CN1709340B - 一种用于补养心肾、健脑安神的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种补养心肾、健脑安神的药物组合物，它是由制何首乌、石菖蒲、补骨脂、五味子、酸枣仁、女贞子、蜂花粉、丹参为原料制备而成的药剂。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物用于治疗神经衰弱，有镇静安神、健脑益智的作用，药效明显，且质量稳定，可控性强，为临床提供了一种新的药用选择。

Description

一种用于补养心肾、健脑安神的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种用于补养心肾、健脑安神的药物组合物，具体地，是以中药材为原料制备的药物组合物。

背景技术

目前市场上的用于治疗神经衰弱的药物以西药为主，如苯二氮卓类、巴比妥类主要针对睡眠障碍治疗，但是服用后会出现头痛、嗜睡、眩晕、口干，记忆困难等副作用；中药如脑力健、健脑补肾丸主要针对改善记忆功能、改善脑循环，对睡眠障碍没有治疗作用。这些药品都不能同时兼顾治疗睡眠及改善脑功能，且中药用药基于中医药理论，用药的种类及用量不同，辩证不同，针对的适应症也不相同。

发明内容

本发明涉及一种用于补养心肾、健脑安神的药物组合物，本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。

本发明提供了一种用于补养心肾、健脑安神的药物组合物，它是含有由下述重量配比的原料制备而成药剂：

制何首乌2～10份、石菖蒲1～8份、补骨脂1～10份、五味子1～8份、酸枣仁1～8份、女贞子1～10份、蜂花粉1～8份、丹参1～8份。

进一步地，它是由下述重量配比的原料制备而成药剂：

制何首乌2～10份、石菖蒲1～8份、补骨脂1～10份、五味子1～8份、酸枣仁1～8份、女贞子1～10份、蜂花粉1～8份、丹参1～8份。

其中，酸枣仁、女贞子可采用生品，也可采用炮制品，如炒制品。

进一步地，它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂：

制何首乌5.33份、石菖蒲1.33份、补骨脂2份、五味子2.66份、酸枣仁4份、女贞子2份、花粉2.66份、丹参2.66份。

所述的药物组合物是由制何首乌、石菖蒲、补骨脂、五味子、酸枣仁、女贞子和丹参的水提取物或乙醇提取物，与蜂花粉乙醇提取物混合为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成药剂。

其中，所述的药剂是：颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、合剂、糖浆剂。

所述的片剂每片含大黄素C₁₅H₁₀O₅，不得少于25ug；胶囊剂每粒中含大黄素C₁₅H₁₀O₅，不得少于25ug；含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)不得少于1.5mg。颗粒剂每袋含大黄素C₁₅H₁₀O₅，不得少于25ug；含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)不得少于1.5mg。口服液每10ml含大黄素C₁₅H₁₀O₅，不得少于25ug；含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)不得少于1.5mg。丸剂每丸含大黄素C₁₅H₁₀O₅，不得少于25ug；含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)不得少于1.5mg。

本发明还提供了该药物组合物的制备方法，它包括如下步骤：

a、称取各重量配比的原料药：制何首乌2～10份、石菖蒲1～8份、补骨脂1～10份、五味子1～8份、酸枣仁1～8份、女贞子1～10份、蜂花粉1～8份、丹参1～8份；

b、将花粉加入75％～95％的乙醇提取，回收乙醇，得乙醇提取物；

c、其余七味药，加水或加75％～95％的乙醇提取，得水提取物或乙醇提取物；

d、将b步骤所得的花粉提取物、c步骤所得的水提取物或乙醇提取物混合，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的药剂。

本发明还提供了该药物组合物在制备治疗神经衰弱的药物中的用途。

其中，所述的药物是镇静安神的药物。

本发明还提供了该药物组合物在制备健脑益智的药物中的用途。

本发明药物养心肾，促进心肾相交，补肾益髓，及益气生血，活络散瘀，利窍降痰，功效显著。本发明药物原料在中医药理论指导下配伍使用，制首乌入肝、肾经，补益精血，滋养精髓，且脑为髓海，用之并可健脑安神；酸枣仁味甘，入心、肝经，能养心阴，益心、肝之血而安神，二药合用，长于补益心肾，养血安神，共为君药。石菖蒲辛温，气味芳香，长于开窍宁心安神，兼有祛痰化湿之功，方中用之可使清窍开，痰浊化，用治痰湿所致之头晕、嗜睡、健忘、失眠、多梦等症，具有健脑益智之效；五味子甘温，归心、肾经，能宁心安神；丹参归心、肝经，功能凉血安神，且擅活血祛瘀，更适于脑脉瘀阻所致的头昏、头晕等；三药配伍，长于宁心安神，以增强君药安神之功，共为臣药。蜂花粉能补养心肾，现代研究发现其能抗衰老，抗疲劳；女贞子归肝、肾经，能补肝肾之阴；补骨脂性温，擅于补肾助阳，以上三药皆为佐药，以助君、臣药补养心肾之功。上述诸药合用，能补益心、肝之阴血，滋补肾精，又能交通心肾，使水火既济，长于治疗现代由于神经衰弱引起的头昏、头晕、失眠、健忘等中医辨证属心肝血虚，心肾不交者。适用于衰老所致的脑功能衰退综合征(如神经衰弱，更年期综合征，脑动脉硬化症时头晕、头痛、失眠、记忆力减退等)，能改善脑代谢，减少老化代谢物的积聚，增强脑功能，并可调整其它内脏活动，增强体质，抗老防衰。

本发明药物兼顾养血安神健脑，除从根本上改善人体睡眠情况外，还能改善脑代谢，减少老化代谢物的积聚，增强脑功能，并可调整其它内脏活动，增强体质，抗老防衰。服用本品后脑组织中的脂褐素沉淀明显减少，SOD活性升高。脂褐素与神经元功能呈负相关关系，能减少小脑蒲氏细胞内脂褐素积聚，这对维护神经元的生理功能是有益的，能充分改善由神经衰弱引起的头昏，头晕，健忘等症，药效明显，且质量稳定，可控性强，为临床提供了一种新的药用选择。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

实施例1  本发明药物片剂的制备

制何首乌533g、石菖蒲133g、补骨脂200g、五味子266g、酸枣仁400g、女贞子200g、蜂花粉266g、丹参266g。

工艺：以上八味，蜂花粉以75％乙醇喷洒杀菌1-2小时，冷冻48小时，温水热溶后，胶体磨破壁，破壁后的花粉乳用乙醇回流提取，滤液静置过夜，减压回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.3稠膏(70-80℃)；制何首乌等七味加水煎煮三次，第一次加水8倍量，煎煮1小时，第二次、第三次分别加水6倍量，均煎煮0.5小时，滤过，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.08-1.10(热测)，放冷，加乙醇使含醇量达60％，放置过夜，滤过，滤液减压回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.25(50℃)的清膏，趁热加入花粉膏、淀粉35g、糊精15g，搅拌均匀，制成颗粒，干燥，再加入硬脂酸镁2.8g，压制成1000片，包衣，即得。

实施例2  本发明药物胶囊剂的制备

制何首乌500g、石菖蒲400g、补骨脂500g、五味子400g、酸枣仁(炒)400g、女贞子(炒)500g、蜂花粉400g、丹参400g。

工艺：以上八味，蜂花粉以75％乙醇喷洒杀菌1-2小时，冷冻48小时，温水热溶后，胶体磨破壁，破壁后的花粉乳用乙醇回流提取，滤液静置过夜，减压回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.3稠膏(70-80℃)；制何首乌等七味加水煎煮三次，第一次加水8倍量，煎煮1小时，第二次、第三次分别加水6倍量，均煎煮0.5小时，滤过，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.08-1.10(热测)，放冷，加乙醇使含醇量达60％，放置过夜，滤过，滤液减压回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.25(50℃)的清膏，趁热加入花粉膏、淀粉35g、糊精15g，搅拌均匀，制成颗粒，干燥，装胶囊。

实施例3  本发明药物颗粒剂的制备

制何首乌500g、石菖蒲250g、补骨脂250g、五味子250g、酸枣仁(炒)250g、女贞子250g、蜂花粉250g、丹参250g。

工艺：以上八味，蜂花粉以75％乙醇喷洒杀菌1-2小时，冷冻48小时，温水热溶后，胶体磨破壁，破壁后的花粉乳用乙醇回流提取，滤液静置过夜，减压回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.3稠膏(70-80℃)；制何首乌等七味加水煎煮三次，第一次加水8倍量，煎煮1小时，第二次、第三次分别加水6倍量，均煎煮0.5小时，滤过，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1-08-1.10(热测)，放冷，加乙醇使含醇量达60％，放置过夜，滤过，滤液减压回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.25(50℃)的清膏，趁热加入花粉膏、淀粉35g、糊精15g，搅拌均匀，制成颗粒，干燥，即得。

实施例4  本发明药物丸剂的制备

制何首乌533g、石菖蒲53.3g、补骨脂53.3g、五味子53.3g、酸枣仁53.3g、女贞子53.3g、蜂花粉53.3g、丹参53.3g。

工艺：以上八味，蜂花粉以75％乙醇喷洒杀菌1-2小时，冷冻48小时，温水热溶后，胶体磨破壁，破壁后的花粉乳用乙醇回流提取，滤液静置过夜，减压回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.3稠膏(70-80℃)；制何首乌等七味加水煎煮三次，第一次加水8倍量，煎煮1小时，第二次、第三次分别加水6倍量，均煎煮0.5小时，滤过，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.08-1.10(热测)，放冷，加乙醇使含醇量达60％，放置过夜，滤过，滤液减压回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.25(50℃)的清膏，趁热加入花粉膏，混匀，烘干，加入炼蜜，制丸，干燥，打光，即得。

实施例5  本发明药物合剂的制备

制何首乌533g、石菖蒲133g、补骨脂200g、五味子266g、酸枣仁400g、女贞子200g、蜂花粉266g、丹参266g。

工艺：以上八味，蜂花粉以75％乙醇喷洒杀菌1-2小时，冷冻48小时，温水热溶后，胶体磨破壁，破壁后的花粉乳用乙醇回流提取，滤液静置过夜，减压回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.3稠膏(70-80℃)；制何首乌等七味加水煎煮三次，第一次加水8倍量，煎煮1小时，第二次、第三次分别加水6倍量，均煎煮0.5小时，滤过，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.08-1.10(热测)，放冷，加乙醇使含醇量达60％，放置过夜，滤过，滤液减压回收乙醇，趁热加入花粉膏、苯甲酸钠3g及矫味剂适量，加水至1000ml，滤过，灌封，即得。

实施例6  本发明药物糖浆剂的制备

制何首乌533g、石菖蒲133g、补骨脂200g、五味子266g、酸枣仁400g、女贞子200g、蜂花粉266g、丹参266g、远志100g、夜交藤120g。

工艺：以上八味，蜂花粉以75％乙醇喷洒杀菌1-2小时，冷冻48小时，温水热溶后，胶体磨破壁，破壁后的花粉乳用乙醇回流提取，滤液静置过夜，减压回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.3稠膏(70-80℃)；制何首乌等七味加水煎煮三次，第一次加水8倍量，煎煮1小时，第二次、第三次分别加水6倍量，均煎煮0.5小时，滤过，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.08-1.10(热测)，放冷，加乙醇使含醇量达60％，放置过夜，滤过，滤液减压回收乙醇，趁热加入花粉膏、650g蔗糖、苯甲酸钠3g及矫味剂适量，加水至1000ml，滤过，灌封，即得。

实施例7  本发明药物的质量控制方法

【鉴别】(1)取实施例1制备的片剂10片，除去薄膜衣，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，加***20ml提取2次，分取***层，挥干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄素、大黄素甲醚对照品，分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(体积比15∶2∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨蒸中熏后，日光下检视，班点变为红色。

(2)取实施例1制备的片剂10片，除去薄膜衣，研细，加乙醇30ml，加热回流30分钟，取出，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取补骨脂素，异补骨脂素对照品，分别加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(休积比4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％氢氧化钠乙醇溶液，置紫外灯365(nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(3)取实施例1制备的片剂10片，除去薄膜衣，研细，加乙醇30ml，加热回流30分钟，取出，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇-氯仿(体积比3∶2)混合液1ml使溶解，作为供试品溶液。另取齐墩果酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-丙酮-醋酸乙酯(体积比5∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(4)取实施例1制备的片剂10片，除去薄膜衣，研细，加氯仿20ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取五味子甲素对照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)试验，吸取对照药材溶液和对照品溶液各2μl，供试品溶液4μl，点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(体积比15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

【检查】其它应符合片剂项下有关的各项规定(《中国药典》2000年版一部附录ID)。

【正丁醇提取物】取实施例1制备的片剂10片，除去薄膜衣，精密称定，研细，取粉末约1g，精密称定，置索氏提取器中，加***150ml，回流2小时，取出，挥干***，将滤纸筒继续置于索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，置水浴上回流4小时，提取液回收甲醇并浓缩至干，残渣加水20ml，微热，使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次20ml，合并正丁醇提取液，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干后，于105℃干燥3小时，移至干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算，即得。

本品每片含正丁醇提取物不得少于20mg。

【含量测定】(1)取实施例1制备的片剂40片，除去薄膜衣，精密称定，研细，取粉末2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中，蒸干，残渣加水20ml使溶解，加盐酸2ml，加热回流1小时，放冷，移至分液漏斗中，并用少量氯仿洗涤容器一并倒入分液漏斗中，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿液，通过装有无水硫酸钠的漏斗，滤器用少量氯仿洗涤，洗液并入滤液中，置水浴上蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密称取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含0.10mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2000年版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液5μl与6μl，对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸(6∶2∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B薄层扫描法)进行扫描，波长λ_S＝440nm，λ_R＝700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。

本品每片含大黄素(C₁₅H₁₀O₅)，不得少于25μg。

(2)制何首乌的含量测定

避光操作，照高效液相色谱法(附录VI D)测定。

色谱条件与***适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(25∶75)为流动相；检测波长为320nm。理论板数按2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备  精密称取2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品适量，加稀乙醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品20片，除去薄膜衣，精密称定，研细(过三号筛)，精密称取适量(约相当于1片的重量)，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，上清液用微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl ，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每片含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)不得少于1.5mg。

用同样的方法可测定其它剂的含量限定：胶囊剂每粒中含大黄素C₁₅H₁₀O₅，不得少于25ug；含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)不得少于1.5mg。颗粒剂每袋含大黄素C₁₅H₁₀O₅，不得少于25ug；含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)不得少于1.5mg。口服液每10ml含大黄素C₁₅H₁₀O₅，不得少于25ug；含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)不得少于1.5mg。丸剂每丸含大黄素C₁₅H₁₀O₅，不得少于25ug；含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)不得少于1.5mg。

以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。

试验例1  本发明药物健脑益智试验

1实验材料

1.1药物

①受试药物：本发明药物片剂，由实施例1制备。每片含原生药2.3克。试验设三个剂量组2.875、5.75、11.5g原生药/Kg体重(分别相当于每日临床剂量的5、10、20倍)。配制方法：本发明药物片剂50片，加蒸馏水100ml，混匀即得115％的药液供大剂量组使用，按比例稀释成57.5％和28.75％的药液供中剂量组和小剂量组使用。

②阳性对照药物：喜得镇，由瑞士山德士药厂、天津华津制药厂联合生产，主治与老年有关的精神退化的症状和体征，主治急慢性脑血管病后的功能、智力减退的症状。口服剂量为6mg/60kg，试验时给药剂量为2.0mg/kg(相当于临床日服剂量的20倍)。配置方法：取喜得镇20片，用蒸馏水配制成100ml喜得镇药液使用。

1.2动物

昆明种小鼠，雌雄各半，体重20±2g，；SD大鼠，雌雄各半，体重180±20g。由成都中医药大学实验动物研究中心提供，检疫后备用。

2实验方法

2.1对小鼠记忆获得障碍模型的影响

取昆明种小鼠60只，随机分成空白对照组(N＝10)、记忆获得障碍模型组(N＝10)、阳性对照组(N＝10)、本发明药物片剂高剂量组(N＝10)、本发明药物片剂中剂量组(N＝10)、本发明药物片剂低剂量组(N＝10)。除空白对照组外，其余各组分别灌胃蒸馏水、喜得镇药液、115％本发明药物片剂药液、57.5％本发明药物片剂药液、28.75％本发明药物片剂药液10ml/kg.d^-1，连续15d。末次给药1h后，腹腔注射东莨菪碱5mg/kg，30min后将小鼠放入12×12×18cm的电刺激实验反射箱内的橡皮垫上，立即通以50v交流电，动物从橡皮垫上跳到实验反射箱底部，受到电刺激，会跳回橡皮垫以躲避伤害性刺激。如此进行跳台试验训练5min。24h后测试小鼠第1次跳下橡皮垫的潜伏期和5min内的错误次数。试验数据用《中国医学百科全书.医学统计学》统计软件包PEMS数据库进行统计处理。

2.2对大鼠记忆巩固障碍模型的影响

取SD大鼠60只，随机分成空白对照组(N＝10)、记忆巩固障碍模型组(N＝10)、阳性对照组(N＝10)、本发明药物片剂高剂量组(N＝10)、本发明药物片剂中剂量组(N＝10)、本发明药物片剂低剂量组(N＝10)。除空白对照组外，其余各组分别灌胃蒸馏水、喜得镇药液、115％本发明药物片剂药液、57.5％本发明药物片剂药液、28.75％本发明药物片剂药液8ml/kg.d^-1，连续30d。末次给药1h后，将大鼠放入MG-2迷宫非安全区的臂顶端，然后通以100v的交流电，大鼠受电击后，将慌忙逃窜，最后偶然进入安全区，此为训练1次，如此反复10次。训练结束时，立即皮下注射亚硝酸钠120mg/kg。24h后测定大鼠第1次从非安全区进入安全区的潜伏期，以及进入非安全区的错误次数。

2.3小鼠记忆再现缺失模型

取昆明种小鼠60只，随机分成空白对照组(N＝10)、记忆再现缺失模型组(N＝10)、阳性对照组(N＝10)、本发明药物片剂高剂量组(N＝10)、本发明药物片剂中剂量组(N＝10)、本发明药物片剂低剂量组(N＝10)。除空白对照组外，其余各组分别灌胃蒸馏水、喜得镇药液、115％本发明药物片剂药液、57.5％本发明药物片剂药液、28.75％本发明药物片剂药液10ml/kg.d^-1，连续15d。末次给药1h后，如前法对小鼠进行跳台训练5min。24h后，如前法测定潜伏期和错误次数30min前，给小鼠灌胃30％的医用乙醇10ml/kg。

3实验结果

3.1本发明药物对小鼠记忆获得障碍模型的影响

记忆获得障碍模型组动物第1次遭受电击的潜伏期缩短，遭受电击的错误次数增多，与空白对照组比较，差异有显著性或极显著性。经本发明药物片剂药液治疗后，高剂量组和中剂量组第1次遭受电击的潜伏期延长，遭受电击的错误次数减少，与模型组比较，差异有显著性或极显著性。结果见表1

       表1  本发明药物片剂对小鼠记忆获得性障碍模型的影响(X±SD)

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01。

与模型组比较△P＜0.05，△△P＜0.01

3.2本发明药物片剂对大鼠记忆巩固障碍模型的影响

记忆巩固模型组动物第1次从非安全区到安全区的潜伏期延长，错误次数增加，与空白对照组比较，差异有显著性或极显著性。经本发明药物片剂药液治疗后，高剂量组潜伏期缩短，错误次数减少，与模型组比较，差异有显著性或极显著性。结果见表2：

                 表2本发明药物片剂对大鼠记忆巩固障碍模型的影响(X±SD)

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01。

与模型组比较△P＜0.05，△△P＜0.01

3.3本发明药物对小鼠记忆再现缺失模型的影响

记忆再现缺失模型组动物遭受电击的潜伏期缩短，错误次数增加，与空白对照组比较，差异有极显著性。经本发明药物药液治疗后，高剂量组、中剂量组潜伏期延长，高剂量组错误次数减少，与模型组比较，差异有显著性或极显著性。结果见表3

                     表3本发明药物片剂对大鼠记忆再现缺失模型的影响(X±SD)

注：与空白对照组比较**P＜0.01；

与模型组比较△P＜0.01，△△P＜0.01

试验例2  本发明药物镇静安神试验

1实验材料

1.1药物

①受试药物：本发明药物片剂，由实施例1制备。每片含原生药2.3克。试验设三个剂量组2.875、5.75、11.5g原生药/Kg体重(分别相当于每日临床剂量的5、10、20倍)。配制方法：本发明药物片剂50片，加蒸馏水100ml，混匀即得115％的药液供大剂量组使用，按比例稀释成57.5％和28.75％的药液供中剂量组和小剂量组使用。

②阳性对照药：舒乐安定，由上海黄河利亚制药有限公司生产。用蒸馏水配制成10％的浓度(每ml含舒乐安定0.1mg)备用。

1.2动物

昆明种小鼠，雌雄各半，体重20±2g，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，检疫后备用。

2实验方法

2.1对小鼠自主活动的影响

取昆明种小鼠50只，随机分成阴性对照组(N＝10)、阳性对照组(N＝10)、本发明药物片剂高剂量组(N＝10)、本发明药物片剂中剂量组(N＝10)、本发明药物片剂低剂量组(N＝10)。按组分别灌胃蒸馏水、10％舒乐安定药液、115％本发明药物片剂药液、57.5％本发明药物片剂药液、28.75％本发明药物片剂药液10ml/kg。给药1h后，用CB3201数字描记式小动物活动测定仪测定小鼠在下午5点到11点之间5分钟内的自主活动次数。试验数据用《中国医学百科全书.医学统计学》统计软件包PEMS数据库进行统计处理。

2.2对小鼠戊巴比妥钠睡眠的影响

取昆明种小鼠50只，随机分成阴性对照组(N＝10)、阳性对照组(N＝10)、本发明药物片剂高剂量组(N＝10)、本发明药物片剂中剂量组(N＝10)、本发明药物片剂低剂量组(N＝10)。按组分别灌胃蒸馏水、10％舒乐安定药液、115％本发明药物片剂药液、57.5％本发明药物片剂药液、28.75％本发明药物片剂药液10ml/kg。给药1h后，腹腔注射戊巴比妥钠40mg/kg，观察记录各组动物出现睡眠的潜伏期和睡眠时间(即翻正反射消失的时间)。试验数据用《中国医学百科全书.医学统计学》统计软件包PEMS数据库进行统计处理。

2.3对小鼠戊巴比妥钠阈下催眠的影响

取昆明种小鼠50只，随机分成阴性对照组(N＝10)、阳性对照组(N＝10)、本发明药物片剂高剂量组(N＝10)、本发明药物片剂中剂量组(N＝10)、本发明药物片剂低剂量组(N＝10)。按组分别灌胃蒸馏水、10％舒乐安定药液、115％本发明药物片剂药液、57.5％本发明药物片剂药液、28.75％本发明药物片剂药液10ml/kg。给药1h后，腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg，观察记录各组动物翻正反射消失1min以上的动物只数。试验数据用《中国医学百科全书.医学统计学》统计软件包PEMS数据库进行统计处理。

3实验结果

3.1本发明药物对小鼠自主活动的影响

舒乐安定阳性对照组、本发明药物高剂量组动物自主活动动物次数明显降低，与阴性对照组比较，差异有显著性或极显著性，结果见表4。

                  表4本发明药物片剂对小鼠自主活动的影响(X±SD)

注：与阴性对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01。

3.2本发明药物对小鼠戊巴比妥钠睡眠的影响

舒乐安定阳性对照组动物翻正反射消失的潜伏期缩短，睡眠时间延长；本发明药物片剂高、中剂量组动物睡眠时间明显延长；与阴性对照组比较，差异有极显著性。结果见表5

表5本发明药物片剂对小鼠戊巴比妥钠睡眠的影响(X±SD)

注：与阴性对照组比较：**P＜0.01。

3.3本发明药物对小鼠戊巴比妥钠阈下催眠的影响

舒乐安定阳性对照组，本发明药物高剂量组动物翻正反射消失、出现睡眠的动物只数明显增加，与阴性对照组比较，差异有显著性或极显著性。结果见表6

               表6本发明药物片剂对小鼠戊巴比妥钠阈下催眠的影响

注：与阴性对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01。

(3)试验结论

本发明药物能明显提高小鼠记忆获得障碍模型、大鼠记忆巩固障碍动物模型、小鼠记忆再现障碍动物模型的记忆能力；明显延长小鼠跳台试验出现错误的潜伏期，减少小鼠出现错误的次数；明显缩短大鼠Y迷宫试验的潜伏期，减少大鼠出现错误的次数；明显降低小鼠的自主活动，延长戊巴比妥钠的催眠时间，协同戊巴比妥钠阈下催眠作用。

试验例3  本发明药物急性毒性试验

(1)实验材料

1.药物

本发明药物片剂，受试药物，每片含原生药2.3g。用蒸馏水配制成每ml含原生药2.35g备用。

2.动物

昆明种小鼠，雌雄各半，体重20±2g，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，检疫后备用。

(2)实验方法

经预试，本发明药物片剂药液灌胃不能测定LD₅₀，故测定本发明药物片剂的最大耐受量。

取昆明种小鼠20只，雌雄各半，禁食12hr，不禁水，以动物能够接受的最大浓度(每ml含原生药2.35g)和最大容积0.4ml/10g.B.W的剂量灌胃，连续观察7d，记录动物有无毒性反应以及实验前后体重变化，以不产生死亡的剂量为最大耐受量(MTD)。

(3)实验结果

昆明种小鼠灌胃本发明药物药液160g/kg后，发育健康，肌肉丰满，被毛浓密而有光泽、紧贴其身，眼睛明亮而灵活、无异常的分泌物，肛周洁净，摄食正常，四肢健壮，自发活动正常，体重逐渐增加。7d内未见动物死亡及毒副反应。实验结束时间肉眼尸解未见明显病理改变。体重变化详见表7。

      表7本发明药物片剂药液MTD体重变化(X±SD)

(4)结论

昆明种小鼠24h灌胃本发明药物片剂药液40ml/kg×3次(相当于282原生药/kg体重)，动物未出现死亡和异常中毒反应，与人临床日服剂量34.5g相比较，动物日摄入量相当于人临床日用量的490倍。

结果提示：本发明药物片剂，口服，1日3次，每次5片，无急性毒性。

Claims (4)

1.一种用于补养心肾、健脑安神的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂：

制何首乌5.33份、石菖蒲1.33份、补骨脂2份、五味子2.66份、酸枣仁4份、女贞子2份、蜂花粉2.66份、丹参2.66份；

其中，所述的药剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液或丸剂；所述的片剂每片含大黄素，不得少于25ug；每片含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷不得少于1.5mg；胶囊剂每粒中含大黄素，不得少于25ug，含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷不得少于1.5mg；颗粒剂每袋含大黄素，不得少于25ug；含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷不得少于1.5mg；口服液每10ml含大黄素，不得少于25ug，含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷不得少于1.5mg；丸剂每丸含大黄素，不得少于25ug，含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷不得少于1.5mg。

2.根据权利要求1所述的用于补养心肾、健脑安神的药物组合物，其特征在于：它是由制何首乌、石菖蒲、补骨脂、五味子、酸枣仁、女贞子和丹参的水提取物或乙醇提取物，与蜂花粉乙醇提取物混合为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的药剂。

3.权利要求1所述的药物组合物在制备治疗镇静安神的药物中的用途。

4.权利要求1所述的药物组合物在制备健脑益智的药物中的用途。