或疤痕。
28.权利要求1至22中任一项所述制剂的用途，用于生产试图形成经皮动脉伤口的止血塞的材料，或用于皮肤愈合的糊剂，或用于软骨或骨愈合的材料。
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