CN117643628A

CN117643628A - 新型冠状病毒中和抗体药物组合物及其用途

Info

Publication number: CN117643628A
Application number: CN202311077459.7A
Authority: CN
Inventors: 刘沛想; 冯辉; 姚盛; 刘洪川; 苏凯迪; 王静; 李理; 宋涛
Original assignee: Shanghai Junshi Biosciences Co Ltd; Suzhou Junmeng Biosciences Co Ltd
Current assignee: Shanghai Junshi Biosciences Co Ltd; Suzhou Junmeng Biosciences Co Ltd
Priority date: 2022-09-02
Filing date: 2023-08-25
Publication date: 2024-03-05

Abstract

本申请提供一种新型冠状病毒中和抗体药物组合物及其用途。该药物组合物含有新型冠状病毒抗体或其抗原结合片段HUR33变体和/或CB6变体以及任选的缓冲液等，其中，HUR33变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；CB6变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:15所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:22所示或分别如SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:20所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。本申请还提供含有药物组合物的液体制剂，以及药物组合物和液体制剂在制备用于预防、治疗、检测或诊断与新型冠状病毒感染相关的疾病的药物中的用途。

Description

新型冠状病毒中和抗体药物组合物及其用途

本申请要求于2022年9月2日提交中国专利局、申请号为202211074840.3、发明名称为“新型冠状病毒中和抗体药物组合物及其用途”的中国专利申请的优先权，其全部内容通过引用结合在本申请中。

技术领域

本申请涉及生物医药领域，具体涉及新型冠状病毒中和抗体药物组合物及其用途。

背景技术

国际病毒分类委员会(International Committee on Taxonomy of Viruses，ICTV)宣布，新型冠状病毒的正式分类名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acuterespiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2)。新型冠状病毒SARS-CoV-2导致的疾病的全球累计确诊病例数众多，对公众的生命和健康造成重大威胁。

目前针对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染的治疗，科学家已研发有多种中和抗体，但是鲜有专门适用于这类抗体的稳定的药物组合物。因此，亟需开发具有高稳定性的包含新型冠状病毒中和抗体的药物组合物。

发明内容

本申请的目的在于提供一种含有新型冠状病毒中和抗体药物组合物的药物组合物，其具有长期稳定和无聚集等优点。

本申请第一方面提供了一种药物组合物，包含选自HUR33变体和CB6变体中的至少一种的新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段；所述HUR33变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；所述CB6变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:15所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:22所示或分别如SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:20所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。

在本申请的一些实施方式中，所述HUR33变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9所示的重链可变区，和/或氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示的轻链可变区；所述CB6变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:23所示的重链可变区，和/或氨基酸序列如SEQ IDNO:25或SEQ ID NO:24所示的轻链可变区。

在本申请的一些实施方式中，所述HUR33变体还包含氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示的重链恒定区和氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示的轻链恒定区。

在本申请的一些实施方式中，所述HUR33变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:11所示的重链，和/或氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示的轻链；所述CB6变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:26所示的重链，和/或氨基酸序列如SEQ ID NO:27或SEQ IDNO:28所示的轻链。

在本申请的一些实施方式中，所述HUR33变体包含：(1)氨基酸序列分别如SEQ IDNO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和氨基酸序列分别如SEQID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；或(2)氨基酸序列如SEQID NO:8所示的重链可变区和氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示的轻链可变区；或(3)氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示的重链和氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示的轻链；所述CB6变体包含：(1)氨基酸序列分别如SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:15所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和氨基酸序列分别如SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:22所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；或(2)氨基酸序列如SEQ ID NO:23所示的重链可变区和氨基酸序列如SEQ ID NO:25所示的轻链可变区；或(3)氨基酸序列如SEQ ID NO:26所示的重链和氨基酸序列如SEQ ID NO:27所示的轻链。

在本申请的一些实施方式中，所述HUR33变体和所述CB6变体的质量比为(1～10)：(10～1)、约1：1、约1：2、约1：3、约1：4、约1：5、约2：1、约2：3、约3：1、约3：2、约4：1或约5：1。

在本申请的一些实施方式中，所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段的浓度为1～300mg/mL、10～200mg/mL、20～150mg/mL、30～120mg/mL、30～100mg/mL、20～100mg/mL、5～90mg/mL、5～85mg/mL、10～90mg/mL、10～85mg/mL、20～90mg/mL、20～85mg/mL、30～90mg/mL、30～85mg/mL、40～90mg/mL、40～85mg/mL、50～90mg/mL、50～85mg/mL、60～85mg/mL、60～90mg/mL、10～80mg/mL、20～80mg/mL、30～80mg/mL、40～80mg/mL、50～80mg/mL、60～80mg/mL、10～60mg/mL、20～60mg/mL、30～60mg/mL、10～50mg/mL、20～50mg/mL、30～50mg/mL、10～40mg/mL、20～40mg/mL、30～40mg/mL、约10mg/mL、约20mg/mL、约30mg/mL、约40mg/mL、约50mg/mL、约60mg/mL、约70mg/mL、约80mg/mL或约90mg/mL。

在本申请的一些实施方式中，所述药物组合物还包括缓冲液，所述缓冲液选自醋酸缓冲液、柠檬酸缓冲液和组氨酸缓冲液中的至少一种；优选地，所述组氨酸缓冲液为组氨酸-组氨酸盐酸盐缓冲液；优选地，所述缓冲液的浓度为1～100mM、5～50mM、10～40mM、10～30mM、15～25mM或约20mM；优选地，所述缓冲液选自浓度为约20mM的组氨酸-组氨酸盐酸盐缓冲液。

在本申请的一些实施方式中，所述缓冲液的pH为5.0～6.5、5.5～6.0、约5.0、约5.5、约6.0或约6.5。

在本申请的一些实施方式中，所述药物组合物还包括稳定剂，所述稳定剂选自精氨酸、精氨酸盐、脯氨酸、甘氨酸、氯化钠、甘露醇、山梨醇、蔗糖、麦芽糖、木糖醇和海藻糖中的至少一种；优选地，所述药物组合物中，所述稳定剂的浓度为10～400mM、50～300mM、150～300mM、200～300mM、160～300mM、180～280mM或约230mM。

在本申请的一些实施方式中，所述稳定剂为氯化钠；所述药物组合物中，所述氯化钠的浓度为50～200mM；或所述稳定剂为甘露醇；所述药物组合物中，所述甘露醇的浓度为100～300mM或200～300mM；或所述稳定剂为蔗糖；所述药物组合物中，所述蔗糖的浓度为100～300mM、150～300mM、200～300mM或约230mM；或所述稳定剂为海藻糖；所述药物组合物中，所述海藻糖的浓度为100～300mM、150～300mM、200～300mM、160～300mM、180～280mM或约230mM。

在本申请的一些实施方式中，所述药物组合物还包括表面活性剂，所述表面活性剂选自聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20和泊洛沙姆188中的至少一种；优选地，所述药物组合物中，以w/v计，所述表面活性剂的浓度为0.01％～0.1％、0.01％～0.08％、0.01％～0.06％、0.01％～0.05％、0.01％～0.04％、0.02％～0.08％、0.02％～0.06％、0.02％～0.05％、0.02％～0.04％、约0.02％、约0.03％、约0.04％或约0.05％；优选地，所述表面活性剂选自聚山梨醇酯80，所述药物组合物中，以w/v计，所述聚山梨醇酯80的浓度为0.02％或0.04％。

在本申请的一些实施方式中，所述药物组合物包含如下所示的组分：

(a)5～90mg/mL的所述HUR33变体和5～90mg/mL的所述CB6变体；(b)10～30mM组氨酸缓冲液，pH为5.5～6.5；(c)150～300mM的海藻糖；以及(d)以w/v计，浓度为0.01％～0.06％的聚山梨醇酯80；

优选地，(a)5～90mg/mL的所述HUR33变体和5～90mg/mL的所述CB6变体；(b)15～25mM组氨酸缓冲液，pH为5.5～6.0；(c)160～300mM的海藻糖；以及(d)以w/v计，浓度为0.02％～0.04％的聚山梨醇酯80；

更优选地，(a)10～80mg/mL的所述HUR33变体和10～80mg/mL的所述CB6变体；(b)15～25mM组氨酸缓冲液，pH为5.5～6.0；(c)180～280mM的海藻糖；以及(d)以w/v计，浓度为0.02％～0.04％的聚山梨醇酯80；

更进一步优选地，(a)约15mg/mL的所述HUR33变体和约15mg/mL的所述CB6变体；(b)约20mM组氨酸缓冲液，pH为约5.5；(c)约230mM的海藻糖；以及(d)以w/v计，浓度为约0.04％的聚山梨醇酯80；或

(a)约25mg/mL的所述HUR33变体和约25mg/mL的所述CB6变体；(b)约20mM组氨酸缓冲液，pH为约5.5；(c)约230mM的海藻糖；以及(d)以w/v计，浓度为约0.04％的聚山梨醇酯80；或

(a)约40mg/mL的所述HUR33变体和约40mg/mL的所述CB6变体；(b)约20mM组氨酸缓冲液，pH为约5.5；(c)约230mM的海藻糖；以及(d)以w/v计，浓度为约0.04％的聚山梨醇酯80；或

(a)约10mg/mL的所述HUR33变体和约10mg/mL的所述CB6变体；(b)约20mM组氨酸缓冲液，pH为约5.5；(c)约230mM的海藻糖；以及(d)以w/v计，浓度为约0.04％的聚山梨醇酯80；或

(a)约30mg/mL的所述HUR33变体和约30mg/mL的所述CB6变体；(b)约20mM组氨酸缓冲液，pH为约5.5；(c)约230mM的海藻糖；以及(d)以w/v计，浓度为约0.04％的聚山梨醇酯80；或

(a)约20mg/mL的所述HUR33变体和约20mg/mL的所述CB6变体；(b)约20mM组氨酸缓冲液，pH为约5.5；(c)约230mM的海藻糖；以及(d)以w/v计，浓度为约0.04％的聚山梨醇酯80。

本申请第二方面提供了一种包含本申请第一方面所述的药物组合物的液体制剂。

在本申请的一些实施方式中，所述液体制剂含有葡萄糖溶液或氯化钠溶液以及本申请第一方面所述的药物组合物；优选地，以w/v计，所述氯化钠溶液的浓度为0.85％～0.9％，所述葡萄糖溶液的浓度为5％～25％；优选地，所述液体制剂中，所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段的浓度为0.1～50mg/mL，优选为0.5～30mg/mL；优选地，所述液体制剂的pH为5.0～7.0。

本申请第三方面提供了本申请第一方面所述的药物组合物、本申请第二方面所述的液体制剂在制备用于预防、治疗、检测或诊断与新型冠状病毒感染相关的疾病的药物中的用途。

本申请提供的含有新型冠状病毒中和抗体药物组合物的药物组合物，具有长期稳定和无聚集等优点，可用来制备用于预防、治疗、检测或诊断与新型冠状病毒感染相关的疾病的药物。本申请提供的药物组合物可含有两种不同的针对新型冠状病毒的中和抗体，且同时保持了高稳定性和强高温耐受性，并且对新型冠状病毒野生型及六种临床变异株具有广泛的中和活性。

当然，实施本申请的任一产品或方法并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一种实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，还可以根据这些附图获得其他的实施方式。

图1显示了本申请实施例4中HUR33变体与SARS-COV-2野生型毒株RBD蛋白的结合解离曲线；

图2显示了本申请实施例4中CB6变体与SARS-COV-2野生型毒株RBD蛋白的结合解离曲线；

图3显示了本申请实施例5中实验组和阴性对照组与RBD his蛋白的结合曲线。

具体实施方式

为使本申请的目的、技术方案、及优点更加清楚明白，以下参照附图和实施例，对本申请进一步详细说明。显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员所获得的所有其他技术方案，都属于本申请保护的范围。

定义和说明

为了更容易理解本申请，以下具体定义了一些技术和科学术语。除非在本申请中另有明确定义，本申请使用的所有其它技术和科学术语都具有本申请所属领域的一般技术人员通常理解的含义。应理解本申请不限于具体的方法、试剂、化合物、组合物或生物***，当然可以对以上进行变化。还应理解本申请所用术语仅为了描述具体的实施方式，并不旨在进行限制。本申请所引用的所有参考文献，包括专利、专利申请、论文、教科书诸如此类，以及其中所引用的参考文献，就其尚未被引用的程度而言，在此其全文通过引用并入。如果所并入的文献和类似材料中的一个或多个与本申请不同或矛盾，包括但不限于所定义的术语、术语用法、所描述的技术诸如此类，则以本申请为准。

术语“药物组合物”或“制剂”表示含有一种或多种本申请所述抗体与其他组分的混合物，所述其他组分例如生理学可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。

术语“液体制剂”是指处于液体状态下的制剂，且不意图指称重悬浮的冻干制剂。本申请的液体制剂在储存时稳定，并且其稳定性不依赖于冻干(或其他状态改变方法，例如喷雾干燥)。

本申请所用的“约”在指代可测量数值(如量、持续时间等)时意在涵盖相对于具体数值±20％或±10％的变化，包括±5％、±1％和±0.1％，因为这些变化适于进行所公开的方法。

术语“缓冲液pH为约5.0～6.5”是指这样的试剂，通过其酸/碱共轭组分的作用使得包含该试剂的溶液能抵抗pH变化。本申请的制剂中使用的缓冲液可具有约5.0至约6.5范围内的pH、或约5.5至约6.0范围内的pH。

在本申请中，将pH控制在该范围内的“缓冲液”实例包括醋酸、醋酸盐(例如醋酸钠)、琥珀酸、琥珀酸盐(例如琥珀酸钠)、葡萄糖酸、组氨酸、组胺酸盐(例如组氨酸盐酸盐)、甲硫氨酸、柠檬酸(枸橼酸)、柠檬酸盐(枸橼酸盐)、磷酸盐、柠檬酸盐/磷酸盐、咪唑、其组合和其他有机酸缓冲剂。

“组氨酸缓冲液”为包含组氨酸离子的缓冲液。组氨酸缓冲液的实例包括组氨酸和组氨酸的盐，如组氨酸盐酸盐、组氨酸乙酸盐、组氨酸磷酸盐和组氨酸硫酸盐等，如含有组氨酸与组氨酸盐酸盐的组氨酸缓冲液；本申请的组氨酸缓冲液也包括含有组氨酸和醋酸盐(如钠盐或钾盐)的组氨酸缓冲液。

“醋酸缓冲液”是包括醋酸根离子的缓冲液。醋酸盐缓冲液的实例包括醋酸-醋酸钠、醋酸-醋酸钾、醋酸-醋酸钙、醋酸-醋酸镁等。优选的醋酸盐缓冲液为醋酸-醋酸钠缓冲液。

术语“稳定剂”表示药学上可接受的赋形剂，其在制造，储存和应用过程中保护活性药物成分和/或制剂免受化学和/或物理降解。稳定剂包括但不限于如以下定义的糖，氨基酸，盐，多元醇和他们的代谢产物，例如氯化钠、氯化钙、氯化镁、甘露醇、山梨醇、蔗糖、海藻糖、精氨酸或其盐(如精氨酸盐酸盐)、甘氨酸、丙氨酸(α-丙氨酸、β-丙氨酸)、甜菜碱、亮氨酸、赖氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、4-羟基脯氨酸、肌氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)、奥品类(opines)、丙氨奥品、章鱼碱、甘氨奥品(strombine)和三甲胺的N-氧化物(TMAO)、人血清白蛋白(hsa)、牛血清白蛋白(BSA)、α-酪蛋白、球蛋白、α-乳白蛋白、乳酸脱氢酶(LDH)、溶菌酶、肌红蛋白、卵清蛋白和核糖核酸酶A(RNAase A)。部分稳定剂，如氯化钠、氯化钙、氯化镁、甘露醇、山梨醇、蔗糖等也可起到控制渗透压的作用。在本申请中具体地使用的稳定剂选自多元醇、氨基酸、盐、糖中的一种或一种以上。优选的盐为氯化钠，优选的糖为蔗糖和海藻糖，优选的多元醇为山梨醇和甘露醇。优选的氨基酸为精氨酸、甘氨酸、脯氨酸，氨基酸可以以其D-和/或L-型存在，但典型是L-型，氨基酸可以任何合适的盐存在，例如盐酸盐，如精氨酸盐酸盐。优选的稳定剂为氯化钠、甘露醇、山梨醇、蔗糖、海藻糖、精氨酸盐酸盐、甘氨酸、脯氨酸、氯化钠-山梨醇、氯化钠-甘露醇、氯化钠-蔗糖、氯化钠-海藻糖、精氨酸盐酸盐-甘露醇、精氨酸盐酸盐-蔗糖。

术语“表面活性剂”一般包括保护蛋白质例如抗体免受空气/溶液界面诱导的应力、溶液/表面诱导的应力的影响以减少抗体的聚集或使制剂中颗粒物的形成最小化的试剂。示例性的表面活性剂包括但不限于非离子型表面活性剂，例如：聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯(如聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80)、聚乙烯-聚丙烯共聚物、聚乙烯-聚丙烯二醇、聚氧乙烯-硬脂酸酯、聚氧乙烯烷基醚、例如聚氧乙烯单月桂基醚、烷基苯基聚氧乙烯醚(Triton-X)、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(泊洛沙姆，Pluronic)、十二烷基硫酸钠(SDS)。本申请中，如无特别说明，术语“聚山梨醇酯20的浓度”和“聚山梨醇酯80的浓度”均是指质量体积浓度(w/v)，如“约0.04％聚山梨醇酯80”中“0.04％”即指“100mL液体中含有0.04g的聚山梨醇酯80”。

术语“稳定的”制剂是其中的抗体在制造过程期间和/或储存时基本上保持其物理稳定性和/或化学稳定性和/或生物活性的制剂。即使所含的抗体在经过一定时间储存之后未能保持其100％的化学结构或生物功能，医药制剂也可以是稳定的。在某些情况下，在经过一定时间储存之后，能维持约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的抗体结构或功能，也可被认为是“稳定的”。用于测量蛋白质稳定性的各种分析技术在本技术领域中是可得的，并综述在《肽和蛋白质药物递送》(Peptide and Protein Drug Delivery)247～301，Vincent Lee主编，Marcel Dekker，Inc.，New York，N.Y.，Pubs.(1991)，和Jones，A.(1993)Adv.Drug Delivery Rev.10：29～90中(其全文通过引用结合到本申请中)。

制剂在一定温度下经过一定时间的储存之后，通过测定其中剩余的天然抗体的百分比(及其它方法)，可以测量其稳定性。除其它方法外，天然抗体的百分比可以通过尺寸排阻色谱法(例如尺寸排阻高效液相色谱法[SEC-HPLC])来测量，“天然的”指未聚集的和未降解的。在一些实施方式中，蛋白质的稳定性按照具有低百分比的降解(例如片段化)和/或聚集蛋白质的溶液中单体蛋白质的百分数来确定。在一些实施方式中，制剂可以在室温、约25～30℃或40℃下稳定储存至少2周、至少28天、至少1个月、至少2个月、至少3个月、至少4个月、至少5个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月、至少12个月、至少18个月、至少24个月，或更长，最多不超过约6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.1％聚集形式的抗体。

通过测定在离子交换期间在此抗体主馏分(“主要荷电形式”)较为酸性的馏分中迁移的抗体(“酸性形式”)的百分比(及其它方法)，可以测量稳定性，其中稳定性与酸性形式抗体的百分比成反比。除其它方法外，“酸化”抗体的百分比可以通过离子交换色谱法(例如阳离子交换高效液相色谱法[CEX-HPLC])来测量。在一些实施方式中，可接受程度的稳定性意为当制剂在一定温度下经过一定时间的储存之后，其中可检测出的酸性形式的抗体最多不超过约49％、45％、40％、35％、30％、25％、20％、15％、10％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.1％。在测量稳定性之前储存的一定时间可以是至少2周、至少28天、至少1个月、至少2个月、至少3个月、至少4个月、至少5个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月、至少12个月、至少18个月、至少24个月，或更长。当评估稳定性时，容许储存医药制剂的一定温度可以是约-80℃至约45℃范围内的任何温度，例如储存于约-80℃、约-30℃、约-20℃、约0℃、约2～8℃、约5℃、约25℃，或约40℃。

如果抗体在颜色和/或澄清度目测检查时或通过紫外(UV)光散射或通过孔径排阻层析测量时基本上不显示出例如聚集、沉淀和/或变性的迹象，则所述抗体在该药物组合物中“保持其物理稳定性”。聚集是单个分子或复合物共价或非共价缔合以形成聚集体的过程。聚集可以进行到形成可见沉淀物的程度。

制剂的稳定性例如物理稳定性可以通过本技术领域中公知的方法来评估，包括测量样品的表观消光度(吸光度或光密度)。这样的消光测量与制剂的浊度相关。制剂的浊度部分地是溶解在溶液中的蛋白质的固有性质，并且通常通过比浊法来测量，并用比浊法浊度单位来量度。

随着例如溶液中一种或多种组分的浓度(例如蛋白质和/或盐浓度)而变化的浊度水平也被称为制剂的“乳浊”或“乳浊外观”。浊度水平可以参照使用已知浊度的悬液产生的标准曲线来计算。用于测定药物组合物的浊度水平的参比标准品可以基于《欧洲药典》标准(《欧洲药典》(European Pharmacopoeia)，第四版，“欧洲药品质量管理局指令”(Directorate for the Quality of Medicine of the Council of Europe)(EDQM)，Strasbourg，France)。根据《欧洲药典》标准，澄清溶液被定义为浊度低于或等于按照《欧洲药典》标准具有约3的参比悬液的浊度的溶液。比浊法的浊度测量可以检测在不存在缔合或非理想效应的情况下的瑞利散射，其通常随浓度线性变化。用于评估物理稳定性的其他方法在本技术领域中是公知的。

如果抗体在给定时间点的化学稳定性使得抗体被认为仍保持如下文中所定义的其生物活性，则所述抗体在药物组合物中“保持其化学稳定性”。可以通过例如检测或定量抗体的化学改变的形式来评估化学稳定性。化学改变可以包括尺寸改变(例如剪短)，其可以使用例如孔径排阻层析、SDS-PAGE和/或基质辅助的激光解吸电离/飞行时间质谱(MALDI/TOF MS)来评估。其他类型的化学改变包括电荷改变(例如作为脱酰胺或氧化的结果而发生)，其可以通过例如离子交换层析来评估。

如果药物组合物中的抗体对于其预期目的来说是生物活性的，则所述抗体在药物组合物中“保持其生物活性”。例如，如果制剂于例如5℃、25℃、45℃等温度下储存一定时间(例如1至12个月)之后，该制剂所含新型冠状病毒抗体与新型冠状病毒结合的亲和力为所述储存之前抗体结合亲和力的至少90％、95％或95％以上，则可认为本申请之制剂是稳定的。结合亲和力也可用例如ELISA(酶联免疫吸附剂测定)或等离子共振技术测定。

申请所用的术语“抗体”应被理解为包括完整抗体分子及其抗原结合片段。本申请所用的术语抗体的“抗原结合部分”或“抗原结合片段”(或简称为“抗体部分”或“抗体片段”)是指抗体中保持了与人CD39或其表位特异性结合能力的一个或多个片段。因此，其以最广义使用，具体包括但不限于单克隆抗体(包括全长单克隆抗体)、多克隆抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)、人源化抗体、全人抗体、嵌合抗体和单结构域抗体。已知基本的抗体结构单位包含四聚体，每个四聚体包括两个相同的多肽链对，每各多肽链对具有一条“轻”链(L，约25kDa)和一条“重”链(H，约50～70kDa)。每条链的氨基端部分或片段可包括主要负责抗原识别的约100～110个或更多个氨基酸的可变区。每条链的羧基端部分或片段可限定主要负责效应子功能的恒定区。

术语“分离的抗体”是指结合化合物的纯化状态，且在这种情况下意指该分子基本不含其它生物分子，例如核酸、蛋白质、脂质、糖或其它物质例如细胞碎片和生长培养基。术语“分离(的)”并非意指完全不存在这类物质或不存在水、缓冲液或盐，除非它们以明显干扰本申请所述结合化合物的实验或治疗应用的量存在。

术语“单克隆抗体”是指由高度一致的免疫细胞制成的抗体，这些免疫细胞是单一亲本细胞的所有克隆。单克隆抗体具有单价亲和力，因为它们结合相同的表位(抗体识别抗原的部位)。所述单克隆抗体也可能包括少量天然存在的突变。相比之下，术语“多克隆抗体”结合多个表位，通常由几个不同的浆细胞(分泌抗体的免疫细胞)谱系组成，可以理解为是多种单克隆抗体的混杂物。修饰语“单克隆”不得解释为需要通过任何特定方法产生抗体。

术语“全长抗体”或“完整抗体分子”，指包含四条肽链的免疫球蛋白分子：两条重(H)链(全长时约50～70kDa)和两条轻(L)链(全长时约25kDa)通过二硫键互相连接。每一条重链由重链可变区(在本申请中缩写为VH)和重链恒定区(在本申请中缩写为CH)组成。重链恒定区由3个结构域CH1、CH2和CH3组成。每一条轻链由轻链可变区(在本申请中缩写为VL)和轻链恒定区(在本申请中缩写为CL)组成。轻链恒定区由一个结构域CL组成。VH和VL区可被进一步细分为具有高可变性的互补决定区(CDR)和与互补决定区间隔分布的，具有更高保守性的框架区(FR)。每一个VH或VL从氨基末端至羧基末端的结构域排列顺序为FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。重链和轻链的可变区分别含有与抗原相互作用的结合结构域。抗体的恒定区可介导抗体对宿主的组织或免疫***的各种细胞(例如，效应细胞)和经典补体***的第一组分(Clq)的结合。

术语“结合结构域”或“抗原结合结构域”或“抗原结合位点”系指抗体中能够特异地与抗原的一部分或全部结合，并与抗原的一部分或全部互补的区域。当抗原很大时，抗体可能只能结合到抗原的一个特定的部分，该部分被称为表位。结合结构域可包含重链和轻链的可变结构域，即重链可变区VH和轻链可变区VL，其各自包括四个保守框架区(FR)和三个互补决定区(CDR)。CDR在序列上可变化并确定对特定抗原的特异性。

术语“CDR”是指抗体可变序列内的互补决定区。在重链和轻链的各个可变区中各存在3个CDR，其对于各个重链和轻链可变区被命名为HCDR1、HCDR2和HCDR3或LCDR1、LCDR2和LCDR3。这些CDR的准确边界按照不同的***有不同的定义。

对于抗体的互补决定区CDR的精确氨基酸序列边界，可根据公知方法来定义，例如基于抗体的三维结构和CDR环的拓扑学的Chothia(Chothia等，Nature 342:877-883，1989；Al-Lazikani等，Journal of Molecular Biology，273:927-948，1997)；或者基于抗体序列可变性的Kabat(Kabat等，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第4版，U.S.Department of Health and Human Services，National Institutes of Health，1987)、AbM(University of Bath)、Contact(University College London)以及IMGT(theinternational ImMunoGeneTics database，1999Nucleic Acids Research,27,209-212)；或者基于利用大量晶体结构的近邻传播聚类(affinity propagation clustering)的North CDR定义。本申请中抗体的CDR可以由本领域技术人员根据本领域的任何方案(例如上述任选的定义方法)确定边界。

本申请所使用的“抗原结合片段”包括抗体的片段或抗体的衍生物，所述“抗原结合片段”对应的抗体可称为亲代抗体。抗体的抗原结合片段通常包含亲代抗体的抗原结合区或可变区的至少一个片段，其保持亲代抗体的至少一些结合特异性。抗原结合片段的实例包括但不限于Fab、Fab'、F(ab')²和单链Fv片段，双特异性抗体，单链抗体分子，例如sc-Fv；由抗体片段形成的纳米抗体(nanobody)和多特异性抗体等。相同摩尔浓度下，抗原结合片段至少能够保持亲代抗体抗原结合活性的10％，至少20％、50％、70％、80％、90％、95％或100％或更高。此外，抗体的抗原结合片段还可以包括不明显改变其生物活性的保守或非保守氨基酸取代(称为抗体的“保守变体”或“功能保守变体”)。

语“特异性结合”、“选择性结合”是指抗体与预定的抗原上的表位结合。术语“识别抗原”在本申请中可以与术语“特异性结合”互换使用。

术语“亲和力”或“结合亲和力”指反映结合对子的成员(如抗原和抗体)之间相互作用的固有结合亲和力。亲和力可以通常由平衡解离常数(K_D)表示，平衡解离常数是解离速率常数和结合速率常数的比值。亲和力可以由本领域已知的常见方法测量，例如可采用ForteBio生物学分子相互作用工作站测定。

本申请基于中国专利申请CN2022102308454、CN2021116585640及其同族申请所记载的抗新型冠状病毒单克隆抗体，在其基础上研发出本申请的药物组合物，其全部内容通过引用结合到本申请中。

医药制剂

本申请提供了一种药物组合物，包含新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段；其中，所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段选自HUR33变体和CB6变体中的至少一种；所述HUR33变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；所述CB6变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:18、SEQ IDNO:17和SEQ ID NO:15所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:22所示或分别如SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:16和SEQ IDNO:20所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。本申请所述的HUR33变体和CB6变体均可靶向结合新型冠状病毒刺突蛋白S1亚基。

HUR33变体包含的三个重链互补决定区：

HCDR1：DYGMN(SEQ ID NO:1)；

HCDR2：WINTYSGEPTYADDFRG(SEQ ID NO:2)；

HCDR3：GGNWDWYFDV(SEQ ID NO:3)。

HUR33变体包含的三个轻链互补决定区：

LCDR1：RASQSVSNFLH(SEQ ID NO:4)；

LCDR2：YASQSIS(SEQ ID NO:5)；

LCDR3：QQSNTWPLT(SEQ ID NO:6)。

CB6变体包含的三个重链互补决定区：

HCDR1：GFVVQANY(SEQ ID NO:18)；

HCDR2：IYPGGST(SEQ ID NO:17)；

HCDR3：ARVLPMYGDYLDY(SEQ ID NO:15)。

CB6变体包含的三个轻链互补决定区：

LCDR1：QNIERY(SEQ ID NO:21)；

LCDR2：AAS(SEQ ID NO:16)；

LCDR3：QQSASSTPEYT(SEQ ID NO:22)；或

LCDR1：QNILPY(SEQ ID NO:19)；

LCDR2：AAS(SEQ ID NO:16)；

LCDR3：QQSSSAVPEYT(SEQ ID NO:20)。

本申请中，所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段选自HUR33变体和CB6变体中的至少一种；是指新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段选自：(1)HUR33变体中的任意一种；(2)CB6变体中的任意一种；(3)HUR33变体中的任意多种；(4)CB6变体中的任意多种；或(5)HUR33变体中的任意一种或多种与CB6变体中的任意一种或多种的混合物。

具体地，所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段选自HUR33变体和CB6变体中的至少一种，至少包含如下方案：

(1)所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段为HUR33变体，所述HUR33变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；

(2)所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段为CB6变体，所述CB6变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:15所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:22所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；

(3)所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段为CB6变体，所述CB6变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:15所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:20所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；

(4)所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段为HUR33变体和CB6变体的混合物，所述HUR33变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；所述CB6变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:18、SEQ IDNO:17和SEQ ID NO:15所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:22所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；

(5)所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段为HUR33变体和CB6变体的混合物，所述HUR33变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；所述CB6变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:15所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:20所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；

(6)所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段为不同CB6变体的混合物，第一种CB6变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:15所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:22所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；第二种CB6变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:18、SEQ IDNO:17和SEQ ID NO:15所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:20所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。

在本申请的一些实施方式中，本申请的药物组合物中使用的HUR33变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9所示的重链可变区，和/或氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示的轻链可变区；所述CB6变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:23所示的重链可变区，和/或氨基酸序列如SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:24所示的轻链可变区。

HUR33变体包含的重链可变区：

QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTDYGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTYSGEPTYAD DFRGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARGGNWDWYFDVWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:8)；或

QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTDYGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTYSGEPTYAD DFRGRFVFSLDTSVSTAYLQINSLKAEDTAVYYCARGGNWDWYFDVWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:9)。

HUR33变体包含的轻链可变区：

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSVSNFLHWYQQKPGKAPKLLIYYASQSISGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSNTWPLTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:7)。

CB6变体包含的重链可变区：

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFVVQANYMSWVRQAPGKGLEWVSVIYPGGSTFYADSVK GRFTISRDNSMNTLFLQMNSLRAEDTAVYYCARVLPMYGDYLDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:23)。CB6变体包含的轻链可变区：

DIVMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQNIERYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSASSTPEYTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:25)；或

DIVMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQNILPYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSSSAVPEYTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:24)。

在本申请的一些实施方式中，本申请的药物组合物中使用的所述HUR33变体还包含氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示的重链恒定区和氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示的轻链恒定区。

HUR33变体包含的重链恒定区(IgG1重链恒定区)：

ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:13)。

HUR33变体包含的轻链恒定区(IgG1轻链恒定区)：

RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDST YSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGECS(SEQ ID NO:14)。

在本申请的一些实施方式中，本申请的药物组合物中使用的所述HUR33变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:11所示的重链，和/或氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示的轻链；所述CB6变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:26所示的重链，和/或氨基酸序列如SEQ ID NO:27或SEQ ID NO:28所示的轻链。

HUR33变体包含的重链：

QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTDYGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTYSGEPTYADDFRGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARGGNWDWYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLYITREPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:10)；或

QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTDYGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTYSGEPTYADDFRGRFVFSLDTSVSTAYLQINSLKAEDTAVYYCARGGNWDWYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLYITREPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:11)。

HUR33变体包含的轻链：

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSVSNFLHWYQQKPGKAPKLLIYYASQSISGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSNTWPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ IDNO:12)。

CB6变体包含的重链：

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFVVQANYMSWVRQAPGKGLEWVSVIYPGGSTFYADSVKGRFTISRDNSMNTLFLQMNSLRAEDTAVYYCARVLPMYGDYLDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLYITREPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:26)。

CB6变体包含的轻链：

DIVMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQNIERYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSASSTPEYTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQID NO:27)；或

DIVMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQNILPYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSSSAVPEYTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQID NO:28)。

在本申请的一些实施方式中，本申请的药物组合物中使用的所述HUR33变体和所述CB6变体的质量比为(1～10)：(10～1)、约1：1、约1：2、约1：3、约1：4、约1：5、约2：1、约2：3、约3：1、约3：2、约4：1或约5：1。所述HUR33变体和所述CB6变体的质量比可以为上述任意两个比值作为端点形成的范围。

在本申请的一些实施方式中，所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段的浓度为约1～300mg/mL、10～200mg/mL、20～150mg/mL、30～120mg/mL、30～100mg/mL、20～100mg/mL、5～90mg/mL、5～85mg/mL、10～90mg/mL、10～85mg/mL、20～90mg/mL、20～85mg/mL、30～90mg/mL、30～85mg/mL、40～90mg/mL、40～85mg/mL、50～90mg/mL、50～85mg/mL、60～85mg/mL、60～90mg/mL、10～80mg/mL、20～80mg/mL、30～80mg/mL、40～80mg/mL、50～80mg/mL、60～80mg/mL、10～60mg/mL、20～60mg/mL、30～60mg/mL、10～50mg/mL、20～50mg/mL、30～50mg/mL、10～40mg/mL、20～40mg/mL、30～40mg/mL、约10mg/mL、约20mg/mL、约30mg/mL、约40mg/mL、约50mg/mL、约60mg/mL、约70mg/mL、约80mg/mL或约90mg/mL。所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段的浓度可以为约1mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、15mg/mL、20mg/mL、25mg/mL、30mg/mL、35mg/mL、40mg/mL、45mg/mL、50mg/mL、55mg/mL、60mg/mL、65mg/mL、70mg/mL、75mg/mL、80mg/mL、85mg/mL、90mg/mL、95mg/mL、100mg/mL、105mg/mL、110mg/mL、115mg/mL、120mg/mL、125mg/mL、150mg/mL、160mg/mL、180mg/mL、200mg/mL、220mg/mL、250mg/mL、300mg/mL或上述任意两个数值作为端点形成的范围。

在本申请的一些实施方式中，所述药物组合物还包括缓冲液，所述缓冲液选自醋酸缓冲液、柠檬酸缓冲液和组氨酸缓冲液中的至少一种；优选地，所述组氨酸缓冲液为组氨酸-组氨酸盐酸盐缓冲液；优选地，所述缓冲液的浓度为1～100mM、5～50mM、10～40mM、10～30mM、15～25mM或约20mM；优选地，所述缓冲液选自浓度为约20mM的组氨酸-组氨酸盐酸盐缓冲液。上述缓冲液的浓度可以为约1mM、5mM、10mM、15mM、20mM、25mM、30mM、35mM、40mM、45mM、50mM、60mM、70mM、80mM、90mM、100mM或上述任意两个数值作为端点形成的范围。如无特殊说明，本申请所述的缓冲液中采用的溶剂为水。如无特殊说明，本申请所述的缓冲液的浓度是指缓冲物质在药物组合物中的浓度。

在本申请的一些实施方式中，所述缓冲液的pH为5.0～6.5、5.5～6.0、约5.0、约5.5、约6.0或约6.5。上述缓冲液的pH可以为约5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0或上述任意两个数值作为端点形成的范围。

在本申请的一些实施方式中，所述组氨酸-组氨酸盐酸盐缓冲液采用组氨酸和组氨酸盐酸盐制成，优选采用L-组氨酸和L-组氨酸单盐酸盐。在一些实施方式中，组氨酸缓冲液采用1～30mM的L-组氨酸和1～30mM的L-组氨酸单盐酸盐制成。在一些实施方式中，组氨酸缓冲液采用摩尔比为1:1到1:4的组氨酸和组氨酸盐酸盐制成。在一些实施方式中，组氨酸缓冲液采用摩尔比为1:1组氨酸和组氨酸盐酸盐制成。在一些实施方式中，组氨酸缓冲液采用摩尔比为1:3的组氨酸和组氨酸盐酸盐制成。在一些实施方式中，组氨酸-组氨酸盐酸盐缓冲液为：采用4.5mM的L-组氨酸和15.5mM的L-组氨酸单盐酸盐制成的pH为5.5的组氨酸-组氨酸盐酸盐缓冲液。在一些实施方式中，组氨酸-组氨酸盐酸盐缓冲液为：采用7.5mM的L-组氨酸和22.5mM的L-组氨酸单盐酸盐制成的pH为5.5的组氨酸缓冲剂。在一些实施方式中，组氨酸-组氨酸盐酸盐缓冲液为：采用10mM的组氨酸和10mM的组氨酸盐酸盐制成的pH为6.0的组氨酸缓冲液。

在本申请的一些实施方式中，所述醋酸缓冲液为醋酸-醋酸钠缓冲液或醋酸-醋酸钾缓冲液，优选为醋酸-醋酸钠缓冲液。在一些实施方式中，醋酸缓冲液采用1～30mM的醋酸和1～30mM的醋酸钠制成。在一些实施方式中，醋酸缓冲液采用摩尔比为1:2.1的醋酸和醋酸钠制成。在一些实施方式中，醋酸缓冲液采用摩尔比为1:5.7的醋酸和醋酸钠制成。在一些实施方式中，醋酸缓冲液为：采用6.5mM的醋酸和13.5mM的醋酸钠制成的pH为5.0的醋酸缓冲液。在一些实施方式中，醋酸缓冲液为：采用3mM的醋酸和17mM的醋酸钠制成的pH为5.5的醋酸缓冲液。

在本申请的一些实施方式中，所述柠檬酸缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。在一些实施方式中，柠檬酸缓冲液采用1～30mM的柠檬酸和1～30mM的柠檬酸钠制成。在一些实施方式中，柠檬酸缓冲液采用摩尔比为1:1到1:4的柠檬酸和柠檬酸钠制成。在一些实施方式中，柠檬酸缓冲液为：采用5.0mM的柠檬酸和15.0mM的柠檬酸钠制成的pH为6.5的柠檬酸缓冲液。在一些实施方式中，柠檬酸缓冲液为：采用10mM的柠檬酸和10mM的柠檬酸钠制成的pH为6.0的柠檬酸缓冲液。

在本申请的一些实施方式中，所述药物组合物还包括稳定剂，所述稳定剂选自精氨酸、精氨酸盐、脯氨酸、甘氨酸、氯化钠、甘露醇、山梨醇、蔗糖、麦芽糖、木糖醇和海藻糖中的至少一种；优选地，所述药物组合物中，所述稳定剂的浓度为10～400mM、50～300mM、150～300mM、200～300mM、160～300mM、180～280mM或约230mM。上述稳定剂的浓度可以为约10mM、20mM、30mM、40mM、50mM、60mM、70mM、80mM、90mM、100mM、110mM、120mM、130mM、140mM、150mM、160mM、170mM、180mM、190mM、200mM、210mM、220mM、230mM、240mM、250mM、260mM、270mM、280mM、290mM、300mM、310mM、320mM、330mM、340mM、350mM、360mM、370mM、380mM、390mM、400mM或上述任意两个数值作为端点形成的范围。如无特殊说明，本申请所述的稳定剂的浓度是指稳定剂在药物组合物中的浓度。

在本申请的一些实施方式中，所述稳定剂为氯化钠；所述药物组合物中，所述氯化钠的浓度为50～200mM。上述氯化钠的浓度可以为约50mM、60mM、70mM、80mM、90mM、100mM、110mM、120mM、130mM、140mM、150mM、160mM、170mM、180mM、190mM、200mM或上述任意两个数值作为端点形成的范围。

在本申请的一些实施方式中，所述稳定剂为甘露醇；所述药物组合物中，所述甘露醇的浓度为100～300mM或200～300mM。上述甘露醇的浓度可以为约100mM、110mM、120mM、130mM、140mM、150mM、160mM、170mM、180mM、190mM、200mM、210mM、220mM、230mM、240mM、250mM、260mM、270mM、280mM、290mM、300mM或上述任意两个数值作为端点形成的范围。

在本申请的一些实施方式中，所述稳定剂为蔗糖；所述药物组合物中，所述蔗糖的浓度为约100～300mM、150～300mM、200～300mM或约230mM。上述蔗糖的浓度可以为约100mM、110mM、120mM、130mM、140mM、150mM、160mM、170mM、180mM、190mM、200mM、210mM、220mM、230mM、240mM、250mM、260mM、270mM、280mM、290mM、300mM或上述任意两个数值作为端点形成的范围。

在本申请的一些实施方式中，所述稳定剂为海藻糖；所述药物组合物中，所述海藻糖的浓度为约100～300mM、150～300mM、200～300mM、160～300mM、180～280mM或约230mM。上述海藻糖的浓度可以为约100mM、110mM、120mM、130mM、140mM、150mM、160mM、170mM、180mM、190mM、200mM、210mM、220mM、230mM、240mM、250mM、260mM、270mM、280mM、290mM、300mM或上述任意两个数值作为端点形成的范围。

在本申请的一些实施方式中，所述稳定剂为精氨酸或精氨酸盐；优选地，上述精氨酸盐为精氨酸盐酸盐。精氨酸或精氨酸盐的浓度为100～300mM、120～280mM或120～160mM。上述精氨酸或精氨酸盐的浓度可以为约100mM、110mM、120mM、130mM、140mM、150mM、160mM、170mM、180mM、190mM、200mM、210mM、220mM、230mM、240mM、250mM、260mM、270mM、280mM、290mM、300mM。

在本申请的一些实施方式中，所述稳定剂为山梨醇。在一些实施方式中，山梨醇的浓度为100～300mM、200～300mM或220～250mM。上述山梨醇的浓度可以为100mM、110mM、120mM、130mM、140mM、150mM、160mM、170mM、180mM、190mM、200mM、210mM、220mM、230mM、240mM、250mM、260mM、270mM、280mM、290mM、300mM或上述任意两个数值作为端点形成的范围。

在本申请的一些实施方式中，所述稳定剂为氯化钠与甘露醇的组合。在一些实施方式中，上述稳定剂为20～200mM的氯化钠与20～200mM的甘露醇的组合，或30～100mM的氯化钠与100～180mM的甘露醇的组合，或30～70mM的氯化钠与120～160mM的甘露醇的组合，或约50mM的氯化钠与约140mM、145mM或150mM的甘露醇的组合。

在本申请的一些实施方式中，所述稳定剂为精氨酸盐酸盐与蔗糖的组合。在一些实施方式中，上述稳定剂为20～200mM精氨酸盐酸盐与20～200mM的蔗糖的组合，或20～80mM的精氨酸盐酸盐与100～180mM的蔗糖的组合，或30～70mM的精氨酸盐酸盐与100～160mM的蔗糖的组合，或约50mM的精氨酸盐酸盐与约120mM、125mM、130mM或135mM的蔗糖的组合。

在本申请的一些实施方式中，所述稳定剂为精氨酸盐酸盐与甘氨酸的组合。在一些实施方式中，上述稳定剂为20～200mM精氨酸盐酸盐与20～200mM的甘氨酸的组合，或20～80mM的精氨酸盐酸盐与100～180mM的甘氨酸的组合，或30～70mM的精氨酸盐酸盐与100～120mM的甘氨酸的组合，或约50mM的精氨酸盐酸盐与约100mM、105mM、110mM或115mM的甘氨酸的组合。

在本申请的一些实施方式中，所述稳定剂为氯化钠与蔗糖的组合。在一些实施方式中，上述稳定剂为20～200mM的氯化钠与20～200mM的蔗糖的组合，或20～100mM的氯化钠与100～180mM的蔗糖的组合，或30～70mM的氯化钠与120～160mM的蔗糖的组合，或约50mM的氯化钠与约120mM、125mM、130mM或135mM的蔗糖的组合。

在本申请的一些实施方式中，所述稳定剂为氯化钠与海藻糖的组合。在一些实施方式中，上述稳定剂为20～200mM的氯化钠与20～200mM的海藻糖的组合，或20～80mM的氯化钠与100～180mM的海藻糖的组合，或30～70mM的氯化钠与120～160mM的海藻糖的组合，或约50mM的氯化钠与约120mM、130mM或140mM的海藻糖的组合。

在本申请的一些实施方式中，所述药物组合物还包括表面活性剂，所述表面活性剂选自聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20和泊洛沙姆188中的至少一种；优选地，所述药物组合物中，以w/v计，所述表面活性剂的浓度为0.01％～0.1％、0.01％～0.08％、0.01％～0.06％、0.01％～0.05％、0.01％～0.04％、0.02％～0.08％、0.02％～0.06％、0.02％～0.05％、0.02％～0.04％、约0.02％、约0.03％、约0.04％或约0.05％；优选地，所述表面活性剂选自聚山梨醇酯80，所述药物组合物中，以w/v计，所述聚山梨醇酯80的浓度为0.02％或0.04％。上述表面活性剂的浓度可以为约0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％或上述任意两个数值作为端点形成的范围。如无特殊说明，本申请所述的表面活性剂的浓度是指表面活性剂在药物组合物中的浓度。

在本申请的一些实施方式中，本申请的药物组合物包含如下所示的组分：

更进一步优选地，(a)15mg/mL的所述HUR33变体和15mg/mL的所述CB6变体；(b)20mM组氨酸缓冲液，pH为5.5；(c)230mM的海藻糖；以及(d)以w/v计，浓度为0.04％的聚山梨醇酯80；或

(a)约40mg/mL的所述HUR33变体和约40mg/mL的所述CB6变体；(b)约20mM组氨酸缓冲液，pH为约5.5；(c)2约30mM的海藻糖；以及(d)以w/v计，浓度为约0.04％的聚山梨醇酯80；或

本申请对于药物组合物的配制方法不做特别的限定，只要能够使得配制得到的药物组合物中的各组分在本申请所述的范围内即可。例如，将HUR33变体储存样品和/或CB6变体储存样品使用Millipore0.11m²进行超滤浓缩(UF/DF)至HUR33变体和/或CB6变体的浓度为预设终浓度的1～2倍，之后透析至含稳定剂的缓冲液中。透析结束后测定HUR33变体和/或CB6变体浓度，依照测定的浓度加入含稳定剂的缓冲液和表面活性剂，将HUR33变体和/或CB6变体最终浓度调至预设终浓度，且控制其他组分的浓度均为对应的预设终浓度，得到药物组合物。

在又一个方面，本申请提供了包含本申请所述的药物组合物的液体制剂；优选地，所述液体制剂是注射剂。

在本申请的一些实施方式中，所述液体制剂含有葡萄糖溶液或氯化钠溶液以及本申请所述的药物组合物；优选地，以w/v计，所述氯化钠溶液的浓度为0.85％～0.9％，所述葡萄糖溶液的浓度为5％～25％；优选地，所述液体制剂中，所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段的浓度为0.1～50mg/mL，优选为0.5～30mg/mL；优选地，所述液体制剂的pH为5.0～7.0。如无特殊说明，本申请所述的氯化钠溶液的浓度是指氯化钠在氯化钠溶液中浓度，葡萄糖溶液的浓度是指葡萄糖在葡萄糖溶液中的浓度。

医药用途和方法

在又一个方面，本申请提供了本申请所述的药物组合物或液体制剂在用于预防、治疗、检测或诊断与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染相关的疾病的药物中的用途。

在又一个方面，本申请提供了本申请所述的药物组合物或液体制剂在通过消除、抑制或降低新型冠状病毒活性来预防或治疗新型冠状病毒感染的用途。

在又一个方面，本申请提供了一种通过消除、抑制或降低新型冠状病毒活性来预防或治疗新型冠状病毒感染的方法，其包括向有需要的受试者施用本申请所述的药物组合物或液体制剂。

在又一个方面，本申请还提供了一种联合疗法，其包括向受试者联合施用治疗有效量的本申请任一实施方式的药物组合物或液体制剂，和其它一种或多种疗法来治疗新型冠状病毒感染引起的疾病。在一些实施方式中，所述疗法包括手术治疗和/或放射疗法。

在又一个方面，本申请还提供了一种联合疗法，其包括向受试者联合施用治疗有效量的本申请任一实施方式的药物组合物、冻干制剂或液体制剂，和其它一种或多种治疗剂来治疗新型冠状病毒感染引起的疾病。在一些实施方式中，其他治疗剂可选自化学治疗剂和生物治疗剂中的至少一种；其中，化学治疗剂选自α-干扰素、利巴韦林、磷酸氯喹和阿比多尔中的至少一种；生物治疗剂选自托珠单抗。

在又一个方面，本申请还提供一种降低感染新型冠状病毒的受试者的全身或局部病毒载量的方法，包括向受试者施用有效量的本申请任一实施方式的药物组合物或液体制剂。

在又一个方面，本发明前所述的任一种药物组合物或液体制剂也可用于制备预防、治疗、检测或诊断与新型冠状病毒相关的疾病的药物或制剂。

本申请所述的新型冠状病毒，包括新型冠状病毒野生型和/或突变株，新型冠状病毒突变株包括阿尔法(Alpha)突变株、贝塔(Beta)突变株、伽马(Gamma)突变株、德尔塔(Delta)突变株、Epsilon突变株、Zeta突变株、Eta突变株、Theta突变株、Iota突变株、卡帕(Kappa)突变株、缪(Mu)突变株和奥密克戎(Omicron)突变株中的至少一种，优选为Alpha突变株、Beta突变株、Gamma突变株、Kappa突变株、Epsilon突变株和Delta突变株中的至少一种。

实施例

下文将以具体实施例的方式阐述本申请。应理解，这些实施例仅仅是阐述性的，并非意图限制本申请的范围。对本领域的技术人员而言，在不脱离本申请精神和范围的情况下，针对本申请具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。本申请实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，如冷泉港的抗体技术实验手册、分子克隆手册等；或按照原料或商品制造厂商所建议的条件。未注明具体来源的试剂，为市场购买的常规试剂。

下述实施例中所用的HUR33变体的重链的氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示，轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示；CB6变体的重链的氨基酸序列如SEQ ID NO:26所示，轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:27所示。

HUR33变体和CB6变体的制备：根据HUR33变体和CB6变体的轻链和重链的氨基酸序列，全基因合成后分别构建至pCAGGS载体，分别获得HUR33变体和CB6变体完整的轻链表达质粒和重链表达质粒；之后将质粒转染细胞后进行培养，获得目的蛋白；具体地：将HUR33变体的重链表达质粒和轻链表达质粒以2：3的比例共转染293T细胞，转染4-6小时后，PBS洗涤细胞2次，采用无血清DMEM培养基进行培养；分别于转染后第3天和7天收取细胞上清，离心去除细胞碎片，将两次获得的抗体上清混合，纯化，分别获得目的蛋白HUR33变体和CB6变体。

下述实施例4至实施例5中，采用药物组合物FS5-1作为测试对象，在测试前，采用各实施例对应的稀释剂稀释药物组合物，使HUR33变体和CB6变体的浓度至相应的数值。

本申请实施例中采用下述缩略词：

W表示周；

T0表示药物组合物样品放样处理前的起始测试；

HPLC表示高效液相色谱；

SEC-HPLC表示分子排阻高效液相色谱；

CEX-HPLC表示离子交换高效液相色谱；

rCE-SDS表示还原毛细管电泳；

nrCE-SDS表示非还原毛细管电泳；

RBD表示受体结合结构域；

SDS表示十二烷基硫酸钠；

MES表示2-吗啉乙磺酸；

NEM表示乙基马来酰亚胺；

TMB表示3,3',5,5'-四甲基联苯胺；

EC₅₀表示半最大效应浓度；

PBS表示磷酸缓冲液。

实施例1：包含HUR33变体的药物组合物的稳定性测试

1.1实验样品

将HUR33变体样品(HUR33-1)使用Millipore0.11m²进行超滤浓缩(UF/DF)至浓度分别约为60mg/mL或40mg/mL，之后透析至相应的含稳定剂的缓冲液中。分别测定HUR33变体浓度，依照测定的浓度分别加入对应的含稳定剂的缓冲液和表面活性剂，将HUR33变体最终浓度分别调至50mg/mL、30mg/mL、20mg/mL和10mg/mL，且其他组分的含量分别如表1所示，得到不同的待测药物组合物。

将上述新配制的不同的待测药物组合物无菌灌装到2R西林瓶，FS1-1至FS1-5均为0.5mL/瓶，FS2-1至FS2-4均为2mL/瓶，之后根据稳定性考察条件进行稳定性放样并检测。不同的待测药物组合物的组分如表1所示，其中：组氨酸缓冲液是指L-组氨酸-L-组氨酸盐酸盐缓冲液。

表1不同的待测药物组合物的组分

1.2实验方法及结果

稳定性考察条件包括：

(1)放置于5±3℃的环境中2W和4W，下文简称为“长期(5±3℃)”；

(2)放置于40±2℃的环境中2W和4W，下文简称为“高温(40±2℃)”。

1.2.1外观测试

测试方法：采用目检法来检测各药物组合物(样品)的外观情况。检测过程中，确保澄明度检测仪的光照强度保持在1000Lux-1500 Lux之间。将样品保持在视线的同一水平面，轻轻摇晃或颠倒以避免产生气泡；分别在黑色背景和白色背景前进行目检。从颜色、乳光和可见异物三个方面记录目检结果。

测试结果：外观测试结果如表2所示。

表2外观测试结果

从上述表2结果可知，药物组合物FS1-1至FS1-5经高温条件下放置4周，均未发现明显可见异物，无明显乳光；经长期条件下放置4周，与T0相比外观乳光加重，并且FS1-3和FS1-4出现较多颗粒。

药物组合物FS2-1至FS2-4经高温和长期条件下放置4周，FS2-1和FS2-2均未发现明显可见异物，均无明显乳光，FS2-3和FS2-4在放置2周后乳光出现加重现象，4周后外观与2周无明显差异。

1.2.2SEC-HPLC纯度测试

测试方法：采用安装有SEC色谱柱(Waters XBridge BEH，7.8mm×30cm，3.5μm，)的HPLC(Waters e2695仪器)检测SEC纯度。用流动相将各药物组合物(样品)分别稀释至4.0mg/mL，混匀后加入内衬管中，直接进样分析；流动相组成为50mM磷酸盐溶液(含300mM氯化钠)，pH 6.8±0.2。采用面积归一化法计算主峰、聚体和片段的相对百分比。参比品的预处理方法和测试方法同样品。测试参数如下表3所示：

表3 SEC-HPLC纯度测试参数

测试结果：SEC-HPLC纯度测试结果如表4所示。

表4 SEC-HPLC纯度测试结果(％)

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注：“/”代表未测定

从上述表4结果可知，药物组合物FS1-1至FS1-5经高温条件下放置4周，SEC-HPLC纯度均有下降，主要为聚体增加；其中FS1-1纯度下降最快，其他药物组合物间无明显差异；经长期条件下放置4周，所有药物组合物SEC-HPLC纯度均未出现明显变化。

药物组合物FS2-1至FS2-4经高温条件下放置4周，SEC-HPLC纯度均略有下降，不同药物组合物间无明显差异；经长期条件下放置4周，SEC-HPLC纯度均未出现明显变化。

1.2.3CEX-HPLC纯度测试

测试方法：采用安装有阳离子色谱柱(MabPac SCX-10,4×250mm)的HPLC(Waterse2695仪器)进行CEX-HPLC纯度检测。用流动相A相将各药物组合物(样品)稀释至1.0mg/mL，混匀后加入到内衬管中，进样分析；流动相组成为A相：20mM MES溶液(pH 6.20±0.02)；B相：20mM MES+100mM NaCl溶液(pH 6.20±0.02)。采用峰面积归一化法计算主峰、酸性峰、碱性峰百分比。参比品的预处理方法和测试方法同样品。测试参数如下表5所示：

表5CEX-HPLC纯度测试参数

测试结果：CEX-HPLC纯度测试结果如表6所示。

表6CEX-HPLC纯度测试结果(％)

注：“/”代表未测定

从上述表6结果可知，药物组合物FS1-1至FS1-5经高温条件下放置4周，CEX-HPLC纯度均明显下降，主要为碱峰的增加；其中FS1-1纯度下降较快，其他药物组合物间无明显差异；经长期放置4周后，所有药物组合物无明显变化。

药物组合物FS2-1至FS2-4经高温条件条件下放置4周，CEX-HPLC纯度均有下降，药物组合物间未出现明显差异；长期条件下放置4周，所有药物组合物CEX-HPLC纯度均无明显变化。

1.2.4rCE-SDS纯度测试

测试方法：使用毛细管电泳仪(Maurice仪器)进行rCE-SDS纯度检测。取稀释液(1wt％SDS+40mM磷酸盐缓冲液，pH 6.5)将各药物组合物(样品)稀释至1mg/mL，然后取95μL稀释后样品与5μL 2-巯基乙醇混合均匀，3000rpm室温离心30s，之后70℃孵育15min。孵育完成后，冷却至室温，12000rpm室温离心5min。从样品管中分别取出75μL样品溶液至96孔板，避免产生气泡，1000g室温离心10min，使用毛细管电泳仪(Maurice)检测。参比品的预处理方法和测试方法同样品。

测试结果：rCE-SDS纯度测试结果如表7所示。

表7 rCE-SDS纯度测试结果(％)

注：“/”代表未测定

从上述表7结果可知，药物组合物FS1-1至FS1-5经高温条件下放置4周，rCE-SDS纯度均有下降趋势，所有药物组合物间无明显差异；经长期放置4周后，rCE-SDS纯度均未出现明显变化。

药物组合物FS2-1至FS2-4经高温条件下放置4周，rCE-SDS纯度均有下降，所有药物组合物间无明显差异；经长期条件下放置4周，纯度均未出现明显变化。

1.2.5nrCE-SDS纯度测试

测试方法：使用毛细管电泳仪(Maurice仪器)进行nrCE-SDS纯度检测。按终体积100μL计算好将各药物组合物(样品)稀释至1mg/mL时需要加入的稀释液及样品量，然后依次按稀释液(1wt％SDS+40mM磷酸盐缓冲液，pH6.5)、5.0μL 0.25M NEM、样品的顺序加入1.5mL EP管混匀。3000rpm室温离心30s，之后70℃孵育5min。孵育完成后，冷却至室温，12000rpm室温离心5min。从样品管中分别取出75μL样品溶液至96孔板，避免产生气泡，1000g室温离心10min，使用毛细管电泳仪(Maurice仪器)检测。参比品的预处理方法和测试方法同样品。

测试结果：nrCE-SDS纯度测试结果如表8所示。

表8 nrCE-SDS纯度测试结果(％)

注：“/”代表未测定

从上述表8结果可知，药物组合物FS1-1至FS1-5经高温条件下放置4周，nrCE-SDS纯度均明显降低，所有药物组合物间无明显差异；经长期放置4周，nrCE-SDS纯度均未出现明显变化。

药物组合物FS2-1至FS2-4经高温条件下放置4周，nrCE-SDS纯度均有下降，所有药物组合物组间无明显差异；经长期条件下放置4周，nrCE-SDS纯度均未出现明显变化。

1.2.6结合活性测试

测试方法：使用浓度为3.0μg/mL的His标签的RBD蛋白溶液(苏州君盟自制)包板，37℃温育90min；洗板并用含有2％(w/v)脱脂牛奶的PBS溶液封闭；分别加入采用含有2％(w/v)脱脂牛奶的PBS溶液梯度稀释的包含HUR33变体(HUR33变体的浓度先采用含有2％(w/v)脱脂牛奶的PBS溶液稀释为40μg/mL，再4倍梯度稀释，终浓度至0.009537ng/mL)，37℃温育60min。用稀释5000倍的山羊抗人IgG抗体(Fc特异性，偶联过氧化物酶)(厂家：sigma货号：A0170)作为检测抗体进行检测，37℃温育60min，然后用0.1mg/mL TMB(厂家：sigma货号：T2885)显色，15min后用2M HCl终止反应，在450nm/620nm下读板，之后使用GraphPadPrism软件进行四参数对数回归(4PL)模型拟合曲线，得到实验组的EC₅₀(半最大效应浓度)值。结合活性(相对活性，％)＝参比品的EC₅₀/药物组合物的EC₅₀×100％。

测试结果：结合活性测试结果如表9所示。

表9结合活性测试结果(％)

注：“/”代表未测定

从上述表9结果可知，药物组合物FS1-1至FS1-5经高温条件和长期条件下放置4周，所有药物组合物结合活性均未出现明显变化。

药物组合物FS2-1至FS2-4经高温条件和长期条件下放置4周，所有药物组合物结合活性均未出现明显变化。

1.2.7亚可见颗粒测试

测试方法：使用HIAC不溶性微粒计数仪作为检测仪器，利用光阻法对各药物组合物(样品)中的不溶性微粒进行统计测定。运行模式使用Run counter，设置参数如下表10所示。

表10亚可见颗粒测试参数

参数	设定值
		运行次数	4
稀释因子	1
		是否舍弃第一次运行结果	是

测试结果：亚可见颗粒测试结果如表11所示。其中，10≤X＜25μm是指颗粒粒径在10-25μm之间，25μm≤X是指颗粒粒径大于25μm。

表11亚可见颗粒测试结果(单位：颗/mL)

从上述表11结果可知，药物组合物FS2-1至FS2-4经高温条件和长期条件下放置4周，所有药物组合物亚可见颗粒均未出现明显变化。

综上所述，由FS1-1到FS1-5结果可知，高温条件下，从外观、rCE-SDS、nrCE-SDS和细胞活性的结果来看，所有药物组合物间无明显差异；从SEC-HPLC纯度和CEX主峰纯度结果显示FS1-1纯度下降相对较快，其他药物组合物无明显差异；长期条件下，从外观来看，FS1-1、FS1-2和FS1-5相对较优，其他药物组合物无明显差异，其他检测所有药物组合物均无异常。整体来看，药物组合物FS1-2和FS1-5相对其他药物组合物的稳定性更好。

由FS2-1到FS2-4结果可知，从SEC-HPLC、CEX-HPLC、rCE-SDS、nrCE-SDS、结合活性和亚可见颗粒结果来看，所有药物组合物间未出现明显差异，从外观来看，FS2-3和FS2-4中HUR33变体浓度为30mg/mL，在长期或高温条件下4周样品外观乳光均未出现进一步增强现象，两组无明显差异。整体来看，药物组合物FS2-3相对其他药物组合物的稳定性更好。

实施例2：包含CB6变体的药物组合物的稳定性测试

2.1实验样品

将CB6变体变体样品(CB638)使用Millipore0.11m²进行超滤浓缩(UF/DF)至浓度分别约为60mg/mL或40mg/mL，之后透析至相应的含稳定剂的缓冲液中。分别测定HUR33变体浓度，依照测定的浓度分别加入对应的含稳定剂的缓冲液和表面活性剂，将HUR33变体最终浓度分别调至50mg/mL、30mg/mL、20mg/mL和10mg/mL，且其他组分的含量分别如表12所示，得到不同的待测药物组合物。

将上述新配制的不同的待测药物组合物无菌灌装到2R西林瓶，FS3-1至FS3-4均为0.5mL/瓶，FS4-1至FS4-4均为2mL/瓶，之后根据稳定性考察条件进行稳定性放样并检测。不同的待测药物组合物的组分如表12所示，其中：组氨酸缓冲液是指L-组氨酸-L-组氨酸盐酸盐缓冲液。

表12不同的待测药物组合物的组分

2.2实验方法及结果

稳定性考察条件包括：

2.2.1外观测试

测试方法：同1.2.1外观测试。

测试结果：外观测试结果如表13所示。

表13外观测试结果

从上述表13结果可知，药物组合物FS3-1至FS3-4经高温条件下放置4周，均未发现明显可见异物，无明显乳光；经长期条件下放置4周，与T0相比所有药物组合物外观均出现较多颗粒，并且FS3-3出现大量细沙状颗粒。

药物组合物FS4-1至FS4-4经高温和长期条件下放置4周，均未发现明显可见异物，无明显乳光。

2.2.2SEC-HPLC纯度测试

测试方法：同1.2.2SEC-HPLC纯度测试。

测试结果：SEC-HPLC纯度测试结果如表14所示。

表14 SEC-HPLC纯度测试结果(％)

注：“/”代表未测定

从上述表14结果可知，药物组合物FS3-1至FS3-4经高温条件下放置4周，SEC-HPLC纯度均有下降，主要为片段峰的增加，所有药物组合物间无明显差异；经长期条件下放置4周，所有药物组合物SEC-HPLC纯度均未出现明显变化。

药物组合物FS4-1至FS4-4经高温条件下放置4周，SEC-HPLC纯度均有下降，不同药物组合物间无明显差异；经长期条件下放置4周，SEC-HPLC纯度均未出现明显变化。

2.2.3CEX-HPLC纯度测试

测试方法：采用安装有阳离子色谱柱(ProPac^TM WCX-10,4×250mm)的HPLC(Waterse2695仪器)进行CEX-HPLC纯度检测。用流动相A相将各药物组合物(样品)稀释至1.0mg/mL，混匀后加入到内衬管中，进样分析；流动相组成为A相：20mM MES溶液(pH 6.50±0.02)；B相：20mM MES+150mM NaCl溶液(pH 6.50±0.02)。采用峰面积归一化法计算主峰、酸性峰、碱性峰百分比。参比品的预处理方法和测试方法同样品。测试参数如下表15所示：

表15 CEX-HPLC纯度测试参数

测试结果：CEX-HPLC纯度测试结果如表16所示。

表16 CEX-HPLC纯度测试结果(％)

注：“/”代表未测定

从上述表16结果可知，药物组合物FS3-1至FS3-4经高温条件下放置4周，CEX-HPLC纯度均明显下降，主要为酸性峰的增加；其中FS3-1和FS3-4纯度下降较慢；经长期放置4周后，所有药物组合物无明显变化。

药物组合物FS4-1至FS4-4经高温条件条件下放置4周，CEX-HPLC纯度均有下降，药物组合物间未出现明显差异；长期条件下放置4周，所有药物组合物CEX-HPLC纯度均无明显变化。

2.2.4rCE-SDS纯度测试

测试方法：同1.2.4rCE-SDS纯度测试。

测试结果：rCE-SDS纯度测试结果如表17所示。

表17 rCE-SDS纯度测试结果(％)

注：“/”表示未测定

从上述表17结果可知，药物组合物FS3-1至FS3-4经高温条件下放置4周，rCE-SDS纯度均有下降趋势，所有药物组合物间无明显差异；经长期放置4周后，rCE-SDS纯度均未出现明显变化。

药物组合物FS4-1至FS4-4经高温条件下放置4周，rCE-SDS纯度均有下降，所有药物组合物间无明显差异；经长期条件下放置4周，纯度均未出现明显变化。

2.2.5nrCE-SDS纯度测试

测试方法：同1.2.5nrCE-SDS纯度测试。

测试结果：nrCE-SDS纯度测试结果如表18所示。

表18 nrCE-SDS纯度测试结果(％)

注：“/”表示未测定

从上述表18结果可知，药物组合物FS3-1至FS3-4经高温条件下放置4周，nrCE-SDS纯度均明显降低，所有药物组合物间无明显差异；经长期放置4周，nrCE-SDS纯度均未出现明显变化。

药物组合物FS4-1至FS4-4经高温条件下放置4周，nrCE-SDS纯度均有下降，所有药物组合物组间无明显差异；经长期条件下放置4周，nrCE-SDS纯度均未出现明显变化。

2.2.6结合活性测试

测试方法：使用浓度为3.0μg/mL的His标签的RBD蛋白溶液(苏州君盟)包板，37℃温育90min；洗板并用含有2％(w/v)脱脂牛奶的PBS溶液封闭；分别加入采用含有2％(w/v)脱脂牛奶的PBS溶液梯度稀释的包含CB6变体(CB6变体的浓度先采用含有2％(w/v)脱脂牛奶的PBS溶液稀释为40μg/mL，再4倍梯度稀释，终浓度至0.009537ng/mL)，37℃温育60min。用稀释5000倍的山羊抗人IgG抗体(Fc特异性，偶联过氧化物酶)(厂家：sigma货号：A0170)作为检测抗体进行检测，37℃温育60min，然后用0.1mg/mL TMB(厂家：sigma货号：T2885)显色，15min后用2M HCl终止反应，在450nm/620nm下读板，之后使用GraphPad Prism软件进行四参数对数回归(4PL)模型拟合曲线，得到实验组的EC₅₀(半最大效应浓度)值。结合活性(相对活性，％)＝参比品的EC₅₀/药物组合物的EC₅₀×100％。

测试结果：结合活性测试结果如表19所示。

表19结合活性测试结果(％)

注：“/”表示未测定

从上述表19结果可知，药物组合物FS3-1至FS3-4经高温条件和长期条件下放置4周，所有药物组合物结合活性均未出现明显变化。

药物组合物FS4-1至FS4-4经高温条件和长期条件下放置4周，所有药物组合物结合活性均未出现明显变化。

2.2.7亚可见颗粒测试

测试方法：同1.2.7亚可见颗粒测试。

测试结果：亚可见颗粒测试结果如表20所示。其中，10≤X＜25μm是指颗粒粒径在10～25μm之间，25μm≤X是指颗粒粒径大于25μm。

表20亚可见颗粒测试结果(单位：颗/mL)

从上述表20结果可知，药物组合物FS4-1至FS4-4经高温条件和长期条件下放置4周，所有药物组合物亚可见颗粒均未出现明显变化。

综上所述，由FS3-1到FS3-4结果可知，高温条件下，从外观、SEC-HPLC、rCE-SDS、nrCE-SDS和细胞活性结果来看，所有药物组合物间无明显差异；从CEX-HPLC结果来看，FS3-3和FS3-4CEX-HPLC纯度下降相对较慢，其他药物组合物无明显差异；长期条件下，从外观来看，FS3-1、FS3-2和FS3-4相对更好，其他检测所有药物组合物均无异常。整体来看，药物组合物FS3-1、FS3-2和FS3-4相对其他药物组合物的稳定性更好。

由FS4-1到FS4-4结果可知，从外观、SEC-HPLC、CEX-HPLC、rCE-SDS、nrCE-SDS、结合活性和亚可见颗粒结果来看，所有药物组合物间未出现明显差异，并且长期稳定性良好。

实施例3：包含HUR33变体和CB6变体的药物组合物的稳定性测试

3.1实验样品

将HUR33变体(HUR33-1)或CB6变体样品(CB638)分别使用Millipore0.11m²进行超滤浓缩(UF/DF)至浓度分别约为100mg/mL，之后透析至相应的含稳定剂的缓冲液中。分别测定HUR33变体和或CB6变体浓度，依照测定的浓度分别加入对应的含稳定剂的缓冲液和表面活性剂，将HUR33变体和或CB6变体最终浓度分别调至80mg/mL、50mg/mL和30mg/mL，将HUR33变体和CB6变体等浓度和等体积混合，且其他组分的含量分别如表21所示，得到不同的待测药物组合物。

将上述新配制的不同的待测药物组合物无菌灌装到2R西林瓶，2mL/瓶，之后根据稳定性考察条件进行稳定性放样并检测。不同的待测药物组合物的组分如表21所示，其中：组氨酸缓冲液是指L-组氨酸-L-组氨酸盐酸盐缓冲液。

表21不同的待测药物组合物的组分

3.2实验方法及结果

稳定性考察条件包括：

3.2.1外观测试

测试方法：同1.2.1外观测试。

测试结果：外观测试结果如表22所示。

表22外观测试结果

从上述表22结果可知，药物组合物FS5-1至FS5-3经高温条件下放置4周，乳光均增强，FS5-3出现较多颗粒；长期条件下放置2周，所有处方乳光均出现增强现象，并且乳光增强程度具有浓度依赖性，随着样品浓度越高，乳光现象更为明显。

3.2.2SEC-HPLC纯度测试

测试方法：采用安装有SEC色谱柱(TSKgel G3000SWXL，7.8mm×30cm，5μm)的HPLC(Waters e2695仪器)检测SEC纯度。用流动相将各药物组合物(样品)分别稀释至4.0mg/mL，混匀后加入内衬管中，直接进样分析；流动相组成为50mM磷酸盐溶液(含300mM氯化钠和300mM L-精氨酸盐酸盐)，pH 6.8±0.2。采用面积归一化法计算主峰、聚体和片段的相对百分比。参比品的预处理方法和测试方法同样品。测试参数如下表23所示：

表23 SEC-HPLC纯度测试参数

色谱条件	色谱参数
		色谱柱	TSKgel G3000SWXL，7.8mm×30cm，5μm
检测波长	280nm
		柱温箱	25±3℃
样品盘温度	5±3℃
		流速	1.0mL/min
进样量	25μL(样品浓度4.0mg/mL)
		流动相	50mM磷酸盐，300mM氯化钠，300mM L-精氨酸盐酸盐，pH 6.8±0.2
洗脱方式	等度洗脱
		洗脱时间	20min

测试结果：SEC-HPLC纯度测试结果如表24所示。

表24 SEC-HPLC纯度测试结果(％)

从上述表24结果可知，药物组合物FS5-1至FS5-3经高温条件下放置4周，SEC-HPLC纯度均略有下降，所有药物组合物间无明显差异；经长期条件下放置4周，所有药物组合物SEC-HPLC纯度均未出现明显变化。

3.2.3CEX-HPLC纯度测试

测试方法：采用安装有阳离子色谱柱(ProPac^TM WCX-10，4*250mm)的HPLC(Waterse2695仪器)进行CEX-HPLC纯度检测。用流动相A相将各药物组合物(样品)稀释至1.0mg/mL，混匀后加入到内衬管中，进样分析；流动相组成为A相：20mM MES溶液(pH 6.50±0.02)；B相：20mM MES+100mM NaCl溶液(pH 6.50±0.02)。采用面积归一化法分别计算CB6变体(主峰1)、HUR33变体(主峰2)以及组分1～3的百分比。参比品的预处理方法和测试方法同样品。测试参数如下表25所示：

表25 CEX-HPLC纯度测试参数

测试结果：CEX-HPLC纯度测试结果如表26所示。

表26 CEX-HPLC纯度测试结果(％)

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从上述表26结果可知，药物组合物FS5-1至FS5-3经高温条件和长期条件下放置4周，CEX-HPLC纯度均有下降，药物组合物间未出现明显差异。

3.2.4rCE-SDS和nrCE-SDS纯度测试

rCE-SDS测试方法：取稀释液(1×Sample Buffer Maurice CE-SDS PLUS，厂家：Proteinsimple，货号：046-567)将各药物组合物(样品)稀释至0.8mg/mL，然后取95μL稀释后样品与5μL 2-巯基乙醇混合均匀，3000rpm室温离心30s，之后70℃孵育15min。孵育完成后，冷却至室温，12000rpm室温离心5min。从样品管中分别取出75μL样品溶液至96孔板，避免产生气泡，1000g室温离心10min，使用毛细管电泳仪(Maurice)检测。参比品的预处理方法和测试方法同样品。

nrCE-SDS方法同1.2.5nrCE-SDS纯度测试。

测试结果：rCE-SDS和nrCE-SDS纯度测试结果如表27所示。

表27 rCE-SDS和nrCE-SDS纯度测试结果(％)

从上述表27结果可知，药物组合物FS5-1至FS5-3经高温条件下和长期条件下放置4周，rCE-SDS和nrCE-SDS纯度均有下降，所有药物组合物间无明显差异。

3.2.5结合活性测试

测试方法：同1.2.6结合活性测试。

测试结果：结合活性测试结果如表28所示。

表28结合活性测试结果(％)

从上述表28结果可知，药物组合物FS5-1至FS5-3经高温条件和长期条件下放置4周，所有药物组合物结合活性均未出现明显变化。

综上所述，由FS5-1到FS5-3结果可知，从SEC-HPLC和结合活性结果来看，所有药物组合物间未出现明显差异，从外观来看，高温条件下FS5-3外观相对较差，所有药物组合物间均有乳光增强现象。基于药物组合物在高温和长期条件下乳光具有浓度关联性，结合仅含HUR33变体或CB6变体的药物组合物测试结果和风险可控性，FS5-1稳定性相对较好。

实施例4：药物组合物的抗原亲和力测定

4.1实验方法

使用分子相互作用分析仪Octet RBD 96e(Sartorius Fortebio公司)，采用PBST将HUR33变体和CB6变体的浓度稀释为5μg/mL，分别捕获在Protein A(蛋白A)探针(厂商Sartorius Fortebio，货号18-5010)表面，其中PBST成分为PBS(厂商Sigma,货号P4417)和0.05vol％P20(厂商Cytiva，货号BR100054)，pH 7.4；再浸入到浓度分别为15nM、60nM的SARS-COV-2野生型毒株Spike蛋白的RBD溶液(苏州君盟)，检测得到结合信号；于PBST中解离，检测得到解离信号。使用Octet分析软件对数据进行分析拟合，得到结合解离曲线。

4.2实验结果

实验结果如表29和图1、图2所示，表29中显示了缔合速率常数(ka)、解离速率常数(kd)和亲和力(K_D)值。

表29药物组合物FS5-1与SARS-COV-2野生型毒株Spike蛋白的RBD的亲和力

上述结果表明，本申请的药物组合物FS5-1中的HUR33变体及CB6变体皆与野生型毒株RBD蛋白均有结合活性。

实施例5：药物组合物与SARS-COV-2野生型RBD的结合活性

5.1实验方法

使用浓度为3.0μg/mL的His标签的RBD蛋白溶液(苏州君盟)包板，37℃温育90min；洗板并用含有2％(w/v)脱脂牛奶的PBS溶液封闭；分别加入采用含有2％(w/v)脱脂牛奶的PBS溶液梯度稀释的包含HUR33变体及CB6变体的药物组合物FS5-1(HUR33变体及CB6变体的浓度先采用含有2％(w/v)脱脂牛奶的PBS溶液稀释为40μg/mL，再4倍梯度稀释，终浓度至0.009537ng/mL)，37℃温育60min。用稀释5000倍的山羊抗人IgG抗体(Fc特异性，偶联过氧化物酶)(厂家：sigma货号：A0170)作为检测抗体进行检测，37℃温育60min，然后用0.1mg/mL TMB(厂家：sigma货号：T2885)显色，15min后用2M HCl终止反应，在450nm/620nm下读板，之后使用GraphPad Prism软件进行四参数对数回归(4PL)模型拟合曲线，得到实验组的EC₅₀(半最大效应浓度)值。采用除不含HUR33变体及CB6变体、其他同药物组合物FS5-1的混合液体作为阴性对照组，样品处理方法同实验组。

5.2实验结果

实验结果如表30和图3所示。

表30 EC₅₀结果

	实验组	阴性对照组
			EC₅₀值(ng/mL)	7.7	NA

注：“NA”表示无明显活性

由表30和图3结果可知，包含HUR33变体及CB6变体的药物组合物FS5-1与RBD his结合曲线呈“S”型，有特异性结合活性，EC₅₀值为7.7ng/mL；而阴性对照组与RBD his无特异性结合活性。

以上所述仅为本申请的较佳实施例，并不用以限制本申请，凡在本申请的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请保护的范围之内。

Claims

1.一种药物组合物，包含选自HUR33变体和CB6变体中的至少一种的新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段；

所述HUR33变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；

所述CB6变体包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:15所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或氨基酸序列分别如SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:16和SEQ IDNO:22所示或分别如SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:20所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其中，所述HUR33变体包含氨基酸序列如SEQ IDNO:8或SEQ ID NO:9所示的重链可变区，和/或氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示的轻链可变区；

所述CB6变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:23所示的重链可变区，和/或氨基酸序列如SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:24所示的轻链可变区。

3.如权利要求1或2所述的药物组合物，其中，所述HUR33变体还包含氨基酸序列如SEQID NO:13所示的重链恒定区和氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示的轻链恒定区。

4.如权利要求1-3中任一项所述的药物组合物，其中，所述HUR33变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:11所示的重链，和/或氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示的轻链；

所述CB6变体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:26所示的重链，和/或氨基酸序列如SEQ IDNO:27或SEQ ID NO:28所示的轻链。

5.如权利要求1-4中任一项所述的药物组合物，其中，

所述HUR33变体包含：

氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；或

氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示的重链可变区和氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示的轻链可变区；或

氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示的重链和氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示的轻链；

所述CB6变体包含：

氨基酸序列分别如SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:15所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和氨基酸序列分别如SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:22所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；或

氨基酸序列如SEQ ID NO:23所示的重链可变区和氨基酸序列如SEQ ID NO:25所示的轻链可变区；或

氨基酸序列如SEQ ID NO:26所示的重链和氨基酸序列如SEQ ID NO:27所示的轻链。

6.如权利要求1-5中任一项所述的药物组合物，其中，所述HUR33变体和所述CB6变体的质量比为(1～10)：(10～1)或约1：1。

7.如权利要求1-6中任一项所述的药物组合物，其中，所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段的浓度为5～90mg/mL、5～85mg/mL、20～40mg/mL或约30mg/mL。

8.如权利要求1-7中任一项所述的药物组合物，其中，所述药物组合物还包括缓冲液，所述缓冲液选自醋酸缓冲液、柠檬酸缓冲液和组氨酸缓冲液中的至少一种；优选地，所述组氨酸缓冲液为组氨酸-组氨酸盐酸盐缓冲液；优选地，所述缓冲液的浓度为10～30mM、15～25mM或约20mM；优选地，所述缓冲液选自浓度为约20mM的组氨酸-组氨酸盐酸盐缓冲液。

9.如权利要求8所述的药物组合物，其中，所述缓冲液的pH为5.0～6.5或5.5～6.0。

10.如权利要求1-9中任一项所述的药物组合物，其中，所述药物组合物还包括稳定剂，所述稳定剂选自精氨酸、精氨酸盐、脯氨酸、甘氨酸、氯化钠、甘露醇、山梨醇、蔗糖、麦芽糖、木糖醇和海藻糖中的至少一种；优选地，所述药物组合物中，所述稳定剂的浓度为180～280mM或约230mM。

11.如权利要求10所述的药物组合物，其中，所述稳定剂为氯化钠；所述药物组合物中，所述氯化钠的浓度为50～200mM；或

所述稳定剂为甘露醇；所述药物组合物中，所述甘露醇的浓度为100～300mM或200～300mM；或

所述稳定剂为蔗糖；所述药物组合物中，所述蔗糖的浓度为180～280mM或约230mM；或

所述稳定剂为海藻糖；所述药物组合物中，所述海藻糖的浓度为180～280mM或约230mM。

12.如权利要求1-11中任一项所述的药物组合物，其中，所述药物组合物还包括表面活性剂，所述表面活性剂选自聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20和泊洛沙姆188中的至少一种；优选地，所述药物组合物中，以w/v计，所述表面活性剂的浓度为0.01％～0.05％或0.02％～0.04％；优选地，所述表面活性剂选自聚山梨醇酯80，所述药物组合物中，以w/v计，所述聚山梨醇酯80的浓度为0.02％～0.04％。

13.如权利要求1-12中任一项所述的药物组合物，其包含：

14.包含权利要求1-13中任一项所述的药物组合物的液体制剂。

15.如权利要求14所述的液体制剂，其中，所述液体制剂含有葡萄糖溶液或氯化钠溶液以及权利要求1-13中任一项所述的药物组合物；优选地，以w/v计，所述氯化钠溶液的浓度为0.85％～0.9％，所述葡萄糖溶液的浓度为5％～25％；优选地，所述液体制剂中，所述新型冠状病毒中和抗体或其抗原结合片段的浓度为0.1～50mg/mL，优选为0.5～30mg/mL；优选地，所述液体制剂的pH为5.0～7.0。

16.如权利要求1-13中任一项所述的药物组合物或权利要求14或15所述的液体制剂在制备用于预防、治疗、检测或诊断与新型冠状病毒感染相关的疾病的药物中的用途。