CN1526444A - 免疫激活用组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种含有经过酶处理的蜂王浆和具有免疫激活作用的蘑菇作为有效成分的免疫激活用组合物、和由该组合物构成的用于免疫激活的食品及其医药品。其目的在于开发出一种新颖且安全性高的免疫激活用组合物。
Description
技术领域
本发明涉及一种免疫激活用组合物,具体而言,涉及一种含有经过酶处理的蜂王浆和具有免疫激活作用的蘑菇作为有效成分的免疫激活用组合物、和由该组合物构成的用于免疫激活的食品或医药品。
背景技术
以“王浆”闻名的蜂王浆,是由雌性工蜂分泌而成的作为蜂王食饵的乳白色物质,它是由蛋白质、碳水化合物、脂质等构成,它所具有的成长促进作用及延长寿命的效果等多种生理活性众人皆知。
因此,在食品中经常使用蜂王浆,但如果将其添加到液体食品中时,由于它的溶解性差,易生成白色混浊或者沉淀,不仅外观上不受欢迎,而且也遇到了不能使用高浓度的蜂王浆的问题。
在此,利用酶将具有难水解性的蛋白质进行水解,使溶解稳定性、体内吸收性、低过敏原性得以提高的经过酶处理的蜂王浆近年被开发出来(专利文献1和2)。
另一方面,蜂王浆不仅可单独使用,根据目的也可与其它的健康食品成分组合起来使用。
例如,在专利文献3和4中记载了由蜂王浆和巴西蘑菇(Agaricusblazei Murill)这样的蘑菇类组合构成的具有抗肿瘤活性的食品等。
但在此使用的蜂王浆并不是酶处理物。并且经过酶处理的蜂王浆和巴西蘑菇的组合比它们单独分别使用具有更好的免疫激活作用的事实还不被人们所知。
[专利文献1]
专利第2623044号公报
[专利文献2]
特开2002-112715号公报
[专利文献3]
特开平11-127338号公报
[专利文献4]
特开2002-229号公报
发明内容
在这种状况下,本发明人发现,当经过酶处理的蜂王浆与巴西蘑菇组合使用时,比它们单独使用或未经过酶处理的蜂王浆与巴西蘑菇的组合使用能获得更优良的免疫激活作用。
因此,本发明提供一种含有经过酶处理的蜂王浆和具有免疫激活作用的蘑菇作为有效成分的免疫激活用组合物、和由该组合物构成的用于免疫激活的食品或医药品。
具体实施方式
在本发明中,所谓经过酶处理的蜂王浆,只要是经过酶处理过的蜂王浆即可,它包括经过酶处理过的蜂王浆本身,或者是将经过酶处理过的蜂王浆进行蛋白质改性处理、例如通过热处理将酶除去、再根据需要使其干燥粉末化、例如冻结干燥等任意的形态。
对于酶来说,能够水解蜂王浆的酶均可,可使用一种也可使用任意二种以上的组合。
作为这样的酶可举出如蛋白质水解酶、糖水解酶、脂酶等各种酶,但对蜂王浆能进行充分水解的酶,优选使用如胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、肠促胰液肽酶、アスペルギロペプチダ一ゼA等的蛋白水解酶,或者是例如纤维素酶、葡萄糖苷酶、半乳糖苷酶、甘露糖苷酶等的糖水解酶与蛋白质水解酶的组合。
酶处理可根据所使用的各种酶按通常方法进行,例如在蜂王浆中可添加0.1~3.0重量%的酶,在20~60℃下,优选在35~55℃下,处理30分钟~24小时,优选处理2~5小时,即可得到经过酶处理过的蜂王浆。
另外,在使用多种酶的情况下,当酶的处理条件相似时,可在同一条件下同时进行多种酶处理;当处理条件不同时,可分别在适合于各个酶的条件下依次进行酶处理,可对蜂王浆进行酶处理。
所谓具有免疫激活作用的蘑菇,是指含有以β-葡聚糖为主体的多糖类等或其它的低分子化合物、并被公认的具有免疫激活作用的蘑菇。具体而言,可举出如巴西蘑菇(Agaricus blazei Murill)、绣球菌、灰树花菌(Grifola frondosa)、桑黄菌(Phellinus Linteus)、灵芝、猴头菇、云芝(Coriolasversicolor)、香菇(Lentinus edodes)、冬虫夏草、平菇(Pleurotusostreatus)、裂褶菇(Schizophyllum)、白桦茸(Phaeoporus obliquus)、真姬菇(Hypsizigusmaromoreus)、金针菇(Flammulina Velutipes)、荷叶离褶伞菌(Lyophyllum decastes)、Mycoleptodonoides aitchisonii(未有中文译名)、双孢蘑菇(Agaricus bisporus)等。其中,优选巴西蘑菇、灰树花菌、桑黄菌、灵芝、猴头菇、冬虫夏草、白桦茸,特别优选巴西蘑菇。
可使用这些蘑菇中的一种或者任意二种以上的组合,并根据其种类,选用适宜的子实体或菌丝体等部分,例如巴西蘑菇可以分别单独使用它的子实体、菌丝体的部分,也可以组合使用。
对于蘑菇的使用形态,可举出天然形态的蘑菇、干燥蘑菇、蘑菇的粉碎物、蘑菇的提取物或者其合成品等。例如,就巴西蘑菇来说,可使用干燥后的巴西蘑菇粉碎物,或者用热水提取的提取液,提取液还可根据需要进行冻结干燥等,再将其干燥粉末化。
根据本发明者进行的试验证实,将经过酶处理的蜂王浆和巴西蘑菇的热水提取液进行组合使用,由于其协同作用,与经过酶处理的蜂王浆、巴西蘑菇或者未经酶处理的蜂王浆的单独使用,或者未经酶处理的蜂王浆和巴西蘑菇的组合使用相比较,可得到更好的免疫激活作用。
因此,使用了经过酶处理的蜂王浆和如巴西蘑菇这样的具有免疫激活作用蘑菇的本发明的组合物,用1∶1000~1000∶1的比例、优选为1∶100~100∶1进行组合,利用其本身或使用在该领域中公知的赋形剂,即可根据常规方法使之制剂化,制成液体制剂或固体制剂。
作为液体制剂可举出液剂、糖浆剂等,固体制剂则有散剂、颗粒剂、锭剂、咀嚼片剂、含片等的经口投用形态。
在制造液体制剂时,作为赋形剂可使用水、甘油、丙二醇、单糖浆、乙醇、乙二醇、聚乙二醇、山梨糖醇等。
此外,在制造固体制剂时,作为赋形剂可使用例如乳糖、蔗糖、葡萄糖、玉米淀粉、白明胶、淀粉、糊精、磷酸钙、碳酸钙、合成或天然的硅酸铝、氧化镁、干燥氢氧化铝、硬脂酸镁、碳酸氢钠、干燥酵母等。
再者,在本发明的组合物中,根据需要可加入柠檬酸、磷酸、苹果酸或其盐类等的稳定剂;スクラロ一ス(SucraloseR,未有中文译名)、アセスルフアムカリウム(未有中文译名)等的高甜度的甜味料或蔗糖、果糖、蜂蜜等的甜味剂;醇类、甘油等的防腐剂;如稀释剂、缓冲剂、着香剂和着色剂等的通常的添加剂也可使用。
如此制成的本发明的组合物,其本身可以作为食品或者医药品使用,也可将这些组合物作为食品或医药品的原料、中间制品或最终制品,通过混合或喷雾等制成用于免疫激活的食品或医药品。
在此,作为食品除了普通的食品以外,还包括比一般食品具有更积极意义的以保健、维护增进健康为目的的食品,例如健康食品、功能性食品、营养辅助食品、增补剂或特定保健用食品等。
作为普通食品,可举出例如以下的例子:饮料类(咖啡、果汁、茶饮料那样的清凉饮料、乳饮料、乳酸菌饮料、酸奶饮料、碳酸饮料、日本酒、洋酒、果实酒、蜂蜜酒那样的酒);面包抹酱类(牛奶蛋糕酱等);糊类(水果糊等);西式点心类(巧克力、炸面包圈、派、小面包冰激凌、口香糖、果冻、硬糖、曲奇、蛋糕、布丁);日式点心类(年糕团、米糕、有馅小馒头、西班牙甜蛋糕、小豆蜜、羊羹);冷吃类(冰激凌、冰硬糖、果子露);加工品类(咖喱、牛肉盖浇饭、杂煮、大酱汤、汤、肉酱、面类食品、酱菜、果酱、蜂蜜、蜂胶);调味料类(调味汁、撒在饭上的颗粒调味料、美味调味料类、汤之素)
此外,作为健康食品、医药品等,可举出片剂、糖衣锭、颗粒、粉末、硬胶囊、软胶囊、咀嚼片、糖浆等的形态。
本发明的免疫激活用组合物在作为健康食品、医药品等使用时,对于体重为60kg的成人,直接换算使用经过酶处理的蜂王浆的一日推荐服用量为100~10,000mg,优选为300~3,000mg。
另外,作为食品使用时,使用量优选为不要对食品的味及外观产生影响。
然而,这些服用量都要依据服用组合物的人的健康状态、投给方法及与其它制剂的组合等各种因素而进行变动。
[实施例]
下面例举实施例和试验例进行说明,这些实施例对本发明不构成任何限定。
实施例1:
将3g的蜂王浆用30ml去离子水溶解,用涡流器搅拌后,在搅拌液中添加20%盐酸并调整pH至1.2。其后,加入相对于试料为0.4重量%的胃蛋白酶(来源于猪胃粘膜,Nacalai Tesque公司生产)12mg,在37℃下进行恒温培养。
4小时后,在得到的液体中加入20%氢氧化钠溶液,使pH调整至6.8后,将其进行冻结干燥,即可得到胃蛋白酶水解蜂王浆。
将巴西蘑菇子实体的粉碎干燥物用80℃的热水加热30分钟后,在1500rpm、5分钟、20℃的条件下进行离心分离,所得上清液直接使用,或者将其进行适宜的冻结干燥后使用。
将包括得到的胃蛋白酶水解蜂王浆和巴西蘑菇提取物在内的以下6种成分溶解在水中,即可得到全部100ml的保健饮料型制剂。
胃蛋白酶水解蜂王浆 0.7g
巴西蘑菇提取物 0.3g
柠檬果汁 20ml
蜂胶 0.3g
维生素C 0.2g
蜂蜜 13g
实施例2:
实施例1的胃蛋白酶水解蜂王浆 0.7g
实施例1的巴西蘑菇提取物 0.3g
酱油 2.5g
醋 2.0g
色拉油 2.5g
酱 0.1g
蜂蜜 1.0g
蔬菜浸提物 1.4g
美味调味料 0.5g
香辛料联社 适量
将上述各种成分按照常规方法进行充分地混合,即可得到共11.0g的调味汁。
实施例3:
实施例1的胃蛋白酶水解蜂王浆 13mg
实施例1的巴西蘑菇提取物 7mg
水饴 600mg
砂糖 5000mg
将上述各成分按照常规方法进行混合,即可得到1块糖。
实施例4:
与实施例1同样操作后,加入相对于试料为0.4重量%的胃蛋白酶和0.2重量%的胰蛋白酶(来源于牛胰腺,BOEHRINGER MANNHEIM公司生产)6mg,在37℃下进行恒温培养。
4小时后,将恒温培养后的溶液在98℃下加热处理15分钟,再将所得溶液进行冻结干燥,即可得到胃蛋白酶-胰蛋白酶水解蜂王浆。
将包括所得到的胃蛋白酶-胰蛋白酶水解蜂王浆与下列各种粉末进行均匀地混合,再通过60目筛后,即可将总量250mg的粉末装入1号凝胶胶囊中,得到胶囊剂。
胃蛋白酶-胰蛋白酶水解蜂王浆 50mg
实施例1的巴西蘑菇提取物 20mg
乳糖 103mg
玉米淀粉 75mg
硬脂酸镁 2mg
实施例5:
在10g蜂王浆中加 10ml去离子水,用涡流器搅拌直到均匀为止。在其中同时加入1.0重量%アスペルギロペプチダ一ゼA和0.2重量%的β-甘露糖苷酶,然后在50℃下进行1个小时的恒温培养。
在此之后,再在80℃下进行30分钟的加热处理,在使酶失活的同时进行杀菌处理,即可得到アスペルギロペプチダ一ゼA·β-甘露糖苷酶水解蜂王浆。
アスペルギロペプチダ一ゼA·β-甘露糖苷酶水解蜂王浆 100mg
实施例1的巴西蘑菇提取物 50mg
微晶质纤维素 50mg
玉米淀粉 75mg
硬脂酸镁 2mg
将アスペルギロペプチダ一ゼA·B-甘露糖苷酶水解蜂王浆和实施例1的巴西蘑菇提取物及微晶质纤维素混合并进行冻结干燥后,再与玉米淀粉的一部分混合,然后通过常规方法使之粒状化。
将所得到的粒状物过筛后,加入剩下的玉米淀粉和硬脂酸镁进行混合。接着即可将得到的粒状物放入打锭机中得到250mg的锭剂。
试验例:
根据特开平11-174053号公报中记载的免疫能测定方法,测定蜂王浆和其酶处理物及它们与巴西蘑菇的组合针对淋巴球的癌细胞的细胞抑制活性(NK活性),并比较了它们的免疫激活作用。
1.测定方法
将蜂王浆、在实施例1中调制的胃蛋白酶水解蜂王浆及巴西蘑菇提取物溶解在培养液(组成:RPMI液体培养基+10%牛胎儿血清)中,通过0.20μm的过滤器灭菌后,对此分别设定具有以下浓度的试验组:
(组1)蜂王浆100ng/ml
(组2)经过酶处理的蜂王浆100ng/ml
(组3)巴西蘑菇提取物1ng/ml
(组4)蜂王浆100ng/ml+巴西蘑菇提取物1ng/ml
(组5)经过酶处理的蜂王浆100ng/ml+巴西蘑菇提取物1ng/ml
在从被验者4人(男性2人,女性2人)的血液中采集的淋巴球中,等量添加上述各组的试验液后,在37℃下培养一昼夜,使淋巴球活性化。
接着,将淋巴球和用铕(Eu)标识的癌细胞(骨髓性白血病细胞株K562细胞)以5∶1的比例进行了混合。
经一定时间培养后,将癌细胞受到的伤害程度用Eu的溶出量进行定量,根据以下的公式求出NK活性:
[式1]
*人为地将癌细胞全部破坏时游离的Eu量
**淋巴球无添加时游离的背景Eu量
此外,对只有淋巴球时的NK活性和已知免疫激活效果的Picibanil的NK活性进行控制,以只有淋巴球时的NK活性为100%,算出各试验组的NK活性增加率作为4人被验者的平均值。
2.结果
[表1] 单位:%
组1 | 组2 | 组3 | 组4 | 组5 | |
NK活性增加率 | 108.2 | 109.0 | 104.6 | 115.3 | 127.3 |
未经过酶处理的蜂王浆和经过酶处理的蜂王浆单独比较,其免疫激活作用没有显著差别。但是,将它们与巴西蘑菇组合后,却显示出经过酶处理的蜂王浆组合比未经过酶处理的蜂王浆组合能获得明显高的免疫激活作用。
发明效果
根据本发明,通过利用含有经过酶处理的蜂王浆和具有免疫激活作用的蘑菇作为有效成分的组合物,与其单独使用相比较,由于它们的协同作用,可以获得更好的免疫激活效果。
Claims (5)
1.一种免疫激活用组合物,其特征在于:含有经过酶处理的蜂王浆和具有免疫激活作用的蘑菇作为有效成分。
2.如权利要求1所述的组合物,其特征在于:经过酶处理的蜂王浆是用蛋白质水解酶处理的蜂王浆。
3.如权利要求1所述的组合物,其特征在于:经过酶处理的蜂王浆是用蛋白质水解酶和糖水解酶处理的蜂王浆。
4.如权利要求1~3中任一项所述的组合物,其特征在于:具有免疫激活作用的蘑菇是选自巴西蘑菇、灰树花菌、桑黄菌、灵芝、猴头菇、冬虫夏草和白桦茸中的。
5.一种由权利要求1~4中任一项所述的组合物构成的用于免疫激活的食品或医药品。
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