CN1438320A - 利用人cyld基因对肿瘤进行诊断、治疗及药物开发的方法 - Google Patents
利用人cyld基因对肿瘤进行诊断、治疗及药物开发的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1438320A CN1438320A CN 02110851 CN02110851A CN1438320A CN 1438320 A CN1438320 A CN 1438320A CN 02110851 CN02110851 CN 02110851 CN 02110851 A CN02110851 A CN 02110851A CN 1438320 A CN1438320 A CN 1438320A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- leu
- ser
- glu
- cyld
- gly
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种诊断肿瘤尤其是毛发上皮瘤的方法，它包括检测个体的CYLD基因、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异，存在变异就表明该个体患肿瘤的可能性大于正常人群。本发明还公开了相应的检测试剂盒，以及***的方法和药物组合物。
Description
技术领域
本发明涉及生物工程和医学领域。更具体地，本发明涉及利用人CYLD基因及其编码产物诊断和***尤其是毛发上皮瘤的方法，以及含有CYLD基因和/或蛋白的药物组合物。
背景技术
毛发上皮瘤是一种皮肤肿瘤。其通常在***前发病，好发于面部，尤其是鼻唇沟及上唇，背部，头皮，颈部，躯干，四肢亦可受累。其皮损呈半球形或圆锥形，质地坚实，半透明，黄色或淡红色，有时较大的皮损表明可见毛细血管扩张。毛发上皮瘤不仅影响美容，因为其使背部，头皮，颈部，躯干，四肢受累，故严重者还会在生活中遇到困难。该病为常染色体显性遗传疾病，其发病的机理目前还不清楚。对于该疾病目前尚无满意的治疗方法。
然而，迄今为止，尚没有充分揭示毛发上皮瘤的确切原因，也没有人揭示出毛发上皮瘤与某种蛋白存在直接的相关性。此外，本领域还缺乏早期诊断毛发上皮瘤疾病的有效方法以及非手术治疗毛发上皮瘤的有效手段。
CYLD是一种已知的蛋白，其基本信息如下：
英文：Gene from：Homo sapiens chromosome 16 working draft sequencesegment.
NCBI：Contig NT_030834
GENE：Gene from：Homo sapiens chromosome 16 working draft sequencesegment.gi|17488444：243550-308161
CYLD的DNA序列如SEQ ID NO：1所示，ORF位于第392-3262位，编码一个全长956个氨基酸的蛋白质(SEQ ID NO：2)。CYLD的其他信息可以从Http：//www.ncbi.nlm.nih.gov获得。
CYLD基因曾被报道其外显子的突变导致了圆柱瘤的发生，但国际上尚无任何文章报道CYLD基因和毛发上皮瘤的关系。毛发上皮瘤的遗传机理信息可从NCBI的OMIM获得。
因此，本领域迫切需要开发新的诊断和治疗毛发上皮瘤的有效方法，以及相关的治疗药物，诊断技术和试剂。
发明内容
本发明的一个目的就是提供一种新的诊断(尤其是早期诊断)肿瘤尤其是毛发上皮瘤的方法及检测试剂盒。
本发明的另一目的是提供一种新的***尤其是毛发上皮瘤的方法。
本发明的再一目的是提供一种***尤其是毛发上皮瘤的药物组合物。
在本发明的第一方面，提供了一种对个体的肿瘤易感性进行诊断的方法，它包括步骤：
检测该个体的CYLD基因、转录本和/或蛋白，并与正常的CYLD基因、转录本和/或蛋白相比较，
存在差异就表明该个体患肿瘤的可能性高于正常人群。
较佳地，被检测的是CYLD的基因或转录本，并与正常CYLD核苷酸序列比较差异。更佳地，所述的肿瘤是毛发上皮瘤，且所述的差异选自：SEQ ID NO：1中第1853位A缺失。
在本发明的第二方面，提供了一种***的方法，它包括步骤：给需要所述治疗的病人施用安全有效量的正常CYLD蛋白。较佳地，CYLD蛋白被局部施用于病灶处。
在本发明的第三方面，提供了一种CYLD蛋白在制备药物组合物方面的的用途以及相应的药物组合物，它含有安全有效量的人CYLD蛋白以及药学上可接受的载体。较佳地，它是药膏。
在本发明的第四方面，提供了一种检测肿瘤的试剂盒，它包括特异性扩增CYLD基因或转录本的引物。较佳地，它还含有与突变部位结合的探针和/或识别突变位点的酶。
本发明的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。
附图说明
图1显示了一常染色体显性遗传的毛发上皮瘤家系的谱系图。
图2为典型的患者的脸部照片。
图3为患者的活检病理照片。
图4显示了CYLD基因中的序列变化，其中SEQ ID NO：1的第1853位发生了碱基的缺失，从而导致了移码突变，使其编码的蛋白缩短。
具体实施方式
本发明人经过广泛而深入的研究，首次发现和证明了CYLD与毛发上皮瘤密切相关，而且发现了它的新功能：CYLD的改变将直接导致毛发上皮瘤。进一步的研究还暗示，CYLD是一抑癌基因，其突变会导致多种肿瘤的发生。在此基础上完成了本发明。
通过对一常染色体显性遗传的毛发上皮瘤家系进行遗传连锁分析、候选基因筛选以及大规模测序，已证实该家族中的所有病人在CYLD基因的第10号外显子的1853位发生了碱基的缺失，从而导致了移码突变，使其氨基酸编码缩短，蛋白翻译异常，最终导致了毛发上皮瘤的发生。正常的CYLD编码全长956个氨基酸的蛋白(SEQ ID NO：2)，如果在1853位处发生了碱基A的缺失则只编码全长为496个氨基酸的蛋白(SEQ ID NO：5)和部分非正常的小肽。
CYLD的突变导致了人类个体表现出肿瘤，尤其是毛发上皮瘤。我们的研究表明，正常的CYLD的存在是皮肤正常生理状态的关键，同时CYLD的突变还会导致其他许多肿瘤。
鉴于人类CYLD的变异是导致毛发上皮瘤等肿瘤的直接原因之一。因此，可根据此基因及其表达产物设计的药物和诊断治疗技术，可用于诊断和治疗人类的肿瘤，其中包括但并不限于：毛发上皮瘤、小汗腺瘤、黑色素瘤、圆柱瘤、胃癌、肝癌等。
本发明的人CYLD核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据CYLD的有关核苷酸序列，尤其是开放阅读框序列来设计引物，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板，扩增而得有关序列。当序列较长时，常常需要进行两次或多次PCR扩增，然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。
一旦获得了有关的序列，就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体，再转入细胞，然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。
此外，还可用人工合成的方法来合成有关序列，尤其是片段长度较短时。通常，通过先合成多个小片段，然后再进行连接可获得序列很长的片段。
将CYLD编码序列***合适的表达载体，再转入宿主细胞，就可以分离出CYLD蛋白。
基于本发明的新风险，CYLD蛋白或多肽有多方面的新用途。这些用途包括(但不限于)：直接做为药物治疗CYLD蛋白功能低下或丧失所致的疾病(如毛发上皮瘤等肿瘤)，和用于筛选促进CYLD蛋白功能的物质，如抗体、多肽或其它配体。用表达的重组人CYLD蛋白筛选多肽库可用于寻找有治疗价值的能刺激人CYLD蛋白功能的多肽分子。
另一方面，本发明还包括对人CYLD DNA或是其片段编码的多肽具有特异性的多克隆抗体和单克隆抗体，尤其是单克隆抗体。这里，“特异性”是指抗体能结合于人CYLD基因产物或片段。较佳地，指那些能与人CYLD基因产物或片段结合但不识别和结合于其它非相关抗原分子的抗体。本发明中抗体包括那些能够结合并抑制人CYLD蛋白的分子，也包括那些并不影响人CYLD蛋白功能的抗体。
本发明不仅包括完整的单克隆或多克隆抗体，而且还包括具有免疫活性的抗体片段，如Fab’或(Fab)2片段；抗体重链；抗体轻链；遗传工程改造的单链Fv分子；或嵌合抗体。
本发明的抗体可以通过本领域内技术人员已知的各种技术进行制备。例如，纯化的人CYLD基因产物或者其具有抗原性的片段，可被施用于动物以诱导多克隆抗体的产生。与之相似的，表达人CYLD蛋白或其具有抗原性的片段的细胞可用来免疫动物来生产抗体。多种佐剂可用于增强免疫反应，包括但不限于弗氏佐剂等。
本发明的抗体也可以是单克隆抗体。此类单克隆抗体可以利用杂交瘤技术来制备。本发明的抗体包括能阻断人CYLD蛋白功能的抗体以及不影响人CYLD蛋白功能的抗体。本发明的各类抗体可以利用人CYLD基因产物的片段或功能区，通过常规免疫技术获得。这些片段或功能区可以利用重组方法制备或利用多肽合成仪合成。与人CYLD基因产物的未修饰形式结合的抗体可以用原核细胞(例如E.Coli)中生产的基因产物来免疫动物而产生；与翻译后修饰形式结合的抗体(如糖基化或磷酸化的蛋白或多肽)，可以用真核细胞(例如酵母或昆虫细胞)中产生的基因产物来免疫动物而获得。
抗人CYLD蛋白的抗体可用于免疫组织化学技术中，检测活检标本中的人CYLD蛋白。一种优选的抗CYLD抗体是不识别正常CYLD但识别突变CYLD的抗体(由于突变的CYLD所编码的蛋白比正常的CYLD所编码的蛋白小得多，故可设计只识别异常小蛋白的抗体)，或者识别正常CYLD但不识别突变CYLD的抗体。利用该抗体对正常和异常CYLD蛋白的特异性差异，可以方便地进行蛋白质水平的毛发上皮瘤易感性检测。
利用本发明CYLD蛋白，通过各种常规筛选方法，可筛选出与CYLD蛋白发生相互作用的物质，如抑制剂、激动剂或拮抗剂等。
本发明CYLD蛋白及其抗体、抑制剂、激动剂、拮抗剂等，当在治疗上进行施用(给药)时，可提供不同的效果。通常，可将这些物质配制于无毒的、惰性的和药学上可接受的水性载体介质中，其中pH通常约为5-8，较佳地pH约为6-8，尽管pH值可随被配制物质的性质以及待治疗的病症而有所变化。配制好的药物组合物可以通过常规途径进行给药，其中包括(但并不限于)：肌内、静脉内、皮下、或局部给药(包括病灶处)。较佳地是局部给药。
正常的CYLD多肽可直接用于疾病治疗，例如，用于毛发上皮瘤方面的治疗。在使用本发明CYLD蛋白时，还可同时使用其他***的药剂。
本发明还提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的本发明CYLD蛋白以及药学上可接受的载体或赋形剂。这类载体包括(但并不限于)：盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、及其组合。药物制剂应与给药方式相匹配。本发明的药物组合物可以被制成针剂形式，例如用生理盐水或含有葡萄糖和其他辅剂的水溶液通过常规方法进行制备。诸如药膏、片剂和胶囊之类的药物组合物，可通过常规方法进行制备。药物组合物如药膏、针剂、溶液、片剂和胶囊宜在无菌条件下制造。活性成分的给药量是治疗有效量，例如每天约0.1微克/千克体重-约10毫克/千克体重。此外，本发明的多肽还可与其他治疗剂一起使用。
使用药物组合物时，是将安全有效量的CYLD蛋白或其拮抗剂、激动剂施用于哺乳动物，其中该安全有效量通常至少约0.1微克/千克体重，而且在大多数情况下不超过约10毫克/千克体重，较佳地该剂量是约0.1微克/千克体重-约100微克/千克体重。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。
人CYLD蛋白的多聚核苷酸也可用于多种治疗目的。基因治疗技术可用于治疗由于CYLD蛋白的无表达或异常/无活性的CYLD蛋白的表达所致的细胞增殖、发育或代谢异常。构建携带CYLD基因的重组病毒载体的方法可见于已有文献(Sambrook，et al.)。另外重组人CYLD基因可包装到脂质体中，然后再转移至细胞内。
多聚核苷酸导入组织或细胞内的方法包括：将多聚核苷酸直接注入到体内组织中；或在体外通过载体(如病毒、噬菌体或质粒等)先将多聚核苷酸导入细胞中，再将细胞移植到体内等。
本发明还涉及定量和定位检测人CYLD蛋白水平的诊断试验方法。这些试验是本领域所熟知的，且包括FISH测定和放射免疫测定。
一种检测检测样品中是否存在CYLD蛋白的方法是利用CYLD蛋白的特异性抗体进行检测，它包括：将样品与CYLD蛋白特异性抗体接触；观察是否形成抗体复合物，形成了抗体复合物就表示样品中存在CYLD蛋白。
CYLD蛋白的多聚核苷酸可用于CYLD蛋白相关疾病的诊断和治疗。在诊断方面，CYLD蛋白的多聚核苷酸可用于检测CYLD蛋白的表达与否或在疾病状态下CYLD蛋白的异常表达。如CYLD DNA序列可用于对活检标本的杂交以判断CYLD蛋白的表达异常。杂交技术包括Southern印迹法，Northern印迹法、原位杂交等。这些技术方法都是公开的成熟技术，相关的试剂盒都可从商业途径得到。本发明的多核苷酸的一部分或全部可作为探针固定在微阵列(microarray)或DNA芯片(又称为“基因芯片”)上，用于分析组织中基因的差异表达分析和基因诊断。用CYLD蛋白特异的引物进行RNA-聚合酶链反应(RT-PCR)体外扩增也可检测CYLD蛋白的转录产物。
本发明还提供了一种检测人CYLD基因表达是否异常的方法，它包括步骤：(a)确定在人CYLD基因的SEQ ID NO：1所示序列的第1853位的核苷酸；和(b)检测在所述位置是否存在碱基A缺失。
检测CYLD基因的突变也可用于诊断毛发上皮瘤。检测可以针对cDNA，也可针对基因组DNA。CYLD蛋白突变的形式包括与正常野生型CYLD DNA序列相比的点突变、易位、缺失、重组和其它任何异常等。可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。另外，突变有可能影响蛋白的表达，因此用Northern印迹法、Western印迹法可间接判断基因有无突变。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York：Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1
常染色体显性毛发上皮瘤家系的确定
1.1对象
一个毛发上皮瘤大家系，共4代，53人。其中毛发上皮瘤患者共有20人(图1) 。
实施例2
确定CYLD突变是导致毛发上皮瘤的直接原因
2.1遗传连锁分析
利用微卫星标记进行该家系的连锁分析。共利用384对微卫星引物(RESEARCH GENETICS)对整个基因组进行扫描，将该家系毛发上皮瘤基因定位于人的第16号染色体上。进一步合成引物将致病基因定位到微卫星标记d16s753和d16s3253之间的14(cM)厘摩的遗传距离内，如图1所示。此物理距离大约有1千4百万个碱基对，1百多个基因。
| 标记 | θ处的Lod值＝ | 0.4 | 最大值 | |||||||||
| 位置(cm) | n | het | 0.0 | 0.01 | 0.05 | 0.1 | 0.2 | 0.3 | Lod | θ | ||
| D16s3093 | 52.26 | 6 | 0.7315 | -inf. | -5.24 | -1.95 | -0.72 | 0.18 | 0.36 | 0.22 | 0.36 | 0.3 |
| D16s753 | 57.79 | 6 | / | -inf. | 1.27 | 1.77 | 1.80 | 1.51 | 1.01 | 0.45 | 1.80 | 0.1 |
| D16s411 | 59.68 | 7 | 0.7943 | 6.32 | 6.22 | 5.80 | 5.25 | 4.05 | 2.71 | 1.22 | 6.32 | 0.0 |
| D16s3396 | 63.78 | 5 | / | 2.96 | 2.91 | 2.70 | 2.43 | 1.83 | 1.16 | 0.46 | 2.96 | 0.0 |
| D16s757 | 65.10 | 4 | / | 6.29 | 6.19 | 5.77 | 5.22 | 4.02 | 2.68 | 1.20 | 6.29 | 0.0 |
| D16s770 | 65.77 | 4 | / | 3.26 | 3.20 | 2.96 | 2.64 | 1.96 | 1.21 | 0.43 | 3.26 | 0.0 |
| D16s2623 | 66.10 | 5 | / | 6.15 | 6.05 | 5.63 | 5.09 | 3.92 | 2.60 | 1.16 | 6.15 | 0.0 |
| D16s3253 | 71.77 | 6 | / | -inf. | 0.49 | 1.05 | 1.17 | 1.05 | 0.77 | 0.42 | 1.17 | 0.1 |
| D16s2260 | 81.15 | 5 | / | -inf. | -5.50 | -2.26 | -1.06 | -0.16 | 0.09 | 0.06 | 0.09 | 0.3 |
2.2候选基因
用DNA抽提试剂盒(QIAGEN公司)从家族血样中抽提基因组DNA作为模板。
对候选基因，设计PCR引物，PCR扩增出候选基因，然后进行测序。经过对候选基因的测序检测，发现CYLD与该家系的毛发上皮瘤密切相关。
对CYLD设计了34对引物进行测序。其中，以下列一对引物扩增出的PCR产物进行测序时，发现该毛发上皮瘤家系各病人的中CYLD对比该家族的正常人发现该基因在第10号外显子的1853位发生了碱基的缺失，即SEQ ID NO：1的第1853位发生了碱基A的缺失，从而导致了移码突变，使其编码的蛋白缩短为496个氨基酸。该突变最终导致了毛发上皮瘤的发生(见图4)。
| 名称 | 序列(5 ú 3i) | 编号 |
| CYLD_15正向 | tctgcagtga tagcttttct gaca | SEQ ID NO：3 |
| CYLD_15反向 | cagtctcacc aagatgccca atac | SEQ ID NO：4 |
此外，为了验证该位点对毛发上皮瘤的发生的特异性，随机检查了100个没有亲源关系的人在该位点的情况，没有发现任何突变。这说明该位点的突变并非人群中的多态性所致，而是毛发上皮瘤的特异性突变位点。因此表明了CYLD与人类的毛发上皮瘤的发生密切相关，此基因及其编码产物可对人类的毛发上皮瘤起重要作用。
实施例3
毛发上皮瘤检测试剂盒的制备
制备一试剂盒，它含有：名称 序列(5 ú3i) 编号 浓度正向引物 tctgcagtga tagcttttct gaca SEQ ID NO：3 干粉2OD反向引物 cagtctcacc aagatgccca atac SEQ ID NO：4 干粉2ODPCR反应液 含Taq酶dNTP镁离子PCR反应缓冲液PCR产物纯化盒 含小量PCR产物纯化的溶液，DNA吸附柱测序反应液 含Big Dye
抽取待检测病人的血液3ml，使用常规方法(或使用特定的试剂盒)从血液中提取DNA。将毛发上皮瘤检测试剂盒中的PCR引物稀释到1μmol/μl，以所提取的DNA为模板与所提供的引物进行PCR反应。使用检测试剂盒所提供的PRC产物纯化盒对PCR产物进行纯化。将纯化的产物进行测序反应后直接进行测序。观测测序所得到的序列是否有移码突变。
实施例4
药物组合物的制备
将CYLD所编码的正常蛋白与普通的药膏材料按特定的比例混合，制成含CYLD所编码的正常蛋白的药膏。使用时，将药膏施于患处，患处CYLD所编码的正常蛋白得到补充，使病人由于缺乏CYLD所编码的正常蛋白而引起的皮肤病变得以减轻，直至最后的消失。或将CYLD所编码的正常蛋白制成针剂，使用时对患处进行皮下注射，直接补充病灶处的CYLD编码蛋白，使病人的皮肤的生理状况得到改善，从而达到治疗的目的。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
序列表<110>中国科学院上海生物工程研究中心<120>利用人CYLD基因对肿瘤进行诊断、治疗及药物开发的方法<130>020614<160>5<170>PatentIn version 3.0<210>1<211>5371<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<220><221>CDS<222>(392)..(3262)<400>1gggggcgggc ccaggtagca ggtttggctg cgcgggggcc gcgcgtcgga gtttccccct 60ttctagggtg aggatggttc tacacagcca cccggagttc cttagttgaa aggtgcgccc 120tgctgtgaca gaatgtggta attgtaatct ttaacatttt catgtaaaac atatttcctg 180atcatctttc cattgtcttc atggaaaatt gataaatatt tgtgccttcc aactctcgtc 240ttggttgaat gacttcatct taatacaaca tggacaccac gttgctgaaa acatgctttg 300ggactgccac tgaatttatc ttttgcggtt ttatgacaaa gttattagta gtttcccttt 360tttgaattag tattttgaag ttaatatcac a atg agt tca ggc tta tgg agc 412
Met Ser Ser Gly Leu Trp Ser
1 5caa gaa aaa gtc act tca ccc tac tgg gaa gag cgg att ttt tac ttg 460Gln Glu Lys Val Thr Ser Pro Tyr Trp Glu Glu Arg Ile Phe Tyr Leu
10 15 20ctt ctt caa gaa tgc agc gtt aca gac aaa caa aca caa aag ctc ctt 508Leu Leu Gln Glu Cys Ser Val Thr Asp Lys Gln Thr Gln Lys Leu Leu
25 30 35aaa gta ccg aag gga agt ata gga cag tat att caa gat cgt tct gtg 556Lys Val Pro Lys Gly Ser Ile Gly Gln Tyr Ile Gln Asp Arg Ser Val40 45 50 55ggg cat tca agg att cct tct gca aaa ggc aag aaa aat cag att gga 604Gly His Ser Arg Ile Pro Ser Ala Lys Gly Lys Lys Asn Gln Ile Gly
60 65 70tta aaa att cta gag caa cct cat gca gtt ctc ttt gtt gat gaa aag 652Leu Lys Ile Leu Glu Gln Pro His Ala Val Leu Phe Val Asp Glu Lys
75 80 85gat gtt gta gag ata aat gaa aag ttc aca gag tta ctt ttg gca att 700Asp Val Val Glu Ile Asn Glu Lys Phe Thr Glu Leu Leu Leu Ala Ile
90 95 100acc aat tgt gag gag agg ttc agc ctg ttt aaa aac aga aac aga cta 748Thr Asn Cys Glu Glu Arg Phe Ser Leu Phe Lys Asn Arg Asn Arg Leu
105 110 115agt aaa ggc ctc caa ata gac gtg ggc tgt cct gtg aaa gta cag ctg 796Ser Lys Gly Leu Gln Ile Asp Val Gly Cys Pro Val Lys Val Gln Leu120 125 130 135aga tct ggg gaa gaa aaa ttt cct gga gtt gta cgc ttc aga gga ccc 844Arg Ser Gly Glu Glu Lys Phe Pro Gly Val Val Arg Phe Arg Gly Pro
140 145 150ctg tta gca gag agg aca gtc tcc gga ata ttc ttt gga gtt gaa ttg 892Leu Leu Ala Glu Arg Thr Val Ser Gly Ile Phe Phe Gly Val Glu Leu
155 160 165ctg gaa gaa ggt cgt ggt caa ggt ttc act gac ggg gtg tac caa ggg 940Leu Glu Glu Gly Arg Gly Gln Gly Phe Thr Asp Gly Val Tyr Gln Gly
170 175 180aaa cag ctt ttt cag tgt gat gaa gat tgt ggc gtg ttt gtt gca ttg 988Lys Gln Leu Phe Gln Cys Asp Glu Asp Cys Gly Val Phe Val Ala Leu
185 190 195gac aag cta gaa ctc ata gaa gat gat gac act gca ttg gaa agt gat 1036Asp Lys Leu Glu Leu Ile Glu Asp Asp Asp Thr Ala Leu Glu Ser Asp200 205 210 215tac gca ggt cct ggg gac aca atg cag gtc gaa ctt cct cct ttg gaa 1084Tyr Ala Gly Pro Gly Asp Thr Met Gln Val Glu Leu Pro Pro Leu Glu
220 225 230ata aac tcc aga gtt tct ttg aag gtt gga gaa aca ata gaa tct gga 1132Ile Asn Ser Arg Val Ser Leu Lys Val Gly Glu Thr Ile Glu Ser Gly
235 240 245aca gtt ata ttc tgt gat gtt ttg cca gga aaa gaa agc tta gga tat 1180Thr Val Ile Phe Cys Asp Val Leu Pro Gly Lys Glu Ser Leu Gly Tyr
250 255 260ttt gtt ggt gtg gac atg gat aac cct att ggc aac tgg gat gga aga 1228Phe Val Gly Val Asp Met Asp Asn Pro Ile Gly Asn Trp Asp Gly Arg
265 270 275ttt gat gga gtg cag ctt tgt agt ttt gcg tgt gtt gaa agt aca att 1276Phe Asp Gly Val Gln Leu Cys Ser Phe Ala Cys Val Glu Ser Thr Ile280 285 290 295cta ttg cac atc aat gat atc atc cca gct tta tca gag agt gtg acg 1324Leu Leu His Ile Asn Asp Ile Ile Pro Ala Leu Ser Glu Ser Val Thr
300 305 310cag gaa agg agg cct ccc aaa ctt gcc ttt atg tca aga ggt gtt ggg 1372Gln Glu Arg Arg Pro Pro Lys Leu Ala Phe Met Ser Arg Gly Val Gly
315 320 325gac aaa ggt tca tcc agt cat aat aaa cca aag gct aca gga tct acc 1420Asp Lys Gly Ser Ser Ser His Asn Lys Pro Lys Ala Thr Gly Ser Thr
330 335 340tca gac cct gga aat aga aac aga tct gaa tta ttt tat acc tta aat 1468Ser Asp Pro Gly Asn Arg Asn Arg Ser Glu Leu Phe Tyr Thr Leu Asn
345 350 355ggg tct tct gtt gac tca caa cca caa tcc aaa tca aaa aat aca tgg 1516Gly Ser Ser Val Asp Ser Gln Pro Gln Ser Lys Ser Lys Asn Thr Trp360 365 370 375tac att gat gaa gtt gca gaa gac cct gca aaa tct ctt aca gag ata 1564Tyr Ile Asp Glu Val Ala Glu Asp Pro Ala Lys Ser Leu Thr Glu Ile
380 385 390tct aca gac ttt gac cgt tct tca cca cca ctc cag cct cct cct gtg 1612Ser Thr Asp Phe Asp Arg Ser Ser Pro Pro Leu Gln Pro Pro Pro Val
395 400 405aac tca ctg acc acc gag aac aga ttc cac tct tta cca ttc agt ctc 1660Asn Ser Leu Thr Thr Glu Asn Arg Phe His Ser Leu Pro Phe Ser Leu
410 415 420acc aag atg ccc aat acc aat gga agt att ggc cac agt cca ctt tct 1708Thr Lys Met Pro Asn Thr Asn Gly Ser Ile Gly His Ser Pro Leu Ser
425 430 435ctg tca gcc cag tct gta atg gaa gag cta aac act gca ccc gtc caa 1756Leu Ser Ala Gln Ser Val Met Glu Glu Leu Asn Thr Ala Pro Val Gln440 445 450 455gag agt cca ccc ttg gcc atg cct cct ggg aac tca cat ggt cta gaa 1804Glu Ser Pro Pro Leu Ala Met Pro Pro Gly Asn Ser His Gly Leu Glu
460 465 470gtg ggc tca ttg gct gaa gtt aag gag aac cct cct ttc tat ggg gta 1852Val Gly Ser Leu Ala Glu Val Lys Glu Asn Pro Pro Phe Tyr Gly Val
475 480 485atc cgt tgg atc ggt cag cca cca gga ctg aat gaa gtg ctc gct gga 1900Ile Arg Trp Ile Gly Gln Pro Pro Gly Leu Asn Glu Val Leu Ala Gly
490 495 500ctg gaa ctg gaa gat gag tgt gca ggc tgt acg gat gga acc ttc aga 1948Leu Glu Leu Glu Asp Glu Cys Ala Gly Cys Thr Asp Gly Thr Phe Arg
505 510 515ggc act cgg tat ttc acc tgt gcc ctg aag aag gcg ctg ttt gtg aaa 1996Gly Thr Arg Tyr Phe Thr Cys Ala Leu Lys Lys Ala Leu Phe Val Lys520 525 530 535ctg aag agc tgc agg cct gac tct agg ttt gca tca ttg cag ccg gtt 2044Leu Lys Ser Cys Arg Pro Asp Ser Arg Phe Ala Ser Leu Gln Pro Val
540 545 550tcc aat cag att gag cgc tgt aac tct tta gca ttt gga ggc tac tta 2092Ser Asn Gln Ile Glu Arg Cys Asn Ser Leu Ala Phe Gly Gly Tyr Leu
555 560 565agt gaa gta gta gaa gaa aat act cca cca aaa atg gaa aaa gaa ggc 2140Ser Glu Val Val Glu Glu Asn Thr Pro Pro Lys Met Glu Lys Glu Gly
570 575 580ttg gag ata atg att ggg aag aag aaa ggc atc cag ggt cat tac aat 2188Leu Glu Ile Met Ile Gly Lys Lys Lys Gly Ile Gln Gly His Tyr Asn
585 590 595tct tgt tac tta gac tca acc tta ttc tgc tta ttt gct ttt agt tct 2236Ser Cys Tyr Leu Asp Ser Thr Leu Phe Cys Leu Phe Ala Phe Ser Ser600 605 610 615gtt ctg gac act gtg tta ctt aga ccc aaa gaa aag aac gat gta gaa 2284Val Leu Asp Thr Val Leu Leu Arg Pro Lys Glu Lys Asn Asp Val Glu
620 625 630tat tat agt gaa acc caa gag cta ctg agg aca gaa att gtt aat cct 2332Tyr Tyr Ser Glu Thr Gln Glu Leu Leu Arg Thr Glu Ile Val Asn Pro
635 640 645ctg aga ata tat gga tat gtg tgt gcc aca aaa att atg aaa ctg agg 2380Leu Arg Ile Tyr Gly Tyr Val Cys Ala Thr Lys Ile Met Lys Leu Arg
650 655 660aaa ata ctt gaa aag gtg gag gct gca tca gga ttt acc tct gaa gaa 2428Lys Ile Leu Glu Lys Val Glu Ala Ala Ser Gly Phe Thr Ser Glu Glu
665 670 675aaa gat cct gag gaa ttc ttg aat att ctg ttt cat cat att tta agg 2476Lys Asp Pro Glu Glu Phe Leu Asn Ile Leu Phe His His Ile Leu Arg680 685 690 695gta gaa cct ttg cta aaa ata aga tca gca ggt caa aag gta caa gat 2524Val Glu Pro Leu Leu Lys Ile Arg Ser Ala Gly Gln Lys Val Gln Asp
700 705 710tgt tac ttc tat caa att ttt atg gaa aaa aat gag aaa gtt ggc gtt 2572Cys Tyr Phe Tyr Gln Ile Phe Met Glu Lys Asn Glu Lys Val Gly Val
715 720 725ccc aca att cag cag ttg tta gaa tgg tct ttt atc aac agt aac ctg 2620Pro Thr Ile Gln Gln Leu Leu Glu Trp Ser Phe Ile Asn Ser Asn Leu
730 735 740aaa ttt gca gag gca cca tca tgt ctg att att cag atg cct cga ttt 2668Lys Phe Ala Glu Ala Pro Ser Cys Leu Ile Ile Gln Met Pro Arg Phe
745 750 755gga aaa gac ttt aaa cta ttt aaa aaa att ttt cct tct ctg gaa tta 2716Gly Lys Asp Phe Lys Leu Phe Lys Lys Ile Phe Pro Ser Leu Glu Leu760 765 770 775aat ata aca gat tta ctt gaa gac act ccc aga cag tgc cgg ata tgt 2764Asn Ile Thr Asp Leu Leu Glu Asp Thr Pro Arg Gln Cys Arg Ile Cys
780 785 790gga ggg ctt gca atg tat gag tgt aga gaa tgc tac gac gat ccg gac 2812Gly Gly Leu Ala Met Tyr Glu Cys Arg Glu Cys Tyr Asp Asp Pro Asp
795 800 805atc tca gct gga aaa atc aag cag ttt tgt aaa acc tgc aac act caa 2860Ile Ser Ala Gly Lys Ile Lys Gln Phe Cys Lys Thr Cys Asn Thr Gln
810 815 820gtc cac ctt cat ccg aag agg ctg aat cat aaa tat aac cca gtg tca 2908Val His Leu His Pro Lys Arg Leu Asn His Lys Tyr Asn Pro Val Ser
825 830 835ctt ccc aaa gac tta ccc gac tgg gac tgg aga cac ggc tgc atc cct 2956Leu Pro Lys Asp Leu Pro Asp Trp Asp Trp Arg His Gly Cys Ile Pro840 845 850 855tgc cag aat atg gag tta ttt gct gtt ctc tgc ata gaa aca agc cac 3004Cys Gln Asn Met Glu Leu Phe Ala Val Leu Cys Ile Glu Thr Ser His
860 865 870tat gtt gct ttt gtg aag tat ggg aag gac gat tct gcc tgg ctc ttc 3052Tyr Val Ala Phe Val Lys Tyr Gly Lys Asp Asp Ser Ala Trp Leu Phe
875 880 885ttt gac agc atg gcc gat cgg gat ggt ggt cag aat ggc ttc aac att 3100Phe Asp Ser Met Ala Asp Arg Asp Gly Gly Gln Asn Gly Phe Asn Ile
890 895 900cct caa gtc acc cca tgc cca gaa gta gga gag tac ttg aag atg tct 3148Pro Gln Val Thr Pro Cys Pro Glu Val Gly Glu Tyr Leu Lys Met Ser
905 910 915ctg gaa gac ctg cat tcc ttg gac tcc agg aga atc caa ggc tgt gca 3196Leu Glu Asp Leu His Ser Leu Asp Ser Arg Arg Ile Gln Gly Cys Ala920 925 930 935cga aga ctg ctt tgt gat gca tat atg tgc atg tac cag agt cca aca 3244Arg Arg Leu Leu Cys Asp Ala Tyr Met Cys Met Tyr Gln Ser Pro Thr
940 945 950atg agt ttg tac aaa taa ctggggtcat cgggaaaggc aaagaaactg 3292Met Ser Leu Tyr Lys
955aaggcagagt cctaacgttg catcttattc gagctggcag ttctgttcac gtccattgcc 3352ggcaatggat gtctttgtgg tgatgatcct tcagaaaagg atgcctctgt ttaaaaacaa 3412attgcttttg tgtccctgaa gtatttaata agaagcattt tgcactctag aaagtatgtt 3472tgtgttggtt ttttaagaag tctaaatgaa gttattaata cctgaagctt taagttaagt 3532gcattgatca tatgatattt ttggaagcat acaattttaa ttgtggaagt ttaaagcctc 3592ttttagtcca ttgagaatgt aaataaatgt gtcttcttta tggaccaagg atatgaaatc 3652atttttcttt tgtagctaac ggttgccttg aggaagaaat aatttggttt tattaagagt 3712ctactctcaa tccagttatt agagatgtac tgagtttgat ttgttaatcc tttctatata 3772ctgctgatct tgcatgtcta caatctgctc agtttttctg tgtttctgca atagtggtca 3832gaaaaatact taaattccct taatggtgtt gttttctatt tgttctggtt ttgagataaa 3892tgagtgattc tgtccccaaa tgtccatttt tgaagtgatt ttcctggagg attagggtat 3952ttagcagttg aagctcttca ttcatagtag ttactgtcag ctaacaggtt ttttaaggct 4012tttaactatt aatattttat ggaatggggc aaagtaaatt gatgaaagaa ttggagtgat 4072aatagtcctt tacaaacata cagtccataa gaaaatgaat ttggcatata gaattattac 4132aatttcctgg gagagatgga tatttaaacc tctattattt tagacaagac tgtctagaac 4192ttaagtttga tctgtcagcc agtactccca ttaaattcag tgtagtttca cttgatagaa 4252tcagatatgt tatcgaaatg ttagcagcag cttcatcctc cttctgatta aagtaagtag 4312aaatgggatg ttttgtttaa taacagccat agtgtgtgtt tagaccacag cggatgttgt 4372agaccaggac catagatgat acatgtcagt gctgtggaat gtgcattctc tgagtgttgt 4432tttgtggtat cattgtcttt cctgaatgac tttctaactg tgcagaaagg cagaaaagtc 4492atcatatgta tatgtcatat gactttataa aatatttaat gtgacaaaaa gtggaaagaa 4552tctttacaaa ccctgcaatt acttttttaa aggcactttt actctttggt tttatcattc 4612cattttgcta atatttacta gctttataaa ttacagtaag gtacaaaaac tcatcttgta 4672atattttcat ttttgaagtg aaaaagtaca tatattttgc acaaggtttt atactgctaa 4732gtgcttggtt ggggtggtga gatgatgatt agatcagggg tgaggctgag agactctggg 4792tttagggcta gccctgcctc catctccctt gggtaaaatg aagggtgtgg ggtaaaagat 4852gcataaggcc ttttctagct ctgacagcct agaagtccaa tcaccctgta ataaatatgt 4912gttgaatgaa gaaatgggtg aatgagcttg tcaatgtgat tttaaaaaat tgactacctg 4972gaggaatgat taggaatcta aatgaagcca gccctcggta tctgcaggtt tctcatccat 5032ggattcaacc aactgcaaat ggaaaatacg atttttttta aaaaaaggat ggttacatcc 5092gtattgaaca tgtacagact tttttcttgt cattattctc tgaacaatac aagaactctt 5152tatgtagcat ttacatttat taggtattat aagtaatcta gagattattt aattaaaata 5212tacaggagga tgtgtgttta tatgccagaa attctgtacc attttgtatc agggaattga 5272gcatcttcag atgttggtat ctgcagggat cctggaacca aacccctgca gatactaagg 5332gctgacgatc taggtaagac tggatttaac agttggaaa 5371<210>2<211>956<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>2Met Ser Ser Gly Leu Trp Ser Gln Glu Lys Val Thr Ser Pro Tyr Trp1 5 10 15Glu Glu Arg Ile Phe Tyr Leu Leu Leu Gln Glu Cys Ser Val Thr Asp
20 25 30Lys Gln Thr Gln Lys Leu Leu Lys Val Pro Lys Gly Ser Ile Gly Gln
35 40 45Tyr Ile Gln Asp Arg Ser Val Gly His Ser Arg Ile Pro Ser Ala Lys
50 55 60Gly Lys Lys Asn Gln Ile Gly Leu Lys Ile Leu Glu Gln Pro His Ala65 70 75 80Val Leu Phe Val Asp Glu Lys Asp Val Val Glu Ile Asn Glu Lys Phe
85 90 95Thr Glu Leu Leu Leu Ala Ile Thr Asn Cys Glu Glu Arg Phe Ser Leu
100 105 110Phe Lys Asn Arg Asn Arg Leu Ser Lys Gly Leu Gln Ile Asp Val Gly
115 120 125Cys Pro Val Lys Val Gln Leu Arg Ser Gly Glu Glu Lys Phe Pro Gly
130 135 140Val Val Arg Phe Arg Gly Pro Leu Leu Ala Glu Arg Thr Val Ser Gly145 150 155 160Ile Phe Phe Gly Val Glu Leu Leu Glu Glu Gly Arg Gly Gln Gly Phe
165 170 175Thr Asp Gly Val Tyr Gln Gly Lys Gln Leu Phe Gln Cys Asp Glu Asp
180 185 190Cys Gly Val Phe Val Ala Leu Asp Lys Leu Glu Leu Ile Glu Asp Asp
195 200 205Asp Thr Ala Leu Glu Ser Asp Tyr Ala Gly Pro Gly Asp Thr Met Gln
210 215 220Val Glu Leu Pro Pro Leu Glu Ile Asn Ser Arg Val Ser Leu Lys Val225 230 235 240Gly Glu Thr Ile Glu Ser Gly Thr Val Ile Phe Cys Asp Val Leu Pro
245 250 255Gly Lys Glu Ser Leu Gly Tyr Phe Val Gly Val Asp Met Asp Asn Pro
260 265 270Ile Gly Asn Trp Asp Gly Arg Phe Asp Gly Val Gln Leu Cys Ser Phe
275 280 285Ala Cys Val Glu Ser Thr Ile Leu Leu His Ile Asn Asp Ile Ile Pro
290 295 300Ala Leu Ser Glu Ser Val Thr Gln Glu Arg Arg Pro Pro Lys Leu Ala305 310 315 320Phe Met Ser Arg Gly Val Gly Asp Lys Gly Ser Ser Ser His Asn Lys
325 330 335Pro Lys Ala Thr Gly Ser Thr Ser Asp Pro Gly Asn Arg Asn Arg Ser
340 345 350Glu Leu Phe Tyr Thr Leu Asn Gly Ser Ser Val Asp Ser Gln Pro Gln
355 360 365Ser Lys Ser Lys Asn Thr Trp Tyr Ile Asp Glu Val Ala Glu Asp Pro
370 375 380Ala Lys Ser Leu Thr Glu Ile Ser Thr Asp Phe Asp Arg Ser Ser Pro385 390 395 400Pro Leu Gln Pro Pro Pro Val Asn Ser Leu Thr Thr Glu Asn Arg Phe
405 410 415His Ser Leu Pro Phe Ser Leu Thr Lys Met Pro Asn Thr Asn Gly Ser
420 425 430Ile Gly His Ser Pro Leu Ser Leu Ser Ala Gln Ser Val Met Glu Glu
435 440 445Leu Asn Thr Ala Pro Val Gln Glu Ser Pro Pro Leu Ala Met Pro Pro
450 455 460Gly Asn Ser His Gly Leu Glu Val Gly Ser Leu Ala Glu Val Lys Glu465 470 475 480Asn Pro Pro Phe Tyr Gly Val Ile Arg Trp Ile Gly Gln Pro Pro Gly
485 490 495Leu Asn Glu Val Leu Ala Gly Leu Glu Leu Glu Asp Glu Cys Ala Gly
500 505 510Cys Thr Asp Gly Thr Phe Arg Gly Thr Arg Tyr Phe Thr Cys Ala Leu
515 520 525Lys Lys Ala Leu Phe Val Lys Leu Lys Ser Cys Arg Pro Asp Ser Arg
530 535 540Phe Ala Ser Leu Gln Pro Val Ser Asn Gln Ile Glu Arg Cys Asn Ser545 550 555 560Leu Ala Phe Gly Gly Tyr Leu Ser Glu Val Val Glu Glu Asn Thr Pro
565 570 575Pro Lys Met Glu Lys Glu Gly Leu Glu Ile Met Ile Gly Lys Lys Lys
580 585 590Gly Ile Gln Gly His Tyr Asn Ser Cys Tyr Leu Asp Ser Thr Leu Phe
595 600 605Cys Leu Phe Ala Phe Ser Ser Val Leu Asp Thr Val Leu Leu Arg Pro
610 615 620Lys Glu Lys Asn Asp Val Glu Tyr Tyr Ser Glu Thr Gln Glu Leu Leu625 630 635 640Arg Thr Glu Ile Val Asn Pro Leu Arg Ile Tyr Gly Tyr Val Cys Ala
645 650 655Thr Lys Ile Met Lys Leu Arg Lys Ile Leu Glu Lys Val Glu Ala Ala
660 665 670Ser Gly Phe Thr Ser Glu Glu Lys Asp Pro Glu Glu Phe Leu Asn Ile
675 680 685Leu Phe His His Ile Leu Arg Val Glu Pro Leu Leu Lys Ile Arg Ser
690 695 700Ala Gly Gln Lys Val Gln Asp Cys Tyr Phe Tyr Gln Ile Phe Met Glu705 710 715 720Lys Asn Glu Lys Val Gly Val Pro Thr Ile Gln Gln Leu Leu Glu Trp
725 730 735Ser Phe Ile Asn Ser Asn Leu Lys Phe Ala Glu Ala Pro Ser Cys Leu
740 745 750Ile Ile Gln Met Pro Arg Phe Gly Lys Asp Phe Lys Leu Phe Lys Lys
755 760 765Ile Phe Pro Ser Leu Glu Leu Asn Ile Thr Asp Leu Leu Glu Asp Thr
770 775 780Pro Arg Gln Cys Arg Ile Cys Gly Gly Leu Ala Met Tyr Glu Cys Arg785 790 795 800Glu Cys Tyr Asp Asp Pro Asp Ile Ser Ala Gly Lys Ile Lys Gln Phe
805 810 815Cys Lys Thr Cys Asn Thr Gln Val His Leu His Pro Lys Arg Leu Asn
820 825 830His Lys Tyr Asn Pro ValSer Leu Pro Lys Asp Leu Pro Asp Trp Asp
835 840 845Trp Arg His Gly Cys Ile Pro Cys Gln Asn Met Glu Leu Phe Ala Val
850 855 860Leu Cys Ile Glu Thr Ser His Tyr Val Ala Phe Val Lys Tyr Gly Lys865 870 875 880Asp Asp Ser Ala Trp Leu Phe Phe Asp Ser Met Ala Asp Arg Asp Gly
885 890 895Gly Gln Asn Gly Phe Asn Ile Pro Gln Val Thr Pro Cys Pro Glu Val
900 905 910Gly Glu Tyr Leu Lys Met Ser Leu Glu Asp Leu His Ser Leu Asp Ser
915 920 925Arg Arg Ile Gln Gly Cys Ala Arg Arg Leu Leu Cys Asp Ala Tyr Met
930 935 940Cys Met Tyr Gln Ser Pro Thr Met Ser Leu Tyr Lys945 950 955<210>3<211>24<212>DNA<213>人工序列<220><221>misc_feature<223>引物<400>3tctgcagtga tagcttttct gaca<210>4<211>24<212>DNA<213>人工序列<220><221>misc_feature<223>引物<400>4cagtctcacc aagatgccca atac 24<210>5<211>496<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>5Met Ser Ser Gly Leu Trp Ser Gln Glu Lys Val Thr Ser Pro Tyr Trp1 5 10 15Glu Glu Arg Ile Phe Tyr Leu Leu Leu Gln Glu Cys Ser Val Thr Asp
20 25 30Lys Gln Thr Gln Lys Leu Leu Lys Val Pro Lys Gly Ser Ile Gly Gln
35 40 45Tyr Ile Gln Asp Arg Ser Val Gly His Ser Arg Ile Pro Ser Ala Lys
50 55 60Gly Lys Lys Asn Gln Ile Gly Leu Lys Ile Leu Glu Gln Pro His Ala65 70 75 80Val Leu Phe Val Asp Glu Lys Asp Val Val Glu Ile Asn Glu Lys Phe
85 90 95Thr Glu Leu Leu Leu Ala Ile Thr Asn Cys Glu Glu Arg Phe Ser Leu
100 105 110Phe Lys Asn Arg Asn Arg Leu Ser Lys Gly Leu Gln Ile Asp Val Gly
115 120 125Cys Pro Val Lys Val Gln Leu Arg Ser Gly Glu Glu Lys Phe Pro Gly
130 135 140Val Val Arg Phe Arg Gly Pro Leu Leu Ala Glu Arg Thr Val Ser Gly145 150 155 160Ile Phe Phe Gly Val Glu Leu Leu Glu Glu Gly Arg Gly Gln Gly Phe
165 170 175Thr Asp Gly Val Tyr Gln Gly Lys Gln Leu Phe Gln Cys Asp Glu Asp
180 185 190Cys Gly Val Phe Val Ala Leu Asp Lys Leu Glu Leu Ile Glu Asp Asp
195 200 205Asp Thr Ala Leu Glu Ser Asp Tyr Ala Gly Pro Gly Asp Thr Met Gln
210 215 220Val Glu Leu Pro Pro Leu Glu Ile Asn Ser Arg Val Ser Leu Lys Val225 230 235 240Gly Glu Thr Ile Glu Ser Gly Thr Val Ile Phe Cys Asp Val Leu Pro
245 250 255Gly Lys Glu Ser Leu Gly Tyr Phe Val Gly Val Asp Met Asp Asn Pro
260 265 270Ile Gly Asn Trp Asp Gly Arg Phe Asp Gly Val Gln Leu Cys Ser Phe
275 280 285Ala Cys Val Glu Ser Thr Ile Leu Leu His Ile Asn Asp Ile Ile Pro
290 295 300Ala Leu Ser Glu Ser Val Thr Gln Glu Arg Arg Pro Pro Lys Leu Ala305 310 315 320Phe Met Ser Arg Gly Val Gly Asp Lys Gly Ser Ser Ser His Asn Lys
325 330 335Pro Lys Ala Thr Gly Ser Thr Ser Asp Pro Gly Asn Arg Asn Arg Ser
340 345 350Glu Leu Phe Tyr Thr Leu Asn Gly Ser Ser Val Asp Ser Gln Pro Gln
355 360 365Ser Lys Ser Lys Asn Thr Trp Tyr Ile Asp Glu Val Ala Glu Asp Pro
370 375 380Ala Lys Ser Leu Thr Glu Ile Ser Thr Asp Phe Asp Arg Ser Ser Pro385 390 395 400Pro Leu Gln Pro Pro Pro Val Asn Ser Leu Thr Thr Glu Asn Arg Phe
405 410 415His Ser Leu Pro Phe Ser Leu Thr Lys Met Pro Asn Thr Asn Gly Ser
420 425 430Ile Gly His Ser Pro Leu Ser Leu Ser Ala Gln Ser Val Met Glu Glu
435 440 445Leu Asn Thr Ala Pro Val Gln Glu Ser Pro Pro Leu Ala Met Pro Pro
450 455 460Gly Asn Ser His Gly Leu Glu Val Gly Ser Leu Ala Glu Val Lys Glu465 470 475 480Asn Pro Pro Phe Tyr Gly Val Ser Val Gly Ser Val Ser His Gln Asp
485 490 495
Claims (10)
1.一种对个体的肿瘤易感性进行诊断的方法，其特征在于，它包括步骤：
检测该个体的CYLD基因、转录本和/或蛋白，并与正常的CYLD基因、转录本和/或蛋白相比较，
存在差异就表明该个体患肿瘤的可能性高于正常人群。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，检测的是CYLD的基因或转录本，并与正常CYLD核苷酸序列比较差异。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的肿瘤是毛发上皮瘤，且所述的差异选自：SEQ ID NO：1中第1853位A缺失。
4.一种***的方法，其特征在于，包括步骤：给需要所述治疗的病人施用安全有效量的正常CYLD蛋白。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的CYLD蛋白被局部施用于病灶处。
6.一种CYLD蛋白的用途，其特征在于，用于制备***的药物组合物。
7.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述药物组合物是药膏或针剂。
8.一种检测肿瘤的试剂盒，其特征在于，它包括特异性扩增CYLD基因或转录本的引物。
9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，它还含有选自下组的试剂：
(a)与突变部位结合的探针；
(b)识别突变位点的限制性内切酶。
10.如权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述的突变选自：SEQ ID NO：1中第1853位A缺失。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 02110851 CN1438320A (zh) | 2002-02-10 | 2002-02-10 | 利用人cyld基因对肿瘤进行诊断、治疗及药物开发的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 02110851 CN1438320A (zh) | 2002-02-10 | 2002-02-10 | 利用人cyld基因对肿瘤进行诊断、治疗及药物开发的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1438320A true CN1438320A (zh) | 2003-08-27 |
Family
ID=27672150
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 02110851 Pending CN1438320A (zh) | 2002-02-10 | 2002-02-10 | 利用人cyld基因对肿瘤进行诊断、治疗及药物开发的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1438320A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104069483A (zh) * | 2014-07-08 | 2014-10-01 | 武汉大学 | 肿瘤抑制因子cylindromatosis在治疗脂肪肝和Ⅱ型糖尿病中的功能和应用 |
-
2002
- 2002-02-10 CN CN 02110851 patent/CN1438320A/zh active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104069483A (zh) * | 2014-07-08 | 2014-10-01 | 武汉大学 | 肿瘤抑制因子cylindromatosis在治疗脂肪肝和Ⅱ型糖尿病中的功能和应用 |
| CN104069483B (zh) * | 2014-07-08 | 2016-03-02 | 武汉大学 | 肿瘤抑制因子cylindromatosis在治疗脂肪肝和Ⅱ型糖尿病中的功能和应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1080311C (zh) | 与人类细胞逐渐死亡相关的新的肽类及其编码它的dna | |
| CN1683403A (zh) | 日本血吸虫细胞周期静止素，其编码核酸及其应用 | |
| CN1438320A (zh) | 利用人cyld基因对肿瘤进行诊断、治疗及药物开发的方法 | |
| CN1438322A (zh) | 利用人cyld基因及其编码产物诊断和治疗毛发上皮瘤的方法 | |
| CN1341753A (zh) | 利用牙本质唾磷蛋白基因及其编码产物诊断和治疗牙本质生成不全ⅱ型的方法 | |
| CN1712542A (zh) | 肝细胞癌相关的蛋白质分子标记原癌蛋白18的筛选及其应用 | |
| CN1438321A (zh) | 利用人hsf4基因及其编码产物诊断和治疗晶状体病变的方法 | |
| CN1519315A (zh) | 一种多肽——人组氨酰－trna合成酶13.09和编码这种多肽的多核苷酸 | |
| CN1661072A (zh) | 精氨酸升压素受体1a基因与原发性高血压的相关性 | |
| CN1465704A (zh) | 抑癌基因pinx1及其应用 | |
| CN1661085A (zh) | 胆固醇酯转移蛋白基因与原发性高血压的相关性 | |
| CN1670204A (zh) | 肺炎链球菌自溶酶，其编码核酸及其应用 | |
| CN1670202A (zh) | 华支睾吸虫微粒体gst－1，其编码核酸及其应用 | |
| CN1448402A (zh) | 一种多肽——人贫血症相关蛋白35.4和编码这种多肽的多核苷酸 | |
| CN1519253A (zh) | 一种多肽——人edf－1内皮细胞分化因子14.73和编码这种多肽的多核苷酸 | |
| CN1661051A (zh) | 生长激素1基因与原发性高血压的相关性 | |
| CN1661053A (zh) | 生长激素1基因与原发性高血压的相关性 | |
| CN1519255A (zh) | 一种多肽－人dna错配修改蛋白12.98和编码这种多肽的多核苷酸 | |
| CN1661084A (zh) | 胆固醇酯转移蛋白基因与原发性高血压的相关性 | |
| CN1746186A (zh) | 心房颤动致病基因及其用途 | |
| CN1390852A (zh) | 人类心房颤动致病基因和编码蛋白及其用途 | |
| CN1519247A (zh) | 一种多肽——人液泡蛋白9.46和编码这种多肽的多核苷酸 | |
| CN1519251A (zh) | 一种多肽－人锌指蛋白9.45和编码这种多肽的多核苷酸 | |
| CN1661065A (zh) | 胰岛素受体基因snp与原发性高血压的相关性 | |
| CN1661049A (zh) | 生长激素1基因与原发性高血压的相关性 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: SHANGHAI INST. OF LIFE SCIENCE, CAS Free format text: FORMER OWNER: SHANGHAI RESEARCH CENTER OF BIOTECHNOLOGY Effective date: 20031029 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20031029 Applicant after: Shanghai Institute of life Sciences, Chinese Academy of Sciences Applicant before: Shanghai Bioengineering Research Center, Chinese Academy of Sciences |
|
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |