CN1283667C - 壳聚糖硫酸酯金属配合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一类新的壳聚糖硫酸酯金属配合物及其制备方法。壳聚糖硫酸酯金属配合物是式(1)化合物：其中M＝Cu或Zn，n为56-6211，m∶n为(1∶36)-(1∶2)，R₁为H或Ar，R₂为H或Na。它是用不同分子量的壳聚糖与金属化合物反应后再在微波辐射下与硫酸酯化试剂反应制备不同分子量的壳聚糖硫酸酯金属配合物。采用微波辐射的方法进行硫酸酯化反应同时可应用于其他多糖的硫酸化反应。壳聚糖硫酸酯金属配合物毒性低且易被吸收，有较好的水溶性，金属离子及硫酸酯基与壳聚糖分子有效结合起来，可产生协同增效作用，显著增强壳聚糖自身特有的生物活性，可用于医药、保健品、化妆品和农业等领域应用。

Description

壳聚糖硫酸酯金属配合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种新的壳聚糖硫酸酯金属配合物及其制备方法，具体讲是采用微波辐射技术合成壳聚糖硫酸酯金属配合物，制备具有多种生物活性，有着广泛用途的金属有机化合物。其属于海洋化工工程技术领域。

背景技术

硫酸酯化多糖是多糖的衍生物，是多糖大分子链中单糖分子上的一个或几个羟基被硫酸根所取代而形成的一类多功能生理活性物质。国内外研究表明，多糖硫酸酯化产物具有多种生物活性，如增强机体免疫力、抗凝血、抗病毒、抗肿瘤等活性作用，特别是抗爱滋病病毒(HIV)活性，已成为近年来研究的热点。在众多的衍生物当中，由于壳聚糖来源丰富，性能优越而成为首选的硫酸化研究对象。壳聚糖(Chitosan)是一种广泛存在于自然界中的可再生、无毒副作用，生物相容性和降解性良好的天然氨基多糖，其自身及其衍生物具有许多独特的生理、药理功能性质，被广泛应用于医药、食品、农业、日化、环保等多种行业领域中。壳聚糖单体中有三个官能团：C₃位羟基，C₆位羟基，C₂位氨基。这三种官能团都可以进行硫酸酯化修饰，但活性不同，可根据不同需要，选择性地进行硫酸酯化。壳聚糖的硫酸酯化修饰成为目前多糖研究领域内最吸引人的热点之一。

壳聚糖硫酸酯的抗凝血活性。壳聚糖C₂位氨基羧甲基化后，再将C₆位羟基硫酸酯化，制得的N-羧甲基6-壳聚糖硫酸酯具有类肝素的结构，具有长效抗凝血活性。Hirano S等人的研究加深了对壳聚糖硫酸酯构效关系的认识：实验表明已糖胺C₆位硫酸化是影响抗凝生物活性的主要位点，C₃位硫酸化可增强活性，但C₃位和N位上硫酸化取代并非必须；同时，分子量(M_w)大小对生物活性有影响，具有以下活性关系：Mw26,000＞肝素2,100＞Mw12,000＞Mw54,000。大多数的研究表明壳聚糖硫酸酯化制备的类肝素物质的抗凝血活性与硫酸基含量密切相关。

壳聚糖硫酸酯的抗病毒、抗肿瘤活性。1973年，Horton D等人研究证明含有硫酸酯基的壳聚糖衍生物对白血病病毒具有显著抑制作用。1992年Vercelloui等人发现壳聚糖硫酸化衍生物能抑制哺乳动物的病毒感染，特别是能抑制和治疗HIV感染。

壳聚糖分子中含有大量的羟基(-OH)、氨基(-NH₂)或酰氨基(-NHCOCH₃)，是金属离子的良好配体，可与金属离子进行配位反应形成配合物。研究表明壳聚糖金属配合物能显著增强壳聚糖的抗氧化、抗菌活性，同时提高了金属离子生物相容性和在体内的吸收利用率，其在工业、农业、医药、食品等方面存在潜在的应用前景。但壳聚糖金属配合物不溶于水和其他有机溶剂，限制了其进一步应用。将壳聚糖金属配合物进一步硫酸酯化，不仅使产物具有良好的水溶性，同时可增强其原有生物活性，扩大其应用领域。

金属离子Cu(II)、Zn(II)是人体和动物机体必需的微量元素，参与体内多种酶的生物合成，调节多种酶促反应，涉及蛋白质、核酸、脂肪、激素、能量等代谢，与生命过程密切相关。Cu(II)、Zn(II)作为铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)的金属辅酶，是CuZn-SOD的重要辅助因子和调节因子，以不同的机制在机体防御自由基损伤方面发挥着重要作用。实验表明，去除CuZn-SOD中的Cu(II)后，酶活力全部丧失，而去除Zn(II)后，残存酶活力仅为天然酶的20-80％。同时，Cu(II)、Zn(II)也是很好的抗菌剂，如波尔多液作为植物的杀菌剂使用已有上百年的历史。Cu(II)、Zn(II)的抑菌机理是其可与病原菌细胞膜表面上的K⁺、H⁺等阳离子发生交换反应，使病原菌细胞膜上的蛋白质凝固，同时部分Cu(II)、Zn(II)离子渗透入病原菌细胞内与某些酶结合，影响其活性。

将壳聚糖及其衍生物与金属进行配位反应，制备多种金属配合物，并对其进一步化学改性，加入特异性功能基团硫酸酯基。不仅能发挥壳聚糖本身独特的生物活性、提高无机金属元素在体内的吸收利用，而且有可能起到协同效应，增强各自的生物活性，甚至会产生新的生理活性功能。壳聚糖硫酸酯金属配合物是一种新的金属有机化合物，将多糖、硫酸酯基、金属离子有效结合起来，并且具有良好的水溶性，可用于医药、保健品、化妆品和农业等领域应用。

微波辐射技术是在80年代后期兴起的一项有机合成新技术，即-将微波辐射能技术取代传统加热方法应用于有机干、湿反应(合成)。微波技术已成功地应用于多种重要的有机合成反应，如在Diels-Alder反应、亲核取代反应、烷基化反应、重排反应的应用中，充分显示出了此新技术的广阔前景。在微波辐射作用下的有机反应速率比传统的加热方法快数倍甚至上千倍，且具有产率高、受热均匀、产品质量均一，操作简单等特点。微波能由电场和磁场组成，但只有电场可进行能量转移达到加热目的。由于在微波场中进行化学反应时，是一种内加热反应形式，是离子迁移和极性分子的旋转使分子运动，因此并不会引起分子内部结构的改变，但可使其反应速率和选择性有极大的提高。在有机干、湿反应中微波的应用越来越广泛，使一些用常规加热方法很难进行的反应也找到了新的途径，且使一些不易发生反应的物质也变得活跃起来。然而，国内外对在微波辐射下进行壳聚糖及其衍生物的硫酸酯化反应尚未见报道。

目前多糖的硫酸酯化反应大多在水浴加热条件下进行，反应速度较慢，需数小时，且反应的硫酸酯化程度也不高。同时，多糖长时间在酸性硫酸酯化试剂中反应，可能造成多糖分子的剧烈降解，影响产物的收率。由此，硫酸化多糖在规模化应用上，就受到很大程度的限制。因此研制或改进新的生产技术工艺进行硫酸酯化反应，以提高其反应效率和反应程度，是降低成本，实现硫酸酯化多糖规模化生产的关键问题。

发明内容

本发明的目的就是提供一种壳聚糖硫酸酯金属配合物及其制备方法，利用壳聚糖结构的特殊性，含有活泼的-OH、-NH₂，在N或O上可引入其他活性基团，通过壳聚糖与金属化合物反应后，接入活泼金属离子，再利用微波辐射技术进行硫酸酯化反应，选择性地接入硫酸酯基，多种基团和离子发挥协同增效作用，显著增强其生物活性，同时溶解性能也得到改善。微波辐射技术应用于多糖的硫酸酯化合成反应，能够降低能耗，减少污染，节省时间和原料，降低生产成本，是一项具有产业化前景和广泛市场潜力的应用技术。

本发明涉及的壳聚糖硫酸酯金属配合物是式(1)化合物。其化学一般式为：

式(1)

其中M＝Cu或Zn，n为56-6211，m∶n为(1∶36)-(1∶2)，R₁为H，R₂为H或Na。

本发明中，金属离子M主要是与壳聚糖C₂位的氨基(-NH₂)和C₃位羟基(-OH)配位，配位的壳聚糖单元可以是连续的也可以是不连续的。金属含量为1.1-8.2％(重量百分比)。

本发明中，硫酸酯基(-OSO₃ ^-)主要是与壳聚糖C₆位上的羟基结合，经碱中和后，主要是以硫酸酯钠盐(-SO₃Na)的形式存在。硫酸基含量为29.2-38.1％(以SO₄ ^2-计)。

为实现本发明的目的所采取的技术措施如下：

壳聚糖与金属化合物反应后，再通过沉淀、过滤、洗涤、烘干、粉碎后，悬浮于甲酰胺(或二甲基甲酰胺)中，在冰浴和搅拌条件下加入硫酸酯化试剂，封盖，将反应器置于微波炉中，在微波功率340-850W下，反应1-8min(间歇操作)，加入3-5倍量的95％乙醇溶液，低温放置1-3h，形成白色沉淀真空过滤，70-80％乙醇溶液洗涤数次，无水乙醇洗涤2次，加入少量蒸馏水溶解，用1mol/L NaOH溶液调样品液pH至中性，将样品液转入透析袋(截流分子量＝3,500)内，蒸馏水透析3-4天。采用旋转蒸发浓缩透析液至10-20mL，冷冻干燥后，即得壳聚糖硫酸酯金属配合物。

本发明涉及的壳聚糖分子量在0.9-100万之间，脱乙酰度为65-100％。

本发明中，壳聚糖与金属化合物反应在均相条件下进行，此过程为常规技术，壳聚糖溶解于10-20倍(V/W)体积的酸性溶液中，滴加金属化合物水溶液，在偏酸性条件下搅拌一定时间，加入3-4倍量的丙酮或乙醇(或二者等体积的混合液)生成沉淀，过滤，乙醇洗涤，烘干至恒重。对溶解壳聚糖的溶剂没有特别限定，只要能溶解壳聚糖均可以，主要有甲酸、乙酸、盐酸，浓度为0.5-5％。金属化合物为铜化合物或锌化合物，对其没有特别限定，铜化合物包括硫酸铜、氯化铜、硝酸铜、醋酸铜，锌化合物包括硫酸锌、氯化锌、硝酸锌、醋酸锌。壳聚糖与金属化合物的摩尔比为1∶1。反应在室温下进行，反应时间为2-12小时，反应溶液pH为4-6，用稀氨水调pH。

本发明中，在微波辐射下进行硫酸酯化反应。硫酸酯化反应在甲酰胺(或二甲基甲酰胺)中进行，甲酰胺(或二甲基甲酰胺)与壳聚糖金属配合物的V/W(体积/重量)为(10∶1)-(50∶1)。硫酸酯化试剂没有特别限定，主要包括DMF-SO₃，SO₂/SO₃、氯磺酸/吡啶、SO₃/吡啶等。采用DMF-SO₃可取得较好效果。硫酸酯化试剂与壳聚糖金属配合物的V/W(体积/重量)为(10∶1)-(40∶1)。微波辐射功率在340-850W之间，辐射时间为1-8min(间歇操作)，制备的壳聚糖硫酸酯铜(II)配合物为淡蓝色粉末状固体，壳聚糖硫酸酯锌(II)配合物为淡黄色粉末状固体。

本发明的壳聚糖硫酸酯金属配合物可以用一般的化学分析手段进行表征。例如，红外光谱，紫外光谱、核磁共振、元素分析等。

本发明中壳聚糖硫酸酯金属配合物中的金属含量采用络合滴定法测定，其中壳聚糖硫酸酯铜(II)配合物中铜含量为2.1-8.2％，壳聚糖硫酸酯锌(II)配合物中锌含量为1.1-6.0％。硫酸基含量采用氯化钡-明胶法测定，壳聚糖硫酸酯配合物中硫酸基含量为29.2-38.1％。

本发明的特点在于：

(1)壳聚糖分子与金属离子、硫酸酯基有效结合在一起，三者的相互作用可产生协同增效作用，增强各自特有的生物活性，具有抗氧化、抗病毒、抗菌等多种活性作用。

(2)采用微波辐射技术进行硫酸酯化反应。由于微波辐射能量具有内加热的特点，能加快极性分子的运动，大大增加了反应物的碰撞频率，酯化效率显著提高，可在极短的时间内完成反应，降低能耗，节约成本。同时，避免了壳聚糖金属配合物长时间在酸性酯化试剂中反应造成的大量金属离子解离，可制备出具有较高金属含量的壳聚糖硫酸酯金属配合物。微波辐射技术应用于硫酸酯化反应，为硫酸化多糖的规模化生产应用提供了有效途径。

(3)壳聚糖硫酸酯金属配合物毒性低且易被吸收，具有良好的水溶性，可溶解于多种无机和有机溶剂中，克服了壳聚糖及其金属配合物溶解性差的缺点，扩大了其应用领域，在医药、保健品、化妆品和农业等领域有广泛的应用。

附图说明

图1为壳聚糖的红外谱图；其特征红外(cm^-1)：3446.20；2873.02；1654.86；1580.13；1420.35；1379.90；1155.04；1089.16；664.32。

图2为壳聚糖硫酸酯铜配合物的红外谱图；其特征红外(cm^-1)：3447.43；2928.66；1666.34；1548.27；1398.77；1227.57；1063.22；809.78；583.81。

图3为壳聚糖硫酸酯锌配合物的红外谱图；其特征红外(cm^-1)：3486.45；3217.09；1628.88；1528.61；1429.92；1217.17；1064.73；802.03；579.38。

图4为壳聚糖硫酸酯的红外谱图；其特征红外(cm^-1)：3477.47；3223.52；1630.98；1526.51；1433.28；1219.21；1062.89；808.95；581.81。

图5为壳聚糖的¹³CNMR图谱；其化学位移(ppm)：99.385；57.888；75.378；78.568；75.912；69.411。

图6为壳聚糖硫酸酯铜配合物的¹³CNMR图谱；其化学位移(ppm)：102.682；57.552；75.699；79.423；76.477；69.426。

图7为壳聚糖硫酸酯锌配合物的¹³CNMR图谱；其化学位移(ppm)：100.652；57.873；71.899；81.407；75.058；68.801。

图8为壳聚糖硫酸酯的¹³CNMR图谱；其化学位移(ppm)：100.835；58.316；73.135；79.468；75.165；68.953。

具体实施方式

本发明的实施例结合附图进一步说明如下，本发明的保护范围不仅局限于以下实施例中。

实施例1

4g壳聚糖(Mw＝7.6×10⁵，脱乙酰度为84.1％)用1％乙酸溶解后，加入等摩尔量的CuSO₄水溶液，搅拌2小时，用稀氨水调溶液pH为4-6，继续搅拌4h，用3-4倍体积的丙酮沉淀，过滤，洗涤，烘干，粉碎后得壳聚糖铜(II)配合物，取上述配合物2g，悬浮于50mL甲酰胺中，在冰浴和搅拌条件下加入30mLDMF-SO₃，封盖，将反应器置于微波炉中，850W微波功率下反应2min(间歇操作)，加入3-5倍量95％乙醇形成沉淀，4℃冷藏柜中放置1h，抽滤，加20mL蒸馏水溶解，用1mol/L NaOH溶液调pH至中性，装入透析袋中，蒸馏水透析3-4天，旋转蒸发浓缩透析液至10-20mL，冷冻干燥后即得壳聚糖硫酸酯铜(II)配合物。

该配合物采用络合滴定法测定表明铜含量为8.2％(重量百分比)，氯化钡-明胶法测定硫酸基含量为29.2％(以SO₄ ^2-计)。红外光谱分析(图2)表明，壳聚糖硫酸酯铜配合物与壳聚糖(图1)相比，出现1227.57cm^-1和809.78cm^-1两个新的吸收峰，这是硫酸酯基的特征吸收峰，1200cm^-1左右是-OSO₃的S＝O伸缩振动，808cm^-1左右是C-O-S键的伸缩振动，证实配合物中接入了硫酸酯基，并以钠盐形式存在。同时，从红外图谱中可以看出，3446cm^-1左右是形成氢键缔合的O-H伸缩振动吸收峰与N-H伸缩振动吸收峰重叠而增宽的多重吸收峰，该吸收峰发生一定位移，且吸收峰变尖，说明-NH₂和-OH参与了配位反应。位于1580cm^-1处的δ_N-H吸收峰，与Cu(II)配位后该峰向低频位移32cm^-1，进一步说明-NH₂参与了配位反应；位于1655cm^-1处的乙酰氨基吸收峰向高频发生一定位移，说明壳聚糖分子中的乙酰氨基参与了配位反应。核磁图谱分析(图6)表明，由于接入了铜离子和硫酸酯基，配合物与壳聚糖相比，对壳聚糖六个碳的位移均产生较强的影响，特别是对C₁、C₄、C₅的位移影响较大，C₁向低场位移3.297ppm，C₄向低场位移0.855ppm，C₅向低场位移0.565ppm，可能是受到C₆位电负性较强的硫酸酯基强烈影响造成的。壳聚糖硫酸酯Cu(II)配合物与壳聚糖硫酸酯(图8)相比，C₂向高场位移0.764ppm，C₃向低场位移了2.564ppm，均有较大差别，进一步证明配合物中C₂和C₃主要与铜离子配位，未参与硫酸酯化反应，只有C₆位接入了硫酸酯基，而壳聚糖硫酸酯中C₂位氨基和C₃、C₆位羟基均接入硫酸酯基。如图6所示壳聚糖硫酸酯铜配合物的¹³CNMR图谱；其化学位移(ppm)：102.682；57.552；75.699；79.423；76.477；69.426。

以上的分析结果表明，该配合物中铜离子主要与壳聚糖分子C₂位氨基和C₃位羟基进行配位，部分乙酰氨基也参与配位。硫酸酯基主要接在C₆位羟基上。

实施例2

4g壳聚糖(Mw＝7.6×10⁵，脱乙酰度为84.1％)用1％甲酸溶解后，加入等摩尔量的ZnSO₄水溶液，搅拌2小时，用稀氨水调溶液pH为4-6，继续搅拌4h，用3-4倍体积的丙酮沉淀，过滤，洗涤，烘干，粉碎后得壳聚糖锌(II)配合物，取上述配合物2g，悬浮于100mL二甲基甲酰胺中，在冰浴和搅拌条件下加入60mLDMF-SO₃，封盖，将反应器置于微波炉中，680W微波功率下反应3min(间歇操作)，加入3-5倍量95％乙醇形成沉淀，4℃冷藏柜中放置1h，抽滤，加20mL蒸馏水溶解，用1mol/L NaOH溶液调pH至中性，装入透析袋中，蒸馏水透析3-4天，旋转蒸发浓缩透析液至10-20mL，冷冻干燥后即得壳聚糖硫酸酯锌(II)配合物。

该配合物采用络合滴定法测定表明锌含量为6.0％(重量百分比)，氯化钡-明胶法测定硫酸基含量为37.2％(以SO₄ ^2-计)。红外光谱分析(图3)表明壳聚糖硫酸酯锌配合物与壳聚糖(图1)相比，出现1217.17cm^-1和802.03cm^-1两个新的吸收峰，这是硫酸酯基的特征吸收峰，证实配合物中接入了硫酸酯基，并以钠盐形式存在。同时，从红外图谱中可以看出，位于3446cm-1左右的吸收峰发生一定位移，说明-NH₂和-OH参与了配位反应；位于1580cm^-1处的δ_N-H吸收峰，与锌配位后该峰向低频位移52cm^-1，进一步说明-NH₂参与了配位反应；位于1655cm^-1处的乙酰氨基吸收峰也发生一定位移，说明壳聚糖分子中的乙酰氨基参与了配位反应。核磁图谱分析(图7)表明，该配合物与壳聚糖相比，壳聚糖六个碳的位移均有较大变化，特别是对C₁、C₃、C₄、C₅的位移影响较大，C₁向低场位移1.267ppm，C₃向高场位移3.479ppm，C₄向低场位移2.839ppm，C₅向高场位移0.854ppm。壳聚糖硫酸酯锌(II)配合物与壳聚糖硫酸酯(图8)相比，C₂向高场位移0.443ppm，C₃向高场位移了1.236ppm，均有较大差别，进一步证明配合物中C₂和C₃主要与铜离子配位，未参与硫酸酯化反应，只有C₆位接入了硫酸酯基，而壳聚糖硫酸酯中C₂位氨基和C₃、C₆位羟基均接入硫酸酯基。如图7所示壳聚糖硫酸酯锌配合物的¹³CNMR图谱；其化学位移(ppm)：100.652；57.873；71.899；81.407；75.058；68.801。

以上的分析结果表明，该配合物中锌离子主要与壳聚糖分子C₂位氨基和C₃位羟基进行配位，部分乙酰氨基也参与配位。硫酸酯基主要接在C₆位羟基上。

实施例3(低分子量壳聚糖配合物)

4g低分子量壳聚糖(Mw＝2.0×10⁴，脱乙酰度为85.4％)溶于1％乙酸中，加入等摩尔量的CuSO₄水溶液，搅拌2小时，用稀氨水调溶液pH为4-6，继续搅拌6h，用3-4倍体积的丙酮沉淀，过滤，洗涤，烘干，粉碎后得壳聚糖铜(II)配合物，取上述配合物2g，悬浮于60mL甲酰胺中，在冰浴和搅拌条件下加入20mLDMF-SO₃，封盖，将反应器置于微波炉中，510W微波功率下反应4min(间歇操作)，加入3-5倍量乙醇形成沉淀，4℃冷藏柜中放置3h，抽滤，加20mL蒸馏水溶解，用1mol/L NaOH溶液调pH至中性，装入透析袋中，蒸馏水透析3-4天，旋转蒸发浓缩透析液至10-20mL，冷冻干燥后即得低分子量壳聚糖硫酸酯铜(II)配合物。

该配合物采用络合滴定法测定表明铜含量为2.1％(重量百分比)。氯化钡-明胶法测定硫酸基含量为36.9％(以SO₄ ^2-计)。

实施例4(低分子量壳聚糖配合物)

4g低分子量壳聚糖(Mw＝2.0×10⁴，脱乙酰度为85.4％)溶于1％甲酸中，加入等摩尔量的ZnSO4水溶液，搅拌2小时，用稀氨水调溶液pH为4-6，继续搅拌6h，用3-4倍体积的丙酮沉淀，过滤，洗涤，烘干，粉碎后得壳聚糖铜(II)配合物，取上述配合物2g，悬浮于60mL二甲基甲酰胺中，在冰浴和搅拌条件下加入30mL DMF-SO₃，封盖，将反应器置于微波炉中，340W微波功率下反应8min(间歇操作)，加入3-5倍量乙醇形成沉淀，4℃冷藏柜中放置3h，抽滤，加20mL蒸馏水溶解，用1mol/L NaOH溶液调pH至中性，装入透析袋中，蒸馏水透析3-4天，旋转蒸发浓缩透析液至10-20mL，冷冻干燥后即得低分子量壳聚糖硫酸酯锌(II)配合物。

该配合物采用络合滴定法测定表明铜含量为1.1％(重量百分比)。氯化钡-明胶法测定硫酸基含量为38.1％(以SO₄ ^2-计)。

比较例(壳聚糖硫酸酯化合物)

2g壳聚糖(Mw＝7.6×10⁵，脱乙酰度为84.1％)，悬浮于50mL甲酰胺中，在冰浴和搅拌条件下加入30mL DMF-SO₃，封盖，将反应器置于微波炉中，680W微波功率下反应3min(间歇操作)，加入3-5倍量95％乙醇形成沉淀，4℃冷藏柜中放置1h，抽滤，加20mL蒸馏水溶解，用1mol/LNaOH溶液调pH至中性，装入透析袋中，蒸馏水透析3-4天，旋转蒸发浓缩透析液至10-20mL，冷冻干燥后即得壳聚糖硫酸酯化合物。

氯化钡-明胶法测定硫酸基含量为42.9％(以SO₄ ^2-计)。红外光谱分析(图4)表明壳聚糖硫酸酯与壳聚糖(图1)相比，出现1219.21cm^-1和808.95cm^-1两个新的吸收峰，这是硫酸酯基的特征吸收峰，证实已接入硫酸酯基，并以钠盐形式存在。核磁图谱分析(图8)表明，由于受电负性较强的硫酸酯基的影响，与壳聚糖相比，六个碳均发生较大位移。如图8所示壳聚糖硫酸酯的¹³CNMR图谱；其化学位移(ppm)：100.835；58.316；73.135；79.468；75.165；68.953。

如图5所示壳聚糖的¹³CNMR图谱；其化学位移(ppm)：99.385；57.888；75.378；78.568；75.912；69.411。

Claims (7)

1、一种壳聚糖硫酸酯金属配合物，其特征在于壳聚糖硫酸酯金属配合物是式(1)化合物：

式(1)

其中M＝Cu或Zn，n为56-6211，m∶n为(1∶36)-(1∶2)，R₁为H，R₂为H或Na。

2、按照权利要求1所述壳聚糖硫酸酯金属配合物的制备方法，其特征在于：首先由壳聚糖与金属化合物反应制备出壳聚糖金属配合物，在此基础上，微波辐射下与硫酸酯化试剂反应进行酯化合成反应，接上硫酸酯基-OSO₃ ^-，硫酸酯化试剂与壳聚糖金属配合物的体积/重量为(10∶1)-(40∶1)，硫酸酯化反应在微波辐射下进行，微波辐射功率为340-850W，辐射时间为1-8min，再通过沉淀、过滤、中和、透析制得配合物，配合物中金属含量为1.1-8.2％，硫酸基含量为29.2-38.1％；所述金属化合物为铜化合物或锌化合物。

3、按照权利要求2所述壳聚糖硫酸酯金属配合物的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖分子量在0.9万-100万之间，脱乙酰度为65-100％。

4、按照权利要求2所述壳聚糖硫酸酯金属配合物的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖分子量在1万-10万之间，n为62.11-621.1。

5、按照权利要求2所述壳聚糖硫酸酯金属配合物的制备方法，其特征在于：所述铜化合物包括硫酸铜、氯化铜、硝酸铜或醋酸铜。

6、按照权利要求2所述壳聚糖硫酸酯金属配合物的制备方法，其特征在于：所述锌化合物包括硫酸锌、氯化锌、硝酸锌或醋酸锌。

7、按照权利要求2所述壳聚糖硫酸酯金属配合物的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖金属配合物在甲酰胺或二甲基甲酰胺溶剂中与硫酸酯化试剂进行反应。

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