CN116457365A - 肽以及包含所述肽的化妆品组合物和药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及肽以及包含所述肽的化妆品组合物和药物组合物。本发明表现优异的溶解度和稳定性，并由此在制备包含所述肽的化妆品材料或药物时促进配制。因此，可以增强皮肤皱纹、敏感性皮肤和皮炎的缓解效果、毛发生长的促进效果和针对代谢性疾病的药物效果。

Description

肽以及包含所述肽的化妆品组合物和药物组合物
技术领域
本发明涉及肽以及包含所述肽的化妆品组合物和药物组合物。
背景技术
皮肤老化通常由与皮肤皱纹增加、下垂和松弛相关的外部和内部过程引起。由于外部老化主要由重复暴露于紫外线(UV)引起，因此通常被称作“光老化”。此外，自然老化的皮肤是光滑、苍白和略微起皱纹的，而光老化的皮肤具有厚的皮肤皱纹并且引起色素沉着和毛细血管扩张。
皮下脂肪通过分泌控制其它组织的新陈代谢的激素和脂肪因子而在维持能量稳态中起重要作用。最近，已知紫外线降低人皮下脂肪组织的脂肪含量，紫外线是引起各种疾病如光老化、炎症、免疫抑制和癌症等的环境因素，并且作为脂肪来源的产物的脂联素在老化的皮肤中减少，同时引起MMP-1的增加和胶原蛋白的减少。
敏感性皮肤是指与正常皮肤相比，对外部刺激物、过敏原、环境变化、或人体的内部诱因更敏感地反应，由此引起刺激反应或皮炎的皮肤。作为识别敏感性皮肤的观察方法，存在用已知导致皮炎的乳酸或DMSO处理皮肤，从而确定敏感性皮肤的实例。代谢性疾病是指其中例如肥胖、糖尿病、高血压、动脉硬化和非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)等危险因子由于体内过度营养累积和缺乏运动而一起出现的综合征，并且目前通过世界卫生组织(WorldHealth Organization)和美国国立卫生研究院的心脏、肺和血液研究所(Heart,Lung,andBlood Institute of the US National Institutes of Health)确立的成人治疗计划III(Adult Treatment Program III)被官方地命名为“代谢综合征”或“胰岛素抵抗综合征”。此外，根据2001年出版的美国国家胆固醇教育计划(US National Cholesterol EducationProgram,NCEP))的ATP，在包括以下的五种危险因子中：男性腰部尺寸为40英寸(102cm)以上和女性腰部尺寸为35英寸(88cm)以上的腹部肥胖；甘油三酯为150mg/dL以上；男性HDL胆固醇为40mg/dL以下和女性HDL胆固醇为50mg/dL以下；血压为130/85mmHg以上；和空腹血糖为100mg/dL以上，出现三种以上的因子，其被判断为代谢性疾病。在亚洲人的情况中，略微调整腹部肥胖的定义为男性腰部尺寸为90cm以上和女性腰部尺寸为80cm以上。如果采用如上所述的此类调整，目前的研究报告表明韩国总人口的约25％显示代谢综合征症状。
另一方面，脂联素是一种脂肪因子，其是从脂肪细胞特异性分泌的蛋白质激素，并且通过增强胰岛素的功能和抑制胰岛素抵抗而在调节心血管疾病如高血糖、高胰岛素血症、肥胖和动脉硬化等中起到重要作用。此外，脂联素还具有抑制癌细胞转移和炎症应答的功能。脂联素不仅增殖角质细胞，还促进皮肤中丝聚蛋白、透明质酸和细胞外基质的表达，从而实现伤口愈合、抑制纤维化、改善皮肤皱纹、保湿等。脂联素由244个氨基酸构成并且由信号序列、位于N-末端的胶原蛋白样结构域和位于C-末端的C1q样球状结构域组成。六聚体和400kDa高分子量(HMW)复合物是主要低聚物，其中已知HMW复合物具有比低分子量(LMW)复合物更高的活性。
已知具有不同生理活性的脂联素衍生肽的开发已经成为许多国内和国外研究人员和制药公司的目标。然而，由于难以在体内形成聚合物，最终成功的可能性相对低。
因此，需要对具有优异的生理活性的脂联素衍生的短肽的开发进行研究，并且对有利于配制成化妆品和药物的脂联素修饰的肽进行研究。
发明内容
发明要解决的问题
本发明的目的在于提供一种具有优异的溶解度和稳定性的肽。
本发明的另一目的在于提供一种包含所述肽的化妆品组合物。
此外，本发明的另一目的在于提供一种包含所述肽的化妆品组合物，其用于改善皮肤皱纹、改善敏感性皮肤、改善皮炎或促进毛发生长。
此外，本发明的另一目的在于提供一种包含所述肽的药物组合物，其用于改善皮肤皱纹、改善皮炎或促进毛发生长。
此外，本发明的另一目的在于提供一种包含所述肽的药物组合物，其用于治疗代谢性疾病。
用于解决问题的方案
1.一种肽，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:1或2，并在C末端具有氨基。
2.根据上述1所述的肽，其中至少一个氨基酸为D型。
3.根据上述1所述的肽，其中一个氨基酸为D型。
4.一种肽，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:1或2，其中至少一个氨基酸为D型。
5.根据上述4所述的肽，其中一个氨基酸为D型。
6.一种化妆品组合物，其包含根据上述1至5中任一项所述的肽。
7.根据上述6所述的化妆品组合物，其中所述组合物用于改善皮肤皱纹、改善敏感性皮肤、改善皮炎或促进毛发生长。
8.一种药物组合物，其用于改善皮肤皱纹、改善皮炎或促进毛发生长，其包含根据上述1至5中任一项所述的肽。
9.一种用于治疗代谢性疾病的药物组合物，其包含根据上述1至5中任一项所述的肽。
发明的效果
本发明涉及肽以及包含所述肽的化妆品组合物和药物组合物，所述肽具有优异的溶解度和稳定性，使得它们在制造包含所述肽的化妆品或药物时有利于配制，从而改善皮肤皱纹、敏感性皮肤和皮炎、促进毛发生长、并可增强对代谢性疾病的药物功效。
附图说明
图1示出本发明的肽的细胞渗透性试验结果。
图2示出本发明的肽的细胞毒性试验结果。
图3示出本发明的肽的稳定性试验结果。
图4示出本发明的肽的体外AMPK-磷酸化活性。
图5至7示出本发明的肽促进脂联素生产、以及原胶原和p-AMPK表达的功效的实验结果。
图8示出本发明的肽抑制肝细胞脂肪的累积的能力的确证。
图9和10示出本发明的肽改善敏感性皮肤和皮炎的功效的实验结果。
图11示出本发明的肽促进毛发生长的功效的实验结果。
具体实施方式
下文中，将详细地描述本发明。
本发明提供一种肽，其包含SEQ ID NO:1或2的氨基酸序列，并在C末端具有氨基。
本发明的肽由SEQ ID NO:1(LYYF)或SEQ ID NO:2(GLYYF)的氨基酸序列组成并且在C末端具有氨基，从而与在C末端具有-OH基团的肽相比，表现增强的溶解度、细胞渗透性、毒性和稳定性。
所述肽可以是其中至少一个氨基酸为D型的肽。此时，无论氨基酸的位置，只要至少一个氨基酸为D型，就可以实现上述效果。
本发明的肽可以通过一般化学合成如固相肽合成来制备。可选地，本发明的肽可以通过培养用含有编码上述肽的核酸的重组载体转化的微生物，由此表达所述肽，然后根据任何常规方法纯化来制备，但不限于此。
本发明可以包括由SEQ ID NO:1或2的氨基酸序列组成并在C末端具有氨基的肽的功能等同物和变体。
肽的功能等同物可以包括不改变肽整体的活性的肽，具体地，具有相同功能作用的肽可包括在本发明的范围内。此外，变体是指例如一种物质，其中在氨基酸序列中缺失、取代或添加一个或几个氨基酸，并且其具有与所述氨基酸序列95％以上、优选98％以上、和更优选99％以上的同一性。此处，术语“同一性”是指在向下述两条氨基酸序列引入或不引入空位的情况下进行比对以达到最大程度的同一性时，相对于一条氨基酸序列中的总氨基酸残基数(包括空位数)的、另一条氨基酸序列中的相同氨基酸残基数的比例(％)。此外，术语“几个”是指2至10的整数，例如，2至7、2至5、2至4、或2至3的整数。天然变体的具体实例可以包括基于多态性例如单核苷酸多态性(SNP)的变体，和剪接变体等。优选地，取代是保守氨基酸取代。这是因为如果它是保守氨基酸取代，它可以具有与具有上述氨基酸序列的肽的结构或性质实质上等同的结构或性质。本领域已知的保守氨基酸可以包括，例如：互为(mutually)非极性氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸)；极性氨基酸(除了非极性氨基酸以外的氨基酸)；带电氨基酸(酸性氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸)；碱性氨基酸(精氨酸、组氨酸、赖氨酸)；不带电氨基酸(除了带电氨基酸以外的氨基酸)；芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸)；支链氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸)；脂肪族氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸)等。此外，它还可以包括其中通过氨基酸序列中的突变或修饰，肽的对热、pH等的结构稳定性增加或肽活性增加的肽。
本发明提供一种肽，其具有SEQ ID NO:1或2的氨基酸序列，其中至少一个氨基酸为D型。
由于本发明的肽由SEQ ID NO:1(LYYF)或SEQ ID NO:2(GLYYF)的氨基酸序列组成并且至少一个氨基酸为D型，与其中所有氨基酸均为L型的肽相比，改善了溶解度、细胞渗透性、细胞毒性和稳定性。
肽可以是其中一个氨基酸为D型的肽。此时，无论氨基酸的位置，只要一个氨基酸为D型，就可以实现上述效果。
本发明的肽可以通过一般化学合成如固相肽合成来制备。可选地，本发明的肽可以通过培养用含有编码上述肽的核酸的重组载体转化的微生物，由此表达所述肽，然后根据任何常规方法纯化来制备，但不限于此。
本发明可以包括由SEQ ID NO:1或2的氨基酸序列组成的肽的功能等同物和变体，其中至少一个氨基酸为D型。
肽的功能等同物可以包括不改变肽整体的活性的肽，具体地，具有相同功能作用的肽可包括在本发明的范围内。此外，变体是指例如一种物质，其中在氨基酸序列中缺失、取代或添加一个或几个氨基酸，并且其具有与所述氨基酸序列95％以上、优选98％以上、和更优选99％以上的同一性。此处，术语“同一性”是指在向下述两条氨基酸序列引入或不引入空位的情况下进行比对以达到最大程度的同一性时，相对于一条氨基酸序列中的总氨基酸残基数(包括空位数)的、另一条氨基酸序列中的相同氨基酸残基数的比例(％)。此外，术语“几个”是指2至10的整数，例如，2至7、2至5、2至4、或2至3的整数。天然变体的具体实例可以包括基于多态性例如单核苷酸多态性(SNP)的变体，和剪接变体等。优选地，取代是保守氨基酸取代。这是因为如果它是保守氨基酸取代，它可以具有与具有上述氨基酸序列的肽的结构或性质实质上等同的结构或性质。本领域已知的保守氨基酸可以包括，例如：互为非极性氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸)；极性氨基酸(除了非极性氨基酸以外的氨基酸)；带电氨基酸(酸性氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸)；碱性氨基酸(精氨酸、组氨酸、赖氨酸)；不带电氨基酸(除了带电氨基酸以外的氨基酸)；芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸)；支链氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸)；脂肪族氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸)等。此外，它还可以包括其中通过氨基酸序列中的突变或修饰，肽的对热、pH等的结构稳定性增加或肽活性增加的肽。
本发明提供包含所述肽的化妆品组合物。
本发明的化妆品组合物可用于改善皮肤皱纹、改善敏感性皮肤、改善皮炎或促进毛发生长。
敏感性皮肤可以是指由于外部或内部因素引起的皮肤生理功能的恶化或异常而导致出现各种超敏反应的皮肤。具体地，它是指由于对非敏感性皮肤没有应答的皮肤刺激物、缺乏睡眠、过度劳累、季节变化或压力而表现出例如干燥皮肤、粗糙皮肤、刺痛、瘙痒、过敏反应、发红(redness)和红斑等症状的皮肤。
皮炎可以包括皮肤上出现的各种炎性疾病，例如银屑病性皮炎(psoriaticdermatitis)、干燥性皮炎(dry dermatitis)、特应性皮炎、脂溢性皮炎、接触性皮炎和钱币状皮炎，但不限于此。
本发明中，改善是指通过本发明的化妆品组合物而在一定程度上改善症状的任何过程，并且可以是指预防、缓解等。
毛发生长促进可以包括本领域中使用的其它术语，例如促进羊毛或毛发生长，并且可以是指预防或缓解毛发脱落。
包含本发明的肽的化妆品组合物还可以包含化妆品组合物中常用的组分，并且可以包含例如常规补充剂如抗氧化剂、稳定剂、增溶剂、维生素、颜料和芳香香精(aromaticessence)、以及载体。
可以向其添加上述组合物的产品可以包括，例如，化妆品如收敛化妆水(astringent lotion)、柔软化妆水、滋养化妆水、各种霜剂、精华液、面膜、粉底等；和清洁产品(cleansing)、洁面剂、肥皂、护理品(treatment)、化妆液等，但不限于此。
根据本发明的化妆品组合物的具体制剂包括典型制剂，例如润肤剂(skinlotion)、柔肤剂(skin softener)、爽肤剂(skin toner)、收敛剂、乳液(lotion)、牛奶乳液(milk lotion)、保湿乳液、滋养乳液、按摩霜、滋养霜、保湿霜、护手霜、精华液、滋养精华素、面膜、肥皂、洗发剂、清洁泡沫、清洁乳液、清洁霜、身体乳、身体清洁剂、乳剂、唇膏、隔离霜、粉底、粉饼、散粉、眼影、清洗剂(rinse)、凝胶、蜡、喷雾等，但不限于此。
组合物可以通过将肽混入纳米脂质体内部并使其稳定来配制。当肽包含在纳米脂质体内部时，使肽的组分稳定以解决配制过程中例如沉淀和变形等问题，可以增加组分的溶解度和经皮吸收，从而最大程度地表现对所述肽所期望的功效。
本发明提供包含所述肽的药物组合物。
本发明的药物组合物可用于改善皮肤皱纹、改善皮炎、促进毛发生长或治疗代谢性疾病。
皮炎可以包括例如银屑病性皮炎、干燥性皮炎、特应性皮炎、脂溢性皮炎、接触性皮炎和钱币状皮炎，但不限于此。
本发明中，改善是指通过施用本发明的药物组合物而在一定程度上改善症状的任何过程，并且可以是指预防、缓解和治疗等。
毛发生长促进可以包括本领域中用于促进羊毛或毛发生长的其它术语，并且可以是指预防或治疗毛发脱落。
代谢性疾病可以是例如肥胖、糖尿病、糖尿病的并发症、脂肪肝、血脂异常、胰岛素抵抗、心血管疾病、动脉硬化、高血糖症、高脂血症或异常碳水化合物代谢，但不限于此。
包含本发明的肽的药物组合物还可以包含药学上可接受的载体，并且可以与这样的载体一起配制。如本文所用，术语“药学上可接受的载体”是指不刺激生物体并且不抑制所施用的化合物的生物学活性和性质的载体或稀释剂。配制成液体溶液的组合物中可接受的药物载体是无菌的且生物相容性的，并且可以包括盐水、无菌水、林格氏溶液、缓冲盐水、白蛋白可注射溶液、葡萄糖溶液、麦芽糖糊精溶液、甘油、乙醇和这些组分中的一种以上的混合物。此外，根据需要，可以添加其它典型添加剂，例如抗氧化剂、缓冲剂和抑菌剂。还可以添加稀释剂、分散剂、表面活性剂、粘结剂和润滑剂，以将药物组合物配制成可注射制剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂或片剂，例如水性溶液、悬浮液、乳剂等。
本发明的药物组合物适用于任何含有本发明的肽作为活性成分的制剂形式，并且可以以口服或肠胃外制剂制备。本发明的药物制剂可以包括适合于口服、直肠、鼻、局部(包括颊和舌下)、皮下、***或肠胃外(包括肌内、皮下和静脉内)施用的形式。可选地，也可包括适合于通过吸入、吹入或敷涂来施用的形式，但并不限于此。
本发明的药物组合物以药学上有效量施用。有效剂量水平可以根据患者的疾病类型、严重程度、药物活性、对药物的敏感性、施用时间、施用途径和释放速率、治疗持续时间、包括同时使用的药物的因素、以及医学领域公知的其它因素来确定。
本发明的药物组合物可以作为单独的治疗剂施用或与其它治疗剂组合施用，可以与常规治疗剂顺序地或同时地施用，并且可以以单一或多个剂量施用。考虑到所有上述因素，重要的是以能够由最小量实现最大效果而没有副作用的量施用药物组合物，这可由本领域技术人员容易地确定。
根据本发明的药物组合物的剂量可以根据患者的体重、年龄、性别、健康状况或饮食、施用时间、施用方法、排出率和疾病的严重程度而广泛变化，并且适当的剂量取决于例如患者体内累积的药物的量和/或本发明的肽的特定功效。通常，所述量可以基于EC50计算，其通常被确定为在体内动物模型和体外有效，例如每kg体重0.01μg至1g。此外，本发明的药物组合物可以在单位时间段内每单位时间施用一次或多次，例如每天、每周、每月或每年，或可以使用输注泵长时间连续施用。考虑到体内药物的驻留时间、体内药物浓度等，确定重复施用剂量的数量。即使在根据疾病治疗的进程进行治疗之后，还可以施用组合物用于防止疾病的再发生，即复发。
本发明的药物组合物还可以包含化合物以维持/增加表现与上述疾病的治疗相关的相同或类似功能的一种以上的活性物质、或者至少一种活性成分的溶解度和/或吸收。此外，组合物还可以任选地包含化疗剂、抗炎剂、抗病毒剂和/或免疫调节剂等。
此外，本发明的药物组合物可以使用本领域已知的任何方法配制，以允许在向哺乳动物施用后快速、持续或延迟释放活性成分。制剂可以以散剂、颗粒剂、片剂、乳剂、糖浆剂、气雾剂、软或硬明胶胶囊剂、无菌可注射溶液、无菌粉末的形式生产。
在下文中，将参照以下实施例详细地描述本发明。
实施例–肽的制剂
本发明中所用的肽是通过使用9-芴基甲氧基羰基(9-fluorenylmethoxycarbonyl,Fmoc)作为Nα-氨基酸的保护基团的固相法(Fmoc固相肽合成)来合成的，N-羟基苯并***-二异丙基碳二亚胺(N-hydroxybenzotriazole-diisopropylcarbodiimide,HOBt-DIC)法用于延伸肽(Wang C.Chan,Perter D.white,“Fmoc solid phase peptide synthesis”Oxford)。所合成的肽使用高效液相色谱法(Prep-HPLC，C18柱，10μm，250mm×22mm)来纯化并冷冻干燥以获得粉末形式。此外，使用液相色谱-质谱(LC-MS)，确定表1的化合物的分子量。下文中描述了更详细的合成过程。
[表1]
肽 分子量
LYYF-NH2 603.71
GLYYF-NH2 660.76
lYYF 604.69
LyYF 604.69
LYyF 604.69
LYYf 604.69
GlYYF 661.74
GLyYF 661.74
GLYyF 661.74
GLYYf 661.74
lYYF-NH2 603.71
LyYF-NH2 603.71
LYyF-NH2 603.71
LYYf-NH2 603.71
GlYYF-NH2 660.76
GLyYF-NH2 660.76
GLYyF-NH2 660.76
GLYYf-NH2 660.76
1.反应物的合成
(1)Fmoc-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物1a)
在50ml反应容器中，添加50ml的含有20％的Rink酰胺AM树脂(1mmol,1.43g)和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)，并在室温下反应10分钟。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷(DCM)、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤。向通过真空干燥去除固相形式的Fmoc的产物中，添加溶解于50ml的二甲基甲酰胺的Fmoc-Phe-OH(N-Fmoc-L-苯丙氨酸)(8mmol,3.1g)、HOBt(8mmol,1.081g)和DIC(8mmol,1.24ml)，然后在室温下反应4小时。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤合成的树脂。通过真空干燥，定量获得固相形式的化合物1a。
(2)Fmoc-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物1b)
在50ml反应容器中，添加50ml的含有20％的化合物1a和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)，并在室温下反应10分钟。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷(DCM)、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤。向通过真空干燥去除固相形式的Fmoc的产物中，添加溶解于50ml的二甲基甲酰胺的Fmoc-Tyr(tBu)-OH(N-Fmoc-O-叔丁基-L-酪氨酸)(8mmol,3.68g)、HOBt(8mmol,1.081g)和DIC(8mmol,1.24ml)，然后在室温下反应4小时。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤合成的树脂。通过真空干燥，定量获得固相形式的化合物1b。
(3)Fmoc-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物1c)
除了将50ml的含有20％的化合物1b和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(2)中所描述的实质上相同。
(4)Fmoc-Leu-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物1d)
在50ml反应容器中，添加50ml的含有20％的化合物1c和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)，并在室温下反应10分钟。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷(DCM)、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤。向通过真空干燥去除固相形式的Fmoc的产物中，添加溶解于50ml的二甲基甲酰胺的Fmoc-Leu-OH(N-Fmoc-L-亮氨酸)(8mmol,3.68g)、HOBt(8mmol,1.081g)和DIC(8mmol,1.24ml)，然后在室温下反应4小时。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤合成的树脂。通过真空干燥，定量获得固相形式的化合物1d。
(5)Fmoc-Gly-Leu-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物2a)
在50ml反应容器中，添加50ml的含有20％的化合物1d和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)，并在室温下反应10分钟。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷(DCM)、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤。向通过真空干燥去除固相形式的Fmoc的产物中，添加溶解于50ml的二甲基甲酰胺的Fmoc-Gly-OH(Fmoc-甘氨酸)(8mmol,2.38g)、HOBt(8mmol,1.081g)和DIC(8mmol,1.24ml)，然后在室温下反应4小时。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤合成的树脂。通过真空干燥，定量获得固相形式的化合物2a。
(6)Fmoc-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物3a)
在50ml反应容器中，添加溶解于50ml的二氯甲烷的2-氯三苯甲基氯树脂(1mmol,0.714g)和Fmoc-Phe-OH(N-Fmoc-L-苯丙氨酸)(2mmol,0.78g)、二异丙基乙胺(N,N-二异丙基乙胺)(6mmol,1.05ml)，然后在室温下反应6小时。通过过滤去除反应溶液，合成的树脂依次分别用50ml的二氯甲烷(DCM)、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤。通过真空干燥，定量获得固相形式的化合物3a。
(7)Fmoc-Tyr(tBu)-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物3b)
除了将50ml的含有20％的化合物3a和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(2)中所描述的实质上相同。
(8)Fmoc-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物3c)
除了将50ml的含有20％的化合物3b和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(2)中所描述的实质上相同。
(9)Fmoc-D-Leu-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物3d)
在50ml反应容器中，添加50ml的含有20％的化合物3c和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)，并在室温下反应10分钟。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷(DCM)、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤。向通过真空干燥去除固相形式的Fmoc的产物中，添加溶解于50ml的二甲基甲酰胺的Fmoc-D-Leu-OH(N-Fmoc-D-亮氨酸)(8mmol,3.68g)、HOBt(8mmol,1.081g)和DIC(8mmol,1.24ml)，然后在室温下反应4小时。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤合成的树脂。通过真空干燥，定量获得固相形式的化合物3d。
(10)Fmoc-D-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物4a)
在50ml反应容器中，添加50ml的含有20％的化合物3b和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)，并在室温下反应10分钟。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷(DCM)、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤。向通过真空干燥去除固相形式的Fmoc的产物中，添加溶解于50ml的二甲基甲酰胺的Fmoc-D-Tyr(tBu)-OH(N-Fmoc-O-叔丁基-D-酪氨酸)(8mmol,3.68g)、HOBt(8mmol,1.081g)和DIC(8mmol,1.24ml)，然后在室温下反应4小时。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤合成的树脂。通过真空干燥，定量获得固相形式的化合物4a。
(11)Fmoc-Leu-D-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物4b)
除了将50ml的含有20％的化合物4a和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(4)中所描述的实质上相同。
(12)Fmoc-D-Tyr(tBu)-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物5a)
除了将50ml的含有20％的化合物3a和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(10)中所描述的实质上相同。
(13)Fmoc-Tyr(tBu)-D-Tyr(tBu)-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物5b)
除了将50ml的含有20％的化合物5a和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(2)中所描述的实质上相同。
(14)Fmoc-Leu-Tyr(tBu)-D-Tyr(tBu)-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物5c)
除了将50ml的含有20％的化合物5b和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(4)中所描述的实质上相同。
(15)Fmoc-D-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物6a)
在50ml反应容器中，添加溶解于50ml的二氯甲烷的2-氯三苯甲基氯树脂(1mmol,0.714g)和Fmoc-D-Phe-OH(N-Fmoc-D-苯丙氨酸)(2mmol,0.78g)和二异丙基乙胺(N,N-二异丙基乙胺)(6mmol,1.05ml)，然后在室温下反应6小时。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷(DCM)、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤合成的树脂。通过真空干燥，定量获得固相形式的化合物6a。
(16)Fmoc-Tyr(tBu)-D-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物6b)
除了将50ml的含有20％的化合物6a和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(2)中所描述的实质上相同。
(17)Fmoc-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-D-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物6c)
除了将50ml的含有20％的化合物6b和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(2)中所描述的实质上相同。
(18)Fmoc-Leu-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-D-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物6d)
除了将50ml的含有20％的化合物6c和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(4)中所描述的实质上相同。
(19)Fmoc-Gly-D-Leu-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物7a)
除了将50ml的含有20％的化合物3d和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(5)中所描述的实质上相同。
(20)Fmoc-Gly-Leu-D-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物8a)
除了将50ml的含有20％的化合物4b和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(5)中所描述的实质上相同。
(21)Fmoc-Gly-Leu-Tyr(tBu)-D-Tyr(tBu)-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物9a)
除了将50ml的含有20％的化合物5c和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(5)中所描述的实质上相同。
(22)Fmoc-Gly-Leu-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-D-Phe-2-氯-三苯甲基树脂的合成(化合物10a)
除了将50ml的含有20％的化合物6d和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(5)中所描述的实质上相同。
(23)Fmoc-D-Leu-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物11a)
Fmoc-D-Leu-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂(11a)的合成：在50ml反应容器中，添加50ml的含有20％的化合物1c和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)，并在室温下反应10分钟。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤。向通过真空干燥去除固相形式的Fmoc的产物中，添加溶解于50ml的二甲基甲酰胺的Fmoc-D-Leu-OH(N-Fmoc-D-亮氨酸)(8mmol,3.68g)、HOBt(8mmol,1.081g)和DIC(8mmol,1.24ml)，然后在室温下反应4小时。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤合成的树脂。通过真空干燥，定量获得固相形式的化合物11a(Fmoc-D-Leu-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂)。
(24)Fmoc-D-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物12a)
除了将50ml的含有20％的化合物1b和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(10)中所描述的实质上相同。
(25)Fmoc-Leu-D-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物12b)
除了将50ml的含有20％的化合物12a和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(4)中所描述的实质上相同。
(26)Fmoc-D-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物13a)
除了将50ml的含有20％的化合物1a和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(10)中所描述的实质上相同。
(27)Fmoc-Tyr(tBu)-D-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物13b)
除了将50ml的含有20％的化合物13a和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(2)中所描述的实质上相同。
(28)Fmoc-Leu-Tyr(tBu)-D-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物13c)
除了将50ml的含有20％的化合物13b和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(4)中所描述的实质上相同。
(29)Fmoc-D-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物14a)
在50ml反应容器中，添加50ml的含有20％的Rink酰胺AM树脂(1mmol,1.43g)和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)，并在室温下反应10分钟。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷(DCM)、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤。向通过真空干燥去除固相形式的Fmoc的产物中，添加溶解于50ml的二甲基甲酰胺的Fmoc-D-Phe-OH(N-Fmoc-D-苯丙氨酸)(8mmol,3.1g)、HOBt(8mmol,1.081g)和DIC(8mmol,1.24ml)，然后在室温下反应4小时。通过过滤去除反应溶液，依次分别用50ml的二氯甲烷、甲醇、二氯甲烷、和二甲基甲酰胺洗涤合成的树脂。通过真空干燥，定量获得固相形式的化合物14a。
(30)Fmoc-Tyr(tBu)-D-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物14b)
除了将50ml的含有20％的化合物14a和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(2)中所描述的实质上相同。
(31)Fmoc-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-D-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物14c)
除了将50ml的含有20％的化合物14b和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(2)中所描述的实质上相同。
(32)Fmoc-Leu-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-D-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物14d)
除了将50ml的含有20％的化合物14c和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(4)中所描述的实质上相同。
(33)Fmoc-Gly-D-Leu-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物15a)
除了将50ml的含有20％的化合物11a和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(5)中所描述的实质上相同。
(34)Fmoc-Gly-Leu-D-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物16a)
除了将50ml的含有20％的化合物12b和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(5)中所描述的实质上相同。
(35)Fmoc-Gly-Leu-Tyr(tBu)-D-Tyr(tBu)-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物17a)
除了将50ml的含有20％的化合物13c和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(5)中所描述的实质上相同。
(36)Fmoc-Gly-Leu-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-D-Phe-Rink酰胺AM树脂的合成(化合物18a)
除了将50ml的含有20％的化合物14d和哌啶的二甲基甲酰胺(N,N-二甲基甲酰胺,DMF)置于50ml反应容器中并在室温下反应10分钟以外，后续过程与实施例(5)中所描述的实质上相同。
2.肽的合成
将50ml的含有20％的哌啶的二甲基甲酰胺以及实施例1中合成的化合物(表2)的任一者置于50ml反应容器中，并在室温下反应10分钟。通过过滤去除反应溶液，并用50ml的二氯甲烷洗涤三次。向通过真空干燥去除固相形式的Fmoc的产物中，添加50ml的用于分离保护基团的混合物(三氟乙酸:三异丙基硅烷:水＝95:2.5:2.5)以及树脂，然后在室温下反应3小时。通过过滤收集反应溶液，向其添加500ml的二***以沉淀产物。使用离心机收集固体产物，用500ml的二***洗涤两次，然后干燥。所得的固体产物使用Prep-HPLC(C18柱,10μm,250mm×22mm)来纯化，然后冷冻干燥以获得每种肽。
[表2]
肽 反应物
LYYF-NH2 化合物1d
GLYYF-NH2 化合物2a
lYYF 化合物3d
LyYF 化合物4b
LYyF 化合物5c
LYYf 化合物6d
GlYYF 化合物7a
GLyYF 化合物8a
GLYyF 化合物9a
GLYYf 化合物10a
lYYF-NH2 化合物11a
LyYF-NH2 化合物12b
LYyF-NH2 化合物13c
LYYf-NH2 化合物14d
GlYYF-NH2 化合物15a
GLyYF-NH2 化合物16a
GLYyF-NH2 化合物17a
GLYYf-NH2 化合物18a
实验例
1.溶解度的确定
向5mg的通过上述方法合成的每种肽，添加少量的水或丁二醇以测量溶解度。
其结果示于下表3中。
[表3]
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*此处，BG是丁二醇，PG是丙二醇。
2.细胞渗透性的测量
使用猪皮验证通过上述方法合成的每种肽的皮肤渗透性，猪皮最类似于人皮肤，因此通常用于测试渗透性。在将猪皮切割成宽度和高度为2cm的大小后，通过浓缩制备FITC荧光附着的肽原液(阳性对照P5：GLYYF肽)和DMSO。然后，以足够量将制备的溶液施涂至猪皮上。将施涂的猪皮置于37℃的培养箱中2小时，同时避光。在使用LN2快速冷冻后，进行冷冻切片。在用DAPI(核染色)处理5分钟后，洗涤，然后用共聚焦显微镜观察。
作为结果，其确证了与用作对照的P5：GLYYF肽相比，本发明的肽(P5N：GLYYF-NH2，P4d:LYyF)具有对猪皮优异的渗透性(图1)。
3.细胞毒性的确证
使用3种细胞系(3T3-L1脂肪细胞、RD肌肉细胞和成纤维细胞)，将每种细胞以每孔5×104个细胞接种于24孔板中，并在各个细胞培养条件下培养24小时。丢弃培养基，用PBS洗涤培养产物，然后用不含10％ FBS的新的培养基替换。用各浓度的肽处理产物并培养24小时。在小心地去除培养基并用PBS洗涤产物后，根据制造商的方法添加MTT试剂。然后，在室温下反应30分钟后，在450nm处测定吸光度以确证在所有细胞系中未发现每种肽的毒性(图2)。
4.稳定性的确证
用肽(1mg/ml)处理小鼠全血并反应0、15、30、60和120分钟，接着用LC-QTOF_MS分析剩余的肽。作为结果，其确证了与用作对照的P5：GLYYF肽相比，本发明的肽(P5N：GLYYF-NH2，P4d:LYyF)具有改善的稳定性(图3)。
5.体外AMPK-磷酸化活性的确证
用10μM的浓度的每种肽处理小鼠脂肪细胞系3T3-L1并培养24小时，从而获得细胞。然后，提取蛋白质，并通过免疫印迹法比较和确证对负责脂联素的主要亚信号传导的AMPK磷酸化的作用(图4)。作为结果，其确证了本发明的肽增加AMPK的磷酸化(V：DMSO，p5：GLYYF)。
6.当施用于内源性老化的皮肤时，在促进脂联素生成、基质蛋白胶原蛋白和p-AMPK表达中的功效的确证
在将本发明的肽施用至报告具有减少的脂联素的老年皮肤后，在24小时后进行活组织检查。作为通过免疫印迹法和免疫化学染色来观察脂联素、基质蛋白原胶原和p-AMPK的表达的结果，与阴性对照(溶媒)和现有P5肽相比，脂联素、原胶原和p-AMPK的表达在本发明的肽中增加(图5至7)。
7.肝细胞脂肪累积抑制能力的确证
用1mM游离脂肪酸(FFA)和10μM的肽处理肝癌细胞系，即HepG2细胞。作为甘油三酯含量比较的结果，本发明的肽的脂肪累积抑制能力优于作为阳性对照的罗格列酮(rosiglitazone)和P5的脂肪累积抑制能力(图8)。此外，关于作为用于合成甘油三酯的主要酶的乙酰-CoA羧化酶(ACC)，和作为脂联素的负责其调节的亚信号调节剂的AMPK，磷酸化增加(p-ACC无活性并且抑制甘油三酯合成)。
8.敏感性皮肤、皮炎改善功效的确证
为了分类具有敏感性皮肤的患者，通过执行乳酸刺痛试验(Contact Dermatitis2010；62:137-49)来进行双盲长期施涂研究，所述乳酸穿刺试验是用于诊断敏感性皮炎的最广泛使用的且已知可靠的试验(总计54人，本发明的肽P5N：GLYYF-NH2(APN5N)0.01％vs对照(安慰剂)，每施用组27人)。从同意进行活组织检查的志愿者(本发明的肽P5N：GLYYF-NH2(APN5N)vs对照材料(安慰剂)，每施用组8人)，通过2mm穿刺从总计4个部位获得面部基线处的皮肤组织和8周施用后的皮肤组织(每种2个部位)。对于所获得的皮肤组织，对于敏感性皮肤相关基因和标志物(包括脂联素)，进行定量PCR分析和免疫组织化学。分别作为第2次访问(施用后4周)和第3次访问(施用后8周)时乳酸刺痛试验的结果，在乳酸刺痛试验中分类为“即使10分钟一次也表现出两次以上的刺激感觉的人作为阳性”，施用APN5N的试验组的敏感性皮肤显著改善为非敏感性皮肤(图9)。此外，在第2次访问时，可以看到29.6％的试验组从敏感性皮肤改善为非敏感性皮肤。另一方面，对照显示14.8％改善。在上述两组之间没有显著差异(p＝0.327，费希尔精确检验)。此外，在第3次访问时，在48.1％的试验组中，初始敏感性皮肤被改善为非敏感性皮肤，而仅14.8％的对照被改善为非敏感性皮肤，这与第2次访问时相同。因此，两组之间显示出显著差异(p＝0.018)。此外，由于脂联素的表达在具有敏感性皮肤的患者中降低，APN5N处理后脂联素基因表达的改变可以是敏感性改善的重要标志。因此，作为通过活组织检查确证脂联素、脂联素的亚信号传导因子P-AMPK和敏感性诱导因子TRPV1的表达的结果(图10)，在包含APN5N的试验组中，脂联素和P-AMPK的表达在施用后增加，而TRPV1的表达降低。在试验组中，在每天两次施用含有APN5N的试验物质持续8周后，与施用前相比，脂联素的表达统计学上地并且显著地增加超过4倍。另一方面，在施用对照材料后，对照中的脂联素的表达没有统计学上显著变化。
9.毛发生长促进功效的确证
已知小鼠的所有毛发都经历其中毛发在第7至8周龄进入休止期并转变回到生长期的过程。因此，使用C57BL/6小鼠确证了本发明的肽对生长期诱导过程的效果。具体地，分别地，在小鼠的下背部的皮肤上，涂布3％的通常用作脱发和毛发生长的治疗的米诺地尔(minoxidil,MNX)、现有的脂联素衍生肽P5(GLYYF，0.05mm和0.1mM)和0.1mM浓度的本发明的P5N(GLYYF-NH2)，每天一次。其后，研究毛发生长。作为结果，在用本发明的肽处理的组中与在阳性对照中一样，确证了在用本发明的肽处理的组中与在阳性对照中一样地，在约4周后，在最初去除毛发的区域中，毛发在生长期生长的区域的比例增加(图11)。
<110> 首尔大学医院(SEOUL NATIONAL UNIVERSITY HOSPITAL)
<120> 肽以及包含所述肽的用于改善皱纹和治疗代谢性疾病的组合物
<130> 21OP07027PCT
<150> KR 10-2020-0113278
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1
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 脂联素衍生肽
<400> 2
Gly Leu Tyr Tyr Phe
1 5

Claims (9)

1.一种肽，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:1或2，并在C末端具有氨基。
2.根据权利要求1所述的肽，其中至少一个氨基酸为D型。
3.根据权利要求1所述的肽，其中一个氨基酸为D型。
4.一种肽，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:1或2，其中至少一个氨基酸为D型。
5.根据权利要求4所述的肽，其中一个氨基酸为D型。
6.一种化妆品组合物，其包含根据权利要求1至5中任一项所述的肽。
7.根据权利要求6所述的化妆品组合物，其中所述组合物用于改善皮肤皱纹、改善敏感性皮肤、改善皮炎或促进毛发生长。
8.一种药物组合物，其用于改善皮肤皱纹、改善皮炎或促进毛发生长，其包含根据权利要求1至5中任一项所述的肽。
9.一种用于治疗代谢性疾病的药物组合物，其包含根据权利要求1至5中任一项所述的肽。
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