CN116162680A - 一种量化评估血液净化装置血栓程度的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种量化评估血液净化装置血栓程度的方法。与现有技术相比，本发明提供的评估方法可以消除血液批次/患者不同带来的测试误差，还可以量化血液净化装置血栓的形成程度，并且适用于评估大批量血液净化装置之间的血栓程度的差异，且试验测试简单，干扰因素少，为解决血栓残留问题以及新产品开发提供优化评价方案。

Description

一种量化评估血液净化装置血栓程度的方法

技术领域

本发明属于医疗器械技术领域，尤其涉及一种量化评估血液净化装置血栓程度的方法。

背景技术

体外循环及血液处理设备是针对肝脏、肺、肾脏等器官的手术患者或器官功能障碍患者等利用一系列特殊人工装置将回心静脉血引流到体外，经人工方法代替肝脏、肺、肾等器官进行血液循环的气体交换、温度调节和血液净化等处理后，输回体内动脉的复杂设备***。按照目的和功能的不同，分为体外循环设备***和血液处理设备***两大类。

其中，体外血液处理主要是血液净化，包括：血液透析、血液滤过、血浆/血液置换、血液灌流等。血液净化治疗主要依靠血液净化装置连接提供动力的血泵进行，利用半透膜或吸附树脂将患者血液中多余的代谢废物、有害物质、过多的电解质进行物质交换或者排出，使患者的机体接近正常人，从而达到净化血液的目的。

在血液净化过程中，蛋白质随着净化时间增长逐渐吸附在半透膜材或吸附树脂表面，激活血小板、白细胞引起它们的积聚、凝结，进而导致凝血瀑布的发生，此过程中如生成纤维蛋白原积聚形成纤维蛋白，会进一步促进红细胞等血细胞的积聚，造成半透膜材或吸附树脂的污染，产生血栓现象。血栓的形成不仅会包覆血液中血细胞，引起血细胞数目降低，而且影响半透膜材或吸附树脂的通透性，降低透析功效，严重时堵塞半透膜材或吸附树脂表面孔结构，造成患者体外血容量损失。

影响血栓形成的因素可以分为三大类：血液净化装置及其它耗材、患者体征以及医护操作。其中血液净化装置是诱导血栓形成的关键性部件，因此科学评价血栓的形成对血液净化装置而言显得尤为重要。

目前，血液净化装置血栓形成程度的评价方法有多种，外观评分是最为直接、简单、普遍的做法。临床上，护士会对下机后的血液净化装置以及静脉壶血栓形成外观进行评分。但该方法为定性评估方法，主观因素比较多，同时该方法只能看到血液净化装置***膜丝或吸附树脂血栓形成情况，看不到内部膜丝或吸附树脂状态，并且有的血液净化装置产品壳体雾化，使内部血栓形成的可视化度降低，导致评价结果不客观。

国标《GB/T 16886-4:2022》提出凝血、血小板、血液学和补体的四项组合测试作为血栓形成试验的替代试验。但该标准的评价过程周期很长，适用产品上市前评估，不适用指导生产作业；而且试验结果受试验用血液影响比较大，因此试验数据可重复性差，适用少量血液净化装置之间的评估，不适用大批量血液净化装置之间的评估。

文献“Melchior P,

A,Zawada A M,et al.Complement activationby dialysis membranes and its association with secondary membrane formationand surface charge[J].Artificial Organs,2021,45(7):770-778.”中提出一种“评估指数”的概念。“评估指数”是指待测血液净化装置与参照血液净化装置单位时间内的变化量与变化量最小值的比值百分比，该方法是建立在模拟使用浸提的方法基础上，通过“评估指数”来间接判断血栓形成的程度。文中通过微积分的方式计算待测血液净化装置与参照血液净化装置单位时间内的血小板变化量，然后通过“评估指数”评价待测血液净化装置之间的血液相容性差异。但该方法中试验数据处理繁琐，数据之间不具有可比性，不利于处理批量血液净化装置间的差异。

再者，血液成分复杂，很难保证每次试验血液特性完全相同，因此探索一种不因血液差异性干扰测试结果的实验方法是很有必要的，这样可以用于分析各血液净化装置之间的差异性。

发明内容

有鉴于此，为解决上述技术问题，本发明提供一种量化评估血液净化装置血栓程度的方法。

本发明提供了一种量化评估血液净化装置血栓程度的方法，包括以下步骤：

S1)将待测血液净化装置与体外循环血路相连接，加入含有抗凝剂的血液进行循环净化，取样，检测经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量；

将参照血液净化装置与体外循环血路相连，加入含有抗凝剂的血液进行循环净化，取样，检测经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量；

S2)绘制经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量及经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线，得到血细胞含量-时间坐标图；

S3)根据血细胞含量-时间坐标图中经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变换关系曲线下方的面积及参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积，计算血细胞差异指数DI，根据DI判断待测血液净化装置形成血栓的程度；DI＝(N1-N2)/N2；所述N1为血细胞含量-时间坐标图中经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积；N2为血细胞含量-时间坐标图中经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积。

优选的，所述待测血液净化装置与参照血液净化装置选自血液透析器、血液透析滤过器、血液滤过器、血浆分离器、血液吸附器或血液灌流器；

所述血细胞为白细胞和/或血小板。

优选的，所述抗凝剂的加入量使血液的活化凝血时间为100～300s。

优选的，所述步骤S1)中含有抗凝剂的血液加入的体积为120～500mL。

优选的，所述待测血液净化装置与参照血液净化装置均置于恒温水浴中；所述恒温水浴的温度为36℃～37℃。

优选的，所述循环净化时血液的流速为100～300mL/min。

优选的，所述取样的时间为0～60min。

优选的，所述取样的次数为多次；相邻两次取样的时间间隔为2～10min。

优选的，所述取样的体积为0.1～1mL。

优选的，所述步骤S3)中血细胞含量-时间坐标图以网格为背景，经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变换关系曲线下方的面积及参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积以网格数代替计算。

本发明提供了一种量化评估血液净化装置血栓程度的方法，包括以下步骤：S1)将待测血液净化装置与体外循环血路相连接，加入含有抗凝剂的血液进行循环净化，取样，检测经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量；将参照血液净化装置与体外循环血路相连，加入含有抗凝剂的血液进行循环净化，取样，检测经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量；S2)绘制经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量及经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系，得到血细胞含量-时间坐标图；S3)根据血细胞含量-时间坐标图中经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变换关系曲线下方的面积及参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积，计算血细胞差异指数DI，根据DI判断待测血液净化装置形成血栓的程度；DI＝(N1-N2)/N2；所述N1为血细胞含量-时间坐标图中经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积；N2为血细胞含量-时间坐标图中经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积。与现有技术相比，本发明提供的评估方法可以消除血液批次/患者不同带来的测试误差，还可以量化血液净化装置血栓的程度，并且适用于评估大批量血液净化装置之间的血栓程度的差异，且试验测试简单，干扰因素少，为解决血栓残留问题以及新产品开发提供优化评价方案。

附图说明

图1为本发明提供的量化评估血液净化装置血栓程度的流程示意图；

图2为本发明提供的待测血液净化装置与体外循环血路连接结构示意图；

图3为本发明实施例1中得到的白细胞数目(纵坐标)-时间t(横坐标)关系图；

图4为本发明实施例2中得到的白细胞数目(纵坐标)-时间t(横坐标)关系图；

图5为本发明实施例3中得到的血小板数目(纵坐标)-时间t(横坐标)关系图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供了一种量化评估血液净化装置血栓程度的方法，包括以下步骤：S1)将待测血液净化装置与体外循环血路相连接，加入含有抗凝剂的血液进行循环净化，取样，检测经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量；将参照血液净化装置与体外循环血路相连，加入含有抗凝剂的血液进行循环净化，取样，检测经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量；S2)绘制经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量及经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线，得到血细胞含量-时间坐标图；S3)根据血细胞含量-时间坐标图中经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变换关系曲线下方的面积及参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积，计算血细胞差异指数DI，根据DI判断待测血液净化装置形成血栓的程度；DI＝(N1-N2)/N2；所述N1为血细胞含量-时间坐标图中经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积；N2为血细胞含量-时间坐标图中经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积。

本发明提供的评估方法可以消除血液批次/患者不同带来的测试误差，还可以量化血液净化装置血栓的形成，并且适用于评估大批量血液净化装置之间的血栓程度的差异，且试验测试简单，干扰因素少，为解决血栓残留问题以及新产品开发提供优化评价方案。

参见图1，图1为本发明提供的量化评估血液净化装置血栓程度的流程示意图。

其中，本发明对所有原料的来源并没有特殊的限制，为市售即可。

将待测血液净化装置与体外循环血路相连接；所述待测血液净化装置优选为血液透析器、血液透析滤过器、血液滤过器、血浆分离器、血液吸附器或血液灌流器；所述待测血液净化装置与体外循环血路相连接，形成一个通路；所述待测血液净化装置优选置于恒温水浴中，若所述的待测血液净化装置存在其他进出口，用硅胶塞进行密封；所述体外循环血路设置有取样点、储液器与泵管；其中，取样点用于取样，优选位于待测血液净化装置的血液出口端；储液器用于存储血液，优选位于待测血液净化装置的血液进口端；所述泵管安装于透析机的血泵中，依靠血泵控制体外循环血路中血液的流速；参见图2，图2为本发明提供的待测血液净化装置与体外循环血路连接结构示意图，其中1为体外循环血路，2为取样点，3为血泵，4为储液器，5为待测血液净化装置，6为恒温水槽，7为泵管。

加入含有抗凝剂的血液进行循环净化；所述血液优选为4h内的新鲜动物血液，更优选为4h内的新鲜猪血；所述抗凝剂为本领域技术人员熟知的抗凝剂即可，并无特殊的限制，本发明中优选为枸橼酸钠；所述抗凝剂的加入量优选为使血液的活化凝血时间(ACT)为100～300s，更优选为120～280s，再优选为150～250s，最优选为200s；所述血液的体积优选为120～500mL，更优选为150～400mL，再优选为150～300mL，最优选为150～200mL；所述循环净化时血液的流速优选为100～300mL/min，更优选为150～250mL/min，再优选为200mL/min；所述循环净化时待测血液净化装置优选置于恒温水浴中；所述恒温水浴的温度优选为36℃～37℃。

然后进行取样，检测经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量；所述取样的时间优选为0～60min，更优选为0～30min；所述取样的次数优选为多次；相邻两次取样的时间间隔优选为2～10min，更优选为4～8min，再优选为5min；其中取样时间为0时，优选在循环净化前取样；所述取样的体积优选为0.1～1mL，更优选为0.3～0.8mL，再优选为0.4～0.6mL，最优选为0.5mL；所述血细胞为本领域技术人员熟知的血细胞即可，并无特殊的限制本发明中优选为白细胞和/或血小板，更优选为白细胞或血小板；所述检测经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量优选通过全自动血细胞分析仪进行。

将参照血液净化装置与体外循环血路相连，加入含有抗凝剂的血液进行循环净化，取样检测经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量；在本发明中，参照血液净化装置循环净化血液与待测血液净化装置净化血液的操作并无前后顺序之分，也可同时进行，并没有特殊的限制。所述参照血液净化装置优选为血液透析器、血液透析滤过器、血液滤过器、血浆分离器、血液吸附器或血液灌流器；为便于量化比较，所述参照血液净化装置与待测血液净化装置的种类相同，优选的，两者的规格也相同；所述参照血液净化装置的两侧分别与体外循环血路相连接，形成一个通路；所述参照血液净化装置优选置于恒温水浴中，若所述的参照血液净化装置存在其他进出口，用硅胶塞进行密封；所述体外循环血路设置有取样点、储液器与泵管；其中，取样点用于取样，优选位于参照血液净化装置的血液出口端；储液器用于存储血液，优选位于参照血液净化装置的血液进口端；所述泵管安装于透析机的血泵中，依靠血泵控制体外循环血路中血液的流速；在本发明中此步骤中连接后的示意图与图2相同，只是将待测血液净化装置替换为参照血液净化装置即可。加入含有抗凝剂的血液进行循环净化；所述血液优选为4h内的新鲜动物血液，更优选为4h内的新鲜猪血；所述抗凝剂为本领域技术人员熟知的抗凝剂即可，并无特殊的限制，本发明中优选为枸橼酸钠；所述抗凝剂的加入量优选为使血液的活化凝血时间(ACT)为100～300s，更优选为120～280s，再优选为150～250s，最优选为200s；所述血液的体积优选为120～500mL，更优选为150～400mL，再优选为150～300mL，最优选为200～300mL；所述循环净化时血液的流速优选为100～300mL/min，更优选为150～250mL/min，再优选为200mL/min；所述循环净化时待测血液净化装置优选置于恒温水浴中；所述恒温水浴的温度优选为36℃～37℃。然后进行取样，检测经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量；所述取样的时间优选为0～60min，更优选为0～30min；所述取样的次数优选为多次；相邻两次取样的时间间隔优选为2～10min，更优选为4～8min，再优选为5min；其中取样时间为0时，优选在循环净化前取样；所述取样的体积优选为0.1～1mL，更优选为0.3～0.8mL，再优选为0.4～0.6mL，最优选为0.5mL；所述检测经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量优选通过全自动血细胞分析仪进行。

为提高评估结果的准确性，参照血液净化装置中加入含有抗凝剂的血液进行循环净化，取样及检测经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量的操作均与待测血液净化装置的循环净化、取样及检测待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量的步骤操作均优选相同。

绘制经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量及经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线，得到血细胞含量-时间坐标图；在本发明中，血细胞含量坐标图中以血细胞含量为纵坐标，数据为经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量或经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量，时间为横坐标，数据为取样时间。

根据血细胞含量-时间坐标图中经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变换关系曲线下方的面积及参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积，计算血细胞差异指数DI，根据DI判断待测血液净化装置形成血栓的程度；DI＝(N1-N2)/N2；所述N1为血细胞含量-时间坐标图中经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积；N2为血细胞含量-时间坐标图中经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积；在本发明中，所述血细胞含量-时间坐标图优选以网格为背景，更优选以正方网格为背景；经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变换关系曲线下方的面积及参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积以网格数代替计算；具体为：数出曲线下方正方形个数，曲线与正方形交界处面积小于半个方格舍弃，面积大于半个方格按照一个计算；计算血液净化装置“血细胞差异指数＝(经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方覆盖的网格数-经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方覆盖的网格数)/经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方覆盖的网格数”来量化评估血液净化装置血栓形成程度。血细胞差异指数是负值说明待测血液净化装置形成血栓程度高于参照血液净化装置，负值绝对值越大，说明待测血液净化装置形成血栓程度越高；相反，血细胞差异指数是正值说明待测血液净化装置形成血栓程度低于参照血液净化装置，正值绝对值越大，说明待测血液净化装置形成血栓程度越低。即血细胞差异指数DI＞0说明待测血液净化装置形成血栓程度低于参照血液净化装置，且正值绝对值越大，说明待测血液净化装置形成血栓程度越低；血细胞差异指数DI＜0说明待测血液净化装置形成血栓程度高于参照血液净化装置，且负值绝对值越大，说明待测血液净化装置形成血栓程度越高；血细胞差异指数DI＝0说明待测血液净化装置形成血栓程度相比于参照血液净化装置无差异。

本发明通过全自动血细胞分析仪测定血液接触血液净化装置后血细胞数目的变化并通过网格计数法来量化评估血液净化装置血栓的形成，有消除实验用血液批次差异，测试简单，量化分析，干扰因素少，适用于大批量血液净化装置之间的评估等优点，为解决血栓残留问题以及新产品开发提供优化评价方案。

为了进一步说明本发明，以下结合实施例对本发明提供一种量化评估血液净化装置血栓程度的方法进行详细描述。

以下实施例中所用的试剂均为市售。

实施例1

待测透析器选取Hi18，参照透析器选取FX CorDiax80。

采取新鲜兔血500mL，血液需保证4h内使用；向血液快速加入3.8％的枸橼酸钠，调整活化凝血时间ACT＝200s；引血后，如图2所示将管路闭环循环，将透析器置于37℃的恒温水浴中，调整循环装置中血液体积为150mL。调节泵速至200mL/min，分别在时间点0、5、10、15、20、25和30分钟从取样口取样0.5mL，取样后通过全自动血细胞分析仪(希森美康，XN-1000)测试白细胞含量(0分钟上机前取样)。

以白细胞数目为纵坐标，数据为全自动血细胞分析仪测试出的透析器出口端血液中白细胞含量，时间为横坐标，数据为取样时间，然后通过绘图软件建立“白细胞数目(纵坐标)-时间t(横坐标)”关系图，如图3所示。

将48×60的正方网格覆盖于坐标区间内上，“白细胞数目-时间t”曲线下方面积大小以正方形数目代替，数出曲线下方正方形个数，曲线与正方形交界处面积小于半个方格舍弃，面积大于半个方格按照一个计算；计算白细胞差异指数＝(经待测血液净化装置净化后血液中白细胞含量随时间变化关系曲线下方覆盖的网格数-经参照血液净化装置净化后血液中白细胞含量随时间变化关系曲线下方覆盖的网格数)/经参照血液净化装置净化后血液中白细胞含量随时间变化关系曲线下方覆盖的网格数。

测试结果白细胞差异指数DI＝(388-452)/452＝-0.142，说明Hi18比FXCorDiax80血栓形成程度更高。

对比例1

根据GBT16886.4-2022《医疗器械生物学评价第4部分：与血液相互作用试验选择》的指导原则本试验将待测品和参照品分别与血液直接接触，通过测定白细胞数量的变化和观察白细胞的形态变化，以评价待测品对血液中的白细胞是否存在影响。

待测品(Hi18)制备:按0.2g/mL的比例，取待测品1.2g，平均加入3支塑料管中，作为待测品组，备用。

参照品(FXCorDiax80)制备：参照品的制备与待测品制备方法一致，平行操作，然后将制备好的参照品平均加入3支塑料管中，作为参照品组。

空白对照：取3支同批号的塑料管,作为空白对照组。

方法：

新鲜抗凝兔血：根据试验用血量进行静脉采血，按9:1的比例加入3.8％枸橼酸钠溶液进行抗凝，混匀，制备成新鲜抗凝兔血。

向待测品管、参照品管和空白对照管分别加入2.0mL新鲜抗凝兔血，使材料全部被血液浸没，混匀后放入隔水培养箱的旋转培养器上，在(37±1)℃条件下，30min动态接触60min，60min后取出待测品管参照品管和空白对照管，混匀，分离待测品管、参照品管和空白对照管中的血液到新的塑料管，最后用全自动血细胞分析仪检测待测品管、参照品管和空白对照管分离后管中血液的白细胞数量，得到结果如表1所示。

表1对比例1白细胞计数结果

实施例2

相比于实施例1，实施例2将待测透析器改为HF18。得到“白细胞数目(纵坐标)-时间t(横坐标)”关系图，如图4所示。

测试结果：白细胞差异指数DI＝(449-421)/421＝0.067，说明HF18比FXCorDiax80血栓形成程度更低。

对比例2

相比于对比例1，对比例2待测品改为HF18。得到结果如表2所示。

表2对比例2白细胞计数结果

实施例3

待测灌流器选取YTS200，参照灌流器选取HA230。

采取新鲜猪血500mL，血液需保证4h内使用；向血液快速加入3.8％的枸橼酸钠，调整活化凝血时间ACT＝200s；引血后，如图1所示将管路闭环循环，将透析器置于37℃的恒温水浴中，调整循环装置中血液体积为150mL。调节泵速至200mL/min，分别在时间点0、5、10、15、20、25和30分钟从取样口取样0.5mL，取样后通过全自动血细胞分析仪(希森美康，XN-1000)测试血小板含量，其中0分钟上机前取样。

以血小板数目为纵坐标，数据为全自动血细胞分析仪测试出的透析器出口端血液中血小板含量，时间为横坐标，数据为取样时间，然后通过绘图软件建立“血小板数目(纵坐标)-时间t(横坐标)”关系图，如图5所示。

将48×60的正方网格覆盖于坐标区间内上，“血小板数目-时间t”曲线下方面积大小以正方形数目代替，数出曲线下方正方形个数，曲线与正方形交界处面积小于半个方格舍弃，面积大于半个方格按照一个计算；计算血小板差异指数＝(经待测血液净化装置净化后血液中血小板含量随时间变化关系曲线下方覆盖的网格数-经参照血液净化装置净化后血液中血小板含量随时间变化关系曲线下方覆盖的网格数)/经参照血液净化装置净化后血液中血小板含量随时间变化关系曲线下方覆盖的网格数。

测试结果：血小板差异指数DI＝(425-501)/501＝-0.152，说明YTS200比HA230血液相容性差。

对比例3

根据GBT16886.4-2022《医疗器械生物学评价第4部分：与血液相互作用试验选择》的指导原则本试验将待测品和参照品分别与血液直接接触，通过测定血小板数量的变化和观察血小板的形态变化，以评价待测品对血液中的血小板是否存在影响。

待测品(YTS200)制备：按0.2g/mL的比例，取待测品1.2g，平均加入3支塑料管中，作为待测品组，备用。

参照品(HA230)制备：参照品的制备与待测品制备方法一致，平行操作，然后将制备好的参照品平均加入3支塑料管中，作为参照品组。

空白对照：取3支同批号的塑料管，作为空白对照组。

方法：

新鲜抗凝猪血：根据试验用血量进行静脉采血，按9:1的比例加入3.8％枸橼酸钠溶液进行抗凝，混匀，制备成新鲜抗凝猪血。

向待测品管、参照品管和空白对照管分别加入2.0mL新鲜抗凝猪血，使材料全部被血液浸没，混匀后放入隔水培养箱的旋转培养器上，在(37±1)℃条件下，30min动态接触60min，60min后取出待测品管参照品管和空白对照管，混匀，分离待测品管、参照品管和空白对照管中的血液到新的塑料管，最后用全自动血细胞分析仪检测待测品管、参照品管和空白对照管分离后管中血液的血小板数量，得到结果如表3所示。

表3血小板计数结果

由实施例1～3及对比例1～3的数据可知看出，本申请提供的方法不仅与现有标准方法结果相符，而且更直观的得到血液净化装置形成血栓的程度，测试方法简单，干扰因素较少。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种量化评估血液净化装置血栓程度的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1)将待测血液净化装置与体外循环血路相连接，加入含有抗凝剂的血液进行循环净化，取样，检测经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量；

将参照血液净化装置与体外循环血路相连，加入含有抗凝剂的血液进行循环净化，取样，检测经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量；

S2)绘制经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量及经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线，得到血细胞含量-时间坐标图；

S3)根据血细胞含量-时间坐标图中经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变换关系曲线下方的面积及参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积，计算血细胞差异指数DI，根据DI判断待测血液净化装置形成血栓的程度；DI＝(N1-N2)/N2；所述N1为血细胞含量-时间坐标图中经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积；N2为血细胞含量-时间坐标图中经参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测血液净化装置与参照血液净化装置选自血液透析器、血液透析滤过器、血液滤过器、血浆分离器、血液吸附器或血液灌流器；

所述血细胞为白细胞和/或血小板。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗凝剂的加入量使血液的活化凝血时间为100～300s。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S1)中含有抗凝剂的血液加入的体积为120～500mL。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测血液净化装置与参照血液净化装置均置于恒温水浴中；所述恒温水浴的温度为36℃～37℃。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述循环净化时血液的流速为100～300mL/min。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述取样的时间为0～60min。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述取样的次数为多次；相邻两次取样的时间间隔为2～10min。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述取样的体积为0.1～1mL。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S3)中血细胞含量-时间坐标图以网格为背景，经待测血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变换关系曲线下方的面积及参照血液净化装置净化后血液中血细胞含量随时间变化关系曲线下方的面积以网格数代替计算。

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