CN1729861A - 一种多肽食品及其生产方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种多肽食品及其生产方法，它由吸血类水蛭提取的酸性多肽和辅料组成，辅料包括一切可作为食品用的物料。该食品具有调节机体生理功能和为机体提供营养的双重功能，还具有抗凝和溶栓作用，并能透过血脑屏障而发挥独特的功效，是一种极具市场发展潜力的食品。

Description

一种多肽食品及其生产方法

技术领域

本发明涉及一种食品，特别是一种用吸血水蛭提取的酸性多肽做成的食品。

背景技术

多肽是由氨基酸构成但又不同于蛋白质的中间物质，它具有蛋白质的特性，但比蛋白质简单、分子量小，因而其活性高，在微量或低浓度的情况下，多肽都能发挥其独特的生理作用。

多肽具有如下的特点：

多肽优于氨基酸，一是较氨基酸吸收快速；二是以完整的形式被机体吸收；三是主动吸收(氨基酸属被动吸收)；四是低耗，与氨基酸比较，多肽吸收具有低耗或不需要消耗能量的特点，多肽通过十二指肠吸收后，直接进入血液循环，将自身能量营养输送到人体各个部位；五是多肽吸收较氨基酸，具有不饱和的特点；六是氨基酸只有20种，功能可数，而多肽以氨基酸为底物，可合成上千上万种，功能各异。七是各种多肽之间运转无竞争性和不存在抑制性。

作为基础营养物质，多肽比氨基酸更易吸收，生物利用度高。某些低分子的肽类，还同时具有防病、治病，调节人体生理功能的功效，这些功效是原蛋白质及其所组成的氨基酸所不具备的。

用吸血水蛭提取的酸性多肽，在常温常压下，因为其肽链比蛋白质要短，其稳定性要比蛋白质高得多，因而在使用时不必加入任何的稳定剂就能长期保存，这为将酸性多肽应用在食品上提供了科学依据。

目前，多肽的开发应用是当前生物工程领域的热门课题，其广泛应用于医药、保健、食品、化妆品等行业，正在形成具有广阔前景的新产业。

多肽应用于食品(保健品、营养食品、普通食品)，开始于上世纪80年代的日本，随后多肽食品在美国、西欧等发达国家也方兴未艾。目前多肽食品已经形成产业，许多著名的公司成系列的开发多肽食品、多肽食品添加剂以及添加多肽因子的配餐等等。功能肽作为一种高科技产品已广泛应用于各类食品，在日本、美国和西欧，含有多肽的健康食品层出不穷，有多肽饮料、多肽儿童午餐、多肽老人套餐、多肽运动食品，促钙吸收食品，降压食品等。在中国，武汉肽类物质研究所已完成系列中药蛋白多肽，系列植物蛋白多肽(其中包括大豆多肽等)、多肽系列食品添加剂、多肽系列调料添加剂等几十个成品和原料粉产品的研制，在市场的初步推广中取得了可喜的成绩。

我们经过检索，查到目前公开文献报道的有关从动物制备活性多肽的文献有以下一些：

1、【题名】牡蛎双酶水解工艺的研究【作者】付猛【刊名】食品信息与技术.2004(12).-29-29【文摘】牡蛎是世界上第一大养殖贝类，也是我国四大养殖贝类之一，是一种极珍贵的海产软体动物。牡蛎中蛋白质及糖元含量丰富，还富含多种维生素及铜、铁、锌、碘等元素，尤其是含有丰富的牛黄酸，具有很高的营养价值。目前，人们倾向于水解蛋白质以制取活性肽。酶能在温和的条件下对蛋白质进行水解，产生特定的肽。从海洋贝类中制备活性多肽的研究工作也已展开。但是，

2、【题名】功能肽的研究进展【作者】励建荣 封平【机构】浙江工商大学食品、生物与环境工程学院，【刊名】食品科学.2004，25(11).-415-419【文摘】迄今为止，人们已从人体、动物、植物和微生物等生物体中提取或合成了各种具有生理活性的多肽物质。本文较为全面地介绍了功能肽的不同来源及生产方法，比较了几种常用生产方法的优、缺点，并概述了近几年国内外几种重要功能肽的研究进展。

3、【题名】利用扇贝边制造水解动物蛋白的研究【作者】曾庆祝[1]曾庆孝[1]汪涛[2]许庆陵[2]【机构】[1]华南理工大学食品与生物工程学院，[2]大连水产学院食品工程系，【刊名】华南理工大学学报：自然科学版.2003，31(8).-82-87【文摘】选用复合蛋白酶酶解扇贝边制备水解液，并优化酶解工艺条件；采用中空纤维超滤膜对水解液进行分离纯化，制造高质量的水解动物蛋白，并测试膜分离试验操作条件对分离效率的影响.研究结果表明，先用枯草杆菌蛋白酶酶解4h，然后用风味蛋白酶继续酶解，可以显著提高酶解液中多肽、短肽及游离氨基酸的含量；超过滤的操作压力、温度、酶解液的pH值及浓缩比等因素都将影响超过滤效率，在操作压力不高于0.10MPa，pH值为7.0～7.5，温度为43℃，每过滤10min后就对超过滤膜进行2min的反冲洗等操作条件下，可以大大提高超过滤的分离效率、减少膜的污染及延长膜的使用寿命；试验结果还表明，超过滤分离后水解液的感官指标明显优于未分离的水解原液。

4、【题名】天然活性多肽的研究进展【作者】赵锐顾谦群【机构】青岛海洋大学海洋药物与食品研究所，青岛【刊名】天然产物研究与开发.2000，12(4).-84-91【文摘】综述了近年来天然来源的活性多肽的研究近况，主要侧重直链肽的研究近况，包括人，动物，植物来源多肽的提取分离方法，氨基酸组成以及生物活性等方面的研究进展。

5、【题名】蚕丝丝胶蛋白的结构、性能及利用【作者】陈华[1]胡国梁[2]等【机构】[1]浙江大学动物科学学院，[2]浙江工程学院，【刊名】功能高分子学报.2001，14(3).-344-348【文摘】丝绸厂排放的废水中含有大量的丝胶蛋白。丝胶蛋白是一种球状蛋白，含有多种多肽，由18种氢基酸组成，含有较多的丝氨酸，天门冬氨酸和甘氨酸，极性侧链氨基酸占74.61％，丝胶蛋白具有易溶，吸水，凝胶化，可改性和抗氧化等特性，在化妆品，食品、医药和生物材料等方面具有良好的开发潜能。

6、【题名】胶原蛋白的应用【作者】李彦春程宝箴等【机构】山东轻工业学院，【刊名】皮革化工.2002，19(3).-10-14【文摘】本文综述了胶原蛋白和多肽在生物，医学，食品，化妆品，饲料，化学品等工业中的进展，随着胶原蛋白与胶原多肽的生物功能等性能逐渐被人们认识，这方面的研究也逐渐成为研究的热点，利用动物皮开发新的生物产品将大大提高其附加值，具有广阔的发展前景。

7、【题名】乳铁蛋白及其活性肽的营养生理作用及应用前景【作者】罗献梅[1]陈代文[2]张克英[2]【机构】[1]西南农业大学荣昌校区动科院，[2]四川农业大学动物营养研究所【刊名】饲料工业.2005，26(2).-5-9【文摘】乳铁蛋白(LF)是一种多功能的糖蛋白，乳铁蛋白活性多肽(Lfein)是从LF上被胃蛋白酶水解下来的25个氨基酸残基的小肽。文中阐述了乳铁蛋白及其活性多肽的结构，介绍了乳铁蛋白及其活性多肽的主要生理作用：抗菌、抑菌、抗病毒、抗氧化，调节机体的免疫和提高肠道对铁离子的吸收等作用。根据乳铁蛋白制备的研究进展，讨论了乳铁蛋白及其活性多肽在乳、食品和动物生产中作为添加剂的应用前景。

从上述文献了解到，从动物中制备或提取活性多肽，将其作为食品、医药、化妆品等方面的应用正在走进人们的生活。但由于不同的动物原料，以及采用的工艺，得到的多肽产品有着很大的差异。

据有关科学研究表明，吸血类水蛭(如菲牛蛭、日本医蛭、棒纹牛蛭、日本山蛭和海南山蛭等)体内有一种氨基酸残基组成的低分子酸性多肽(水蛭素)，它除了具有多肽的一般功能外，还具有抗凝和溶栓作用，并能透过血脑屏障而发挥独特的功效。虽然这种酸性多肽在1884年已被人们发现，在上个世纪70年代确认了其肽链的组成和一级结构，但一直以来，科学界被自然界中能够提取的这种酸性多肽的资源实在太少了的错误观点所左右(的确，在中国能够从吸血水蛭中提取酸性多肽的蛭类仅分布于华南的广东、广西等少数几个省区，其分布范围较窄，且品种和数量均有限)。这种酸性多肽(水蛭素)由于在医药、食品已经引起了极大的关注，人们试图采用人工合成的方式获取，但是，一直以来这种酸性多肽的提取技术和生产工艺未曾取得突破性进展，这是制约酸性多肽生产的瓶颈。

经过多年来的艰苦探索，本发明人周维海于2003年发明了从吸血水蛭活体中进行反复多次提取水蛭素(酸性多肽)技术，并申报了国家发明专利，申请号03113566，因而使酸性多肽的规模化生产变为现实。

本发明就是以利用上述技术制得的酸性多肽为主要原料、辅以一般食品原料，从而制成多肽食品，拓宽了酸性多肽的另一应用领域。

发明内容

本发明的目的是提供一种多肽食品，从而丰富国内外多肽食品品种。

本发明的多肽食品是从吸血类水蛭(包括菲牛蛭、日本医蛭、棒纹牛蛭、日本山蛭和海南山蛭等)提取的酸性多肽(即水蛭素)，它的原料成分和质量百分组成如下(配方)：酸性多肽0.1～99.9％，辅料0.1％～99.9％。

所述的酸性多肽，是45-100个氨基酸组成的低分子多肽。

所述的酸性多肽采用以下提取或加工工艺：

1、活体水蛭匀浆后经离心、超滤提取；该方法是将活体吸血类水蛭洗净后置于打浆机打浆，然后用离心机离心，再用100微米以下的过滤器或者用分子量为5000-30000的过滤膜滤过，置4℃以下冷库冷冻保藏。

2、干体水蛭粉碎后用生理盐水浸提；该方法是将干体吸血类水蛭用粉碎机粉碎，再用生理盐水浸提0.5-5小时，再浓缩保存或者置4℃以下冷库冷冻保藏。

3、利用诱导液刺激水蛭活体使其分泌唾液，然后以这些唾液为原料，经离心、凝胶层析提取。按照本发明人2003年申请的中国专利(申请号：03113566)的方法提取，具体是将清洗干净的菲牛蛭用乙酸、柠檬酸、氯化钠、碳酸钠混合物的水溶液，其浓度为0.1％，PH在4.5，溶解于蒸馏水后充分喂饱菲牛蛭，然后对菲牛蛭进行挤压使其分泌出唾液(水蛭素粗品)，和加入酸的浓度使水溶液的PH在5-6.5之间。然后对其唾液经离心除杂，再进行分离和纯化。分离和纯化是将250-300ml从上述菲牛蛭体内提取出的唾液腺分泌物提取液中加4倍置冰箱中预冷的含水15％的丙酮，搅拌后置冰箱中过夜，吸出上清丙酮并离心，在沉淀中加入预冷的三氯乙酸(约25ml)使其溶解，离心除去残渣，待上样进行柱层析。

阴离子交换柱层析取适量DEAE加蒸馏水使其膨胀，按常规方法依次用0.5MOL/LNaOH-NaCl混合液、0.5mol/LHCl及0.5mol/LNaOH-NaCl混合液各浸泡30分后用蒸馏水洗涤至中性。装柱(2cm×60cm)至所需高度，用pH4.6的0.1mol/L柠檬酸一柠檬酸钠缓冲液平衡，5ml的唾液腺分泌物浓缩液或上述三氯乙酸溶液上样进行梯度洗脱并用记录仪绘出洗脱曲线，分段收集洗脱液。经检测，将有活力部分集中于透析袋中用甘油浓缩，再用双缩法测总蛋白含量，得到高纯度的酸性多肽。

4、干体水蛭超微粉碎细粉；该方法是将干体吸血类水蛭用超微粉碎，经过灭菌后直接添加到食品中。

本发明所用的辅料，来源于日常的食品，包括以下几种或者组合：

1、可食用的淀粉类食品，包括谷类淀粉、薯类淀粉、豆粉，如玉米粉、面粉、芝麻粉、豆粉、大米粉等；

2、肉类、蛋类食品，包括可以立即食用的经煮、蒸、烤、煎或其它加工方法做好的肉类、蛋类。

3、西药、中药或其提取物；

4、饮料；

5、纯净水或可以饮用的干净水。

6、糖类食品，如葡萄糖、蔗糖、多聚糖。

本发明的酸性多肽食品制备方法：依据不同的辅料，其制法通常有如下几种：

1、辅料为粉状(如玉米粉、面粉、中药材粉、芝麻粉、大米粉等)时，按比例将酸性多肽加入到粉状原料中，搅拌、混合均匀即成为本发明的多肽粉状食品。

2、辅料为液体状(如各种饮料等)，按比例将多肽加入到液体中混合即成本发明的多肽液体食品。

3、辅料为糕体状(如蛋糕、马蹄糕等)，按比例将多肽加入到糕体中混合即成本发明的多肽糕体食品。

4、辅料为肉类、蛋类食品，在食用的经煮、蒸、烤、煎或其它加工方法做好的肉类中按比例将酸性多肽加入混合均匀得到。

以上所述多肽食品的制备方法，可以将酸性多肽与辅料混合做成粉状、固体状、胶囊状、膏体状或者液体状的食品，包括做成保健食品、营养食品和普通食品。

多肽食品质量控制技术：多肽食品中酸性多肽活性可用凝血酶滴定法进行检测，其原理是：酸性多肽能与凝血酶特异性结合，使凝血酶失活，其结合比例为1∶1，酸性多肽活性单位以AT-U表示，凝血酶活性的国际单位为NIH，即1个AT-U等于中和1个NIH凝血酶的酸性多肽量。

检测方法：

取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，精密加入0.9％氯化钠溶液5ml，充分搅拌，浸提30分钟，并时时振摇，离心，精密量取上清夜100μl，置试管(10mm×100ml)中，加入0.5％(牛)纤维蛋白原(以凝固物计)的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(取0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液25ml与0.1mol/L盐酸溶液约40ml，加水至100ml，调节pH值至7.4)200μl，摇匀，置水浴(37℃±0.5℃)中缓缓滴加每1ml中含40单位的凝血酶溶液(每分钟5μl，边滴加边轻轻摇匀)至凝固，记录消耗凝血酶溶液的体积，按下式计算：

$U=\frac{c_1{v}_1}{c_2{v}_2}$

本发明的优点是：

1、将吸血类水蛭(包括菲牛蛭、日本医蛭、棒纹牛蛭、日本山蛭和海南山蛭等)提取的酸性多肽(即水蛭素)，是由氨基酸构成但又不同于蛋白质的中间物质，它具有蛋白质的特性，但比蛋白质简单、分子量小，因而其活性高，在微量或低浓度的情况下，多肽都能发挥其独特的生理作用。它除了具有多肽的一般功能外，还具有抗凝和溶栓作用，并能透过血脑屏障而发挥独特的功效。

2、作为基础营养物质，多肽比氨基酸更易吸收，生物利用度高。某些低分子的肽类，还同时具有防病、治病，调节人体生理功能的功效，这些功效是原蛋白质及其所组成的氨基酸所不具备的。酸性多肽在常温常压下，因为其肽链比蛋白质要短，其稳定性要比蛋白质高得多，因而在使用时不必加入任何的稳定剂就能长期保存，这为将酸性多肽应用在食品上提供了科学依据。

具体实施方式

本发明的酸性多肽的提取或加工工艺实施例：

实施例1-1

将活体吸血类水蛭洗净后置于打浆机打浆，然后用离心机离心，再用100微米以下的过滤器或者过滤膜滤过，置4℃以下冷库冷冻保藏。

实施例1-2

将干体吸血类水蛭用粉碎机粉碎，再用生理盐水浸提5小时，再浓缩保存或者置4℃以下冷库冷冻保藏。

实施例1-3

利用诱导液刺激水蛭活体使其分泌唾液，然后以这些唾液为原料，经离心、凝胶层析提取。按照本发明人2003年申请的中国专利(申请号：03113566)的方法提取。

实施例1-4

是将干体吸血类水蛭用超微粉碎机粉碎，过200-1000目的筛。

本发明的酸性多肽食品加工工艺实施例

实施例2-1

酸性多肽10g，玉米粉10000g，将多肽放入玉米粉中，混合均匀后即成多肽玉米粉。

实施例2-2

酸性多肽50g，大米粉10000g，赖氨酸20g，蛋氨酸10g，分别将上述四种原料称好后一起混合均匀即成多肽营养食品。

实施例2-3

酸性多肽100g，面粉10000g，用适量水将上述两种原料混合后做成块状，放入烘箱内烘干即成多肽饼干。

实施例2-4

酸性多肽300g，药用淀粉10000g，将上述两种原料混合后装入胶囊，每粒15～0.5g，每天2次，每次2～3粒。

实施例2-5

酸性多肽200g，干净水10000g，将多肽加入干净水中混合均匀后即成多肽口服液。

实施例2-6

酸性多肽250g，牛奶10000ml，将多肽加入牛奶中混合均匀后即成多肽牛奶。

实施例2-7

酸性多肽15g，咖啡35g，将上述两种原料混合均匀后即成多肽咖啡。

实施例2-8

酸性多肽15g，板蓝根冲剂1000g，将上述两种原料混合均匀后即成多肽板蓝根冲剂。

实施例2-9

酸性多肽50g，螺旋藻1000g，将上述两种原料混合均匀后即成多肽螺旋藻。

实施例2-10

酸性多肽100g，低聚糖或葡萄糖1000g，将上述两种原料混合均匀后即成多肽葡萄糖、多肽低聚糖。

实施例2-11

酸性多肽70g，打成粉状的烤熟瘦猪肉1000g，将上述两种原料混合均匀后即成多肽猪肉粉。

实施例2-12

酸性多肽60g，芦荟汁1000ml，将多肽加入芦荟汁搅拌均匀后即成多肽芦荟汁。

实施例2-13

酸性多肽100g，大豆、绿豆多肽1000g，将上述两种原料混合均匀后即成复合多肽食品。

实施例2-14

酸性多肽200g，山楂粉1000g，将上述两种原料混合均匀后即成多肽山楂粉。

实施例2-15

酸性多肽150g，打成粉状的烤熟瘦牛肉粉1000g，将上述两种原料混合均匀后即成多肽粉。

实施例2-16

酸性多肽1000g，土鳖虫粉1000g，将上述两种原料混合均匀后即成多肽土鳖虫粉，将这种粉装入胶囊内，每粒0.3g，每天2～3次，每次2～4粒，对防治心脑血管疾病有明显疗效。

实施例2-17

酸性多肽500g，鸡蛋2000g，面粉5000克上述三种原料加水调混合均匀后做成多肽鸡蛋煎饼。

实施例2-18

酸性多肽300g，豆浆1000ml，将多肽加入豆浆中即成多肽豆浆。

实施例2-19

酸性多肽500g，珍珠粉、玉米粉1000g，将上述两种原料混合均匀后即成多肽珍珠玉米粉。

实施例2-20

酸性多肽100g，豆浆1000g，将多肽加入大豆制成的豆浆中，搅拌均匀，再加入凝固剂使其凝固，即成多肽豆腐。

实施例2-21

酸性多肽300g，地龙500g，将多肽加入凉粉中并捣碎，混合均匀即成多肽地龙粉。

实施例2-22

酸性多肽150g，面粉或魔芋粉1000g，黄豆浆25g，将上述原料混合均匀，上机压制，即成多肽挂面。

本发明多肽食品可以降低血脂和胆固醇，治疗***炎和缓解高血压，以下是实施效果：

李××，男，1958年生，广西玉林市人，因患高血脂，2003年初在某医院治疗，服用西药洛伐他汀，但症状有所改善，但停药后症状未见好转，后改服用“实施例2-16的多肽土鳖虫粉”，每天2次，每次0.3克，服用30天后经常头晕症状已好转，服用2个月后，症状已全部消失，精神好转，体力增加，血脂恢复正常，感觉良好。

张××，女，1941年生，广东廉江人，2001年3月5日在医院检查患高血压，经常头晕，上楼气喘，由于***未住院，服用“多肽地龙粉”，每天2次，每次0.3克，服用5周后觉得病情好转，头晕减轻。

Claims (5)

1、一种多肽食品，由吸血类水蛭提取的酸性多肽和辅料组成，其特征在于：它的原料成分和质量百分组成如下：酸性多肽0.1～99.9％，辅料0.1％～99.9％；

所述的酸性多肽，是45-100个氨基酸组成的低分子多肽。

2、根据权利要求1所述的多肽食品，其特征在于：酸性多肽采用以下提取或加工工艺得到：

(1)活体水蛭匀浆后经离心、超滤提取；

(2)干体水蛭粉碎后用生理盐水浸提；

(3)利用诱导液刺激水蛭活体使其分泌唾液，然后以这些唾液为原料，经离心、凝胶层析提取；

(4)干体水蛭超微粉碎细粉。

3、根据权利要求1所述的多肽食品，其特征在于：所用的辅料来源于日常的食品，包括以下几种或者其组合：

(1)可食用的淀粉类食品，包括谷类淀粉、薯类淀粉、豆粉；

(2)肉类、蛋类食品，包括可以立即食用的经煮、蒸、烤、煎或其它加工方法做好的肉类、蛋类；

(3)西药、中药或其提取物；

(4)饮料；

(5)纯净水或可以饮用的干净水；

(6)糖类食品。

4、一种如权利要求1所述的多肽食品的制备方法，其特征在于：按比例将酸性多肽加入到辅料中，搅拌、混合均匀得到食品。

5、根据权利要求1所述多肽食品的制备方法，其特征在于：将酸性多肽与辅料混合做成粉状、固体状、胶囊状、膏体状或者液体状的食品，包括做成保健食品、营养食品和普通食品。