CN116059303B - 一种复合骨碎补提取物及其制备工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及植物提取物领域，具体公开了一种复合骨碎补提取物及其制备工艺。复合骨碎补提取物提取工艺，包括以下步骤：步骤1），将骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花投入水中浸泡1‑2h，投入混合菌液，在35‑36℃下浸泡提取120‑125小时；步骤2），加热至沸腾，冷凝回流，保持沸腾6‑8h；步骤3），过滤，得发酵滤液；步骤4），加热浓缩至浸膏；步骤5），加去离子水溶解，过滤，加热浓缩，得发酵浓缩液，即为复合骨碎补提取物；骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花均为晒制的中药材。本发明具有提高治疗牙周炎的效果的优点。

Description

一种复合骨碎补提取物及其制备工艺
技术领域
本发明涉及植物提取物领域，尤其是涉及一种复合骨碎补提取物及其制备工艺。
背景技术
骨碎补是水龙骨科植物，其根状茎可用作药用，具有散瘀止痛、接骨续筋、治牙疼、腰疼、久泻等功效。有研究发现，骨碎补对治疗牙周炎有一定的功效，内服骨碎补能缓解牙周炎，消炎止痛。
将骨碎补中的有效物质提取后制成各种剂型进行服用，能更为有效地吸收骨碎补中的营养成分，且能省去煎服的麻烦工艺，较为方便，但是，虽然骨碎补提取物具有治疗牙周炎的功效，但效果较为一般，且研究发现，即便加大剂量，治疗效果也无明显提升，难以快速缓解牙周炎给患者带来的不适，因此，还有改善空间。
发明内容
为了提高治疗牙周炎的效果，本申请提供一种复合骨碎补提取物及其制备工艺。
第一方面，本申请提供一种复合骨碎补提取物提取工艺，采用如下的技术方案：
一种复合骨碎补提取物提取工艺，包括以下步骤：
步骤1），将骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花投入水中浸泡1-2h，投入混合菌液，在35-36℃下浸泡提取120-125小时；
步骤2），加热至沸腾，冷凝回流，保持沸腾6-8h；
步骤3），过滤，得发酵滤液；
步骤4），加热浓缩至浸膏；
步骤5），加去离子水溶解，过滤，加热浓缩，得发酵浓缩液，即为复合骨碎补提取物；
所述骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花均为晒制的中药材。
通过采用上述技术方案，通过骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花复配，使得骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花协同配合，制得的复合提取物在服用后，能快速缓解疼痛，并能更快地消肿，对牙周炎的针对性更强，治疗效果更为明显。
骨碎补主要含有柚皮甙、甲基丁香酚、新北美圣草甙、原儿茶酸、骨碎双氢黄酮等成分。
半夏主要含有氨基酸类、β-谷甾醇、半夏蛋白、生物碱等成分。
九节菖蒲主要含有脂肪酸、棕榈酸、琥珀酸、5-羟基乙酰丙酸、十六烷酸、9，12-十八碳二烯酸、β-谷甾醇，白头翁素等成分。
豆蔻主要含有α-乙酸松油酯、桉油精、柠檬烯、α-葡聚糖等成分。
大飞扬草主要含有黄酮苷、酚类、三萜类，茎含卅烷醇、蒲公英赛醇、无羁萜、β-香树脂醇、β-谷甾醇、蒲公英赛酮、杨梅苷等成分。
扶桑花主要含有矢车菊素-二葡萄糖苷, 矢车菊素槐糖葡萄糖苷,槲皮素二葡萄糖苷及扶桑甾醇等成分。
其中，骨碎补中的柚皮甙是已知对牙周炎有一定疗效的成分之一，经过实验发现，当骨碎补中的柚皮甙与半夏、九节菖蒲、大飞扬草中的β-谷甾醇、豆蔻中的柠檬烯、大飞扬草中的黄酮苷、扶桑花中的矢车菊素槐糖葡萄糖苷相互配合时，治疗牙周炎的功效有显著的提升，尤其是缓解疼痛的功效十分显著，治疗效果较佳。
每日摄入0.3-0.4g复合骨碎补提取物，能快速止痛，服用一个月后疗效十分显著，牙龈指数（GI）分级、菌斑指数（PLI）明显下降，起到快速治疗之功效，提高患者的生活质量。
优选的，所述步骤1）中，骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花的质量比例为8：0.5：0.4：0.6：0.3：0.2。
通过采用上述技术方案，通过骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花以特定比例配合后，治疗牙周炎的效果更佳。
优选的，所述步骤5）中，过滤时，采用超滤膜进行超滤。
通过采用上述技术方案，通过采用超滤膜超滤，能有效去除杂质，使得复合提取物的药效更佳。
优选的，所述步骤5）中，加热浓缩至发酵浓缩液的质量为步骤1）中骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花的投入总质量的18-22%。
通过采用上述技术方案，通过控制发酵浓缩液的质量，减少溶剂占比，制剂方便运输，而且制成液体制剂，方便分装及服用，同时方便运输。
优选的，所述步骤1）中，混合菌液的制备方法如下：
步骤01），配置液体培养基；
步骤02），在液体培养基中接种黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉，培养至OD值≥2，即得混合菌液。
通过采用上述技术方案，通过采用黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉的复合菌株对骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花进行发酵提取，使得各药材的细胞壁被较好的分解，细胞中的营养物质易于被提取，从而使得提取物中含有用于治疗牙周炎的有效成分的含量更高，治疗牙周炎的效果更好，而且能分解部分糖类物质，产生对人体有营养的分泌物，服用提取物后能更好地提高人体免疫力，一定程度有助于人体恢复，从而使得牙周炎治疗效果更佳。
而且，黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉复配能起到相互促进生长的效果，使得各菌活性更高，从而能更快速的分解纤维素，使得提取的效率更高，具有更高的经济价值。
通过将黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉共同在液体培养基中培养，由于相互促进生长的效果，使得培养速度更快，经济价值更高。
优选的，所述步骤01）中，配置液体培养基的步骤具体如下：
步骤01-1），取去离子水、胡萝卜、苦瓜、甘蔗、菊花、茶叶，在破壁机中破碎，得破壁液；
步骤01-2），取去离子水，常温下，加入淀粉，搅拌溶解，加热至淀粉糊化，冷却至室温，得增稠液；
步骤01-3），将破壁液和增稠液在室温下混合，得液体培养基。
优选的，去离子水、胡萝卜、苦瓜、甘蔗、菊花、茶叶的质量比例为：98：1：0.6：0.2：0.1：0.1。
通过采用上述技术方案，通过特殊的培养基培养，能较好地促进各菌种的生长繁殖，快速培养出足够的菌种，并且能对菌种活性进行筛选，能保留高活性菌株并淘汰低活性菌株，使得混合菌液同时提取骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花中的有效成分的效果更佳，经过发酵提取得到的营养成分对治疗牙周炎具有较佳的疗效。
优选的，所述步骤02）中，接种黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉时，黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉的接种量的质量比例为1：3：4：2。
通过采用上述技术方案，通过具体选择黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉的接种比例，协同生长的效果更佳，并且能一定程度上控制最终获得的各菌种的浓度，在同时发酵提取骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花时效果更佳，提取效率高，提取物对牙周炎的疗效更好。
优选的，所述步骤02）中，接种黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉后，恒温34-36℃培养。
通过采用上述技术方案，通过在34-36℃下培养，最大程度上激发菌种的活性，繁殖效率更高，缩短工艺时间，提高经济效益。
优选的，所述步骤02）中，接种黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉后，将液体培养基放置在磁场强度为600-700MT的磁场中进行培养。
通过采用上述技术方案，通过特殊的磁场强度与特殊的液体培养基配合，能更好地筛选保留活性高的菌株，使得混合菌液发酵提取的效果更佳，提取物质量更好。
第二方面，本申请提供一种复合骨碎补提取物，采用如下的技术方案：
一种复合骨碎补提取物，由上述的复合骨碎补提取物提取工艺制得。
通过采用上述技术方案，提取物对质量牙周炎有极好的疗效，快速止痛，质量效果较佳，快速改善患者痛苦。
综上所述，本申请具有以下有益效果：
1、本申请中通过骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花复配，使得骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花协同配合，制得的复合提取物在服用后，能快速缓解疼痛，并能更快地消肿，对牙周炎的针对性更强，治疗效果更为明显。
2、本申请中通过采用黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉的复合菌株对骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花进行发酵提取，使得各药材的细胞壁被较好的分解，细胞中的营养物质易于被提取，从而使得提取物中含有用于治疗牙周炎的有效成分的含量更高，治疗牙周炎的效果更好，而且能分解部分糖类物质，产生对人体有营养的分泌物，服用提取物后能更好地提高人体免疫力，一定程度有助于人体恢复，从而使得牙周炎治疗效果更佳。
3、本申请中通过特殊的培养基培养，能较好地促进各菌种的生长繁殖，快速培养出足够的菌种，并且能对菌种活性进行筛选，能保留高活性菌株并淘汰低活性菌株，使得混合菌液同时提取骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花中的有效成分的效果更佳，经过发酵提取得到的营养成分对治疗牙周炎具有较佳的疗效。
4、本申请中通过特殊的磁场强度与特殊的液体培养基配合，能更好地筛选保留活性高的菌株，使得混合菌液发酵提取的效果更佳，提取物质量更好。
具体实施方式
以下结合实施例对本申请作进一步详细说明。
实施例1
一种复合骨碎补提取物提取工艺，包括以下步骤：
步骤1），称量8kg骨碎补、0.5kg半夏、0.4kg九节菖蒲、0.6kg豆蔻、0.3kg大飞扬草、0.2kg扶桑花与50kg常温水混合，在水中浸泡1h，投入1kg混合菌液，在35℃下浸泡提取125小时，得提取液。
步骤2），将提取液加热至沸腾，冷凝回流，保持沸腾6h。
步骤3），通过200目滤布过滤，得发酵滤液。
步骤4），将发酵滤液在0.01MPa下加热浓缩至浸膏。
步骤5），加入10kg去离子水溶解浸膏，通过200目滤布过滤，在0.01MPa下加热浓缩得1.8kg发酵浓缩液，即为复合骨碎补提取物。
其中，骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花均为市售的经晒制的中药材。
步骤1）中，混合菌液的制备方法如下：
步骤01），配置液体培养基：
步骤01-1），取0.4kg去离子水、0.01kg胡萝卜、0.006kg苦瓜、0.002kg甘蔗、0.001kg菊花、0.001kg茶叶，在破壁机中破碎，得破壁液。
步骤01-2），取0.5kg去离子水，常温下，加入0.08kg淀粉，搅拌溶解，加热至淀粉糊化，冷却至室温，得增稠液。
步骤01-3），将破壁液和增稠液在室温下混合，得液体培养基。
步骤02），在液体培养基中接种1mg黑曲霉、3mg费氏丙酸菌、4mg乳酸乳杆菌、2mg白地霉，恒温34℃培养至OD值为2，即得混合菌液。
实施例2
一种复合骨碎补提取物提取工艺，包括以下步骤：
步骤1），称量8kg骨碎补、0.5kg半夏、0.4kg九节菖蒲、0.6kg豆蔻、0.3kg大飞扬草、0.2kg扶桑花与50kg常温水混合，在水中浸泡1h，投入1kg混合菌液，在36℃下浸泡提取120小时，得提取液。
步骤2），将提取液加热至沸腾，冷凝回流，保持沸腾8h。
步骤3），通过200目滤布过滤，得发酵滤液。
步骤4），将发酵滤液在0.01MPa下加热浓缩至浸膏。
步骤5），加入10kg去离子水溶解浸膏，通过200目滤布过滤，在0.01MPa下加热浓缩得2.2kg发酵浓缩液，即为复合骨碎补提取物。
其中，骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花均为市售的经晒制的中药材。
步骤1）中，混合菌液的制备方法如下：
步骤01），配置液体培养基：
步骤01-1），取0.4kg去离子水、0.01kg胡萝卜、0.006kg苦瓜、0.002kg甘蔗、0.001kg菊花、0.001kg茶叶，在破壁机中破碎，得破壁液。
步骤01-2），取0.5kg去离子水，常温下，加入0.08kg淀粉，搅拌溶解，加热至淀粉糊化，冷却至室温，得增稠液。
步骤01-3），将破壁液和增稠液在室温下混合，得液体培养基。
步骤02），在液体培养基中接种1mg黑曲霉、3mg费氏丙酸菌、4mg乳酸乳杆菌、2mg白地霉，恒温36℃培养至OD值为2，即得混合菌液。
实施例3
一种复合骨碎补提取物提取工艺，包括以下步骤：
步骤1），称量8kg骨碎补、0.6kg半夏、0.3kg九节菖蒲、0.3kg豆蔻、0.5kg大飞扬草、0.3kg扶桑花与50kg常温水混合，在水中浸泡1h，投入1kg混合菌液，在35℃下浸泡提取125小时，得提取液。
步骤2），将提取液加热至沸腾，冷凝回流，保持沸腾6h。
步骤3），通过200目滤布过滤，得发酵滤液。
步骤4），将发酵滤液在0.01MPa下加热浓缩至浸膏。
步骤5），加入10kg去离子水溶解浸膏，通过200目滤布过滤，在0.01MPa下加热浓缩得1.8kg发酵浓缩液，即为复合骨碎补提取物。
其中，骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花均为市售的经晒制的中药材。
步骤1）中，混合菌液的制备方法如下：
步骤01），配置液体培养基：
步骤01-1），取0.4kg去离子水、0.01kg胡萝卜、0.006kg苦瓜、0.002kg甘蔗、0.001kg菊花、0.001kg茶叶，在破壁机中破碎，得破壁液。
步骤01-2），取0.5kg去离子水，常温下，加入0.08kg淀粉，搅拌溶解，加热至淀粉糊化，冷却至室温，得增稠液。
步骤01-3），将破壁液和增稠液在室温下混合，得液体培养基。
步骤02），在液体培养基中接种1mg黑曲霉、3mg费氏丙酸菌、4mg乳酸乳杆菌、2mg白地霉，恒温34℃培养至OD值为2，即得混合菌液。
实施例4
一种复合骨碎补提取物提取工艺，包括以下步骤：
步骤1），称量8kg骨碎补、0.5kg半夏、0.4kg九节菖蒲、0.6kg豆蔻、0.3kg大飞扬草、0.2kg扶桑花与50kg常温水混合，在水中浸泡1h，投入1kg混合菌液，在35℃下浸泡提取125小时，得提取液。
步骤2），将提取液加热至沸腾，冷凝回流，保持沸腾6h。
步骤3），通过200目滤布过滤，得发酵滤液。
步骤4），将发酵滤液在0.01MPa下加热浓缩至浸膏。
步骤5），加入10kg去离子水溶解浸膏，通过200目滤布过滤，然后通过超滤膜超滤，超滤膜的截留分子量为500D，操作压力1bar，在0.01MPa下加热浓缩得1.8kg发酵浓缩液，即为复合骨碎补提取物。
其中，骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花均为市售的经晒制的中药材。
步骤1）中，混合菌液的制备方法如下：
步骤01），配置液体培养基：
步骤01-1），取0.4kg去离子水、0.01kg胡萝卜、0.006kg苦瓜、0.002kg甘蔗、0.001kg菊花、0.001kg茶叶，在破壁机中破碎，得破壁液。
步骤01-2），取0.5kg去离子水，常温下，加入0.08kg淀粉，搅拌溶解，加热至淀粉糊化，冷却至室温，得增稠液。
步骤01-3），将破壁液和增稠液在室温下混合，得液体培养基。
步骤02），在液体培养基中接种1mg黑曲霉、3mg费氏丙酸菌、4mg乳酸乳杆菌、2mg白地霉，恒温34℃培养至OD值为2，即得混合菌液。
实施例5
一种复合骨碎补提取物提取工艺，包括以下步骤：
步骤1），称量8kg骨碎补、0.5kg半夏、0.4kg九节菖蒲、0.6kg豆蔻、0.3kg大飞扬草、0.2kg扶桑花与50kg常温水混合，在水中浸泡1h，投入1kg混合菌液，在35℃下浸泡提取125小时，得提取液。
步骤2），将提取液加热至沸腾，冷凝回流，保持沸腾6h。
步骤3），通过200目滤布过滤，得发酵滤液。
步骤4），将发酵滤液在0.01MPa下加热浓缩至浸膏。
步骤5），加入10kg去离子水溶解浸膏，通过200目滤布过滤，在0.01MPa下加热浓缩得1.8kg发酵浓缩液，即为复合骨碎补提取物。
其中，骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花均为市售的经晒制的中药材。
步骤1）中，混合菌液的制备方法如下：
步骤01），配置液体培养基：
步骤01-1），取0.4kg去离子水、0.01kg胡萝卜、0.006kg苦瓜、0.002kg甘蔗、0.001kg菊花、0.001kg茶叶，在破壁机中破碎，得破壁液。
步骤01-2），取0.5kg去离子水，常温下，加入0.08kg淀粉，搅拌溶解，加热至淀粉糊化，冷却至室温，得增稠液。
步骤01-3），将破壁液和增稠液在室温下混合，得液体培养基。
步骤02），在液体培养基中接种1mg黑曲霉、3mg费氏丙酸菌、4mg乳酸乳杆菌、2mg白地霉，将液体培养基放置在600MT的磁场中，恒温34℃培养至OD值为2，即得混合菌液。
实施例6
一种复合骨碎补提取物提取工艺，包括以下步骤：
步骤1），称量8kg骨碎补、0.5kg半夏、0.4kg九节菖蒲、0.6kg豆蔻、0.3kg大飞扬草、0.2kg扶桑花与50kg常温水混合，在水中浸泡1h，投入1kg混合菌液，在35℃下浸泡提取125小时，得提取液。
步骤2），将提取液加热至沸腾，冷凝回流，保持沸腾6h。
步骤3），通过200目滤布过滤，得发酵滤液。
步骤4），将发酵滤液在0.01MPa下加热浓缩至浸膏。
步骤5），加入10kg去离子水溶解浸膏，通过200目滤布过滤，在0.01MPa下加热浓缩得1.8kg发酵浓缩液，即为复合骨碎补提取物。
其中，骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花均为市售的经晒制的中药材。
步骤1）中，混合菌液的制备方法如下：
步骤01），配置液体培养基：
步骤01-1），取0.4kg去离子水、0.01kg胡萝卜、0.006kg苦瓜、0.002kg甘蔗、0.001kg菊花、0.001kg茶叶，在破壁机中破碎，得破壁液。
步骤01-2），取0.5kg去离子水，常温下，加入0.08kg淀粉，搅拌溶解，加热至淀粉糊化，冷却至室温，得增稠液。
步骤01-3），将破壁液和增稠液在室温下混合，得液体培养基。
步骤02），在液体培养基中接种1mg黑曲霉、3mg费氏丙酸菌、4mg乳酸乳杆菌、2mg白地霉，将液体培养基放置在700MT的磁场中，恒温34℃培养至OD值为2，即得混合菌液。
实施例7
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
配置液体培养基时，采用白萝卜等量替换胡萝卜。
实施例8
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
配置液体培养基时，采用黄瓜等量替换苦瓜。
实施例9
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
配置液体培养基时，采用洋葱等量替换甘蔗。
实施例10
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
配置液体培养基时，采用金银花等量替换菊花。
实施例11
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
配置液体培养基时，采用陈皮等量替换茶叶。
实施例12
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
在液体培养基中接种时，采用绿色木霉等量替换黑曲霉。
实施例13
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
在液体培养基中接种时，采用地衣芽孢杆菌替换费氏丙酸菌。
实施例14
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
在液体培养基中接种时，采用枯草芽孢杆菌替换乳酸乳杆菌。
实施例15
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
在液体培养基中接种时，采用蜡叶芽枝霉等量替换白地霉。
对比例1
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
步骤1）中，采用天南星等量替换半夏。
对比例2
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
步骤1）中，采用石菖蒲等量替换九节菖蒲。
对比例3
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
步骤1）中，采用苍术等量替换豆蔻。
对比例4
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
步骤1）中，采用马齿苋等量替换大飞扬草。
对比例5
一种复合骨碎补提取物提取工艺，与实施例1相比，区别仅在于：
步骤1）中，采用龙葵等量替换扶桑花。
实验1
采用各实施例及对比例的复合骨碎补提取物与去离子水混合配置成口服液，一瓶口服液10ml，每瓶口服液中含复合骨碎补提取物0.4g。
召集若干牙周炎患者，每日在早饭和晚饭后各服用一瓶口服液。
疗程为一个月，在服用前先测试牙龈指数（GI）、菌斑指数（PLI），记为初始GI、初始PLI，服用口服液一个月后，再次测试，记为一个月GI、一个月PLI。
牙龈指数GI计分标准：
0=牙龈健康；
1=牙龈轻度炎症：牙龈的颜色有轻度改变并轻度水肿，探诊不出血；
2=牙龈中等炎症：牙龈色红，水肿光亮，探诊出血；
3=牙龈严重炎症：牙龈明显红肿或有溃疡，并有自动出血倾向。
菌斑指数PLI计分标准：
0=龈缘区无菌斑；
1=龈缘区的牙面有薄的菌斑，但视诊不可见，若用探针尖刮牙面可见牙菌斑；
2=在龈缘或邻面可见中等量菌斑；
3=龈沟内或龈缘区及邻面有大量软垢。
在疗程中每日探查牙痛状况，记录牙痛完全消失时的服药天数。
每10人为一组，所有检测数值取平均值。
所有患者的初始GI均为3。
所有患者的初始PLI均为3。
实验1的具体检测数据详见表1。
表1
Figure SMS_1
根据表1中实施例1与对比例1-5的数据对比可得，当骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花复配共同提取时，复合骨碎补提取物治疗牙周炎的效果较佳，一个月的疗程，能使牙龈恢复至轻度炎症，牙菌斑显著减少，疗效显著，而且3天左右即可抑制牙痛，快速改善患者的舒适度。
根据表1中实施例1与实施例5-6的数据对比可得，通过加入磁场培养菌株，对菌株产生了一定的筛选作用，使得菌株活性更高，发酵提取的效果更好，得到的复合骨碎补提取物在抑制牙痛的时效性上有进一步提升。
根据表1中实施例1实施例7-11的数据对比可得，当采用离子水、胡萝卜、苦瓜、甘蔗、菊花、茶叶制备成培养基对菌株进行培养时，培养得到的菌株活性较高，发酵提取的效果更佳，并且培养基中也会产生特殊的营养成分，添加菌株时培养基的营养成分也一同加入，制得的复合骨碎补提取物在抑制牙痛的时效性上有进一步提升，更快抑制牙痛，改善患者舒适度。
根据表1中实施例1实施例12-15的数据对比可得，当采用黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉配合发酵提取时，对骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花复配体系的提取效果较佳，制得的复合骨碎补提取物对牙周炎疗效显著，而明显缩短止痛时间，更快第改善患者的舒适度，更有利于治疗。
本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (8)

1.一种复合骨碎补提取物提取工艺，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1），将骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花投入水中浸泡1-2h，投入混合菌液，在35-36℃下浸泡提取120-125小时；
步骤2），加热至沸腾，冷凝回流，保持沸腾6-8h；
步骤3），过滤，得发酵滤液；
步骤4），加热浓缩至浸膏；
步骤5），加去离子水溶解，过滤，加热浓缩，得发酵浓缩液，即为复合骨碎补提取物；
所述骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花均为晒制的中药材；
所述步骤1）中，混合菌液的制备方法如下：
步骤01），配置液体培养基；
步骤02），在液体培养基中接种黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉，培养至OD值≥2，即得混合菌液；
所述步骤01）中，配置液体培养基的步骤具体如下：
步骤01-1），取去离子水、胡萝卜、苦瓜、甘蔗、菊花、茶叶，在破壁机中破碎，得破壁液；
步骤01-2），取去离子水，常温下，加入淀粉，搅拌溶解，加热至淀粉糊化，冷却至室温，得增稠液；
步骤01-3），将破壁液和增稠液在室温下混合，得液体培养基。
2.根据权利要求1所述的一种复合骨碎补提取物提取工艺，其特征在于：所述步骤1）中，骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花的质量比例为8：0.5：0.4：0.6：0.3：0.2。
3.根据权利要求1所述的一种复合骨碎补提取物提取工艺，其特征在于：所述步骤5）中，过滤时，采用超滤膜进行超滤。
4.根据权利要求1所述的一种复合骨碎补提取物提取工艺，其特征在于：所述步骤5）中，加热浓缩至发酵浓缩液的质量为步骤1）中骨碎补、半夏、九节菖蒲、豆蔻、大飞扬草、扶桑花的投入总质量的18-22%。
5.根据权利要求1-4任一所述的一种复合骨碎补提取物提取工艺，其特征在于：所述步骤02）中，接种黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉时，黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉的接种量的质量比例为1：3：4：2。
6.根据权利要求5所述的一种复合骨碎补提取物提取工艺，其特征在于：所述步骤02）中，接种黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉后，恒温34-36℃培养。
7.根据权利要求6所述的一种复合骨碎补提取物提取工艺，其特征在于：所述步骤02）中，接种黑曲霉、费氏丙酸菌、乳酸乳杆菌、白地霉后，将液体培养基放置在磁场强度为600-700MT的磁场中进行培养。
8.一种复合骨碎补提取物，其特征在于：由权利要求1-7任一所述的复合骨碎补提取物提取工艺制得。
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