CN116685351A

CN116685351A - Empacta的结果：一项用于评估托珠单抗在患有covid-19肺炎的住院患者中的功效和安全性的随机、双盲、安慰剂对照、多中心研究

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Publication number: CN116685351A
Application number: CN202180063055.5A
Authority: CN
Inventors: S·V·莫汉; W·G·瑞斯; 尤海瑛; B·H·克莱默; 韩健
Original assignee: Genentech Inc
Current assignee: Genentech Inc
Priority date: 2020-09-17
Filing date: 2021-03-19
Publication date: 2023-09-01
Also published as: WO2022060412A1; EP4213877A1; JP2023541921A; US20230357418A1

Abstract

所公开的本申请涉及一种治疗未进行机械通气的患者的肺炎的方法，其包括以有效防止所述患者死亡或接受机械通气的量向所述患者施用IL‑6拮抗剂(例如托珠单抗)。公开内容基于EMPACTA临床试验的结果。

Description

EMPACTA的结果：一项用于评估托珠单抗在患有COVID-19肺炎的住院患者中的功效和安全性的随机、双盲、安慰剂对照、多中心研究

相关申请的交叉引用

本申请要求2020年9月17日提交的美国临时申请号63/079877的优先权，其公开内容通过引用以其全文并入本文。

序列表

本申请含有序列表，该序列表通过efs-web提交并且全文以引用方式并入本文。所述ASCII副本创建于2021年3月15日，命名为P36402WOSEQLIST.txt，并且大小为7,434个字节。

技术领域

本发明涉及用IL-6拮抗剂治疗患者肺炎的方法。该方法包括治疗病毒性肺炎的方法，诸如冠状病毒肺炎，并以COVID-19肺炎为例。特别是，所公开的本申请涉及一种治疗未进行机械通气的患者中的肺炎的方法，其包括以有效防止患者死亡或接受机械通气的量向患者施用IL-6拮抗剂(例如托珠单抗)。

背景技术

白介素-6(IL-6)是由多种细胞类型产生的促炎、多功能细胞因子。IL-6参与T细胞活化，B细胞分化，急性期蛋白的诱导，造血前体细胞生长和分化的刺激，破骨细胞从前体细胞分化的促进，肝脏、皮肤和神经细胞的增殖，骨代谢以及脂质代谢等多种过程(HiranoT.Chem Immunol.51:153-180(1992)；Keller等人Frontiers Biosci.1:340-357(1996)；Metzger等人Am J Physiol Endocrinol Metab.281:E597-E965(2001)；Tamura等人ProcNatl Acad Sci USA.90:11924-11928(1993)；Taub R.J Clin Invest 112:978-980(2003))。IL-6牵涉到多种疾病的发病机制，包括自身免疫性疾病、骨质疏松症、瘤形成和衰老(Hirano,T.(1992)，同上；和Keller等人，同上)。IL-6通过配体特异性受体(IL-6R)(以可溶性和膜表达两种形式存在)发挥其作用。

已报道类风湿性关节炎(RA)患者血清和滑膜液中IL-6水平升高，提示滑膜产生IL-6(Irano等人Eur J Immunol.18:1797-1801(1988)；和Houssiau等人ArthritisRheum.1988；31:784-788(1988))。IL-6水平与RA疾病活动性相关(Hirano等人(1988)，同上)，并且临床功效伴随血清IL-6水平的降低(Madhok等人Arthritis Rheum.33:S154.Abstract(1990))。

托珠单抗(TCZ)是与人类IL-6受体结合的免疫球蛋白IgG1亚类的重组人源化单克隆抗体。静脉内注射(iv)TCZ的临床功效和安全性研究已经完成或正在由Roche和Chugai在各种疾病领域进行，包括成人发病的RA、全身型幼年特发性关节炎(sJIA)和多关节幼年特发性关节炎(pJIA)。

托珠单抗在美国获得批准用于：

1.类风湿性关节炎(RA)患有中度至重度活动性类风湿性关节炎且对一种或多种缓解病情抗风湿药(DMARD)响应不足的成年患者。

2.巨细胞动脉炎(GCA)：患有巨细胞动脉炎的患者。

3.多关节幼年特发性关节炎(pJIA)：年龄≥2岁的活动性多关节幼年特发性关节炎患者。

4.全身型幼年特发性关节炎(sJIA)：年龄≥2岁的活动性全身型幼年特发性关节炎患者。

5.细胞因子释放综合征(CRS)：患有嵌合抗原受体(CAR)T细胞诱导的重度或危及生命的细胞因子释放综合征的成年患者和年龄≥2岁的儿童患者。

冠状病毒(CoV)是正链RNA病毒，由于包膜上存在刺突糖蛋白，在电子显微镜下呈冠状外观。冠状病毒是一个庞大的病毒家族，它们可以引起多种疾病，从普通感冒到更严重的疾病(诸如中东呼吸综合征(MERS-CoV)和重症急性呼吸综合征(SARS-CoV))。

COVID-19是冠状病毒疾病2019(coronavirus disease 2019)的首字母缩写，是由一种新型冠状病毒毒株引起的，此前尚未在人类中发现，并于2020年2月11日由世界卫生组织(WHO)命名。随后，世界卫生组织于2020年3月11日宣布大流行。

据世界卫生组织统计，截至2020年3月17日，全球超过100个国家报告了超过179,000例COVID-19病例，死亡人数超过7400人。高达约20％的感染患者出现了与重度间质性肺炎相关的并发症，这种肺炎可能进展为急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和/或多器官衰竭(MOF)和死亡。

CRS已被确定为用于治疗恶性肿瘤的CAR T细胞疗法的临床显著性在靶脱肿瘤副作用。CRS的特征包括发热、疲乏、头痛、脑病、低血压、心动过速、凝血障碍、恶心、毛细血管渗漏和多器官功能障碍。据报道的CAR T细胞疗法后CRS的发生在从50％至100％的范围内，其中13％至48％的患者经历严重或危及生命程度的CRS。血清炎症性细胞因子水平升高，特别是白介素-6(IL-6)。症状的严重程度可能与血清细胞因子浓度和暴露于炎症性细胞因子的持续时间相关。

2017年8月30日，美国食品和药物管理局批准托珠单抗用于治疗成年患者和年龄≥2岁的儿童患者的重度或危及生命的CAR T细胞诱导的CRS。体重≥30kg的允许剂量为8mg/kg，体重＜30kg的允许剂量为12mg/kg。如果体征/症状没有改善，可给予最多三剂另外的剂量，并且后续剂量之间应至少间隔8小时。

TCZ的批准是基于对用TCZ治疗的患者的数据的回顾性分析，这些患者在前瞻性临床试验中接受tisagenlecleucel或axicabtagene ciloleucel治疗后出现了CRS(Le等人The Oncologist.23:943-947(2018))。来自CTL019系列的45例患者中有31例(69％)在第一剂量TCZ的14天内获得了响应(定义为第一剂量TCZ(最多两次剂量)的14天内出现持续不发热并且停用血管加压药至少24小时，并且没有使用除皮质类固醇以外的另外的治疗)，并且从第一剂量到响应的中位时间为4天。来自axicabtagene ciloleucel系列的15例患者中有8例(53％)获得了响应，并且到响应的中位时间为4.5天。在诸如年龄组、性别、种族、民族、TCZ的第一剂量时的CRS分级以及接受TCZ治疗前的CRS持续时间等亚组中，响应率基本一致。没有报道可归因于TCZ的不良反应。

27例患者在第一剂量TCZ后和8例患者在第二剂量TCZ后可获得药代动力学(PK)数据。基于131例PK观察，在患有CAR T细胞诱导、重度或危及生命的CRS的患者的TCZ的几何平均值(％CV)最大浓度为99.5μg/mL(36.8％)(第一输注后)，和160.7μg/mL(113.8％)(第二次输注后)。PK建模分析表明，与健康志愿者和其他患者群体相比，患有CRS的患者对TCZ的清除更快，并且模拟显示，在患有CRS的患者中，最多四次剂量的TCZ暴露至少间隔8小时被认为是可以接受的。

在欧盟和某些其他国家，TCZ也被批准用于CAR-T诱导的重度或危及生命的CRA。

中国医生在冠状病毒(COVID-19)肺炎治疗中启动了TCZ的药品说明书之外的用法。基于针对21例接受TCZ治疗的COVID-19患者的观察性研究的发现，2020年2月13日还启动了一项研究者发起的随机、开放标签研究(n＝188)。

2020年3月3日，中国国家卫生健康委员会将TCZ纳入第七版《COVID-19肺炎诊断和治疗方案》，作为重症或危重症COVID-19肺炎的一种治疗选择。中国疾病预防控制中心根据以下标准定义疾病严重程度：

1.重症肺炎：24至48h内出现呼吸困难、呼吸频率≥30/min、血氧饱和度(SpO₂)≤93％、PaO2/FiO₂比[血氧分压(氧分压，PaO2)与供氧百分比(吸入氧分数，FiO₂)之比]＜300mmHg、和/或肺部浸润＞50％；这种情况发生在14％的病例中。

2.危重症肺炎：呼吸衰竭、感染性休克和/或多器官功能障碍(MOD)或衰竭(MOF)；这种情况发生在5％的病例中(Wu等人JAMA.doi:10.1001/jama.2020.2648(2020))。

根据这些指南第10.3.7节：“对于肺部广泛病变的患者和重症患者，以及实验室检测IL-6水平升高的患者，可以尝试托珠单抗治疗。第一剂量为4至8mg/kg，推荐剂量为400mg，0.9％生理盐水稀释至100ml，并且输注时间超过1小时；若第一剂量后体征和症状没有经历临床改善，12小时后可以再次施用如前相同剂量。累积施用次数最多2次，并且最大单次剂量不超过800mg。注意超敏反应以及那些有活动性感染的疾病(诸如结核病)为禁忌症。”

基于对最初的21例患者(其中重症或危重症冠状病毒(COVID-19)肺炎患者接受了TCZ治疗)的回顾性观察研究的结果，一项随机、对照试验(n＝188)(测试相同的TCZ剂量方案)已在相同群体中启动，并且目前正在进行中，约有70例患者入组。Xu等人Effectivetreatment of severe COVID-19patients with tocilizumab.已提交的稿件。[资源源自网络]。2020[于2020年3月5日更新；于2020年3月17日引用]。可从以下网站获得：http://www.chinaxiv.org/abs/202003.00026。

2020年2月，21例患有重症或危重症COVID-19肺炎的患者接受了TCZ IV(400mg)加标准治疗的治疗。患者的年龄范围为25至88岁，平均年龄为56.8±16.5岁。17例(81.0％)患者评估为重症，4例(19.0％)患者评估为危重症。大多数患者(85％)表现为淋巴细胞减少。在所有20例患者中C反应蛋白(CRP)水平升高(平均值：75.06±66.80mg/L)。中值降钙素原(PCT)值为0.33±0.78ng/mL，并且20例患者中仅两例(10.0％)呈现正常值。接受TCZ前平均IL-6水平为132.38±278.54pg/mL(正常值<7pg/mL)。

标准治疗由洛匹那韦、甲泼尼龙、其他症状缓解剂和氧疗组成，如《新型冠状病毒肺炎诊断和治疗方案(第六版)》推荐的。所有21例患者在持续发热、低氧血症和胸部CT图像恶化之前，接受了一周的常规标准治疗治疗。

18例(85.7％)患者接受了一次TCZ，3例(14.3％)患者由于在12小时内发热接受了第二剂量。据作者称，TCZ治疗后，发热恢复正常，并且所有其他症状明显改善。20例患者中有15例(75.0％)摄氧量降低，并且1例患者无需氧疗。CT扫描显示，20例患者中有19例(90.5％)在接受TCZ治疗后，双肺的不透明度明显缓解。外周血淋巴细胞百分比在治疗前85.0％(17/20)的患者(平均值，15.52±8.89％)中下降，治疗后第五天在52.6％(10/19)的患者中恢复正常。异常升高的CRP在84.2％的患者(16/19)中显著下降。未报告药物不良反应和继发肺部感染。

报告时有19例患者(90.5％)出院，其中包括两例危重症患者。21例接受治疗的患者中没有死亡病例。该研究作者得出结论，对于患有重症COVID-19的患者，TCZ是有效的治疗方法(Xu等人(2020)，同上)。

与用于COVID-19肺炎的托珠单抗相关的临床试验除其他外包括：

1.一项评估托珠单抗在患有重症COVID-19肺炎患者中的安全性和功效性的研究(COVACTA)：ClinicalTrials.gov标识符NCT04320615，首次发布：2020年3月25日。COVACTA的初步结果在以下新闻稿中公布：https://www.roche.com/investors/updates/inv- update-2020-07-29.htm。COVACTA试验未达到改善COVID-19相关肺炎患者中的临床状况的主要终点或降低患者死亡率的关键次要终点。与接受安慰剂治疗的患者相比，接受Actemra/RoActemra治疗的患者中至出院或“准备出院”的时间更短。Actemra/RoActemra的至出院或“准备出院”的中位时间为20天，并且安慰剂的为28天(中位时间[95％CI]：Actemra/RoActemra＝20.0[17.0,27.0]；安慰剂＝28.0[20.0，NE]，p＝0.0370)。Actemra/RoActemra与安慰剂之间的无呼吸机天数差异无统计学显著性(Actemra/RoActemra的中位数为22天，安慰剂的为16.5天，中位数差异[95％CI]＝5.5[-2.8,13.0]，p＝0.3202)。

2.一项评估瑞德西韦加托珠单抗与瑞德西韦加安慰剂相比在患有重症COVID-19肺炎的住院参与者中的功效性和安全性的研究(REMDACTA)：ClinicalTrials.gov标识符NCT04409262，首次发布：2020年6月1日。

3.一项评估托珠单抗在患有COVID-19肺炎的住院参与者中的功效性和安全性的研究(EMPACTA)：ClinicalTrials.gov标识符NCT04372186，首次发布：2020年5月1日。

4.一项研究在患有中度至重症COVID-19肺炎的参与者中静脉内注射托珠单抗的研究(MARIPOSA)：ClinicalTrials.gov标识符NCT04363736，首次发布：2020年4月27日。

5.托珠单抗可防止患有COVID-19的住院非危重症患者出现低氧血症型呼吸衰竭进展(MGH研究)：ClinicalTrials.gov标识符：NCT04356937，首次发布：2020年4月22日。本研究包括以下至少一项作为“纳入标准”：a.铁蛋白>500ng/ml(即>1124pmol/L)、CRP>50mg/L，c.LDH>250U/L，d.D-二聚体>1000ng/mL。

一项评估了萨瑞鲁单抗(Sarilumab)对患有COVID-19住院患者的功效性和安全性的适应性2/3期、随机、双盲、安慰剂对照研究，见于：ClinicalTrials.gov标识符：NCT04315298，首次发布：2020年3月19日。萨瑞鲁单抗是针对白介素-6受体的人类单克隆抗体。

发明内容

在第一方面，本发明涉及一种治疗未进行机械通气的患者中的肺炎的方法，其包括以有效防止患者死亡或接受机械通气的量向患者施用IL-6拮抗剂。

在第二方面，本发明涉及一种治疗未进行机械通气的患者中的病毒性肺炎的方法，其包括以有效防止患者死亡或接受机械通气的量向患者施用IL-6拮抗剂和瑞德西韦的组合。

在另一方面，本发明涉及一种治疗未进行机械通气的患者中的病毒性肺炎的方法，其包括以有效防止患者死亡或接受机械通气的量向患者施用IL-6拮抗剂和皮质类固醇的组合。

附图说明

图1描绘了EMPACTA研究设计。

图2描绘了患者处置。

图3A至3B描绘了患者的人口统计数据。

图4A至4C描绘了基线疾病特征。

图5描绘了研究药物暴露(安全性群体)。

图6描绘了主要功效终点：至第28天的死亡或需要机械通气的患者的累积比例。

图7至10描绘了次要功效终点，即：

图7：直至第28天的至出院或“准备出院”的时间。

图8：直至第28天的至临床状态等级改善的时间。

图9：直至第28天的至临床失败的时间。

图10：至第28天的死亡率。

图11描绘了安全性概览。

图12描绘了特别关注的不良事件。

图13描绘了按***器官分类的严重不良事件(在任何组中的发生率>1％)。

图14描绘了严重不良事件：感染和侵染(在任何组中的发生率>1％)。

优选实施例的具体实施方式

I.定义

本说明书中可能使用的缩写：

出于本文的目的，“炎症”是指针对感染的免疫防御，以局部血流量的增加、白细胞的迁移和化学毒素的释放为标志。炎症是机体用来保护自身免受感染的一种方式。炎症的临床特点包括身体部位的红、热、肿、痛和功能丧失。就全身而言，炎症可引起发热、关节和肌肉疼痛、器官功能障碍和不适。

“肺炎”是指单侧或双侧肺的炎症，伴随肺部炎症密集区域。本发明涉及由于病毒感染引起的肺炎。肺炎的症状可以包括发热、寒战、咳嗽伴咳痰、胸痛和呼吸短促。在一个实施例中，肺炎已经胸部X线或计算机断层扫描(CT扫描)证实。

“重症肺炎”是指心脏、肾脏或循环***有衰竭的危险，或肺部不能再摄取足够的氧气并出现急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的肺炎。患有重症肺炎的患者通常会住院治疗，并且可能在重症监护室(ICU)。通常，患者患有重症呼吸困难、呼吸窘迫、呼吸急迫(>30次呼吸/min)和缺氧，任选地伴随发热。儿童可能发生发绀。在这个定义中，诊断是临床的，并且使用放射学成像以排除并发症。在一个实施例中，患有重症肺炎的患者的肺功能受损，如由周围毛细血管血氧饱和度(SpO₂)确定的。在一个实施例中，根据动脉血氧分压与吸入氧浓度的比值(PaO2/FiO₂)确定患有重症肺炎患者的肺功能受损。在一个实施例中，患者患有重症肺炎，SpO₂≤93％。在一个实施例中，患有重症肺炎的患者的PaO2/FiO₂<300mmHg(对于高海拔地区可基于如下任选地调节：PaO2/FiO₂ x[大气压(mmHg)/760])。在一个实施例中，患者呼吸窘迫(RR≥30次呼吸/分)。在一个实施例中，患者在肺部成像中有>50％的病变。

“危重症肺炎”是指发生呼吸衰竭、休克和/或器官衰竭的重症肺炎患者。在一个实施例中，患有危重症肺炎的患者需要机械通气。

“轻度肺炎”表现为上呼吸道病毒感染的症状，包括轻度发热、咳嗽(干咳)、咽喉痛、鼻充血、不适、头痛、肌肉痛或不适。不存在更严重的疾病的体征和症状，诸如呼吸困难。

在“中度肺炎”中，存在诸如咳嗽、呼吸短促(或在儿童中的呼吸急迫)等呼吸道症状，无重症肺炎体征。患有中度肺炎的患者可能在医院，但不在ICU或不使用呼吸机。

“急性呼吸***综合征”或“ARDS”是指危及生命的肺部疾病，其阻止了足够的氧气进入肺部并进入血液。在一个实施例中，ARDS的诊断基于以下标准：急性起病、在非心脏来源的胸片上的双肺浸润、以及PaO/FiO比值<300mmHg。在一个实施例中，ARDS是以PaO2/FiO2为200至300mmHg为特征的“轻度ARDS”。在一个实施例中，ARDS是以PaO2/FiO2为100至200mmHg为特征的“中度ARDS”。在一个实施例中，ARDS是以PaO2/FiO2<100mmHg为特征的“重度ARDS”。

“病毒性肺炎”是指由一种或多种病毒进入患者体内引起的肺炎。在一个实施例中，病毒为DNA病毒。在一个实施例中，病毒为RNA病毒。本文所考虑的引起病毒性肺炎的病毒的示例除其他外包括：由以下引起的病毒性肺炎：人类免疫缺陷病毒(HIV)、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、流感病毒(包括H1N1或“猪流感”和H5N1或“禽流感”)、寨卡病毒、轮状病毒、狂犬病病毒、西尼罗河病毒、疱疹病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒(RSV)、诺瓦克病毒、轮状病毒、星状病毒、鼻病毒、人类乳突病毒(HPV)、脊髓灰质炎病毒、登革热、埃博拉病毒和冠状病毒。在一个实施例中，病毒性肺炎是由冠状病毒引起的。

“冠状病毒”是感染人类并引起呼吸道感染的病毒。可引起患者肺炎的冠状病毒包括但不限于引起中东呼吸道综合征(MERS)的β冠状病毒、引起重症急性呼吸综合征(SARS)的β冠状病毒和引起COVID-19的SARS-CoV-2病毒。

“COVID-19”是指通常以发热、咳嗽和呼吸短促为特征的疾病并且可能进展为肺炎和呼吸衰竭。在一个实施例中，患有COVID-19的患者通过患者的标本(例如呼吸***、血液、尿液、粪便、其他体液标本)的阳性聚合酶链反应(PCR)测试(例如实时PCT、RT-PCT测试)得到确认。在一个实施例中，患者具有SARS-CoV-2特异性抗体(例如IgG和/或IgM抗体)，例如如通过免疫组化(IHC)、酶联免疫吸附测定(ELISA)等确定的。COVID-19的同义词包括但不限于“新型冠状病毒”、“2019新型冠状病毒”和“2019-nCoV”。

本文的术语“患者”是指人类患者。在一个实施例中，患者为住院患者。

药物的“静脉内注射”或“iv”剂量、施用或制剂是经由静脉施用，例如通过输注药物。

药物的“皮下注射”或“sc”剂量、施用或制剂是皮肤下(例如，经由预先填充的注射器、自动注射器或其他装置)施用药物。

药物的“基于体重的剂量”是指基于患者的体重的剂量。在优选的实施例中，其中药物为托珠单抗，基于体重的剂量为8mg/kg(任选地≤800mg剂量)。

药物的“固定剂量”是指在不考虑患者体重的情况下施用的剂量。

出于本文的目的，“临床状态”是指患者的健康状态。示例包括患者正在改善或越来越差。在一个实施例中，临床状态是基于临床状态的等级量表。在一个实施例中，临床状态不基于患者是否出现发热。

“临床状态等级量表”是指用于量化无量纲结果的量表。这些量表包括可以包括单一的时间点的结果，或可以检查两个时间点之间发生的变化。在一个实施例中，这两个时间点是“第1天”(施用IL-6拮抗剂(诸如托珠单抗)的第一剂量时，例如8mg/kg)与“第28天”对比(评估患者时)，以及任选地在“第60天(进一步评估患者时)。等级量表包括各种“类别”，每个类别评估患者状态或结果。在一个实施例中，等级量表是“7类等级量表”。

在一个实施例中，“7类等级量表”包括以下类别，用于评估患者的状态：

1.从医院出院(或“准备出院”，例如如由正常的体温和呼吸率，以及在环境空气中稳定的血氧饱和度或≤2L辅助供氧所证实)

2.在非ICU的医院病房(或“准备去医院病房”)不需要辅助供氧

3.在非ICU的医院病房(或“准备去医院病房”)需要辅助供氧

4.在ICU或非ICU的医院病房，需要无创通气或高流量吸氧

5.在ICU，需要插管和机械通气

6.在ICU，需要ECMO或机械通气和另外的器官支持(例如血管加压药、肾脏替代疗法)

7.死亡。

“基线”是指患者刚好在治疗前和/或生物标志物分析前的状态。在一个实施例中，患者在基线时没有通气。在一个实施例中，患者在基线时没有接受：a.持续气道正压通气(CPAP)、b.双相气道正压通气(BIPAP)或c.有创通气。在一个实施例中，患者在环境空气中具有<94％的SpO2。在一个实施例中，患者在基线时没有活动性细菌、真菌、病毒或其他感染(除COVID-19外)。在一个实施例中，患者在基线时具有>5x ULN的ALT或AST。在一个实施例中，患者在基线时具有<1000/mL的ANC。在一个实施例中，患者在基线时具有<50,000/mL的血小板计数。

出于本文的目的，“标准治疗”或“SOC”是指通常用于治疗患有肺炎(例如病毒性肺炎，诸如COVID-19肺炎)的患者的治疗或药物，其除其他外包括：支持性治疗、施用一种或多种抗病毒剂和/或施用一种或多种皮质类固醇。在一个实施例中，SOC包括抗病毒剂(例如瑞德西韦或阿奇霉素)和/或皮质类固醇(例如***或***)治疗。

“支持性治疗”包括但不限于：呼吸支持(例如经由面罩或鼻导管的氧疗、经鼻高流量氧疗或无创机械通气、创伤性机械通气、经由体外膜肺氧合(ECMO)等)；循环辅助(例如液体复苏、改善微循环、血管活性药物)；肾脏替代疗法；血浆疗法；血液净化疗法；血必净注射液(例如100mL/日一日两次)；微生态制备物(例如益生菌、益生元和合生元)；(例如非甾体类抗炎药，例如NSAIDs)；草药；血浆(例如恢复期血浆)等。

“抗病毒”剂包括但不限于：α-干扰素、洛匹那韦、利托那韦、洛匹那韦/利托那韦、瑞德西韦、阿奇霉素、利巴韦林、羟氯喹或氯喹(有或没有阿奇霉素)、阿比多尔、法匹拉韦等。任选地，抗病毒剂与α-干扰素、利巴韦林和/或阿奇霉素组合。在一个实施例中，抗病毒剂为瑞德西韦或阿奇霉素。

“皮质类固醇”是指具有类固醇的一般化学结构的几种合成或天然存在的物质中的任何一种，其模仿或增强天然存在的皮质类固醇的效果。合成的皮质类固醇的示例包括***、***龙(包括甲泼尼龙，诸如甲泼尼龙琥珀酸钠)、***或***曲安奈德、氢化可的松和倍他米松。在一个实施例中，皮质类固醇选自***、甲泼尼龙、氢化可的松和***。在一个实施例中，皮质类固醇是甲泼尼龙。在一个实施例中，皮质类固醇是“低剂量”糖皮质激素(例如≤1-2mg/kg/日甲泼尼龙，例如持续3-5天)。在一个实施例中，皮质类固醇是***(例如口服或iv 6mg每日一次，持续长达10天)或***。

“抗炎药”是减少炎症的药物。示例包括但不限于：类固醇(例如***)、抗-ST2(艾特利单抗；MSTT1041A)、IL-22Fc(UTTR1147A；参见例如US2014/0314711)、他汀、IL-6拮抗剂等。

“免疫调节剂”是控制免疫***的药物。示例包括例如IL-6拮抗剂、托珠单抗、萨瑞鲁单抗、阿那白滞素、巴瑞替尼、卡那单抗、鲁索替尼等。

“抗凝剂”是有助于防止血液凝结的药物，例如肝素。

“抗纤维化药物”是减缓或阻止纤维化的药物，例如酪氨酸激酶抑制剂(例如伊马替尼)或吡非尼酮。

“抗病毒抗体”是与病毒结合的抗体，并且优选可以中和病毒感染患者和/或在患者体内复制的能力。在一个实施例中，抗病毒抗体包含两种或多种抗病毒抗体的混合物，例如REGN-COV2。

本文的“人类白介素6”(简称为“IL-6”)是一种细胞因子，也称为B细胞刺激因子2(BSF-2)、或干扰素β-2(IFNB2)、杂交瘤生长因子和CTL分化因子。发现IL-6为促进B细胞活化的分化因子(Hirano等人,Nature 324:73-76(1986))，并且后来被发现是影响多种不同细胞类型起作用的多功能细胞因子(Akira等人,Adv.in Immunology 54:1-78(1993))。天然存在的人类IL-6变体是已知的并且包含在该定义中。已披露了人类IL-6氨基酸序列信息，参见例如www.uniprot.org/uniprot/P05231。

“IL-6拮抗剂”是指经由与人类IL-6或人类IL-6受体结合来抑制或阻断IL-6生物学活性的药剂。在一个实施例中，IL-6拮抗剂为抗体。在一个实施例中，IL-6拮抗剂是与IL-6受体结合的抗体。与IL-6受体结合的抗体包括托珠单抗(包括其静脉内注射iv和皮下注射sc制剂)(Chugai、Roche、Genentech)、萨特利珠单抗(Chugai、Roche、Genentech)、萨瑞鲁单抗(Sanofi、Regeneron)、NI-1201(Novimmune和Tiziana)和沃巴利珠单抗(Ablynx)。在一个实施例中，IL-6拮抗剂是与IL-6结合的单克隆抗体。与IL-6结合的抗体包括西鲁库单抗(Centecor、Janssen)、奥洛组单抗(UCB)、克拉扎珠单抗(BMS和Alder)、司妥昔单抗(Janssen)、EBI-031(Eleven Biotherapeutics和Roche)。在一个实施例中，IL-6拮抗剂为olamkicept。

出于本文的目的，“人类白介素6受体”(简称为“IL-6R”)是指与IL-6结合的受体，包括膜结合型IL-6R(mIL-6R)和可溶性IL-6R(sIL-6R)两者。IL-6R可与白介素6信号转导糖蛋白130组合以形成活性受体复合物。已报道编码IL-6的不同同种型的替代性地剪接转录物变体，并包括在该定义中。已描述了人类IL-6R及其胞外结构域的氨基酸序列结构；参见例如Yamasaki等人,Science,241:825(1988)。

本文的“中和”抗IL-6R抗体是与IL-6R结合的抗体，并且能够在可测量的程度上抑制IL-6与IL-6R结合和/或活化IL-6R的能力。托珠单抗是中和抗IL-6R抗体的示例。

“托珠单抗”或“TCZ”是重组人源化单克隆抗体，其可与人类白介素6受体(IL-6R)结合。该抗体为IgG1κ(γ1,κ)抗体，其具有两条重链和两条轻链形成两个抗原结合位点。在优选的实施例中，托珠单抗的轻链和重链氨基酸序列分别包含SEQ ID NO.1和2。

本文的“天然序列”蛋白质是指包含天然存在的蛋白质的氨基酸序列的蛋白质，包括蛋白质的天然存在的变体。本文使用的术语包括从其天然来源分离或重组生产的蛋白质。

本文中的术语“抗体”以最广泛的意义使用，并且具体地涵盖单克隆抗体、多克隆抗体、由至少两种完整抗体形成的多特异性抗体(例如，双特异性抗体)和抗体片段，只要它们表现出所需的生物活性。

本文的“抗体片段”包含保留了与抗原结合的能力的完整抗体的部分。抗体片段的示例包括Fab、Fab'、F(ab')₂和Fv片段；双体抗体；线性抗体；单链抗体分子；和由抗体片段形成的多特异性抗体。

如本文所使用，术语“单克隆抗体”是指从基本上同质的抗体群体获得的抗体，即，包含群体的个体抗体是相同的和/或结合相同的表位，除了在单克隆抗体的生产过程中可能产生的可能的变体之外，此类变体通常以少量存在。与通常包括针对不同决定簇(表位)的不同抗体的多克隆抗体制剂相反，每种单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。除特异性以外，单克隆抗体的优势还在于它们不受其他免疫球蛋白污染的情况下合成。修饰语"单克隆"表示抗体的特征是从基本上同质的抗体群体获得的，并且不应解释为需要通过任何特定方法产生抗体。例如，根据本发明的单克隆抗体可以通过首先由Kohler等人，Nature,256:495(1975)描述的杂交瘤方法制备，或可以通过重组DNA方法制备(参见例如美国专利号4,816,567)。“单克隆抗体”还可使用例如Clackson等人，Nature，352:624-628(1991)以及Marks等人，J.Mol.Biol.，222:581-597(1991)所述的技术从噬菌体抗体文库中分离得到。单克隆抗体的具体示例包括嵌合抗体、人源化抗体和人类抗体，包括其抗原结合片段。

本文中的单克隆抗体具体地包括“嵌合”抗体(免疫球蛋白)，其中重链和/或轻链的一部分与来自特定物种或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而一条或多条链的其余部分与来自另一物种或属于另一抗体类别或亚类的抗体中的相应序列以及此类抗体的片段相同或同源，只要它们表现出所需的生物学活性即可(美国专利号4,816,567；Morrison等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,81:6851-6855(1984))。本文中的目标嵌合抗体包括“灵长类源化”抗体，其包含来源于非人灵长类动物(例如旧大陆猴，诸如狒狒、恒河猴或食蟹猴)的可变结构域抗原结合序列以及人恒定区序列(美国专利号5,693,780)。

“人源化”形式的非人(例如，鼠)抗体为含有来源于非人免疫球蛋白的最小序列的嵌合抗体。在大多数情况下，人源化抗体为人免疫球蛋白(受体抗体)，其中受体的高变区中的残基被来自非人类物种(供体抗体)的高变区的残基替换，所述非人类物种诸如小鼠、大鼠、兔或非人灵长类动物，其具有所需的特异性、亲和力和功能。在一些情况下，人免疫球蛋白的框架区(FR)残基被相应的非人类残基取代。此外，人源化抗体可包含受体抗体或供体抗体中不存在的残基。这些修饰旨在进一步完善抗体性能。总体上，人源化抗体将基本上包含所有可变结构域或至少一个可变结构域，通常是两个可变结构域，其中所有或基本上所有高变区对应于非人免疫球蛋白的高变区，并且所有或基本上所有的FR为人免疫球蛋白序列的FR，除了上面提到的FR取代之外。人源化抗体还任选地包含免疫球蛋白恒定区的至少一部分，该免疫球蛋白通常为人免疫球蛋白。更多详情参见Jones等人，Nature 321:522-525(1986)；Riechmann等人，Nature 332:323-329(1988)；以及Presta，Curr.Op.Struct.Biol.2:593-596(1992)。本文的人源化抗体具体地包括如美国专利号5,795,965中所述的“重塑”IL-6R抗体，该文献通过引用明确地并入本文。

本文的“人类抗体”是一种包含氨基酸序列结构的抗体，该氨基酸序列结构与可从人类B细胞获得的抗体的氨基酸序列结构相对应，并且包括人类抗体的抗原结合片段。此类抗体可以通过各种技术鉴定或制备，包括但不限于：通过能够在没有内源性免疫球蛋白产生的情况下，在免疫接种后产生人类抗体的转基因动物(例如小鼠)生产(参见例如.,Jakobovits等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,90:2551(1993)；Jakobovits等人,Nature,362:255-258(1993)；Bruggermann等人,Year in Immuno.,7:33(1993)；以及美国专利号5,591,669,5,589,369和5,545,807)；从表达人类抗体或人类抗体片段的噬菌体展示文库中选择(参见例如McCafferty等人,Nature348:552-553(1990)；Johnson等人,CurrentOpinion in Structural Biology3:564-571(1993)；Clackson等人,Nature,352:624-628(1991)；Marks等人,J.Mol.Biol.222:581-597(1991)；Griffith等人,EMBO J.12:725-734(1993)；美国专利号5,565,332和5,573,905)；经由体外活化的B细胞生成(参见美国专利5,567,610和5,229,275)；以及从产生抗体的人类杂交瘤中分离。

本文的“多特异性抗体”是对至少两个不同表位具有结合特异性的抗体。示例性多特异性抗体可以结合IL-6R的两个不同表位。替代性地，抗IL-6R结合臂可与结合白细胞上的触发分子的臂组合，所述触发分子诸如T细胞受体分子(例如CD2或CD3)，或IgG的Fc受体(FcγR)诸如FcγRI(CD64)、FcγRII(CD32)和FcγRIII(CD16)，从而将细胞防御机制集中于受体。可以将多特异性抗体制备为全长抗体或抗体片段(例如F(ab')₂双特异性抗体)。还考虑了具有三个或多个(优选四个)功能性抗原结合位点的工程化抗体(参见例如美国申请号US 2002/0004587 A1,Miller等人)。

本文的抗体包括具有改变的抗原结合或生物活性的“氨基酸序列变体”。此类氨基酸改变的示例包括对抗原(例如亲和力成熟的抗体)具有增强亲和力的抗体、和具有改变Fc区(如果存在)的抗体(例如具有改变的(增加或减少)抗体依赖细胞毒性(ADCC)和/或补体依赖细胞毒性(CDC))(参见例如WO 00/42072,Presta,L.和WO 99/51642,Iduosogie等人)；和/或增加或减少血清半衰期(参见例如WO00/42072,Presta,L.)。

本文的抗体可以与“异源分子”接合，例如以增加半衰期或稳定性或者以其他方式改善抗体。例如，抗体可以连接到多种非蛋白质聚合物中的一种，例如聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇、聚氧化烯或聚乙二醇和聚丙二醇的共聚物。与一个或多个PEG分子连接的抗体片段(诸如Fab')是本发明的示例性实施例。

本文的抗体可能是“糖基化变体”，因此附接在Fc区上的任何碳水化合物(如果存在)都会被改变。例如，在美国专利申请号US 2003/0157108(Presta,L.)中描述的抗体具有成熟的碳水化合物结构，缺少附接到抗体Fc区的岩藻糖。还参见US 2004/0093621(KyowaHakko Kogyo Co.,Ltd)。WO 2003/011878,Jean-Mairet等人和美国专利号6,602,684,Umana等人中引用了与抗体Fc区附接的碳水化合物中含有二等分N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)的抗体。WO 1997/30087,Patel等人中还报道了在与抗体Fc区附接的寡糖中具有至少一个半乳糖残基的抗体。还参见WO 1998/58964(Raju,S.)和WO 1999/22764(Raju,S.)涉及具有与抗体Fc域附接的改变的碳水化合物的抗体。还参见US 2005/0123546(Umana等人)，其描述了具有修饰的糖基化的抗体。

如本文所用的术语“高变区”是指抗体中负责抗原结合的氨基酸残基。高变区包含来自“互补决定区”或“CDR”的氨基酸残基(例如，在轻链可变结构域中的残基24-34(L1)、50-56(L2)和89-97(L3)，以及在重链可变结构域中的残基31-35(H1)、50-65(H2)和95-102(H3)；Kabat等人.,Sequences of Proteins of Immunological Interest,第5版.PublicHealth Service,National Institutes of Health,Bethesda,MD.(1991))和/或来自“高变环”的那些残基(例如轻链可变结构域中的残基26-32(L1)、50-52(L2)和91-96(L3)，以及重链可变结构域中的残基26-32(H1)、53-55(H2)和96-101(H3)；Chothia和LeskJ.Mol.Biol.196:901-917(1987))。“框架”或“FR”残基是除本文定义的高变区残基以外的那些可变结构域残基。托珠单抗的高变区包含：

L1-Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Tyr Leu Asn(SEQ ID NO:3)；

L2-Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser(SEQ ID NO:4)；

L3–Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr(SEQ ID NO:5)；

H1–Ser Asp His Ala Trp Ser(SEQ ID NO:6)；

H2-Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ile Thr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser(SEQ IDNO:7)；和

H3-Ser Leu Ala Arg Thr Ala Met Asp Tyr(SEQ ID NO:8)。

在本文的一个实施例中，IL-6R抗体包含托珠单抗的高变区。

“全长抗体”是包含抗原结合可变区以及轻链恒定结构域(CL)和重链恒定结构域CH1、CH2和CH3的抗体。恒定结构域可为天然序列恒定结构域(例如，人类天然序列恒定结构域)或其氨基酸序列变体。优选地，全长抗体具有一种或多种效应子功能。托珠单抗是全长抗体的示例。

“裸抗体”是不与异源分子诸如细胞毒性部分、聚合物或放射性标记缀合的抗体(如本文所定义)。

抗体“效应子功能”是指归因于抗体的Fc区(天然序列Fc区或氨基酸序列变体Fc区)的生物活性。抗体效应子功能的示例包括C1q结合、补体依赖细胞毒性(CDC)、Fc受体结合、抗体依赖细胞介导的细胞毒性(ADCC)等。

根据其重链恒定结构域的氨基酸序列，可以将全长抗体分为不同的“类别”。存在五大类全长抗体：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，并且这些类别中的若干可以进一步分为“亚类”(同种型)，例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgA和IgA2。对应于不同类别的抗体的重链恒定结构域分别称为α、δ、ε、γ和μ。不同种类的免疫球蛋白的亚基结构和三维构型是众所周知的。

本文所用的术语“重组抗体”是指由包含编码抗体的核酸的重组宿主细胞表达的抗体(例如嵌合的、人源化的或人类的抗体或其抗原结合片段)。用于生产重组抗体的“宿主细胞”的示例包括：(1)哺乳动物细胞，例如中国仓鼠卵巢(CHO)、COS、骨髓瘤细胞(包括Y0和NS0细胞)、幼仓鼠肾(BHK)、Hela和Vero细胞；(2)昆虫细胞，例如sf9、sf21和Tn5；(3)植物细胞，例如属于烟草属(例如烟草)的植物；(4)酵母细胞，例如属于酵母属(例如酿酒酵母)或曲霉属(例如黑曲霉)的酵母细胞；(5)细菌细胞，例如大肠杆菌细胞或枯草芽孢杆菌细胞等。

如本文所用的“特异性结合”或“特异性结合至”是指抗体选择性地或优先地与IL-6R抗原结合。优选地，抗原的结合亲和力的Kd值为10^-9mol/l或更低(例如10^-10mol/l)，优选地Kd值为10^-10mol/l或更低(例如10^-12mol/l)。使用标准结合测定(诸如表面等离子体共振技术)来确定结合亲和力。

“非甾体抗炎药”或“NSAIDs”的示例包括阿司匹林、乙酰水杨酸、布洛芬、氟比洛芬、萘普生、吲哚美辛、舒林酸、托美丁、苯基丁氮酮、双氯芬酸、酮洛芬、扑炎痛、甲芬那酸、甲氨蝶呤、芬布芬、阿扎丙酮；COX-2抑制剂，诸如塞来昔布(4-(5-(4-甲苯基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)苯磺酰胺、伐地考昔/>美洛昔康GR 253035(Glaxo Wellcome)；和MK966(Merck Sharp&Dohme)，包括其盐或衍生物，等。具体实施例包括：阿司匹林、萘普生、布洛芬、吲哚美辛和托美丁。

关于IL-6拮抗剂，“有效量”是指用于治疗肺炎(例如病毒性肺炎(包括COVID-19肺炎))和/或用于治疗急性呼吸窘迫综合征(ARDS)有效的IL-6拮抗剂(例如IL-6受体抗体，诸如托珠单抗)的量。

术语“药物制剂”是指处于允许一种或多种活性成分的生物活性有效的形式，并且不含对于将被施用制剂的受试者具有不可接受的毒性的另外组分的制备物。此类制剂为无菌制剂。在一个实施例中，制剂用于静脉内注射(iv)施用。在另一个实施例中，制剂用于皮下注射(sc)施用。

“无菌”制剂是无菌的或不含所有活微生物及其孢子。

根据本发明的“液体制剂”或“水性制剂”是指在至少约2℃至约8℃的温度下呈液态的制剂。

术语“冻干制剂”是指通过冷冻制剂并随后通过本领域中已知的任何冻干方法(例如可商购的冻干装置)将冰从冷冻内容物中升华而干燥的制剂。此类制剂可在适当的稀释剂(诸如水、注射用无菌水、盐水溶液等)中重构，以形成适用于向受试者施用的重构的液体制剂。

“包装说明书”用于指治疗产品的商业包装中通常包括的说明书，其含有涉及此类治疗产品的使用的有关适应症、用法、剂量、施用、禁忌症、与包装内的产品组合使用的其他治疗产品和/或警告的信息。

生物标志物的“升高”水平是指患者体内该生物标志物的量高于正常上限(ULN)。

“升高的IL-6水平”为≥15pg/mL，或≥10pg/mL或>7pg/mL，例如通过患者血液样品的酶联免疫吸附测定(ELISA)测量的。在一个实施例中，“正常”IL-6水平被认为是7pg/mL。在一个实施例中，升高的IL-6水平≥80ng/L，例如如ELISA测量的。

对于“通过实验室测试未发现IL-6水平升高”的患者，在不考虑其IL-6水平的情况下，根据本文的方法进行治疗。在一个实施例中，这样的患者没有升高的IL-6水平。

“瑞德西韦”是一种抗病毒药物，是一种核苷酸类似物，具体是一种腺苷类似物，其***病毒RNA链，导致病毒RNA链提前终止。它们的分子式为C₂₇H₃₅N₆O₈P并且IUPAC名称为2-乙丁基(2S)-2-[[[(2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基氧戊环-2-基]甲氧基-苯氧基磷酰基]氨基]丙酸酯。瑞德西韦的实验室名称为GS-5734并且其CAS号为1809249-37-3。瑞德西韦描述于美国专利号9,724,360并且由Gilead Sciences制造。

如本文所用的术语“生物标志物”是指一种可在样品中检测到的指示物，例如预测性的、诊断性的和/或预后性的，例如铁蛋白和IL-6生物标志物。生物标志物优选能预测患者对IL-6拮抗剂的响应。生物标志物包括但不限于多核苷酸(例如DNA和/或RNA)、多核苷酸拷贝数改变(例如，DNA拷贝数)、多肽、多肽和多核苷酸修饰(例如，翻译后修饰)、碳水化合物和/或基于糖脂的分子标记。在一个实施例中，生物标志物是铁蛋白。在一个实施例中，生物标志物是IL-6。

与对个体的临床益处增加相关的生物标志物的“量”或“水平”是生物样品中可检测的水平。这些可以通过本领域技术人员已知并且在本文中公开的方法来测量。所评估的生物标志物的表达水平或数量可用于确定对治疗的响应。

“高于正常上限的水平”是指受试者(包括健康受试者)或患者(包括患有肺炎或经历炎症的患者)中异常或非典型的生物标志物的量。测量这种异常量的铁蛋白和IL-6的测定，以及用于确定有资格接受疗法的患者的铁蛋白或IL-6的“截断值”或“比较器”是本领域已知的，并在本文中披露。

如本文所用的术语“样品”是指获自或衍生自目的受试者或患者的组合物，其包含待表征和/或鉴定的细胞和/或其他分子实体。样品包括但不限于，组织样品、原代或培养的细胞或细胞系、细胞上清液、细胞裂解液、血小板、血清、血浆、玻璃体液、淋巴液、滑液、***、***、羊水、乳汁、全血、血液来源的细胞、尿液、脑脊液、唾液、痰、眼泪、汗液、粘液、肿瘤溶解产物和组织培养基、组织提取物诸如均质化的组织、肿瘤组织、细胞提取物及其组合。在一个实施例中，样品是来自患者的血液标本。在一个实施例中，样品是来自患者的血清样品。在一个实施例中，样品是来自患者的血浆样品。

“铁蛋白”是在体内储存和释放铁的蛋白质。出于本文的目的，“铁蛋白”是指人类铁蛋白。铁蛋白是球状蛋白复合物，包含由24个蛋白亚单位形成的纳米笼，伴随多种金属–蛋白质相互作用。

“铁蛋白水平”可以在患者或受试者的样品(例如血样(全血、血清和/或血浆))中使用在院内标准的测定测量。示例性铁蛋白测定包括但不限于：标记非放射测定(例如EIA、酶免疫测定；荧光测定；ELISA：酶联免疫吸附测定；化学发光测定(例如ECL：电化学发光测定，例如Roche测定)；MEIA：微粒子酶免疫测定；RPIA：径向分离免疫测定)；标记放射测定(例如RIA：放射性免疫测定；IRMA：免疫放射测定)；凝集测定(例如浊度测定；浊度测定；LPIA：乳胶光密度免疫测定)；参见例如，Garcia-Casel等人PLoS One.2018；13(5):e0196576。在一个实施例中，测定是酶免疫测定或化学发光测定。在一个实施例中，患者样品是血清或血浆样品。

出于本文的目的，“正常铁蛋白水平”是指正常(男性或女性)受试者中铁蛋白水平，该正常受试者不存在铁蛋白缺乏或未经历导致铁蛋白水平升高的炎症。总体上，男性正常铁蛋白水平范围为每毫升血液中约12至约300纳克(ng/mL)以及女性正常铁蛋白水平范围为约12至150ng/mL。参见例如www.medicinenet.com/ferritin_blood_test/article.htm。

本文的“升高”、“异常升高”或“高于正常”的铁蛋白水平意指受试者体内高于“正常上限”铁蛋白水平的铁蛋白的量，例如>300ng/mL或400ng/mL(对于男性患者)，>150ng/mL(对于女性患者)，≥约2198pmol/L或≥约3150pmol/L，例如施用酶免疫测定或化学发光测定(例如铁蛋白测定)测量的。

II.IL-6拮抗剂的产生

本文考虑的IL-6拮抗剂包括与IL-6或IL-6受体结合的拮抗剂。

在一个实施例中，IL-6拮抗剂为抗体。

在一个实施例中，IL-6拮抗剂是与IL-6受体结合的抗体。

在一个实施例中，IL-6拮抗剂是同时与膜结合型IL-6受体和可溶性IL-6受体结合的抗体。

在一个实施例中，IL-6拮抗剂阻断IL-6/IL-6受体复合物，并降低血液中IL-6的循环水平。

与IL-6受体结合的抗体包括托珠单抗(包括其静脉内注射iv和皮下注射sc制剂)(Chugai、Roche、Genentech)、萨特利珠单抗(Chugai、Roche、Genentech)、萨瑞鲁单抗(Sanofi、Regeneron)、NI-1201或TZLS-501(Novimmune和Tiziana)和沃巴利珠单抗(Ablynx)。

在一个实施例中，IL-6拮抗剂为托珠单抗。

托珠单抗，又名骨髓瘤受体抗体(MRA)，是选择性结合人类白介素-6受体(IL-6R)的重组人源化单克隆抗体。该抗体为IgG1κ(γ1,κ)抗体，具有典型的H₂L₂结构。托珠单抗分子由两个异二聚体组成。每个异二聚体由重(H)和轻(L)多肽链组成。四条多肽链通过二硫键在分子内和分子间连接。托珠单抗抗体的分子式和理论分子量如下：

分子式：C₆₄₂₈H₉₉₇₆N₁₇₂₀O₂₀₁₈S₄₂(仅多肽部分)

分子量：144,985Da(仅多肽部分)。

由互补脱氧核糖核酸(cDNA)序列推导轻链氨基酸序列，该氨基酸序列经液相色谱-质谱(LC-MS)肽图谱确认在SEQ ID No 1和2中。每个异二聚体的五个轻链半胱氨酸残基参与两个链内二硫键和一个链间二硫键：

链内键：Cys_L23-Cys_L88和Cys_L134-Cys_L194

重链和轻链之间的键：Cys_L214和Cys_H222

二硫键的分配是基于与其他IgG1抗体的序列同源性，并通过使用***(G4)工艺的材料进行液相色谱-质谱(LC-MS)肽图谱确认。Cys_Lx和Cys_Hx分别表示轻链和重链x位置的半胱氨酸残基。

SEQ ID NO.1托珠单抗分子的L链的氨基酸序列

注释：整个序列已通过LC-MS肽图谱确定。

由互补脱氧核糖核酸(cDNA)序列推导重链氨基酸序列，该氨基酸序列经氨基酸测序确认在SEQ ID NO.2中。每个异二聚体的十一个重链半胱氨酸残基参与四个链内二硫键、两个重链之间的两个链间二硫键以及每个异二聚体的重链和轻链之间的第三个链间二硫键：

链内键：Cys_H22-Cys_H96、Cys_H146-Cys_H202、Cys_H263-Cys_H323和Cys_H369-Cys_H427

两个重链之间的键：Cys_H228-Cys_H228和Cys_H231-Cys_H231

重链和轻链之间的键：Cys_L214-Cys_H222

二硫键的分配是基于与其他IgG1抗体的序列同源性，并通过使用G4工艺的材料进行LC-MS肽图谱确认。

SEQ ID NO.2托珠单抗分子的H链的氨基酸序列

注释：整个序列已通过LC-MS肽图谱确定。已确定重链的N-末端主要是焦谷氨酸残基(pE)。

在一个实施例中，IL-6拮抗剂为萨特利珠单抗。萨特利珠单抗(也称为SA237)是一种与IL-6受体结合的人源化单克隆抗体。参见美国专利号US 8,562,991。

在一个实施例中，IL-6拮抗剂是与IL-6受体结合的人类抗体，称为TZLS-501(Tiziana)或NI-1201(Novimmune)。

在一个实施例中，IL-6拮抗剂是与IL-6结合的单克隆抗体。

与IL-6结合的抗体包括西鲁库单抗(Centecor、Janssen)、奥洛组单抗(UCB)、克拉扎珠单抗(BMS和Alder)、司妥昔单抗(Janssen)、EBI-031(Eleven Biotherapeutics和Roche)。

在一个实施例中，IL-6拮抗剂为olamkicept。Olamkicept是一种重组蛋白，其将IL-6受体——IL-6Rβ(糖蛋白130，gp130)的信号转导亚基的胞外结构域与人类IgG Fc片段融合。完整的构建体是共价连接相同肽链的二聚体。从机制上来看，olamkicept是IL-6信号传导通路的抑制剂起作用。Olamkicept通过可溶性IL-6受体(sIL-6R)抑制反式信号传导。

在优选的实施例中，本发明的制造方法和制品使用或掺入了与人类IL-6R结合的抗体。用于产生或筛选抗体的IL-6R抗原可以是例如IL-6R或其部分(含有所需的表位)(例如胞外结构域)的可溶性形式。替代性地，或另外地，在它们的细胞表面表达IL-6R的细胞可用于生成或筛选抗体。可用于生成抗体的其他形式的IL-6R对本领域技术人员来说是显而易见的。

在一个实施例中，抗体是抗体片段，上文披露了多种此类片段。

在另一个实施例中，抗体是完整或全长抗体。根据其重链恒定结构域的氨基酸序列，可以将完整抗体分为不同的类别。存在五大类完整抗体：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，并且这些类别中的若干可以进一步分为“亚类”(同种型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA和IgA2。对应于不同类别的抗体的重链恒定结构域分别称为α、δ、ε、γ和μ。不同种类的免疫球蛋白的亚基结构和三维构型是众所周知的。在优选的实施例中，抗IL-6R抗体是IgG1或IgM抗体。

生成抗体的技术是已知的，并在本文档上文的定义部分提供了示例。在优选的实施例中，抗体是嵌合的、人源化的或人类的抗体或其抗原结合片段。优选地，抗体是人源化全长抗体。

多种技术可用于确定抗体与IL-6R的结合。一种这样的测定是酶联免疫吸附测定(ELISA)，用于确认与人类IL-6R结合的能力。例如，参见美国专利号5,795,965。根据该测定，包被IL-6R(例如重组sIL-6R)的平板与包含抗IL-6R抗体的样品一起孵育，并且确定抗体与sIL-6R的结合。

优选地，该抗IL-6R抗体中和IL-6活性，例如通过抑制IL-6与IL-6R的结合。例如，在美国专利号5,670,373和5,795,965中披露了评估这种抑制的示例性方法。根据本方法，评估抗体与IL-6竞争IL-6R的能力。例如，向包被IL-6R(例如重组sIL-6R)的平板添加包含带有标记的IL-6的抗IL-6R抗体的样品，并且测量该抗体阻断标记的IL-6与IL-6R结合的能力。参见美国专利号5,795,965。替代性地，或另外地，根据Taga等人J.Exp.Med.,166:967(1987)的方法进行IL-6与膜结合型IL-6R的结合的鉴定。还可以用使用IL-6依赖性人类T细胞白血病细胞系KT3确认中和活性的测定，参见美国专利号5,670,373和Shimizu等人Blood72:1826(1988)。

本文抗IL-6R抗体的非限制示例包括PM-1抗体(Hirata等人,J.Immunol.143:2900-2906(1989))、AUK12-20、AUK64-7和AUK146-15抗体(美国专利号5,795,965)以及其人源化变体，包括例如托珠单抗。参见美国专利号5,795,965。本发明中使用的重塑的人类抗体的优选的示例包括人源化的或重塑的抗白介素(IL-6)受体抗体(hPM-1或MRA)(参见美国专利号5,795,965)。

本文的抗体优选是由编码其重链和轻链的核酸序列转化的宿主细胞(例如其中宿主细胞已被一个或多个带有其核酸的载体转化)中重组产生。优选的宿主细胞是哺乳动物细胞，最优选地是中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。

III.药物制剂

根据本发明所使用的抗体的治疗制剂是通过将具有所需纯度的抗体与任选的药用载体、赋形剂或稳定剂(Remington's Pharmaceutical Sciences第16版,Osol,A.编辑(1980))混合，用于以冻干制剂或水性溶液的形式制备用于储存。可接受的载体、赋形剂或稳定剂在使用的剂量和浓度下对受体无毒，并且包括缓冲液，诸如磷酸盐、柠檬酸盐和其他有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和蛋氨酸；防腐剂(诸如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氯化六甲双铵；苯扎氯铵；苄索氯铵；苯酚、丁醇或苄醇；对羟基苯甲酸烷基酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；间甲酚)；低分子量(少于约10个残基)的多肽；蛋白质，诸如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，诸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，诸如EDTA；糖，诸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨糖醇；成盐抗衡离子，诸如钠；金属络合物(例如，锌蛋白络合物)；和/或非离子表面活性剂，诸如TWEEN^TM、PLURONICS^TM或聚乙二醇(PEG)。

本文的制剂还可含有多于一种以上的活性化合物(根据需要)，优选为具有不会彼此不利地影响的互补活性的那些活性化合物。此类药物的类型和有效量取决于例如制剂中存在的抗体的量以及受试者的临床参数。下文讨论了示例性的此类药物。

活性成分可以包埋在例如通过凝聚技术或通过界面聚合制备的微胶囊(例如，分别为羟甲基纤维素或明胶微胶囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊)中，被包埋在胶体药物递送***(例如，脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米粒子和纳米胶囊)中或粗滴乳液中。此类技术公开于Remington's Pharmaceutical Sciences第16版，Osol,A.编(1980)中。

可以制备缓释制备物。持续释放制备物的合适示例包括含有抗体的固体疏水聚合物的半透性基质，该基质为成型制品的形式，例如，膜或微胶囊。持续释放基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如，聚(甲基丙烯酸2-羟乙酯)或聚乙烯醇)、聚丙交酯(美国专利号3,773,919)、L-谷氨酸和γ-L-谷氨酸的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物诸如LUPRON DEPOT^TM(由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林组成的可注射微球)和聚-D-(-)-3-羟基丁酸。

待用于体内施用的制剂必须为无菌的。这通过无菌过滤膜过滤很容易实现。

在一个实施例中，该制剂适用于静脉内(iv)输注，例如美国专利号8,840,884和9,051,384中公开的托珠单抗iv制剂。在一个实施例中，托珠单抗iv制剂是无菌、澄清、无色至淡黄色的、不含防腐剂的溶液，可在静脉内输注前进一步稀释，pH约为6.5。在一个实施例中，托珠单抗iv制剂以单剂量小瓶提供，用磷酸氢二钠十二水合物/磷酸二氢钠二水合物缓冲溶液配制，并且浓度为20mg/mL，含有80mg/4mL、200mg/10mL或400mg/20mL的托珠单抗。在一个实施例中，每mL托珠单抗iv溶液含有聚山梨酯80(0.5mg)、蔗糖(50mg)和注射用水，USP。

在一个实施例中，制剂适用于皮下注射(sc)施用，例如美国专利8,568,720中的托珠单抗sc制剂。在一个实施例中，托珠单抗sc制剂是无菌、澄清、无色至浅黄色的、不含防腐剂的组氨酸缓冲溶液，用于皮下注射使用，pH约为6.0。在一个实施例中，托珠单抗sc制剂是在带有针头安全装置的即用型单剂量0.9mL预填充注射器(PFS)或即用型单剂量0.9mL自动注射器中提供的。在一个实施例中，托珠单抗sc制剂递送162mg托珠单抗、L-精氨酸盐酸盐(19mg)、L-组氨酸(1.52mg)、L-组氨酸盐酸盐一水合物(1.74mg)、L-蛋氨酸(4.03mg)、聚山梨酯80(0.18mg)和注射用水。

IV.诊断方法

在一个实施例中，本发明提供了用于鉴定可能从接受IL-6拮抗剂治疗中获益的肺炎患者的方法，该方法包括测量患者样品中的铁蛋白水平，其中升高的铁蛋白水平将该患者鉴定为将从治疗中获益的患者。

铁蛋白水平可以在来自病人或受试者的样品中测量。优选地，该样品是血液样品，例如全血、血清或血浆，优选是血清或血浆样品。

示例性铁蛋白测定包括但不限于：标记的非放射测定(例如EIA、酶免疫测定；荧光测定；ELISA：酶联免疫吸附测定；化学发光测定(例如ECL：电化学发光测定，例如Roche测定)；MEIA：微粒子酶免疫测定；RPIA：径向分离免疫测定)；标记放射测定(例如RIA：放射性免疫测定；IRMA：免疫放射测定)；凝集测定(例如浊度测定；浊度测定；LPIA：乳胶光密度免疫测定)；参见例如，Garcia-Casel等人PLoS One.2018；13(5):e0196576。

在一个实施例中，铁蛋白测定是酶免疫测定。

在一个实施例中，铁蛋白测定是化学发光测定。

在一个实施例中，铁蛋白测定是电化学发光(ECL)测定，例如Roche测定。

在一个实施例中，样品中的铁蛋白水平升高、异常高、高于正常、或高于受试者的正常铁蛋白水平上限。

在一个实施例中，对于男性患者，铁蛋白水平>300ng/mL或>400ng/mL。

在一个实施例中，对于女性患者，铁蛋白水平>150mg/mL。

在一个实施例中，铁蛋白水平≥约2198pmol/L。

在一个实施例中，铁蛋白水平≥约3150pmol/L。

在另一个实施例中，本发明提供了用于鉴定正在接受无创通气或高流量氧或者***管并且正在进行机械通气，可能受益于接受IL-6拮抗剂治疗的患有肺炎的住院患者的方法，该方法包括测量患者样品中的IL-6水平，其中升高的IL-6水平将该患者鉴定为将受益于缩短至出院的时间的患者。

IL-6水平可以在来自病人或受试者的样品中测量。优选地，该样品是血液样品，例如全血、血清、血浆或其组合，优选是血清或血浆样品。

在一个实施例中，来自个体的样品中IL-6的表达水平被确定为高于参考IL-6表达水平，例如，其中参考IL-6表达水平是预先指定的IL-6表达水平。例如，样品中IL-6的表达水平是相对参考IL-6表达水平高出至少四个标准差的IL-6表达水平。

在一个实施例中，样品中IL-6的表达水平是IL-6的蛋白表达水平，例如通过酶联免疫吸附测定(ELISA)。

在一个实施例中，IL-6的表达水平是IL-6的mRNA表达水平。用于测量IL-6的mRNA表达水平的测定包括原位杂交(ISH)(例如使用靶向IL-6mRNA的核苷酸2-1082的探针)、RNA-seq、RT-qPCR、qPCR、多重qPCR或RT-qPCR、微阵列分析、SAGE、MassARRAY技术、FISH或其组合。

在一个实施例中，升高的IL-6水平≥15pg/mL，例如如ELISA测量的。

在一个实施例中，升高的IL-6水平≥10pg/mL，例如如ELISA测量的。

在一个实施例中，升高的IL-6水平≥80ng/L，例如如ELISA测量的。

V.抗IL-6拮抗剂的治疗用途

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗未进行机械通气的患者中的肺炎的方法，其包括以有效防止患者死亡或接受机械通气的量向患者施用IL-6拮抗剂。

在一个实施例中，有效量防止患者接受机械通气。

在一个实施例中，肺炎是病毒性肺炎。

在一个实施例中，肺炎是中度肺炎、重症肺炎或危重症肺炎。

在一个实施例中，肺炎是重症肺炎。

在一个实施例中，肺炎是冠状病毒肺炎。

在一个实施例中，肺炎为COVID-19肺炎、中东呼吸道综合征(MERS-CoV)肺炎或重症急性呼吸综合征(SARS-CoV)肺炎。

在一个实施例中，肺炎是COVID-19肺炎。

在一个实施例中，患者为住院患者。

在一个实施例中，患者缺氧。

在一个实施例中，有效量的IL-6拮抗剂防止患者在自首次施用IL-6拮抗剂起或自基线起截至约第28天内死亡或接受机械通气。

在一个实施例中，施用IL-6拮抗剂可防止患者在自首次施用IL-6拮抗剂起截至约28天内死亡或接受机械通气。

在一个实施例中，其中在第28天死亡或机械通气率患者的估计累积比例在施用IL-6拮抗剂的情况下为约12％，相比之下在未接受抗IL-6拮抗剂的患者中为约19％。

在一个实施例中，患者进一步接受标准治疗。

在一个实施例中，与未接受IL-6拮抗剂但接受标准治疗(SOC)的患者相比，用IL-6拮抗剂治疗使患者死亡或接受机械通气的风险降低。

在一个实施例中，例如与在没有IL-6拮抗剂的情况下施用SOC的患者相比，施用IL-6拮抗剂使死亡或需要机械通气的风险降低至少约40％(例如约44％)。

在一个实施例中，SOC包括施用抗病毒剂(例如瑞德西韦)和/或施用皮质类固醇(例如***)。

在一个实施例中，有效量的IL-6拮抗剂进一步降低临床失败的可能性，例如其中临床失败包括至以下的时间：死亡、机械通气、ICU入住和/或7类等级量表中的2类恶化(其中患者在治疗前已经入住ICU)。根据该实施例，该方法任选地使临床失败的风险降低直至第28天。

在另一方面，本发明涉及一种治疗未进行机械通气的患者中的病毒性肺炎的方法，其包括以有效防止患者死亡或接受机械通气的量向患者施用IL-6拮抗剂和瑞德西韦的组合。

根据该实施例，IL-6拮抗剂优选地是托珠单抗。

根据该实施例，有效量的托珠单抗包括第一基于体重的8mg/kg静脉内剂量的托珠单抗，任选地随后在该第一剂量之后8-24小时的第二基于体重的8mg/kg静脉内剂量的托珠单抗。

根据该实施例，有效量的瑞德西韦包括200mg的初始一次性剂量，随后为每天100mg，并且其中向患者施用5至10个总剂量的瑞德西韦。

在另一个实施例中，本发明涉及一种治疗未进行机械通气的患者中的病毒性肺炎的方法，其包括以有效防止患者死亡或接受机械通气的量向患者施用IL-6拮抗剂和皮质类固醇的组合。

根据该实施例，有效量的托珠单抗优选地包括第一基于体重的8mg/kg静脉内剂量的托珠单抗，任选地随后在该第一剂量之后8-24小时的第二基于体重的8mg/kg静脉内剂量的托珠单抗。

根据该实施例，其中皮质类固醇优选地包括***(例如口服或静脉内施用6mg，每天一次，持续长达10天)。

在一个实施例中，本文治疗的患者被鉴定为具有升高的铁蛋白水平。

在一个实施例中，本文治疗的患者具有升高的IL-6水平。

根据某些实施例，肺炎是：

○病毒性肺炎；

○中度肺炎；

○中度-重症肺炎；

○重症肺炎；

○重症-危重症肺炎；

○危重症肺炎；

○冠状病毒肺炎；

○COVID-19肺炎；

○中东呼吸道综合征(MERS-CoV)肺炎；

○重症急性呼吸综合征(SARS-CoV)肺炎

○重症COVID-19肺炎；

○危重症COVID-19肺炎；

○中度COVID-19肺炎；

○中度-重症COVID-19肺炎；

○重症-危重症COVID-19肺炎；

○病毒性肺炎伴缺氧；

○住院肺炎；

○住院肺炎伴缺氧；

○住院COVID肺炎；或者

○住院COVID肺炎伴缺氧。

在一个实施例中，施用IL-6拮抗剂治疗：

1.冠状病毒感染；

2.COVID-19感染；

3.与冠状病毒相关的炎症；

4.与病毒性感染相关的细胞因子释放；

5.与冠状病毒相关的细胞因子释放。

根据某些实施例，IL-6拮抗剂：

○与IL-6受体结合；

○与IL-6结合；

○是托珠单抗、萨特利珠单抗、萨瑞鲁单抗、NI-120、沃巴利珠单抗、西鲁库单抗、奥洛组单抗、克拉扎珠单抗、司妥昔单抗、EBI-031、或olamkicept；

○是萨瑞鲁单抗；

○优选地是托珠单抗。

根据某些实施例，IL-6拮抗剂是托珠单抗并且例如如下施用：第一基于体重的8mg/kg静脉内剂量的托珠单抗(例如其中第一剂量≤800mg的托珠单抗)，任选地随后在该第一剂量之后8-24小时的第二基于体重的8mg/kg静脉内剂量的托珠单抗(例如其中第二基于体重的剂量的托珠单抗≤800mg)。

根据某些实施例，该IL-6拮抗剂与至少一种另外的药剂(例如如一种、两种、三种、四种或多种另外的药剂)组合以治疗该患者，例如其中另外的药剂包括：

○抗病毒剂(例如，瑞德西韦、洛匹那韦/利托那韦、磷酸氯喹、羟氯喹、乌非诺韦和/或法匹拉韦)，任选地与α-干扰素、利巴韦林和/或阿奇霉素组合；

○皮质类固醇(例如***、***龙、甲泼尼龙、甲泼尼龙琥珀酸钠、***、***去炎松、氢化可的松和/或倍他米松)；

○另一种抗炎药(例如干扰素γ拮抗剂、白介素1拮抗剂、另一种IL-6拮抗剂、补体因子5a拮抗剂、类固醇、抗ST2、IL-22Fc和/或他汀)；

○另一种免疫调节剂(例如另一种IL-6拮抗剂、沙利鲁单抗、阿那白滞素、巴瑞克替尼、卡那单抗和/或鲁索替尼)；

○抗凝剂(例如肝素)；

○抗纤维化或酪氨酸激酶抑制剂(例如伊马替尼)或吡非尼酮；

○抗病毒抗体或其混合物(例如REGN-COV2)；

○抗体(例如恢复期血浆、超免疫免疫球蛋白、恢复期血浆来源的超免疫球蛋白、靶向SARS-CoV-2的单克隆抗体)；和/或

○SARS-CoV-2疫苗。

在一个实施例中，该IL-6拮抗剂与瑞德西韦组合施用于患者，例如，如初始一次性剂量为200mg，随后每天100mg，5至10个总剂量

在一个实施例中，仅向患者施用单次基于体重的剂量，8mg/kg(≤800mg)的托珠单抗。

在一个实施例中，仅向患者施用两次基于体重的剂量，每次剂量为8mg/kg(每次剂量≤800mg)的托珠单抗。

在一个实施例中，施用第二剂量的托珠单抗，例如：

○在首次剂量后患者临床状况无改善或恶化之后；

○在首次剂量后患者临床状况的等级量表无改善或出现≥一类恶化之后；

○在首次剂量后患者临床状况的等级量表(例如7类等级量表)出现≥一类恶化之后。

在一个实施例中，与标准治疗(SOC)相比，接受IL-6拮抗剂(例如托珠单抗)治疗在临床结果上有更大的改善。

在一个实施例中，与标准治疗(SOC)相比，IL-6拮抗剂治疗与可接受的安全性结果相关联，示例性安全性结果包括以下任何一个或多个：

○不良事件的发生和严重程度；

○根据美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准(NCI CTCAE)v5.0确定不良事件的严重程度；

○随时间变化的COVID-19(SARS-CoV-2)病毒载量；

○至逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)病毒阴性的时间；

○治疗后感染；以及

○靶向临床实验室测试结果相对于基线的变化。

其中，用于治疗肺炎特别是病毒性肺炎的SOC(诸如COVID-19肺炎)包括以下的任一种或多种(例如以下的一种、两种或三种)：

1.支持性治疗；

2.一种或多种抗病毒剂；

3.一种或多种皮质类固醇，例如一种或多种低剂量皮质类固醇。

在一个实施例中，IL-6拮抗剂与支持治疗组合。支持性治疗的示例包括但不限于：

1.氧疗(例如经由面罩或鼻导管；经鼻高流量氧疗或无创机械通气；创伤性机械通气；经由体外膜肺氧合(ECMO)的肺部扩张等)；

2.循环辅助(例如液体复苏、改善微循环和/或血管活性药物)；

3.肾脏替代疗法；

4.血浆疗法；

5.血液净化疗法；

6.血必净注射液(例如100mL/日一日两次)；

7.微生态剂(例如益生菌、益生元和合生元)；和/或

8.抗体(例如恢复期血浆、超免疫免疫球蛋白、恢复期血浆来源的超免疫球蛋白、靶向COVID-19的单克隆抗体)等

在一个实施例中，IL-6拮抗剂与多种抗病毒剂、(优选仅一种或两种)抗病毒剂组合。示例性抗病毒治疗包括但不限于：

1.瑞德西韦(例如在第1天施用RDV 200mg，然后在第2、3、4和5天施用RDV 100mg，或者在第1天施用RDV 200mg，然后在第2、3、4、5、6、7、8、9和10天施用RDV 100mg)。

2.α-干扰素(例如经由雾化；例如，成人每次约500万单位或等效量，添加2mL注射用无菌水；例如，经由每日两次雾化吸入)；

3.洛匹那韦/利托那韦(例如，成人每粒200mg/50mg，每次2粒，每日两次，例如≤10日)；

4.利巴韦林(例如与α-干扰素或洛匹那韦/利托那韦组合，例如，成人每次500mg，每日2–3次，静脉内注射，例如≤10日)；

5.磷酸氯喹或羟氯喹(例如对于18至65岁的成人；例如如果体重大于50kg，每次500mg，每日两次持续7天；如果体重低于50kg，每次500mg，每日两次，持续第1天和第2天；每次500mg，每日一次持续第3天至第7天)，任选地与阿奇霉素合用；

6.阿比多尔(例如，成人200mg，例如每日三次，例如≤10天)；以及

7.法匹拉韦(例如在第1天1600mg每日两次，然后600mg每日两次，持续7–10或14天)。

在一个实施例中，IL-6拮抗剂与一种或多种皮质类固醇结合，例如

1.***、***龙、甲泼尼龙、甲泼尼龙琥珀酸钠、***、***曲安奈德、氢化可的松、和/或倍他米松；

2.“低剂量”皮质类固醇；

3.皮质类固醇(例如≤1-2mg/kg/日)；

4.甲泼尼龙(例如≤1-2mg/kg/日)；

5.甲泼尼龙(例如≤1-2mg/kg/日持续3-5日)；

6.***(例如口服或iv 6mg每日一次持续长达10天)。

这些如本文所述的另外的药物通常以如上所使用的相同的剂量和施用途径使用，或约从1％至99％的迄今应用的剂量。如果使用此类的另外的药物，优选以低于不存在第一药物的情况下的量使用，特别是在使用第一种药物的最初剂量之外的后续剂量，以消除或减少由此产生的副作用。

另外的药剂的组合施用包括使用单独的制剂或单一药物制剂的共同施用(同时施用)，以及以任何顺序连续施用，其中优选在一定时间段内两种(或全部)活性剂(药物)同时发挥其生物学活性。

本发明的进一步的细节通过以下非限制性示例说明。在本说明书中所有引用的公开内容通过引用明确地并入本文。

实例1

EMPACTA的结果：一项用于评估托珠单抗在患有COVID-19肺炎的住院患者中的功效和安全性的随机、双盲、安慰剂对照、多中心研究患者选择

纳入标准：

■年满18岁，通过任何标本(例如呼吸道、血液、尿液、粪便、其他体液)的阳性PCR确诊感染SARS CoV 2(COVID 19)，并且通过CT扫描或胸部X射线证明)

■在环境空气中时SpO2<94％

排除标准

■需要持续气道正压通气(CPAP)、双相气道正压通气(BIPAP)或有创机械通气

■在研究者看来，无论是否提供治疗，在未来24小时内进展至死亡是即将到来和不可避免的。

■疑似活动性细菌、真菌、病毒或其他感染(除COVID-19外)

■筛选时，ALT或AST>5x ULN；ANC<1000/mL；血小板计数<50,000/Ml

功效终点

主要和次要功效终点总结如下。请注意，所有功效分析均按年龄分层(≤60岁，>60岁)。功效终点以分层方式进行测试，从主要功效终点开始并设门控。

主要功效终点：

至第28天(至事件分析的时间)的死亡或需要机械通气的患者的累积比例

次要功效终点

1.直至第28天的至出院或“准备出院”的时间(定义为在7类等级量表上，直至第28天的至出院或“准备出院”的时间)。

2.直至第28天的至临床状态等级改善的时间(定义为在7类等级量表中，如果基线等级量表为2，直至第28天的至至少2类或1类改善的时间)。

3.直至第28天的至临床失败的时间(定义为至死亡、机械通气、ICU入住或7类等级量表中的2类恶化(如果患者在基线时已经入住ICU或退出(以先发生者为准))。

4.至第28天的死亡率。

结果

EMPACTA临床试验的结果如图2至14中所示。

图2描绘了患者处置。纳入了来自美国、墨西哥、肯尼亚、南非、秘鲁和巴西的389名患者(388名可评估)。

如图3A至3B中的患者人口统计数据表明：

●组总体上得到很好的平衡。

●大约60％的男性。

●平均年龄为56岁，72％的人<65岁。

●平均体重为91公斤，平均体重指数(BMI)为32

●87％的少数民族患者：西班牙裔/拉丁裔56％，黑人/非裔美国人15％，美洲印第安人/阿拉斯加原住民/其他16％。

●大约81％的美国患者

●组之间的就业状况、教育状况和吸烟史相似。

如图4A至4C中所描绘的基线疾病特征显示：

●组在基线等级量表和炎症标志物方面得到平衡。

●总体而言，84％的患者在基线时CRP升高。

●在两组中从首次COVID症状到基线的平均时间均为8天。

●从COVID诊断到基线的平均时间为2天。

●组之间的类固醇使用(80％)和抗病毒药物使用(78％)相似。

主要功效终点是至第28天的死亡或需要机械通气的患者的累积比例，并且终点的结果如图6中所描绘。如该图所示，主要终点具有统计学显著性：

○第28天累积事件率(95％CI)：与在PBO+SOC中为19.3％(13.38％,27.45％)相比，在TCZ+SOC中为12.2％(8.61％,17.04％)(对数秩检验p值＝0.0348)

○风险比(95％CI)[ref＝PBO]：0.56(0.32,0.97)-与PBO+SOC相比，TCZ+SOC将死亡或需要机械通气的风险显著降低了44％。

次要功效终点如图7至10中所描绘。如这些图所示：

○图7：直至第28天的至出院或“准备出院”的时间，未发现统计学显著性：

●至出院的中位时间(95％CI)：与在PBO+SOC中为7.5天(7.0,9.0)相比，在TCZ+SOC中为6天(6.0,7.0)(对数秩检验p值＝0.2456)

●风险比(95％CI)[ref＝PBO]：1.16(0.90,1.48)

○图8：直至第28天的至临床状态等级改善的时间，未发现统计学显著性：

●至临床改善的中位时间(95％CI)：与在PBO+SOC中为7天(6.0,9.0)相比，在TCZ+SOC中为6天(6.0,7.0)(对数秩检验p值＝0.2597)

●风险比(95％CI)[ref＝PBO]：1.15(0.90,1.47)

○图9：直至第28天的至临床失败的时间，终点达到名义统计学显著性：

●在两组中均未达到至事件的中位时间(对数秩检验p值＝0.0217)

●风险比(95％CI)[ref＝PBO]：0.55(0.33,0.92)

○图10：至第28天的死亡率：

●死亡率在组之间具有可比性：

●在出院后的安全性随访期间，在TCZ组中有2人在28天内死亡。

功效分析结果的汇总

主要

关键次要

注释：以分层方式进行测试，以将整个研究范围内的1类错误率控制在5％的显著性水平。

P值基于按年龄分层的测试。

NE＝不可估量。

安全性数据

如图11至14中所描绘的安全性数据显示：

○图11：安全性概览：

●SAE、严重感染和致命AE在组之间是平衡的

●没有新的安全性信号

○图12：特别关注的不良事件(AESI)：

●AESI在组之间是平衡的，并且与TCZ的已知概况是相当的

○图13：按***器官分类的严重不良事件(SAE)(在任何组中发生率>1％)：

●SAE在治疗组之间是平衡的

○图14：严重不良事件：感染和侵染(在任何组中的发生率>1％)

●严重感染在治疗组之间是平衡的。

结论

功效性

■与PBO+SOC相比，TCZ+SOC显著降低了死亡或需要机械通气的风险。

■至临床失败的时间是唯一具有名义显著性的关键次要功效终点。

安全性

■没有发现新的安全性信号。

■总体AE概况在TCZ与PBO之间平衡，包括感染和严重感染。

总体研究结论

EMPACTA表明TCZ+SOC在降低在基线时不需要机械通气的住院COVID-19肺炎患者中的死亡或需要机械通气的风险方面的功效性和安全性优于PBO+SOC。总体而言，治疗组之间的死亡率在第28天没有差异。

序列表

<110> 基因泰克公司

<120> EMPACTA 的结果：一项用于评估托珠单抗在患有 COVID-19 肺炎的住院患者中的功效和安全性的随机、双盲、安慰剂对照、多中心研究

<130> P36402-WO

<150> 63/079877

<151> 2020-09-17

<160> 8

<170> PatentIn 版本 3.5

<210> 1

<211> 214

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 托珠单抗轻链

<400> 1

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 2

<211> 448

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 托珠单抗重链

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 焦谷氨酸

<400> 2

Xaa Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Arg Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Asp

20 25 30

His Ala Trp Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ile Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Ser Arg Val Thr Met Leu Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Leu Ala Arg Thr Thr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Ser Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

<210> 3

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 托珠单抗 CDR L1

<400> 3

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 4

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 托珠单抗 CDR L2

<400> 4

Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser

1 5

<210> 5

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 托珠单抗 CDR L3

<400> 5

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

1 5

<210> 6

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 托珠单抗 CDR H1

<400> 6

Ser Asp His Ala Trp Ser

1 5

<210> 7

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 托珠单抗 CDR H2

<400> 7

Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ile Thr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 8

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 托珠单抗 CDR H3

<400> 8

Ser Leu Ala Arg Thr Ala Met Asp Tyr

1 5

Claims

1.一种治疗未进行机械通气的患者的肺炎的方法，其包括以有效防止所述患者死亡或接受机械通气的量向所述患者施用IL-6拮抗剂。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述肺炎为病毒性肺炎。

3.根据权利要求1或权利要求2中任一项所述的方法，其中所述肺炎为中度肺炎、重症肺炎或危重症肺炎。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述肺炎为重症肺炎。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述肺炎为冠状病毒肺炎。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述肺炎为COVID-19肺炎、中东呼吸综合征(MERSCoV)肺炎或重症急性呼吸综合征(SARS-CoV)肺炎。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述肺炎为COVID-19肺炎。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述患者为住院患者。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述患者缺氧。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中施用所述IL-6拮抗剂防止所述患者在自首次施用所述IL-6拮抗剂起约28天内死亡或接受机械通气。

11.根据权利要求10所述的方法，其中在第28天死亡或机械通气的患者的估计累积比例在施用IL-6拮抗剂的情况下为约12％，相比之下在未接受抗IL-6拮抗剂的患者中为约19％。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述患者进一步接受标准治疗。

13.根据权利要求12所述的方法，其中与未接受所述IL-6拮抗剂但接受所述标准治疗(SOC)的所述患者相比，施用所述IL-6拮抗剂使所述患者死亡或接受机械通气的风险降低。

14.根据权利要求13所述的方法，其中与未接受所述IL-6拮抗剂但接受所述SOC的所述患者相比，施用所述IL-6拮抗剂使所述患者死亡或接受机械通气的风险降低至少约40％。

15.根据权利要求12至14中任一项所述的方法，其中所述SOC包括施用抗病毒剂(例如瑞德西韦或阿奇霉素)和/或施用皮质类固醇(例如***或***)。

16.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中施用所述IL-6拮抗剂使临床失败的可能性进一步降低。

17.根据权利要求16所述的方法，其中临床失败包括至以下的时间：死亡、机械通气、ICU入住和/或7类等级量表中的2类恶化，其中所述患者在治疗之前已经入住ICU。

18.根据权利要求17所述的方法，其使临床失败的风险降低直至第28天。

19.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述IL-6拮抗剂结合IL-6受体。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述IL-6拮抗剂为托珠单抗。

21.根据权利要求20所述的方法，其中有效量的托珠单抗包括第一基于体重的8mg/kg静脉内剂量的托珠单抗，任选地随后在第一剂量之后8至24小时的第二基于体重的8mg/kg静脉内剂量的托珠单抗。

22.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其进一步包括施用至少一种另外的药剂来治疗所述患者，其中所述另外的药剂包括：

a.抗病毒剂(例如，瑞德西韦、阿奇霉素、洛匹那韦/利托那韦、磷酸氯喹、羟氯喹、乌非诺韦和/或法匹拉韦)，任选地与α-干扰素、利巴韦林和/或阿奇霉素组合；和/或

b.皮质类固醇(例如***、***龙、甲泼尼龙、甲泼尼龙琥珀酸钠、***、***去炎松、氢化可的松和/或倍他米松)。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述另外的药剂包括抗病毒剂，并且所述抗病毒剂包括瑞德西韦或阿奇霉素。

24.根据权利要求22所述的方法，其中所述另外的药剂包括皮质类固醇，并且所述皮质类固醇包括***或***。

25.一种治疗未进行机械通气的患者的病毒性肺炎的方法，其包括以有效防止所述患者死亡或接受机械通气的量向所述患者施用IL-6拮抗剂和瑞德西韦的组合。

26.根据权利要求25所述的方法，其中所述IL-6拮抗剂为托珠单抗。

27.根据权利要求26所述的方法，其中有效量的托珠单抗包括第一基于体重的8mg/kg静脉内剂量的托珠单抗，任选地随后在第一剂量之后8至24小时的第二基于体重的8mg/kg静脉内剂量的托珠单抗。

28.根据权利要求25至27中任一项所述的方法，其中有效量的瑞德西韦包括200mg的初始一次性剂量，随后为每天100mg，并且其中向所述患者施用5至10个总剂量的瑞德西韦。

29.一种治疗未进行机械通气的患者的病毒性肺炎的方法，其包括以有效防止所述患者死亡或接受机械通气的量向所述患者施用IL-6拮抗剂和皮质类固醇的组合。

30.根据权利要求29所述的方法，其中所述IL-6拮抗剂为托珠单抗。

31.根据权利要求30所述的方法，其中有效量的托珠单抗包括第一基于体重的8mg/kg静脉内剂量的托珠单抗，任选地随后在第一剂量之后8至24小时的第二基于体重的8mg/kg静脉内剂量的托珠单抗。

32.根据权利要求29至31中任一项所述的方法，其中所述皮质类固醇包括***。

33.根据权利要求32所述的方法，其中口服或静脉内施用所述***6mg，每天一次，持续长达10天。