CN1744887A - 乳癌耐性蛋白抑制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了对抑制BCRP的药物制剂的筛选有用的癌细胞及抑制BCRP的药物制剂。提供了以下式(1)、(2)、(3)、(4)或(5)表示的类黄酮化合物或其苷、酯或盐为有效成分的BCRP抑制剂，以及含有该BCRP抑制剂和可成为BCRP的基质的抗癌剂的抗癌剂。

Description

乳癌耐性蛋白抑制剂
技术领域
本发明涉及乳癌耐性蛋白(BCRP)抑制剂及对BCRP抑制剂的筛选有用的SN-38耐性癌细胞。
背景技术
在癌症化疗法中，出现自然耐性、获得性耐性等是一个比较严重的问题，自然耐性是指从治疗开始时起抗癌剂就无效的情况，获得性耐性是指长时间连续使用抗癌剂时其疗效降低的情况。如果能够克服该对抗癌剂的耐性，就有望提高癌症化疗法的治疗成绩。目前，已经明确了存在各种耐性机制。一般认为，其中药物转运蛋白质的表达起到了耐性机制的中心的作用，该药物转运蛋白质主动地将抗癌剂向细胞外转运，使抗癌剂在细胞内的蓄积量减少。
特别是七十年代发现的由MDR1基因编码的药物转运蛋白质P-糖蛋白质，由于其对化学结构及作用机制等不同的多种抗癌剂产生交叉耐性，因此成为多剂耐性克服剂的主要靶分子。但是，以后随着认知的加深，逐渐清楚了仅仅用P-糖蛋白质无法完全说明抗癌剂的耐性机制，还希望开发出以新的药物转运蛋白质为靶分子的耐性克服剂。
在这种情况下，1988年发现了一种乳癌耐性蛋白(BCRP)(参考Proc.Natl.Acad.Sci.USA95，15665-15670(1998))，它和P-糖蛋白质一样，是属于被称为ATP结合盒(ABC)转运体超家族的一族的药物转运蛋白质。BCRP的结构中只有一个ATP结合盒，在结构上不同于具有两个ATP结合盒的P-糖蛋白质及其它药物转运蛋白质。BCRP与对盐酸依立替康(CPT-11)及拓朴替康等拓朴异构酶(トポイソメラ-ゼ)I抑制剂、米托蒽醌(ミトキサソトロソ)等拓朴异构酶II抑制剂的耐性作用具有非常深的关系。另一方面，BCRP对通过P-糖蛋白质排出的紫杉醇及长春新碱等没有作用，而与不是通过P-糖蛋白质向细胞外排出的CPT-11及SN-38(CPT-11的活性体)等喜树碱衍生物的排出有关(Cancer Res.59，5938-5946(1999))，由此明确了BCRP具有和P-糖蛋白质不同的基质特异性。此外，有资料显示，BCRP还与口服的抗癌剂的生物利用度的限制有关(参考J.Clin.Oncol.20，2943-2950(2002))。基于这些情况，抑制BCRP的药物有希望对用以往的耐性克服剂不能克服的抗癌剂的耐性发挥出克服效果，并且使抗癌剂的生物利用度得到提高，因此希望能够进行这方面的开发研究工作。
到目前为止，以克服对抗癌剂的耐性为目的，一直在进行大量的P-糖蛋白质抑制剂的开发。而另一方面，针对BCRP的特异性的抑制剂的相关报告却很少，而且其抑制作用也十分有限，因此希望开发出具有更加强有效的BCRP抑制作用的药物(参考Mol.Cancer.Ther.1，427-434(2002))。另外，有报告称，类黄酮化合物中有对P-糖蛋白质显示出抑制作用的化合物(J.Med.Chem.41，4161-4164(1998)；Biochem.Biophys.Res.Commun.295，832-840(2002))，但是对BCRP具有抑制作用的类黄酮化合物还未知。
本发明的目的是提供对抑制BCRP的药物的筛选有用的癌细胞及抑制BCRP的药物制剂。
发明的揭示
为了解决上述课题，本发明者通过使用含SN-38的培养基对来自人非小细胞肺癌的癌细胞A549细胞进行继代培养，确定了通过BCRP高表达而获得了抗癌剂耐性的人癌细胞。再使用该癌细胞，以耐性克服作用作为指标，对各种来自植物的成分进行筛选，结果发现下式(1)、(2)、(3)、(4)或(5)表示的类黄酮化合物具有极强的BCRP抑制作用。并据此最终完成了本发明。
即，本发明提供了以下式(1)、(2)、(3)、(4)或(5)表示的类黄酮化合物或其苷、酯或盐为有效成分的BCRP抑制剂，针对获得了与BCRP有关的耐性的癌症的抗癌剂耐性克服剂，或针对表达BCRP、对抗癌剂的感受性低的癌症的抗癌剂耐性克服剂；
Figure A20048000329300061
式中，R1表示氢原子、羟基、卤原子、低级烷氧基或低级烷基，7个R2可以相同也可以不同，表示氢原子、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级链烯基或糖残基，或者也可以和相邻的R1一起形成为可被低级烷基取代的吡喃环，R3表示氢原子、羟基、卤原子、低级烷基、低级烷氧基、氨基或硝基；
式中，R4表示氢原子、羟基、卤原子、低级烷氧基、低级烷基或低级链烯基，7个R5可以相同也可以不同，表示氢原子、羟基、低级烷氧基或低级烷基，或者相邻的2个R5可以一起形成为可被低级烷基取代的吡喃环，R6表示氢原子、羟基、卤原子、低级烷氧基、低级烷基、氨基或硝基；
Figure A20048000329300072
式中，R7表示氢原子、羟基、卤原子、低级烷氧基或低级烷基，2个R8可以相同也可以不同，表示氢原子、羟基、低级烷氧基或低级烷基，R9表示氢原子、羟基、卤原子或低级烷氧基，5个R10可以相同也可以不同，表示氢原子、羟基或低级烷氧基；
式中，3个R11可以相同也可以不同，表示氢原子、羟基或低级烷氧基；
Figure A20048000329300081
式中，R12表示氢原子或低级链烯基，R13表示氢原子或羟基，R14表示表示氢原子。
本发明还提供了含有上述BCRP抑制剂及可成为BCRP的基质的抗癌剂的抗癌剂。
本发明还提供了下式(6)
Figure A20048000329300082
表示的新的类黄酮化合物，式中，R15表示氨基或硝基。
本发明还提供了高水平表达BCRP的SN-38耐性人非小细胞肺癌A549细胞。
附图的简单说明
图1为表示A549/SN-38-4细胞所获得的对SN-38(A)和米托蒽醌(B)的耐性的程度的图。
图2为表示A549细胞和A549/SN-38细胞中的各种药物转运蛋白质的mRNA的表达的RT-PCR法分析结果的图。
图3为表示A549细胞和A549/SN-38细胞中的BCRP(A)及MRP2(B)mRNA的表达的实时RT-PCR法定量分析结果的图。
图4为表示A549细胞和A549/SN-38-4细胞的SN-38(A)及SN-38葡糖醛酸轭合体(B)的蓄积量的图。
图5为表示类黄酮化合物[化合物1-1(A)、化合物1-4(B)、化合物1-6(C)、化合物1-14(D)、化合物3-4(E)及化合物3-6(F)]对P388/BCRP细胞的SN-38耐性的克服作用的图。
图6为表示类黄酮化合物使P388/BCRP细胞的SN-38蓄积量增大的作用的图。
图7为表示类黄酮化合物使MCF-7细胞的SN-38蓄积量增大的作用的图。
实施发明的最佳方式
已知人非小细胞肺癌A549细胞容易培养，能够植入小鼠，而且对CPT-11的活性本体SN-38表现出高感受性(J.Clin.Invest.101，1789-1796(1998))。通过在逐步地提高培养基中的SN-38浓度的条件下持续地培养该A549细胞，确立SN-38耐性A549细胞。如后面的实施例所述，所得的SN-38耐性A549细胞高水平表达BCRP，使细胞内SN-38的蓄积量减少，从而获得耐性，对BCRP抑制剂的筛选有用。SN-38耐性A549细胞也可以用于体外的筛选，此外，通过植入小鼠，可以用于体内的筛选。
使用该细胞，以SN-38耐性克服作用作为指标，对各种来自植物的成分进行筛选，结果发现类黄酮化合物具有极强的BCRP抑制作用。
本发明的类黄酮化合物是上式(1)表示的黄酮衍生物、式(2)表示的黄烷酮衍生物、式(3)表示的查耳酮衍生物、式(4)表示的异黄酮衍生物或式(5)表示的类黄酮衍生物。
式(1)～(4)中，R1～R11为低级烷氧基时，优选碳原子数1～4的烷氧基，特别优选的是甲氧基。R1～R8为低级烷基时，优选碳原子数1～4的烷基，特别优选的是甲基。式(1)、(2)及(5)中的R2、R4或R12为低级链烯基时，优选碳原子数2～5的链烯基，特别优选的是3-甲基-1或2-丁烯基。卤原子可例举氟、氯、溴及碘原子，优选氯或溴原子。式(1)中相邻的R1和R2形成的吡喃环可以被碳原子数1～4的低级烷基取代，该取代基特别优选的是甲基。式(2)中形成吡喃环的相邻的2个R5最好是位于二氢苯并吡喃环上的R5。相邻的2个R5形成的吡喃环可以被碳原子数1～4的低级烷基取代，该取代基特别优选的是甲基。
在式(6)中，R15为硝基的化合物(2’-硝基-4’，5，5’，6，7，8-六甲氧基黄酮)也称为2’-硝基川皮苷，R15为氨基的化合物(2’-氨基-4’，5，5’，6，7，8-六甲氧基黄酮)也称为2’-氨基川皮苷，都是新化合物。
上述类黄酮化合物也包括例如β-D-葡糖苷等糖加成所得的苷。此外，还能够与钠、钾、盐酸盐等加成，形成药理学允许的盐，这种盐也包含在本发明的范围中。再有，能够例如与乙酸、丙酸、乳酸、丁酸等低级脂肪酸类加成，形成药理学允许的酯，这种酯也包含在本发明的范围中。类黄酮化合物有时也以水合物等溶剂合物的形态存在，该溶剂合物也包含在本发明的范围中。各异构体及其混合物也包含在本发明的范围中。
对本发明的类黄酮化合物的来源没有特别的限定，可以来源于植物，也可以是化学合成品或半合成品。对从植物中获取本发明的类黄酮化合物的方法没有特别的限定，例如有将植物的根、茎、叶、果实及/或花朵用水、甲醇、乙醇等低级醇或丙酮等水溶性有机溶剂在室温或加热下进行提取的方法；利用水和这些有机溶剂的混合物进行提取的方法；利用氯仿、二氯甲烷、乙酸酯类、甲苯或由二氧化碳气体形成的超临界流体等疏水性有机溶剂和甲醇等水溶性有机溶剂的混合物进行提取的方法。效果特别好的是将根、茎及/或叶切细或粉碎，用甲醇等低级醇进行提取的方法。然后，再通过采用柱色谱法等对所得的提取物进行分离、精制，能够分离出本发明的类黄酮化合物。
式(6)中的R15为硝基的2’-硝基-4’，5，5’，6，7，8-六甲氧基黄酮可以通过常用方法将4’，5，5’，6，7，8-六甲氧基黄酮硝基化来制造。硝基化试剂例如可以采用硝酸-硫酸这类混合酸。
式(6)中的R15为氨基的2’-氨基-4’，5，5’，6，7，8-六甲氧基黄酮可以通过常用方法将2’-硝基-4’，5，5’，6，7，8-六甲氧基黄酮还原来制造。
本发明的类黄酮化合物可以就这样直接给药，也可以在不会降低疗效的前提下和分散助剂、赋形剂等制剂中常用的载体混合，制成粉剂、液剂、胶囊剂、悬浮剂、乳剂、糖浆剂、酏剂、颗粒剂、丸剂、片剂、糖锭剂、乳液剂等口服剂或注射剂等剂型使用。
上述载体可例举水溶性的单糖或低聚糖或多糖类，例如甘露糖醇、乳糖、葡聚糖等；凝胶形成性或水溶性的纤维素类，例如羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素等；水吸收性且水难溶性的纤维素类，例如结晶性纤维素、α-纤维素、交联羧甲基纤维素钠及它们的衍生物等；水吸收性且水难溶性的多糖类，例如羟丙基淀粉、羧甲基淀粉、交联淀粉、直链淀粉、支链淀粉、果胶及它们的衍生物等；水吸收性且水难溶性的树胶类，例如***胶、黄蓍胶、グリコマソナソ及它们的衍生物等；交联乙烯基聚合物类，例如聚乙烯吡咯烷酮、交联聚丙烯酸及其盐、交联聚乙烯醇、聚羟乙基甲基丙烯酸酯及它们的衍生物等；形成核糖核蛋白体等分子集合体的脂质类，例如磷脂、胆甾醇等。
本发明的类黄酮化合物的溶解性较低时，可以进行可溶化处理。可溶化处理可采用制药中常用的方法，例如添加聚氧乙烯醇醚、聚氧乙烯酰基酯类、山梨糖醇酐酰基酯类、聚氧乙烯山梨糖醇酐酰基酯类等表面活性剂的方法；使用聚乙二醇等水溶性高分子的方法等。此外，还可以根据需要，采用形成可溶性盐的方法，使用环糊精等形成包合物的方法等。可溶化处理的方法可以根据目标类黄酮化合物作适当的变更。
对于通过投入抗癌剂而获得了与BCRP有关的耐性的癌症，BCRP抑制剂可以用作为抗癌剂耐性克服剂。此外，对于原本就BCRP表达、对抗癌剂的感受性低的癌症，可以用作为抗癌剂的增效剂。作为成为以BCRP抑制剂为有效成分的抗癌剂耐性克服剂和抗癌剂的增效剂的对象的抗癌剂，只要是可成为BCRP的基质的抗癌剂即可，对其没有特别的限定，可例举盐酸依立替康/CPT-11(活性本体：SN-38)或拓朴替康等拓朴异构酶I抑制剂；米托蒽醌、阿霉素、道诺红菌素、ビスアソトレソ、依托泊苷等拓朴异构酶II抑制剂；甲氨喋呤等叶酸代谢拮抗药物等。
本发明的BCRP抑制剂的给药量可以根据给药方法及患者的症状等作适当调整，较好是成人1天1mg～10g，更好是100mg～10g，特别好的是500mg～10g。此外，对抗癌剂和BCRP抑制剂的比例没有特别的限定，其合适的范围随所用的抗癌剂、抑制剂的种类而有所不同，例如抗癌剂使用盐酸依立替康时，按重量换算，抗癌剂：BCRP抑制剂为1∶1～1∶500，更好是1∶1～1∶100，特别好的是1∶1～1∶10。
本发明所用的类黄酮的具体例示于表1、表2、表3、表4及表5。
表1 黄酮衍生物
表2 黄烷酮衍生物
Figure A20048000329300131
表3 查耳酮衍生物
Figure A20048000329300132
表4 异黄酮衍生物
Figure A20048000329300133
表5 类黄酮衍生物
化合物 化学名
5-1 6H，7H-[1]苯并吡喃并[4，3-b][I]苯并吡喃-7-酮，3，8，10-三羟基-9-(3-甲基-1-丁烯基)-6-(2-甲基-1-丙烯基)(实施例13)
实施例
以下，例举实施例对本发明作更详细的说明，但这仅仅是示例，并不限定本发明。
实施例1：3’，5-二羟基-4’，6，7-三甲氧基黄酮(化合物1-6)的分离将368g巴西产的药物カルケ一ヅ，在甲醇中回流2小时，将提取液减压干固。在所得的提取物8.1g中取5.09g，采用中压色谱法将其用己烷进行洗脱后(A组分)，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)混合溶液进行洗脱(B组分)，接着用乙酸乙酯洗脱(C组分)，然后再用甲醇进行洗脱(D组分)。在所得的C组分1.53g中取1.0g，采用中压色谱法，将其在254nm监测下用己烷洗脱后，按照己烷-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液、己烷-乙酸乙酯(1∶1)混合溶液、乙酸乙酯、甲醇的顺序依次进行洗脱，得到12组分。采用高效液相色谱法[Mightysil RP-18 GP、6.0×250mm、用乙腈-水的(45∶55)混合溶液洗脱]，对用己烷-乙酸乙酯混合溶液(2∶1)洗脱后所得的C6组分(100.1mg)进行分析，分析结果表明得到了显示保持时间为15.2分钟的峰的组分。将该C6组分用氯仿-甲醇(1∶1)混合溶液进行重结晶，得到47.9g化合物1-6。该化合物的分析结果如下所示。
IR νmax(KBr)cm-1：1649(C＝O)
EI-MS m/z：315[M]+
1H-NMR(DMSO-d6)δ：3.74(C6-OCH3，s)，3.88(C4’-OCH3，s)，3.94(C7-OCH3，s)，6.83(C3-H，s)，6.92(C8-H，s)，7.10(C5’-H，d，J＝8.8Hz)，7.48(C2’-H，d，J＝2.2Hz)，7.57(8.5，C6’-H，dd，J＝2.4Hz)，9.44(C3’-OH，s)，12.90(C5-OH，s)，13C-NMR(DMSO-d6)δ：56.2(C6-OCH3)，56.9(C7-OCH3)，60.5(C6-OCH3)，92.0(C-8)，103.7(C-3)，105.4(C-10)，112.5(C-5’)，113.2(C-2’)，119.3(C-6’)，123.2(C-1’)，132.2(C-6)，147.0(C-3’)，151.7(C-4’)，152.0(C-5)，153.1(C-9)，159.1(C-7)，164.3(C-2)，182.5(C-4)
实施例2：5，4’-二羟基-6，7-二甲氧基黄酮(化合物1-19)的分离
将500g从高砂药业株式会社获得的茵陈蒿在甲醇中回流2小时，将提取液减压干固。在所得的提取物40.1g中取5.07g，将其涂满硅胶，采用中压色谱法，用己烷进行洗脱后(A组分)，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)混合溶液进行洗脱(B组分)，接着用乙酸乙酯洗脱(C组分)，然后再用甲醇进行洗脱(D组分)。在所得的C组分1.56g中取1.5g，采用中压色谱法，将其在254nm监测下用氯仿洗脱后按照氯仿-甲醇(99∶1)混合溶液、氯仿-甲醇(9∶1)混合溶液、甲醇的顺序依次进行洗脱，得到14组分。将用氯仿洗脱后所得的C6组分(112.4mg)溶于甲醇，得到C6甲醇不溶性组分(70mg)。采用高效液相色谱法[Mightysil RP-18GP、6.0×250mm、用乙腈-0.7甲酸溶液的(30∶70)混合溶液洗脱]，对该C6甲醇不溶性组分进行分析，分析结果显示出保持时间为28.0分钟的峰。精制该具有保持时间28.0分钟的峰的组分，得到化合物1-19。该化合物1-19的分析结果如下所示。
IR νmax(KBr)cm-1：1655(C＝O)
MS(ESI)m/z：315[M+H]+
1H-NMR(CDCL3)δ：3.87(OCH3，s)，3.99(OCH3，s)，6.57(C3-H，s)，6.62(C8-H，s)，6.96(C3’-H，C5’-H，dd，J＝8.8Hz，1.7)，7.79(C2’-H，C6’-H，dd，J＝8.8Hz，1.5)，9.89(C4’-OH，s)，12.88(C5-OH，s)
实施例3：2’-硝基-4’，5，5’，6，7，8-六甲氧基黄酮(化合物1-20)的合成
在冰浴中将831mg的4’，5，5’，6，7，8-六甲氧基黄酮溶于17ml浓硫酸中。向溶液中滴入1.7ml的5％发烟硝酸-硫酸混合液，在冰浴中搅拌30分钟。然后，将反应液倒入50ml的冰水中搅拌10分钟。吸滤所析出的晶体，将晶体用乙酸乙酯清洗。水层用50ml乙酸乙酯萃取2次。将所得的乙酸乙酯层在减压下浓缩干固。将得到的固体物质和先前的晶体合在一起，采用硅胶柱色谱法[关东化学制SiO2、用己烷-乙酸乙酯(1∶1)洗脱]进行分离。然后，将所要的组分在减压下浓缩干固，得到2’-硝基-4’，5，5’，6，7，8-六甲氧基黄酮(产量326mg：产率35％)。
IR νmax(KBr)cm-1：3489，2943，2838，1655，1530
MS(ESI)m/z：448[M+H]+
1H-NMR(CDCl3)δ：3.83(3H，s)，3.95(3H，s)，3.97(3H，s)，3.98(3H，s)，4.03(3H，s)，4.08(3H，s)，6.41(1H，s)，7.00(1H，s)，7.67(1H，s)实施例4：2’-氨基-4’，5，5’，6，7，8-六甲氧基黄酮化合物(1-5)的合成
将135g的2’-硝基-4’，5，5’，6，7，8-六甲氧基黄酮溶于5ml浓盐酸-甲醇(1∶1)混合液，加入51.6mg铁粉末，在室温下搅拌4小时。然后，向反应液中加入20ml精制水、20ml乙酸进行分液。用饱和碳酸氢纳水溶液将所得的水层的pH调整至8，用130ml乙酸乙酯萃取2次。将乙酸乙酯层用70ml饱和食盐水清洗后，用无水硫酸镁干燥。接着，滤去硫酸镁，用乙酸乙酯清洗后，将乙酸乙酯层在减压下浓缩干固。然后，采用硅胶柱色谱法[关东化学制SiO2、用己烷-乙酸乙酯(1∶1)洗脱]对所得的固体物质进行分离。将所要的组分在减压下浓缩干固，得到2’-氨基-4’，5，5’，6，7，8-六甲氧基黄酮(产量66mg：产率52％)。
IR νmax(KBr)cm-1：3496，3326，1624，1560，1520
MS(ESI)m/z：418[M+H]+
1H-NMR(CDCl3)δ：3.85(3H，s)，3.89(3H，s)，3.96(6H，s)，3.99(3H，s)，4.09(3H，s)，6.28(1H，s)，6.48(1H，s)，6.96(1H，s)
实施例5：4’，5-二羟基-3，3’，7-三甲氧基黄酮(化合物1-22)的分离在室温下，用甲醇对泰国产药物Pogostemon cablin的枝叶53.8g进行一周的提取，将提取液减压干固。在所得的提取物4.9g中取4.7g，采用中压色谱法，将其用己烷进行洗脱后(A组分)，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)混合溶液进行洗脱(B组分)，接着用乙酸乙酯洗脱(C组分)，然后再用甲醇进行洗脱(D组分)。在所得的B组分1.3g中取0.5g，采用离心色谱法，将其在254nm监测下用氯仿洗脱后，按照氯仿-甲醇(9∶1)混合溶液、甲醇的顺序依次进行洗脱，得到18组分。采用高效液相色谱法[Mightysil RP-18 GP、6.0×250mm、用乙腈-水的(45∶55)混合溶液洗脱]，对用氯仿-甲醇(9∶1)混合溶液洗脱后所得的B9组分(14.8mg)进行分析，分析结果表明得到了显示保持时间为14.5分钟的峰的组分。该化合物的分析结果如下所示。
MS(ESI)m/z：345[M+H]+，343[M-H]-
1H-NMR(CDCl3)δ：3.85(C3’-OCH3，s)，3.88(C7，-OCH3，s)，3.98(C3-OCH3，s)，6.36(C6-H，d，J＝2.4)，6.44(C8-H，d，J＝2.4)，7.09(C5，-H，d，J＝8.8)，7.67(C6’-H，dd，J＝8.8，2.0)，7.70(C2’-H，d，J＝2.0
13C-NMR(CDCl3)δ：55.8(C3’～OCH3)，56.1(C7-OCH3)，60.2(C3-OCH3)，92.2(C-8)，97.8(C-6)，106.0(C-10)，110.9(C-2’)，114.6(C-5’)，122.4(C-1’)，122.7(C-6’)，138.8(C-3)，146.3(C-3’)，148.3(C-4’)，155.9(C-2)，156.7(C-5)，162.0(C-9)，165.4(C-7)，178.7(C-4)
实施例6：5-羟基-3’，4’，7-三甲氧基黄酮(化合物1-23)的分离
将约300g中国产药物独角柑(Striga asiatica的全草)在甲醇中回流2小时，将提取液减压干固。在所得的提取物6.8g中取5.0g，采用中压色谱法，用己烷进行洗脱后(A组分)，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)混合溶液进行洗脱(B组分)，接着用乙酸乙酯洗脱(C组分)，然后再用甲醇进行洗脱(D组分)。采用离心色谱法，将所得的B组分480mg在254nm监测下用氯仿洗脱后，按照氯仿-甲醇(9∶1)混合溶液、甲醇的顺序依次进行洗脱，得到9组分。采用高效液相色谱法[MightysilRP-18 GP、6.0×250mm、用乙腈-甲醇-水的(45∶5∶50)混合溶液洗脱]，对用氯仿洗脱后所得的B3及B4组分(各42.3mg)进行分析，分别得到了保持时间为16.5分钟的峰。该化合物的分析结果如下所示。
MS(ESI)m/z：329[M+H]+
1H-NMR(CDCl3)δ：3.89，3.97，3.99(C7，C3’，C4’-OCH3，s)，6.38(C6-H，d，J＝2.4)，6.50(C8-H，d，J＝2.4)，6.59(C3-H，s)，6.98(C5’-H，d，J＝8.8)，7.34(C2’-H，d，J＝2.4)，7.53(C6’-H，dd，J＝8.8，2.4)，12.79(C5-OH，s)
13C-NMR(CDCl3)δ：55.8(C7-OCH3)，56.1(C3’-OCH3，C4’-OCH3)，92.7(C-2)，98.1(C-8)，104.7(C-3)，105.6(C-10)，108.9(C-2’)，111.2(C-5’)，120.1(C-6’)，123.8(C-1’)，149.3(C-3’)，152.3(C-4’)，151.7(C-4’)，157.7(C-9)，162.2(C-2)，164.0(C-5)，165.5(C-7)，182.4(C-4)
实施例7：3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黄酮(化合物1-24)和3’，4’，5，6，7-五甲氧基黄酮(化合物1-25)的分离
将约2Kg中国产药物桔皮(Citrus tangerina的果皮)在甲醇中回流2小时，将提取液减压干固。在所得的提取物356.5g中取35.2g，采用中压色谱法，用己烷进行洗脱后(A组分)，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)混合溶液进行洗脱(B组分)，接着用乙酸乙酯洗脱(C组分)，然后再用甲醇进行洗脱(D组分)。采用中压硅胶柱色谱法，将所得的C组分556mg在254nm监测下用氯仿洗脱后，按照氯仿-甲醇(98∶2)混合溶液、氯仿-甲醇(95∶5)混合溶液、甲醇的顺序依次进行洗脱，得到10组分。接着，采用中压硅胶柱色谱法，将用氯仿洗脱后所得的C3及C4组分(总计230mg)在254nm监测下用己烷洗脱后，按照己烷-乙酸乙酯(19∶1)混合溶液、己烷-乙酸乙酯(9∶1)混合溶液、己烷-乙酸乙酯(8∶2)混合溶液、己烷-乙酸乙酯(7∶3)混合溶液、己烷-乙酸乙酯(5∶5)混合溶液、己烷-乙酸乙酯(1∶2)混合溶液、乙酸乙酯、甲醇的顺序依次进行洗脱，得到10组分。采用高速液相色谱法[Mightysil RP-18 GP、6.0×250mm、用乙腈-5％甲酸-甲醇-水的(30∶10∶20∶40)混合溶液洗脱]，对用己烷-乙酸乙酯(5∶5)混合溶液洗脱后所得的C23G组分(90.0mg)及(1∶2)混合溶液洗脱后所得的C23J组分(5.2mg)进行分析，分析结果表明得到了显示保持时间为18.3分钟(化合物1-24)和10.6分钟(化合物1-25)的峰的组分。该化合物的分析结果如下所示。
化合物1-24
MS(ESI)m/z：433[M+H]+
1H-NMR(CDCl3)δ：3.91(OCH3，s)，3.96(OCH3，s)，3.98(OCH3×2，s)，3.99(OCH3，s)，4.02(OCH3，s)，4.11(OCH3，s)，7.03(C5’-H，d，J＝8.3)，7.82(C2’-H，d，J＝2.4)，7.85(C6’-H，dd，J＝8.3，2.4)
13C-NMR(CDCl3)δ：56.6，56.7(C3’，C4’-OCH3)，60.5，62.4，62.5，62.7，63.0(C3，C5，C6，C7，C8-OCH3)，107.4(C-2’)，111.7(C-5’)，115.2(C-10)，122.7(C-6’)，124.1(C-1’)，138.6(C-8)，141.5(C-6)，144.6(C-3)，147.4(C-5)，148.9(C-9)，149.5(C-3’)，151.8(C-2)，152.0(C-7)，153.8(C-4’)，174.6(C-4)
化合物1-25
MS(ESI)m/z：373[M+H]+，371[M-H]-
1H-NMR(CDCl3)δ：3.93(OCH3，s)，3.96(OCH3，s)，3.98(OCH3，s)，3.99(OCH3×2，s)，6.60(C3-H，s)，6.80(C8-H，s)，6.97(C5’-H，d，J＝8.8)，7.33(C2’-H，d，J＝2.0)，7.51(C6’-H，J＝8.3，2.0)
13C-NMR(CDCl3)δ：56.3，56.3，56.5(C7，C3’，C4’-OCH3)，61.7，62.5(C5，C6-OCH3)，96.4(C-8)，107.6(C-3)，108.8(C-2’)，111.3(C-5’)，112.9(C-10)，119.8(C-6’)，124.3(C-1’)，140.4(C-6)，139.3(C-3’)，152.0(C-4’)，152.6(C-9)，154.7(C-5)，157.8(C-7)，161.3(C-2)，177.4(C-4)
实施例8：5-羟基-6，7-二甲氧基黄酮-4’-葡糖苷(化合物1-26)的分离
在室温下，用甲醇对北海道产的チシマアザミ的茎叶55.0g进行一周的提取，将提取液减压干固。在所得的提取物13.5g中取5.1g，采用中压色谱法，将其用己烷进行洗脱后(A组分)，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)混合溶液进行洗脱(B组分)，接着用乙酸乙酯洗脱(C组分)，然后再用甲醇进行洗脱(D组分)。在所得的D组分3.8g中取2.0g，采用中压硅胶柱色谱法，在254nm监测下用氯仿洗脱后，按照氯仿-甲醇(9∶1)混合溶液、氯仿-甲醇(8∶1)混合溶液、氯仿-甲醇(3∶7)混合溶液、甲醇的顺序依次进行洗脱，得到10组分。用氯仿将由氯仿-甲醇(9∶1)混合溶液洗脱后所得的D4组分1.34g进行重结晶，得到白色晶体。然后，采用高效液相色谱法[Mightysil RP-18 GP、6.0×250mm、用乙腈-水的(20∶80)混合溶液洗脱]进行分析，分析结果表明得到了显示保持时间为27.6分钟的峰的化合物。
该化合物的分析结果如下所示。
MS(ESI)m/z：477[M+H]+
1H-NMR(DMSO-d6)δ：3.74(C7-CH3，s)，3.94(C6’-CH3，s)，4.59(t，J＝5.6)，5.04(d，J＝7.8)，5.06(d，J＝5.6)，5.13(d，J＝4.4)，5.37(d，J＝4.6)，6.98(C8-H，s)，6.96(C3-H，s)，7.20(C3’-H，C5’-H，d，J＝9.0)，8.07(C2’-H，C6’-H，d，J＝9.0)，12.9(C5-OH，s)
13C-NMR(DMSO-d6)δ：56.5(C7-OCH3)，60.0(C6-OCH3)，60.6(C-6’’)，69.6(C-4’’)，73.1(C-2’’)，76.5(C-3’’)，77.2(C-5’’)，91.7(C-8)，99.8(C-1’’)，103.6(C-3)，105.2(C-10)，116.6(C-3’，C-5’)，123.8(C-1’)，128.2(C-2’，C-6’)，131.9(C-6)，152.0(C-5)，152.7(C-9)，158.7(C-7)，160.3(C-4’)，163.4(C-2)，182.3(C-4)
实施例9：5-羟基-7-二甲氧基黄酮-4’-葡糖苷(化合物1-27)的制备
将化合物1-1(5，4’-二羟基-7-甲氧基黄酮)(100mg)溶于丙酮，向其中加入α-D-乙酰溴葡糖(647mg)和碳酸钾(231mg)，在剧烈的搅拌下进行一昼夜的沸腾回流。过滤除去不溶物，用氯仿清洗滤取物，合并滤洗液，将其在减压下浓缩干固。通过硅胶色谱法用氯仿/甲醇系对残留物进行精制。然后将其悬浮于无水甲醇，滴入28％的NaOMe，在室温搅拌0.5小时。向反应混合物中加入水，用离子交换树脂(磺酸-+H型)中和。过滤除去树脂，将溶剂在减压下浓缩干固，通过硅胶色谱法用氯仿/甲醇系进行精制，得到目标产物(产量10mg：产率6％)。
淡黄色结晶，MS(ESI)m/z：447[M+H]+
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.18(1H，t，J＝9Hz)，3.28(1H，t，J＝9Hz)，3.32(1H，t，J＝9Hz)，3.41(1H，m)，3.50(1H，dd，J＝6Hz，12Hz)，3.71(1H，dd，J＝2Hz，11Hz)，3.88(3H，s)，5.04(1H，d，J＝7Hz)，6.40(1H，d，J＝2Hz)，6.83(1H，d，J＝2Hz)，6.94(1H，s)，7.21(2H，d，J＝9Hz)，8.07(2H，d，J＝9Hz)
实施例10：4H，8H-苯并[1，2-b：3，4-b’]二吡喃-4-酮，2-(2，4-二羟基苯基)-5-羟基-8，8-二甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)(化合物1-28)的分离
在室温下，用甲醇对泰国产药物Jack Fruit Tree（Artocarpus heterophyllus的木部)169g进行一周的提取，将提取液减压干固。在所得的提取物8.1g中取4.7g，采用中压色谱法，将其用己烷进行洗脱后(A组分)，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)混合溶液进行洗脱(B组分)，接着用乙酸乙酯洗脱(C组分)，然后再用甲醇进行洗脱(D组分)。采用中压硅胶柱色谱法，将所得到的C组分3.2g在254nm监测下用氯仿洗脱后，按照氯仿-甲醇(98∶2)混合溶液、氯仿-甲醇(19∶1)混合溶液、氯仿-甲醇(9∶1)混合溶液、氯仿-甲醇(4∶1)混合溶液、氯仿-甲醇(2∶1)混合溶液、氯仿-甲醇(1∶1)混合溶液、甲醇的顺序依次进行洗脱，得到10组分。采用高效液相色谱法[Mightysil RP-18GP、6.0×250mm、用乙腈-水的(70∶30)混合溶液洗脱]，对用氯仿洗脱后所得的C4组分(217mg)进行分析，结果得到了保持时间为9.8分钟(化合物1-28)的峰。该化合物的分析结果如下所示。
化合物1-28
MS(ESI)m/z：421[M+H]+，419[M-H]-
1H-NMR(CD3OD)δ：1.36(CH3，s)，1.43(CH3×2，s)，1.58(CH3，s)，3.08(H，d，J＝6.8)，5.09(H，tt，J＝6.8，3.9)，5.66(C9-H，d，J＝9.8)，6.25(C6-H，s)，6.39(C5，-H，dd，J＝8.3，2.4)，6.40(C3’-H，s)，6.67(C10-H，d，J＝9.8)，7.06(C6’-H，d，J＝8.3)13C-NMR(CD3OD)δ：24.6(CH3)，25.6(CH3)，28.3(C8-CH3×2)，78.7(C-8)，95.4(C-6)，103.5(C-3’)，105.8，107.7(C-9)，113.0(C-1’)，116.1(C-5’)，121.8(C-3)，122.5，132.2(C-10)，132.5，157.0，157.5(C-2’)，158.7(C-4’)，160.3(C-7)，161.7(C-2)，163.4(C-5)，183.6(C-4)
实施例11：2’，4’，5-三羟基-7-甲氧基-6-(3-甲基-1-丁烯基)-3-(3-甲基-2-丁烯基)-黄酮(化合物1-29)的分离
在室温下，用甲醇对泰国产药物Jack Fruit Tree(Artocarpus heterophyllus的木部)169g进行一周的提取，将提取液减压干固。在所得的提取物8.1g中取4.7g，采用中压色谱法，将其用己烷进行洗脱后(A组分)，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)混合溶液进行洗脱(B组分)，接着用乙酸乙酯洗脱(C组分)，然后再用甲醇进行洗脱(D组分)。接着，采用高效液相色谱法[Mightysil RP-18 GP、6.0×250mm、用乙腈-水的(70∶30)混合溶液洗脱]，对用氯仿洗脱后所得的C4组分(217mg)进行分析，结果得到了保持时间为8.5分钟(化合物1-29)的峰。该化合物的分析结果如下所示。
化合物1-29
MS(ESI)m/z：437[M+H]+，435[M+H]-
1H-NMR(CD3OD)δ：1.02(C17，C18-CH3，d，J＝6.83)，1.33(C12-CH3，s)，1.52(C13-CH3，s)，2.33(C16-H，m)，3.02，3.04(C9-CH2，s)，3.77(C7-OCH3，s)，5.04(C10-H，tt，J＝5.4，1.5)，6.33(C8-H，s)，6.34(C5’-H，d，J＝9.3)，6.36(C3’-H，d，J＝3.4)，6.43(C14-H，dd，J＝16.1，1.0)，6.56(C15-H，dd，J＝16.1，7.3)，7.02(C6’-H，J＝8.3)13C-NMR(CD3OD)δ：18.5(C-13)，24.1(C-17，C-18)，25.8(C-9)，26.7(C-12)，35.2(C-16)，57.3(C7-OCH3)，91.5(C-8)，104.6(C-3’)，106.7(C-4a)，108.8(C-5’)，111.2(C-6)，114.1(C-1’)，118.0(C-14)，122.9(C-3)，123.7(C-10)，133.4(C-11)，133.5(C-6’)，143.5(C-15)，158.6(C-2’)，158.6(C-8a)，160.4(C-5)，162.6(C-4’)，164.3(C-2)，165.0(C-7)，184.6(C-4)
实施例12：2H，6H-苯并[1，2-b：5，4-b’]二吡喃-6-酮，7，8-二氢-5-羟基-8-(4-羟基苯基)-2，2-二甲基-10-(3-甲基-2-丁烯基)(化合物2-3)的分离
在室温下，用甲醇对泰国产药物Albizzia myriophylla的枝干60.0g进行一周的提取，将提取液减压干固。在所得的提取物4.4g中取3.80g，采用中压色谱法，将其用己烷进行洗脱后(A组分)，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)混合溶液进行洗脱(B组分)，接着用乙酸乙酯洗脱(C组分)，然后再用甲醇进行洗脱(D组分)。接着，采用高效液相色谱法[Mightysil RP-18 GP、6.0×250mm、用乙腈-水的(70∶30)混合溶液洗脱]，对所得的B组分(1.2g)进行分析，分析结果表明得到了显示保持时间为15.2分钟的峰的组分。该化合物的分析结果如下所示。
MS(ESI)m/z：407[M+H]+，405[M-H]-
1H-NMR(CDCl3)δ：1.43，1.45(C2’’’-CH3×2，s)，1.65(C3’’-CH3×2，s)，2.80(C3-H，dd，J＝17.1，3.2)，3.39(C3-H，dd，J＝17.1，2.9)，3.21(C1’’-H2，d，J＝7.3)，5.14(C2’’-H，t，J＝7.3)，5.34(C2-H，dd，J＝12.7，2.9)，5.50(C3-‘’’H，d，J＝10.0)，6.63(C4’’’-H，d，J＝10.0)，6.87(C3’-H，C5’-H，d，J＝8.8)，7.32(C2’-H，C6’-H，d，J＝8.8)
13C-NMR(CDCl3)δ：17.8(C-5’’-CH3)，21.5(C-1’’)，25.8(C4’’-CH3)，28.3(C-6’’’-CH3)，28.4(C-5’’’-CH3)，43.2(C-3)，78.1(C-2’’’)，78.5(C-2)，102.7(C-10)，102.8(C-6)，108.6(C-8)，115.5(C-3’，C-5’)，115.7(C-4’’’)，122.5(C-2’’)，126.0(C-1’)，127.7(C-2’，C-6’)，131.1(C-3’’’)，155.8(C-4’)，156.6(C-9)，159.3(C-5)，160.0(C-7)，196.4(C-4)
实施例13：6H，7H-[1]苯并吡喃并[4，3-b][1]苯并吡喃-7-酮，3，8，10-三羟基-9-(3-甲基-1-丁烯基)-6-(2-甲基-1-丙烯基)(化合物5-1)的分离
在室温下，用甲醇对泰国产药物Jack Fruit Tree(Artocarpus heterophyllus的木部)169g进行一周的提取，将提取液减压干固。在所得的提取物8.1g中取4.7g，采用中压色谱法，将其用己烷进行洗脱后(A组分)，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)混合溶液进行洗脱(B组分)，接着用乙酸乙酯洗脱(C组分)，然后再用甲醇进行洗脱(D组分)。采用中压硅胶柱色谱法，将所得到的C组分3.2g在254nm监测下用氯仿洗脱后，按照氯仿-甲醇(98∶2)混合溶液、氯仿-甲醇(19∶1)混合溶液、氯仿-甲醇(9∶1)混合溶液、氯仿-甲醇(4∶1)混合溶液、氯仿-甲醇(2∶1)混合溶液、氯仿-甲醇(1∶1)混合溶液、甲醇的顺序依次进行洗脱，得到10组分。采用高效液相色谱法[Mightysil RP-18GP、6.0×250mm、用乙腈-水的(70∶30)混合溶液洗脱]，对用氯仿洗脱后所得的C3组分进行分析，结果得到了保持时间为10.8分钟(化合物5-1)的峰。该化合物的分析结果如下所示。
化合物5-1
MS(ESI)m/z：421[M+H]+
1H-NMR(CD3OD)δ：1.92(CH3×2，d，J＝6.6)，1.70(CH3，d，J＝1.2)，1.95(CH3，d，J＝1.2)，2.41(CH，m)，5.40(CH＝，dt，J＝9.5，1.2)，6.14(C6-H，d，J＝9.3)，6.30(C2-H，d，J＝2.2)，6.42(C11-H，s)，6.50(C4-H，dd，J＝8.5，2.2)，6.53(＝CH，dd，J＝16.1，1.0)，6.68(CH＝，dd，J＝16.1，7.0)，7.59(C5-H，d，J＝8.5)
13C-NMR(CD3OD)δ：19.3(CH3)，23.9(CH3×2)，26.6(CH3)，35.0，67.3，71.3，95.0(C-11)，105.6(C-4)，106.0，109.3，110.9，111.6，118.0(C-2)，123.2，126.8(C-5)，140.4，143.2，156.9，157.6(C-5)，160.1，161.2(C-8)，163.6(C-3)，165.3(C-10)，180.4(C-7)
实施例14 SN-38耐性A549细胞的确立
对人非小细胞肺癌A549细胞使用含有10％FBS、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的Ham’s F-12培养基(10％FBS/Ham’s F-12)在5％CO2、37℃的条件下进行继代培养。逐步(4～10ng/ml)增加培养基中的SN-38浓度，对A549细胞进行2个月的继代培养，选择出SN-38耐性A549细胞。然后，采用有限稀释法对该SN-38耐性A549细胞进行克隆，确立6株克隆化SN-38耐性A549细胞(A549/SN-38-1～6)。
实施例15 A549/SN-38细胞的抗癌剂感受性试验
将A549或A549/SN-38-1～6各细胞悬浮于10％FBS/Ham’s F-12，接种于96孔微孔板，在5％CO2、37℃的条件下进行培养(2×103cells/50μl/well)。培养一晚后，加入50μl溶有抗癌剂的10％FBS/Ham’s F-12，在5％CO2、37℃的条件下培养48小时。培养后，使用活细胞测定用试剂[TetraColor ONE(商标名)，生化学工业制]，按照附带的操作程序测定活细胞数。A549细胞及6株A549/SN-38细胞对各种抗癌剂的感受性示于表6和图1。其中，IC50值是抑制细胞增殖50％时的抗癌剂的浓度。相对耐性度是A549/SN-38细胞的IC50值除以A549细胞的IC50值所得的值，该值越大，表示耐性获得的程度越高。A549/SN-38细胞对作为BCRP的基质的SN-38及米托蒽醌表现出特别强的耐性。
表6
抗癌剂   A549                          A549/SN-38
    1     2     3     4     5     6
                         IC50μg/ml(相对耐性度)
SN-38 0.013  0.12(9.2) 0.10(7.5) 0.13(9.7) 0.10(7.7) 0.10(7.7) 0.10(7.4)
紫杉醇 0.0049  0.0098(2.0) 0.012(2.4) 0.0013(2.7) 0.014(2.8) 0.0061(1.2) 0.0071(1.4)
依托泊苷 0.90  0.27(0.3) 0.80(1.0) 1.6(1.9) 3.5(4.0) 2.3(2.7) 1.0(1.1)
顺铂 18.6  15.1(0.8) 16.5(0.9) 15.1(0.8) 17.0(0.9) 15.9(0.9) 16.8(0.9)
5-氟脲嘧啶 2.1  4.3(2.0) 1.3(0.6) 0.69(0.3) 0.91(0.4) 1.7(0.8) 1.0(0.5)
吉西他滨 0.0090  0.0039(0.4) 0.0053(0.6) 0.0040(0.4) 0.0032(0.4) 0.0040(0.4) 0.0040(0.4)
阿霉素 0.10  0.19(1.9) 0.14(1.4) 0.12(1.3) 0.22(2.3) 0.057(0.6) 0.049(0.5)
丝裂霉素C 0.11  0.13(1.2) 0.11(1.1) 0.0029(0.3) 0.15(1.4) 0.11(1.0) 0.047(0.4)
实施例16 A549/SN-38细胞的RT-PCR分析
采用RT-PCR法对A549细胞、6株A549/SN-38细胞及已知表达BCRP的人乳癌MCF-7细胞中的各种药物转运蛋白质的mRNA的表达水平进行分析。用RNA提取用试剂[ISOGEN(商标名)、ニツポソヅ一ソ制]从细胞中提取全部的RNA，使用RT-PCR用试剂[Ready To Go RT-PCR Beads(商标名)、Amershampharmacia biotech制]和热循环仪[iCycler(商标名)、BIO-RAD制]，按照附带的操作程序进行RT-PCR(总RNA：0.5μg)。PCR产物用2％琼脂糖凝胶进行电泳后，实施溴化乙啶染色，其后用透射仪进行检测。此外，使用实时RT-PCR用试剂[SYBR Green RT-PCR Reagents(商标名)，Applied Biosystems制]和PCR产物自动检测/定量***[ABI PRISM7000(商标名)、Applied Biosystems制]，按照附带的操作程序采用实时RT-PCR法进行定量的分析(总RNA 0.1μg)。另外，与BCRP、MDR1、MRP1、MRP2、MRP3和内在性控制基因G3PDH相对应的各PCR引物分别按照公知的mRNA碱序列(登录号AF098951、AF016535、L05628、U63970、AF009670、M33197)进行设计。RT-PCR的结果示于图2，实时RT-PCR的结果示于图3。与A549细胞相比，所有的6株A549/SN-3 8细胞中BCRP的表达都显著增加。另一方面，与BCRP一样以SN-38为基质的MRP2的表达水平则没有发现大的差异。此外，其它的药物转运蛋白质也一样，在A549细胞和A549/SN-38细胞间没有发现其表达水平的差异。该结果意味着，BCRP与A549/SN-38细胞的抗癌剂耐性机制有关。通过该RT-PCR分析还确认人乳癌MCF-7细胞中的BCRP表达。另一方面，除了药物转运蛋白质的表达之外，还通过蛋白印迹法，以有关拓朴异构酶I活性的DNA弛缓反应为指标研究了拓朴异构酶I、拓朴异构酶II、Bc1-2、Bax和IκBα的表达，但没有得到显示它们与A549/SN-38细胞的抗癌剂耐性机制有关的数据。
实施例17：A549/SN-38细胞的抗癌剂蓄积量
向1ml悬浮着A549细胞或A549/SN-38-4细胞(4×106cells/ml)的10％FBS/RPMI1640中加入1μl的SN-38 DMSO溶液(最终浓度：300ng/ml)，于37℃恒温60分钟后，进行离心分离(2℃、1400xg、1min)除去上清液。在沉淀出的细胞中加入冰冷的PBS，使其再次悬浮后进行离心分离(2℃、1400xg、1min)，清洗细胞。再重复进行一次该清洗操作后，加入375μl PBS，通过进行超声波处理将细胞破坏。在该细胞破坏液中加入375μl甲醇和15μl的10％硫酸锌溶液，搅拌后进行离心分离(2℃、12500xg、5min)，回收上清液。将回收的上清液分配到荧光强度测定用的白色96孔微孔板后(200μ/well)，利用微孔板荧光光度计[SPECTRA max GEMINI XS(商标名)，Molecular Devices制]测定上清液中的SN-38和SN-38葡糖醛酸轭合体量(SN-38：激励波长380nm，测定波长560nm；SN-38葡糖醛酸轭合体：激励波长370nm，测定波长430nm)，算出细胞内的蓄积量。其结果如图4所示，A549/SN-38-4细胞的SN-38蓄积量减少到A549细胞中的蓄积量的约1/5。该结果进一步佐证BCRP与A549/SN-38细胞的抗癌剂耐性机制有关。另一方面，在两种细胞中基本没有检测出SN-38葡糖醛酸轭合体，这表示葡糖醛酸轭合活性与耐性机制无关。
实施例18：类黄酮化合物对A549/SN-38-4细胞的抗癌剂耐性的克服作用
将A549或A549/SN-38-4细胞悬浮于10％FBS/Ham’s F-12，接种于96孔微孔板，在5％CO2、37℃的条件下进行培养(2×103cells/50μl/well)。培养一晚后，分别加入类黄酮化合物和溶有SN-38的10％FBS/Ham’s F-12各25μl，在5％CO2、37℃的条件下培养48小时。培养后，使用TetraColor ONE，按照附带的操作程序测定活细胞数。各类黄酮化合物的耐性克服效果以EC50值示于表7。EC50值是使相对耐性度降低50％时的类黄酮化合物的浓度。其结果是，类黄酮化合物对A549/SN-38-4细胞的SN-38耐性显示出极强的克服作用。另一方面，在能够克服耐性的浓度范围内，类黄酮化合物本身不会影响A549细胞和A549/SN-38-4细胞的增殖。该结果表明，本发明的类黄酮化合物是通过抑制BCRP来克服癌细胞的抗癌剂耐性的。
表7
化合物     耐性克服作用EC50(μg/ml)
1-11-21-31-41-51-61-71-81-91-101-111-121-131-141-151-161-171-181-191-201-211-221-231-24       0.0170.0480.100.0300.0810.0170.130.460.120.170.160.0740.110.00780.160.0980.0600.140.0150.750.520.0460.00700.054
  1-251-261-271-281-292-12-22-33-13-23-33-43-53-63-73-83-93-104-14-25-1     0.530.140.0422.00.230.150.480.0670.0400.230.160.0230.0400.00740.650.790.940.970.330.840.18
实施例19类黄酮化合物使MCF-7细胞对抗癌剂的感受性增强的作用
使用已知表达BCRP的人乳癌MCF-7细胞(Blood 99，3763-3770(2002))，研究类黄酮化合物在癌细胞对抗癌剂的感受性上所带来的作用。将MCF-7细胞悬浮于10％FBS/RPMI1640，再接种于96孔微孔板，在5％CO2、37℃的条件下进行培养(3×103cells/50μl/well)。培养一晚后，分别加入类黄酮化合物和溶有SN-38的10％FBS/RPMI1640各25μl，在5％CO2、37℃的条件下培养48小时。培养后，使用TetraColor ONE，按照附带的操作程序测定活细胞数。受类黄酮化合物的作用MCF-7细胞对SN-38的感受性的变化以IC50值(将细胞增殖抑制50％时的SN-38的浓度)表示，示于表8。其结果是，类黄酮化合物增强了MCF-7细胞对SN-38的感受性。另一方面，在能够增强感受性的浓度范围内，类黄酮化合物本身不会影响MCF-7细胞的增殖。该结果表明，本发明的类黄酮化合物是通过抑制BCRP来增强癌细胞对抗癌剂的感受性的。
表8
化合物 化合物浓度(μg/ml)
0 0.1     1.0
1-11-21-41-141-192-13-13-43-6   SN-38：IC50(μg/ml)0.0210.0140.0370.0240.0210.0310.0160.0270.059 0.0140.0130.0120.0150.0140.0220.0150.0320.023 0.0063＜0.0030.00610.00770.00380.0110.00850.0130.011
实施例20类黄酮化合物对人BCRP基因导入小鼠白血病P388细胞的抗癌剂耐性的克服作用
将小鼠白血病P388细胞或人BCRP基因导入P388细胞(P388/BCRP细胞，取自财团法人癌研究会癌化学疗法中心  杉本芳一氏)悬浮于10％FBS/RPMI1640，再接种于96孔微孔板后(1×104cells/50μl/well)，分别加入类黄酮化合物和溶有SN-38的10％FBS/RPMI1640各25μl，在5％CO2、37℃的条件下培养48小时。培养后，使用TetraColor ONE，按照附带的操作程序测定活细胞数。其结果示于图5。类黄酮化合物对P388/BCRP细胞的SN-38耐性表现出极强的克服作用。而在P388细胞对SN-38的感受性上没有影响。该结果证明，本发明的类黄酮化合物具有BCRP抑制作用。
实施例21：类黄酮化合物对MES-SA/Dx5细胞的多剂耐性的作用
将人子宫癌MES-SA细胞或高水平表达P-糖蛋白质而获得多剂耐性的MES-SA/Dx5细胞[Cancer Res.45，4091-4096(1985)]悬浮于10％FBS/DMEM，再接种于96孔微孔板，在5％CO2、37℃的条件下进行培养(3×103cells/50μl/well)。培养一晚后，分别加入类黄酮化合物和溶有紫杉醇的10％FBS/DMEM各25μl，在5％CO2、37℃的条件下培养48小时。培养后，使用TetraColor ONE，按照附带的操作程序测定活细胞数。各类黄酮化合物对多剂耐性的作用以ECx值表示，示于表9。EC50值是使相对耐性度降低50％时的类黄酮化合物的浓度。其结果是，在所研究的浓度范围内，类黄酮化合物对MES-SA/Dx5细胞的紫杉醇耐性没有影响。此外，类黄酮化合物本身对MES-SA细胞和MES-SA/Dx5细胞的增殖没有影响。该结果表明，本发明的类黄酮化合物对P-糖蛋白质没有作用，对BCRP具有特异性。
表9
    化合物   耐性克服作用EC50(μg/ml)
    1-11-21-31-41-51-61-71-81-91-101-111-121-131-141-15     ＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0
   1-161-171-181-191-201-212-12-23-13-23-33-43-53-63-73-83-93-104-14-2    ＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0＞1.0
实施例22：类黄酮化合物对BCRP表达细胞的抗癌剂蓄积量的作用
向1ml悬浮着P388细胞和P388/BCRP细胞(1×107cells/ml)或MCF-7细胞(3×106cells/ml)的10％FBS/RPMI1640中加入类黄酮化合物和SN-38(最终浓度：500ng/ml)，于37℃恒温60分钟后，进行离心分离(2℃、1400xg、1min)除去上清液。向沉淀出的细胞中加入冰冷的10％FBS/RPMI1640，使其再次悬浮后，进行离心分离(2℃、1400xg、1min)，清洗细胞。再重复进行一次该清洗操作后，加入375μl PBS，通过进行超声波处理将细胞破坏。在该细胞破坏液中加入375μl甲醇和15μl 10％硫酸锌溶液，搅拌后进行离心分离(2℃、12500xg、5min)，回收上清液。将回收的上清液分配到荧光强度测定用的白色96孔微孔板后(200μ/well)，利用微孔板荧光光度计测定上清液中的SN-38量(SN-38：激励波长380nm，测定波长560nm)，算出细胞内的蓄积量。其结果如图6所示，本发明的类黄酮化合物使P388/BCRP细胞的SN-38细胞内蓄积量增加。还有，如图7所示，本发明的类黄酮化合物使MCF-7细胞的SN-38蓄积量增加。该结果表明，本发明的类黄酮化合物可抑制BCRP，使抗癌剂在细胞内的存在量增加。
实施例23：类黄酮化合物的体内的抗癌剂耐性克服作用
在6周龄的CDF1类、雌小鼠(5只/组)的腹腔内植入P388细胞或P388/BCRP(1×106cells/小鼠)，从肿瘤植入后的第1天至第10天，1天1次将类黄酮化合物和盐酸依立替康(CPT-11)投入腹腔内，共计10次。类黄酮化合物以悬浮于乙醇、聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单油酸酯[Tween 80(商标名)、东京化成工业制]和5％葡萄糖混合液(乙醇/Tween 80/5％葡萄糖＝5∶5∶90)的形式投入，CPT-11以溶于生理盐水的形式投入，而在对照组中仅投入溶剂。调查植入肿瘤后的小鼠的生存天数，按照下式求出寿命延长率T/C(％)，判断抗肿瘤效果。
寿命延长率T/C(％)＝(给药组小鼠的平均生存天数)÷(对照组小鼠的平均生存天数)×100
结果示于表10。该结果表明，本发明的类黄酮化合物在体内也可抑制BCRP，发挥抗癌剂耐性克服效果。
表10
化合物   给药量(mg/kg/day) 生存天数平均±标准偏差  T/C(％)
    化合物     CPT-11
1-141-153-5     100100100     202020  18.4±4.518.2±3.918.4±0.5  153152153
溶剂溶剂     00     200  14.6±0.512.0±0.7  122100
实施例24
混合下述成分，将该混合物制成药片。
表11
    化合物1     100mg
    乳糖     100mg
    马铃薯淀粉     39mg
    微晶纤维素     30mg
    合成硅酸铝     30mg
    硬脂酸钙     1mg
    总量(1片)     300mg
利用本发明，能够克服与BCRP有关的抗癌剂耐性。此外，对于原本就表达BCRP的癌症有增强抗癌剂的效果。此外，有望提高抗癌剂的生物利用度，提高癌症化疗法的治疗成绩。

Claims (7)

1.以下式(1)、(2)、(3)、(4)或(5)表示的类黄酮化合物或其苷、酯或盐为有效成分的乳癌耐性蛋白抑制剂，
式中，R1表示氢原子、羟基、卤原子、低级烷氧基或低级烷基，7个R2可以相同也可以不同，表示氢原子、羟基、低级烷氧基、低级烷基、低级链烯基或糖残基，或者也可以和相邻的R1一起形成为可被低级烷基取代的吡喃环，R3表示氢原子、羟基、卤原子、低级烷基、低级烷氧基、氨基或硝基；
Figure A2004800032930002C2
式中，R4表示氢原子、羟基、卤原子、低级烷氧基、低级烷基或低级链烯基，7个R5可以相同也可以不同，表示氢原子、羟基、低级烷氧基或低级烷基，或者相邻的2个R5可以一起形成为可被低级烷基取代的吡喃环，R6表示氢原子、羟基、卤原子、低级烷氧基、低级烷基、氨基或硝基；
Figure A2004800032930002C3
式中，R7表示氢原子、羟基、卤原子、低级烷氧基或低级烷基，2个R8可以相同也可以不同，表示氢原子、羟基、低级烷氧基或低级烷基，R9表示氢原子、羟基、卤原子或低级烷氧基，5个R10可以相同也可以不同，表示氢原子、羟基或低级烷氧基；
式中，3个R11可以相同也可以不同，表示氢原子、羟基或低级烷氧基；
式中，R12表示氢原子或低级链烯基，R13表示氢原子或羟基，R14表示表示氢原子。
2.以权利要求1所述的类黄酮化合物(1)、(2)、(3)、(4)或(5)、其苷、酯或盐为有效成分的针对获得了与BCRP有关的耐性的癌症的抗癌剂耐性克服剂，或针对表达BCRP、对抗癌剂的感受性低的癌症的抗癌剂耐性克服剂。
3.抗癌剂，其特征在于，含有权利要求1所述的类黄酮化合物(1)、(2)、(3)、(4)或(5)或其苷、酯或盐及可成为BCRP的基质的抗癌剂。
4.类黄酮化合物，其特征在于，由下式(6)
Figure A2004800032930003C3
表示，式中，R15表示氨基或硝基。
5.如权利要求4所述的类黄酮化合物，其特征还在于，式(6)中的R15表示硝基。
6.如权利要求4所述的类黄酮化合物，其特征还在于，式(6)中的R15表示氨基。
7.高水平表达BCRP的7-乙基-10-羟基喜树碱(SN-38)耐性人非小细胞肺癌A549细胞。
CNA2004800032933A 2003-02-04 2004-02-03 乳癌耐性蛋白抑制剂 Pending CN1744887A (zh)

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Cited By (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102180853A (zh) * 2011-03-09 2011-09-14 中国科学院昆明植物研究所 抗ev71的黄酮类化合物，及其在制药中的应用
CN102267888A (zh) * 2011-06-14 2011-12-07 黑龙江大学 一种查耳酮衍生物及其制备方法和作为诱导肿瘤细胞凋亡诱导剂的应用
CN102861093A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 吴俊华 Houttuynoid B在治疗结直肠癌药物中的应用
CN102861069A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 南京大学 Houttuynoid B在治疗喉癌药物中的应用
CN102861089A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 吴俊华 Houttuynoid B在治疗肝癌药物中的应用
CN102861070A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 南京大学 Houttuynoid E在治疗舌癌药物中的应用
CN102861058A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 吴俊华 Houttuynoid D在治疗胆管癌药物中的应用
CN102861049A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 吴俊华 Houttuynoid A在治疗肝癌药物中的应用
CN102861056A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 吴俊华 Houttuynoid A在治疗子宫内膜癌药物中的应用
CN102861065A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 吴俊华 Houttuynoid E在治疗胃癌药物中的应用
CN102872113A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid A在治疗白血病药物中的应用
CN102872108A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid A在治疗胆管癌药物中的应用
CN102872125A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid C在治疗***药物中的应用
CN102872078A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid C在治疗白血病药物中的应用
CN102872135A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid D在治疗肾癌药物中的应用
CN102872134A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid D在治疗喉癌药物中的应用
CN102872143A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid D在预防或治疗胰腺纤维化的药物中的应用
CN102872098A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid A在预防、治疗肾功能不全药物中的应用
CN103877069A (zh) * 2012-12-21 2014-06-25 香港中文大学 微RNA-34a的小分子调节剂
CN110151751A (zh) * 2019-05-14 2019-08-23 山东中医药大学 岩豆素在制备用于防治与5-脂氧合酶相关疾病的药物中的应用
CN110818755A (zh) * 2019-11-28 2020-02-21 海南大学 一种金花茶中提取的化合物及其制药应用
US10865176B2 (en) 2012-12-21 2020-12-15 The Chinese University Of Hong Kong Small molecule modulators of microRNA-34a
CN113045527A (zh) * 2021-03-22 2021-06-29 广东省科学院动物研究所 二氢色原酮衍生物及其合成方法和用途
CN115813991A (zh) * 2022-11-29 2023-03-21 三峡大学 一种柑橘属果实提取物在制备治疗乳腺癌内分泌药物中的应用

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006069910A (ja) * 2004-08-31 2006-03-16 Yoshiichi Sugimoto 抗癌剤耐性克服剤
JP5380069B2 (ja) * 2005-03-11 2014-01-08 ハワード フローリー インスティチュート フラボノイド化合物およびその使用
CA2602467C (en) 2005-03-30 2014-09-02 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Bcrp/abcg2 inhibitor
JP5224321B2 (ja) * 2007-08-23 2013-07-03 ヤスハラケミカル株式会社 ポリメトキシフラボン類の製造方法、その方法で得られるポリメトキシフラボン類、およびポリメトキシフラボン類含有有機酸水溶液
WO2009070331A2 (en) * 2007-11-27 2009-06-04 Stc.Unm Compounds and methods for the selective inhibition of abcb1, abcc1 and abcg2 transporters and the treatment of cancers, especially drug resistant cancers and high throughput flow cytometry assay to detect selective inhibitors
WO2009072267A1 (ja) 2007-12-03 2009-06-11 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Ａｂｃｇ２阻害剤
JP5246615B2 (ja) * 2008-02-29 2013-07-24 国立大学法人広島大学 抗腫瘍剤
FR2941456B1 (fr) * 2009-01-26 2011-03-04 Univ Claude Bernard Lyon Nouveaux composes de type azapeptide ou azapeptidomimetrique inhibiteurs de bcrp et/ou p-gp.
KR101817635B1 (ko) * 2010-10-22 2018-01-11 비쭈리 헬스 사이언스 엘엘씨 난용성 화합물의 용해도를 증가시키는 방법과 이와 같은 화합물의 제형을 제조하는 방법 및 사용하는 방법
US9593062B2 (en) * 2011-09-07 2017-03-14 Deutschland Krebsforschungszentrum Means and methods for treating and/or preventing natural AHR ligand-dependent cancer
US9486490B2 (en) 2012-08-31 2016-11-08 Korea Research Institute Of Bioscience And Biotechnology Composition for preventing or treating cancer containing extracts of artocarpus altilis fruits, leaves, or stems, or fractions thereof as active ingredients
ITRM20130366A1 (it) * 2013-06-25 2014-12-26 Univ Roma La Sapienza Multitarget hedgehog pathway inhibitors and uses thereof
WO2020255156A1 (en) * 2019-06-19 2020-12-24 Dr Reddy's Institute Of Life Sciences Heterocyclic compounds as lipoxygenase inhibitors
JP7058026B2 (ja) 2020-04-22 2022-04-21 ネオファーマジャパン株式会社 新型コロナウイルス感染症（ｃｏｖｉｄ－１９）の治療及び／又は予防剤

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4473692A (en) * 1981-09-04 1984-09-25 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Camptothecin derivatives and process for preparing same
JP2514500B2 (ja) * 1991-09-14 1996-07-10 呉羽化学工業株式会社 多剤耐性抑制剤及び発現阻害剤
US5336685A (en) * 1993-04-12 1994-08-09 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Use of flavonoids to treat multidrug resistant cancer cells
JP4187412B2 (ja) * 1998-02-05 2008-11-26 ユニバーシテイ・オブ・メリーランド・ボルチモア 乳癌耐性蛋白質（ｂｃｒｐ）とそれをコードするｄｎａ
SK12912000A3 (sk) * 1998-02-26 2001-08-06 Aventis Pharmaceuticals Inc. 6,9-disubstituované 2-[trans-(4-aminocyklohexyl)amino]puríny, farmaceutické prostriedky obsahujúce tieto zlúčeniny a použitie
EP1119353A4 (en) * 1998-10-06 2002-08-28 Kgk Synergize Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING NEOPLASTIC DISEASES USING LIMOCITRIN AND 5-DESMETHYL-SINENSETINE RELATED COMPOUNDS
AU6366000A (en) * 1999-07-23 2001-02-13 Colorado State University Research Foundation Multidrug resistance pump inhibitors and uses thereof
GB9920912D0 (en) * 1999-09-03 1999-11-10 Indena Spa Novel derivatives of flavones,xanthones and coumarins
EP1159963A1 (en) * 2000-06-02 2001-12-05 Protein Technologies International, Inc. Composition for and method of preventing or treating breast cancer
JP2001342132A (ja) * 2000-06-05 2001-12-11 Protein Technol Internatl Inc 乳癌を予防し、もしくは治療するための組成物およびそのための方法
JP2003040781A (ja) * 2001-07-26 2003-02-13 Ezaki Glico Co Ltd 飲食物および医薬品

Cited By (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102180853A (zh) * 2011-03-09 2011-09-14 中国科学院昆明植物研究所 抗ev71的黄酮类化合物，及其在制药中的应用
CN102267888A (zh) * 2011-06-14 2011-12-07 黑龙江大学 一种查耳酮衍生物及其制备方法和作为诱导肿瘤细胞凋亡诱导剂的应用
CN102267888B (zh) * 2011-06-14 2014-02-26 黑龙江大学 制备查尔酮衍生物的方法
CN102861049A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 吴俊华 Houttuynoid A在治疗肝癌药物中的应用
CN102872143A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid D在预防或治疗胰腺纤维化的药物中的应用
CN102861070A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 南京大学 Houttuynoid E在治疗舌癌药物中的应用
CN102861058A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 吴俊华 Houttuynoid D在治疗胆管癌药物中的应用
CN102861069A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 南京大学 Houttuynoid B在治疗喉癌药物中的应用
CN102861056A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 吴俊华 Houttuynoid A在治疗子宫内膜癌药物中的应用
CN102861065A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 吴俊华 Houttuynoid E在治疗胃癌药物中的应用
CN102872113A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid A在治疗白血病药物中的应用
CN102872108A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid A在治疗胆管癌药物中的应用
CN102872125A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid C在治疗***药物中的应用
CN102872078A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid C在治疗白血病药物中的应用
CN102872135A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid D在治疗肾癌药物中的应用
CN102872134A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid D在治疗喉癌药物中的应用
CN102861089A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 吴俊华 Houttuynoid B在治疗肝癌药物中的应用
CN102872098A (zh) * 2012-10-27 2013-01-16 吴俊华 Houttuynoid A在预防、治疗肾功能不全药物中的应用
CN102872113B (zh) * 2012-10-27 2013-08-28 吴俊华 Houttuynoid A在治疗白血病药物中的应用
CN102872134B (zh) * 2012-10-27 2013-10-23 吴俊华 Houttuynoid D在治疗喉癌药物中的应用
CN102872143B (zh) * 2012-10-27 2013-12-18 吴俊华 Houttuynoid D在预防或治疗胰腺纤维化的药物中的应用
CN102861093A (zh) * 2012-10-27 2013-01-09 吴俊华 Houttuynoid B在治疗结直肠癌药物中的应用
CN103877069A (zh) * 2012-12-21 2014-06-25 香港中文大学 微RNA-34a的小分子调节剂
US10865176B2 (en) 2012-12-21 2020-12-15 The Chinese University Of Hong Kong Small molecule modulators of microRNA-34a
CN110151751A (zh) * 2019-05-14 2019-08-23 山东中医药大学 岩豆素在制备用于防治与5-脂氧合酶相关疾病的药物中的应用
CN110818755A (zh) * 2019-11-28 2020-02-21 海南大学 一种金花茶中提取的化合物及其制药应用
CN110818755B (zh) * 2019-11-28 2022-11-11 海南大学 一种金花茶中提取的化合物及其制药应用
CN113045527A (zh) * 2021-03-22 2021-06-29 广东省科学院动物研究所 二氢色原酮衍生物及其合成方法和用途
CN115813991A (zh) * 2022-11-29 2023-03-21 三峡大学 一种柑橘属果实提取物在制备治疗乳腺癌内分泌药物中的应用

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