CN1563104A - 中药附子中多糖的提取和纯化方法 - Google Patents
中药附子中多糖的提取和纯化方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1563104A CN1563104A CN 200410026912 CN200410026912A CN1563104A CN 1563104 A CN1563104 A CN 1563104A CN 200410026912 CN200410026912 CN 200410026912 CN 200410026912 A CN200410026912 A CN 200410026912A CN 1563104 A CN1563104 A CN 1563104A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- polysaccharide
- hour
- radix aconiti
- aconiti lateralis
- lateralis preparata
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明涉及一种中药附子多糖的制备方法，中药附子黑顺片经分选除杂，用粉碎机粉碎，于超声提取器中提取，提取液经过离心、过滤、浓缩，加入乙醇，使浓度达到75％，充分搅拌，静置，离心过滤，得附子粗多糖。粗多糖用蒸馏水复溶，除杂，二次浓缩、醇沉，再依次用无水乙醇、丙酮、***等洗涤后，干燥，得纯化附子多糖精品。本发明生产的附子多糖收率高，纯度高，步骤简便，成本低廉，通过药效学实验证明具有降低小鼠血糖，提高小鼠免疫功能的作用。
Description
本发明涉及一种从中药附子中提取分离纯化多糖的方法，属于药物化学领域。
近年来对具有生理活性的多糖物质，经药理研究与临床应用，确认具有降血糖，抗肿瘤与增强免疫功能的作用，受到越来越多的专家的重视。目前国内外对于人参多糖、刺五加多糖、猪苓多糖、枸杞多糖、香菇多糖等从中药中提取的多糖物质，已应用于临床，取得令人满意的效果。附子属于毛莨科乌头属(Aconitum Carmichaeli Debx)植物的侧根，是一种常用的中药，具有回阳救逆、温补肾阳之功能。国内外对于附子中有效成分的研究，主要集中在附子生物碱方面，而对附子中多糖的研究则很少。多糖物质的提取分离纯化方法有多种，经查阅文献，本发明提供的中国产附子(黑顺片)多糖的提取分离纯化方法未见有报道。发明人在研究筛选其有效部位时，反复进行免疫调节作用及降血糖作用的实验，已确证其药效作用。
本发明的目的是提供三种从中药附子根茎炮制品——黑顺片中提取附子粗多糖的方法。
本发明的另一目的是提供上述粗多糖的纯化方法。
本发明从中药附子中提取附子粗多糖的方法包括如下步骤：
1.将中药附子黑顺片分选除杂，粉碎，过20-50目筛。
2.提取。用下述三种方法之一。
(2.1)置于超声提取器中，加入pH值为8～10的NaOH水溶液，温度80～100℃，提取三次，第一次提取(固液比为1∶10～20)0.5～2小时；滤渣再提取二次(固液比为1∶5～10)，每次0.5～1.5小时。药渣可用于制备附子生物碱。
(2.2)加入pH值为8～10的NaOH水溶液，先煮沸1～2小时，再转于超声提取器中提取，80～100℃，0.5～1.5小时，用纱布过滤；滤渣再超声提取1～2次(固液比为1∶5～10)，0.5～1.5小时/次。药渣可用于制备附子生物碱。
(2.3)提总生物碱将中药附子黑顺片分选除杂，用粉碎机粉碎，取50g加入95％乙醇800ml，转移至索氏提取器中，80～90℃超声回流提取2小时，过滤，乙醇提取液浓缩，用于制备附子生物碱，回收乙醇。先超声提取附子总生物碱，药渣再加入pH值为8～10的NaOH水溶液超声提取2～3次，第一次提取(固液比为1∶10～20)0.5～2小时；滤渣再提取1～2次(固液比为1∶5～10)，0.5～1.5小时/次。
3.纱布过滤，合并提取液，趁热置于离心机中离心(2000～4000r/min)15～25分钟，过滤。
4.将滤液浓缩至1/3～1/5体积。
5.加入无水乙醇，使乙醇浓度达到70～85％，充分搅拌，静置，得粗多糖沉淀。
6.离心、过滤、干燥得粗多糖。
附子粗多糖纯化方法：
1.粗多糖用1-2倍(w/w)蒸馏水复溶。
2.按3∶1～5∶1(v/v)体积加入苯酚/氯仿(1∶1 v/v)试剂，充分搅拌混匀，静置分层。
3.离心(2000～3000r/min)25分钟，过滤得滤液。
4.滤液重复除杂2～4次后，减压浓缩，醇沉，离心，得多糖沉淀。
依次用3～5倍体积的无水乙醇、丙酮、***充分洗涤2～3次，真空干燥后，粉碎得精制附子多糖。
本发明的优点在于：应用超声提取技术，改进除杂工艺，大大缩短了提取时间，收率高、纯度高、成本低。通过药效学实验，证明具有免疫调节功能及降血糖作用。
下面给出实施例：
[例1]：
(1)超声提取将中药附子黑顺片分选除杂，用粉碎机粉碎，取50g；加入pH＝9的NaOH水溶液750ml，温度为90℃的条件下，超声提取二次。第一次提取(固液比为1∶15)1小时；滤渣再提取二次(固液比为1∶5)，每次0.5小时，用四层纱布过滤，将三次提取液合并，趁热置于离心机中离心(3000r/min)20分钟，过滤得滤液。药渣用于制备附子生物碱。
(2)浓缩、醇沉滤液减压浓缩至1/5体积，加入无水乙醇，使乙醇终浓度达到75％，静置4小时，使多糖沉淀完全，置于离心机中离心(3000r/min)10分钟，过滤得多糖沉淀。
(3)复溶、除杂将所得粗多糖重新溶于2倍体积蒸馏水中，按5∶1(v/v)体积加入苯酚/氯仿(1∶1 v/v)试剂，充分搅拌混匀，静置分层后，离心(3000r/min)25分钟，过滤得滤液。滤液重复(2)、(3)步骤二次除杂。
(4)浓缩、醇沉除杂后的滤液，经减压浓缩至1/2体积，加入无水乙醇，使终浓度达到75％，静置4小时，使多糖沉淀完全，将多糖沉淀置于离心机中离心(3000r/min)20分钟，过滤得多糖沉淀。
(5)精制将二次醇沉后的多糖沉淀，先后用5倍体积的无水乙醇、丙酮、***充分洗涤各两次，得附子多糖。
(6)干燥将精制多糖移至真空干燥箱。
(7)将干燥后的多糖粉碎，得白色粉末状附子多糖精品6.2g，装入密闭容器防潮保存，备用。
[例2]：
(1)先水提后超声将中药附子黑顺片分选除杂，用粉碎机粉碎，取50g；加入pH＝9的NaOH水溶液750ml(固液比为1∶15)，100℃煮沸0.5小时，转用超声提取，90℃提取1小时，纱布过滤；滤渣再用超声90℃提取1小时(固液比为1∶5)，用四层纱布过滤，将二次提取液合并，趁热置于离心机中离心(3000r/min)20分钟，过滤得滤液。药渣用于制备附子生物碱。
(2)浓缩、醇沉滤液减压浓缩至1/5体积，加入无水乙醇，使乙醇终浓度达到75％，静置4小时，使多糖沉淀完全，置于离心机中离心(3000r/min)10分钟，过滤得多糖沉淀。
(3)复溶、除杂将所得粗多糖重新溶于2倍体积蒸馏水中，按5∶1(v/v)体积加入苯酚/氯仿(1∶1v/v)试剂，充分搅拌混匀，静置分层后，离心(3000r/min)25分钟，过滤得滤液。滤液重复(2)、(3)步骤二次除杂。
(4)浓缩、醇沉除杂后的滤液，经减压浓缩至1/2体积，加入无水乙醇，使终浓度达到75％，静置4小时，使多糖沉淀完全，将多糖沉淀置于离心机中离心(3000r/min)20分钟，过滤得多糖沉淀。
(5)精制将二次醇沉后的多糖沉淀，先后用5倍体积的无水乙醇、丙酮、***充分洗涤各两次，得附子多糖。
(6)干燥将精制多糖移至真空干燥箱。
(7)将干燥后的多糖粉碎，得白色粉末状附子多糖精品6.7g，装入密闭容器防潮保存，备用。
[例3]：
(1)提总生物碱将中药附子黑顺片分选除杂，用粉碎机粉碎，取50g加入95％乙醇800ml，转移至索氏提取器中，80～90℃超声回流提取2小时，过滤，乙醇提取液浓缩，用于制备附子生物碱，回收乙醇。
(2)超声提取药渣加入pH值为8～10的NaOH水溶液超声提取2次，第一次加入750ml，提取1小时，四层纱布过滤；滤渣再加入500mlNaOH水溶液提取1小时，四层纱布过滤，将两次提取液合并，趁热置于离心机中离心(3000r/min)20分钟，过滤得滤液。
(3)浓缩、醇沉滤液减压浓缩至1/5体积，加入无水乙醇，使乙醇终浓度达到75％，静置4小时，使多糖沉淀完全，置于离心机中离心(3000r/min)10分钟，过滤得多糖沉淀。
(4)复溶、除杂将所得粗多糖重新溶于2倍体积蒸馏水中，按5∶1(v/v)体积加入苯酚/氯仿(1∶1 v/v)试剂，充分搅拌混匀，静置分层后，离心(3000r/min)25分钟，过滤得滤液。滤液重复(2)、(3)步骤二次除杂。
(5)浓缩、醇沉除杂后的滤液，经减压浓缩至1/2体积，加入无水乙醇，使终浓度达到75％，静置4小时，使多糖沉淀完全，将多糖沉淀置于离心机中离心(3000r/min)20分钟，过滤得多糖沉淀。
(6)精制将二次醇沉后的多糖沉淀，先后用5倍体积的无水乙醇、丙酮、***充分洗涤各两次，得附子多糖。
(7)干燥将精制多糖移至真空干燥箱。
(8)将干燥后的多糖粉碎，得白色粉末状附子多糖精品6.0g，装入密闭容器防潮保存，备用。
Claims (2)
1.一种中药附子中多糖的提取方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)将中药附子黑顺片分选除杂，粉碎，过20-50目筛；
(2)提取
(2.1)置于超声提取器中，加入pH值为8～10的NaOH水溶液，温度80～100℃，提取三次，第一次提取(固液比为1∶10～20)0.5～2小时；滤渣再提取二次(固液比为1∶5～10)，每次0.5～1.5小时，或
(2.2)加入pH值为8～10的NaOH水溶液，先煮沸1～2小时，再转于超声提取器中提取，80～100℃，0.5～1.5小时，用纱布过滤；滤渣再超声提取1～2次(固液比为1∶5～10)，0.5～1.5小时/次，或
(2.3)提总生物碱将中药附子黑顺片分选除杂，用粉碎机粉碎，取50g加入95％乙醇800ml，转移至索氏提取器中，80～90℃超声回流提取2小时，过滤，乙醇提取液浓缩，用于制备附子生物碱，回收乙醇；先超声提取附子总生物碱，药渣再加入pH值为8～10的NaOH水溶液超声提取2～3次，第一次提取(固液比为1∶10～20)0.5～2小时；滤渣再提取1～2次(固液比为1∶5～10)，0.5～1.5小时/次；
(3)纱布过滤，合并提取液，趁热置于离心机中离心(2000～4000r/min)15～25分钟，过滤；
(4)将滤液浓缩至1/3～1/5体积；
(5)加入无水乙醇，使乙醇浓度达到70～85％，充分搅拌，静置，得粗多糖沉淀；离心、过滤、干燥得粗多糖。
2.一种中药附子中多糖的纯化方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)粗多糖用1-2倍(w/w)蒸馏水复溶；
(2)按3∶1～5∶1(v/v)体积加入苯酚/氯仿(1∶1v/v)试剂，充分搅拌混匀，静置分层；
(3)离心(2000～3000r/min)25分钟，过滤得滤液；
(4)滤液重复除杂2～4次后，减压浓缩，醇沉，离心，得多糖沉淀；依次用3～5倍体积的无水乙醇、丙酮、***充分洗涤2～3次，真空干燥后，粉碎得精制附子多糖。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200410026912 CN1563104A (zh) | 2004-04-19 | 2004-04-19 | 中药附子中多糖的提取和纯化方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200410026912 CN1563104A (zh) | 2004-04-19 | 2004-04-19 | 中药附子中多糖的提取和纯化方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1563104A true CN1563104A (zh) | 2005-01-12 |
Family
ID=34480796
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 200410026912 Pending CN1563104A (zh) | 2004-04-19 | 2004-04-19 | 中药附子中多糖的提取和纯化方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1563104A (zh) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101839863A (zh) * | 2010-02-10 | 2010-09-22 | 宁波御坊堂生物科技有限公司 | 灵芝螺旋藻中粗多糖的提取和测定方法 |
| CN101538334B (zh) * | 2009-04-24 | 2012-05-30 | 昆明理工大学 | 一种药用回心草多糖提取方法 |
| CN103181957A (zh) * | 2013-01-15 | 2013-07-03 | 浙江中医药大学 | 一种能完全去除附子急性毒性并保留其药效活性的制备工艺 |
| CN104387481A (zh) * | 2014-10-22 | 2015-03-04 | 苏州市中医院 | 一种熟附子多糖的提取方法及其新用途 |
| CN106492002A (zh) * | 2016-10-17 | 2017-03-15 | 紫云自治县紫香源农林科技有限责任公司 | 一种楠竹液的提取方法 |
| CN109021127A (zh) * | 2018-06-29 | 2018-12-18 | 北京工商大学 | 一种马齿苋多糖的提取方法 |
| CN110746512A (zh) * | 2018-07-24 | 2020-02-04 | 广东省中医院 | 一种炮天雄均一多糖及其制备方法及应用 |
-
2004
- 2004-04-19 CN CN 200410026912 patent/CN1563104A/zh active Pending
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101538334B (zh) * | 2009-04-24 | 2012-05-30 | 昆明理工大学 | 一种药用回心草多糖提取方法 |
| CN101839863A (zh) * | 2010-02-10 | 2010-09-22 | 宁波御坊堂生物科技有限公司 | 灵芝螺旋藻中粗多糖的提取和测定方法 |
| CN101839863B (zh) * | 2010-02-10 | 2012-03-21 | 宁波御坊堂生物科技有限公司 | 灵芝螺旋藻片中粗多糖的提取和测定方法 |
| CN103181957A (zh) * | 2013-01-15 | 2013-07-03 | 浙江中医药大学 | 一种能完全去除附子急性毒性并保留其药效活性的制备工艺 |
| CN104387481A (zh) * | 2014-10-22 | 2015-03-04 | 苏州市中医院 | 一种熟附子多糖的提取方法及其新用途 |
| CN106492002A (zh) * | 2016-10-17 | 2017-03-15 | 紫云自治县紫香源农林科技有限责任公司 | 一种楠竹液的提取方法 |
| CN109021127A (zh) * | 2018-06-29 | 2018-12-18 | 北京工商大学 | 一种马齿苋多糖的提取方法 |
| CN109021127B (zh) * | 2018-06-29 | 2021-09-10 | 北京工商大学 | 一种马齿苋多糖的提取方法 |
| CN110746512A (zh) * | 2018-07-24 | 2020-02-04 | 广东省中医院 | 一种炮天雄均一多糖及其制备方法及应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1291028C (zh) | 一种从茶叶中提取茶多酚副产咖啡碱和茶多糖的方法 | |
| CN102504041B (zh) | 一种石斛多糖的分离纯化方法 | |
| CN101229199B (zh) | 北冬虫夏草菌丝体中多种有效成分的综合提取方法 | |
| CN103333067B (zh) | 一种高纯度绿原酸的提取方法 | |
| CN104189041B (zh) | 一种提取人参皂苷的方法及制备得到的人参皂苷提取物 | |
| CN104177370B (zh) | 一种从芝麻粕中制备高含量芝麻素的方法 | |
| CN102060932A (zh) | 一种同步生产葛根淀粉、葛根黄酮的工艺方法 | |
| CN102146142B (zh) | 一种黄芪多糖的制备方法 | |
| CN101961371B (zh) | 从甜味绞股蓝中提取分离人参皂苷、黄酮、多糖的方法 | |
| CN110272932A (zh) | 一种灵芝孢子粉多糖肽的制备方法 | |
| CN101824098B (zh) | 快速沉淀分离肝素钠中多硫酸软骨素的方法 | |
| CN1557841A (zh) | 从茶叶中综合提取茶多糖、茶多酚、茶氨酸、咖啡碱的方法 | |
| CN100402543C (zh) | 贯叶连翘中金丝桃苷和金丝桃素的制备方法 | |
| CN101982471B (zh) | 一种从杜仲果中提取桃叶珊瑚苷的工艺方法 | |
| CN103613679B (zh) | 一种以鲜天麻为原料的天麻多糖制备方法 | |
| CN1563104A (zh) | 中药附子中多糖的提取和纯化方法 | |
| CN103505492B (zh) | 一种使用超滤法制备高抗氧化值红景天提取物的方法 | |
| CN1814608A (zh) | 一种从亚麻籽中提取纯化开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷的方法 | |
| CN1207301C (zh) | 黄芩中黄芩苷提取方法 | |
| CN107880149A (zh) | 一种铁皮石斛多糖的提取工艺 | |
| CN102180921A (zh) | 一种从枸杞叶中提取高纯度芦丁的方法 | |
| CN111205300A (zh) | 一种高效提取芝麻粕中芝麻素的方法 | |
| CN108359021B (zh) | 一种快速制备具有抗病毒和免疫调节活性的亚麻籽多糖的方法 | |
| CN1281600C (zh) | 沙棘黄酮配基的高纯度提取方法 | |
| CN1485324A (zh) | 以膜分离技术制取沙棘黄酮的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |