CN116286674A - 一株鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24、其噬菌体组合物及其应用 - Google Patents

一株鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24、其噬菌体组合物及其应用 Download PDF

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Abstract

本申请涉及微生物领域，具体公开了一株鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24、其噬菌体组合物及其应用；一株鸭疫里默氏菌噬菌体，被命名为鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24，保藏编号为CGMCC NO.23814；本申请提供的鸭疫里默氏菌噬菌体对鸭疫里默氏菌具有较强、专一的裂解能力，可以有效防治由鸭疫里默氏菌感染引起的疾病；其次，该噬菌体及其噬菌体组合物可作为活性成分用于制备预防和治疗鸭疫里默氏菌病的药物、消毒剂、饲料添加剂以及试剂盒等，可广泛应用于水禽养殖过程、以及产品加工生产过程中各个环节，快速、高效、安全杀灭致鸭疫里默氏菌，有效降低发水禽的病发率和死亡率。

Description

一株鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24、其噬菌体组合物及 其应用
技术领域
本申请属于微生物技术领域，尤其涉及一株鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24、其噬菌体组合物及其应用。
背景技术
鸭疫里默氏菌(Riemerellaanatipestifer，RA)可感染鸭、鹅、鸡和火鸡等多种家禽及野鸟发病，也有正常健康鸭、猪、水产鱼类等带菌的报道。鸭疫里默氏菌是革兰氏阴性小杆菌，大小为0.2～0.4μm，常单个或成对存在，有时也成长丝状，无鞭毛，瑞氏染色呈两极浓染，印度墨汁染色可见有荚膜。鸭疫里默氏菌经污染的饲料、饮水、飞沫、尘埃等通过呼吸道、消化道以及损伤的皮肤等途径传播，且一年四季均可发病，以气温低、湿度大的季节发病和死亡率最高。
鸭疫里默氏菌病又称鸭浆膜炎、鸭败血症等，以14～49日龄雏鹅、仔鹅为易感群，死亡率在40％左右，甚至最高可超过90％。部分农场会采取鹅、鸭混养模式，进一步增加了鸭疫里默氏菌的感染风险，同时，一些其他疾病如大肠杆菌病、巴氏杆菌病、鸭病毒性肝炎等可促进本病的发生。该病多见于群体发病，大批幼鹅、幼鸭同时发病，14日龄以下有突然死亡病例，死前无明显症状；患病鹅、鸭多表现出精神沉郁、食欲下降、久卧不立、行动迟缓、离群等症状，部分患鹅伴有咳嗽流涕、垂翅、昏睡不起、体质虚弱现象，在眼、鼻等部位出现粘液、浆液甚至脓性分泌物，致使眼眶周围羽毛粘连、鼻腔内分泌物堆积，影响患鹅正常呼吸；少数患鹅出现缩颈、头部轻微抽搐、以嘴抵地及神经症状，且迅速死亡。由于该病的高病发率和高死亡率，已成为危害各国养殖业的主要细菌性传染病之一。
抗生素是预防和治疗鸭疫里默氏菌病的首选，但由于抗菌药物长期广泛、不合理的使用，使得该类细菌的多重耐药性日趋严重，耐药菌株不仅对养殖业造成巨大损失，而且还通过食物链等手段向人类传播，从而对人体健康、食品安全构成威胁。目前，抗生素的研发速度远远跟不上耐药性增长的速度，从而急需寻找抗生素替代物来解决这一问题。
噬菌体是一种能够高效特异性吸附和裂解细菌的病毒，与抗生素相比，具有特异性强、分布广泛、研发时间短等优势，目前已广泛应用于细菌性疾病的治疗。噬菌体在治疗和预防过程中，仅针对对应的宿主菌，不会破坏动物机体的肠道菌群平衡，无副作用。目前还未有一款噬菌体产品可有效预防和治疗鹅的鸭疫里默氏菌病。因此，研发一种兼具预防和治疗，且效果显著、使用安全的噬菌体制剂用于防治鹅的鸭疫里默氏菌病迫在眉睫。
发明内容
本申请的目的在于提供一种能够有效防治鹅鸭疫里默氏菌疾病的噬菌体及其组合物治疗方法。本申请提供的噬菌体及其组合物对鸭疫里默氏菌具有较强的裂解能力，能够抑制鸭疫里默氏菌的过度生长，有效治疗鹅的鸭疫里默氏菌病。
为实现上述目的，本申请采取以下技术方案：
第一方面，本申请提供了一株鸭疫里默氏菌噬菌体，采用如下的技术方案：
该噬菌体分离自商丘鸭毛；鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24，于2022年4月26日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号为CGMCC NO.23814。
电镜下观测到：本申请的鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24对鹅源鸭疫里默氏菌均具有较强的裂解作用，同时对鸭源鸭疫里默氏菌也具有一定的裂解作用。在本申请中，该株噬菌体从电镜形态上为长尾噬菌体，头部长约65～70nm，头部宽55～60nm，尾部长约210～220nm。
第二方面，本申请提供了一种噬菌体组合物，采用如下的技术方案：
一种噬菌体组合物包括鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24。这种噬菌体组合物可通过鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24与其他噬菌体复配，对鹅源与鸭源鸭疫里默氏菌株均有较强的裂解力，用于制备防治鸭疫里默氏菌病的各类产品。
第三方面，本申请还提供了上述鸭疫里默氏菌噬菌体或噬菌体组合物在制备预防和/或治疗鸭疫里默氏菌感染疾病的药物中的应用，采用如下的技术方案：
上述的鸭疫里默氏菌噬菌体或噬菌体组合物在制备预防和/或治疗鸭、鹅的鸭疫里默氏菌感染疾病的药物中的应用。
优选地，所述鸭疫里默氏菌选自鸭源、鹅源。在上述发明内容中提到的鹅源、鸭源鸭疫里默氏菌包含多种血清型，包括但不限于Ⅰ型、Ⅱ型。
噬菌体的应用方法为：将上述鸭疫里默氏菌噬菌体或其噬菌体组合物或者其加工后的药剂作为治疗药物添加到患病水禽饲料中(即拌料)，或直接进行灌服，或通过加入饮水中的方式，或给予肌肉注射(如胸肌注射)，或呼吸道给药剂型(如喷雾给药)，使用方式操作简单，且应用性强。
第四方面，本申请还提供一种噬菌体药物制剂，采用如下的技术方案：
一种噬菌体药物制剂，其有效成分主要为鸭疫里默氏菌噬菌体和/或包含该噬菌体的组合物。
优选地，噬菌体药物制剂还包括其他具有协同增效的成分。
优选地，噬菌体药物制剂还包括其他特定病原菌的噬菌体。
优选地，所述噬菌体药物制剂中还包含药学上可接受的载体。
药学上可接受的载体包括盐水、无菌水、Ringer’s溶液、缓冲生理盐水、白蛋白输注液、葡萄糖溶液、麦芽糖糊精溶液、甘油和乙醇等。它们可以单独使用或以其任意组合使用。
优选地，可以加入其它常规添加剂，例如，抗氧化剂、缓冲剂和抑菌剂等。
上述噬菌体药物制剂的剂型为口服给药剂型、注射给药剂型或呼吸道给药剂型。优选地，采用口服给药剂型。
上述药物制剂的剂型具体为溶液剂、粉剂、凝胶剂、颗粒剂或冻干剂。
本申请提供的鸭疫里默氏菌噬菌体制剂可制成粉剂、水剂或冻干剂，通过注射、口服、喷雾等方式给药，可以快速、有效的方式裂解动物体内的鸭疫里默氏菌。
第五方面，本申请还提供一种饲料添加剂，采用如下的技术方案：
一种饲料添加剂，包括鸭疫里默氏菌噬菌体和/或包含该噬菌体的噬菌体组合物；通过与水禽饲料进行混拌后，进行饲喂，从而达到预防或治疗鸭传染性浆膜炎的效果。
优选地，饲料添加剂中每种噬菌体的含量至少为1×108PFU/g。
第六方面，本申请还提供一种消毒剂，采用如下的技术方案：
一种消毒剂，其有效成分主要为所述的鸭疫里默氏菌噬菌体和/或包含该噬菌体的组合物。
优选地，噬菌体的效价为1×108PFU/mL以上。
上述环境消毒剂还包含其他用于环境中细菌抑制或消灭的活性成分或其他助剂。
该噬菌体及其噬菌体组合物可作为活性成分用于制备预防和治疗鸭疫里默氏菌病的药物、消毒剂、饲料添加剂以及试剂盒等，可广泛应用于水禽养殖过程、以及产品加工生产过程中各个环节，快速、高效、安全杀灭致病性鸭疫里默氏菌乃至耐药性鸭疫里默氏菌，有效降低发水禽的病发率和死亡率。
上述消毒剂的应用方法为：将消毒剂在屠宰场、水禽产品加工车间及器具、养殖环境中使用，防止环境中鸭疫里默氏菌的污染。
第七方面，本申请还提供一种检测试剂盒，采用如下的技术方案：
一种检测试剂盒，包括如上所述的鸭疫里默氏菌噬菌体或噬菌体组合物。该试剂盒用于检测其特异侵染的鸭疫里默氏菌、或用于防控由其宿主鸭疫里默氏菌侵染导致的疾病。
本申请具有以下有益效果：
1、本申请提供的鸭疫里默氏菌噬菌体对鸭疫里默氏菌具有较强、专一的裂解能力，可以有效防治由鸭疫里默氏菌感染引起的疾病；其次，该噬菌体及其噬菌体组合物可作为活性成分用于制备预防和治疗鸭疫里默氏菌病的药物、消毒剂，可快速、高效、安全杀灭鸭疫里默氏菌。
2、本申请提供的鸭疫里默氏菌噬菌体无毒副作用，安全性高，无残留，不影响动物肠道菌群平衡，对鸭疫里默氏菌病的治疗有较好的作用，为水禽业鸭疫里默氏菌病的治疗提供一种绿色新型生物制剂。
附图说明
图1为噬菌体vB_RanS_PT24的噬菌斑图片；
图2为噬菌体vB_RanS_PT24的电镜图片；
图3为噬菌体vB_RanS_PT24的热稳定性图片；
图4为噬菌体vB_RanS_PT24的pH稳定性图片。
具体实施方式
下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。在本申请中，若非特指，所采用的设备和原料等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。
以下实施例中，
TSA平板配方：胰蛋白胨15.0g、大豆胨5.0g、氯化钠5.0g、琼脂15.0g，pH7.3±0.2(25℃)。
TSB肉汤配方：胰蛋白胨17.0g、大豆蛋白胨3.0g、氯化钠5.0g、磷酸氢二钾2.5g、葡萄糖2.5g，pH7.3±0.2。
SM缓冲液配方：氯化钠5.89g、硫酸镁2g、1MTris-HCL(pH7.5)50mL、2％明胶5mL。
实施例1噬菌体的分离培养和生物学特性
(一)样品采集
从商丘不同养鸭场采集粪样、垫料、污水以及皮毛等样品。
(二)菌种的复苏培养和菌悬液的制备
使用灭菌接种环将鸭疫里默氏菌的冻存菌液在TSA平板(加体积浓度为2％的小牛血清)上三区划线，分离单菌落，37℃烛缸中培养24～48h。挑取单菌落，接种5mLTSB肉汤(加体积浓度为5％的小牛血清)中，37℃空气振荡器中，220rpm振荡培养20h，得到单一的菌悬液。
(二)噬菌体的分离与纯化
将采集的样品加入适量的无菌PBS，37℃，170rpm振荡60min，11000rpm离心5min，取上清后0.45μm细菌滤器过滤备用。
每个50mL离心管中按照总体积25％的量加入各株鸭疫里默氏菌，按照总体积25％的量加入离心过滤的上清液(细菌滤器过滤后的上清液)，按照总体积50％的量加入2×TSB培养基(加体积浓度为5％的小牛血清)搅拌均匀后，于37℃烛缸，静置培养过夜，11000rpm离心5min，0.45μm的细菌滤器过滤除菌后备用；重复上一步骤，将滤液和宿主菌混合，37℃孵育15min后铺双层平板，待凝固后放入37℃烛缸中倒置培养过夜。
若有噬菌体存在，则会在培养基上形成透明、规则的圆形空斑，即为噬菌斑。抠取单个噬菌斑，于1mLSM缓冲液中，37℃的空气振荡器中浸出60min，再置于4℃冰箱中静置3h，11000rpm离心5min，取上清再用双层平板法得到单个的噬菌斑，如此重复3～5次直至形成圆形透明斑块，边界清晰，斑块直径约0.5mm的噬菌斑，见图1。
(三)噬菌体的增殖和效价测定
取100μL宿主菌和噬菌体抠斑浸出液加入到5mL TSB肉汤(加体积浓度为5％的小牛血清)中，于37℃的空气振荡器170rpm的条件下培养5～8h，待混合液变澄清，得到噬菌体增殖液。按照10倍倍比稀释噬菌体增殖液，再通过双层平板法测定噬菌体的效价，每个稀释度分别做3个平行样。
结果显示：取3个平行样计数，计算效价约为2×109PFU/mL～4×109PFU/mL。
(四)透射电镜观察噬菌体的形态
取高于1×109PFU/mL噬菌体样品(噬菌体增殖液)20μL滴于微孔铜网上，沉淀15min，用滤纸吸去多余的液体。在铜网上滴加15μL的体积浓度为2％的磷钨酸(PTA)，染色5min，用滤纸吸去多余的染液，干燥后用透射电镜观察并拍照。
结果显示：所述噬菌体的头部长约65～70nm，头部宽55～60nm，其尾部长约210～220nm，噬菌体电镜图如图2所示；根据病毒分类国际委员会(ICTV)的定义，噬菌体PT24的形态符合长尾噬菌体科的特征，属于长尾噬菌体科，并将该噬菌体命名为vB_RanS_PT24。
(五)噬菌体的热稳定性检测
将3.37×109PFU/mL的噬菌体vB_RanS_PT24的增殖液分别于40℃、45℃、50℃、55℃、60℃，水浴中作用30min，每个温度设两个平行组。双层平板法测定噬菌体的效价。
试验结果如图3所示，噬菌体vB_RanS_PT24在40℃-55℃作用30min后基本保持原活性；在60℃作用30min后，噬菌体效价下降接近1个滴度。试验结果说明噬菌体vB_RanS_PT24能够耐受55℃及以下的高温。
(六)噬菌体的pH稳定性检测
取1.5mL的无菌离心管，并分别向各管中加入不同pH值(4、5、6、7、8、9、10、11)的900μL的SM缓冲液，并置于37℃的水浴锅中，待温度稳定之后，向各管中分别加入100μL的3.37×109PFU/mL的噬菌体增殖液，混匀，37℃水浴作用1h。作用结束之后，分别从各离心管中吸取200μL的混合液，将其加入含有800μLSM缓冲液的1.5mL离心管中，通过双层平板法测定不同pH处理后的噬菌体的效价。
试验结果如图4所示，在pH5～10范围内，噬菌体vB_RanS_PT24的效价几乎没变或略有下降，在pH＝4时，噬菌体vB_RanS_PT24效价下降1个滴度，在pH＝11时，噬菌体vB_RanS_PT24效价下降2个滴度，这说明噬菌体vB_RanS_PT24能够耐受一定的酸性环境和碱性环境。
(七)噬菌体的最佳感染复数(MOI)测定
按照常规方法增殖鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24和宿主菌鸭疫里默氏菌T05，测定噬菌体初始效价及宿主菌浓度，并将噬菌体vB_RanS_PT24和宿主菌进行适当的稀释。按照感染复数为10、1、0.1、0.01的比例各取200μL噬菌体vB_RanS_PT24和宿主菌T05加入到TSB肉汤(加体积浓度为5％的小牛血清)中。于37℃、220rpm振荡培养至液体变澄清，记录液体变澄清时间。11000rpm离心5min，双层平板法测定噬菌体的效价，结果见表1。
表1噬菌体vB_RanS_PT24最佳感染复数测定结果
Figure BDA0004098120220000061
试验结果表明，在感染复数为0.1条件下，噬菌体感染宿主菌产生子代噬菌体的滴度为5.14×109PFU/mL，在4个感染复数中噬菌体滴度最高。
实施例2：噬菌体的基因组分析
提取鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24的基因组，进行全基因组测序，对其序列进行分析：噬菌体vB_RanS_PT24的基因组大小为43704bp，基因组序列A、G、C、T 4种碱基所占的比例分别为36.92％、18.66％、16.15％、28.27％，G+C％含量为34.81％。
经RAST预测分析，噬菌体vB_RanS_PT24基因组含有79个开放阅读框(ORFs)；使用在线工具BLASTp和保守域数据库(CDD)分别对噬菌体vB_RanS_PT24的79个ORFs进行比对，其中，噬菌体vB_RanS_PT24含已知编码功能蛋白11个，其余ORFs为假想蛋白。
噬菌体vB_RanS_PT24的基因组中：重组酶/整合酶(recombinase/integrase)基因的序列如SEQ ID NO:1所示，高度保守的末端酶大亚基(terminase large subunit)基因序列如SEQ ID NO:2所示。上述基因的具体信息见下表2。
表2噬菌体的vB_RanS_PT24基因序列信息表
Figure BDA0004098120220000071
实施例3：噬菌体裂解谱的测定
采用双层平板法测定上述噬菌体的裂解谱，方法具体为：按照实施例1中的方法得到120株不同宿主菌的菌悬液(这120株鸭疫里默氏菌中有60株鸭源菌和60株鹅源菌)。将100μL的各个宿主菌的菌悬液分别与100μL的鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24于37℃条件下孵育15min后，加入上层琼脂中(加体积浓度为5％的小牛血清)制备双层平板，待琼脂凝固后置于37℃的恒温箱中倒置培养过夜观察裂解结果，结果见表3。
表3鸭疫里默氏菌噬菌体裂解谱
Figure BDA0004098120220000081
注：+：裂解，软琼脂平板法有透亮噬菌斑；-：未裂解。
根据表3可知，将上述120株鸭疫里默氏菌作为宿主菌进行裂解谱的测定，噬菌体vB_RanS_PT24能裂解其中的95株，其裂解率达79.16％；针对60株鸭源鸭疫里默氏菌裂解43株，裂解率为71.67％；针对60株鹅源鸭疫里默氏菌裂解52株，裂解率为86.67％。
说明噬菌体vB_RanS_PT24对鸭疫里默氏菌尤其是鹅源鸭疫里默氏菌有较好的裂解效果，可快速、高效、安全杀灭致病性鸭疫里默氏菌乃至耐药性鸭疫里默氏菌，有效降低发水禽的病发率和死亡率，提高养殖场经济效益。
实施例4：噬菌体的安全性试验
选择20只体重为18～20g的健康BALB/C小鼠，雌雄各半，分为实验组和对照组(每组10只)，2组的小鼠分别灌服噬菌体增殖液(300μL，109PFU/mL)和TSB肉汤(300μL)，连续灌服7天，观察小鼠的行为表现，再剖检观察小鼠组织脏器的变化。
实验组和对照组的小鼠的行为无异常，剖检发现：肝脏、肺脏、心脏、脾脏、肾脏等脏器正常，与对照组无明显差别。这说明噬菌体对试验小鼠是安全的。
实施例5：噬菌体消毒试验
将血清Ⅱ型的鸭疫里默氏菌临床分离菌株GT47菌液浓度稀释至1×104CFU/mL。对照组先将1mL稀释至1×104CFU/mL菌液均匀喷洒在1m2的地面上，然后均匀喷洒等体积的TSB肉汤；试验组先将1mL稀释至1×104CFU/mL菌液均匀喷洒在1m2的地面上，然后将1×108PFU/mL的噬菌体vB_RanS_PT24均匀喷洒在地面上，每组2个重复。每隔1h，在相同面积的地面采样，使用平板计数法检测地面宿主菌的数量，共检测6h，结果见表4。
表4消毒试验结果
Figure BDA0004098120220000091
根据表4可知，使用噬菌体vB_RanS_PT24对鸭疫里默氏菌污染的地面进行消毒后，平板计数结果显示1h后地面鸭疫里默氏菌的数量开始下降，2h后地面鸭疫里默氏菌的数量下降至103CFU左右，3h后地面的鸭疫里默氏菌的数量下降至10CFU左右，4h后在地面上已经检测不到鸭疫里默氏菌，对照组地面鸭疫里默氏菌的数量略有上升。说明噬菌体vB_RanS_PT24可以有效杀灭环境中的鸭疫里默氏菌。
实施例6：噬菌体预防鹅鸭疫里默氏菌病试验
选择体重相近的健康3周龄的豁眼鹅20只，将其均分为试验组和对照组(每组10只)。试验组每只鹅口服1mL的1×109PFU/mL鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24进行预防，对照组每只口服等量TSB肉汤；给予噬菌体2h后，分别对试验组和对照组的鹅颈部皮下注射0.5mL血清型Ⅱ型的鸭疫里默氏菌临床分离菌株GT47(5×108CFU/只)，观察鹅状态，记录鹅只的死亡情况，连续观察7天。7天后剖检所有的鹅只观察组织器官的病理变化。
结果显示：7天内，预防试验组的豁眼鹅死亡只数为2只，死亡率为20％；对照组死亡9只，死亡率为90％，噬菌体的保护率达到80％，说明该噬菌体可以有效预防鹅鸭疫里默氏菌病的发生。
实施例7：噬菌体对鹅的鸭疫里默氏菌攻毒治疗试验
选择体重相近的健康3周龄的豁眼鹅20只，分为治疗组和对照组(每组10只)。两组鹅分别颈部皮下注射0.5mL血清Ⅱ型的鸭疫里默氏菌临床分离菌株GT47(5×108CFU/只)，处理2h后，对治疗组的鹅只每天胸肌注射1mL含有1×109PFU/mL的鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24进行治疗，对照组每天胸肌注射等量TSB肉汤，1次/天，连用3天，观察鹅只状态，记录鹅只死亡情况，停药后观察7天后。
结果显示：治疗组的鹅只死亡3只，死亡率为30％，对照组鹅只死亡9只，死亡率为90％，鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24保护率为70％。结果表明，胸肌注射噬菌体能够有效治疗鹅的鸭疫里默氏菌病。
以上所述实施例仅表达了本申请的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此理解为对本申请专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本申请的保护范围。因此，本申请专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (9)

1.一株鸭疫里默氏菌噬菌体，其特征在于，被命名为鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24，保藏编号为CGMCC NO.23814。
2.一种噬菌体组合物，其特征在于，包括如权利要求1所述的鸭疫里默氏菌噬菌体vB_RanS_PT24。
3.如权利要求1所述的鸭疫里默氏菌噬菌体或如权利要求2所述的噬菌体组合物在制备预防和/或治疗鸭疫里默氏菌感染疾病的药物中的应用。
4.一种噬菌体药物制剂，其特征在于：包括如权利要求1所述的鸭疫里默氏菌噬菌体和/或权利要求2所述的噬菌体组合物。
5.根据权利要求4所述的噬菌体药物制剂，其特征在于：噬菌体药物制剂中还包含药学上可接受的载体。
6.根据权利要求5所述的噬菌体药物制剂，其特征在于：噬菌体药物制剂的剂型为口服给药剂型、注射给药剂型或呼吸道给药剂型。
7.一种饲料添加剂，其特征在于，包括如权利要求1所述的鸭疫里默氏菌噬菌体和/或权利要求2所述的噬菌体组合物；饲料添加剂中噬菌体的含量至少为108PFU/g。
8.一种消毒剂，其特征在于，包括如权利要求1所述的鸭疫里默氏菌噬菌体和/或权利要求2所述的噬菌体组合物；消毒剂中噬菌体的效价为1×108PFU/mL以上。
9.一种检测试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的鸭疫里默氏菌噬菌体和/或权利要求2所述的噬菌体组合物。
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