CN116158535B - 一种桑叶蛋白-桑葚花青素复合乳液及其制备方法 - Google Patents
一种桑叶蛋白-桑葚花青素复合乳液及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116158535B CN116158535B CN202211558711.1A CN202211558711A CN116158535B CN 116158535 B CN116158535 B CN 116158535B CN 202211558711 A CN202211558711 A CN 202211558711A CN 116158535 B CN116158535 B CN 116158535B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mulberry leaf
- anthocyanin
- mulberry
- leaf protein
- protein
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 240000000249 Morus alba Species 0.000 title claims abstract description 119
- 235000008708 Morus alba Nutrition 0.000 title claims abstract description 119
- 239000004410 anthocyanin Substances 0.000 title claims abstract description 57
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 title claims abstract description 50
- 235000010208 anthocyanin Nutrition 0.000 title claims abstract description 45
- 229930002877 anthocyanin Natural products 0.000 title claims abstract description 45
- 150000004636 anthocyanins Chemical class 0.000 title claims abstract description 45
- 239000002131 composite material Substances 0.000 title claims abstract description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 title description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 37
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 37
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 37
- 101710138460 Leaf protein Proteins 0.000 claims abstract description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 95
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 33
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 30
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 27
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 19
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 17
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 claims description 17
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 16
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 12
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 11
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims description 11
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 10
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 10
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 9
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 7
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 7
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 claims description 7
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 claims description 7
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 claims description 5
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 5
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 5
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 5
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 claims description 5
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 5
- 238000004537 pulping Methods 0.000 claims description 5
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 5
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 5
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 claims description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 2
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 claims description 2
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 claims description 2
- 239000012527 feed solution Substances 0.000 claims 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 10
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 9
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 6
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 6
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 4
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 3
- OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N phenol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1=CC=CC=C1 OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 description 3
- 238000010025 steaming Methods 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- VEVZSMAEJFVWIL-UHFFFAOYSA-O cyanidin cation Chemical compound [O+]=1C2=CC(O)=CC(O)=C2C=C(O)C=1C1=CC=C(O)C(O)=C1 VEVZSMAEJFVWIL-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- GCPYCNBGGPHOBD-UHFFFAOYSA-N Delphinidin Natural products OC1=Cc2c(O)cc(O)cc2OC1=C3C=C(O)C(=O)C(=C3)O GCPYCNBGGPHOBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 240000001549 Ipomoea eriocarpa Species 0.000 description 1
- 235000005146 Ipomoea eriocarpa Nutrition 0.000 description 1
- YKRGDOXKVOZESV-WRJNSLSBSA-N Paeoniflorin Chemical compound C([C@]12[C@H]3O[C@]4(O)C[C@](O3)([C@]1(C[C@@H]42)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C)OC(=O)C1=CC=CC=C1 YKRGDOXKVOZESV-WRJNSLSBSA-N 0.000 description 1
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 235000007336 cyanidin Nutrition 0.000 description 1
- 235000007242 delphinidin Nutrition 0.000 description 1
- JKHRCGUTYDNCLE-UHFFFAOYSA-O delphinidin Chemical compound [O+]=1C2=CC(O)=CC(O)=C2C=C(O)C=1C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 JKHRCGUTYDNCLE-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 235000018927 edible plant Nutrition 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- YKRGDOXKVOZESV-UHFFFAOYSA-N paeoniflorin Natural products O1C(C)(C2(CC34)OC5C(C(O)C(O)C(CO)O5)O)CC3(O)OC1C24COC(=O)C1=CC=CC=C1 YKRGDOXKVOZESV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000000518 rheometry Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000000733 zeta-potential measurement Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/185—Vegetable proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/006—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from vegetable materials
- A23J1/007—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from vegetable materials from leafy vegetables, e.g. alfalfa, clover, grass
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/30—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols, e.g. xylitol; containing starch hydrolysates, e.g. dextrin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
- C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
- C07D311/58—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4
- C07D311/60—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2
- C07D311/62—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2 with oxygen atoms directly attached in position 3, e.g. anthocyanidins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B61/00—Dyes of natural origin prepared from natural sources, e.g. vegetable sources
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B67/00—Influencing the physical, e.g. the dyeing or printing properties of dyestuffs without chemical reactions, e.g. by treating with solvents grinding or grinding assistants, coating of pigments or dyes; Process features in the making of dyestuff preparations; Dyestuff preparations of a special physical nature, e.g. tablets, films
- C09B67/0096—Purification; Precipitation; Filtration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Botany (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种桑叶蛋白‑桑葚花青素复合乳液及其制备方法，涉及食品加工技术领域。具体包括以下步骤：(1)制备桑叶蛋白；(2)制备桑叶多糖；(3)制备桑葚花青素提取物；(4)均质制备乳液。本发明利用属于同一植物体系来源的桑叶蛋白、桑叶多糖和桑葚花青素制备乳液，提高了整个乳液体系的稳定性。
Description
技术领域
本发明涉及食品加工技术领域，更具体的说是涉及一种桑叶蛋白-桑葚花青素复合乳液及其制备方法。
背景技术
花青素是一种小分子活性物质，主要包括矢车菊素、飞燕草素、芍药花色素、牵牛花色素等。花青素具有抗氧化、抑菌、抗肿瘤、抗炎等多种功能。但是，花青素在加工和储存过程中对环境条件(如温度、pH、光、水、氧气、金属离子等)的稳定性较低，使其在食品中的应用面临着巨大的挑战。
乳液是食品体系中最复杂也是最重要的体系之一，蛋白质作为乳化剂时常被利用，已有研究表明花青素具有较强的蛋白亲和性，在大豆分离蛋白中添加花青素可以有效提高复合乳液氧化稳定性。花青素和蛋白质结合形成复合物，不仅能提高花青素的稳定性，而且能增强蛋白质的抗氧化能力及其他功能特性。但是通过简单的混合方式很难制备稳定的复合体系。多糖作为乳化稳定剂也常被用来改善体系流变性，多糖对体系的结构及稳定性同样具有重要作用。
桑叶是一种药食两用资源，桑叶中的蛋白质含量高，部分品种桑叶蛋白质含量可以占到干基重量的20％-30％。桑叶蛋白质的氨基酸种类齐全，必需氨基酸含量较高，是一种极具开发价值的可食用植物蛋白原料。近几年对于桑叶蛋白的研究主要是集中在其提取工艺上，关于桑叶蛋白在食品体系中的应用尚未见报道。桑叶蛋白具有较好的起泡性、乳化性和乳化稳定性，具备成为食品级乳化剂的潜力。但是，在提取工艺中的热处理、酶处理等过程，易引起桑叶蛋白理化性质改变，使其开发利用受到一定程度的限制。
桑叶多糖是从桑叶中提取得到的一种活性物质，具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗衰老、增强免疫等多种药理作用，在保健品、医药等行业有较高的开发利用价值。目前关于桑叶多糖在稳定食品体系中的应用也鲜见报道。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种桑叶蛋白-花青素复合乳液的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)先将桑叶进行真空冷冻干燥，粉碎，过40目筛，得到桑叶粉；向桑叶粉中加入0.1mol/L的NaOH溶液，超声提取，第一次离心，收集上清液；调节上清液pH为4.8，待蛋白质产生絮状沉淀后，4℃静置，第二次离心，收集沉淀，上清液备用；用95％乙醇洗涤沉淀，用PBS复溶后在蒸馏水中透析1d，真空冷冻干燥，即得桑叶蛋白；
(2)收集步骤(1)中第二次离心的上清液，调节pH至中性，真空浓缩，加入无水乙醇，4℃静置，使沉淀析出，离心收集沉淀；用蒸馏水溶解沉淀，缓慢滴加到经处理的DEAE-52纤维素层析柱上，用NaCL溶液进行梯度洗脱，收集多糖含量最高的组分，装载到葡聚糖凝胶SephadexG-100柱上，用蒸馏水洗脱，根据峰值收集合并洗脱液，真空冷冻干燥，即得桑叶多糖；
(3)将新鲜桑葚用高速匀浆机打浆，加入酸化乙醇，超声提取，共重复提取2次，合并提取液；将提取液旋蒸除去乙醇，经布氏漏斗抽滤后，上样至装填有AB-8大孔树脂的层析柱，吸附完成后，用蒸馏水和乙酸乙酯洗脱除去杂质，然后用60％酸性乙醇洗脱花青素，收集洗脱液，再次减压浓缩除去有机溶剂，真空冷冻干燥，得到桑葚花青素提取物；
(4)取桑叶蛋白溶解于磷酸盐缓冲液中，热处理后磁力搅拌2h，随后调节pH至7.0，并加入桑葚花青素，室温下磁力搅拌1h，再加入大豆油和桑叶多糖，搅拌1h，最后均质制备乳液。
进一步的，所述步骤(1)中，桑叶与NaOH溶液料液比为g：mL＝1:30-50；超声功率300W，提取温度40℃，提取时间20-60min。
进一步的，所述步骤(1)中，桑叶与NaOH溶液料液比优选为g：mL＝1:40；超声提取时间优选为45min。
采用上述进一步技术方案的有益效果在于，桑叶蛋白提取率高，蛋白质结构稳定。
进一步的，所述步骤(2)中，真空浓缩的体积为初始体积的1/10-20。
进一步的，所述步骤(2)中，梯度洗脱中NaCL溶液的梯度浓度为0mol/L、0.1mol/L、0.3mol/L、0.5mol/L；
所述多糖含量最高的组分为以0.3mol/L NaCL溶液洗脱的洗脱液。
采用上述进一步技术方案的有益效果在于，获得纯度较高且分子量较小的桑叶多糖。
进一步的，所述步骤(3)中，酸化乙醇为含有0.1％柠檬酸的乙醇溶液；
桑葚浆与酸化乙醇料液比为g：mL＝1:2-5，优选为1:3；超声功率300W，提取温度40℃，提取时间20-60min，优选为30min。
进一步的，所述步骤(3)中，桑葚浆与酸化乙醇料液比优选为g：mL＝1:3；超声提取时间优选为30min。
采用上述进一步技术方案的有益效果在于，充分提取桑葚花青素。
进一步的，所述步骤(3)中，大孔树脂洗脱所用的蒸馏水体积为层析柱柱体积的1倍，乙酸乙酯体积为层析柱柱体积的1倍，60％酸化乙醇体积为层析柱柱体积的5倍。
采用上述进一步技术方案的有益效果在于，获得高纯度的桑葚花青素。
进一步的，所述步骤(4)中，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.02mol/L；桑叶蛋白的质量浓度为30mg/mL，桑叶蛋白溶液与大豆油的体积比为5:1，桑叶蛋白与花青素的质量比为40:1，桑叶蛋白与桑叶多糖的质量比为5:1；所述的热处理为在80℃条件下水浴10min，均质速度为12000r/min，时间为3min。
采用上述进一步技术方案的有益效果在于，按适度配比添加桑叶多糖，提高桑叶蛋白-花青素复合乳液的稳定性。
本发明还提供上述制备方法得到的桑叶蛋白-花青素复合乳液。
经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
1、本发明利用属于同一植物体系来源的桑叶蛋白、桑叶多糖和桑葚花青素制备乳液，提高了整个乳液体系的稳定性。
2、本发明联合提取桑叶蛋白和桑叶多糖，提高了桑树资源的综合利用率。
3、本发明制备的乳液能够提高花青素的热稳定性。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种桑叶蛋白-桑葚花青素复合乳液的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)先将桑叶进行真空冷冻干燥，粉碎，过40目筛，得到桑叶粉。称取桑叶粉20g，加入NaOH溶液(0.1mol/L)800mL，超声45min，超声功率300W，温度40℃，第一次离心，收集上清液，调节上清液pH为4.8，待蛋白质产生絮状沉淀后，4℃静置，第二次离心，收集沉淀用95％乙醇洗涤沉淀，用PBS复溶后在蒸馏水中透析1d，真空冷冻干燥，即得桑叶蛋白。
(2)收集步骤(1)中第二次离心的上清液，调节pH至中性，真空浓缩至100mL，加入无水乙醇，4℃静置，使沉淀析出。离心收集沉淀，用蒸馏水溶解，缓慢滴加到经处理的DEAE-52纤维素层析柱上，用梯度(0、0.1、0.3、0.5mol/L)NaCL溶液进行洗脱，流速为5mL/min，5mL收集一管，采用苯酚-硫酸法测定多糖含量，根据峰值收集以0.3mol/L NaCL溶液洗脱的多糖含量高的洗脱液，装载到葡聚糖凝胶SephadexG-100柱上，以5mL/min流速洗脱，收集洗脱液，每管5mL，用蒸馏水洗脱，根据峰值收集合并洗脱液，真空冷冻干燥，即得桑叶多糖。
(3)新鲜桑葚用高速匀浆机打浆，取桑葚浆200g，加入酸化乙醇600mL，共重复超声提取2次，超声功率300W，提取温度40℃，每次提取30min。合并提取液，旋蒸除去乙醇，经布氏漏斗抽滤后，上样至装填有AB-8大孔树脂的层析柱(直径为2.6cm、高度为60cm)，吸附完成后，依次用300mL和300mL乙酸乙酯洗脱除去杂质，然后用1.5L酸性乙醇(60％)洗脱花青素，收集洗脱液，再次减压浓缩除去有机溶剂，真空冷冻干燥，得到桑葚花青素提取物。
(4)取桑叶蛋白1.5g溶解于50mL磷酸盐缓冲液(0.02mol/L)中，在80℃条件下水浴10min，磁力搅拌2h，加入37.5mg桑葚花青素，室温下磁力搅拌1h，再加入大豆油10mL和桑叶多糖0.3g，搅拌1h，然后12000r/min均质3min，得到乳液。
实施例2
一种桑叶蛋白-桑葚花青素复合乳液的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)先将桑叶进行真空冷冻干燥，粉碎，过40目筛，得到桑叶粉。称取桑叶粉20g，加入NaOH溶液(0.1mol/L)600mL，超声20min，超声功率300W，温度40℃，第一次离心，收集上清液，调节上清液pH为4.8，待蛋白质产生絮状沉淀后，4℃静置，第二次离心，收集沉淀用95％乙醇洗涤沉淀，用PBS复溶后在蒸馏水中透析1d，真空冷冻干燥，即得桑叶蛋白。
(2)收集步骤(1)中第二次离心的上清液，调节pH至中性，真空浓缩至100mL，加入无水乙醇，4℃静置，使沉淀析出。离心收集沉淀，用蒸馏水溶解，缓慢滴加到经处理的DEAE-52纤维素层析柱上，用梯度(0、0.1、0.3、0.5mol/L)NaCL溶液进行洗脱，流速为5mL/min，5mL收集一管，采用苯酚-硫酸法测定多糖含量，根据峰值收集以0.3mol/L NaCL溶液洗脱的多糖含量高的洗脱液，装载到葡聚糖凝胶SephadexG-100柱上，以5mL/min流速洗脱，收集洗脱液，每管5mL，用蒸馏水洗脱，根据峰值收集合并洗脱液，真空冷冻干燥，即得桑叶多糖。
(3)新鲜桑葚用高速匀浆机打浆，取桑葚浆200g，加入酸化乙醇400mL，共重复超声提取2次，超声功率300W，提取温度40℃，每次提取20min。合并提取液，旋蒸除去乙醇，经布氏漏斗抽滤后，上样至装填有AB-8大孔树脂的层析柱(直径为2.6cm、高度为60cm)，吸附完成后，依次用300mL和300mL乙酸乙酯洗脱除去杂质，然后用1.5L酸性乙醇(60％)洗脱花青素，收集洗脱液，再次减压浓缩除去有机溶剂，真空冷冻干燥，得到桑葚花青素提取物。
(4)取桑叶蛋白1.5g溶解于50mL磷酸盐缓冲液(0.02mol/L)中，在80℃条件下水浴10min，磁力搅拌2h，加入37.5mg桑葚花青素，室温下磁力搅拌1h，再加入大豆油10mL和桑叶多糖0.3g，搅拌1h，然后12000r/min均质3min，得到乳液。
实施例3
一种桑叶蛋白-桑葚花青素复合乳液的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)先将桑叶进行真空冷冻干燥，粉碎，过40目筛，得到桑叶粉。称取桑叶粉20g，加入NaOH溶液(0.1mol/L)1000mL，超声60min，超声功率300W，温度40℃，第一次离心，收集上清液，调节上清液pH为4.8，待蛋白质产生絮状沉淀后，4℃静置，第二次离心，收集沉淀用95％乙醇洗涤沉淀，用PBS复溶后在蒸馏水中透析1d，真空冷冻干燥，即得桑叶蛋白。
(2)收集步骤(1)中第二次离心的上清液，调节pH至中性，真空浓缩至100mL，加入无水乙醇，4℃静置，使沉淀析出。离心收集沉淀，用蒸馏水溶解，缓慢滴加到经处理的DEAE-52纤维素层析柱上，用梯度(0、0.1、0.3、0.5mol/L)NaCL溶液进行洗脱，流速为5mL/min，5mL收集一管，采用苯酚-硫酸法测定多糖含量，根据峰值收集以0.3mol/L NaCL溶液洗脱的多糖含量高的洗脱液，装载到葡聚糖凝胶SephadexG-100柱上，以5mL/min流速洗脱，收集洗脱液，每管5mL，用蒸馏水洗脱，根据峰值收集合并洗脱液，真空冷冻干燥，即得桑叶多糖。
(3)新鲜桑葚用高速匀浆机打浆，取桑葚浆200g，加入酸化乙醇1000mL，共重复超声提取2次，超声功率300W，提取温度40℃，每次提取60min。合并提取液，旋蒸除去乙醇，经布氏漏斗抽滤后，上样至装填有AB-8大孔树脂的层析柱(直径为2.6cm、高度为60cm)，吸附完成后，依次用300mL和300mL乙酸乙酯洗脱除去杂质，然后用1.5L酸性乙醇(60％)洗脱花青素，收集洗脱液，再次减压浓缩除去有机溶剂，真空冷冻干燥，得到桑葚花青素提取物。
(4)取桑叶蛋白1.5g溶解于50mL磷酸盐缓冲液(0.02mol/L)中，在80℃条件下水浴10min，磁力搅拌2h，加入37.5mg桑葚花青素，室温下磁力搅拌1h，再加入大豆油10mL和桑叶多糖0.3g，搅拌1h，然后12000r/min均质3min，得到乳液。
对比例1
步骤(2)不制备桑叶多糖，步骤(4)不添加桑叶多糖，其它步骤同实施例1。
对比例2
将步骤(4)桑叶蛋白替换为市售的大豆蛋白，其它步骤同实施例1。
对比例3
步骤(2)不制备桑叶多糖，步骤(4)不添加桑叶多糖，将步骤(4)桑叶蛋白替换为市售的大豆蛋白，其它步骤同实施例1。
性能测试
测定实施例1和对比例1-3乳液的稳定性指标和桑葚花青素热稳定性，具体步骤如下：
(1)ζ-电位测定：用磷酸缓冲液(10mmol/L，pH＝7)将样品稀释100倍。采用Zeta电位仪对乳状液ζ-电位进行测定，测量温度为25℃，平衡时间为2min，每个样品测定3次，取平均值。
(2)乳化活性及乳化稳定性测定：用SDS溶液(0.1％)将乳液样品稀释100倍，用紫外分光光度计测量初始状态的吸光值和放置10min后的吸光值，在500nm处比色，按公式计算乳化活性指数(m2/g)和乳化稳定性指数(min)。
(3)花青素热稳定性：将添加0.05mol/L的有机酸的桑果汁乳液(桑葚原汁含量50％，乳液样品含量50％)分别置于80℃恒温水浴7h，每隔1h测定最大吸光度，绘制-ln(ct/c0)-时间曲线，计算花青素热降解半衰期t1/2。
测定结果如表1所示：
表1实施例1和对比例1-3乳液的稳定性指标和桑葚花青素热稳定性
| 项目 | 实施例1 | 对比例1 | 对比例2 | 对比例3 |
| ζ-电位 | -36.67 | -31.10 | -34.00 | -30.33 |
| 乳化活性指数(m2/g) | 74.14 | 63.43 | 74.26 | 65.52 |
| 乳化稳定性指数(min) | 91.25 | 80.12 | 84.15 | 75.25 |
| 热降解半衰期t1/2(h) | 3.44 | 2.92 | 3.28 | 2.87 |
由上表可知，实施例1制备的乳液乳化稳定性和花青素热稳定性最好，乳化活性指数和对比例2相近。即本申请将桑叶蛋白、桑叶多糖和桑葚花青素制备乳液，有效提高了整个乳液体系的稳定性，同时有效提高了桑葚花青素热稳定性。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
Claims (10)
1.一种桑叶蛋白-花青素复合乳液的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
（1）先将桑叶进行真空冷冻干燥，粉碎，过40目筛，得到桑叶粉；向桑叶粉中加入0.1mol/L的NaOH溶液，超声提取，第一次离心，收集上清液；调节上清液pH为4.8，待蛋白质产生絮状沉淀后，4℃静置，第二次离心，收集沉淀，上清液备用；用95％乙醇洗涤沉淀，用PBS复溶后在蒸馏水中透析1d，真空冷冻干燥，即得桑叶蛋白；
（2）收集步骤（1）中第二次离心的上清液，调节pH至中性，真空浓缩，加入无水乙醇，4℃静置，使沉淀析出，离心收集沉淀；用蒸馏水溶解沉淀，缓慢滴加到经处理的DEAE-52纤维素层析柱上，用NaCL溶液进行梯度洗脱，收集多糖含量最高的组分，装载到葡聚糖凝胶SephadexG-100柱上，用蒸馏水洗脱，根据峰值收集合并洗脱液，真空冷冻干燥，即得桑叶多糖；
（3）将新鲜桑葚用高速匀浆机打浆，加入酸化乙醇，超声提取，共重复提取2次，合并提取液；将提取液旋蒸除去乙醇，经布氏漏斗抽滤后，上样至装填有AB-8大孔树脂的层析柱，吸附完成后，用蒸馏水和乙酸乙酯洗脱除去杂质，然后用60％酸性乙醇洗脱花青素，收集洗脱液，再次减压浓缩除去有机溶剂，真空冷冻干燥，得到桑葚花青素提取物；
（4）取桑叶蛋白溶解于磷酸盐缓冲液中，热处理后磁力搅拌2h，随后调节pH至7.0，并加入桑葚花青素提取物，室温下磁力搅拌1h，再加入大豆油和桑叶多糖，搅拌1h，最后均质制备乳液。
2.根据权利要求1所述一种桑叶蛋白-花青素复合乳液的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，桑叶与NaOH溶液料液比为g：mL=1:30-50；超声功率300W，提取温度40℃，提取时间20-60min。
3.根据权利要求2所述一种桑叶蛋白-花青素复合乳液的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，桑叶与NaOH溶液料液比为g：mL=1:40；超声提取时间为45min。
4.根据权利要求1所述一种桑叶蛋白-花青素复合乳液的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中，真空浓缩的体积为初始体积的1/10-20。
5.根据权利要求4所述一种桑叶蛋白-花青素复合乳液的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中，梯度洗脱中NaCL溶液的梯度浓度为0mol/L、0.1mol/L、0.3mol/L、0.5mol/L；
所述多糖含量最高的组分为以0.3mol/L NaCL溶液洗脱的洗脱液。
6.根据权利要求1所述一种桑叶蛋白-花青素复合乳液的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中，酸化乙醇为含有0.1%柠檬酸的乙醇溶液；
桑葚浆与酸化乙醇料液比为g：mL=1:2-5；超声功率300W，提取温度40℃，提取时间20-60min。
7.根据权利要求6所述一种桑叶蛋白-花青素复合乳液的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中，桑葚浆与酸化乙醇料液比为g：mL=1:3；超声提取时间为30min。
8.根据权利要求7所述一种桑叶蛋白-花青素复合乳液的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中，大孔树脂洗脱所用的蒸馏水体积为层析柱柱体积的1倍，乙酸乙酯体积为层析柱柱体积的1倍，60％酸化乙醇体积为层析柱柱体积的5倍。
9.根据权利要求1所述一种桑叶蛋白-花青素复合乳液的制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.02 mol/L；桑叶蛋白的质量浓度为30mg/mL，桑叶蛋白溶液与大豆油的体积比为5:1，桑叶蛋白与花青素的质量比为40:1，桑叶蛋白与桑叶多糖的质量比为5:1；所述的热处理为在80℃条件下水浴10min，均质速度为12000r/min，时间为3min。
10.权利要求1所述一种桑叶蛋白-花青素复合乳液的制备方法制备的桑叶蛋白-花青素复合乳液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211558711.1A CN116158535B (zh) | 2022-12-06 | 2022-12-06 | 一种桑叶蛋白-桑葚花青素复合乳液及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211558711.1A CN116158535B (zh) | 2022-12-06 | 2022-12-06 | 一种桑叶蛋白-桑葚花青素复合乳液及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116158535A CN116158535A (zh) | 2023-05-26 |
| CN116158535B true CN116158535B (zh) | 2024-03-08 |
Family
ID=86415327
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211558711.1A Active CN116158535B (zh) | 2022-12-06 | 2022-12-06 | 一种桑叶蛋白-桑葚花青素复合乳液及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116158535B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101317379B1 (ko) * | 2013-02-05 | 2013-10-11 | 강원대학교산학협력단 | 안정성이 증진된 천연색소 미세캡슐의 제조 방법 |
| CN113662187A (zh) * | 2021-09-02 | 2021-11-19 | 哈尔滨工业大学 | 一种原花青素双重Pickering乳液的制备方法 |
-
2022
- 2022-12-06 CN CN202211558711.1A patent/CN116158535B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101317379B1 (ko) * | 2013-02-05 | 2013-10-11 | 강원대학교산학협력단 | 안정성이 증진된 천연색소 미세캡슐의 제조 방법 |
| CN113662187A (zh) * | 2021-09-02 | 2021-11-19 | 哈尔滨工业大学 | 一种原花青素双重Pickering乳液的制备方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 大豆分离蛋白-花青素复合物的制备及其蛋白结构与功能性质分析;江连洲;陈思;李杨;吴长玲;王中江;张巧智;齐宝坤;隋晓楠;陈复生;许振国;;食品科学;20180523(10);26-33 * |
| 桑叶多糖的提取及其生物活性的研究;辛文;中国优秀硕士学位论文全文数据库工程科技Ⅰ辑;20150215(第2期);B016-105 * |
| 竹叶多糖提取、分离及检测技术研究;王伟;中国优秀博硕士学位论文全文数据库 (硕士)工程科技Ⅰ辑;20061231(第12期);B016-18 * |
| 食用桑叶粗蛋白粉的制备及蛋白质营养与加工特性评价;宁军权;李芳红;梁嘉俊;余刚;张敏娟;苏超;焦锋;;蚕业科学;20180615(3);435-441 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116158535A (zh) | 2023-05-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10835552B2 (en) | Method for preparing linseed polysaccharide having antiviral activity and immunological activity, and use of the linseed polysaccharide | |
| CN112694541B (zh) | 一种黄蜀葵花多糖的温和脱色方法 | |
| CN108047343B (zh) | 伊贝母总多糖的制备方法及其应用 | |
| CN109097413B (zh) | 一种基于乌饭树树叶制备不同色调靛蓝色素的方法 | |
| CN110128562B (zh) | 一种抗肿瘤补骨脂多糖及其提取分离方法和在制备抗肿瘤药物方面的应用 | |
| CN112029006B (zh) | 一种银耳多糖及其制备方法和应用 | |
| CN113278305A (zh) | 一种从百香果果皮中同时提取天然色素和果胶的方法 | |
| CN113024685A (zh) | 一种低分子量竹荪菌托多糖及其制备方法与应用 | |
| CN110916198A (zh) | 一种利用黄秋葵发酵酒酒渣同时制备果胶多糖和黏性糖蛋白的方法 | |
| CN112010989B (zh) | 一种具有抗氧化活性的竹荪菌托多糖的制备方法 | |
| CN110652013A (zh) | 一种高效制备具有缓解ⅱ型糖尿病的柑橘果胶的方法 | |
| CN107119096B (zh) | 一种滑菇活性肽的制备方法及其应用 | |
| CN109160954B (zh) | 一种香瓜茄酸性多糖及其提纯方法和用途 | |
| CN116158535B (zh) | 一种桑叶蛋白-桑葚花青素复合乳液及其制备方法 | |
| CN115594775B (zh) | 一种银耳多糖的制备方法及应用 | |
| CN111777691A (zh) | 辛夷多糖的提取方法 | |
| CN116925163A (zh) | 一种低频超声获取玫瑰苷的方法 | |
| CN110922499A (zh) | 一种富硒化绣球菌多糖及其制备方法和应用 | |
| CN111035622B (zh) | 明日叶查尔酮微胶囊及其制备方法 | |
| CN112794925B (zh) | 一种阳春砂多糖及其制备方法和应用 | |
| LU502372B1 (en) | Method for separating and purifying polysaccharide from Ziziphus jujuba cv. Muzao with anti-oxidation effect | |
| CN109796538A (zh) | 提高条斑紫菜多糖生物活性的方法 | |
| CN116970665B (zh) | 一种金花菌发酵金耳多糖的提取方法及其应用 | |
| CN116655820B (zh) | 一种藤茶酸性多糖AGP-3a及其提取分离方法和在制备抗炎化妆品中的用途 | |
| CN117942291B (zh) | 一种艾叶发酵滤液及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |