CN116200305A - 一株具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株、培养方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株具有抗炎特性的耐久肠球菌(Enterococcus durans)98D、培养方法及应用。所述耐久肠球菌的保藏编号为CCTCC NO：M 20221217，其能够恢复DSS及大肠杆菌诱导的肠道炎症、提高结肠上皮屏障完整性、降低促炎基因TNF‑α、IL‑6、IL‑1β表达水平、提高抑炎基因IL‑10及紧密连接蛋白基因ZO‑1、Occludin、Claudin‑1的表达水平，具有对肠道炎症的治疗作用，能够抗炎药物、抗炎保健品或者抗炎饲料添加剂等抗炎产品。

Description

一株具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株、培养方法及应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株具有抗炎特性的耐久肠球菌(Enterococcus durans)98D、培养方法及应用。
背景技术
炎症性肠病是一种病因不明的慢性非特异性肠道炎性疾病，包括克罗恩病和溃疡性结肠炎，已成为21世纪全球发病率加速上升的全球性疾病。遗传因素、粘膜屏障功能缺陷、先天免疫和获得性免疫以及微生物组成的改变都可能导致炎症性肠病的发生和发展。炎症性肠病患者临床症状包含持续腹痛、体重减轻、食欲下降和精神萎靡等。炎症性肠病传统的治疗方法可分为现代医学治疗和中药治疗法，这些方法或具有一定副作用或见效缓慢。随着科学技术的发展，肠道微生物与炎症性肠病相关性研究为该病的治疗提供了新的治疗手段，即通过体外补充益生菌以调节肠道菌群平衡从而治疗炎症性肠病。
益生菌是一种活的微生物，当给予足够的量时，会对宿主产生有益的影响。它们通过调节肠道微生物区系，促进粘膜屏障功能和对病原体的抵抗力来发挥这些作用。目前，临床上认为益生菌能够维持或缓解炎症性肠病的临床发展。益生菌的作用机制主要通过4种方式实现：抑制病原菌或与其竞争、增强肠道上皮的屏障功能、调节宿主免疫功能、参与肠-脑轴调节。
耐久肠球菌属乳酸菌属，能够适应复杂的环境，广泛存在于从昆虫到人类的各个物种的胃肠道中。一些肠球菌菌株具有改善人类健康的功能。然而，其他研究也表明某些肠球菌菌株也与感染的发生有关，例如一些粪肠球菌和屎肠球菌菌株分泌的黏附素、侵袭素及溶血素等会引起人类感染。在动物中，肠球菌的益生作用主要体现在对肠道炎症的预防或治疗作用。Zeyner和Boldt的研究显示，将屎肠球菌作为添加剂可以成功降低腹泻仔猪的比例、提高仔猪的生长发育并减少肠道中致病菌的定殖(A.Zeyner,E.Boldt,Effects of aprobiotic Enterococcus faecium strain supplemented from birth to weaning ondiarrhoea patterns and performance of piglets.Journal of animal physiologyand animal nutrition 90,25-31(2006))。此外，Enterococcus.faecium
Figure BDA0004061141750000021
(NCIMB10415)已被批准用于动物饲料的添加剂，该菌不仅可以降低动物肠道内致病菌的负荷和大肠杆菌毒力基因的表达，还可以引发抗炎反应。石陆娥等(石陆娥,唐振兴,郑伟,张瑜.屎肠球菌KQ2.6及应用[P].浙江省：CN104560820B,2017-10-20)从新鲜孔雀粪便中分析筛选出一株屎肠球菌(Enterococcus.faecium KQ2.6)，用于抑制常见病原微生物的繁殖。马曦等(马曦,姬琳堡,孙美鸽,张中岳,罗小华,王贤锋,陈柱生.一株屎肠球菌及其应用[P].江苏省：CN112063566B,2021-11-02)从肉牛瘤胃中筛选并经过紫外诱变得到一株屎肠球菌(Enterococcus.faecium AH01)，能够有效粘附于动物肠道并对革兰氏阳性、阴性菌均有抑制作用。基于以上所述，益生菌对于肠道疾病的治疗具有很好的前景，但是，其他肠球菌是否具有治疗肠道炎症的潜力及作用机制都有待探究。因此，本发明的目的是提供一株具有优异益生特性，能够有效治疗肠道炎症的耐久肠球菌菌株。/>
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了一株具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株、培养方法及应用。
本发明的目的是提供一种具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株，命名为98D，该菌株已于2022年8月03日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 20221217。
本发明还提供了一种上述具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株的培养方法，将单个菌落接种于MRS培养基中，37℃好氧培养24h，得到耐久肠球菌菌液。
本发明还提供了一种包含上述具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株的抗炎产品。
优选的，所述抗炎产品为抗炎药物、抗炎保健品或者抗炎饲料添加剂。
优选的，所述抗炎产品为片剂、散剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、液体制剂中的任意一种。
优选的，所述抗炎产品是将所述耐久肠球菌以活菌或死菌的固态或液态菌制剂的形式制备成的。
优选的，如果是液态抗炎产品，则所述抗炎产品中耐久肠球菌含量≥109cfu/mL；如果是固态抗炎产品，则所述抗炎产品中耐久肠球菌含量≥109cfu/g。
本发明还提供了一种所述的具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株的应用，所述耐久肠球菌菌株用于制备治疗溃疡性结肠炎症的产品。
优选的，所述耐久肠球菌菌株用于制备促炎基因表达抑制剂，或者用于制备抑炎基因及紧密连接蛋白基因表达促进剂，或者用于制备血清中IFN-γ与LPS的浓度调节剂。
优选的，所述促炎基因为TNF-α、IL-6和IL-1β，所述抑炎基因为IL-10，所述紧密连接蛋白基因为ZO-1、Occludin和Claudin-1。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明所述耐久肠球菌98D可使用于动物或是人类。所述耐久肠球菌还可配合所属领域中的常规用料组分；例如，对于药物组合物，可包括适量的辅料，所述辅料可以为赋型剂、稀释剂、填充剂、吸收促进剂等；对于食品组合物，本发明的耐久肠球菌可以按照现有技术中含耐久肠球菌的食品进行生产，所述组合物可根据受施予者的需要，而采用不同形态。例如粉剂、锭剂、造粒、微胶囊、液体制剂等。
本发明发掘了耐久肠球菌新的用途，开拓了一个新的应用领域。本发明通过实验证明，耐久肠球菌安全无毒，药理作用强，对于肠道炎症有很好的治疗作用，从而预示了耐久肠球菌具有很好的食用和药用前景。耐久肠球菌作为一种益生菌，可用于制备治疗炎症性肠病的食品或药物组合物，进而为临床提供适合人体服用的保健食品或治疗药物。
根据本发明的具体实施方案，所述组合物是用于下调促炎基因IL-6和/或TNF-α和/或IL-1β的表达，上调抑炎基因IL-10及紧密连接蛋白基因ZO-1、Occludin和Claudin-1的表达。具体应用时，所述耐久肠球菌的应用量应达到5×109CFU/mL，以起到缓解和治疗肠道炎症的作用。
生物保藏信息说明
一种耐久肠球菌(Enterococcus durans)，命名为Enterococcus durans 98D，简称为98D。该菌株已于2022年8月3日保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC(地址：湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山，武汉大学)，分类命名：耐久肠球菌(Enterococcus durans)；保藏编号为CCTCC NO：M 20221217。
附图说明
图1是耐久肠球菌98D的平板培养图；
图2是本发明实施例2中耐久肠球菌对DSS诱导的肠道炎症小鼠体重的影响；
图3是本发明实施例2中耐久肠球菌对DSS诱导的肠道炎症小鼠结肠长度的影响；A为长度测量统计图，B为结肠实物长度测量；
图4是本发明实施例2中耐久肠球菌对DSS诱导的肠道炎症小鼠结肠杯状细胞数的影响；A为小鼠结肠上皮中杯状细胞数量统计结果，B为小鼠结肠上皮中杯状细胞染色结果；
图5是本发明实施例2中耐久肠球菌对DSS诱导的肠道炎症小鼠结肠组织基因表达量的影响；A-G分别为TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、ZO-1、Occludin、Claudin-1；
图6是实施例3中耐久肠球菌对大肠杆菌诱导的肠道炎症小鼠结肠组织基因表达量的影响；A-G分别为IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-10、Occludin、Claudin-1、ZO-1；
图7是实施例4耐久肠球菌98D在治疗大肠杆菌诱导的羔羊腹泻方面相关因子浓度的影响；A-F分别为DAI Score、IFN-γ、IL-1β、TNF-α、IL-6、LPS。
具体实施方式
为了使本领域技术人员更好地理解本发明的技术方案能予以实施，下面结合具体实施例和附图对本发明作进一步说明。
在本发明的描述中，如未特殊说明，所用试剂均为市售，所用方法均为本领域常规技术。
实施例1耐久肠球菌98D菌液的制备
(1)由羔羊粪便中分离耐久肠球菌98D
收集新鲜的羔羊粪便1g悬浮于PBS缓冲液中，6000r/min离心5min并收集上清液，连续稀释至10-8倍。9g布氏培养基粉末中加入3g琼脂，加无菌水定容至196mL，高压蒸汽灭菌后，加入0.01‰氯化血红素(即氯化血红素终浓度0.01‰，w/v)、0.01‰维生素K1(即维生素K1终浓度0.01‰，w/v)、0.1‰卡那霉素(即卡那霉素终浓度0.1‰，w/v)、0.0075‰万古霉素(即万古霉素终浓度0.0075‰，w/v)以及5％脱纤维绵羊血(即脱纤维绵羊血终浓度5％，w/v)配置成固体改良布氏血(LKV)培养基。将50μL粪便上清液涂板至固体改LKV培养基上，37℃好氧培养24h后挑取单菌落进行菌种鉴定并纯化培养，得到目标菌株。
耐久肠球菌98D平板培养结果参见图1。
(2)耐久肠球菌98D全基因组测序；
采用农业农村部印发的《直接饲喂微生物和发酵制品生产菌株鉴定及其安全性评价指南》方法，对耐久肠球菌98D基因组中抗生素耐药基因按照覆盖度≥70％，匹配度≥80％进行筛选。评价结果显示，耐久肠球菌98D对氟喹诺酮类、大环内酯类、利福霉素类以及氨基糖苷类抗生素敏感。后经体外药敏实验进一步验证后显示，上述抗生素均可抑制耐久肠球菌98D的生长。因此，耐久肠球菌98D符合欧洲食品安全委员会(European Food SafetyAuthority)对食用细菌耐药性评价规范中的要求。耐久肠球菌98D不含外源抗生素耐药基因，食用安全。
耐久肠球菌16s rRNA基因序列测序结果如下：
CTAATTCTGTCACTTCGGCGGCTGGCTCCTAAAGGTTACCTCACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCAGCTTCACGCAGTCGAGTTGCAGACTGCGATCCGAACTGAGAACAGATTTGTGGGATTGGCTTAACCTCGCGGTTTCGCTGCCCTTTGTTCTGTCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCACCTTAGAGTGCCCAACTGAATGCTGGCAACTAAGATCAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACTCTGCCCCCGAAGGGGACGTCCTATCTCTAGGATTGTCAGAGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGTCTTGCGACCGTACTCCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCAGCACTAAGGGGCGGAAACCCCCTAACACTTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTCGCTCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTCCACATCTCTACGCATTTCACCGCTACACGTGGAATTCCACTCTCCTCTTCTGCACTCAAGTTCCCCAGTTTCCAATGACCCTCCCCGGTTGAGCCGGGGGCTTTCACATCAGACTTAAGAAACCGCCTGCGAGCCCTTTACGCCCAATAATTCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGTTAGGTACCGTCAAGGTACCGCCCTATTCGAACGGTACTTGTTCTTCCCTAACAACAGAGCTTTACGATCCGAAAACCTTCATCACTCACGCGGCGTTGCTCCGTCAGACTTTCGTCCATTGCGGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTACGCATCGTTGCCTTGGTGAGCCGTTACCTCACCAACTAGCTAATGCGCCGCGGGTCCATCTGTAAGTGGTAGCCGAAGCCACCTTTTATGTTTGAACCATGCGGTTCAAACAACCATCCGGTATTAGCCCCGGTTTCCCGGAGTTATCCCAGTCTTACAGGCAGGTTACCCACGTGTTACTCACCCGTCCGCCGCTAACATCAGGGAGCAAGCTCCCATCTGTCCGCTCGACTGCATGTATAGCACGCGGACATGCAC
(3)耐久肠球菌98D的富集培养及菌液制备
选取纯化好的单个菌落接种于MRS培养基中进行富集培养(37℃好氧培养24h)，并取培养后的菌液在5000r/min、4℃条件下离心10min，弃去上清，并用生理盐水洗涤、重悬后进行梯度稀释，以调整耐久肠球菌98D的浓度，保存备用。
实施例2耐久肠球菌98D对于炎症性肠病的短期治疗作用
采用实施例1(3)制备的耐久肠球菌98D菌液进行以下实验：
实验动物：C57BL/6J雌性小鼠。
动物模型构建：化学药物诱导炎症性肠病(葡聚糖硫酸钠DSS诱导溃疡性结肠炎)。
动物试验设计：取24只小鼠随机分为3组：阴性对照组(NC)、阳性对照组(Con)、耐久肠球菌处理组(En.d)。试验第0-14d，NC小鼠自由饮水，Con和En.d组小鼠自由饮用含有3％ DSS的饮用水。试验15-24d，NC小鼠自由饮水，Con和En.d组小鼠仍自由饮用含3g/100mLDSS的饮用水，此外，NC和Con组小鼠每日灌胃200μL生理盐水，En.d组小鼠每日灌胃200μL含5×109CFU/mL Enterococcus durans 98D的生理盐水，于第24d处死小鼠并采样。
测量指标：小鼠体重、小鼠结肠长度、结肠组织切片AB-PAS染色、结肠组织杯状细胞数、促炎基因(TNF-α、IL-6、IL-1β)、抑炎基因IL-10及紧密连接蛋白基因(ZO-1、Occludin、Claudin-1)表达量。
试验结果：如图2所示，与NC组相比，DSS处理后Con组小鼠的体重显著下降，En.d组小鼠体重显著上升(P＜0.05)，结果显示，耐久肠球菌98D能够防止DSS导致的小鼠体重降低。如图3所示，NC组结肠长度最长，其次为En.d组，最后为Con组，结果显示，耐久肠球菌98D处理能够显著缓解DSS影响下的结肠长度变短(P＜0.05)。如图4所示，与Con组相比，En.d组小鼠结肠上皮中杯状细胞数量显著上升(P＜0.05)，说明耐久肠球菌98D处理能够显著改善DSS处理下小鼠的肠道上皮屏障完整性。如图5所示，与Con组相比，En.d组小鼠结肠组织中促炎基因TNF-α、IL-6、IL-1β的表达水平显著降低(P＜0.05)，且抑炎基因IL-10的表达水平显著升高(P＜0.05)。此外，En.d组小鼠结肠上皮组织中紧密连接蛋白基因ZO-1、Occludin、Claudin-1的表达量显著高于Con组小鼠(P＜0.05)。
实施例2的实验结果说明耐久肠球菌98D炎症性肠病尤其是溃疡性结肠炎有治疗作用。
实施例3耐久肠球菌98D抑制肠道致病菌的作用
采用实施例1(3)制备的耐久肠球菌98D菌液进行以下实验：
(1)抑菌实验
致病菌种类：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、幽门螺杆菌、沙门氏菌。
实验方法：牛津杯法，将孵育18h的致病菌菌液0.2ml、菌体浓度107CFU/mL分别均匀涂布接种于营养琼脂平板上，平板中心放置牛津杯，每个牛津杯中装有0.2ml实施例1(3)制备的耐久肠球菌98D菌液；用无菌水0.2ml作为阴性对照。上述体系在37℃培养24h，测量抑菌圈直径，测量3次，求取平均值。
实验结果：结果参见表1。
表1耐久肠球菌抑菌实验结果
Figure BDA0004061141750000081
(2)动物实验
实验动物：6周龄C57BL/6J雌性小鼠。
动物模型构建：大肠杆菌O157:H7诱导肠道炎症的模型参考(Wang,G.,Tang,H.,Zhang,Y.,Xiao,X.,Xia,Y.,&Ai,L.(2020).The intervention effects ofLactobacillus casei LC2W on Escherichia coli O157:H7-induced mousecolitis.Food Science and Human Wellness,9(3),289-294.)。
动物试验设计：取24只小鼠随机分为3组：阴性对照组(NC)、阳性对照组(Con)、耐久肠球菌处理组(En.d)。试验第0-3d，所有实验小鼠饮用含有5g/L链霉素的饮水，以抑制肠道中微生物，为植入大肠杆菌O157:H7做准备。第4-13d，NC小鼠每天灌胃生理盐水0.6mL；Con组小鼠每日灌胃0.3mL大肠杆菌O157活菌浓度含量为1×109CFU/mL的生理盐水，同时灌胃0.3mL的生理盐水；En.d组小鼠灌胃0.3mL大肠杆菌O157活菌浓度为2×109CFU/mL的生理盐水，同时灌胃耐久肠球菌98D活菌含量为2×109CFU/mL的生理盐水0.3mL；于第14天处死小鼠并采样。
测量指标：促炎基因(TNF-α、IL-6、IL-1β)、抑炎基因IL-10、ZO-1、Occludin、Claudin-1的表达量。
试验结果：如图6所示，与Con组相比，En.d组小鼠结肠组织中促炎基因TNF-α、IL-6、IL-1β的表达水平显著降低(P＜0.05)，且抑炎基因IL-10的表达水平显著升高(P＜0.05)。此外，En.d组小鼠结肠上皮组织中紧密连接蛋白基因ZO-1、Occludin、Claudin-1的表达量显著高于Con组小鼠(P＜0.05)。
实施例3的实验结果说明耐久肠球菌98D炎症性肠病尤其是溃疡性结肠炎有治疗作用。
实施例4耐久肠球菌98D在治疗大肠杆菌诱导的羔羊腹泻方面的效果实验
实验分组：取18只60d羔羊随机分为3组，阴性对照组(NC)、阳性对照组(Con)、耐久肠球菌处理组(En.d)，试验共分为两阶段。试验第一阶段：阴性对照组(NC)处理对象为健康羔羊，每日晨饲前灌胃5mL生理盐水；阳性对照组(Con)及耐久肠球菌处理组(En.d)羔羊每日晨饲前灌胃5mL含1×1012CFU/mL肠出血性大肠杆菌O157的生理盐水，试验第一阶段持续7d。试验第二阶段：NC组和Con组羔羊于每日晨饲前灌胃5mL生理盐水；En.d组羔羊每日晨饲前灌胃5mL含1×1012CFU/mL Enterococcus durans 98D的生理盐水，试验第二阶段持续14d。
测量指标：羔羊腹泻评分、血清炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-γ、LPS)的浓度。
羔羊腹泻评分标准：腹泻指数评分标准：以滩羊粪便形态、***周围皮肤洁净程度及炎症情况为评价指标，按照表2分为0、1、2、3等级将羔羊腹泻进行量化。
表2羔羊腹泻指数评分标准
Figure BDA0004061141750000101
试验结果：如图7所示，与Con组相比，En.d组小鼠DAI Score最终降低趋势；与Con组相比，En.d组小鼠结肠组织中IFN-γ、IL-1β、TNF-α、IL-6、LPS的浓度显著降低(P＜0.05)，)。
已有研究结果显示TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-γ及LPS等与糖尿病、肠道炎症、静脉血栓等疾病相关。结合实施例2、实施例3及实施例4，本发明首次发现，耐久肠球菌98D不但能够影响组织中TNF-α、IL-6、IL-1β等促炎因子基因的表达量，也能够调控血清中TNF-α、IL-6、IL-1β及LPS的浓度。同时，化学腹泻及生物腹泻模型的共同验证也表明耐久肠球菌在治疗肠道炎症方面具有广泛的应用前景。
需要说明的是，本发明中涉及数值范围时，应理解为每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用，由于采用的步骤方法与实施例相同，为了防止赘述，本发明描述了优选的实施例。尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例做出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (10)

1.一株具有抗炎特性的耐久肠球菌(Enterococcus durans)菌株，其特征在于，命名为98D，该菌株已于2022年8月3日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M20221217。
2.根据权利要求1所述的具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株的培养方法，其特征在于，将单个菌落接种于MRS培养基中，37℃好氧培养24h，得到耐久肠球菌菌液。
3.一种包含权利要求2所述的具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株的抗炎产品。
4.根据权利要求3所述的具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株的抗炎产品，其特征在于，所述抗炎产品为抗炎药物、抗炎保健品或者抗炎饲料添加剂。
5.根据权利要求3所述的具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株的抗炎产品，其特征在于，所述抗炎产品为片剂、散剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、液体制剂中的任意一种。
6.根据权利要求3所述的具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株的抗炎产品，其特征在于，所述抗炎产品是将所述耐久肠球菌以活菌或死菌的固态或液态菌制剂的形式制备成的。
7.根据权利要求3所述的具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株的抗炎产品，其特征在于，如果是液态抗炎产品，则所述抗炎产品中耐久肠球菌含量≥109cfu/mL；如果是固态抗炎产品，则所述抗炎产品中耐久肠球菌含量≥109cfu/g。
8.根据权利要求1所述的具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株的应用，其特征在于，所述耐久肠球菌菌株用于制备治疗溃疡性结肠炎症的产品。
9.根据权利要求8所述的具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株的应用，其特征在于，所述耐久肠球菌菌株用于制备促炎基因表达抑制剂，或者用于制备抑炎基因及紧密连接蛋白基因表达促进剂，或者用于制备血清中IFN-γ与LPS的浓度调节剂。
10.根据权利要求9所述的具有抗炎特性的耐久肠球菌菌株的应用，其特征在于，所述促炎基因为TNF-α、IL-6和IL-1β，所述抑炎基因为IL-10，所述紧密连接蛋白基因为ZO-1、Occludin和Claudin-1。
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