CN1193763C - 红景天总鞣质提取物及其在制备治疗老年性痴呆病药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种红景天总鞣质提取物及其在制备治疗老年性痴呆病药物中的应用。其提取方法是：将红景天原料粉碎，加溶媒10-20倍量，于50-100℃条件下，提取2-3次，每次0.5-1.5小时，提取液过滤，滤液合并后通过大孔吸附树脂柱，用水洗柱，再经30-80%乙醇洗柱，乙醇洗脱液于40-70℃减压浓缩，浓缩液经真空干燥或喷雾干燥得到总鞣质含量为40-85%的提取物。该提取物制备的药物，用于治疗老年性痴呆病，具有良好的疗效和较高的安全性。

Description

红景天总鞣质提取物及其在制备治疗老年性痴呆病药物中的应用

所属技术领域

本发明涉及植物提取物及其医疗用途，尤其是红景天提取物及其在制备治疗老年性痴呆病药物中的应用，属于中药领域。

背景技术

红景天为多年生草本或亚灌木植物，全世界有90多种，我国有70多种，大部分品种生长在海拔3500-5000米的高寒缺氧的恶劣环境中。红景天作为一种藏族常用中草药，常用来治疗肺炎咳嗽，咳血咯血，妇女白带，外用治疗跌打损伤，烫火烧伤等。近年研究表明，红景天的生物活性是多方面的，如耐缺氧和抗疲劳作用，对肿瘤的抑制作用，抗衰老作用，对心血管***的保护作用，抗辐射作用等。红景天属植物中含有许多类化学物质，如苷类、黄酮类、香豆素类和鞣质、有机酸等，但通常认为红景天苷及其苷元是其主要有效成分，并以红景天苷的含量作为评价红景天质量的主要依据。对红景天的开发，集中于提取红景天苷、黄酮、红景天素等，如“红景天有效成分的提取和加工适应性研究”(《食品工业科技》，2002，23(8))以红景天苷为活性成分，“大花红景天有效成分制剂及制备方法”(专利申请号：00115423)以黄酮、多糖为有效成分。对于所含鞣质类化合物，通常认为药效低，且口味苦涩，而作为杂质除去，如“红景天浸膏粉除鞣质方法研究”(《华西药学杂志》，2000，15(6))一文中用明胶溶液沉淀鞣质除去。

应用方面，红景天主要用于抗疲劳、改善心脑血管功能等保健食品或药物，如“红景天抗疲劳保健饮料及其制备方法”(专利申请号：02132541)，“红景天***片的制剂和制备方法”(申请号：97107821)，“一种治疗冠心病心绞痛的红景天注射剂的制备方法”(专利申请号：99102847)以及“红景天胶囊治疗冠心病心绞痛临床研究”(《中国医药学报》，2002.17(8))等。

老年性痴呆，是一种以进行性记忆力减退、认知功能障碍并伴有人格改变为主要特点的大脑退行性疾病。临床表现为进行性痴呆，其病因尚不明确，治疗该病的目的是改善认知功能障碍，提高病人的生活能力。但由于种种原因，到目前为止，老年性痴呆的临床治疗仍然是一个有待攻破的世界难题。近年来，国内外学者在应用天然药物有效成分治疗老年性痴呆病方面做了大量的基础研究和临床应用研究，希望从中开发出治疗该病的新药，其中研究较多的有：人参、黄芪、生地、水蛭等。目前尚未见用红景天及其提取物治疗老年性痴呆病的研究报道，也无红景天总鞣质提取物的研究报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的红景天提取物即红景天总鞣质提取物。

本发明的另一目的是提供该提取物在制备治疗老年性痴呆病药物中的应用。

本发明所说的红景天总鞣质提取物是通过下述方法获得的：

将红景天原料适当粉碎，加溶媒10-20倍量，于50-100℃条件下，提取2-3次，每次0.5-1.5小时，提取液过滤，滤液合并后，通过大孔吸附树脂柱，用水洗柱，再用30-80％乙醇洗柱，乙醇洗脱液于40-70℃减压浓缩，浓缩液经真空干燥或喷雾干燥即得到红景天总鞣质提取物。

根据《中华人民共和国药典》2000年版一部附录XB“鞣质含量测定法”测定或文献报道的有关“鞣质含量测定方法”测得提取物中总鞣质含量为40-85％。

本发明所说的红景天原料是指红景天属(Rhodiola L.)植物中的任何一种植物：如红景天(R.rosea)、大花红景天(R.crenulata)、狭叶红景天(R.kirilowii)、高山红景天(R.sachalinensis)、圣地红景天(R.sacea)、云南红景天(R.yunnanensis)、唐古特红景天(R.algida)、四裂红景天(R.guadrifida)等。

将红景天总鞣质提取物，或含有红景天总鞣质提取物的组合物，与制药中可以被接受的辅助添加成分混合，按常规的制剂工艺，即可制成口服型药物制剂或注射型药物制剂。如与口服制剂中可以被接受的崩解剂、赋型剂、润滑剂、粘合剂、填充剂等常用的辅助添加成分混合后，按常规方法即可制成为片剂、胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂和丸剂等口服固体药物制剂；与常用的增溶剂、乳化剂、润湿剂、起泡或消泡剂等表面活性剂、稀释剂、防腐剂、稳定剂、较味剂、增稠剂等混合，按相应的常规方法，即可制成为水剂、糖浆剂等口服液体药物制剂；与注射剂中常用的适当溶剂和附加剂配合和操作，还可以制备成相应的冻干粉针、水针等肌肉注射药物制剂。

本发明的有益效果是：将现有技术中通常作为杂质除去的红景天总鞣质提取出来，并提出了与原红景天应用范围不同的新医疗用途，即在制备治疗老年性痴呆病药物中的应用。

以下动物试验和临床疗效证实，本发明的红景天总鞣质提取物对治疗老年性痴呆病有良好的效果和较高的安全性：

一、动物试验：

红景天总鞣质提取物对东茛菪碱所致小鼠记忆获得障碍模型的改善作用：

试验动物：昆明种小鼠(一级)180只，体重30-35克，雌雄各半，随机分为6组。造模药物：氢溴酸东莨菪碱注射液。

供试药物，本发明的红景天总鞣质提取物(含总鞣质70％)；阳性对照药，脑复康。

仪器：DT-21跳台仪，中科院药物所研制生产。

试验方法：连续口服给药15天，训练前1小时给药，给药后50分钟给药组和模型组腹腔注射氢溴酸东茛菪碱5mg/kg，空白对照组腹腔注射生理盐水，然后放入跳台仪，先适应3分钟然后通电，小鼠受电击后跳上跳台，逃避电击，跳下时以小鼠双足同时接触铜栅为错误次数，训练5分钟。训练后24小时将小鼠放在跳台上，小鼠第一次跳下时间为潜伏期，小鼠双足同时接触铜栅为错误反应，记录5分钟内小鼠跳下的潜伏期和错误次数。

试验结果：

                   红景天总鞣质提取物对小鼠学习记忆的改善作用

组别                    动物数(只)    剂量(mg/kg)    潜伏期(秒)      错误次数(次)

空白对照组              30            -              83.5±55.3      3.13±1.04

模型对照组              29            5              24.2±8.5       6.32±2.03

脑复康组                30            600            57.6±20.1      3.05±1.12

红景天提取物低剂量组    29            50             52.4±17.5      4.15±1.54

红景天提取物中剂量组    30            150            85.2.8±24.4    3.15±1.26

红景天提取物高剂量组    30            300            126.8±43.7     2.89±0.98

(红景天提取物的剂量(mg/kg)是指含总鞣质70％的提取物的总量)

动物试验结果表明，红景天总鞣质提取物对小鼠学习记忆有明显兴奋作用，潜伏期和错误次数与模型组比较，有显著差异，且呈剂量相关性，能显著改善东莨菪碱所致小鼠的学习和记忆障碍，特别是近期记忆障碍。

二、临床疗效：

病例：5例，其中男性3例，女2例，均为阿尔茨海默氏(Alzheimer′sDiseae，AD)病人，年龄55-70岁，病程0.5-3年。

治疗方法：每天口服红景天胶囊9粒，分三次服用，每粒胶囊含红景天总鞣质提取物50mg，连续服药8周。

诊断和判断标准采用美国精神病学会《精神障碍诊断与统计手册》和中华全国中医学会老年学会制定的《老年呆病诊断、辩证分型及疗效评价标准》。简易精神状态检查表(MMSE)评分，≥5分为显效，4-2为有效，＜2为无效；日常生活自理能力表(ADL)评分，≥6分为显效，5-3分为有效，＜3为无效。

治疗结果：

红景天总鞣质提取物对老年痴呆患者治疗前后MMSE、ADL积分比较

病例     MMSE积分               ADL积分

         治疗前  治疗后  差值   治疗前  治疗后  差值

1        13.5    20.1    6.6    60.3    52.9    7.4

2        13.8    18.7    4.9    58.1    50.3    7.8

3        15.8    19.3    3.5    59.6    53.1    6.5

4        15.0    20.5    5.5    62.8    55.7    7.1

5        14.7    18.9    4.2    57.4    54.3    3.1

结果表明，红景天总鞣质提取物能显著改善老年性痴呆患者临床症状，提高认知能力，改善行为障碍和社会生活能力。

三、初步急性毒性实验结果如下：

雌性小鼠的口服半数致死量(LD₅₀值)是7.8g/kg，雄性小鼠的口服半数致死量(LD₅₀值)是6.8g/kg；雌性小鼠腹腔注射半数致死量(LD₅₀值)是2.8g/kg，雄性小鼠腹腔注射半数致死量(LD₅₀值)是2.5g/kg；大剂量时雄性小鼠口服有腹泻反应。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细地说明。

实施例1  将大花红景天(R.crenulata)原料1000g，适当粉碎，加水(即溶媒)10倍量，于100℃条件下，提取3次，每次0.5小时，提取液过滤，滤液合并后，通过P160(成都晨光化工研究院)大孔吸附树脂柱，水洗柱，再80％乙醇洗柱，乙醇洗脱液于40℃减压浓缩，浓缩液经真空干燥或喷雾干燥得到红景天总鞣质提取物100g，根据《中华人民共和国药典》2000年版一部附录XB“鞣质含量测定法”测定，总鞣质含量65％。

取上述红景天总鞣质提取物50g，粉碎过筛后按规定量直接填充胶囊制成胶囊剂1000粒即得。

实施例2  将狭叶红景天(R.kirilowii)原料1000g，适当粉碎，加水(即溶媒)10倍量，于100℃条件下，提取3次，每次0.5小时，提取液过滤，滤液合并后通过P260(成都晨光化工研究院)大孔吸附树脂柱，先水洗柱，再70％乙醇洗柱，乙醇洗脱液于70℃减压浓缩，浓缩液经真空干燥或喷雾干燥得到红景天总鞣质提取物100g，根据《中华人民共和国药典》2000年版一部附录XB“鞣质含量测定法”测定，总鞣质含量78％。

取上述红景天总鞣质提取物50g，另取淀粉18g，硬酯酸镁1.5g，混合制成颗粒后，压成片剂1000片即得。

实施例3  将红景天(R.rosea)原料1000g，适当粉碎，加30％乙醇(即溶媒)20倍量，于50℃条件下温浸，提取3次，每次1.0小时，提取液过滤，滤液合并后，通过NKA-9(南开大学化工厂)大孔吸附树脂柱，水洗柱至流出液经检查无糖的反应，再30％乙醇洗柱，乙醇洗脱液于40℃减压浓缩，浓缩液经真空干燥或喷雾干燥得到红景天总鞣质提取物100g，根据江佩芬的“络合滴定法”(《中药通报》，1988，19(9)：136)测定，总鞣质含量85％。

取上述红景天总鞣质提取物50g，另取蔗糖35g，50％乙醇180mL，柠檬酸850mg，苯甲酸钠510mg，混合加水至10L，混匀后分装成1000支，即得口服糖浆剂。

实施例4  将高山红景天(R.sachalinensis)原料1000g，适当粉碎，加40％丙酮溶液(即溶媒)15倍量，于80℃条件下回流提取，提取2次，每次1.5小时，提取液过滤，滤液合并后通过NKA-9(南开大学化工厂)大孔吸附树脂柱，水充分洗柱，再75％乙醇洗柱，乙醇洗脱液于60℃减压浓缩，浓缩液经真空干燥或喷雾干燥得到红景天总鞣质提取物100g，根据王璐的“高锰酸钾法”(《上海医科大学学报》1996，23(2)：152)测定，总鞣质含量80％。

取上述红景天总鞣质提取物25g，另取二乙胺四乙酸二钠盐(EDTA-2Na)0.125g，注射用水1000mL，在无菌条件下，搅拌使完全溶解，分别经玻砂过滤器G3、G6过滤后，滤液定量(1mL)灌注于安瓿瓶或西林瓶内，立即转入冷冻干燥机内，冷冻干燥24小时，熔封瓶口或加盖封口，即得1000支注射用冻干粉针剂。临床使用前加入注射用水，摇匀溶解即可用于肌肉注射。

实施例5  将大花红景天(R.crenulata)原料1000g，适当粉碎，加水(即溶媒)20倍量，于100℃条件下，提取3次，每次1.5小时，提取液过滤，滤液合并后，通过D101大孔吸附树脂柱，水洗柱，再80％乙醇洗柱，乙醇洗脱液于60℃减压浓缩，浓缩液经真空干燥或喷雾干燥得到红景天总鞣质提取物100g，根据江佩芬的“络合滴定法”(《中药通报》，1988，19(9)：136)测定，总鞣质含量40％。

取上述红景天总鞣质提取物50g，粉碎过筛后按规定量直接填充胶囊制成胶囊剂1000粒即得。

Claims (4)

1、一种红景天总鞣质提取物，它通过下述方法获得：

将红景天原料粉碎，加溶媒10-20倍量，于50-100℃条件下，提取2-3次，每次0.5-1.5小时，提取液过滤，滤液合并后通过大孔吸附树脂柱，用水洗柱，再经30-80％乙醇洗柱，乙醇洗脱液于40-70℃减压浓缩，浓缩液经真空干燥或喷雾干燥得到总鞣质含量为40-85％的提取物，其中溶媒选自水、乙醇或丙酮。

2、根据权利要求1所述的红景天总鞣质提取物，其特征在于：所述红景天原料是指红景天属植物中的任何一种。

3、权利要求1所述红景天总鞣质提取物在制备治疗老年性痴呆病药物中的应用。

4、根据权利要求3所述的红景天总鞣质提取物在制备治疗老年性痴呆病药物中的应用，其特征在于：所述药物的剂型是选自片剂、胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、丸剂、水剂、糖浆剂的口服剂型或选自冻干粉针、水针的注射剂型。