CN1286979A - 用于控制动物球虫病的甾体皂甙元 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及具有抗球虫活性的药物组合物,其包括甾体皂甙元,而且可以添加在动物饲料或饮用水中,以控制由艾美尔属球虫导致的疾病。

Description

用于控制动物球虫病的甾体皂甙元
本发明涉及在动物饲料或饮用水中添加甾体皂甙元以控制由艾美尔属球虫导致的疾病(球虫病)的应用。球虫病是导致动物肠道损伤、腹泻、肠炎或死亡的常见病，在家畜生产中球虫病是一种可造成财产巨大损失的疾病。
由于对植物提取物的大量研究，本发明的发明者得以完成以下发明。依据本发明，当添加于动物饲料和饮用水中时，发现从“Lillaceae，石蒜(Amaryllidaceae)和薯蓣(Dioscoraceae)科植物中提取出的甾体皂甙元可有效地控制球虫病伤害作用及其对动物的负面作用。以下所列从植物中提取出的甾体皂甙元仅起描述作用而不起定界作用：龙舌兰皂甙元、绿莲皂甙元、9-脱氢龙舌兰皂甙元、9-脱氢门诺皂甙元、毛地黄皂甙元、Disosgenin、吉托皂甙元、Hectogenin、看莫皂甙元、克里托皂甙元、利拉皂甙元、门诺皂甙元、马尔可皂甙元、美克索皂甙元、新提果皂甙元、延龄草皂甙元、彭罗皂甙元、若可皂甙元、沙莫皂甙元、萨洒皂甙元、异菝葜皂甙元、丝兰肖皂甙元、提果皂甙元、薯蓣皂甙元、和丝兰皂甙元。
通过以下实施例对本发明作进一步描述，但这些实施例不应认为是对本发明范围的任何限制。反之，应清楚地认识到对于本领域技术人员来说，在不背离本发明的精神和/或所附权利要求范围的前提下，本发明可有多种其它实施方案，改良方案及等价方案。实施例1
为确定甾体皂甙元在接种孢子化Eimeria tenella卵囊的肉仔鸡中的抗球虫病能力，进行10天的鸡舍敏感性实验。将50只11日龄的雄性Peterson X Arbor Acres肉仔鸡放在2×3英尺的笼中，每个鸡笼中放10只。喂食标准谷物、大豆和肉为基料的饲料以及不限量的水。饲料中含有约0、2.48、8.53或14.22ppm的甾体皂甙元。用接种物接种实验用仔鸡，该接种物含有采自野外的卵囊悬浮物，而且预实验证明是离子载体敏感的。在实验的第0天时，每个作接种处理的仔鸡被接种100，00个孢子化的E.Tenella卵囊。采用口腔强饲法给药接种物。第6天时采用颈部断错法处死所有仔鸡，采用Johnson和Ried的标准方法按1-4级记录盲肠损伤程度，其中0代表正常肠道，4代表严重损伤的肠道。
处理方式 损伤程度 增重 饲养增重比 死亡率(％) 排粪程度
负对照 0 295 1.415 0 0
正对照 3.4 241 1.747 30 3.33
皂甙元-2.48 0.8 290 1.408 0 1.00
皂甙元-8.53 0.4 275 1.517 0 0.33
皂甙元14.22 0.4 265 1.575 0 0.33
负对照组仔鸡未接种E.Tenella接种物。正对照组仔鸡接种了E.Tenella接种物。饲料中含有甾体皂甙元防止了球虫病所致的死亡，并明显降低了由E.Tenella球虫感染所致的损伤及排粪程度。在饲料中添加皂甙元也明显降低了球虫感染对体重增加及单位体重增加所消耗饲料量的负作用。实施例2
为评价甾体皂甙元在接种孢子化Eimeria tenella卵囊的肉仔鸡中对球虫病死亡率、盲肠损伤程度、增重和饲料转化率的影响作用，进行7天的鸡舍敏感性实验。将200只14日龄的雄性和雌性Peterson X ArborAcres肉仔鸡放在20个2×3英尺的笼中，每个鸡笼中放10只。喂食标准谷物，大豆和肉为基料的饲料以及不限量的水。饲料中含有约0，0.569，1.706或2.844ppm的甾体皂甙元。用接种物接种实验用仔鸡，该接种物中采自野外的卵囊悬浮物，而且预实验证明是离子载体敏感的。在实验的第0天时，每个作接种处理的仔鸡被接种100，00个孢子化的E.Tenella卵囊。采用口腔强饲法给药接种物。第6天时采用颈部断错法处死所有仔鸡，采用Johnson和Ried的标准方法按1-4级记录盲肠损伤程度。
处理方式 损伤级别 增重 饲料增重比 死亡率(％) 排粪级别
负对照 0 240.4 2.798 0 0
正对照 2.7 185.3 2.397 2.5 2.0
皂甙元-0.569 2.3 217.5 2.134 2.5 1.31
皂甙元-1.706 1.6 223.4 2.052 0 0.94
皂甙元-2.844 1.5 212.8 2.133 0 1.00
负对照组仔鸡未接种E.Tenella接种物。正对照组仔鸡接种了E.Tenella接种物。饲料中含1.076ppm或更多皂甙元防止了球虫病的致死性，并明显降低了由E.Tenella球虫感染所致的损伤及排粪程度。在饲料中添加皂甙元也明显降低了球虫感染对体重增加及单位体重增加的饲料量的负作用。实施例3
为比较负对照、正对照、盐霉素(60g／ton)、莫能菌素(100g／ton)和甾体皂甙元(3.32ppm)，评价甾体皂甙元对球虫病致死率、损伤程度、体重增加和饲料转化率的影响作用，用200只Ross X Ross肉仔鸡进行13天的球虫接种实验。给仔鸡喂食标准谷物、大豆和肉为基料的饲料以及不限量的水。仔鸡被放在4×5英尺的鸡笼中，每笼放50只仔鸡。在第6天时除负对照外，所有仔鸡口服接种含E.acervulina、E.maxima和E.tenella的混合接种物。由于这三种艾美尔球虫在肠道造成肠道损伤的位置不同，因此在对仔鸡损伤程度作分级时可以分辨它们的作用效果。第13天时采用颈部断错法处死所有仔鸡，采用Johnson和Ried的标准方法记录肠道损伤程度。
平均仔鸡增重和饲料转化率
处理方式 增重 饲料增重比
负对照 278.2 1.477
正对照 242.1 1.717
皂甙元-3.32ppm 253.2 1.670
盐霉素-60g/ton 246.3 1.624
莫能菌素-100g/ton 233.0 1.843
在受感染的鸡中皂甙元组增重最多，还原了30.7％的球虫感染的负作用。甾体皂甙元的效果要优于家禽球虫感染治疗的一线商品药盐霉素和莫能菌素。甾体皂甙元还原了19.6％的球虫感染对饲料转化率的负作用。与莫能菌素相比甾体皂甙元的饲料转化率要好9.4％，其饲料转化率是盐霉素的97.3％。
平均肠道损伤程序
肠道区域 上部 中部 盲肠
艾美尔球虫种类 acervulina maxima tenclla
处理方式
负对照 0 0 0
正对照 2.64 2.38 2.42
皂甙元-3.32ppm 1.20 1.48 1.92
盐霉素-60g/ton 0.76 1.22 0.68
莫能菌素-100g/ton 1.40 1.58 1.64
甾体皂甙元明显降低(P＜0.01)了肠道所有区域的损伤程度。实施例4
为评价甾体皂甙元对球虫病死亡率、增重、饲料转化率和损伤程度的影响作用，采用270日龄的雄性Arbor Acres肉鸡进行8天的球虫感染研究。处理方式为负对照、正对照、甾体皂甙元1.7ppm、甾体皂甙元3.4ppm、盐霉素(60g／ton)、莫能菌素(90g／ton)和两种不同来源的maduramicin 5ppm。喂食标准谷物、大豆和肉为基料的饲料以及不限量的水。将鸡放在5.1平方英尺的线材制鸡笼中，每个鸡笼中放10只，每个处理方式平行处理3个鸡笼。在第2天时除负对照外，所有鸡口服接种含E.acervulina、E.maxima和E.tenella的混合接种物。第8天时采用颈部断错法处死所有鸡，采用Johnson和Ried的标准方法记录肠道损伤程度。甾体皂甙元对中度感染E.acervulina、E.maxima和E.tenella的作用
处理方式 死亡率，％ 增重，g 饲料增重比
负对照 0a 316.33c 1.6297c
正对照 16.67b 255.33e 2.1497d
甾体皂甙元-1.7ppm 3.33a 247.00de 1.913cd
甾体皂甙元-3.4ppm 0a 256.33de 1.7600c
盐霉素-60g/ton 6.67a 269.67d 1.8473cd
莫能菌素-90/ton 3.33a 258.67d 1.9033cd
Maduramicin，5 ppm 0a 269.33d 1.8463cd
Maduramicin，5 ppm 6.67 266.67d 1.8503cd
表中具有不同上标的a、b值有显著性差异，P＜0.025表中具有不同上标的c、d、e值有显著性差异，P＜0.05
对于中度感染E.acervulina、E.maxima和E.tenella的情况，甾体皂甙元高度有效地控制球虫病死亡率。甾体皂甙元趋向使增重增加并明显(P＜0.05)改善了饲料转化率。与一线商品药盐霉素、莫能菌素和Maduramicin相似，甾体皂甙元控制了球虫病的负作用。甾体皂甙元对中度感染E.acervulina、E.maxima和E.tenella的作用
Figure 0010979300101
表中具有不同上标的a、b、c值有显著性差异，P＜0.05
甾体皂甙元降低了肠道所有区域的损伤程度，与标准养殖工业产品相比甾体皂甙元控制E.tenella造成的盲肠损伤更为有效。实施例5
为应用到实际的家畜生产中，抗球虫病产品必须与常用抗生素有相容性。为评价甾体皂甙元与三种广泛使用的家禽抗生素的相容性，利用260只混合性别的Ross×Ross 308仔鸡进行14天的球虫接种实验。所测试的抗生素为枯草杆菌抗生素MD加Roxarsone、维及尼霉素和枯草杆菌抗生素锌的组合。在实验的第7天除负对照组外对所有仔鸡口服接种E.acervulina、E.maxima和E.tenella的混合培养物。第14天时采用颈部断错法处死所有鸡，采用标准方法记录肠道损伤程度。
甾体皂甙元与抗生素的相容性
表中具有不同上标的a、b、c值有显著性差异，P＜0.05
当单独喂食或与受测试抗生素联合使用时，甾体皂甙元在对球虫感染损伤程度、体重增加及饲料利用率的负作用控制方面高度有效。甾体皂甙元对抗生素的功能无影响，同时抗生素对甾体皂甙元的抗球虫病效能也无影响。实施例6
为应用到实际的家畜生产中，对于喂食该产物的动物来说抗球虫病产品必须是安全的。以建议使用剂量与产生毒性剂量之比计，大多数现有商品抗生素产品安全比低。为评价甾体皂甙元的毒性，采用大鼠进行口服急性中毒实验。对大鼠口服给药0、15.27、30.54和61.07mg／kg体重的甾体皂甙元并观察14天。在各个大鼠中未见死亡和不良反应。
为评价甾体皂甙元对肉仔鸡的安全性，采用200只混合性别的Ross×Ross 308仔鸡在整个42天的生长期内喂食0、3.32、9.96或33.21ppm的甾体皂甙元。
甾体皂甙元-42天安全性
处理方式 体重，kg 进食量，g/day 饲料增重比
对照 4.462 212.05 1.996
甾体皂甙元3.32ppm 4.705 221.36 1.976
甾体皂甙元9.96ppm 4.605 218.19 1.990
甾体皂甙元33.21ppm 4.535 212.28 1.966
对照组和各甾体皂甙元组之间的死亡率无显著差别。与对照相比所有剂量组均增重增加并改善了饲料利用率。所有鸡的肝部被送至VirginiaPoloytechnic Institute兽医系的家禽病理学实验室进行大量的组织病理学检查。在这些鸡肝中未见任何肝脏损伤或病变。实施例7
抗球虫病产品必须在动物饲料加工中常见的温度下稳定，同时能长期贮存稳定。为评价甾体皂甙元在压片、挤压和膨胀等加工条件下的热稳定性，将甾体皂甙元样品置于149℃(300°F)下0、2.5、5.0和10分钟并测量甾体皂甙元的回收率。
时间 甾体皂甙元，ppm ％
0 16，288 100.00
2.5 16，547 101.59
5.0 16，288 100.00
10.0 16，288 100.00
甾体皂甙元在饲料加工条件下是高度稳定的。将甾体皂甙元置于压片、挤压或膨胀操作的温度下时应该不会影响甾体皂甙元的效能。
为评价甾体皂甙元在长期贮存条件下的稳定性，采用一系列样品于22℃(72°F)下贮存0、12和24个月。
月份数 甾体皂甙元，ppm ％
0 21，274 100
12 20，632 96.98
24 20，698 97.29
在常规动物饲料贮存条件下甾体皂甙元是高度稳定的，经过24个月其活性丧失小于3％。实施例8
所有现有商品抗生素的最大弱点是球虫具有产生抗药性的趋势，这明显降低了控制球虫感染负作用的化合物的效能。当球虫长期连续暴露于一种化合物中时就会产生抗药性。为评价球虫对甾体皂甙元产生抗药性的能力，对连续3群肉鸡喂食甾体皂甙元。每14天收集一次损伤程度数据，与对照鸡群相比，对比18周的研究期间中甾体皂甙元的效能。
甾体皂甙元明显降低(P＜0.001)了肠道所有区域的损伤并在18周的研究期间效能未下降。
本发明所列数据是用于描述甾体皂甙元控制球虫作用的效能的。这些针对肉鸡球虫的实验例不应被看作仅限于这些种类的球虫或动物种类。
基于上述实验结果，很明显甾体皂甙元可有效控制球虫感染(球虫病)的负作用。

Claims (9)

1、甾体皂甙元在动物养殖中作为抗球虫药物的应用。
2、因球虫感染所致的动物死亡率的降低。
3、因球虫感染所致的动物肠道损伤程度的降低。
4、因控制了球虫感染所致的动物体重的增加。
5、因控制了球虫感染所致的动物饲料转化率的改善。
6、一种在饲料加工和贮存条件下稳定的抗球虫产品。
7、一种对动物无毒且安全比高的抗球虫产品。
8、一种不至产生抗药性的抗球虫产品。
9、一种与饲料级动物抗生素有相容性的抗球虫产品。
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