CN117582402B - 一种含白细胞提取物的凝胶及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种含白细胞提取物的凝胶及其制备方法和应用。所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料按质量百分含量计包括以下组分:白细胞提取物1~10%、泛醇1~5%、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液0.5~2.5%、肌肽0.5~2%、天然类肝素0.1~0.5%、尿囊素0.05~0.2%、保湿剂1~15%、凝胶基质0.5~2.5%、络合剂0.01~0.05%,余量为条件培养液。本发明含白细胞提取物的凝胶不含药物成分,配方简单,对于带状疱疹后遗痛的疗效十分显著,无复发现象;且本发明所述凝胶对皮肤没有任何损伤,致敏性极低。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,尤其是涉及一种含白细胞提取物的凝胶及其制备方法和应用。
背景技术
带状疱疹(herpes zoster, HZ)是由初次感染人体后潜伏在脊髓背根神经节或颅神经节内的水痘带状疱疹病毒(varicella zoster virus, VZV)再次激活后所致的感染性疾病。临床表现为沿神经支配区域分布的丘疹和水疱并伴随持续性烧灼样、刀割样、撕裂样的自发性疼痛。该病可以发生于任何年龄,其发生率随年龄增加显著上升,主要影响中老年人群。《中国带状疱疹诊疗专家共识(2022版)》报道,全球普通人群带状疱疹的年发病率为0.3~0.5%,而且50岁以上人群带状疱疹发病率增至0.5~1.1%。我国带状疱疹发病率与其他国家和地区基本一致,50岁以上人群带状疱疹发病率为每年0.3~0.6%,且女性终身患病率略高于男性,可达到0.4~0.8%。
带状疱疹后遗神经痛(postherpetic neuralgia,PHN)是HZ最常见的并发症或后遗症,它是最常见的感染后神经病理性疼痛,也是一种复杂的神经病理性疼痛,其发病机制目前尚未完全清楚,一旦发生则往往对患者及其家庭造成显著的痛苦和沉重的负担,而临床治疗PHN又较为困难。PHN是HZ最常见的并发症,国外一般将其定义为HZ皮损好转后疼痛持续3个月及以上,中国较公认的说法是皮疹愈合后持续1个月及以上的疼痛这定义为PHN。《带状疱疹后神经痛诊疗中国专家共识(2016)》报道,约9~34%的带状疱疹患者会发PHN。PHN的发病率和带状疱疹相似,患病率均有随年龄增加而逐渐升高的趋势,60岁及以上的带状疱疹患者约65%会发生PHN,70岁及以上者中则可达75%。其中30~50%的带状疱疹后神经痛患者疼痛持续超过1年,部分病程甚至可达10年。
目前,PHN患者临床上可通过抗病毒、糖皮质激素、止痛药物治疗缩短患者疼痛时间和皮疹愈合时间。但因老年带状疱疹患者免疫力低下、体质较弱,其皮疹愈合后容易并发持续性神经病理性疼痛。目前,我国针对PHN的治疗主要包括药物治疗、介入治疗、物理治疗和心理治疗等。推荐的一线治疗药物主要有钙离子通道阻滞剂普瑞巴林、三环抗抑郁药、阿片类药物、糖皮质激素、神经妥乐平、曲马多、A型肉毒毒素以及5%利多卡因凝胶贴片等。普瑞巴林常引起头晕、嗜睡、共济失调、外周水肿等。为减少单个药物使用最大剂量引起的不良反应,常需多种药物联合治疗,目前临床探索出的联合用药方式,如5%利多卡因凝胶贴片联合普瑞巴林、小剂量***联合普瑞巴林、A型肉毒毒素联合普瑞巴林,虽然均取得了较好的临床效果,且不增加甚至可减少不良反应,但副作用仍然就为明显。药物联合的介入,虽然可以减少副作用,但有创伤,同时也增加了造成神经伤害的风险。而药物联合物理疗法,也常常造成物理损伤,治疗效果也不稳定。由于PHN的发病机制尚不明确,因此目前一种治疗方式很难取得有满意疗效,联合两种或两种以上方法虽然可取得较好的效果,但是仍然无法从根本上解决PHN的根治问题。
虽然PHN的发病机制尚不完全清楚,但有研究发现PHN的发病可能与病毒所致神经损伤、外周神经炎性反应以及神经再生后传导功能异常、中枢神经敏感化、免疫力低下造成的免疫细胞亚群的改变,甚至是焦虑或抑郁有关。许多细胞因子,如肿瘤坏死因子(TumorNecrosis Factor,TNF)-α、白介素(interleukin,IL) IL-1、IL-6、IL-8、IL-10等均也已被证实会引发神经痛。事实上,HZ引起的神经损伤的确会导致TNF-α、IL-1升高,这表明提示PHN的发生与炎性因子密切相关。
有鉴于此,特提出本发明。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种含白细胞提取物的凝胶。本发明含白细胞提取物的凝胶不含药物成分,配方简单,各组分配合具有协同增效的作用,对于带状疱疹后遗痛的疗效十分显著。
本发明的目的之二在于提供一种含白细胞提取物的凝胶的制备方法。
本发明的目的之三在于一项所述的含白细胞提取物的凝胶在制备用于治疗带状疱疹后遗神经痛类产品中的应用。本发明含白细胞提取物的凝胶可有效治疗PHN,特别是治愈了带状疱疹后遗神经痛长达11年的患者。治愈至今已达半年,而且没有复发;且与其他治疗相比,本发明所述凝胶对皮肤没有任何损伤,致敏性极低。
为了实现本发明的上述目的,特采用以下技术方案:
第一方面,本发明提供一种含白细胞提取物的凝胶,所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料按质量百分含量计包括以下组分:
白细胞提取物1~10%、泛醇1~5%、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液0.5~2.5%、肌肽0.5~2%、天然类肝素0.1~0.5%、尿囊素0.05~0.2%、保湿剂1~15%、凝胶基质0.5~2.5%、络合剂0.01~0.05%,余量为条件培养液。
以所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料的总质量为100%计,所述白细胞提取物的添加量为1~10%,例如可以是1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%等。
以所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料的总质量为100%计,所述白泛醇的添加量为1~5%,例如可以是1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%、5%等。
以所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料的总质量为100%计,所述明串球菌/萝卜根发酵产物滤液的添加量为0.5~2.5%,例如可以是0.5%、0.6%、0.8%、1%、1.2%、1.5%、1.8%、2%、2.2%、2.5%等。
以所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料的总质量为100%计,所述肌肽的添加量为0.5~2%,例如可以是0.5%、0.6%、0.8%、1%、1.2%、1.5%、1.8%、2%等。
以所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料的总质量为100%计,所述天然类肝素的添加量为0.1~0.5%,例如可以是0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%等。
以所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料的总质量为100%计,所述尿囊素的添加量为0.05~0.2%,例如可以是0.05%、0.06%、0.08%、0.1%、0.12%、0.14%、0.16%、0.18%、0.2%等。
以所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料的总质量为100%计,所述保湿剂的添加量为1~15%,例如可以是1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%等。
以所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料的总质量为100%计,所述凝胶基质的添加量为0.5~2.5%,例如可以是0.5%、0.6%、0.8%、1%、1.2%、1.5%、1.8%、2%、2.2%、2.5%等。
以所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料的总质量为100%计,所述络合剂的添加量为0.01~0.05%,例如可以是0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%等。
首先,在本发明所述凝胶的制备原料中添加有白细胞提取物,其富含多种生长和细胞因子,使得凝胶的消炎镇痛、活血解毒,修复皮损和促进再生等作用大大提升,有效缓解病毒所致神经损伤、外周神经炎性反应的征兆。从而更为有效地解决PHN的根治问题。
更近一步地,本发明所述白细胞提取物优选为以原有专利《一种白细胞提取物、抗皱紧致面霜及其制备方法》(申请公布号为CN116948961A;申请号为2023112134006)提取的白细胞提取物为原料。
更为具体地,所述白细胞提取物的制备方法包括以下步骤:
(1)采集:采集产后马或驴脐带血;
(2)分离:对脐带血进行离心处理,得到白细胞层上清液;其中,所述分离中离心处理的参数为:离心力为300~600 g,离心的时间为10~20 min;且所述白细胞层上清液需在-85℃~-75℃的温度条件下冷冻保存;
(3)病毒检测:对白细胞层上清液进行RT-PCR荧光和/或PCR荧光定量检测病毒;其中,所述病毒包括甲1型马流行性感冒病毒、2型马流行性感冒病毒、马传染性贫血病毒、马疱疹病毒、马动脉炎病毒、委内瑞拉马脑脊髓炎病毒、东西部马脑髓炎病毒、***病毒和非洲马瘟病毒;
(4)微生物检测:对白细胞层上清液进行内毒素和细菌培养检测微生物;其中,所述内毒素检测采用内毒素鲎试法;所述细菌培养检测采用琼脂平板培养法;
(5)提取:对病毒检测和微生物检测合格的白细胞层上清液进行离心处理,提取得到白细胞提取物;其中,所述合格的白细胞层上清液的标准为:PCR检测均为阴性,内毒素检测低于0.125 EU/mL,细菌检测无检出;所述提取中离心处理的参数为:离心力为4500~5500g,离心的时间为25~30 min;所述离心处理上清液需依次经过0.45 μm和0.1 μm的滤膜进行过滤; 所述白细胞提取物需在-85℃~-75℃的温度条件下冷冻保存。
其次,除添加白细胞提取物为主要活性成分的同时,还添加多种营养成分,各种组分相互配合,从而进一步提高了对于带状疱疹后遗痛的疗效,减少药物的不良反应,缩短带状疱疹治疗时间,减少后遗性疼痛的发生。
其中,泛醇的皮肤保湿和皮肤保护膜修复能力促进表皮再生;此外,还可以促进成纤维细胞的增殖和上皮化,促进伤口愈合,还可以诱导红斑减少和弹性固体组织再生。明串球菌/萝卜根发酵产物滤液不仅帮助配方有效控制微生物,更帮助肌肤增强保湿,增强本发明所述凝胶的渗透性,使其更易吸收,深层保湿,滋养修护肌肤,修复受损或缺乏养分的细胞。肌肽作为人体中天然存在的水溶性二肽,促进细胞修复生长,增强细胞抗损伤能力;完善头皮屏障,并能够清除自由基,防止皮肤再次氧化受损。天然类肝素可以对疤痕组织起到抗炎、抗增生、软化或平滑的作用。尿囊素具有促进细胞生长、加快伤口愈合、软化角质蛋白等作用。
优选地,所述保湿剂为质量比为(1~10):(1~5)的甘油和丙二醇的组合;
其中,“1~10”例如可以是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10等;
其中,“1~5”例如可以是1、2、3、4、5等。
优选地,所述凝胶基质为卡波姆,优选为卡波姆980。
优选地,所述络合剂为乙二胺四乙酸钠。
作为本发明一优选实施方式,所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料按质量百分含量计具体由以下组分组成:
白细胞提取物1~10%、泛醇1~5%、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液0.5~2.5%、肌肽0.5~2%、天然类肝素0.1~0.5%、尿囊素0.05~0.2%、甘油1~10%、丙二醇1~5%、卡波姆980 0.5~2.5%、乙二胺四乙酸钠0.01~0.05%,余量为条件培养液。
优选地,所述条件培养液由间充质细胞在含有白细胞提取物的培养液中培养得到。
优选地,所述培养液选自DMEM/F12培养基、DMEM培养基或α-MEM培养基中的任意一种。
优选地,所述白细胞提取物在培养液中的添加量为5~15 wt%,例如可以是5 wt%、6wt%、7 wt%、8 wt%、9 wt%、10 wt%、11 wt%、12 wt%、13 wt%、14 wt%、15 wt%等。
优选地,所述条件培养液由以下步骤制备得到:
(a)将白细胞提取物和培养液混合,得到含有白细胞提取物的培养液;
(b)将脐带间充质干细胞和含有白细胞提取物的培养液混合,进行离心处理后,弃去上清液,得到重悬细胞;再将重悬细胞置于含有白细胞提取物的培养液中,进行培养;
(c)待细胞生长至70~80%(例如可以是70%、72%、74%、76%、78%、80%等)汇合度,收集上清液并进行离心处理,得到条件培养液。
优选地,步骤(b)中,所述离心处理的离心力为1000~2000 g,例如可以是1000 g、1200 g、1400 g、1600 g、1800 g、2000 g等,优选为1500 g;所述离心处理的时间为1~10min,例如可以是1 min、2 min、3 min、4 min、5 min、6 min、7 min、8 min、9 min、10 min等,优选为5 min。
优选地,步骤(b)中,弃去上清液,得到重悬细胞,进行细胞计数。
优选地,步骤(b)中,所述培养在T175培养瓶中进行。
优选地,步骤(b)中,所述重悬细胞的接种量为1×103~1×105个细胞/cm2,例如可以是1×103个细胞/cm2、2×103个细胞/cm2、4×103个细胞/cm2、6×103个细胞/cm2、8×103个细胞/cm2、1×104个细胞/cm2、2×104个细胞/cm2、4×104个细胞/cm2、6×104个细胞/cm2、8×104个细胞/cm2、1×105个细胞/cm2等,优选为1×104个细胞/cm2。
优选地,步骤(b)中,所述培养的温度为36~38℃,例如可以是36℃、36.5℃、37℃、37.5℃、38℃等,优选为37℃。
优选地,步骤(b)中,所述培养在5%的CO2培养箱中进行。
优选地,步骤(c)中,所述收集上清液的间隔时间为42~54 h,例如可以是42 h、43h、44 h、45 h、46 h、47 h、48 h、49 h、50 h、51 h、52 h、53 h、54 h等,优选为48 h。
优选地,步骤(c)中,所述离心处理具体为:将收集得到的上清液置于离心管中离心后,再次收集上清液,即为所述条件培养液。
优选地,步骤(c)中,所述离心处理的离心力为2000~4000 g,例如可以是2000 g、2200 g、2400 g、2600 g、2800 g、3000 g、3200 g、3400 g、3600 g、3800 g、4000 g等,优选为3000 g;所述离心处理的时间为1~10 min,例如可以是1 min、2 min、3 min、4 min、5min、6 min、7 min、8 min、9 min、10 min等,优选为5 min。
优选地,步骤(c)中,所述条件培养液需经过0.2 μm孔径的滤膜进行过滤处理。
作为本发明一优选实施方式,所述条件培养液由以下步骤制备得到:
(a)将白细胞提取物和培养液混合,得到含有5~15 wt%的白细胞提取物的培养液;
(b)先将脐带间充质干细胞加入含白细胞提取物的培养液中,轻轻混匀,再以1000~2000 g的离心力离心1~10 min,弃上清液,得到重悬细胞,进行细胞计数;再于培养瓶中加入含白细胞提取物的培养液,按1×103~1×105个细胞/cm2接种至培养瓶中,轻轻混匀,放入36~38℃、5% CO2培养箱中培养;
(c)待细胞生长至70~80%汇合度,每42~54 h收取上清培养液,并换液;收集的上清培养液以2000~4000 g的离心力离心1~10 min,取上清;上清液经过过滤,得到所述条件培养液。
第二方面,本发明提供一种如第一方面所述的含白细胞提取物的凝胶的制备方法,所述制备方法包括以下步骤:
将含白细胞提取物的凝胶的制备原料按配比进行混合,再依次进行调节pH和离心处理,得到所述的含白细胞提取物的凝胶。
优选地,所述调节pH采用的试剂为5~15 wt%(例如可以是5 wt%、6 wt%、7 wt%、8wt%、9 wt%、10 wt%、11 wt%、12 wt%、13 wt%、14 wt%、15 wt%等)的氢氧化钠水溶液。
优选地,调节pH至混合体系的pH为6.8~7.2,例如可以是6.8、6.9、7.0、7.1、7.2等。
优选地,所述离心处理的离心力为2000~4000 g,例如可以是2000 g、2200 g、2400g、2600 g、2800 g、3000 g、3200 g、3400 g、3600 g、3800 g、4000 g等,优选为3000 g;离心处理的时间为5~20 min,例如可以是5 min、6 min、8 min、10 min、12 min、14 min、16 min、18 min、20 min等。
作为本发明一优选实施方式,所述含白细胞提取物的凝胶的制备方法,具体包括以下步骤:
(1)取部分条件培养液与白细胞提取物、泛醇、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液、肌肽、天然类肝素、尿囊素、保湿剂、凝胶基质、络合剂混合后,再以剩余的条件培养液补至100%,混匀;
(2)采用碱性pH调节剂将步骤(1)得到的混合凝胶的pH值调节至6.8~7.2,混匀;
(3)将步骤(2)混合凝胶以2000~4000 g的离心力离心5~20 min后,得到所述含白细胞提取物的凝胶。
第三方面,本发明提供一种如第一方面所述的含白细胞提取物的凝胶在制备用于治疗带状疱疹后遗神经痛类产品中的应用。
相对于现有技术,本发明具有以下有益效果:
(1)本发明含白细胞提取物带状疱疹后遗神经痛凝胶不含药物成分,配方简单,对于带状疱疹后遗痛的疗效十分显著;
(2)治愈了带状疱疹后遗神经痛长达11年的患者。治愈至今已达半年,而且没有复发,且与其他治疗相比,本凝胶对皮肤没有任何损伤,致敏性极低。对患者而言在不知不觉中得到了治疗。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为右腹及右侧腰部存在带状疱疹的患者使用本发明实施例1提供的含白细胞提取物的凝胶前后对比图。
图2为右后背及右侧腰部存在带状疱疹的患者使用本发明实施例1提供的含白细胞提取物的凝胶前后对比图。
图3为腹部存在带状疱疹的患者使用本发明实施例1提供的含白细胞提取物的凝胶前后对比图。
图4为上臂部存在带状疱疹的患者使用本发明实施例1提供的含白细胞提取物的凝胶前后对比图。
具体实施方式
除非本文另有定义,连同本发明使用的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员通常理解的含义。术语的含义和范围应当清晰,然而,在任何潜在不明确性的情况下,本文提供的定义优先于任何字典或外来定义。在本申请中,除非另有说明,“或”的使用意味着“和/或”。此外,术语“包括”及其他形式的使用是非限制性的。
一般地,连同本文描述的细胞和组织培养、分子生物学、免疫学、微生物学、遗传学以及蛋白和核酸化学和杂交使用的命名法和其技术是本领域众所周知和通常使用的那些。除非另有说明,本发明的方法和技术一般根据本领域众所周知,且如各种一般和更具体的参考文献中所述的常规方法来进行,所述参考文献在本说明书自始至终引用和讨论。酶促反应和纯化技术根据制造商的说明书、如本领域通常实现的或如本文所述来进行。连同本文描述的分析化学、合成有机化学以及医学和药物化学使用的命名法、以及其实验室程序和技术是本领域众所周知和通常使用的那些。
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
下面通过实施例对本发明作进一步说明。如无特别说明,实施例中的材料为根据现有方法制备而得,或直接从市场上购得。
制备例1
本制备例提供一种白细胞提取物的制备方法,所述白细胞提取物的制备方法包括以下步骤:
(1)采集产后马脐带血,室温运送到实验室;
(2)离心分离含白细胞层上清,并置于-80℃冰箱冷冻保存;
离心处理的参数为:离心力为300 g,离心的时间为10 min;
(3)RT-PCR荧光或PCR荧光定量检测马流行性感冒病毒(甲1型和2型)、马传染性贫血病毒、马疱疹病毒、马动脉炎病毒、委内瑞拉马脑脊髓炎病毒、东西部马脑髓炎病毒、***病毒、非洲马瘟病毒;
(4)通过内毒素和细菌培养检测微生物污染;所述内毒素检测采用内毒素鲎试法;所述细菌培养检测采用琼脂平板培养法;
(5)解冻没有污染的白细胞上清,分离提取白细胞提取物;
所述没有污染的白细胞层上清液的标准为:PCR检测均为阴性,内毒素检测低于0.125 EU/mL,细菌检测无检出;
所述离心处理的参数为:离心力为5000 g,离心的时间为28 min;
(6)经过0.45 μm和0.1 μm抽滤除菌后,于-80℃长期保存备用。
制备例2
本制备例提供一种条件培养液,所述条件培养液由以下步骤制备得到:
(a)向DMEM/F12(Gibco)培养液中添加10%的制备例1提供的白细胞提取物,混匀,得到含有白细胞提取物的培养液。
(b)将经37℃解冻后的脐带间充质干细胞转移至加入8 mL上述含有白细胞提取物的培养液的15 mL离心管中,轻轻混匀,以1500 g的离心力离心5 min。弃上清液,得到2 mL重悬细胞,进行细胞计数。再在T175培养瓶中加入20 mL上述含有白细胞提取物的培养液,按1×104个细胞/cm2接种至培养瓶中,轻轻摇晃混匀,放入37℃、5% CO2培养箱中培养。
(c)待细胞生长至70%汇合度时,每48 h收取上清培养液,并换液。收集的上清培养液置于50 mL离心管以3000 g的离心力离心5 min,取上清。上清液经过0.2 μm过滤后,得到条件培养液,然后置于-20℃保存备用。
制备例3
本制备例提供一种条件培养液,所述条件培养液由以下步骤制备得到:
(a)向DMEM(Gibco)培养液中添加10%的制备例1提供的白细胞提取物,混匀,得到含有白细胞提取物的培养液。
(b)将经37℃解冻后的脐带间充质干细胞转移至加入8 mL上述含有白细胞提取物的培养液的15 mL离心管中,轻轻混匀,以1500 g的离心力离心5 min。弃上清液,得到2 mL重悬细胞,进行细胞计数。再在T175培养瓶中加入20 mL上述含有白细胞提取物的培养液,按1×104个细胞/cm2接种至培养瓶中,轻轻摇晃混匀,放入37℃、5% CO2培养箱中培养。
(c)待细胞生长至75%汇合度时,每48 h收取上清培养液,并换液。收集的上清培养液置于50 mL离心管以3000 g的离心力离心5 min,取上清。上清液经过0.2 μm过滤后,得到条件培养液,然后置于-20℃保存备用。
制备例4
本制备例提供一种条件培养液,所述条件培养液由以下步骤制备得到:
(a)向α-MEM(Gibco)培养液中添加10%的制备例1提供的白细胞提取物,混匀,得到含有白细胞提取物的培养液。
(b)将经37℃解冻后的脐带间充质干细胞转移至加入8 mL上述含有白细胞提取物的培养液的15 mL离心管中,轻轻混匀,以1500 g的离心力离心5 min。弃上清液,得到2 mL重悬细胞,进行细胞计数。再在T175培养瓶中加入20 mL上述含有白细胞提取物的培养液,按1×104个细胞/cm2接种至培养瓶中,轻轻摇晃混匀,放入37℃、5% CO2培养箱中培养。
(c)待细胞生长至80%汇合度时,每48 h收取上清培养液,并换液。收集的上清培养液置于50 mL离心管以3000 g的离心力离心5 min,取上清。上清液经过0.2 μm滤膜过滤后,得到条件培养液,然后置于-20℃保存备用。
制备例5
本制备例提供一种条件培养液,所述条件培养液由以下步骤制备得到:
(a)向MSC SFM(Gibco)培养液中添加10%的制备例1提供的白细胞提取物,混匀,得到含有白细胞提取物的培养液。
(b)将经37℃解冻后的脐带间充质干细胞转移至加入8 mL上述含有白细胞提取物的培养液的15 mL离心管中,轻轻混匀,以1500 g的离心力离心5 min。弃上清液,得到2 mL重悬细胞,进行细胞计数。再在T175培养瓶中加入20 mL上述含有白细胞提取物的培养液,按1×104个细胞/cm2接种至培养瓶中,轻轻摇晃混匀,放入37℃、5% CO2培养箱中培养。
(c)待细胞生长至80%汇合度时,每48 h收取上清培养液,并换液。收集的上清培养液置于50 mL离心管以3000 g的离心力离心5 min,取上清。上清液经过0.2 μm滤膜过滤后,得到条件培养液,然后置于-20℃保存备用。
实施例1
本实施例提供一种含白细胞提取物的凝胶,所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料按质量百分含量计具体由以下组分组成:
白细胞提取物5%、泛醇3%、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液1.5%、肌肽1%、天然类肝素0.3%、尿囊素0.1%、医用甘油5%、丙二醇3%、医用级无菌的卡波姆980 2%、乙二胺四乙酸钠0.02%,余量为条件培养液;
其中,白细胞提取物为制备例1提供的白细胞提取物;条件培养液为制备例2提供的条件培养液。
本实施例所述含白细胞提取物的凝胶由以下步骤制备得到:
(1)在无菌的500 mL离心管中,加入条件培养液,再按照上述配比加入白细胞提取物、泛醇、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液、肌肽、天然类肝素、尿囊素、甘油、丙二醇、卡波姆980、乙二胺四乙酸钠,最后再用条件培养液补齐到500 mL,混匀。
(2)将步骤(1)得到的混合凝胶用经过0.2 μm滤膜过滤除菌的10 wt%的NaOH调节凝胶pH值为7.0,混匀。
(3)将步骤(2)混合凝胶以3000 g离心10 min后,分装在15 mL不透光亚克力真空瓶中,4℃保存。
实施例2
本实施例提供一种含白细胞提取物的凝胶,所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料按质量百分含量计具体由以下组分组成:
白细胞提取物8%、泛醇2%、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液2%、肌肽1.5%、天然类肝素0.2%、尿囊素0.08%、医用甘油10%、丙二醇2%、医用级无菌的卡波姆980 1%、乙二胺四乙酸钠0.03%,余量为条件培养液;
其中,白细胞提取物为制备例1提供的白细胞提取物;条件培养液为制备例3提供的条件培养液。
本实施例所述含白细胞提取物的凝胶由以下步骤制备得到:
(1)在无菌的500 mL离心管中,加入条件培养液,再按照上述配比加入白细胞提取物、泛醇、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液、肌肽、天然类肝素、尿囊素、甘油、丙二醇、卡波姆980、乙二胺四乙酸钠,最后再用条件培养液补齐到500 mL,混匀。
(2)将步骤(1)得到的混合凝胶用经过0.2 μm滤膜过滤除菌的10 wt%的NaOH调节凝胶pH值为7.0,混匀。
(3)将步骤(2)混合凝胶以3000 g离心10 min后,分装在15 mL不透光亚克力真空瓶中,4℃保存。
实施例3
本实施例提供一种含白细胞提取物的凝胶,所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料按质量百分含量计具体由以下组分组成:
白细胞提取物3%、泛醇5%、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液2.5%、肌肽2%、天然类肝素0.5%、尿囊素0.2%、医用甘油3%、丙二醇5%、医用级无菌的卡波姆980 0.5%、乙二胺四乙酸钠0.01%,余量为条件培养液;
其中,白细胞提取物为制备例1提供的白细胞提取物;条件培养液为制备例4提供的条件培养液。
本实施例所述含白细胞提取物的凝胶由以下步骤制备得到:
(1)在无菌的500 mL离心管中,加入条件培养液,再按照上述配比加入白细胞提取物、泛醇、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液、肌肽、天然类肝素、尿囊素、甘油、丙二醇、卡波姆980、乙二胺四乙酸钠,最后再用条件培养液补齐到500 mL,混匀。
(2)将步骤(1)得到的混合凝胶用经过0.2 μm滤膜过滤除菌的10 wt%的NaOH调节凝胶pH值为7.0,混匀。
(3)将步骤(2)混合凝胶以3000 g离心10 min后,分装在15 mL不透光亚克力真空瓶中,4℃保存。
实施例4
本实施例提供一种含白细胞提取物的凝胶,所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料按质量百分含量计具体由以下组分组成:
白细胞提取物5%、泛醇3%、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液1.5%、肌肽1%、天然类肝素0.3%、尿囊素0.1%、医用甘油5%、丙二醇3%、医用级无菌的卡波姆980 2%、乙二胺四乙酸钠0.02%,余量为条件培养液;
其中,白细胞提取物为制备例1提供的白细胞提取物;条件培养液为制备例5提供的条件培养液。
本实施例所述含白细胞提取物的凝胶由以下步骤制备得到:
(1)在无菌的500 mL离心管中,加入条件培养液,再按照上述配比加入白细胞提取物、泛醇、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液、肌肽、天然类肝素、尿囊素、甘油、丙二醇、卡波姆980、乙二胺四乙酸钠,最后再用条件培养液补齐到500 mL,混匀。
(2)将步骤(1)得到的混合凝胶用经过0.2 μm滤膜过滤除菌的10 wt%的NaOH调节凝胶pH值为7.0,混匀。
(3)将步骤(2)混合凝胶以3000 g离心10 min后,分装在15 mL不透光亚克力真空瓶中,4℃保存。
对比例1
本对比例提供一种凝胶,与实施例1的区别在于,不添加白细胞提取物,缺失部分以条件培养液补至100%,其他组分含量及制备方法与实施例1完全一致。
对比例2
本对比例提供一种凝胶,与实施例1的区别在于,将制备例2提供的条件培养液替换成等质量的MSC SFM(Gibco)培养液,其他组分含量及制备方法与实施例1完全一致。
对比例3
本对比例提供一种凝胶,与实施例1的区别在于,不添加泛醇,甘油含量增至8%,其他组分含量及制备方法与实施例1完全一致。
对比例4
本对比例提供一种凝胶,与实施例1的区别在于,不添加肌肽,天然类肝素含量增至0.8%、尿囊素含量增至0.6%,其他组分含量及制备方法与实施例1完全一致。
对比例5
本对比例提供一种凝胶,与实施例1的区别在于,不添加天然类肝素,尿囊素含量增至0.4%,其他组分含量及制备方法与实施例1完全一致。
对比例6
本对比例提供一种凝胶,与实施例1的区别在于,不添加尿囊素,天然类肝素含量增至0.4%,其他组分含量及制备方法与实施例1完全一致。
测试例1
测试样品:实施例1~4提供的含白细胞提取物的凝胶、以及对比例1~6提供的凝胶;
测试方法:排除患有严重感染、血液***以及神经***疾病、过敏体质,或对本发明凝胶过敏、患有精神类疾病的患者,选择符合试验条件的自愿者患者,签署知情同意书并参与试验。参加试验的患者同意停止所有用于治疗带状疱疹后遗神经痛的外用,内服和注射用药。选择带状疱疹后遗神经痛的患者疼痛区域,用湿巾擦拭干净后,给予凝胶涂抹治疗,每日2次。对照组则选择常规对症治疗的患者。所用药物为甲钴胺片每日3次、每次0.5mg。
临床试验结果:含白细胞提取物带状疱疹后遗神经痛凝胶治疗PHN的有效率具体测试结果如表1所示:
表1
其中,其中,痊愈、显效、无效、总有效率中,括号前的数据代表例数,括号内的数字代表该项目所占人数的比例,a、b代表卡方检验二者之间差异显著(P<0.05)。
临床治疗效果统计:临床治疗痊愈,即疼痛感及伴发症状完全消失;显效,疼痛感及伴发症状明显缓解;无效,疼痛感未减轻,或者减轻不明显,其他症状未改善或加重。总有效率=(临床治愈+显效)。
使用时间及显效的用时测试结果如下表2所示:
表2
在试验过程中,无效的患者使用凝胶的时长仅为6~10天,平均为8.3天。这些患者继续使用后是否起效尚无法定论,本发明认为无效。本发明的凝胶治愈PHN的用时平均为46.06天,开始见效的用时平均为6.68天。
由表1和表2测试结果可知,含白细胞提取物的凝胶其治疗的总有效率高达60~76%,且治愈的用时平均为46.06天,开始见效的用时平均为6.68天。由此说明本发明含白细胞提取物带状疱疹后遗神经痛凝胶对于带状疱疹后遗痛的疗效十分显著,且各种组分相互配合,从而进一步提高了对于带状疱疹后遗痛的疗效,减少药物的不良反应,缩短带状疱疹治疗时间,减少后遗性疼痛的发生。
其中,由对比例1的数据明显能够看出,不添加白细胞提取物的凝胶其治疗的总有效率下降及其明显,且需延长使用凝胶的时长才能在一定程度上提高凝胶治愈PHN的效果,显效的平均用时极长。
其中,由对比例2~6的数据明显能够看出,虽然表1的总有效率与实施例1对比不明显,但从表2的数据能够看出,这些凝胶是在延长使用凝胶的时长基础上才在一定程度上提高凝胶治愈PHN的效果,且显效的平均用时相对较长,由此说明本发明各种组分相互配合,具有协同效果,能够提高带状疱疹治疗效果,并进一步治愈和显效的时间。
测试例2
测试样品:对照组(甲钴胺对照组);治疗组(实施例1提供的含白细胞提取物的凝胶);
测试方法:排除患有严重感染、血液***以及神经***疾病、过敏体质,或对本发明凝胶过敏、患有精神类疾病的患者,选择符合试验条件的自愿者患者,签署知情同意书并参与试验。参加试验的患者同意停止所有用于治疗带状疱疹后遗神经痛的外用,内服和注射用药。选择带状疱疹后遗神经痛的患者疼痛区域,用湿巾擦拭干净后,给予凝胶涂抹治疗,每日2次。同时统计治疗前后国际通用视觉模拟量表(VAS)评分结果。
具体测试结果如下表3所示:
表3
由表3所示,本发明含白细胞提取物带状疱疹后遗神经痛凝胶有效治疗PHN患者年龄在36~78岁,平均为58岁;病程在1个月~11年之间,平均在41.4个月之间。治疗结果显示,通常开始见效在一周左右,完全治愈在21~62天之间。
此外,图1~4为不同部位存在带状疱疹的患者在使用本发明含白细胞提取物带状疱疹后遗神经痛凝胶治疗PHN患者前后对照图,如图1~4所示,对皮肤表面的带状疱疹进行外部涂抹直接给药的方式,使用含白细胞提取物的凝胶后,出现带状疱疹的部位红痕几乎消失,对于带状疱疹后遗痛的疗效十分显著。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (7)
1.一种含白细胞提取物的凝胶,其特征在于,所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料按质量百分含量计包括以下组分:
白细胞提取物1~10%、泛醇1~5%、明串球菌/萝卜根发酵产物滤液0.5~2.5%、肌肽0.5~2%、天然类肝素0.1~0.5%、尿囊素0.05~0.2%、保湿剂1~15%、凝胶基质0.5~2.5%、络合剂0.01~0.05%,余量为条件培养液;
所述白细胞提取物的制备方法包括以下步骤:
(1)采集:采集产后马或驴脐带血;
(2)分离:对脐带血进行离心处理,得到白细胞层上清液;其中,所述分离中离心处理的参数为:离心力为300~600 g,离心的时间为10~20 min;且所述白细胞层上清液需在-85℃~-75℃的温度条件下冷冻保存;
(3)病毒检测:对白细胞层上清液进行RT-PCR荧光和/或PCR荧光定量检测病毒;其中,所述病毒包括甲1型马流行性感冒病毒、2型马流行性感冒病毒、马传染性贫血病毒、马疱疹病毒、马动脉炎病毒、委内瑞拉马脑脊髓炎病毒、东西部马脑髓炎病毒、***病毒和非洲马瘟病毒;
(4)微生物检测:对白细胞层上清液进行内毒素和细菌培养检测微生物;其中,所述内毒素检测采用内毒素鲎试法;所述细菌培养检测采用琼脂平板培养法;
(5)提取:对病毒检测和微生物检测合格的白细胞层上清液进行离心处理,提取得到白细胞提取物;其中,所述合格的白细胞层上清液的标准为:PCR检测均为阴性,内毒素检测低于0.125 EU/mL,细菌检测无检出;所述提取中离心处理的参数为:离心力为4500~5500 g,离心的时间为25~30 min;所述离心处理上清液需依次经过0.45 μm和0.1 μm的滤膜进行过滤; 所述白细胞提取物需在-85℃~-75℃的温度条件下冷冻保存;
所述凝胶基质为卡波姆;
所述条件培养液由间充质细胞在含有白细胞提取物的培养液中培养得到;其中,所述培养液选自DMEM/F12培养基、DMEM培养基、α-MEM培养基或MSC SFM培养基中的任意一种;其中,所述白细胞提取物在培养液中的添加量为5~15 wt%;
所述条件培养液由以下步骤制备得到:
(a)将白细胞提取物和培养液混合,得到含有白细胞提取物的培养液;
(b)将脐带间充质干细胞和含有白细胞提取物的培养液混合,进行离心处理后,弃去上清液,得到重悬细胞;再将重悬细胞置于含有白细胞提取物的培养液中,进行培养;
(c)待细胞生长至70~80%汇合度,收集上清液并进行离心处理,得到条件培养液。
2.根据权利要求1所述的含白细胞提取物的凝胶,其特征在于,所述保湿剂为质量比为(1~10):(1~5)的甘油和丙二醇的组合。
3.根据权利要求1所述的含白细胞提取物的凝胶,其特征在于,所述络合剂为乙二胺四乙酸钠。
4.一种根据权利要求1~3中任一项所述的含白细胞提取物的凝胶的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
将含白细胞提取物的凝胶的制备原料按配比进行混合,再依次进行调节pH和离心处理,得到所述的含白细胞提取物的凝胶。
5. 根据权利要求4所述的含白细胞提取物的凝胶的制备方法,其特征在于,所述调节pH采用的试剂为5~15 wt%的氢氧化钠水溶液;
其中,调节pH至混合体系的pH为6.8~7.2。
6. 根据权利要求4所述的含白细胞提取物的凝胶的制备方法,其特征在于,所述离心处理的离心力为2000~4000 g,离心处理的时间为5~20 min。
7.一种根据权利要求1~3中任一项所述的含白细胞提取物的凝胶在制备用于治疗带状疱疹后遗神经痛类产品中的应用。
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Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5411738A (en) * | 1989-03-17 | 1995-05-02 | Hind Health Care, Inc. | Method for treating nerve injury pain associated with shingles (herpes-zoster and post-herpetic neuralgia) by topical application of lidocaine |
CN102895156A (zh) * | 2012-11-12 | 2013-01-30 | 上海制皂(集团)如皋有限公司 | 愈合皮肤皲裂的护肤霜及制备方法 |
CN109846815A (zh) * | 2019-04-03 | 2019-06-07 | 广州曼知生物科技有限公司 | 一种强效抗衰眼部精华乳 |
CN111184679A (zh) * | 2020-01-18 | 2020-05-22 | 西安九州再生医学集团有限公司 | 一种含干细胞外泌体的妊娠纹修复制剂及制备方法和应用 |
KR20200142844A (ko) * | 2019-06-13 | 2020-12-23 | 신신제약 주식회사 | 흉터 예방 또는 치료를 위한 국소용 약학적 조성물 |
CN116870159A (zh) * | 2023-07-06 | 2023-10-13 | 周辉 | 一种用于水痘和带状疱疹皮肤病的外用软膏剂及制备方法 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7618950B2 (en) * | 2004-07-07 | 2009-11-17 | Arigen Pharmaceuticals, Inc. | Method for treatment and prevention of herpes zoster by topical application |
CN117159401A (zh) * | 2023-09-27 | 2023-12-05 | 广州美思生物技术有限公司 | 一种头皮活化滋养保护功效的重组胶原蛋白组合物及其制备方法与应用 |
-
2024
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Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5411738A (en) * | 1989-03-17 | 1995-05-02 | Hind Health Care, Inc. | Method for treating nerve injury pain associated with shingles (herpes-zoster and post-herpetic neuralgia) by topical application of lidocaine |
CN102895156A (zh) * | 2012-11-12 | 2013-01-30 | 上海制皂(集团)如皋有限公司 | 愈合皮肤皲裂的护肤霜及制备方法 |
CN109846815A (zh) * | 2019-04-03 | 2019-06-07 | 广州曼知生物科技有限公司 | 一种强效抗衰眼部精华乳 |
KR20200142844A (ko) * | 2019-06-13 | 2020-12-23 | 신신제약 주식회사 | 흉터 예방 또는 치료를 위한 국소용 약학적 조성물 |
CN111184679A (zh) * | 2020-01-18 | 2020-05-22 | 西安九州再生医学集团有限公司 | 一种含干细胞外泌体的妊娠纹修复制剂及制备方法和应用 |
CN116870159A (zh) * | 2023-07-06 | 2023-10-13 | 周辉 | 一种用于水痘和带状疱疹皮肤病的外用软膏剂及制备方法 |
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