CN1222909A - 吡嗪酮凝血酶抑制剂 - Google Patents

Abstract

结构为(a),例如式(b)的本发明化合物对于抑制凝血酶和有关血栓形成的闭塞是有用的。

Description

吡嗪酮凝血酶抑制剂

发明背景

凝血酶是丝氨酸蛋白酶，以其前体形式，凝血酶原的形式存在于血浆中。凝血酶在血液凝结过程中扮演重要角色，它将血浆蛋白溶液、血纤维蛋白原转变成不溶性血纤维蛋白。

Edwards等(J.Amer.Chem.Soc.,(1992)114卷，1854-1863页)，描述了肽基α-氧代苯并噁唑，这是一类包括人白细胞弹性蛋白酶和胰弹性蛋白酶的丝氨酸蛋白酶的可逆抑制剂。

欧洲公开专利363284号描述了肽酶底物的类似物，其中肽底物断开的酰胺基的氮原子被氢或取代的羰基代替。

澳大利亚公开专利86245677号同样描述了有活化的亲电子的酮基部分例如氟亚甲酮或α-氧代羧基衍生物的肽酶抑制剂。

R.J.Brown等(J.Med.Chem.,37卷，1259-1261页(1994))描

述了具有口服活性的人白细胞弹性蛋白酶的非肽抑制剂，它含有三氟甲酮和吡啶酮部分。

H.Mack等(J.Enzyme Inhibition,9卷，73-86页(1995))描述了刚性脒基苯丙氨酸凝血酶抑制剂，它包含作为重要的核心结构的吡啶酮部分。

发明概述

本发明包括在哺乳动物体内抑制血小板损失、抑制血小板聚集体形成、抑制血纤维蛋白形成、抑制血栓形成和抑制栓子形成的组合物，它包含在药学上可接受的载体中的本发明化合物。这些组合物可以任意包括抗凝血剂、抗血小板剂和血栓溶解剂。为了达到所需的抑制作用，可以将这些组合物加到血中、血液制品或哺乳动物的器官中。

本发明还包括预防和治疗哺乳动物不稳定心绞痛、顽固性心绞痛、心肌梗塞、短暂性局部缺血发作、心房纤维性颤动、血栓形成发作、栓塞发作、深静脉血栓形成、血管内血凝结散布、目视可见的血纤维蛋白形成和再造血管中的再闭塞或再狭窄的组合物。该组合物包括在药学上可接受的载体中的本发明化合物。这些组合物可以任意包括抗凝血剂、抗血小板剂和血栓溶解剂。

本发明还包括通过共价地或非共价地缚附本发明化合物于体表以减少哺乳动物体表血栓形成的方法。本发明详述和优选方案

本发明化合物作为凝血酶抑制剂是有用的，和在例如防治冠状动脉疾病方面具有治疗价值，其为结构式如下的化合物或其药学上可接受的盐：其中W是

氢，

R¹,

R¹OCO,

R¹CO,

R¹(CH₂)_nNHCO，或

(R¹)₂CH(CH₂)_nNHCO，

其中n是0-4；R¹是

R²,

R²(CH₂)mC(R¹²)₂，其中m是0-3，和各个R¹²可以相同或不同，

(R²)(OR²)CH(CH₂)P，其中P是1-4，

R²C(R¹²)₂(CH₂)m，其中m是0-3，和各个R¹²可以相同或不同，其中(R¹²)₂

也可以与C形成C_3-7环烷基代表的环，

R²CH₂C(R¹²)₂(CH₂)q，其中m是0-2，和各个R¹²可以相同或不同，其中(R¹²)₂也可以与C形成C_3-7环烷基代表的环，

(R²)₂CH(CH₂)r，其中r是0-4，和各个R²可以相同或不同，其中(R²)₂

也可以与CH形成C_3-7环烷基、C_7-12二环烷基、C_10-16三环烷基或饱和或不饱和的5-7元单或二杂环代表的环，和该环含有1-3个选自N、O和S的杂原子，

R²O(CH₂)P，其中P是1-4，或

R²(COOR³)(CH₂)r，其中r是1-4；R²和R¹⁴各自独立地代表

未取代的或被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、卤素、羟基、COOH、CONH₂或SO₂NH₂取代的苯基，

萘基，

联苯基，

5-7元单环或9-10元二环杂环或非杂环，它们可以是饱和或不饱和的，

其中杂环含有1-4个选自N、O和S的杂原子，其中的杂环或非杂环是未取代的或被卤素或羟基取代的，

未取代的或被一个或多个羟基、COOH、氨基、芳基、C_3-7环烷基、CF₃、N(CH₃)₂、C_1-3烷基芳基、杂芳基或杂环烷基取代的C_1-7烷基，

CF₃

未取代或被芳基取代的C_3-7环烷基，

C_7-12二环烷基，或

C_10-16三环烷基；R³是

氢，

C_1-4烷氧基，

C_3-7环烷基，或

三氟甲基；X是

氢，或卤素；A选自下列基团之一：

其中Y¹和Y²各自独立代表

氢，

C_1-4烷基，

C_1-4烷氧基，

C_3-7环烷基，

卤素，或

三氟甲基；R⁴是

氢，

C_1-4烷基，

C_1-4烷氧基，

卤素，

-OCH₂CF₃,

-OCH₂CN,

-COOH,

-OH,

-COOR⁶，其中R⁶是C_1-4烷基，

-CONR⁷R⁸，其中R⁷和R⁸各自独立代表氢或C_1-4烷基，

-(CH₂)_1-4OH,

-CH₂NHC(O)CH₃,

-CH₂NHC(O)CF₃,

-CH₂NHSO₂CH₃,-SO₂NH₂,-(CH₂)_1-4SO₂NR⁷R⁸,-(CH₂)_1-4SO₂R⁶,5-7元单环或9-10元二环杂环，它们可以是饱和或不饱和的杂环，其含有1-4个选自N、O和S的杂原子，-ZCH₂CO₂H,-ZCH₂CO₂CH₃,-ZCH₂R¹⁴,-ZCH₂CO₂(CH₂)_1-3CH₃,-Z(CHR⁹)_1-3C(O)NR¹⁰R¹¹其中

R⁹是氢或C_1-4烷基，

R¹⁰和R¹¹各自独立代表

氢，

C_3-7环烷基，

芳基，

杂芳基，

杂环烷基，

-(CH₂)_1-2NCH₂CH₃，

未取代的或被一个或多个羟基、COOH、氨基、芳基、杂芳基或

杂环烷基取代的C_1-4烷基，或

R¹⁰和R¹¹一起形成未取代或被羟基、氨基或芳基取代的4-7元环烷基，其中Z是O、S或CH₂；是氢，卤素，C_1-4烷基，C_1-4烷氧基，CF₃，

CN，或

CO₂NH₂，和R¹²是

氢，

未取代的或被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、卤素、羟基、COOH、CONH₂取代的苯基，

萘基，

联苯基，

5-7元单杂环或9-10元二杂环，它们可以是饱和或不饱和的，其中含有1-4个选自N、O和S的杂原子，

未取代的或被一个或多个羟基、COOH、氨基、芳基、杂芳基或杂环烷基取代的C_1-4烷基，

CF₃

C_3-7环烷基，

C_7-12二环烷基，或

C_10-16三环烷基。

在一类化合物和其药物可接受的盐中，R³是C_1-4烷基。

在这一类化合物和其药物可接受的盐的亚类中，A选自下列基团之一：

其中Y¹和Y²各自独立代表氢或C_1-4烷基；R⁴是

氢，

卤素，

-OCH₂CN，

-OH,

-ZCH₂CO₂H，或

-Z(CHR⁹)_1-3C(O)NR¹⁰R¹¹

其中

R⁹是氢或C_1-4烷基，和

R¹⁰和R¹¹各自独立代表

氢，

C_3-7环烷基，

-(CH₂)_1-2NCH₂CH₃，或

C_1-4烷基，

其中Z是O、S或CH₂；R⁵是

氢，

卤素，或

CF₃。

在这一亚类化合物和其药物可接受的盐的一组化合物中，W是H或R¹。

在这一组化合物和其药物可接受的盐的亚组化合物中，R¹是

R²,

R²(CH₂)mC(R¹²)₂，其中m是0-3，和各个R¹²可以相同或不同，

R²C(R¹²)₂(CH₂)m，其中m是0-3，和各个R¹²可以相同或不同，其中(R¹²)₂

也可以与C形成C_3-7环烷基代表的环，

(R²)₂CH(CH₂)r，其中r是0-4，和各个R²可以相同或不同，其中(R²)₂

也可以与CH形成C_3-7环烷基、C_7-12二环烷基、C_10-16三环烷基或5-7

元饱和或不饱和的单或二杂环代表的环，和该环含有1-3个选自N、O和S的杂原子，

R²O(CH₂)P，其中P是1-4；R²和R¹⁴各自独立地代表

未取代的或被C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、卤素、羟基、或SO₂NH₂单或多取代的苯基，

5-7元单杂环或9-10元二环，它们可以是饱和或不饱和的杂环或非杂环，其中杂环含有1-4个选自N、O和S的杂原子，其中的杂环或非杂环是未取代的或被卤素或羟基取代的，

未取代的或被一个或多个羟基、COOH、C_3-7环烷基、CF₃、N(CH₃)₂、C_1-3烷基芳基、杂芳基或杂环烷基取代的C_1-7烷基，

CF₃或

未取代的或被芳基取代的C_3-7环烷基；和R¹²是

氢，

未取代的或被一个或多个羟基、COOH、氨基、芳基、杂芳基或杂环烷基取代的C_1-4烷基。

在该亚组化合物及其药物可接受的盐的家族中，A是其中R⁵是H、氟、氯，和R¹⁰和R¹¹各自独立选自

氢，

C₂H₅，

C₃H₅，

(CH₂)₂N(CH₃)₂,

C₃环烷基，其中R⁴是OH、氯、H、-OCH₂CN、氟、-OCH₂COOH,R⁵是氯或CF₃，R³是CH₃或CH₂CH₃；X是H或氯；和W是PhCH₂CH₂,(CH₃)₃C-,HOOCCH₂,CF₃CH₂,(CH₃)₂N(CH₂)₂,PhCH₂O(CH₂)₂,PhCH(CH₃),PhCH₂CH(COOH),CH₃(CH₂)₅,PhCH₂,H,CH₃(CH₂)₄,CH₃CH₂CH(CH₃)CH₂,(Ph)₂CHCH₂,PhCH₂CH(CH₃),PhCH₂C(CH₃)₂,PhCH(CH₃)CH₂,(CH₃)₂CH,PhCH(OH)CH₂,PhC(CH₃)CH₂,(Ph)₂CHCH₂,

此类化合物的实例列于下列表1-4中，此类化合物包括(注意甲基按惯例是以单键与环相连)：

一个特别的实例是化合物3-(2-苯乙基胺基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮及其药物可接受的盐。该化合物的一种特别盐是3-(2-苯乙基胺基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐。该盐可以两种晶体多晶型物之一制备，在下文中以“晶型A”和“晶型B”表示(见实施例Ⅴ)。

本发明的化合物可以有手性中心并生成外消旋物所有异构体形式，因此，本发明包括外消旋混合物和单个非对映体或对映体所有异构体形式。本发明的化合物也可以为多晶型结晶物，因此，本发明包括所有多晶型结晶物。

当在任何组分或通式Ⅰ中任何可变的存在形式超过一次时，相对于每种其它存在的定义，每种存在的定义是独立的。只有当这些结合可导致稳定的化合物时，才允许这样的取代物和/或存在的结合。

本申请中出现的一些缩写说明如下。

                        缩写符号                       保护基BOC(Boc)                   叔丁氧基羰基CBZ(Cbz)                   苄氧羰基TBS(TBDMS)                 叔丁基二甲基甲硅烷基活化基HBT(HOBT或HOBt)            1-羟基苯并***水合物符号                       偶合剂BOP试剂                    苯并***-1-基氧三-(二甲胺基)

                       磷鎓六氟磷酸盐BOP-Cl                     二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦鎓氯EDC                        1-乙基-3-(3-二甲胺基丙基)

                       碳化二亚胺盐酸盐

                       其它(BOC)₂O(BOC₂O)           二叔丁基碳酸酯n-Bu₄N+F-                 氟化四丁基铵nBuLi(n-Buli)              正丁基锂DMF                        二甲基甲酰胺Et₃N(TEA)                 三乙胺EtOAc                      乙酸乙酯TFA                        三氟乙酸DMAP                       二甲基氨基吡啶DME                        二甲氧基乙烷NMM                        N-甲基吗啉DPPA                       二苯基磷酰基叠氮化物THF                        四氢呋喃DIPEA                      二异丙基乙胺

               氨基酸

Ile            异亮氨酸

Phe            苯丙氨酸

Pro            脯氨酸

Ala            丙氨酸

Val            缬氨酸

本文中除特别注明的之外，“烷基”包括具有指定碳原子数的直链和支链的饱和脂肪烃基(Me是甲基，Et是乙基，Pr是丙基，Bu是丁基)；“烷氧基”代表通过氧桥相连的指定碳原子数的直链或支链烷基；“卤素”本文中是指氟、氯、溴和碘；“相反离子”代表小的带单负电荷的离子，例如氯离子、溴离子、氢氧根、乙酸根、三氟乙酸根、高氯酸根、硝酸根、苯甲酸根、马来酸根、硫酸根、酒石酸根、半酒石酸根、苯磺酸根等。

术语“C_3-7环烷基”包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基等。

术语“C_7-12二环烷基”包括二环[2,2,1]庚基(降冰片基)、二环[2,2,2]辛基、1,1,3-三甲基-二环[2,2,1]庚基(冰片基)等。

在本文中除有特别注明外，术语“芳基”代表稳定的6-10元单或双环，例如苯基或萘基。芳环可以未取代或被一个或多个C_1-4低级烷基、羟基、烷氧基、卤素、氨基取代。术语“杂芳基”是指含一或两个选自O、N或S杂原子的5-7元不饱和环。

在本文中除有特别注明外，术语“杂环”或“杂环环”代表稳定的5-7元单或双环或稳定的7-10元双杂环，它们可以是饱和或不饱和的，并且由碳原子和1-4个选自N、O和S的杂原子构成，其中氮和硫杂原子可以被任意氧化，氮杂原子可以被任意季铵化，包括任何以上杂环定义给出的二环基团与苯环稠合。特别有利的环含有一个氧原子或硫原子，1-4个氮原子或与一或两个氮原子相连的一个氧原子或硫原子。杂环环可以与任何杂原子或碳原子连接以产生稳定结构。这类杂环基团的例子包括哌啶基、哌嗪基、2-氧哌嗪基、2-氧哌啶基、2-氧吡咯烷基、2-氧代氮杂基、氮杂基、吡咯基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑基、吡唑烷基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噁唑基、噁唑烷基、异噁唑基、异噁唑烷基、吗啉基、噻唑基、噻唑烷基、异噻唑基、奎宁环基、异噻唑烷基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、噻二唑基、苯并吡喃基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、呋喃基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四唑基、噻吩基、苯并噻吩基、硫代吗啉基、硫代吗啉亚砜、硫代吗啉砜和噁二唑基。吗啉代与吗啉基相同。

通式Ⅰ化合物的药物可接受盐(以水或油可溶或可分散产物的形式存在)包括惯用的无毒盐，例如从无机酸衍生出的盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、氨基磺酸盐、磷酸盐、硝酸盐等，或者从无机或有机酸或碱生成的季铵盐。酸加成盐的例子包括乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙基磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、4,4’-亚甲基双(3-羟-2-萘酸盐)、果胶酯酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸押、甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。碱盐包括铵盐，碱金属盐例如钠和钾盐，碱土金属盐例如钙和镁盐，有机碱的盐例如二环己基铵盐、N-甲基-D-葡糖铵盐和氨基酸盐例如精氨酸盐、赖氨酸盐等。含有氮原子的基团也可以与一些例如低级烷基卤化物的试剂发生季铵化作用，例如甲基氯、乙基氯、丙基氯、丁基氯、甲基溴、乙基溴、丙基溴、丁基溴、甲基碘、乙基碘、丙基碘和丁基碘；二烷基硫酸盐如二甲基硫酸盐、二乙基硫酸盐、二丁基硫酸盐和二戊基硫酸盐，长链卤化物例如癸基氯、月桂基氯、肉豆蔻基氯、硬脂酰氯、癸基溴、月桂基溴、肉豆蔻基溴、硬脂酰溴、癸基碘、月桂基碘、肉豆蔻基碘和硬脂酰碘，芳烷卤化物如苄基溴和苯乙基溴等。凝血酶抑制剂-治疗用途-使用方法

抗凝疗法是指治疗和防止各种血栓形成的疾病，特别是用于治疗和预防冠状动脉和脑血管的疾病。在此领域的经验使人们很快意识到需要抗凝疗法。本文中所用术语“患者”是指哺乳动物例如；灵长目动物，包括人、羊、马、牛、猪、狗、猫、大鼠和小鼠。

凝血酶的抑制作用不仅对于有血栓疾病的个体有抗凝血疗效，还用于任何需要抑制血液凝固的情况下，例如在贮存全血过程中防止凝固和防止其它用于实验或贮存的生物制品凝固。因此，可以将凝血酶抑制剂加入到或与任何含凝血酶或类似物的介质接触，使血液凝固作用被抑制，例如使哺乳动物的血与以下材料接触，这些材料选自血管移植物、移植片固定模、矫形假体、心脏假体和体外循环***。

本发明化合物对于治疗或防止哺乳动物的静脉血栓栓塞(例如通过分离血栓梗阻或闭塞静脉；通过分离血栓梗阻或闭塞肺动脉)、心原性血栓栓塞(例如通过分离血栓梗阻或闭塞心脏)、动脉血栓形成(例如在动脉中形成血栓，由动脉血栓引起组织梗塞)、动脉粥样硬化(例如以无规律分布类脂类沉积为特征的动脉粥样硬化)是有用的，它可以降低与血接触的装置使血结块的倾向。

可用本发明化合物治疗或防止静脉血栓栓塞的例子包括静脉梗阻、肺动脉梗阻(肺栓塞)、深部静脉血栓形成，与癌和癌的化学疗法有关的血栓形成，与血栓形成疾病的遗传有关的血栓形成，例如蛋白质C缺乏症、蛋白质S缺乏症、抗凝血酶Ⅲ缺乏症和V Leiden因子，由血流紊乱引起的血栓形成，例如全身红斑狼疮(组织炎症疾病)。就静脉血栓栓塞而言，本发明化合物对于保持内在导管的开放是有利的。

可用本发明化合物治疗或防止的心原性血栓栓塞的例子包括血栓栓塞发作(分离的血栓引起与脑供血不足有关的神经痛)，心原性血栓栓塞与心房纤维性颤动有关(上心室的肌肉纤维快速地无规律地颤搐)，心原性血栓栓塞与假体心脏瓣膜有关，例如机械心脏瓣膜，心原性血栓栓塞与心脏疾病有关。

动脉血栓形成的例子包括不稳定心绞痛(起源于冠状的剧烈胸内狭痛)、心肌梗塞(由于供血不足造成心肌细胞死亡)、心脏局部缺血(由于供血梗阻(例如动脉变窄)导致的局部贫血)，经皮透照冠状血管成形术过程中或过程后的再闭塞，经皮透照冠状血管成型术后的再狭窄，冠状动脉旁路的移植物闭塞和脑血管栓塞病。关于动脉血栓形成，本发明化合物对于保持动静脉套管的开放是有利的。

动脉粥样硬化的例子包括动脉硬化。

与血接触的装置包括血管移植物、移植片固定模、矫形用假体、心脏假体和体外循环***。

本发明的凝血酶抑制剂可以通过口服制剂的形式给药，例如片剂、胶囊剂(每种胶囊剂均包括持续释放或定时释放形式)、丸剂、粉剂、颗粒剂、酏剂、酊剂、悬浮液、糖浆剂和乳剂。它们也可以通过静脉(丸剂或注射)给药、腹腔给药、皮下给药或肌肉注射的形式给药，所有给药形式都是制药工艺中众所周知的常用技术。有效但无毒量的所需化合物可以用作抗凝剂。为了治疗纤维蛋白形成的栓塞，可以通过眼内给药或皮肤表面给药以及口服给药或非口服给药。

凝血酶抑制剂可以通过滴注或植入制剂的形式给药，该制剂以允许活性成分持续释放的方式配制。活性成分可以压制成小丸或小圆柱体，并经皮下或肌内滴注或植入。植入物可以使用惰性材料例如生物降解的聚合物或合成硅氧烷，例如硅橡胶、硅氧橡胶或Dow-Corning公司生产的其它聚合物。

凝血酶抑制剂也可以以脂质体传送***形式给药，例如小单层囊、大单层囊和多层囊。脂质体可以由各种磷脂形成，例如胆固醇、硬脂酰胺或卵磷脂。

凝血酶抑制剂也可通过单克隆抗体作为与化合物分子偶合的单独载体传送。凝血酶抑制剂也可与可溶性聚合物偶合作为靶向药物的载体。此类聚合物包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟基-丙基-异丁烯酰胺-苯酚、聚羟乙基-天冬酰胺-苯酚或棕榈酰残基取代的聚环氧乙烷-聚赖氨酸。而且，凝血酶抑制剂也可以与一类可生物降解的聚合物偶合，以利于获得控释药物，例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚ε-己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚乙缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和交联或两亲的水凝胶嵌段共聚物。

凝血酶抑制剂的使用剂量范围根据各种因素选择，包括患者的类型、种类、年龄、体重、性别和患者的用药病症；要治疗疾病的严重程度；给药途径；患者的肾和肝的功能和所有特殊化合物或其盐。有经验的医生或兽医都可以迅速地决定和开出所需药物的有效剂量以防止、对抗或阻止疾病的发展。

凝血酶抑制剂的口服剂量，为得到显著作用，使用范围从约0.01mg每公斤体重每天(mg/kg/天)到约30mg/kg/天，优选0.025-7.5mg/kg/天，更优选0.1-2.5mg/kg/天，特别优选0.1-0.5mg/kg/天(除非另有规定，活性成分的量以游离碱形式计算)。例如，体重80kg的患者，服药量约从0.8mg/天到2.4g/天，优选2-600mg/天，更优选8-200mg/天，最优选8-40 mg/kg/天。适合每天给药一次的药剂，含0.8mg至2.4g的药物，优选2-600mg，更优选8-200mg，最优选8-40mg，例如8mg、10mg、20mg和40mg。凝血酶抑制剂可以每天分成两次、三次或四次给药是有利的。为了每天给药两次，制得的适合的药剂含0.4mg-4g药物，优选1-300mg，更优选4-100mg，最优选4-20mg，例如4mg、5mg、10mg和20mg。

静脉给药，患者得到足量的活性组分，给药量从0.025-7.5mg/kg/天，优选0.1-2.5mg/kg/天，更优选0.1-0.5mg/kg/天。这样的量可通过许多适合的方式给药，例如在持续的一段时间内或一天几次给大体积低浓度的活性组分，在短时间内给小体积高浓度的活性组分，例如每天一次。典型地，惯用的静脉制剂可含约0.01-1.0mg/ml浓度的活性组分，例如0.1mg/ml、0.3mg/ml和0.6mg/ml，每天的给药量从0.01-10.0ml/kg，例如0.1ml/kg、0.2ml/kg、0.5ml/kg。举一例，体重80kg的患者，含活性组分浓度为0.5mg/ml的静脉注射制剂每天注射两次，每次注射8ml，即每天注射了8mg的活性组分。静脉给药可接受的葡糖醛酸、L-乳酸、乙酸、柠檬酸或任何药物可接受的酸/在可接受的pH范围具有合适缓冲能力的共轭碱可以用作缓冲液。在选择适合的缓冲液和制剂的pH时，应考虑到药物的溶解性，根据药物的溶解性，本领域的技术人员可迅速作出选择。

化合物也可以使用适合的鼻腔给药载体通过鼻腔局部给药，或通过皮下给药，使用皮下给药制剂的方式是本领域技术人员所知的。作为皮下给药的传送***，连续给药比间断给药效果好。

凝血酶抑制剂一般以活性成分与适合的药物稀释剂、赋形剂或载体(本文称“载体”材料)的混合物给药，根据预定的剂型选择适合的载体，这些剂型有口服片、胶囊、酏剂、糖浆剂等，并且所选载体要与惯用的制药实践一致。

例如，口服给药的剂型如片剂或胶囊剂，药物的活性成分可以与可口服的、无毒的、药物可接受的惰性载体结合，惰性载体例如乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、磷酸二钙、硫酸钙、甘露糖醇、山梨醇等；对于口服给药的液体制剂，口服药物成分可以与任何口服的、无毒的、药物可接受的惰性载体例如乙醇、甘油、水等结合。此外，当需要或必须时，也可向混合物中加入适合的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂。适合的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖类如葡萄糖或β-乳糖、玉米粉，天然和合成树胶例如***胶、黄蓍胶或藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等。这些剂型中所使用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、醋酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于，淀粉甲基纤维素、琼脂、皂土、黄原胶等。

凝血酶抑制剂给药适合的典型片芯包括但不限于以下各种标准组分：

              未包衣的片芯中赋形剂的建议组成范围

赋形剂	一般范围(％)	优选范围(％)	最优选范围(％)
				甘露糖醇微晶纤维素硬脂酸镁	10-9010-900.1-5.0	25-7525-750.1-2.5	30-6030-600.5-1.5

甘露糖醇、微晶纤维素和硬脂酸镁可以用其它的药物可接受的赋形剂代替。

凝血酶抑制剂也可与适合的抗血小板剂联合使用，包括但不仅限于血纤维蛋白原受体拮抗剂(例如用于治疗或防止不稳定心绞痛或用于防止血管成形术后的再闭塞和再狭窄)，抗凝血剂例如阿司匹林，溶血栓剂例如纤维蛋白溶酶原活化剂或链激酶，以在各种血管病治疗中获得协同效果，或降脂剂包括抗血胆甾醇过多剂(例如HMG CoA还原酶抑制剂如lovastatin,HMG CoA合成酶抑制剂等)来治疗或防止动脉粥样硬化。例如，患者患有冠状动脉疾病和患者正接受血管成形术治疗，联合使用纤维蛋白原受体拮抗剂和凝血酶抑制剂会有好处。同样，凝血酶抑制剂可以提高以组织纤维蛋白溶酶原活化剂为介导的溶栓再注作用的效率。也可在血栓形成后先给凝血酶抑制剂，然后再给组织纤维蛋白溶酶原活化剂或其它纤维蛋白溶酶原活化剂。

本发明凝血酶抑制剂与其它适合的抗血小板剂、抗凝血剂或溶血栓剂联合使用的典型剂量可以与单独使用凝血酶抑制剂而不使用其它抗血小板剂、抗凝血剂或溶血栓剂的剂量相同，或者在与抗血小板剂、抗凝血剂或溶血栓剂联合使用时减少凝血酶抑制剂的用量，这依靠患者的治疗需要。

下列合成方法可以用来制备本发明的化合物：

以下实施例只是发明人用来更好地解释本发明，而不是用来给本发明的使用范围或精神做限制。

             方法1(通过实施例Ⅰ举例说明)

在步骤A中起始物烯丙胺与乙醛和氰化物缩合得到氨基腈。在步骤B中通过Hoomaert法[J.Heterocyclic Chem.,20,919,(1983)]，用草酰氯处理氨基腈得到吡嗪酮。在步骤C中用四氧化钌将烯烃氧化断裂并将所得的醛用氧化剂例如铬酸转变成酸。在步骤D中，在对甲氧基苄胺存在下，3-位氯基被等当量的胺取代。剩余的氯在步骤E中被阮内镍还原除去。在步骤F中，通过用强酸例如TFA处理步骤E的产物，除去对甲氧基苄基。最后，在步骤G中，在乙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基乙酰胺存在下，该酸与适合的胺偶合得到最终产物(下面给出制备此胺的方法)。

形成本发明化合物的酰胺偶合反应(例如步骤G)可以通过碳化二亚胺法以试剂例如二环己基碳化二亚胺或1-乙基-(3-二甲基-氨基丙基)碳化二亚胺进行。形成酰胺或肽键的其它方法包括但不限于通过酰基氯、叠氮化物、混合酐或活性酯的合成路线。典型地，在液相中进行酰胺偶合反应，也可以以经典的固相合成法Merrifield技术代替液相合成法。添加和除去一个或多个保护基也是常用的方法。

方法的改进允许在相应的合成步骤中通过使用合适的试剂或合适的取代的起始化合物使主权利要求范围内存在不同的W、R³、X和A基团。例如在步骤A中的起始物醛可以有乙基、异丙基、环丙基、三氟甲基等侧链，以得到不同的R³。同样，在步骤D中通过使用适合的胺使可以存在不同的W基团。通过省略步骤E和通过在步骤B中使用试剂例如草酰溴使可以存在不同的X基团。在步骤G中选择适合的胺可得到不同的A。本方法明显的改变和改进可制得相似和明显不同的产物，这对熟悉本领域的技术人员来说是显而易见的。

制备乙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基乙酰胺的方法

该方法的改进允许在指定的合成步骤中使用适合的试剂或适合的取代的起始化合物使在主权利要求范围内存在不同的R⁴和R⁵基团。例如，在步骤F中选择适合的胺将获得不同的R¹⁰和R¹¹。本方法明显的改变和改进可制得相似和明显不同的产物，这对熟悉本领域的技术人员来说是显而易见的。步骤A:4-氯水杨醛肟

将羟胺盐酸盐(16.7g,0.24mol)和碳酸钠(12.7g,0.12mol)的水溶液(120ml)加到搅拌着的4-氯水杨醛(25.0g,0.16mol)的乙醇(160ml)溶液中，并将所得溶液回流加热。1小时后放冷反应物，加水(320ml)并通过过滤分离所得的晶型沉淀。以相似的方法收集第二批结晶并合并所得固体，干燥得到标题化合物：

¹H NMR(400Mz,CDCl₃)d6.92(d,J=8.8Hz,1H),7.15(d,J=2.6Hz,1H),7.23(dd,J=2.6和8.8Hz,1H),7.26(s,1H),8.16(s,1H),9.71(s,1H).步骤B:2-羟基-5-氯苄胺

在氢气(60psi)下，将在帕尔装置中的含浓硫酸(10ml)的4-氯水杨醛肟(10g,58.3mmol)和5％Rh/C(2.0g)的混合乙醇液(100ml)振摇24小时。加水(100ml)并通过硅藻土过滤该混合物。浓缩滤液直至溶液中析出结晶产物。过滤收集固体并将滤液进一步浓缩，加水得到第二批结晶，与第一次得到的结晶合并，干燥后得到标题化合物，硫酸盐：

¹H NMR(400Mz,CD₃OD)d4.07(s,2H),6.88(d,J=8.6Hz,1H),7.25(dd,J=2.6和8.6Hz,1H),7.31(d,J=2.6Hz,1H).步骤C:N-叔丁氧基羰基-2-羟基-5-氯苄胺

在室温下，将在DMF(10ml)中的2-羟基-5-氯苄胺(1.22g,4.77mmol，以二硫酸盐形式)、(BOC)₂O(1.56g,7.16mmol)和N-甲基吗啉(1.05ml,9.54mmol)混合液搅拌5小时。将反应物分配在水和乙酸乙酯中，用5％KHSO₄溶液(2次)、碳酸氢钠溶液和盐水洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得固体。粗产物在乙酸乙酯/己烷(1∶5,12ml)中重结晶得到标题化合物：

¹H NMR(400Mz,CDCl₃)d1.44(s,9H,t-Bu),4.17(d,J=6.8Hz,2H,CH2),5.22(brt,1H,NH),6.87(d,J=8.6Hz,1H,H-3),7.03(d,J=2.6Hz,1H,H-6),7.15(dd,J=2.6和8.6Hz,1H,H-4).步骤D：乙基-2-叔丁氧基羰基氨基甲基-4-氯苯氧基乙酯

将N-叔丁氧羰基-2-羟基-5-氯苄胺(730mg,2.83mmol)、Cs₂CO₃(923mg,2.83mmol)和溴乙酸乙酯(0.314ml,2.83mmol)在DMF(5ml)的混合溶液搅拌2小时。将粗反应混合物分配在乙酸乙酯和水中，用盐水洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得油状物，将其用在下一步骤。步骤E:2-叔丁氧基羰基氨基甲基-4-氯苯氧基乙酸

将步骤D的产物悬浮于1∶1∶1的甲醇/THF/水(9ml)中，加入水合氢氧化锂(126mg,3.0mmol)。16小时后真空除去挥发物并用水稀释该溶液，用乙酸乙酯洗涤溶液，加入足量的盐水分散乳液。用5％KHSO₄溶液酸化水层和用二氯甲烷萃取水层，然后干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得标题化合物，为固体：

¹H NMR(400Mz,CDCl₃)d1.44(s,9H,t-Bu),4.35(br s,2H,NCH₂),4.62(s,2H,OCH₂),5.04(br s,1H,NH),6.74(d,J=7.9Hz,1H,H-3),7.20(d,J=2.6Hz,1H,H-6),7.24(d不清楚，1H,H-4).步骤F：乙基-2-叔丁氧基羰基氨基甲基-4-氯苯氧基乙酰胺

将EDC盐酸盐(249mg,1.3mmol)加到在DMF(4ml)中的搅拌着的2-叔丁氧羰基氨基甲基-4-氯苯氧基乙酸(316mg,1.0mmol)、HOBT(176mg,1.3mmol)、乙胺盐酸盐(106mg,1.3mmol)和N-甲基吗啉(0.396ml,3.6mmol)的混合溶液中，搅拌该混合物16小时。将反应混合物分配在乙酸乙酯和5％KHSO₄溶液中，并用5％KHSO₄溶液、水、NaHCO₃溶液和盐水洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得固体(333mg)，将其用在下一步骤。步骤G：乙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基乙酰胺

将步骤F的产物溶于2∶1的二氯甲烷/TFA(3ml)中，15分钟后真空蒸发掉溶剂。将残余物溶于水中，并用二氯甲烷洗涤溶液(两次)。用饱和碳酸钠溶液碱化水层，并加NaCl至饱和。用乙酸乙酯萃取混合物，和干燥(Na₂SO₄)有机层和真空蒸发得到标题化合物，为晶状固体：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)d1.12(t,J=7.3Hz,3H,Me),1.54(s,9H,t-Bu),3.31(五重峰J=7.3Hz,2H,CH₂Me),3.90(s,2H,NCH₂),4.58(s,2H,OCH₂),6.80(d,J=8.3Hz,1H,H-3),7.19-7.23(m,2H,H-4,H-6),8.01(br s,1H,CONH).

            方法2(通过实施例Ⅲ举例说明)

制备本发明化合物的另一方法通过实施例Ⅱ举例说明。

在2-叔丁氧羰基氨基-5-氨基甲基-6-甲基吡啶(此胺的制备方法显示于下文)存在下，方法Ⅰ步骤C中的酸与适合的胺的偶合反应在此方法步骤A中进行。在步骤B中，在苯乙胺存在下，3-位氯基被适合的胺取代，在步骤C中除去BOC保护基得到最终产物。

方法2(通过实施例Ⅱ举例说明)

改进的方法允许在指定的合成步骤中使用适合的试剂或适合的取代的起始化合物使在主权利要求范围内存在不同的W、R³、X和A基团。本方法明显的改变和改进可制得相似和明显不同的产物，这对一般技术人员来说是显而易见的。

制备2-叔丁氧羰基氨基-5-氨基甲基-6-甲基吡啶的方法2-氨基-5-氰基-6-甲基吡啶的制备

将在DMF(25ml)中的6-氨基-3-溴-2-甲基吡啶(20.0g,0.107mol)(Maybridge)和氰化铜(Ⅰ)(11.0g,0.123mol)的混合物回流加热4小时。真空蒸发除去DMF并将残余物分配在乙酸乙酯和10％***溶液中。用10％***溶液和盐水洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得棕色固体。将其溶于小量的乙酸乙酯中并加入己烷使产物沉淀。过滤混合物得到标题化合物，为棕色粉末：¹H NMR(CDCl₃)d2.56(s,3H),4.97(br s,2H),6.33(d,J=8.6Hz,1H),7.54(d,J=8.6Hz,1H).2-叔丁氧羰基氨基-5-氰基-6-甲基吡啶的制备

将在二氯甲烷(200ml)中的2-氨基-5-氰基-6-甲基吡啶(10.0g,75.1mmol)、(BOC)₂O(1639g,75.1mmol)、三乙胺(11.5ml,82.6mmol)和DMAP(0.92g,7.5mmol)的混合物搅拌3小时。再加三乙胺(422ml)和(BOC)₂O(1.64g)，16小时后，用乙酸乙酯稀释反应混合物并用1M AcOH洗涤(3次)，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得到深棕色固体。粗产物通过快速柱色谱(10％乙酸乙酯/己烷)提纯得到标题化合物，为白色固体：¹H NMR(CDCl₃)d1.52(s,9H),2.62(s,3H),7.46(br s,1H),7.80(d,J=8.8Hz,1H),7.88(d,J=8.8Hz,1H).2-叔丁氧羰基氨基-5-氨基甲基-6-甲基吡啶的制备

在60psi压力下，将在帕尔装置中的2-叔丁氧羰基氨基-5-氰基-6-甲基吡啶(14.68g,62.9mmol)和10％Pd/C(1.5g)在冰醋酸(150ml)中的混合物振摇88小时。通过硅藻土过滤反应物并真空蒸发。残余物溶于水并用二氯甲烷洗涤(2次)该溶液，然后用碳酸钠碱化和用乙酸乙酯萃取(2次)反应物。合并乙酸乙酯层，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得固体。粗产物重结晶(乙酸乙酯/己烷)得到标题化合物：

¹H NMR(CDCl₃)d1.50(s,9H),2.43(s,3H),3.81(s,2H),7.23(br s,1H),7.57(d,J=8.3Hz,1H),7.70(d,J=8.3Hz,1H).

改进的方法允许在指定的合成步骤中使用适合的试剂或适合的取代的起始化合物使在主权利要求范围内存在不同Y¹和Y²基团。本方法明显的改变和改进可制得相似和明显不同的产物，这对一般技术人员来说是显而易见的。

           方法3(通过实施例Ⅴ举例说明)

在步骤A中，甘氨酸的酯(在此处为苄酯)与乙醛和氰化物缩合得到氨基腈。在步骤B中它与草酰氯反应得到吡嗪酮。在步骤C中，3-位氯基被适合的胺取代，此处是指苯乙胺。在步骤D中该酯被水解和在步骤E中氢解除去剩余的氯。在步骤F中此酸与适合的胺偶合，此处的胺是指2-氨基-5-氨基甲基-6-甲基吡啶(此胺的制备方法显示于下文)，得到最终产物。

2-氨基-5-氨基甲基-6-甲基吡啶二盐酸盐的制备

在60psi压力下，将在帕尔装置中的2-氨基-5-氰基-6-甲基吡啶(4.0g,30.0mmol)和10％Pd/C(3.08g)的乙醇溶液(80ml)、甲醇(30ml)、浓盐酸(6ml)和水(10ml)的混合物振摇25小时。通过硅藻土过滤反应物，用1∶1的乙醇/甲醇漂洗并真空蒸发得固体，用5∶1的乙酸乙酯/乙醇研磨，得到标题化合物(5.95g,94％):¹H NMR(CD₃OD):d2.58(s,3H),4.12(s,2H),6.92(d,J=9.2Hz,1H),7.93(d,J=9.2Hz,1H).

本方法明显的改变和改进可制得相似和明显不同的产物，这对一般技术人员来说是显而易见的。

                   方法4

方法3步骤E的产物与适合的被保护的胺例如2-叔丁氧羰基氨基-5-氨基甲基-6-甲基吡啶偶合，然后再去保护得到最终产物。本方法明显的改变和改进可制得相似和明显不同的产物，这对一般技术人员来说是显而易见的。

         方法5(通过实施例LⅩⅩⅫ举例说明)

在步骤A中起始物烯丙胺与乙醛和氰化物缩合得到氨基腈。在步骤B中氨基腈与草酰氯按Hoornaert法[J.Heterocyclic Chem.,20,919,(1983)]反应制得吡嗪酮。在步骤C中，用四氧化钌将此烯烃氧化断裂并将所得的醛用氧化剂例如铬酸转变成酸。在步骤D中，3-位氯基被适合的胺代替，在此处是指苯乙胺。剩余的氯在步骤E中被阮内镍还原除去。在步骤F中，此酸与适合的胺偶合，此处是指3-氨基甲基-6-BOC-氨基-2-甲基吡啶。最后，在步骤G中，用强酸例如HCl气除去BOC基团得到最终产物。

方法5(续)

方法5(续)

形成本发明化合物的酰胺偶合反应(例如步骤F)可以通过碳化二亚胺法以试剂例如二环己基碳化二亚胺或1-乙基-(3-二甲基-氨基丙基)碳化二亚胺进行。形成酰胺或肽键的其它方法包括但不限于通过酰基氯、叠氮化物、混合酐或活性酯进行的合成路线。典型地，在液相中进行酰胺偶合反应，也可以以经典的固相合成法Merrifield技术代替液相合成法。添加和除去一个或多个保护基也是常用的方法。

改进的方法允许在指定的合成步骤中使用适合的试剂或适合的取代的起始化合物使主权利要求范围内存在不同的W、R³、X和A基团。例如在步骤A中的起始物醛可以有乙基、异丙基、环丙基、三氟甲基等侧链，得到不同的R³。同样，在步骤D中通过使用适合的胺使可以存在不同的W基团。通过省略步骤E和通过在步骤B中使用试剂例如草酰溴使可以存在不同的X基团。在步骤F中选择适合的胺可得到不同的A。因此，正如实施例Ⅵ举例说明的，步骤E的产物与2-羟基苄胺衍生物偶合，在此处是指乙基-(2-氨基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺，得到最终产物。本方法明显的改变和改进可制得相似和明显不同的产物，这对一般技术人员来说是显而易见的。

以下实施例只是发明人用来更好地解释本发明，而不是用来给本发明的范围或精神做限制。

                          实施例Ⅰ3-氨基-6-甲基-1-[乙基-(2-甲基-甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰氨基]-2-吡嗪酮的制备

步骤A:α-(烯丙氨基)-丙腈盐酸盐

在0℃下，将浓盐酸(20ml,0.24mol)加到烯丙胺(36ml,0.48mol)的水(100ml)和乙醇(60ml)溶液中。然后加入***(15g,0.23mol)和乙醛(11.2ml,0.20mol)，回流加热此混合物。15小时后真空除去挥发物并用NaCl饱和残余溶液，用二氯甲烷萃取(三次)。合并萃取液，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得到油状物，将其溶于1M HCl(200ml)中。真空蒸发该溶液，与1∶1的甲苯/甲醇共沸得到固体，在乙酸乙酯(200ml)中回流加热，放冷，过滤和干燥得到标题化合物，为盐酸盐：

        ¹H NMR(400MHz,CD₃OD)d1.72(d,J=7.0Hz,3H,CH₃),3.78-3.90(m,2H,CH₂),4.63(q,J=7.0Hz,a-CH),5.56-5.66(m,2H,CHCH₂),5.91-6.02(m,1H,CHCH₂).步骤B:1-烯丙基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮

将搅拌着的草酰氯(30.5ml,0.35mol)和α-(烯丙基氨基)-丙腈盐酸盐(10.26g,70mmol)在邻二氯苯的混合物(100ml)加热至100℃15小时。真空蒸发溶剂和通过硅胶快速柱色谱(30％乙酸乙酯正己烷为流动相)提纯残余的黑色油状物，得到标题化合物，为褐色晶状固体：

¹H NMR(400Mz,CDCl₃)d2.48(s,3H,CH₃),4.75(m,2H,NCH₂),5.18(m,1H,CHCH_AH_B),5.33(m,1H,CHCH_AH_B),5.85-5.92(m,1H,CHCH_AH_B).步骤C:3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮

搅拌下，将三氯化钌水合物(114mg,0.547mmol)加到在水(75ml)、乙腈(50ml)和四氯化碳(50ml)溶液中的1-烯丙基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮(5.45g,24.88mmol)和高碘酸钠(21.82g,0.102mol)混合物中。3小时后，用二氯甲烷萃取反应混合物(4次)，合并萃取液，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得到浆状物。1H NMR(CDCl₃)分析显示其为1∶1的酸和醛的混合物。将粗混合物溶于丙酮(50ml)并加Jones试剂(2.7M)直至反应物保持橙黄色。然后用乙酸乙酯萃取反应物，然后用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得标题化合物，为褐色固体：¹H NMR(400Mz,DMSO)d2.41(s,3H,Me),4.86(s,2H,CH₂)。步骤D:3-(4-甲氧基苄氨基)-5-氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮

将4-甲氧基苄胺(0.83ml,6.33mmol)加到搅拌着的3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮(0.50g,2.11mmol)的二噁烷溶液(6ml)中，将所得混合物温热至60℃。16小时后，将反应混合物分配在氯仿和10％柠檬酸溶液中和干燥有机层(Na₂SO₄)和真空蒸发。通过快速柱色谱(2％甲醇/氯仿/2％乙酸为流动相)提纯粗产物，用甲苯/甲醇共沸干燥后得到标题化合物，为白色固体：¹H NMR(300Mz,CD₃OD)d2.27(s,3H,CCH₃),3.76(s,3H,OCH₃),4.46(s,2H,CH₂),4.87(s,2H,CH₂),6.85(d,J=8.8Hz,1H,aryl H′s),7.27(d,J=8.8Hz,1H,aryl H′s).步骤E:3-(4-甲氧基苄氨基)-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮

将阮内镍合金(2g)加到搅拌着的3-(4-甲氧基苄氨基)-5-氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮(448mg,1.33mmol)的1∶1的甲醇/1M NaOH溶液(50ml)中。2小时后，通过硅藻土过滤反应混合物，用1∶1甲醇/水洗涤和真空蒸发滤液，得到白色固体。通过制备性HPLC(C18，水/乙腈/0.1％TFA梯度洗脱)除去无机盐，得到标题化合物的TFA盐，为泡沫体：¹H NMR(300Mz,CDCl₃)d2.15(s,3H,CCH₃),3.81(s,3H,OCH₃),4.63(s,4H,2xCH₂),6.57(s,1H，吡嗪酮H),6.91(d,J=8.7Hz,1H,芳基H′s),7.30(d,J=8.7Hz,1H芳基H′s).步骤F:3-氨基-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮

将搅拌着的3-(4-甲氧基苄氨基)-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮(387mg,0.927mmol)的TFA溶液(8ml)回流加热6小时。用二氯甲烷和乙酸乙酯共沸真空蒸发反应物。向粗产物中加甲醇并过滤和干燥所得固体，得到标题化合物的TFA盐：¹H NMR(400Mz,CD₃OD)d2.21(s,3H,CH₃),4.81(s,2H,CH₂),6.56(s,1H，吡嗪酮H).步骤G:3-氨基-6-甲基-1-[乙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4氯苯氧基)-乙酰氨基]-2-吡嗪酮

将EDC盐酸盐(67mg,0.35mmol)加到在DMF(1ml)中的搅拌着的3-氨基-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮(80mg,0.27mmol)、HOBT(47mg,0.35mmol)、乙基-(2-氨基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺(85mg,0.35mmol)和N-甲基吗啉(0.11ml,0.97mmol)混合物中，搅拌此混合物16小时。向反应物中加水，过滤收集沉淀的固体并真空干燥。将粗产物悬浮于乙酸乙酯中，然后回流加热，放冷和过滤，干燥后得到标题化合物，为白色晶状固体，熔点大于200℃：¹H NMR(300Mz,DMSO)d0.97(t,J=7.2Hz,3H,CH₂CH₃),2.02(s,3H,CH₃),3.09(五重峰J=6.8Hz,2H,CH₂CH₃),4.37(d,J=5.6Hz,2H,CONHCH₂),4.47(s,2H,CH₂CO),4.63(s,2H,CH₂CO),6.30(br s,2H,NH₂),6.51(s,1H，吡嗪酮H-5),6.94(d,J=9.3Hz,1H，苯氧基H-6),7.28(m,2H剩余部分),7.98(brt,1H,NH),8.67(brt,1H,NH)；MS(FAB)408(M+1)⁺.

                         实施例Ⅱ3-氨基-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

通过使用实施例1，步骤G的方法，由3-氨基-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2-氨基-5-氨基甲基-6-甲基吡啶二盐酸盐制备标题化合物的盐酸盐，熔点大于200℃:MS(FAB)303(M+1)⁺。

                             实施例Ⅲ3-(2-苯乙基氨基)-5-氯-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

步骤A:3,5-二氯-6-甲基-1-(2-叔丁氧羰基氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮

将EDC盐酸盐(249mg,1.3mmol)加到在DMF(4ml)中的搅拌着的3,5-二氯-6-甲基-1-羧基甲基吡嗪酮(237mg,1.0mmol)、HOBT(176mg,1.3mmol)、5-氨基甲基-2-叔丁氧基羰基氨基-6-甲基吡啶(237mg,1.0mmol)和N-甲基吗啉(0.25ml,2.3mmol)混合物中，搅拌此混合物2小时。用乙酸乙酯稀释反应物和用10％的宁檬酸溶液、水、碳酸氢钠溶液和盐水洗涤反应物，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得到标题化合物，为泡沫体：¹H NMR(400Mz,CDCl₃)d1.51(s,9H,t-Bu),2.39(s,3H,CH₃),2.59(s,3H,CH₃),4.37(d,J=5.5Hz,NHCH₂),4.71(s,2H,CH₂CO),6.76(brt,1H,NHCH₂),7.14(s,1H,NHBOC),7.44(d,J=8.3Hz，吡啶H-3),7.66(d,J=8.3 Hz，吡啶H-3).步骤B:3-(2-苯乙基氨基)-5-氯-6-甲基-1-(2-叔丁氧基羰基氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮

将苯乙基胺(0.10ml,0.80mmol)加到搅拌着的3,5-二氯-6-甲基-1-(2-叔丁氧基羰基氨基-6-甲基-5-亚甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮(182mg,0.40mmol)的二噁烷溶液(0.8ml)中，将所得溶液温热至60℃。16小时后，将反应混合物分配在水和氯仿中。干燥(Na₂SO₄)有机层和真空蒸发。通过快速硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷梯度洗脱，40-75％的乙酸乙酯)提纯得到标题化合物。¹H NMR(300Mz,CDCl₃)d1.51(s,9H,t-Bu),2.36(s,3H,CH₃),2.41(s,3H,CH₃),2.92(t,J=7.1Hz,PhCH₂),3.66(q,J=7.1Hz,PhCH₂CH₂),4.35(d,J=5.4Hz,2H,CONHCH₂),4.63(s,2H,CH₂CO),6.05(brt,1H,NH),6.54(brt,1H,NH),7.14(s,1H,NHBOC),7.21-7.31(m,5H,Ph),7.43(d,J=8.3 Hz,1H，吡啶H-3),7.69(d,J=8.3 Hz,1H，吡啶H-4).步骤C:3-(2-苯乙基氨基)-5-氯-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮

在0℃下，向3-(2-苯乙基氨基)-5-氯-6-甲基-1-(2-叔丁氧基羰基氨基-6-甲基-5-亚甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮(83mg,0.153mmol)的乙酸乙酯溶液(10ml)中通HCl气10分钟。将反应物温热至室温，1小时后，用氩将溶液脱气得到白色沉淀，过滤收集沉淀并干燥得到标题化合物的盐酸盐。¹H NMR(400Mz,CD₃OD)d2.26(s,3H,CH₃),2.50(s,3H,CH₃),2.91(t,J=7.0Hz,PhCH₂),3.60(t,J=7.0Hz,PhCH₂CH₂),4.29(s,2H,CONHCH₂),4.74(s,2H,CH₂CO),6.82(d,J=9.0Hz,1H，吡啶H-3),7.18-7.29(m,5H,Ph),7.83(d,J=9.0Hz,1H，吡啶H-4)；MS(FAB)441(M+1)⁺.

                            实施例Ⅳ3-苄氨基-5-氯-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

通过使用实施例Ⅲ，步骤B和C的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-(叔丁氧基羰基氨基-6-甲基-5-亚甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮和苄胺制备标题化合物的TFA盐：MS(FAB)428(M+1)⁺。

                            实施例Ⅴ3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

步骤A:N-(1-氰乙基)甘氨酸苄酯盐酸盐

将TMSCN(18.8ml,141mmol)小心(放热反应)加到搅拌着的甘氨酸苄酯游离碱(23.3g,141mmol-分配在乙酸乙酯和盐水中的盐酸盐，用饱和的Na₂CO₃溶液碱化)和乙醛(7.88ml,141,mmol)的二氯甲烷溶液(50ml)中。4小时后，真空除去挥发物和将残余物溶于乙酸乙酯，用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得到油状物。将此油状物再溶于乙酸乙酯中，加入9.9MHCl的乙醇液(15.25ml,151mmol)，得到晶形沉淀，过滤分离，用乙酸乙酯和***洗涤得到标题化合物：¹H NMR(CD₃OD):d1.70(d,J=7.0Hz,3H,CH₃),4.16(d,J=16.8Hz,1H,CH_AH_B),4.21(d,J=16.8Hz,1H,CH_AH_B),4.64(q,J=7.0Hz,a-CH),5.31(s,2H,CH₂O),7.35-7.44(m,5H,Ph).步骤B:1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮

将搅拌着的草酰氯(40.4ml,463mmol)和N-(1-氰乙基)甘氨酸苄酯盐酸盐(29.51g,116mmol)的1,2-二氯苯混合液(110ml)加热至100℃15小时。真空蒸发挥发物并用快速硅胶柱色谱(己烷，然后用30％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱)提纯残余物得固体，在2∶5乙酸乙酯/己烷(140ml)中回流加热，放冷，过滤收集得到标题化合物，为浅绿色晶状固体：¹H NMR(CDCl₃):d2.35(s,3H,CH₃),4.88(s,2H,CH₂),5.24(s,2H,CH₂),7.38(m,5H,Ph).步骤C:3-(2-苯乙基氨基)-5-氯-6-甲基-1-(苄氧基羰基甲基)-吡嗪酮

将苯乙胺(15.07ml,120mmol)加到在乙酸乙酯(80ml)中的搅拌着的1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮(13.09g,40mmol)混合物中，并将所得混合物在氩气氛下回流加热。2小时后，放冷反应，用氯仿(500ml)稀释并用5％柠檬酸溶液和盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得标题化合物，为晶状固体：¹H NMR(CDCl₃):d2.21(s,3H,CH₃),2.93(t,J=7.1Hz,2H,PhCH₂),3.67(q,J=6.7Hz,2H,CH₂NH),4.79(s,2H,CH₂),5.21(s,2H,CH₂),6.10(brt,1H,NH),7.20-7.39(m,10H,2Ph).步骤D:3-(2-苯乙基氨基)-5-氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮

在0℃下，将LiOH.H₂O(3.36g,80mmol)加到在3∶3∶1的THF/MeOH/H₂O(280ml)中的步骤C产物的悬浮液中，并将此混合物温热至室温。16小时后真空蒸发除去挥发物和用水(500ml)稀释此溶液并用乙酸乙酯洗涤。用NaCl饱和水层并用20％KHSO₄溶液(20ml)酸化，得到沉淀，用1∶1乙酸乙酯/THF(400ml)萃取。有机相干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得到固体，将其在1∶1乙酸乙酯/己烷中回流加热，放冷和过滤收集，得到标题化合物，为晶状固体：¹H NMR(DMSO-d₆):d2.21(s,3H,Me),2.86(t,J=7.4Hz,2H,PhCH₂),3.47(dt,J=5.9和7.4Hz,2H,CH₂NH),4.72(s,2H,CH₂CO₂),7.18-7.31(m,5H,Ph),7.46(t,J=5.9Hz,1H,NH),13.30(brs,1H,COOH).步骤E:3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮

将3-(2-苯乙基氨基)-5-氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮(11.66g,36.2mmol)加到氢氧化钾(86％重量，6.10g,93.5mmol)水溶液(400ml)中。所得溶液用氩气脱气后，加入10％Pd/C(3.48g)，在鼓氢气下搅拌此混合物。16小时后，此混合物用氮气脱气，再加入10％Pd/C(3.0g)，有在鼓氢气下再搅拌此混合物7小时，通过硅藻土过滤，用水(200ml)洗涤滤饼。用KHSO₄(7.8g,57.3mmol)水溶液(35ml)酸化滤液和过滤收集所得沉淀，水(200ml)洗，真空干燥16小时得到标题化合物，为晶状固体：¹H NMR(DMSO-d₆):d2.07(d,J=0.7Hz,3H,Me),2.84(t,J=7.4Hz,2H,PhCH₂),3.47(dt,J=5.9和7.4Hz,2H,CH₂NH),4.66(s,2H,CH₂CO₂),6.67(s,1H，吡嗪酮H-5),6.88(brt,J=5.9Hz,1H,NH),7.17-7.32(m,5H,Ph).步骤F:3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮

将EDC.HCl(0.962g,5.02mmol)加到在无水DMF(10ml)中的搅拌着的3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮(1.20g,4.18mmol)、2-氨基-5-氨基甲基-6-甲基吡啶二盐酸盐(0.874g,4.16mmol)、HOBT.H₂O(0.678g,5.02mmol)和N-甲基吗啉(2.30ml,20.9mmol)的混合液中。16小时后，真空蒸发挥发物，将残余物分配在乙酸乙酯和1M HCl溶液中。用饱和碳酸钠溶液调节水层的pH为10，过滤收集沉淀，用水和乙醇洗涤得到标题化合物，为游离碱。

此游离碱被用作生成3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐(步骤G1)、3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐A型一水合物(步骤G2，也被称作“多晶型结晶物A型一水合物”)或3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐B型一水合物(步骤G3，也被称作“多晶型结晶物B型一水合物”)的起始物。

一般来说，3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐A型一水合物的生产包括步骤a)将3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮溶于乙酸和加盐酸水溶液；b)除去所得固相；和c)除去溶剂。本方法的一方面，在步骤a)中加盐酸水溶液的量是乙酸中的最终水含量，为1-5％重量。

一般来说，3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐B型一水合物的生产由包括a)将3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮溶于盐酸；b)除去所得固相；和c)除去溶剂。步骤G1  3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐

在0℃下，将3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮游离碱悬浮于乙醇(20ml)中，并在搅拌下加入乙醇HCl(9.9M,8.36mmol)。该二盐酸盐从此混合物中快速结晶，30分钟后过滤收集结晶，用乙醇洗涤，在0.5mmHg下干燥16小时得到标题化合物；¹H NMR(DMSO-d₆):d2.10(s,3H,CH₃),2.45(s,3H,CH₃),2.91(t,J=7.6Hz,PhCH₂),3.63(br q,CH₂NH),4.17(d,J=5.5Hz,2H,CONHCH₂),4.62(s,2H,CH₂CO),6.68(s,1H，吡嗪酮H-5),6.81(d,J=9.0Hz,1H，吡啶H-3),7.21-7.31(m,5H,Ph),7.76(暗光d,1H，吡啶H-4),7.77(br s,2H,NH₂),8.81(brt,J=5.5Hz,1H,CONH).步骤G2  3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐A型一水合物

将3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-亚甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮游离碱(680g)溶于6.0升乙酸中，搅拌下将此混合物温热至60℃得溶液。过滤此混合物和在28℃下，向放冷的溶液中加7.6升乙酸和HCl水溶液(734ml,5N HCl和147ml水)冲洗滤液。此混合物被加晶种并温热至73℃，得到细晶种垫，然后经几小时放冷至20℃和过滤，用乙酸洗涤滤饼，然后用190标准乙醇洗涤，在60℃用氮气清洗的真空干燥箱中干燥，得到标题化合物。

A型化合物以其差示扫描量热曲线标记其特征，在一开口杯中，在5℃/分钟加热速率，和在5℃下向水中通氮气，由外推初温为约102℃，峰温为约112℃和缔合热为约115J/gm显示为吸热过程，接着由外推初温为约171℃，峰温为约194℃和缔合热为约83J/gm显示为吸热过程。低温吸热是由于水合水的损失，高温吸热是由于残余物水相分解熔化。x射线粉末衍射图的特征在于，光谱d-间距为13.06、12.16、7.40、5.71、4.92、4.48、4.40、3.63、3.07、2.98、2.86和2.62。步骤G3  3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐B型一水合物

将8.12升2N盐酸加入一个100升的容器中，然后在室温下加1.62升DI水。向此容器中加3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-亚甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮游离碱(3.30kg)并加热至82℃。陈化15分钟后，加入Solka flok(24g)并将所得溶液通过连续的管线滤器(20-50微米)抽滤。用3.25升DI水漂洗原始容器(室温)，合并母液并加热至72℃。将此溶液放冷至53℃，加晶种，经3小时连续冷却至25℃。30分钟内，向此浆液中滴加浓盐酸(1.30升)。将此浆液放冷至20℃并真空抽滤分离固体。用6.48升1N HCl洗涤滤饼。然后用乙醇(190标准；3×6.48升)洗涤。室温下真空干燥湿滤饼得到标题化合物。

B型化合物以差示扫描量热曲线标记其特征，在一开口杯中，在5℃/分钟加热速率和在5℃下向水中通氮气，由外推初温为约120℃，峰温为约132℃和缔合热为约123J/gm显示为吸热反应，接着由外推初温为约160℃，峰温为约191℃和缔合热为约78J/gm显示为吸热过程。低温吸热是由于水合水的损失，高温吸热是由于残余物水相分解熔化。x射线粉末衍射图的特征在于，光谱d-间距为x射线粉末衍射图的d-间距为12.98,11.91,7.24,5.98,4.90,4.46,4.23,3.99,3.75,3.61,3.41,2.94,2.85and2.61.

                           实施例Ⅵ3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1[乙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮

将EDC盐酸盐(56mg,0.29mmol)加到在DMF(1ml)中的搅拌着的3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮(91mg,0.23mmol)、HOBT(40mg,0.29mmol)、乙基-(2-氨基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺盐酸盐(82mg,0.29mmol)和N-甲基吗啉(0.13ml,1.17mmol)混合物中，将此混合物搅拌16小时。将反应物分配在乙酸乙酯和水中，加入足量的盐水分散此乳液。收集混沌的有机层并加入氯仿和甲醇溶解固体，干燥此溶液和蒸发得固体。将粗产物悬浮于乙酸乙酯中并过滤，水洗，接着乙酸乙酯洗，干燥后得到标题化合物，为白色晶状固体，熔点大于200℃：¹H NMR(400Mz,DMSO)d:0.97(t,J=7.2Hz,3H,CH₂CH₃),2.03(s,3H,CH₃),2.83(t,J=7.4Hz,2H,PhCH₂),3.09(五重峰J=6.7Hz,2H,CH₂CH₃),3.47(q,J=6.9Hz,2H,PhCH₂CH₂),4.37(d,J=5.7Hz,2H,CONHCH₂),4.64(s,2H,CH₂CO),6.63(s,1H，吡嗪酮H-5),6.77(brt,1H,NH),6.94(d,J=8.4Hz,1H，苯氧基H-6),7.16-7.30(m,7H，剩余部分)，7.98(brt,1H,NH),8.67(brt,1H,NH)MS(FAB)512(M+1)⁺.

                          实施例Ⅶ[R]-3-(1-苯基-2-丙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和[R]-1-苯基-2-丙胺制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)421(M+1)⁺。

                         实施例Ⅷ[S]3-(1-苯基-2-丙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和[S]-1-苯基-2-丙胺制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)421(M+1)⁺。

                             实施例Ⅸ3-(1-苯基-2-甲基-2-丙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和1-苯基-2-甲基-2-丙胺制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)435(M+1)⁺。

                            实施例Ⅹ3-(2-甲基-2-丙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-甲基-2-丙胺制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)358(M+1)⁺。

                           实施例Ⅺ3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-4,6-二甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-甲基羧基吡嗪酮和2-氨基-5-氨基甲基-4,6二甲基吡啶二盐酸盐制备标题化合物的盐酸盐，熔点大于200℃:MS(FAB)421(M+1)⁺。

                           实施例Ⅻ[R,S]3-(2-苯基-1-丙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和外消旋的-2-苯基-1-丙胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点大于200℃:MS(FAB)421(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅢ3-(2-丙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-丙胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点大于200℃:MS(FAB)345(M+1)⁺。

                           实施例Ⅳ3-(2-苯氧基乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-苯氧基乙胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点大于200℃:MS(FAB)423(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅤ3-[2-(4-羟基苯基)-乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-(4-羟基苯基)-乙胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点195-199℃:MS(FAB)423(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅥ3-环丙基氨基-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和环丙胺制备标题化合物的TFA盐：MS(FAB)343(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅦ3-环丙基甲基氨基-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和环丙基甲胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点大于200℃:MS(FAB)357(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅧ[S]3-(2-羟基-2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和[S]-2-羟基苯胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点大于200℃:MS(FAB)423(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅨ[R]3-(2-羟基-2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和[R]-2-羟基苯乙胺制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)423(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩ3-(2-环丙基乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰氨基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备步骤A:4-苯二酰亚氨基-1-丁烯

在100℃搅拌在DMF(10ml)中的4-溴-1-丁烯(1.01ml,10.0mmol)和苯邻二甲酰亚胺钾(1.85g,10.0mmol)的混合物3小时。将所得混合物放冷并分配在乙酸乙酯和水中。用水和盐水洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得到晶状固体。通过快速硅胶柱色谱(20％乙酸乙酯/己烷洗脱)提纯粗产物，得到标题化合物，为晶状固体：¹H NMR(300Mz,CDCl₃)d2.45(q,J=7.0Hz,2H),3.78(t,J=7.0Hz,2H),5.04(m,2H),5.76(m,1H),7.71(m,2H),7.84(m,2H).步骤B:2-苯二酰亚氨基乙基环丙烷

用Suda法(合成方法，1981,714)，将4-苯二酰亚氨基-1-丁烯环丙烷化得到标题化合物，为晶状固体：¹H NMR(400Mz,CDCl₃)d0.05(m,2H),0.42(m,2H),0.69(m,1H),1.58(q,J=7.1Hz,2H),3.77(t,J=7.1Hz,2H),7.71(m,2H),7.84(n,2H).步骤C:2-环丙基乙胺

将在乙醇(10ml)中的2-苯二酰亚氨基乙基环丙烷(1.40g,6.50mmol)和水合肼(0.32ml,6,50mmol)的混合物回流搅拌1小时。将此混合物放冷和加入浓盐酸(0.54ml,6.50mmol)，得浓稠沉淀。真空蒸发此混合物并将残余物悬浮于1MHCl溶液(10ml)中，温热至50℃5分钟，放冷和过滤。用二氯甲烷洗涤滤液，真空蒸发，与甲苯/乙醇共沸得到标题化合物的盐酸盐，为晶状固体：¹H NMR(400Mz,CD₃OD)d0.15(m,2H),0.54(m,2H),0.74(m,1H),1.55(q,J=7.3Hz,2H),3.01(t,J=7.3Hz,2H).步骤D:3-(2-环丙基乙氨基)-5-氯-6-甲基-1-(苄氧基羰基甲基)-吡嗪酮

在80℃下，将在甲苯(1ml)和水(0.5ml)中的2-环丙基乙胺盐酸盐(73mg,0.60mmol)、1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮(164mg,0.50mmol)和碳酸氢钠(101mg,1.20mmol)的混合物搅拌3小时。放冷反应物并将其分配在二氯甲烷和10％柠檬酸溶液中。干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发有机层得到标题化合物，为晶状固体：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):d0.10(m,2H),0.47(m,2H),0.74(m,1H),1.53(q,J=7.0Hz,2H),2.21(s,3H,CH₃),3.49(q,J=6.6Hz,2H),4.80(s,2H),5.22(s,2H),6.18(brt,1H),7.33-7.40(m,5H).步骤E:3-(2-环丙基乙氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤D-F方法，由3-(2-环丙基乙基氨基)-5-氯-6-甲基-1-(苄氧基羰基甲基)-吡嗪酮制备标题化合物，熔点大于200℃:MS(FAB)371(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅪ3-(2-苯乙基氨基)-6-乙基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ的方法，由丙醛制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)421(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅫ3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2-氨基-5-氨基甲基吡啶制备标题化合物的盐酸盐，熔点大于220℃:MS(FAB)393(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅢ3-(5-二氢化茚基甲基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和5-二氢化茚基甲胺制备标题化合物的TFA盐：MS(FAB)434(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅣ3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-[乙基(2-甲基甲酰胺基甲基苯氧基)-乙酰胺基]-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅵ的方法，由3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和乙基-2-氨基甲基苯氧基乙酰胺制备标题化合物：MS(FAB)478(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅤ3-(4-甲氧基苄氨基)-6-甲基-1-[乙基(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅵ的方法，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和4-甲氧基苄胺制备标题化合物：m.p．大于200℃,MS(FAB)528(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅥ3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(甲基甲酰胺基甲基-2-羟基-5-氯苯基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅵ的方法，由3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-羧基甲基吡嗪酮和2-氨基甲基-4-氯苯酚制备标题化合物：MS(FAB)427(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅦ3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-[乙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)乙酰基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅵ的方法，由3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-羧基甲基吡嗪酮和2-氨甲基甲基-4-氯苯氧基乙酸乙酯制备标题化合物：MS(FAB)513(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅧ3-(2-甲基-2-丙基氨基)-6-甲基-1-[乙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)乙酰胺基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅵ的方法，由3-(2-甲基-2-丙基氨基)-6-甲基-1-羧基甲基吡嗪酮制备标题化合物的TFA盐，熔点64-70℃:MS(FAB)464(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅨ外消旋反式3-(2-苯基环己基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-E的方法，接着用方法4，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和外消旋反式2-苯基环己胺制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)461(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅩ外消旋顺式3-(2-苯基环己基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-E的方法，接着用方法4，由1-苄氧羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和外消旋顺式2-苯基环己胺制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)461(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅪ3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-4-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-甲基羧基吡嗪酮和2-氨基-4-氨基甲基吡啶制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)393(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅫ3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-3-甲基-4-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

步骤A:2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基-吡啶-N-氧化物

0℃下，向2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基吡啶(1.0g,4.8mmol)的二氯甲烷溶液(25ml)中加5％NaHCO₃(25ml)。经20分钟向快速搅拌的混合物中分五次加入3-氯过氧苯甲酸(1.73g,5mmol)。允许在冰浴中过夜，用10％Na₂SO₃骤停反应混合物。搅拌5分钟后，用二氯甲烷萃取水层，Na₂SO₄干燥，用活性炭处理和除去溶剂，得到油状物，用50g细硅胶色谱(98∶2至96∶4氯仿-甲醇洗脱)提纯得到标题化合物，为灰白色固体：¹H NMR(CDCl₃)δ8.23(s,1H),8.12(d,1H,6.6Hz),7.15(d,1H,6.8Hz),6.98(t,1H,6.3Hz),2.36(s,3H),1.52(s,9H).步骤B:2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基-甲氧基吡啶鎓硫酸甲酯

在氩气下，向搅拌着的2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基吡啶-N-氧化物(620mg,0.29mmol)的二氯甲烷溶液(8ml)中加硫酸二甲酯(262μ1,0.3mmol)。在小流量的氩气下蒸发二氯甲烷过夜，得到标题化合物，为浅褐色固体：¹H NMR(DMSO-d₆)δ10.8(s,1H),9.32(d,1H,6.6 Hz),8.50(d,1H,7.8Hz),7.98(t,1H,7.1Hz),4.28(s,3H),3.37(s,3H),),2.41(s,3H),1.49(s,9H)步骤C:2-叔丁氧基羰基氨基-4-氰基-3-甲基吡啶

将上步产物与***(651mg,10mmol)在50℃水(4.5ml)中加热反应过夜。用水和10％碳酸钠稀释反应物，用氯仿萃取三次，合并有机层，用盐水洗涤，Na₂SO₄干燥和除去溶剂，得到深色油状物，将其溶于氯仿并通过20g细硅胶柱(1∶4-1∶3乙酸乙酯-己烷洗脱)提纯得到标题化合物，为无色固体：¹H NMR(CDCl₃)7.64(d,1H,7.7Hz),7.44(d,1H,7.7Hz),6.80(s,1H),2.38(s,3H),1.52(s,9H).步骤D:4-氨基甲基-2叔丁氧基羰基氨基-3-甲基吡啶

在55psi压力下的帕尔装置中，用10％Pd-C(75mg)催化氢化2-叔丁氧基羰基氨基-4-氰基-3-甲基吡啶(175mg,0.75mmol)和乙酸(88μl,1.5mmol)的甲醇(10ml)溶液过夜。过滤除去催化剂，减压浓缩，将残余物分配在氯仿和10％碳酸钠中。用氯仿萃取水层，合并有机层，Na₂SO₄干燥和浓缩，得到150mg标题化合物，为无色油状物：

       ¹H NMR(CDCl₃)δ7.48(d,1H,7.7Hz),7.02(d,1H,7.7Hz),6.69(s,1H),3.88(s,2H),2.28(s,3H),1.51(s,9H).步骤E:3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-3-甲基-4-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮

使用方法4的方法，由3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-羧基甲基吡嗪酮和4-氨基甲基-2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基吡啶制备标题化合物的TFA盐：MS(FAB)407(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅩⅢ3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和F的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧基甲基吡嗪酮和2-(2-吡啶基乙基)胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点209.5-212℃:MS(FAB)408(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅩⅣ3-(1-戊氨基)-5-氯-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧基甲基吡嗪酮和戊胺制备标题化合物：MS(FAB)407(M+1)⁺。

                           实施例ⅩⅩⅩⅤ3-[2-(4-吗啉代)乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和方法4的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2-(4-吗啉代乙基)胺制备标题化合物的盐酸盐：

   分析     C20H29N7O3·3.7HCl·3.05H₂O

 计算值C39.69H6.46N16.20

 实测值C39.69H6.46N15.95

                           实施例ⅩⅩⅩⅥ3-[2(S)-甲基-1-丁基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和F的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2-(S)-甲基-1-丁胺制备标题化合物，熔点188.5-193.5℃。

                           实施例ⅩⅩⅩⅦ3-(1-戊氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和F的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和1-戊胺制备标题化合物，熔点115-118℃。

                           实施例ⅩⅩⅩⅧ3-(2,2-二苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和方法4的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2,2-二苯基乙胺制备标题化合物的盐酸盐：

   分析   C28H30N6O2·2.0HCl·0.50H₂O

计算值C59.56H5.89N14.89

实测值C59.53H5.72N14.59

                           实施例ⅩⅩⅩⅨ3-环己基氨基-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和环己胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点221-227℃。

                           实施例ⅩL3-(2-二氢化茚基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和方法4的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2-氨基二氢化茚制备标题化合物的盐酸盐：

分析   C23H26N6O2·2.0HCl·1.0H₂O·0.35EtOAc计算值C54.25H6.12N15.56实测值C54.20H5.85N15.54

                           实施例ⅩLⅠ3-[2(R)-羟基-1-(S)-二氢化茚基氨基]6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和方法4的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2(R)-羟基-1(S)-氨基二氢化茚制备标题化合物，熔点280-283℃。

                           实施例ⅩLⅡ3-[2-(3,4-亚甲基二氧基苯乙基氨基)]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和方法4的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2-(3,4-亚甲基二氧基苯基)-乙胺制备标题化合物的盐酸盐：

分析    C23H26N6O4.3.0HCl.0.30EtOAc计算值C49.57H5.40N14.33实测值C49.94H5.25N14.48

                           实施例ⅩLⅢ3-[2-(4-氟苯乙基氨基)]6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和方法4的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2-(4-氟苯基)-乙胺制备标题化合物的TFA盐：MS(FAB)425(M+1)⁺。

                           实施例ⅩLⅣ3-[2-(4-吡啶基)-乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和方法4的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2-(4-吡啶基)-乙胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点220-226℃:MS(FAB)408(M+1)⁺。

                           实施例ⅩLⅤ外消旋3-(1-二氢化茚基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和方法4的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和外消旋1-氨基二氢化茚制备标题化合物的盐酸盐：

  分析  C23H26N6O2·2.0HCl·1.0H₂O计算值C54.22H5.94N16.50实测值C54.12H5.65N16.45

                           实施例ⅩLⅥ外消旋3-[2-(2-四氢吡喃基)-乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

步骤A：外消旋2-氰基甲基吡喃

将外消旋2-溴甲基吡喃(3.0g,16mmol)和***(1.6g,33mmol)的DMF(50ml)混合溶液在100℃加热过夜。真空除去溶剂并将残余物分配在二氯甲烷和水中。用硫酸钠干燥有机相。除去溶剂和将残余物色谱(4∶1己烷/乙酸乙酯)提纯得到标题化合物：¹H NMR(CDCl₃)d1.35-1.91(m,6H),2.50(d,J=6.0Hz,2H),5.59(m,2H),4.01(m,1H).步骤B：外消旋2-氨基乙基吡喃

在55psi压力下，将外消旋2-氰基甲基吡喃(4.2g)和10％Pd/C(4.0g)的1∶1乙醇∶乙酸乙酯(150ml)混合物催化氢化过夜。通过硅藻土过滤反应混合物，然后真空除去溶剂。将残余物分配在氯仿和10％碳酸钠溶液中。用硫酸钠干燥有机相。除去溶剂得到标题化合物：¹H NMR(CDCl₃)d1.32-1.84(m,6H),3.06(m,2H),3.44(m,2H),3.98(m,1H).步骤C：外消旋3-[2-(2-四氢吡喃基)-乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤C-E的方法，接着用方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-(2-四氢吡喃基)-乙胺制备标题化合物的TFA盐：MS(FAB)415(M+1)⁺。

                           实施例ⅩLⅦ3-[2-(3-吡啶基)-乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和方法4的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2-(3-吡啶基)-乙胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点大于250℃:MS(FAB)408(M+1)⁺。

                           实施例ⅩLⅧ3-[2-(4-咪唑基)-乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-E的方法和方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和组胺制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)397(M+1)⁺。

                           实施例ⅠL3-[2-(3-吲哚基)-乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-E和方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和色胺制备标题化合物，熔点195-197℃:MS(FAB)446(M+1)⁺。

                           实施例L3-{2-[3-(6-氟)-吲哚基]-乙基氨基}-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-E和方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和6-氟色胺制备标题化合物的TFA盐：MS(FAB)464(M+1)⁺。

                            实施例LⅠ3-(2-环戊基乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-E和方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-环戊基乙胺制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)399(M+1)⁺。

                           实施例LⅡ3-[2-(4-甲基苯基)-乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-(4-甲基苯基)乙胺制备标题化合物，熔点254.5-260℃:MS(FAB)421(M+1)⁺。

                           实施例LⅢ3-[2-(2-噻吩基)-乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅰ步骤D的方法，接着用实施例Ⅴ步骤E和方法4的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2-(2-噻吩基)乙胺制备标题化合物，熔点245.5-249.5℃:MS(FAB)413(M+1)⁺。

                           实施例LⅣ外消旋3-[1-(3-吡啶基)-2-丙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-E的方法，接着用方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和1-(3-吡啶基)-2-丙胺(按Burger等方法制备；J.Org.Chem.1957,22,143)制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)422(M+1)⁺。

 分析     C22H27N7O2·4.1HCl·1.0EtOAc计算值C47.38H5.98N14.88实测值C47.37H6.11N14.88

                           实施例LⅤ外消旋3-[2-(3-吡啶基)-1-丙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

步骤A:2-(3-吡啶基)-1-硝基丙烷

将无水CeCl₃(8.63g,35.0mmol)的无水THF溶液(200ml)冷却至0℃，滴加MeMgBr(1.0M在***中，11.7ml,35.0mmol)。搅拌1.5小时后，将溶液冷却至-40℃并在15分钟内滴加3-(2-硝基乙烯基)吡啶(从TCI-USA可得)(1.50g,10.0mmol)的THF溶液(5ml)。5分钟后，用冰醋酸(1ml)骤停反应和真空浓缩。将残余物溶于二氯甲烷(200ml)中，用NaOH(1×50ml,1N)和水(1×50ml)洗涤，硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩，通过快速柱色谱(30×150mm硅胶柱，乙酸乙酯/二氯甲烷(1∶3))提纯残余物得到标题化合物，为油状物：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)d1.40(d,J=6.9Hz,3H),3.62-3.71(m,1H),4.53-4.62(m,2H),7.26-7.36(m,1H),7.54-7.59(m,1H),8.48-8.53(m,2H).步骤B:2-(3-吡啶基)-1-丙胺

在氩气气氛下，向2-(3-吡啶基)-1-硝基丙烷(0.91g,5.48mmol)的乙醇(20ml)和12N HCl(0.1ml)溶液中加入10％Pd/C(1.00g)。抽空溶液并用氢气吹洗几次，置氢气气氛下剧烈搅拌。14小时后，抽空此混合物并用氩气吹洗几次，硅藻土过滤和用乙醇(200ml)洗涤。真空除去挥发物，将残余物分配在二氯甲烷(100ml)和NaOH(50ml,10％)中，用二氯甲烷(2×100ml)萃取水层。合并有机层，MgSO₄干燥，过滤，真空浓缩并通过快速柱色谱(20×150mm硅胶柱，CH₂Cl₂/NH₃饱和的CH₂Cl₂/MeOH60∶39∶1)提纯残余物，得到标题化合物，为油状物：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)d1.28(d,J=6.8Hz,3H),2.74-2.85(m,1H),2.87-2.92(m,2H),7.23-7.26(m,1H),7.51-7.54(m,1H),8.47-8.49(m,2H).步骤C：外消旋3-[2-(3-吡啶基)-1-丙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-(3-吡啶基)-1-丙胺制备标题化合物：分析    C22H27N7O2·0.1H₂O计算值C62.42H6.48N23.10实测值C62.08H6.28N23.55

                           实施例LⅥ3-[2-甲基-2-(2-吡啶基)-1-丙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

步骤A:2-甲基-2-(2-吡啶基)-丙腈

向冷却至0℃的2-吡啶基乙腈(1.00g,8.44mmol)的无水DMF(20ml)溶液中分次加入NaH(0.743g,18.58mmol,60％重量分散在矿物油中)。10分钟后，经15分钟通过注射器加入碘甲烷(1.31ml,21.11mmol)。1小时后，将反应物稀释在乙酸乙酯(200ml)中，用水(5×20ml)和盐水(1×20ml)洗涤和硫酸镁干燥。过滤溶液，真空除去挥发物和通过快速柱色谱(30×150mm硅胶柱，乙酸乙酯/己烷梯度洗脱1∶4-1∶3)提纯油状物，得到标题化合物，为无色油状物：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)d1.77(s,6H),7.22-7.27(m,1H),7.59(dd,J=7.8and0.9Hz,1H),7.71-7.75(m,1H),8.59-8.61(m,1H).步骤B:2-甲基-2-(2-吡啶基)-丙胺

在氩气气氛下，向2-甲基-2-(2-吡啶基)-丙腈(1.018g,6.97mmol)的无水***溶液(25ml)中分次加入LiAlH₄(0.538g,14.17mmol)。1小时后，加水(1ml)、NaOH(1.0ml,1N)、水(8ml)，然后加***(20ml)骤停反应并搅拌10小时。溶液通过硅藻土垫过滤和用***∶甲醇(1∶1)(200ml)洗涤。真空浓缩滤液并将残余物通过快速柱色谱(30×150mm硅胶柱，CH₂Cl₂/NH₃饱和的CH₂Cl₂/MeOH梯度洗脱60∶39∶1-60∶38∶2-60∶37∶3)提纯，得到标题化合物，为树脂：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)d1.21(br s,2H),1.38(s,6H),2.98(s,2H),7.05-7.14(m.1H),7.34-7.38(m,1H),7.60-7.64(m,1H),8.59-8.61(m,1H).步骤C:3-(2-甲基-2-(2-吡啶基)-1-丙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤C-E的方法，接着用方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-甲基-2-(2-吡啶基)-1-丙胺制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)436(M+1)⁺。

  分析     C23H29N7O2·3.0HCl·0.3EtOAc

计算值C50.87H6.07N17.16

实测值C50.52H5.76N16.88

                           实施例LⅦ外消旋3-{1-[5-(2-甲基氨基吡啶基)]-2-丙基氨基}-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

步骤A:6-(叔丁氧羰基氨基)-烟酸甲酯

向6-氨基烟酸(2.00g,14.48mmol)的氯仿/甲醇(90ml∶30ml)溶液中加(三甲基硅烷基)重氮甲烷(2.0M己烷溶液，25ml)。15分钟后加入乙酸(0.1ml)，真空浓缩至得残余物。用乙酸乙酯/己烷(2∶1)研磨，过滤后得6-氨基烟酸甲酯为浅黄色固体。将其直接用于下一步骤。向6-氨基烟酸甲酯(1.86g,12.22mmol)的二氯甲烷溶液(90ml)中加碳酸二叔丁酯(2.69g,12.34mmol)、4-二甲基氨基吡啶(0.15g,1.22mmol)和三乙胺(2.00ml,14.66mmol)。14小时后，用乙酸乙酯(400ml)稀释反应和用柠檬酸(1×50ml,10％)、水(1×50ml)和盐水(1×50ml)洗涤，硫酸镁干燥，过滤，真空浓缩。通过快速柱色谱(40×150mm硅胶柱，乙酸乙酯/己烷梯度洗脱1∶6,1∶5,1∶3)提纯残余物，得到标题化合物，为白色固体：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)d1.56(s,9H),3.91(s,3H),8.06(d,J=8.2Hz,1H),8.24-8.27(m,1H),8.57(br s,1H),8.93(dd,J=0.7和2.4Hz,1H).步骤B:2-(叔丁氧羰基氨基)-5-吡啶甲醛

向冷却至-30℃的6-(叔丁氧基羰基氨基)-烟酸甲酯(2.20g,8.72mmol)的无水THF溶液(50ml)中滴加DIBAL-H(1.0M己烷溶液，34.8ml,34.8mmol)。1小时后，加入40ml饱和的罗谢尔盐溶液并剧烈搅拌10小时。真空除去挥发物并用二氯甲烷(3×50ml)萃取水层。用水(1×50ml)和盐水(1×50ml)洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤和真空浓缩。残余物直接用于下一步骤。向冷却至-78℃的草酰氯(4.12g,32.46mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中滴加DMSO(2.54g,32.46mmol)的二氯甲烷(9ml)溶液。20分钟后，力加入在二氯甲烷(35ml)中的粗醇(1.82g,8.11mmol)，接着加三乙胺(4.92g,48.66mmol)。撤去冰浴并在室温下搅拌反应1小时，加水(30ml)。分离两层溶液并用二氯甲烷(2×50ml)萃取水层。用水(1×50ml)和盐水(1×50ml)洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤和真空浓缩。通过快速柱色谱(30×150mm硅胶柱，乙酸乙酯/二氯甲烷1∶11)提纯残余物，得到标题化合物，为无色固体：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)d1.55(s,9H),7.79(br s,1H),8.13-8.14(m,2H),8.71(dd,J=1.1和1.8Hz,1H),9.96(s,1H).步骤C:2-(叔丁氧羰基氨基)-5-[1-(2-硝基丙烯基)]-吡啶

向2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-吡啶甲醛(1.20g,5.40mmol)的N-甲基吗啉溶液(40ml)中加硝基乙烷(2.20g,27.0mmol)、氟化钾(0.144g,2.49mmol)和18-冠-6(0.036g)。1小时后加入乙酸酐(2.20g,21.6mmol)和催化量的4-二甲氨基吡啶(0.05g)。12小时后倒入200ml冰中骤停反应。用二氯甲烷(3×75ml)萃取水层和用水(2×50ml)和盐水(1×50ml)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO₄)，过滤和真空浓缩。用二氯甲烷研磨残余物并过滤收集固体，得到标题化合物，为浅黄色固体：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)d1.54(s,9H),2.47(d,J=0.9Hz,3H),7.41(br s,1H),7.76(dd,J=2.3和8.8Hz,1H),8.04(s,1H),8.05(d,J=8.8Hz,1H),8.33(d,J=2.4Hz,1H).步骤D：外消旋1-[5-(2-甲基氨基吡啶基)]-2-丙胺

向冷却至0℃的2-(叔丁氧羰基氨基)-5-[1-(2-硝基丙烯基)]-吡啶(0.20g,0.716mmol)的THF溶液(8ml)中加入甲硼烷THF配合物(4.30ml,1.0MTHF溶液，4.30mmol)。撤去冰浴和加入NaBH₄(0.0135g,0.358mmol)并将反应温热至65℃。24小时后，将反应物倒入冰(50ml)中，用3N HCl调pH为2，在65℃温热2小时。用NaOH(1N)溶液调节pH为8和真空除去溶剂。用二氯甲烷(3×75ml)萃取水层和用水(2×50ml)和盐水(1×50ml)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO₄)，过滤和真空浓缩。通过快速柱色谱(15×150mm硅胶柱，CH₂Cl₂/NH₃饱和的CH₂Cl₂/MeOH60∶37∶3)提纯残余物，得到标题化合物，为油状物：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)d1.09(d,J=6.2Hz,3H),2.37-2.42(m,1H),2.54(dd,J=5.5和13.7Hz,1H),2.90(d,J=4.9Hz,3H),3.03-3.09(m,1H),4.62(br s,1H),6.34-6.37(m,1H),7.26-7.33(m,1H),7.89-7.92(m,1H).步骤E：外消旋3-{1-[5-(2-甲基氨基吡啶基)]-2-丙基氨基}-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和外消旋1-[5-(2-甲基氨基吡啶基)]-2-丙胺制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)451(M+1)⁺。

 分析 C23H30N8O2·2.45HCl·1.25CH2Cl2计算值C45.08H5.45N17.35实测值C45.03H5.48N17.37.

                           实施例LⅧ3-(2-甲基-2-苯基-1-丙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-甲基-2-苯基-1-丙胺制备标题化合物，熔点179-181℃:MS(FAB)435(M+1)⁺。

                           实施例LⅨ3-[2-甲基-2-(3,4-亚甲二氧基苯基)-1-丙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-甲基-2-(3,4-亚甲基二氧苯基)-1-丙胺(用实施例LⅥ步骤A和B)的方法，由3,4-亚甲基二氧苯基乙腈制备)制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)479(M+1)⁺。

  分析     C25H30N6O4·2.10 HCl·0.7H2O计算值C52.88H5.95N14.80实测值C52.88H5.96N14.51.

                           实施例LⅩ外消旋3-[1-(3,4-亚甲二氧基苯基)-2-丙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

步骤A：外消旋1-(3,4-亚甲二氧基苯基)-2-丙胺

在氩气气氛下，向1-(3,4-亚甲二氧基苯基)-2-硝基丙烯(0.938g,4.53mmol)的无水乙醇(40ml)、甲醇(8ml)和HCl(4N,4ml)溶液中加Pd/C(10％,0.902g)。在氢气气氛下(气球，1个大气压)搅拌此混合物14小时。通过硅藻土过滤，用乙醇(200ml)洗涤，真空干燥得到标题化合物，为浅棕色固体：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)d1.35(d,J=6.6Hz,3H),2.76(dd,J=8.6和13.5Hz,1H),3.09(dd,J=5.9和13.5Hz,1H),3.41-3.49(m,1H),5.94(s,2H),6.27-6.77(m,3H).步骤B：外消旋3-[1-(3,4-亚甲二氧基苯基)-2-丙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤C-E的方法，接着用方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和1-(3,4-亚甲二氧基苯基)-2-丙胺制备标题化合物的盐酸盐：MS(FAB)465(M+1)⁺。

分析 forC24H28N6O4·2.40HCl·0.65EtOAc计算值C52.43H5.89N13.79实测值C52.39H5.57N13.82.

                           实施例LⅪ3-[2-(4-磺酰氨基苯基)乙基氨基]-6甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-E的方法，接着用方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和4-(2-氨基乙基)苯磺酰胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点214-221℃:MS(FAB)486(M+1)⁺。

                           实施例LⅫ3-[2-(3,4-二氟苯基)乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-E的方法，接着用方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-(3,4-二氟苯基)乙胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点大于235℃:MS(FAB)443(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅢ3-(3,4-亚甲二氧苄基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-E的方法，接着用方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和3,4-亚甲二氧基苄胺制备标题化合物的盐酸盐，熔点大于255℃:MS(FAB)437(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅣ3-(1-苯基-1-环丁烷基甲基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-E的方法，接着用方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和1-苯基-1-环丁烷基甲胺(用实施例LⅥ步骤B的方法，由1-苯基-1-环丁基腈制备)制备标题化合物的盐酸盐，熔点252-259℃:MS(FAB)447(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅤ3-(1-苯基-1-环丙烷基甲基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-E的方法，接着用方法4的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和1-苯基-1-环丙烷基甲胺(用实施例LⅥ步骤B的方法，由1-苯基-1-环丙基腈制备)制备标题化合物：MS(FAB)433(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅥ3-[2-(2,5-二氟苯基)乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮的制备

使用实施例Ⅴ步骤C-F的方法，由1-苄氧基羰基甲基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮和2-(2,5-二氟苯基)乙胺制备标题化合物的TFA盐：MS(FAB)443(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅦ3-[2-(2吡啶基)乙基氨基]-5-氯-6-甲基-1-[乙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅲ步骤B的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-[乙基-(2-甲基-甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-吡嗪酮[用实施例Ⅲ步骤A的方法，由3,5-二氯-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和乙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基]-乙酰胺)制备]和2-(2-吡啶基)乙胺制备标题化合物，熔点207-209℃。

                           实施例LⅩⅧ3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-[乙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和乙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺制备标题化合物，熔点195-197℃。

                           实施例LⅩⅨ3-[2-(4-吗啉代)乙基氨基]-6-甲基-1-[环丙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-[2-(4-吗啉代)乙基氨基]-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和环丙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺制备标题化合物：

   分析    C25H33N6O5Cl·0.45H2O

计算值C55.49H6.31N15.53

实测值C55.14H6.16N16.13

                           实施例LⅩⅩ3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-[环丙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和环丙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺制备标题化合物，熔点196-199℃:MS(FAB)525(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅪ3-[2(S)-甲基-1-丁基氨基]-6-甲基-1-[环丙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-[2(S)-甲基-1-丁基氨基]-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和环丙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺制备标题化合物，熔点195-198℃:MS(FAB)490(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅫ3-(1-戊基氨基)-6-甲基-1-[乙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-(1-戊基氨基)-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和乙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺制备标题化合物，熔点125-127℃：

                           实施例LⅩⅩⅢ3-(2,2-二苯乙基氨基)-6-甲基-1-[环丙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-(1-戊基氨基)-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和环丙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺制备标题化合物，熔点153-159℃:MS(FAB)600(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅩⅣ3-(环己基氨基)-6-甲基-1-[环丙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-(环己基氨基)-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和环丙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺制备标题化合物，熔点114-121℃:MS(FAB)502(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅩⅤ3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-(2,5-二氯苄基-乙酰胺基)-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2,5-二氯苄胺制备标题化合物，熔点188-191℃:MS(FAB)446(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅩⅥ3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-(3-氯苄基乙酰胺基)-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和3-氯苄胺制备标题化合物，熔点201-207℃:MS(FAB)412(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅩⅦ3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-(3-氯-6-(氰基甲氧基)苄基乙酰胺基)-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和3-氯-6-(氰基甲氧基)苄胺制备标题化合物，熔点207-211℃。

                           实施例LⅩⅩⅧ3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-(2-氟-5-(三氟甲基)苄基乙酰胺基)-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-[2-(2-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2-氟-5-三氟甲基)苄胺制备标题化合物，熔点181-184℃。

                           实施例LⅩⅩⅨ3-[2-(4-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-[环丙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-[2-(4-吡啶基)乙基氨基]-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和环丙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺制备标题化合物，熔点190-192.5℃:MS(FAB)525(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅩⅩ3-[2-(3,4-亚甲二氧基苯基)乙基氨基]-6-甲基-1-[环丙基-(2-甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，由3-[2-(3,4-亚甲二氧基苯基)乙基氨基]-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和环丙基-2-氨基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺制备标题化合物，熔点202-204℃:MS(FAB)568(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅩⅪ3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-[3-氯-6-(羧甲氧基)苄基乙酰胺基]-2-吡嗪酮

使用实施例Ⅴ步骤F的方法，接着用实施例Ⅴ步骤D的方法水解，由3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-羧甲基吡嗪酮和2-氨基甲基-4-氯苯氧基乙酸乙酯制备标题化合物：MS(FAB)485(M+1)⁺。

                           实施例LⅩⅩⅫ3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-亚甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-2-吡嗪酮的制备

步骤A:α-(烯丙基氨基)-丙腈盐酸盐

在0℃，向搅拌着的烯丙胺(36ml,0.48mmol)的水(100ml)和乙醇(60ml)溶液中加浓盐酸(20ml,0.24mol)。然后加入***(15g,0.23mol)和乙醛(11.2ml,0.20mol)，回流加热此混合物。15小时后，真空除去挥发物和用NaCl饱和残余物，用二氯甲烷萃取(三次)。将合并的萃取液干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得到油状物，将其溶于1M HCl(200ml)中。真空蒸发溶液，与1∶1甲苯/甲醇共沸得固体，在乙酸乙酯(200ml)中回流加热该固体，冷却，过滤和干燥，得标题化合物的盐酸盐：

         ¹H NMR(400MHz,CD₃OD)d1.72(d,J=7.0Hz,3H,CH₃),3.78-3.90(m,2H,CH₂),4.63(q,J=7.0Hz,a-CH),5.56-5.66(m,2H,CHCH₂),5.91-6.02(m,1H,CHCH₂).步骤B:1-烯丙基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮

将在邻二氯苯(100ml)中搅拌着的草酰氯(30.5ml,0.35mol)和α-(烯丙基氨基)-丙腈盐酸盐(10.26g,70mmol)的混合物在100℃加热15小时。真空蒸发溶剂和通过快速硅胶柱色谱(用30％乙酸乙酯/己烷洗脱)提纯残余黑色油状物，得到标题化合物，为褐色晶体：¹H NMR(400Mz,CDCl₃)d2.48(s,3H,CH₃),4.75(m,2H,NCH₂),5.18(m,1H,CHCH_AH_B),5.33(m,1H,CHCH_AH_B),5.85-5.92(m,1H,CHCH_AH_B).步骤C:3,5-二氯-6-甲基-1-亚甲基羧基吡嗪酮

将三氯钌水合物(114mg,0.547mmol)加到搅拌着的1-烯丙基-3,5-二氯-6-甲基吡嗪酮(5.45g,24.88mmol)和高碘酸钠(21.82g,0.102mol)的水(75ml)、乙腈(50ml)和四氯化碳(50ml)溶液中。3小时后，用二氯甲烷萃取反应混合物(四次)并干燥(Na₂SO₄)合并的萃取液和真空蒸发，得浆液。1H NMR(CDCl₃)分析显示为1∶1的酸和醛的混合物。将粗产物溶于丙酮(50ml)并加入Jones试剂(2.7M)直至反应物保持橙黄色。用乙酸乙酯萃取反应物，然后用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发得到标题化合物，为褐色固体：¹H NMR(400Mz,DMSO)d2.41(s,3H,Me),4.86(s,2H,CH₂).步骤D:3-(2-苯乙基氨基)-5-氯-6-甲基-1-亚甲基-羧基吡嗪酮

向搅拌着的在二噁烷(6ml)中的3,5-二氯-6-甲基-1-亚甲基羧基吡嗪酮(0.50g,2.11mmol)溶液中加苯乙胺(0.80ml,6.33mmol)并将所得溶液温热至60℃。16小时后，将反应混合物分配在二氯甲烷和10％柠檬酸溶液中。干燥(Na₂SO₄)有机层和真空蒸发，得到褐色固体，通过快速柱色谱(用甲醇/氯仿/2％乙酸梯度洗脱，2-5％甲醇)提纯，用甲苯共沸干燥后得标题化合物，为白色固体：¹H NMR(300Mz,DMSO)d2.19(s,3H,Me),2.84(t,J=7.0Hz,2H,PhCH₂),3.45(q,J=7.0Hz,2H,CH₂NH),4.70(s,2H,CH₂CO₂),7.18-7.31(m,5H,Ph),7.46(br t,1H,NH).步骤E:3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-亚甲基-羧基吡嗪酮

向搅拌着的3-(2-苯乙基氨基)-5-氯-6-甲基-1-亚甲基羧基吡嗪酮(158mg,0.49mmol)的1∶1甲醇/1M NaOH(24ml)溶液中加阮内镍合金(1g)。2小时后，通过硅藻土过滤反应混合物，用1∶1甲醇/水洗涤，真空蒸发滤液得到白色固体。该无机盐污染的粗产物通过制备性HPLC(C18，水/乙腈/0.1％TFA洗脱)提纯得到标题化合物，为泡沫体：¹H NMR(400Mz,DMSO)d2.11(s,3H,Me),2.87(t,J=7.6Hz,2H,PhCH₂),3.53(br s,2H,CH₂NH),4.68(s,2H,CH₂CO₂),6.68(s,1H,吡嗪酮H-5),7.20-7.31(m,5H,Ph),8.16(br s,1H,NH).步骤F:3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-叔丁氧羰基-氨基-6-甲基-5-亚甲基甲酰胺基甲基-吡啶基)-吡嗪酮

将EDC盐酸盐(56mg,0.29mmol)加到在DMF(1ml)中搅拌着的3-(2-苯乙氨基)-6-甲基-1-亚甲基-羧基吡嗪酮(91mg,0.23mmol)、HOBT(40mg,0.29mmol)、5-氨基甲基-2-叔丁氧羰基氨基-6-甲基吡啶(70mg,0.29mmol)和N-甲基吗啉(0.13ml,1.17mmol)的混合物中，将此混合物搅拌16小时。用乙酸乙酯稀释反应物和用水洗涤，干燥(Na₂SO₄)和真空蒸发。通过快速硅胶柱色谱(乙酸乙酯／己烷洗脱，80-100％乙酸乙酯)提纯粗产物，得到标题化合物：¹H NMR(300Mz,CDCl₃)d1.51(s,9H,t-Bu),2.26(s,3H,CH₃),2.36(s,3H,CH₃),2.93(t,J=7.0Hz,PhCH₂),3.65(q,J=7.0Hz,PhCH₂CH₂),4.36(d,J=5.6Hz,2H,CONHCH₂),4.61(s,2H,CH₂CO),5.91(br t,1H,NH),6.65(brt,1H,NH),6.77(s,1H,吡嗪酮H-5),7.12(s,1H,NHBOC),7.21-7.32(m,5H,Ph),7.42(d,J=8.5Hz,1H，吡啶H-3),7.68(d,J=8.5Hz,1H，吡啶H-4).步骤G:3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-亚甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮

在0℃，向搅拌着的3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-叔丁氧基羰基氨基-6-甲基-5-亚甲基-甲酰胺基甲基吡啶基)吡嗪酮(85mg,0.17mmol)的乙酸乙酯(10ml)悬浮液中通HCl气至溶液被HCl气饱和。2小时后，室温下用氮气将混合物脱气，过滤得到标题化合物的二盐酸盐，为白色晶体，熔点大于200℃：¹H NMR(300Mz,CD₃OD)d2.18(s,3H,CH₃),2.52(s,3H,CH₃),3.00(t,J=7.4Hz,PhCH₂),3.68(t,J=7.4Hz,PhCH₂CH₂),4.33(d,J=5.4Hz,2H,CONHCH₂),4.76(s,2H,CH₂CO),6.55(s,1H，吡嗪酮H-5),6.84(d,J=9.3Hz,1H，吡啶H-3),7.23-7.31(m,5H,Ph),7.86(d,J=9.3Hz,1H,吡啶H-4)；MS(FAB)407(M+1)⁺.体外测定蛋白酶抑制作用

人α-凝血酶和人胰蛋白酶的测定基本以Lewis等发表在血栓形成研究，70卷，173页(1993)中的方法。

该测定方法在25℃的0.05MTRIS缓冲液Ph7.4、0.15M NaCl、0.1％PEG中进行。胰蛋白酶的测定中还包含1mM CaCl₂。其原理为测定对硝基酰苯胺(pna)底物的水解速率，用Thermomax96孔板读数器测量(405nm)对硝基苯胺的时间依赖关系。sar-PR-pna用于测定人α-凝血酶(Km=125um)和牛胰蛋白酶(Km=125um)。对硝基酰苯胺底物的浓度用8270cm^-1M^-1的吸光系数测定在342nm处的吸收来确定。

在某些凝血酶抑制程度高的有效抑制剂(Ki＜10nM)研究中，采用更灵敏活性的测定方法。在此测定方法中，由与7-氨基-4-三氟甲基香豆素产生有关的在500nm处的荧光增加(在400nm激发)，来测定荧光底物Z-GPR-afc的凝血酶催化水解速率(Km=27um)。Z-GPR-afc储备液的浓度由在380nm测定凝血酶完全水解等分储备液而产生的7-氨基-4-三氟甲基香豆素的吸收度来确定。

活性测定通过稀释至少十倍于最终浓度≤0.1Km的底物储备液为含酶或抑制剂平衡的酶溶液来进行。在对照试验中测定酶和抑制剂间达到平衡所需的时间。测定无抑制剂时产物形成的初速率(V_O)和存在抑制剂时产物形成的初速率(V_i)。假设Km/[S]、[I]/e和[I]/e的竞争抑制作用可以忽略不计(其中[S]、[I]和e分别代表底物总浓度、抑制物总浓度和酶总浓度)，抑制剂分解的平衡常数(Ki)可从方程1所示的V_O/V_i与[I]的关系式得到。

      V_O/V_i=1+[I]/Ki    (1)

由此测定显示的活性表明，本发明的化合物对于治疗不稳定心绞痛、顽固性心绞痛、心肌梗塞、暂时性局部缺血发作、心房纤维性颤动、血栓形成发作、血栓发作、深部静脉血栓、血管内凝血散布和再闭塞或再狭窄器官等各种疾病是有效的。本发明化合物对人凝血酶的抑制活性(以Ki表示)小于24nM。由其对人胰蛋白酶的抑制活性(以Ki代表)至少为1000nM证明，这些是优选的化合物。

下面的表说明本发明范围内的其它化合物。抑制活性用“*”代表Ki大于或等于1nM，或用“**”代表Ki小于1nM。

   表1

X       Y                     KiH    NHC₂H₅              **H    NHC₃H₅H    NH(CH₂)₂N(CH₃)₂F    NHC₂H₅F    NHC₃H₅F    NH(CH₂)₂N(CH₃)₂

      表2

   R             Ki

C₃H₅

C₃H₅CH₂

t-C₄H₉         *

HO₂CCH₂

CF₃CH₂(CH₃)₂N(CH₂)₂

     表3

  R                KiPhCH₂C(CH₃)₂       *PhCHCH₃PhCH₂CHCO₂Hn-C₆H₁₃

                表4

                 R

           PhCH₂C(CH₃)₂

              PhCHCH₃

           PhCH₂CHCO₂H

               n-C₆H₁₃

本发明的其它典型化合物，对人凝血酶有抑制活性的化合物(以Ki表示)显示如下。同上表一样，抑制活性用“*”代表Ki大于或等于1nM，或“**”代表Ki小于1nM。

实施例LⅩⅩⅩⅢ体内试验测定血栓闭塞

用大鼠体内氯化铁检验方法(Kurtz等在血栓研究，60期，269页(1990)中描述)以3-(2-苯基乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-亚甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-2-吡嗪酮测定本发明凝血酶抑制剂的体内活性。用二醛-尿烷(dial-urethane)溶液(0.1ml/100gm体重i.P.)麻醉雄性Sprague-Dawley大鼠(体重200-350克)，用与12英寸长的PE50管相连的23测量针刺入尾侧静脉。试管由一试管接头与三通阀相连。盐水(对照)或试验化合物，通过适合的尾静脉导管给药。用0.75英寸长的PE205管进行气管造口术。暴露右颈动脉并将一个1.3mm直径的多普勒氏血流量探测器置于脉管上。使用加热灯维持体温在37℃。

任选6只大鼠，通过尾静脉连续静脉注射盐水或试验化合物。试验化合物的给药速率为10ug/kg/min。在开始注射前60分钟，用一块3平方毫米被35％三氯化铁饱和的WhatmanNo.1滤纸盖在远离血流量探测器暴露的颈动脉上。在使用三氯化铁后如果血栓闭塞没有发生，或器官的血栓闭塞终止30分钟后，继续注射90分钟(总计注射150分钟)。闭塞的时间定义为从施用三氯化铁到器官血栓闭塞的时间。终止测量(给动物使用三氯化铁后没有血栓闭塞或血栓闭塞后30分钟再注射90分钟)，通过心脏穿刺抽取血样3ml，加到0.3ml3.8％的柠檬酸钠中。

本试验的结果显示试验化合物是非常有效的。给予试验化合物的大鼠，无一只发生血栓闭塞。

                           实施例LⅩⅩⅩⅣ片剂制剂

各自含25.0、50.0和100.0mg以下活性化合物的片剂由下述说明制备：3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-亚甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-2-吡嗪酮(活性化合物Ⅰ)，3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-[乙基-(2-亚甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮(活性化合物Ⅱ)，和3-氨基-6-甲基-1-[乙基-(2-亚甲基甲酰胺基甲基-4-氯苯氧基)-乙酰胺基]-2-吡嗪酮(活性化合物Ⅲ)。

         25-100毫克活性化合物的组成表

                    毫克数成分        A      B      C      D      E      F     G     H     I活性化合物Ⅰ   25     50    100     -      -      -     -     -     -活性化合物Ⅱ   -      -      -      25     50    100    -     -     -活性化合物     -      -      -      -      -      -     25    50   100

Ⅲ微晶纤维素   37.25   100    200    37.25  100    200  37.25  100   200改进的食用   37.25   4.25   8.5    37.25  4.25   8.5  37.25  4.25  8.5玉米淀粉硬脂酸镁      0.5    0.75  1.5      0.5   0.75   1.5   0.5   0.75  1.5

所有活性化合物、纤维素和部分玉米淀粉混合并粒化成10％的玉米淀粉糊。将所得的颗粒过筛，干燥并与剩余部分的玉米淀粉和硬脂酸镁混合。然后将所得的颗粒压成每片分别含25.0、50.0和100.0mg活性成分的片剂。

                           实施例LⅩⅩⅩⅤ片剂制剂

3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐A型一水合物(活性化合物(Ⅳ)片剂的典型组成如下：

成分	0.25mg	2mg	10mg	50mg
					活性化合物Ⅳ甘露糖醇微晶纤维素硬脂酸镁	0.500％49.50％49.50％0.500％	1.000％49.25％49.25％0.500％	5.000％47.25％47.25％0.500％	14.29％42.61％42.61％0.500％

2,10和50mg的片剂用羟丙基纤维素的水分散剂包膜，羟丙基甲基纤维素和二氧化钛，占片重的2.4％。通过直接压制制备片剂

将活化物Ⅳ、甘露糖醇和微晶纤维素通过指定尺寸的筛目(一般为250-750um)过筛并在适合的掺和机中混合。将混合物大体混合至(典型地为15-30分钟)药物均匀地分布在所得的干粉中。将硬脂酸镁过筛并加到掺和机中，然后，再混合(典型地为2-10分钟)为预压片混合物。该预压片混合物然后在外力下压制(典型压力范围为0.5-2.5千公斤)，使得到的片有合适的物理强度和可接受的崩解时间(根据压片的尺寸和药量而变)。2,10和50mg药片，用水溶性聚合物和颜料的水分散液除灰和包膜。通过干法制粒制备片剂

各自在合适的外力下压制混合干粉并再研磨得到指定粒径的颗粒。然后将此颗粒和硬脂酸镁混合并按上述方法压片。

                           实施例LⅩⅩⅩⅥ静脉用制剂

3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐A型一水合物(活性化合物Ⅳ)的静脉用制剂按一般静脉用制剂的制备方法制备。成分           预计范围活性化合物Ⅳ   0.12-0.61mgD-葡糖醛酸^*   0.5-5mg甘露糖醇NF     50-53mg1N氢氧化钠     q.s pH3.9-4.1注射用水       q.s1.0ml

             典型组合物A-C显示如下：

成分         A          B         C活性化合物Ⅳ  0.61mg^*    0.30^**   0.15^***D-葡糖醛酸^*  1.94mg      1.94mg    1.94mg甘露糖醇NF    51.2mg      51.2mg    51.2mg1N氢氧化钠    q.spH4.0    q.spH4.0  q.spH4.0注射用水      q.s1.0ml    q.s1.0ml  q.s1.0ml^*0.50mg游离碱^**0.25mg游离碱^***0.12mg游离碱

各种其它缓冲酸，例如L-乳酸、乙酸、柠檬酸或任何药物可接受的酸/在静脉给药可接受的pH范围内有适当的缓冲能力的共轭碱可代替葡糖醛酸。

Claims (44)

1．通式如下的化合物和其药学上可接受的盐，

其中W是

氢，

R¹,

R¹OCO,

R¹CO,

R¹(CH₂)_nNHCO，或

(R¹)₂CH(CH₂)_nNHCO，

其中n是0-4；R¹是

R²，

R²(CH₂)mC(R¹²)₂，其中m是0-3，和各个R¹²可以相同或不同，

(R²)(OR²)CH(CH₂)P，其中P是1-4，

R²C(R¹²)₂(CH₂)m，其中m是0-3，和各个R¹²可以相同或不同，其中(R¹²)₂

也可以与C形成C_3-7环烷基代表的环，

R²CH₂C(R¹²)₂(CH₂)q，其中m是0-2，和各个R¹²可以相同或不同，其中(R¹²)₂也可以与C形成C_3-7环烷基代表的环，

(R²)₂CH(CH₂)r，其中r是0-4，和各个R²可以相同或不同，其中(R²)₂

也可以与CH形成C_3-7环烷基、C_7-12二环烷基、C_10-16三环烷基或饱

和或不饱和的5-7元单或二杂环代表的环，和该环含有1-3个选自N、O和S的杂原子，

R²O(CH₂)P，其中P是1-4，或

R²(COOR³)(CH₂)r，其中r是1-4；R²和R¹⁴各自独立地代表

未取代的或被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、卤素、羟基、COOH、CONH₂或SO₂NH₂取代的苯基，

萘基，

联苯基，

5-7元单环或9-10元二环杂环或非杂环，它们可以是饱和或不饱和的，

其中杂环含有1-4个选自N、O和S的杂原子，其中的杂环或非杂环是未取代的或被卤素或羟基取代的，

未取代的或被一个或多个羟基、COOH、氨基、芳基、C_3-7环烷基、CF₃、N(CH₃)₂、C_1-3烷基芳基、杂芳基或杂环烷基取代的C_1-7烷基，CF₃

未取代或被芳基取代的C_3-7环烷基，

C_7-12二环烷基，或

C_10-16三环烷基；R³是

氢，

C_1-4烷氧基，

C_3-7环烷基，或

三氟甲基；X是

氢，或

卤素；

A选自下列基团之一：

其中Y¹和Y²各自独立代表

氢，

C_1-4烷基，

C_1-4烷氧基，

C_3-7环烷基，

卤素，或

三氟甲基；R⁴是

氢，

C_1-4烷基，

C_1-4烷氧基，

卤素，

-OCH₂CF₃，

-OCH₂CN，

-COOH,

-OH，

-COOR⁶，其中R⁶是C_1-4烷基，

-CONR⁷R⁸，其中R⁷和R⁸各自独立代表氢或C_1-4烷基，

-(CH₂)_1-4OH,

-CH₂NHC(O)CH₃,

-CH₂NHC(O)CF₃,

-CH₂NHSO₂CH₃,

-SO₂NH₂,

-(CH₂)_1-4SO₂NR⁷R⁸,

-(CH₂)_1-4SO₂R⁶,

5-7元单环或9-10元二环杂环，它们可以是饱和或不饱和的杂环，其含有1-4个选自N、O和S的杂原子，

-ZCH₂CO₂H,

-ZCH₂CO₂CH₃,

-ZCH₂R¹⁴，

-ZCH₂CO₂(CH₂)_1-3CH₃,

-Z(CHR⁹)_1-3C(O)NR¹⁰R¹¹

其中

    R⁹是氢或C_1-4烷基，

    R¹⁰和R¹¹各自独立代表

    氢，

    C_3-7环烷基，

    芳基，

    杂芳基，

    杂环烷基，

    -(CH₂)_1-2NCH₂CH₃，

    未取代的或被一个或多个羟基、COOH、氨基、芳基、杂芳基或

    杂环烷基取代的C_1-4烷基，或

    R¹⁰和R¹¹一起形成未取代或被羟基、氨基或芳基取代的4-7元环烷基，

其中Z是O、S或CH₂；R⁵是

氢，

卤素，

C_1-4烷基，

C_1-4烷氧基，

CF₃，

CN，或

CO₂NH₂，和R¹²是

氢，

未取代的或被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、卤素、羟基、COOH、CONH₂取代的苯基，

萘基，

联苯基，

5-7元单杂环或9-10元二杂环，它们可以是饱和或不饱和的，其中含有1-4个选自N、O和S的杂原子，

未取代的或被一个或多个羟基、COOH、氨基、芳基、杂芳基或杂

环烷基取代的C_1-4烷基，

CF₃

C_3-7环烷基，

C_7-12二环烷基，或

C_10-16三环烷基。

2．权利要求1的化合物和其药学上可接受的盐，其中R³是C_1-4烷基。

3．权利要求2的化合物和其药学上可接受的盐，其中A选自下列基团之

其中Y¹和Y²各自独立代表氢或C_1-4烷基；R⁴是

氢，

卤素，

-OCH₂CN,

-OH,

-ZCH₂CO₂H，或

-Z(CHR⁹)_1-3C(O)NR¹⁰R¹¹

其中

    R⁹是氢或C_1-4烷基，和

    R¹⁰和R¹¹各自独立代表

    氢，

    C_3-7环烷基，

    -(CH₂)_1-2NCH₂CH₃，或

    C_1-4烷基，

其中Z是O、S或CH₂；R⁵是

氢，

卤素，或

CF₃。

4．权利要求3的化合物和其药学上可接受的盐，其中W是氢或R¹。

5．权利要求4的化合物和其药学上可接受的盐，其中R¹是

R²,

R²(CH₂)mC(R¹²)₂，其中m是0-3，和各个R¹²可以相同或不同，

R²C(R¹²)₂(CH₂)m，其中m是0-3，和各个R¹²可以相同或不同，其中(R¹²)₂

也可以与C形成C_3-7环烷基代表的环，

(R²)₂CH(CH₂)r，其中r是0-4，和各个R²可以相同或不同，其中(R²)₂

也可以与CH形成C_3-7环烷基、C_7-12二环烷基、C_10-16三环烷基或5-7

元饱和或不饱和的单或二杂环代表的环，和该环含有1-3个选自N、O和S的杂原子，或

R²O(CH₂)P，其中P是1-4；R²和R¹⁴各自独立地代表

未取代的或被C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、卤素、羟基、或SO₂NH₂单或

多取代的苯基，

5-7元单环或9-10元二环，它们可以是饱和或不饱和的杂环或非杂环，

其中杂环含有1-4个选自N、O和S的杂原子，其中的杂环或非杂环

是未取代的或被卤素或羟基取代的，

未取代的或被一个或多个羟基、COOH、C_3-7环烷基、CF₃、N(CH₃)₂、C_1-3烷基芳基、杂芳基或杂环烷基取代的C_1-7烷基，

CF₃或

未取代的或被芳基取代的C_3-7环烷基；和R¹²是

氢，

未取代的或被一个或多个羟基、COOH、氨基、芳基、杂芳基或杂

环烷基取代的C_1-4烷基。

6．权利要求5的化合物和其药学上可接受的盐，其中A是

其中R⁵是H、氟、氯，和R¹⁰和R¹¹各自独立选自

氢，

C₂H₅,

C₃H₅,

(CH₂)₂N(CH₃)₂,

C₃环烷基，

其中R⁴是OH、氯、H、-OCH₂CN、氟、-OCH₂COOH,R⁵是氯或CF₃，

R³是CH₃或CH₂CH₃；X是H或氯；和W是

PhCH₂CH₂,

(CH₃)₃C-,

HOOCCH₂,

CF₃CH₂,

(CH₃)₂N(CH₂)₂,

PhCH₂O(CH₂)₂,

PhCH(CH₃),

PhCH₂CH(COOH),

CH₃(CH₂)₅,

PhCH₂,

H,

CH₃(CH₂)₄,

CH₃CH₂CH(CH₃)CH₂,

(Ph)₂CHCH₂,

PhCH₂CH(CH₃),

PhCH₂C(CH₃)₂,

PhCH(CH₃)CH₂,

(CH₃)₂CH,

PhCH(OH)CH₂,

PhC(CH₃)CH₂,

(Ph)₂CHCH₂,

7．权利要求6的化合物和其药学上可接受的盐，选自以下化合物：

8．权利要求7的化合物和其药学上可接受的盐，其中化合物选自以下，

9．权利要求8的化合物和其药学上可接受的盐，其中化合物是3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮。

10．权利要求9的盐是3-(2-苯乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐。

11．权利要求10的盐，以多晶型物的晶型A一水合物形式存在。

12．权利要求11的盐，以差示扫描量热曲线标记其特征，在一开口杯中，在5℃/分钟加热速率，和在5℃下向水中通氮气，由外推初温为约102℃，峰温为约112℃和缔合热为约115J/gm显示为吸热过程，接着由外推初温为约171℃，峰温为约194℃和缔合热为约83J/gm显示为吸热过程；和x射线粉末衍射图的特征在于，光谱d-间距为13.06、12.16、7.40、5.71、4.92、4.48、4.40、3.63、3.07、2.98、2.86和2.62。

13．权利要求10的盐，以多晶型物的晶型B一水合物形式存在。

14．权利要求13的盐，以差示扫描量热曲线标记其特征，在一开口杯中，在5℃/分钟加热速率和在5℃下向水中通氮气，由外推初温为约120℃，峰温为约132℃和缔合热为约123J/gm显示为吸热反应，接着由外推初温为约160℃，峰温为约191℃和缔合热为约78J/gm显示为吸热过程；和x射线粉末衍射图的特征在于，光谱d-间距为12.98,11.91,7.24,5.98,4.90,4.46,4.23,3.99,3.75,3.61,3.41,2.94,2.85和2.61。

15．一种抑制血液中血栓形成的组合物，含有权利要求1的化合物和药学上可接受的载体。

16．一种抑制血液中凝血酶的方法，包括向血液中加权利要求15的组合物。

17．一种抑制血液血小板凝聚物形成的方法，包括向血液中加权利要求15的组合物。

18．一种抑制血液中血栓形成的方法，包括向血液中加权利要求15的组合物。

19．一种抑制血液中血栓形成的方法，包括向血液中加权利要求1的化合物和纤维蛋白原受体拮抗剂。

20．一种权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，在制造抑制凝血酶、抑制血栓形成、治疗血栓形成或预防哺乳动物的血栓形成药物中的应用。

21．一种治疗或预防哺乳动物的静脉血栓栓塞和肺栓塞的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

22．一种治疗或预防哺乳动物的深部静脉血栓形成的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

23．一种治疗或预防哺乳动物的心原性血栓栓塞的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

24．一种治疗或预防人和其它哺乳动物的血栓栓塞发作的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

25．一种治疗或预防与哺乳动物的癌症和癌症化疗有关的血栓形成的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

26．一种治疗或预防哺乳动物的不稳定心绞痛的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

27．一种治疗或预防哺乳动物的心肌梗塞的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

28．一种治疗或预防与哺乳动物的心房纤维性颤动有关的心原性血栓栓塞的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

29．一种治疗或预防与哺乳动物的假体心脏瓣膜有关的心原性血栓栓塞的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

30．一种治疗或预防与哺乳动物的心脏疾病有关的心原性血栓栓塞的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

31．一种治疗或预防哺乳动物的动脉粥样硬化的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

32．一种治疗或预防哺乳动物的遗传性血栓形成疾病，例如蛋白质C缺乏症，蛋白质S缺乏症，抗凝血因子Ⅲ和抗凝血因子V Leiden有关的血栓形成的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

33．一种治疗或预防哺乳动物的后天性血栓形成疾病例如***性红斑狼疮有关的血栓形成的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

34．一种治疗或预防哺乳动物的局部缺血性心脏病的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

35．一种减低与血接触的装置凝血倾向的方法，包括给该装置涂覆权利要求15的组合物。

36．一种治疗或预防哺乳动物在经皮透照冠状血管成型术过程中或过程后的再闭塞的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

37．一种治疗或预防哺乳动物的经皮透照冠状血管成型术后的再狭窄的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

38．一种治疗或预防哺乳动物的冠状动脉旁路移植物引起的闭塞的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

39．一种治疗或预防哺乳动物的脑血管闭塞疾病的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

40．一种保持植入哺乳动物的动静脉插管开放的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

41．一种保持哺乳动物体内导管开放的方法，包括给哺乳动物权利要求15的组合物。

42．一种制备3-(2-苯基乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐晶型A一水合物的方法，包括以下步骤：

a)将3-(2-苯基乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮溶解在乙酸中并加盐酸水溶液；

b)回收得到的固相；和

c)除去其中的溶剂。

43．权利要求42的方法，其中盐酸水溶液的量为使乙酸中的最终含水重量为1-5％。

44．一种制备3-(2-苯基乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮二盐酸盐晶型B一水合物的方法，包括以下步骤：

a)将3-(2-苯基乙基氨基)-6-甲基-1-(2-氨基-6-甲基-5-甲基甲酰胺基甲基吡啶基)-吡嗪酮溶解在盐酸溶剂中；

b)回收得到的固相；和

c)除去其中的溶剂。