CN117164883A - 一种光可调控荧光水凝胶检测物及对胆红素的检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种光可调控荧光水凝胶检测物及对胆红素的检测方法。该检测物包括对Fe³⁺有选择性识别的邻甲氧基香兰素荧光识别官能团及对光敏感的7‑羟基4‑甲基‑香豆素MAEMC基团。Fe³⁺引发小分子单体（I）生成小分子单体I‑Fe³⁺配位组装物（Ⅱ）溶液，并淬灭其荧光。基于胆红素对Fe³⁺特有的氧化还原性质组装物（Ⅱ）溶液的荧光具有“开启”特性，并且经光照，则转变为凝胶（Ⅲ）形貌；若用254nm光照射时，凝胶（Ⅲ）又能逆变为溶胶（Ⅳ）形貌，从而实现对胆红素的检测。由本发明的可调控荧光水凝胶检测物形成的检测体系方便携带，对于胆红素可以实现快速测定。

Description

一种光可调控荧光水凝胶检测物及对胆红素的检测方法

技术领域

本发明属于医药检测技术领域，具体涉及一种光可调控荧光水凝胶检测物及对胆红素的检测方法。

背景技术

作为血红素分解代谢的吡咯衍生物，胆红素具有重要临床意义。胆红素是一项重要的常规肝功能指标，肝功能不全可能导致人体胆红素水平异常。胆红素过多，对人体产生神经毒性；胆红素含量偏低，会产生动脉粥样硬化、冠状动脉疾病和糖尿病等疾病。

在临床上，新生儿高胆红素血症的重要危险因素之一来源于母乳喂养的婴儿黄疸。尤其对于早发性母乳性黄疸的患儿，其高胆红素血症的临床表现更为严重，甚至可以引起胆红素脑病的发生。随着人们对母婴健康意识的不断提高，母乳喂养因其营养全面、免疫强化及利于培养亲子关系等优点逐渐得到了推广，然而，随之而来的是母乳性黄疸的发病率呈逐年上升趋势，成为新生儿高胆红素血症的首要危险因素。防治黄疸的同时又要确保母乳喂养的成功，成为临床诊疗方面的热点之一。所以，能即时、并现场准确、灵敏监控或测定胆红素值，避免诊断时对胆红素多重检测，对新生婴儿或哺乳期幼儿临床黄疸防治及诊断有重要意义。

此外，目前对国内献血的血样，现场只是进行体检式的血型和转氨酶检测，没有条件进行现场胆红素检测并及时进行胆红素含量报告。

现行临床中胆红素指标测定的常规方法主要有重氮试剂法、化学氧化法、胆红素氧化酶终点法等。a) Seminars in Perinatology, 2011, 35(3), 141-147. b)中国医学创新，2012, 9(30), 80-81. c) 国际检验医学杂志，2006, 27(11), 997-998.）。但是，上述常规检测方法均对检测条件有较高的要求并存在各种不足，比如，常规检测方法需要时间较长，不能立刻出结果；对标本要求较高，严重黄疸由于溶血的标本会导致检测值假性偏高，致使检测结果导致报告值偏低；此外有些试剂成本较高，并且必须要在合适的实验室内进行检测。

近年来，众多文献也报道了多种对胆红素的荧光检测策略及方法: [d)Analytica Chimica Acta, 2023, 1238, 340657. e) ACS Applied Polymer Materials,2022, 4(5), 3491-3497. f) Analytical Methods, 2021, 13(46), 5651-5659. g) ACSApplied Bio Materials, 2020, 3(7), 4074-4080.] 虽然荧光分析具有易于实施、灵敏度高和选择性好、操作简便的优点，但其也存在一些不足，例如荧光发射光谱的测试，要使用专门的荧光分析仪等大型仪器。在荧光检测时，若能在激发光照射下，结合智能手机荧光颜色识别照相的APP，就能克服上述不足，实现待测底物现场的在线检测并显示结果[h)Anal. Methods, 2022, 14, 1730-1738.]。

再者，虽然众多均相溶液体系中，荧光探针分子已能较好的对应底物响应，但仍面临着溶液体系难以直接与检测设备复合、不能实现简易便携的现场在线检测。超分子组装凝胶是一类多孔三维软物质，具有较好的待测底物封装能力和生物兼容性，具有高吸水量，能有效调节底物和荧光响应分子的反应微环境，适用场景广泛。通过胶凝剂的结构设计也可以在分子水平上调节凝胶特性，实现对外界刺激(例如酶、pH、温度或光)做出刺激反应。在这些刺激中，光在凝胶-溶胶调制中显示出独特的优势。通过共轭光敏部分实现凝胶-溶胶转变的动态控制；通过照射区域或时间的简单调整实现方便的时空控制，赋予凝胶较好的机械稳定性、凝胶重现性。

发明内容

鉴于上述原因，并为了克服现有技术存在的问题，本发明一种光可调控荧光水凝胶检测物及对胆红素的检测方法，用于解决现有技术中存在的上述问题。

一种检测胆红素的光可调控荧光水凝胶检测物，用于检测胆红素，所述荧光水凝胶检测物的结构中包括对三价铁离子有选择性识别的邻甲氧基香兰素荧光识别官能团和对光敏感的7-羟基4-甲基-香豆素MAEMC基团的小分子单体（I），该小分子单体的结构式为：。

如上所述的方面和任一可能的实现方式，进一步提供一种实现方式，将Fe(ClO₄)₃与所述小分子单体（I）以一定的比例混合，得到配位组装物均相溶液，即小分子单体（I）-Fe³⁺配位组装物（Ⅱ）溶液，该配位组装物（Ⅱ）的结构式为：

如上所述的方面和任一可能的实现方式，进一步提供一种实现方式，所述小分子单体（I）和Fe(ClO₄)₃中Fe³⁺的结合比为3:1得到组装配合物（Ⅱ）。

如上所述的方面和任一可能的实现方式，进一步提供一种实现方式，在365nm光照射下，所述配位组装物（Ⅱ）溶液转变为凝胶（Ⅲ）的形貌状态，弹性增大，该凝胶（Ⅲ）的结构式为：。

如上所述的方面和任一可能的实现方式，进一步提供一种实现方式，在改变为254nm光照射时，所述凝胶（Ⅲ）的形貌转变为溶胶（Ⅳ）的形貌状态，该溶胶（Ⅳ）为配位组装物（Ⅱ）和凝胶（Ⅲ）的混合物。

如上所述的方面和任一可能的实现方式，进一步提供一种实现方式，在波长为365nm光照射激发下，所述检测物的荧光颜色由小分子单体（I）的亮蓝色荧光变为配位组装物（Ⅱ）溶液的无荧光颜色，之后又转变为凝胶（Ⅲ）的无荧光颜色。

如上所述的方面和任一可能的实现方式，进一步提供一种实现方式，可见光下，所述小分子单体（I）溶液为黄色，配位组装物（Ⅱ）溶液转变为凝胶（Ⅲ）后为暗绿色。

本发明还提供了一种采用光可调控荧光水凝胶检测物进行胆红素检测的方法，所述方法采用所述的光可调控荧光水凝胶检测物，所述方法包括步骤：

S1.建立小分子单体（I）和 Fe³⁺配位生成配位组装物（Ⅱ）溶液的荧光淬灭标准曲线；

S2.建立胆红素标准样品浓度对配位组装物（Ⅱ）溶液在365nm光照射后并生成凝胶（Ⅲ）时的荧光恢复标准工作曲线；

S3. 根据实际待测样品中胆红素浓度对配位组装物（Ⅱ）在365nm光照射下的凝胶（Ⅲ）荧光颜色的变化，使用S2标准工作曲线，得到所述待测样品中胆红素的含量或浓度。

如上所述的方面和任一可能的实现方式，进一步提供一种实现方式，所述S3中，若凝胶荧光颜色的变化通过智能手机上的APP来分析识别，则由该APP获得所述待测样品颜色的RGB值，从而实时在线检测获得待测样品中胆红素的的含量或浓度。

如上所述的方面和任一可能的实现方式，进一步提供一种实现方式，通过智能手机APP分析配合组装物凝胶（Ⅲ）荧光颜色G+B值与待测样品中胆红素浓度的线性关系，凝胶（Ⅲ）对胆红素检测的线性范围为0-45 μM。

本发明的有益效果：

本发明的光可调控荧光水凝胶检测物及其检测胆红素的方法，所述检测物的结构中包括对Fe³⁺ 有选择性荧光淬灭响应的邻甲氧基香兰素荧光识别官能团和对光敏感的7-羟基4-甲基-香豆素MAEMC基团小分子单体（I）。基于胆红素对Fe³⁺ 特有的氧化还原性质，在365nm光照下，组装物（Ⅱ）溶液和凝胶结构式（Ⅲ）有明显的外形貌转变，并实现组装物（Ⅱ）溶液（即凝胶结构式Ⅲ）荧光“开启”的检测模式，能有效提高检测灵敏度。同时，若改变在254nm光照射，所述凝胶（Ⅲ）的外形貌又转变为溶胶（Ⅳ）的形貌状态。由本发明的光可调控荧光水凝胶检测物形成的检测体系，易于成型，方便携带，对存在于水溶液或其它生物制品比如婴幼儿黄疸血浆、成人献血血浆中的胆红素，本发明的光可调控荧光水凝胶检测物对胆红素既能进行荧光光谱仪器上的在机检测，又能实现水溶液或血浆制品中的目视观察，特别是可和智能手机联用，进行胆红素含量现场在线测定。本发明提供的方法简单快速，对检测的外部条件无要求，对血浆使用单位等检测条件不足的情况下，也能实现现场胆红素检测，能达到对胆红素含量的有效控制。

附图说明

图1是本发明的配位组装物（Ⅱ）溶液在365nm光照射下转变为凝胶结构式（Ⅲ）后，若改变为254nm光照射时和溶胶（Ⅳ）的互变转化外形貌示意图。

图2是本发明溶胶（Ⅳ）或凝胶（Ⅲ）中对光敏感的基团4-甲基-香豆素（MAEMC），在365nm和254nm光照下的交联-开环结构互变示意图。

图3是本发明在365nm光照射下，小分子单体（I）-图中(1)、及其和Fe³⁺配位组装的溶液(Ⅱ)光照下形成凝胶(Ⅲ)-图中(2)、及凝胶(Ⅲ)加入胆红素后-图中(3)的荧光颜色变化示意图。其中(1)亮蓝色荧光，(2)无荧光颜色，(3)亮蓝色荧光。

图4是小分子单体（I），小分子单体（I）-Fe³⁺配位组装物（Ⅱ）及其加入胆红素后，在365nm光照激发射下的凝胶荧光发射图谱。

图5是本发明的365nm光照下形成凝胶(Ⅲ)并在加入胆红素前、后，在可见光下的颜色示意图；左图为暗绿色，右图为浅绿色。

图6是本发明小分子单体（I）-Fe³⁺配位组装物（Ⅱ）溶液（50μM）滴加胆红素（0-100μM）并在365nm光照激发射下的凝胶荧光滴定光谱示意图。

图7是本发明小分子单体（I）-Fe³⁺配位组装物（Ⅱ）溶液（50μM），滴加胆红素（0-100μM）并在365nm光照激发射下的凝胶荧光滴定发射光谱散点示意图。内插图为二者的线性拟合曲线；其中λ_ex=365nm,λ_em=451nm。

图8是本发明的智能手机APP分析识别所述待测样品凝胶颜色的RGB值示意图。

图9是本发明的智能手机APP分析识别所述待测样品凝胶（Ⅲ）颜色检测胆红素含量变化示意图。

图10是本发明的智能手机APP分析识别样品凝胶（Ⅲ）的荧光颜色的G+B值与胆红素浓度的线性关系图。

具体实施方式

为了更好的理解本发明的技术方案，本发明内容包括但不限于下文中的具体实施方式，相似的技术和方法都应该视为本发明保护的范畴之内。为使本发明要解决的技术问题、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图及具体实施例进行详细描述。

应当明确，本发明所描述的实施例,仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

在本发明实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本发明。在本发明实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“所述”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。

本发明提供一种用于水溶液或其它生物制品比如婴幼儿黄疸血浆、成人献血血浆中胆红素检测的光可调控荧光水凝胶检测物。该光可调控荧光水凝胶检测物由包含对Fe³⁺ 有选择性荧光淬灭响应的邻甲氧基香兰素荧光识别官能团和对光敏感的7-羟基4-甲基-香豆素MAEMC基团的小分子单体（I）组成，其结构特征为小分子单体结构式I：。

进一步地，将Fe(ClO₄)₃与所述小分子单体（I）以一定的比例混合，均相溶液，即小分子单体I-Fe³⁺配位组装物（Ⅱ）溶液。所述小分子单体（I）可以和Fe(ClO₄)₃中的Fe³⁺离子进行专一选择性配位组装，并形成结合比为3:1的组装物，即小分子单体（I）-Fe³⁺配位组装物（Ⅱ），其结构式Ⅱ为。

进一步地，小分子单体(I)和Fe³⁺形成的配位组装结构式（II）具有专一选择性（其它金属阳离子比如Fe^{3 +}、Mg^{2 +}、Ca^{2 +}、Na ⁺、Zn^{2 +}、Mn^{2 +}、Cr^{3 +}、Fe^{2 +}、K ⁺、Ba^{2 +}、Cd^{2 +}、Pb^{2 +}、Co^{2 +}、Ni^{2 +}、Cu^{2 +}、Al^{3 +}无干扰）。随着Fe³⁺的加入，小分子单体(I)的荧光强度逐渐降低。由于Fe³⁺和小分子单体（I）的配位组装，使得组装物（Ⅱ）的荧光被猝灭。在365 nm光照时，裸眼可见由单体(I)的亮蓝色荧光颜色转变为组装物（Ⅱ）的无荧光色；而该转变，在可见光下呈现由黄色到暗绿色的颜色变化。

进一步地，在365 nm光照射10 min下测试时， Fe³⁺配位组装物（Ⅱ）外形，由溶液状态转变为凝胶（Ⅲ）状态，弹性增大，凝胶（Ⅲ）的结构式为：

；

在改用254 nm光波照射10 min后，凝胶（Ⅲ）状态外形又转变为溶胶（Ⅳ）状态。凝胶（Ⅲ）和溶胶（Ⅳ）外形貌的互变转化如图 1所示。其光控水凝胶可逆变化原理如图2所示，其中的，香豆素（MAEMC）对光不稳定，在365 nm激光照射下，单体中MAEMC发生光交联。交联的发生，也增强了配位组装体的交联度和凝胶强度；当在254 nm光照射后，失去交联，由于照射时间短及光强度等原因，凝胶（Ⅲ）恢复为（Ⅱ）和（Ⅲ）的混合物，即溶胶（Ⅳ）。凝胶（Ⅲ）和溶胶（Ⅳ）形貌特性的互变呈现，使得检测物体系有直观明了的外形变化，特别是凝胶（Ⅲ）的形成，使得多孔聚合物凝胶内部的3D网状结构可以吸收并保留大量的水分，不但对待测底物胆红素起到吸附和富集作用，能提高其检测灵敏度，并为其在类固相凝胶状态的微小均相溶液环境中对胆红素的识别反应提供了便利条件，也更利于便携集合智能手机的在线测试。

进一步地，基于胆红素对Fe³⁺ 特有的氧化还原性质，使配位组装物（Ⅱ）中Fe³⁺还原为Fe²⁺，从而阻断了Fe³⁺对配位组装物（Ⅱ）中小分子单体（I）的荧光淬灭。在波长为365nm光照射下，小分子单体I为亮蓝色荧光，但由于Fe3+引发配位组装物（Ⅱ）的生成，使其荧光淬灭。同时，光照作用使配位组装物（Ⅱ）溶液转变成的凝胶（Ⅲ）也无荧光颜色。

当无荧光色的配位组装物（Ⅱ）溶液中加入含胆红素溶液时，随着胆红素浓度的增大，在365nm光激发下，配位组装物（Ⅱ）溶液的荧光逐渐升高，对胆红素的检测具有荧光开启特征，并显示裸眼可观察到的无荧光色向亮蓝荧光色的荧光颜色恢复，如图3，图4所示，具体来说，当向无荧光色的组装物溶液（Ⅱ）中加入含胆红素的均相样品溶液，并在365nm光照下10分钟检测时，反应体系由溶液状态转变为凝胶(Ⅲ)态，并呈现无荧光色颜色向亮蓝荧光色的变化，使检测物具有荧光开启特征。365nm光照下形成凝胶(Ⅲ)并在加入胆红素后，在可见光下由暗绿色缓慢转变为绿色，如图5所示。

作为本发明公开的实施例，本发明采用光可控荧光水凝胶检测物对水溶液或生物制品血浆中胆红素进行检测时，该方法包括下列步骤：

第一步骤，首先建立小分子单体(I)和Fe³⁺在水溶液状态下配位组装形成组装物（II）的荧光淬灭工作曲线，以便确定Fe³⁺对定量小分子单体（I）淬灭的最大浓度、两者量化线性结合关系和两者的配位结合比；

第二步骤，由一定浓度的胆红素标准样品和一定浓度的配位组装物（Ⅱ），先在荧光光谱仪上建立胆红素标准样品浓度对配位组装物（Ⅱ）在365nm光照下（即凝胶物（Ⅲ））荧光强度恢复的标准工作曲线。两者的荧光滴定光谱如图 6所示，荧光滴定光谱散点示意图及二者的线性拟合曲线如图 7所示；

第三步骤，测试待测生物血浆样品中胆红素含量或浓度时，根据待测样品和定量配位组装物（Ⅱ）在365nm光照下（即凝胶物（Ⅲ））的荧光强度对应值，使用上述胆红素标准样品浓度与凝胶物（Ⅲ）荧光强度的标准线性工作曲线中的关系，即可得出待测生物血浆中胆红素含量或浓度。

配位组装物（II）在365nm光照下检测胆红素含量的线性范围为0-50μM，根据LOD=3δ/m，其中δ为空白溶液的标准差，m为荧光强度与胆红素含量 的绝对斜率，计算出配位组装物（II）对胆红素浓度的最低检测限LOD为0.163μM，适合临床检测要求。

由于大型荧光光谱仪的可移动性差，在实际应用中检测胆红素，仍难以满足现场检测对仪器微小化的要求。365nm光照下，待测生物血浆样品中的胆红素，使配位组装物凝胶（Ⅲ）的荧光颜色有系列变化，并且与荧光光谱仪测定时一致。通过智能手机记录凝胶样品荧光颜色的变化，由安装在智能手机上的ColorMeter APP，对手机拍摄的具有颜色的照片进行相应处理后由APP输出的对应的RGB值（其中，B表示蓝色、G表示绿色、R表示红色）如图8，图9所示。根据如图10所示的凝胶（Ⅲ）的荧光颜色的G+B值与胆红素浓度的线性关系，来分析待测实际样品胆红素浓度与配合组装物凝胶（Ⅲ）荧光颜色G+B值的线性关系，实时在线检测获得胆红素的浓度。由智能手机ColorMeter APP在线性获得凝胶（Ⅲ）对胆红素检测的线性范围为0-45 μM，对胆红素的最低检测限为0.279 μM。

实施例：

（1）一种用于水溶液或其它生物制品血浆中胆红素检测的光可调控荧光检测物及形成的Fe³⁺配合物的制备：

取100mL的小分子单体(I)的乙腈和PBS（丁二酸丁二醇酯）的混合溶液（600μmol/L;v/v,1/1），放置于PVP离心管中，再往里面加入100mL的200μmol/L的Fe(ClO₄)₃水溶液，并混合均匀，得到化合物(I)-Fe³⁺配位组装物（II），可见光下颜色显示为暗绿色。

（2）用于水溶液或其它生物制品血浆中胆红素检测的光可调控荧光水凝胶检测物及形成的Fe³⁺凝胶专一性应用于测定胆红素：

将胆红素溶解于PBS 缓冲液（pH=7.4）中，制备胆红素标准浓度储备液（0-200 μM）。将5 mL不同浓度的胆红素溶液加入5 mL上述小分子单体 (I)-Fe³⁺组装物（Ⅱ）溶液中（100 μM））。365 nm光照射激发10 min，使用荧光仪测定451 nm下的荧光发射光谱。确定胆红素标准样品储备液对单体 (I)-Fe³⁺的配位组装物凝胶 (Ⅲ)的荧光恢复标准工作曲线。

取低温保存的待检测生物血浆样品，用 PBS（PH=7.4）稀释，将其滴入上述小分子单体 (I)-Fe³⁺配位组装物（Ⅱ）的溶液中（50 μM）里，在365 nm光照射激发下，使用荧光仪测定该配位组装物（Ⅱ）的溶液在451nm的荧光发射光谱，根据该光谱得到待检测血浆样品中胆红素对单体(I)-Fe3+的配位组装凝胶物 (Ⅲ)的荧光恢复曲线，与荧光恢复标准工作曲线进行对照 ，从而得出血浆样品中胆红素的含量或浓度。

作为优选的实施例，本发明还可使用智能手机联用在线检测水溶液或其它生物制品血浆中胆红素，用于替换步骤（2），具体实施过程如下：在智能手机上安装ColorMeterAPP，该APP对输入的包括有颜色的照片进行颜色识别后输出的相应RGB值，其中B表示蓝色、G表示绿色、R表示红色。具体步骤如图8所示，在10ml 的PVP 离心管中，按上述步骤（1）所述的一种用于水溶液或其它生物制品血浆中胆红素检测的光可调控荧光水凝胶检测物及形成的Fe³⁺配合物的制备方法， 获得小分子单体 (I)-Fe³⁺组装物（Ⅱ）溶液，在365nm光下照射形成凝胶 (Ⅲ)；在凝胶 (Ⅲ)中加入含有胆红素的待测实际样品，反应2分钟；之后用手机对凝胶 (Ⅲ)进行拍照，获得在365nm光照射下凝胶 (Ⅲ)荧光颜色的RGB值，因G+B值和待测样品胆红素浓度呈线性关系，实时在线检测获得待测样品中胆红素的的含量或浓度。智能手机APP在线性获得凝胶（Ⅲ）对胆红素检测的线性范围为0-45 μM，对胆红素的最低检测限为0.279 μM。经证明，荧光仪测得样品中胆红素的含量值和手机在线测量值相比，误差不大于1.00‰。

上述说明示出并描述了本发明的若干优选实施例，但如前所述，应当理解本发明并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述申请构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离本发明的精神和范围，则都应在本发明所附权利要求书的保护范围内。

Claims (10)

1.一种检测胆红素的光可调控荧光水凝胶检测物，用于检测胆红素，其特征在于，所述荧光水凝胶检测物的结构中包括对三价铁离子有选择性识别的邻甲氧基香兰素荧光识别官能团和对光敏感的7-羟基4-甲基-香豆素MAEMC基团的小分子单体（I），该小分子单体的结构式为：。

2.根据权利要求1所述的光可调控荧光水凝胶检测物，其特征在于，将Fe(ClO₄)₃与所述小分子单体（I）以一定的比例混合，得到配位组装物均相溶液，即小分子单体（I）-Fe³⁺配位组装物（Ⅱ）溶液，该配位组装物（Ⅱ）的结构式为：

。

3.根据权利要求2所述的光可调控荧光水凝胶检测物，其特征在于，所述小分子单体（I）和Fe(ClO₄)₃中Fe³⁺的结合比为3:1得到组装配合物（Ⅱ）。

4.根据权利要求2所述的光可调控荧光水凝胶检测物，其特征在于，在365nm光照射下，所述配位组装物（Ⅱ）溶液转变为凝胶（Ⅲ）的形貌状态，弹性增大，该凝胶（Ⅲ）的结构式为：。

5.根据权利要求4所述的光可调控荧光水凝胶检测物，其特征在于，在改变为254nm光照射时，所述凝胶（Ⅲ）的形貌转变为溶胶（Ⅳ）的形貌状态，该溶胶（Ⅳ）为配位组装物（Ⅱ）和凝胶（Ⅲ）的混合物。

6.根据权利要求2所述的光可调控荧光水凝胶检测物，其特征在于，在波长为365nm光照射激发下，所述检测物的荧光颜色由小分子单体（I）的亮蓝色荧光变为配位组装物（Ⅱ）溶液的无荧光颜色，之后又转变为凝胶（Ⅲ）的无荧光颜色。

7.根据权利要求2所述的光可调控荧光水凝胶检测物，其特征在于，可见光下，所述小分子单体（I）溶液为黄色，配位组装物（Ⅱ）溶液转变为凝胶（Ⅲ）后为暗绿色。

8.一种采用光可调控荧光水凝胶检测物进行胆红素检测的方法，其特征在于，所述方法采用权利要求1-7之一所述的光可调控荧光水凝胶检测物，所述方法包括步骤：

S1.建立小分子单体（I）和 Fe³⁺配位生成配位组装物（Ⅱ）溶液的荧光淬灭标准曲线；

S2.建立胆红素标准样品浓度对配位组装物（Ⅱ）溶液在365nm光照射后并生成凝胶（Ⅲ）时的荧光恢复标准工作曲线；

S3. 根据实际待测样品中胆红素浓度对配位组装物（Ⅱ）在365nm光照射下的凝胶（Ⅲ）荧光颜色的变化，使用S2标准工作曲线，得到所述待测样品中胆红素的含量或浓度。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述S3中，若凝胶荧光颜色的变化通过智能手机上的APP来分析识别，则由该APP获得所述待测样品颜色的RGB值，从而实时在线检测获得待测样品中胆红素的的含量或浓度。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，通过智能手机APP分析配合组装物凝胶（Ⅲ）荧光颜色G+B值与待测样品中胆红素浓度的线性关系，凝胶（Ⅲ）对胆红素检测的线性范围为0-45 μM。