CN115960104A - 靶向蛋白酶降解(ted)平台 - Google Patents

靶向蛋白酶降解(ted)平台 Download PDF

Info

Publication number
CN115960104A
CN115960104A CN202111176342.5A CN202111176342A CN115960104A CN 115960104 A CN115960104 A CN 115960104A CN 202111176342 A CN202111176342 A CN 202111176342A CN 115960104 A CN115960104 A CN 115960104A
Authority
CN
China
Prior art keywords
group
substituted
unsubstituted
compound
alkyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202111176342.5A
Other languages
English (en)
Inventor
曹小冬
王晓磊
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiaxing Youbo Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Jiaxing Youbo Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiaxing Youbo Biotechnology Co ltd filed Critical Jiaxing Youbo Biotechnology Co ltd
Priority to CN202111176342.5A priority Critical patent/CN115960104A/zh
Priority to PCT/CN2022/124206 priority patent/WO2023056981A1/zh
Publication of CN115960104A publication Critical patent/CN115960104A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems

Abstract

本发明涉及靶向蛋白酶降解(TED)平台，具体地，本发明公开了一种式I所示的靶标分子‑连接体‑E3连接酶配体的偶联物，RT‑L1‑RE3(式I)，其中，所述RT为靶标分子的一价基团；所述RE3为E3连接酶配体的一价基团；所述L1为连接A和B的连接头；且L1如下式II所示：‑W1‑L2‑W2‑(II)。

Description

靶向蛋白酶降解(TED)平台
技术领域
本发明属于生物医药，具体地，涉及一种靶向蛋白酶降解(TED)平台。
背景技术
现代分子生物学从3个基本层次上调控蛋白的表达水平：首先，在DNA水平，通过基因敲除，从而使目标蛋白的DNA失活；其次，在mRNA水平，通过小分子RNA，与目标蛋白的mRNA结合，从而抑制mRNA的翻译及表达；再次，在蛋白水平，通过对翻译后靶蛋白的修饰，例如甲基化、磷酸化、糖基化等，从而调整靶蛋白的量及活性。
就药物研发的总体发展来看，小分子和大分子两种药物形式都有各自的优势与不足。如小分子药物的发展一直面临如何维持体内药物浓度以及耐药性等关键挑战。有些靶点部位的形状不利于小分子的药物设计而成为“不可成药”的靶点。针对这些靶点目前还未找到有效的调控方式。单抗虽相对于小分子具有高亲和力和高选择性的优势，易于开发成高效、高选择性的药物，但其最大的弊端在于无法透过细胞膜，因此无法作用于胞内靶点。抗体药物偶联体(ADC)利用具有内吞性的抗体提供靶向并作为载体将超级毒素药物送达靶向部位。ADC类药物开发遇到的瓶颈是治疗窗口不够宽，除了抗体本身引起的毒副作用外，超级毒素会因偶联的非均一性而在到达靶位前脱落，引起严重毒副作用。此外，泛素-蛋白酶体***正常生理功能负责清理细胞中变性、变异或者有害的蛋白。
综上所述，本领域迫切需要开发能够更高效、且可重复利用的降解靶蛋白从而治疗相关疾病的化合物。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能够更高效、且可重复利用的降解靶蛋白从而治疗相关疾病的化合物。
在本发明的第一方面，提供了一种如式I所示的偶联物或其药学上可接受的盐，
RT-L1-RE3      (I)
其中，
(a)所述RE3为E3连接酶配体部分；
(b)所述RT为靶标分子部分；
(c)所述L1为连接RE3和RT部分的连接头，且L1如式II所示；
-W1-L2-W2-      (II)
其中，
W1和W2各自独立地为-(W)s-；
W各自独立地选自下组：无(键)、-C(Rb)2-、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、-SO2-、-SO-、-PO3-、 -C(Rb)＝C(Rb)-、-C≡C-、NR、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的5至10元杂芳基；
s＝0、1、2、3、或4；
L2如式III所示，
-(ML)o-      (III)
其中，
ML各自独立地为M、MT或MN；
其中，
o为5～50的整数；
M各自独立地为选自下组的二价基团：-C(Rb)2-、、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、-SO2-、-SO-、 -PO3-、-C(Rb)＝C(Rb)-、-C≡C-、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的5至10元杂芳基、氨基酸残基；
MN各自独立地为选自下组的二价基团：-N(R')-、-N(含N(R')环原子的4至10元杂环烷基)-、含 N(R')环原子的4至10元杂环烷基、被至少一个-N(Rb)R'(较佳地，-NHR')所取代的-C(Rb)2-、C3-8环烷基、4至10元杂环烷基、C6-10芳基或5至10元杂芳基；
MT各自独立地为选自下组的二价基团：-N(R")-、-N(含N(R")环原子的4至10元杂环烷基)-、含 N(R")环原子的4至10元杂环烷基、被至少一个-N(Rb)R"(较佳地，-NHR")所取代的-C(Rb)2-、C3-8环烷基、4至10元杂环烷基、C6-10芳基或5至10元杂芳基；
R为R'或R"；
R'各自独立地选自下组：H、C1-6烷基、OH、SH、-COO-C1-6烷基、-OC(O)-C1-6烷基、氨基保护基团；
R"为-W3-LT1-WP1-(RP)q1；
下标q1＞0(较佳地，q1＝1)；
WP1为无、-S-S-或
Figure BDA0003295775120000021
其中，*代表与LT1连接的部分；较佳地，WP1为-S-S-或
Figure BDA0003295775120000022
RP为-W4-RP1；W4为无或-(W")s1-WP2-(W")s2-；其中，下标s1和s2各自独立地为0、1、2、3或4， WP2为无、NH、-C(Rb)(NRa)-(如-CH(-NH2)-)、-N(R"')-或-C(Rb)(NH(R"'))-；
R"'为-W5-LT2-W6-LT3-RP2；
LT1为-(M')t1-WY-(M')t2-；
LT2为-(M')t3-；
LT3为-(M')t4-；
下标t1、t2、t3和t4各自独立地为0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10(较佳地，t1、t2、t3和t4各自独立地为0、1、2或3)；
M'各自独立选自下组：-C(Rb)2-、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、-SO2-、-SO-、-PO3-、取代或未取代的C1-10亚烷基、-(CH2CH2O)1-10-、氨基酸残基、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的 4至10元杂环烷基、取代或未取代的C6-10芳基、和取代或未取代的5至10元杂芳基；并且任选地1或 2个M'为WX；
WX为亲水性二价连接部分；
WY为无或在细胞表面或细胞质内可裂解的二价连接部分；
W3为-(W')s3-；其中，下标s3＝0、1或2；
W5为-(W')s4-；其中，下标s4＝0、1或2；
W6为
Figure BDA0003295775120000023
或-(W")s6-；其中，下标s6＝0、1、2、3或4；
W'各自独立地为选自下组的二价基团：-C(Rb)2-、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、-SO2-、-SO-、-PO3-、氨基酸残基、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基、取代或未取代的C6-10 芳基、取代或未取代的5至10元杂芳基；
W"各自独立地为选自下组的二价基团：-C(Rb)2-、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、-SO2-、-SO-、-PO3-、氨基酸残基、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基、取代或未取代的C6-10 芳基、和取代或未取代的5至10元杂芳基；
RP1和RP2各自独立地为相同或不同的多肽元件或者靶标分子T；优选地，RP1和RP2各自独立地为不同的多肽元件或者靶标分子T；
Ra各自独立地选自下组：H、OH、SH、取代或未取代的C1-6烷基、氨基保护基团、含N(Rc)环原子的4至10元杂环烷基；
Rb各自独立地选自下组：H、卤素、OH、SH、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的C2-6烯基、取代或未取代的C2-6炔基、取代或未取代的C1-6烷氧基、取代或未取代的C1-6烷基酰基(-C(O)-C1-6烷基)、羧基、-COO-C1-6烷基、-OC(O)-C1-6烷基；或者，位于相同碳上的2个Rb以及与它们相连的碳共同构成取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基；
Rc各自独立地选自下组：H、OH、SH、取代或未取代的C1-6烷基、氨基保护基团；
除非特别说明，所述的取代是指基团中一个或多个(如1、2、或3个)氢被选自下组的取代基所取代：卤素(较佳地，F、Cl、Br或I)、氰基(CN)、氧代(＝O)、硫代(＝S)、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、 C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6烷基酰基(C1-6烷基-C(O)-)、-COO-C1-6烷基、-OC(O)-C1-6烷基、 NH2、NH(C1-6烷基)、N(C1-6烷基)2。
在另一优选例中，当WP1为无或
Figure BDA0003295775120000031
时，WY为在细胞表面或细胞质内可裂解的二价连接部分。
在另一优选例中，细胞表面或细胞质内可裂解的二价连接部分是指能够在细胞表面或细胞质的酸性环境裂解或者被GSH酶特异性切割的二价连接部分。
在另一优选例中，所述细胞表面或细胞质内可裂解的二价连接部分选自下组：
Figure BDA0003295775120000032
在另一优选例中，t1+t2≤4；更佳地，t1+t2＝3或4。
在另一优选例中，WP2为无、-C(Rb)(NRa)-(如-CH(-NH2)-)或-CH(NH(R"'))-。
在另一优选例中，W4为无、-NH-CH(COOH)-CH2-、-NH-C(O)-CH(NH2)-CH2-、或-NH-C(O)-CH(NH(R"'))-CH2-。
在另一优选例中，所述亲水性二价连接部分是指主链上或侧链存在一个或多个选自下组的基团的二价连接部分：-(CH2CH2O)-、-SO3H、-PO3H2、-COOH。
在另一优选例中，所述亲水性二价连接部分或WX选自下组：
Figure BDA0003295775120000041
其中，n5为0-30的整数(较佳地，n5＝0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)。
在另一优选例中，W3为无、-C(O)-或-OC(O)-。
在另一优选例中，W5为无、-C(O)-或-OC(O)-。
在另一优选例中，LT1、LT2和LT3中，存在一个M'为WX。
在另一优选例中，W不为NR。
在另一优选例中，W各自独立地选自下组：无、-C(Rb)2-、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、-SO2-、 -SO-、-PO3-、-C(Rb)＝C(Rb)-、-C≡C-、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的5至10元杂芳基，且s＝1或2。
在另一优选例中，W1和W2各自独立地为-N(Ra)-C(O)-、-C(O)-N(Ra)-或-C≡C-。
在另一优选例中，W1为-N(Ra)-C(O)-、或-C(O)-N(Ra)-；并且W2为-C≡C-。
在另一优选例中，RP1和RP2中的一个为多肽元件且另一个为靶标分子T。
在另一优选例中，RP1和RP2均为相同或不同的多肽元件。
在另一优选例中，RP1和RP2均为相同或不同的靶标分子T。
在另一优选例中，RP1和RP2各自独立地选自下组：
Figure BDA0003295775120000042
在另一优选例中，L2不存在-O-O-。
在另一优选例中，L2中，至少一个ML为MT或MN。
在另一优选例中，L2中，当二个或更多个ML为MT或MN时，L2中包括MT和MN、或L2仅包括 MT，或L2仅包括MN。
在另一优选例中，L2中，至少一个ML为MN。
在另一优选例中，L2中，至少一个ML为MT。
在另一优选例中，L2中，1、2或3个ML各自独立地为MT或MN。
在另一优选例中，L2中，1、2或3个ML各自独立地为MN。
在另一优选例中，L2中，1、2或3个ML各自独立地为MT。
在另一优选例中，L2为L5，且L5如式IIIc所示；
-(M)o1-(M')-(M)o2-     (IIIc)
其中，
M'各自独立地为MT或MN；
M、MT和MN如式I中定义；
o1和o2各自独立地为1～50的整数且4≤o1+o2≤49。
在另一优选例中，L2为L6，且L6如式IIIa所示；
-(M)o1-(MN)-(M)o2-   (IIIa)
其中，
M、MN如前定义；
o1和o2各自独立地为1～50的整数且4≤o1+o2≤49。
在另一优选例中，o1和o2各自独立地为1、2、3、4、5、6、7或8。
在另一优选例中，o1为1、或2，并且o2为1、2、3、4、5、6或7。
在另一优选例中，L6中，M各自独立地选自下组：-CH2-、-CH(C1-4烷基)-、-CH(NH2)-、-O-、 -NH-、-N(C1-4烷基)-、
Figure BDA0003295775120000051
Figure BDA0003295775120000052
在另一优选例中，所述的偶联物如式IV所示；
RT-W1-L6-W2-RE3   (IV)
其中，L6、W1、W2、RT和RE3如式I中定义。
在另一优选例中，L2为L7，且L7如式IIIb所示；
-(M)o1-(MT)-(M)o2-   (IIIb)
其中，M、MT如前定义；
o1和o2各自独立地为1～50的整数且4≤o1+o2≤49。
在另一优选例中，o1和o2各自独立地为1、2、3、4、5、6、7或8。
在另一优选例中，所述的偶联物如式V所示；
RT-W1-L7-W2-RE3     (V)；
其中，L7、W1、W2、RT和RE3如式I中定义。
在另一优选例中，所述的偶联物如式1-1、1-2、1-3、2或3所示；
RT-W1-L5-Wb-C≡C-RE3     (1-1)；
RT-W1-L5-CO-RE3       (1-2)；
RT-W1-L5-CONH-RE3     (1-3)；
RT-Wa-Cr1-Wa-Cr2-L5-W2-RE3     (2)
RT-Ar1-L5-W2-RE3      (3)
其中，
Ar1为-五或六元含氮杂芳基-；
Cr1为无，或者未取代或被C1-4烷基所取代的C4-7环烷基或4至6元杂环基；
Cr2为未取代或被C1-4烷基所取代的4至6元含氮杂环基，且Cr2中至少一个氮杂原子与L7连接；
Wa和Wb的定义同W；且W、W1、W2、RT、RE3和L5如前定义。
在另一优选例中，所述的偶联物如式1a-1、1a-2、1a-3、2a或3a所示；
RT-W1-L6-Wb-C≡C-RE3      (1a-1)；
RT-W1-L6-CO-RE3    (1a-2)；
RT-W1-L6-CONH-RE3    (1a-3)；
RT-Wa-Cr1-Wa-Cr2-L6-W2-RE3   (2a)
RT-Ar1-L6-W2-RE3    (3a)
其中，
Ar1、Cr1、Cr2、Wa、Wb、W1、W2、RT、RE3和L6如前定义。
在另一优选例中，所述的偶联物如式1b-1、1b-2、1b-3、2b或3b所示；
RT-W1-L7-Wb-C≡C-RE3     (1b-1)；
RT-W1-L7-CO-RE3     (1b-2)；
RT-W1-L7-CONH-RE3    (1b-3)；
RT-Wa-Cr1-Wa-Cr2-L7-W2-RE3   (2b)
RT-Ar1-L7-W2-RE3    (3b)
其中，
Ar1为五或六元含氮杂芳基；
Cr1为无，或者未取代或被C1-4烷基所取代的C4-7环烷基或4至6元杂环基；
Cr2为未取代或被C1-4烷基所取代的4至6元含氮杂环基，且Cr2中至少一个氮杂原子与L7连接；
Wa和Wb的定义同W；且W、W1、W2、RT、RE3和L7如式I中定义。
在另一优选例中，L2为L8，且L8如式IIId所示；
-(M)o3-     (IIId)
其中，M如前定义(较佳地，M为CH2)，o3为1、2、3、4或5。
在另一优选例中，所述的偶联物如RT-W1-L8-W2-RE3所示；其中，RT、W1、L8、W2、和RE3如前定义。优选地，W1为Wa-Cr1-Cr2(更优选地，为NH-Cr1-Cr2)，Cr1和Cr2如前定义。
在另一优选例中，当所述杂环烷基(如4至10元杂环烷基)为二价基团时，所述的4至10元杂环烷基包括：
Figure BDA0003295775120000061
其中，k1和k2各自独立地为0、1、2或3；较佳地，所述的4 至10元杂环烷基选自下组：
Figure BDA0003295775120000062
在另一优选例中，当所述环烷基(如C3-8环烷基)为二价基团时，所述环烷基(如C3-8环烷基)包括：
Figure BDA0003295775120000063
其中，k1和k2各自独立地为1、2或3；更佳地，所述C3-8环烷基选自下组：
Figure BDA0003295775120000064
Figure BDA0003295775120000065
在另一优选例中，当所述杂芳基(如5至10元杂芳基)为二价基团时，所述杂芳基(如5至10元杂芳基)为
Figure BDA0003295775120000066
其中，V1、V2和V4各自独立地选自：-O-、-S-、-N＝、-NH-、-CH＝、-CH2-；V3选自下组：-N＝、-CH＝；较佳地，所述5至10元杂芳基选自下组：
Figure BDA0003295775120000067
Figure BDA0003295775120000068
在另一优选例中，M各自独立地选自下组：-CH2-、-CH(C1-4烷基)-、-CH(NH2)-、-O-、-NH-、-N(C1-4烷基)-、
Figure BDA0003295775120000071
Figure BDA0003295775120000072
在另一优选例中，当所述含N(R)环原子的4至10元杂环烷基为二价基团时，含N(R)环原子的4 至10元杂环烷基选自下组：
Figure BDA0003295775120000073
其中，R为R'或R"。
在另一优选例中，MT各自独立地选自下组：-N(R")-、-C(Rb)(NHR")-、
Figure BDA0003295775120000074
Figure BDA0003295775120000075
在另一优选例中，MT为下述二价基团：-N(R")-。在另一优选例中，MN各自独立地选自下组： -N(R')-、-C(Rb)(NHR')-、
Figure BDA0003295775120000076
在另一优选例中，MN为下述二价基团：-N(R')-。
在另一优选例中，M各自独立地选自下组：O、C(Rb)2；较佳地，其中，Rb各自独立地为H或C1-6烷基(如甲基)。
在另一优选例中，W选自下组：无、-C(Rb)2-、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、-SO2-、-SO-、-PO3-、 -C(Rb)＝C(Rb)-、-C≡C-；或者W为取代或未取代的选自下组的基团：
Figure BDA0003295775120000077
Figure BDA0003295775120000078
在另一优选例中，Ra各自独立地为H或C1-6烷基(如甲基)。
在另一优选例中，Rb各自独立地为H或C1-6烷基(如甲基)。
在另一优选例中，Rc各自独立地为H或C1-6烷基(如甲基)。
在另一优选例中，L3为-(Ma)p-；其中，Ma的定义同M，p为1～50的整数。
在另一优选例中，p＝1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15。
在另一优选例中，Ma各自独立地为选自下组的二价基团：-C(Rb)2-、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、 -SO2-、-SO-、-PO3-、-C(Rb)＝C(Rb)-、-C≡C-、取代或未取代的-C3-8环烷基-、取代或未取代的-4至 10元杂环烷基、取代或未取代的-C6-10芳基、取代或未取代的5至10元杂芳基、氨基酸残基。
在另一优选例中，-W3-L3-W4-RP选自下组：
Figure BDA0003295775120000079
Figure BDA0003295775120000081
其中，L4为-(M)q-，其中M的定义同L2中定义；
q为0～50的整数且q小于p(较佳地，q＝0-30的整数；更佳地，q＝0、1、2、3、4、5、6、7、8、 9或10)，n5为0-30的整数(较佳地，n5＝0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)；R20和R21各自独立地选自下组：-H，-Me,-Et,-nPr,iPro,cPro。
在另一优选例中，所述偶联物为选自组1、组2和组3中的偶联物。
在另一优选例中，所述的偶联物为选自组1a、组2a和组3a中的偶联物。
在另一优选例中，所述的偶联物为选自组1、组2和组3中的偶联物；其中，R和R1为R"(即R和 R1各自独立地为-W3-L3-W4-(RP)q)。
在另一优选例中，式I所示的偶联物为如式X所示的偶联物
RP-(W4-L3-W3-RTED)t  (X)
其中，t＝1/q(较佳地，t＝1-8)；
RP如上定义，优选地为RP为多肽元件，更佳地为抗体；
RTED-W4-L3-W3-为式I所示偶联物的失去RP基团后余下的部分。
在另一优选例中，RTED为衍生自表A1和A2中的偶联物、组1a、2a和3a中的偶联物的具体化合物的一价基团(其中，所述的衍生是指表A1和A2具体化合物失去连接基团的主链或连接基团的支链上NH的氢形成的一价基团)。
在另一优选例中，所述偶联物选自：
Figure BDA0003295775120000091
在另一优选例中，Ab通过N端或C端的氨基酸，或氨基酸侧链(较佳地，选自下组的氨基酸侧链： Lys、Cys)，或被还原打开二硫键而形成的巯基，与式III所示的W4-L3 W3-(较佳地，W4-L3-W3-中的
Figure BDA0003295775120000092
或者-NH2基团)连接。
在另一优选例中，所述的靶标分子为靶标分子A或靶标分子T。
在另一优选例中，所述靶标分子A或T包括：小分子、纳米载体，或其组合。
在另一优选例中，所述靶标分子A和T各自独立地为选自下组的靶标分子或者靶向选自下组的靶标(如各自酶或受体)的靶标分子：叶酸、HSP90、TINFRm、TNFR2、NADPH氧化酶(oxidase)、 BclIBax、C5a受体(receptor)，HMG-CoA还原酶(reductase)、PDE I-V、角鲨烯环化酶抑制剂(Squalene cyclase inhibitors)、CXCR1、CXCR2、一氧化氮(NO)合成酶(Nitric oxide(NO)synthase)、环加氧酶(cyclo-oxygenase)1-2、5HT受体(5HTreceptors)、多巴胺受体(dopamine receptors)、G-蛋白(G-proteins)、 Gq、组胺受体(Histamine receptors)、脂肪氧合酶(Lipoxygenases)、类胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶(Tryptase serine protease)、胸苷酸合成酶(Thymidylate synthase)、嘌呤核苷酸磷酸化酶(Purine nucleotide phosphorylase)、GAPDH锥虫(GAPDH trypanosomal)、糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase)、碳酸酐酶(Carbonic anhydrase)、趋化因子受体(Chemokine receptors)、JAW STAT、RXR及其类似物、HIV 1蛋白酶(HIV 1protease)、HIV 1整合酶(HIV 1integrase)、流感(Influenza)、乙型肝炎逆转录酶(hepatitis B reversetranscriptase)、神经氨酸酶(neuraminidase)、钠通道(Sodium channel)、MDR、蛋白质P1-糖蛋白(protein P1-glycoprotein)、酪氨酸激酶(Tyrosine kinases)、CD23、CD124、TKp56 lck、CD4、 CD5、IL-1受体(IL-1receptor)、IL-2受体(IL-2receptor)、TNF-aR,ICAM1,Ca+通道(Ca+channels)、 VCAM、VLA-4整合素(VLA-4integrin)、VLA-4整合素(VLA-4integrin)、选择素(Selectins)、CD40/40L、新霉素和受体(Newokinins and receptors)、肌苷一磷酸脱氢酶(Inosine monophosphate dehydrogenase)、 p38 MAP激酶(p38 MAPkinase)、白细胞介素-1转化酶(Interleukin-1converting enzyme)、胱天蛋白酶(Caspase)、HCV NS3蛋白酶(HCV NS3 protease)、HCV-NS3 RNA解旋酶(HCV-NS3 RNAhelicase)、甘氨酰胺核糖核苷酸甲酰转移酶(Glycinamide ribonucleotide formyltransferase)、鼻病毒3C蛋白酶 (rhinovirus 3C protease)、HSV-I、CMV、ADP聚合酶(ADP1-polymerae)、CDK、VEGF、催产素受体(oxytoxin receptor)、msomal转移蛋白抑制剂(msomal transfer protein inhibitor)、胆汁酸转移蛋白抑制剂(Bile acid transferprotein inhibitor)、5-a还原酶(5-a reductase)、血管紧张素11(Angiotensin 11),甘氨酸受体(Glycine receptors)、去甲肾上腺素再摄取受体(noradrenaline reuptakereceptor)、内皮素受体 (Endothelin receptors)、神经肽Y和受体(Neuropeptide Y andreceptors)、***受体(Estrogen receptors)、 AMP、AMP脱氨酶(AMP deaminase)、ACC、EGFR、法呢基转移酶(Farnesyltransferase)。
在另一优选例中，所述的多肽元件包括：抗体、蛋白，或其组合。
在另一优选例中，所述抗体包括：纳米抗体、小分子抗体(minibody)，或其组合。
在另一优选例中，所述多肽元件为抗体；优选地，所述抗体包括纳米抗体(nanobody)、小分子抗体(minibody)、抗体片段(如scFv，Fab)、双抗(Dibody)等等。
在另一优选例中，所述多肽(靶向多肽)的靶标包括但不局限于：EGFR，FGFR，SSTR1-14， GnRH，TRPV1-6，RGD，iRGD等等。
在另一优选例中，所述抗体可与选自下组的抗原或受体结合(例如，与选自下组的一种(即单功能抗体)或两种(即双功能抗体)或更多种(即多功能抗体)抗原和/或受体结合)：DLL3、EDAR、 CLL1、BMPR1B、E16、STEAP1、0772P、MPF、5T4，NaPi2b、Sema 5b、PSCA hlg、ETBR、MSG783、 STEAP2、TrpM4、CRIPTO、CD21、CD22、CD79b、CD19、CD37、CD38、CD138、FcRH2、B7-H4、 HER2、NCA、MDP、IL20Rα、短小蛋白聚(Brevican)、EphB2R、ASLG659、PSCA、GEDA、BAFF-R、 CD79a、CXCR5、HLA-DOB、P2X5、CD72、LY64、FcRH1、IRTA2、TENB2、PMEL17、TMEFF1、GDNF-Ra1、Ly6E、TMEM46、Ly6G6D、LGR5、RET、LY6K、GPR19、GPR54、ASPHD1、酪氨酸酶(Tyrosinase)、TMEM118、GPR172A、MUC1、CD70、CD71、MUC16、methothelin、FOLR1、 TroP1-2、gpNMB、EGFR、ENPP3、PSMA、CA6、GPC-3、PTK7、CD44、CD56、TIM-1、钙粘素 -6(Cadherin-6)、ASG-15ME、ASG-22ME、CanAg、AXL、CEACAM5、EphA4、cMet、FGFR2、FGFR3、 CD123、Her3、LAMP1、LRRC15、TDGF1、CD66、CD25、BCMA、GCC、Noch3、cMet、EGFR 和CD33，或者诸如CD70、Trop2、PD-L1、CD47、CLDN-18.2的受体。在另一优选例中，本发明的靶标分子还可与可以被特异性小分子靶向的受体结合，如叶酸，HSP90，葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter 1)(GLUT1)，氨肽酶(aminopeptidase N)(APN)，低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low-densitylipoprotein receptor-related protein 1)(LRP1)，***特异性肽(prostate-specific membrane antigen) (PSMA)，整合素αvβ3,铃蟾素(bombesin receptor)、生长抑素受体(somatostatin receptor)(SSTR)，肿瘤乏氧微环境，以及碳酸酐酶IX(CAIX)等受体。
在另一优选例中，RT选自表B1和B2所示的基团。
在另一优选例中，所述E3连接酶配体部分A1选自：WO2017/176957A1中的A1基团(较佳地， WO2017/176957A1中的A-10、A-11、A-15、A-28、A-48、A-69、A-85、A-93、A-98、A-99或A-101 的相应部分)。
在另一优选例中，所述E3连接酶配体部分选自：
Figure BDA0003295775120000101
Figure BDA0003295775120000111
各式中，虚线表示与其他部分连接的位置(即与RT-L1连接的位置)；
其中，Rx各自独立地选自下组：无、NH、NH-CO、O、S、SO、SO2、SO2(NH2)NH、C1～C4 亚烷基、C2～C5亚烯基、C2～C5亚炔基；Ry为C＝O,C＝S或CH2。
在另一优选例中，所述E3连接酶配体部分选自表C中所示的基团。
在另一优选例中，当RE3为
Figure BDA0003295775120000112
(A1)(较佳地为表B中的A1.2)时，式I偶联物如式1-1 所示，RT-W1-L5-Wb-C≡C-RE3(1-1)；较佳地，L5中至少一个M为O和/或W1为NH或NH-Cr2，和/或Wb为CH2；更佳地，L5中，7≤o1+o2≤12。
在另一优选例中，当RE3为
Figure BDA0003295775120000113
(A1)(较佳地为表B中的A1.2)时，式I偶联物如 RT-Wa-Cr1-Cr2-(M)o3-W2-RE3所示，且Cr1和Cr2均不为无；较佳地，L2为-(M)o3-，且下标o3为1、2、3、 4、或5。
在另一优选例中，所述的偶联物为如第六方面所述的TED化合物。
在另一优选例中，所述的偶联物为如第七方面所述的ACTED化合物。
在另一优选例中，所述的偶联物不为PCT/CN2019/110225和PCT/IB2021/052954中所公开的那些具体化合物。
在另一优选例中，所述的偶联物不为PCT/CN2019/110225中表D记载的具体化合物，所述表D 具体化合物如下：
Figure BDA0003295775120000114
在另一优选例中，所述的偶联物不为PCT/IB2021/052954中记载的如下化合物：
Figure BDA0003295775120000121
PCT/IB2021/052954的表D中的化合物1216、1229、1231、1233。
在本发明的第二方面，提供了一种药物组合物，其中，所述的药物组合物含有如第一方面所述的偶联物和药学上可接受的载体。
在本发明的第三方面，提供了如第一方面所述的偶联物在制备用于治疗或预防与靶标蛋白过量相关的疾病的药物中的的用途。
在本发明的第四方面，提供了一种如第一方面所述的偶联物在治疗或预防与靶标蛋白过量相关的疾病中用途。
在本发明的第五方面，提供了一种减少细胞中靶标蛋白含量的方法，其中，将细胞与如第一方面所述的偶联物相接触，从而减少细胞中靶标蛋白的含量。
在另一优选例中，所述的方法是体外方法。
在另一优选例中，所述的方法是非诊断性和非治疗性的。
在本发明的第六方面，提供了一种TED化合物或其药学上可接受的盐，其中，所述的TED化合物如式VI所示；
RTW1-(ML)o-W2-RE3      (VI)
其中，
ML各自独立地为M或MN
M、MN、RE3、RT、W1、W2和下标o如式I中定义。
在另一优选例中，所述TED化合物如式IV所示。
在另一优选例中，所述TED化合物如如式1a-1、1a-2、1a-3、2a或3a所示。
在另一优选例中，所述TED化合物用于与RP偶联。
在另一优选例中，所述TED化合物通过-W3-L3-W4-与RP偶联。
在另一优选例中，所述TED化合物为选自组1、组2和组3的化合物，且R和R1各自独立地为R'。
在另一优选例中，所述TED化合物为选自表A1和A2。
在本发明的第七方面，提供了一种ACTED化合物或其药学上可接受的盐，其中，所述的ACTED 化合物如式VII所示；
RTW1-(ML)o-W2-RE3      (VII)
其中，
ML各自独立地为M或MT
M、MT、RE3、RT、W1、W2和下标o如式I中定义。
在另一优选例中，所述ACTED化合物如式V所示。
在另一优选例中，所述ACTED化合物如式X所示。
在另一优选例中，所述ACTED化合物如如式1b-1、1b-2、1b-3、2b或3b所示。
在另一优选例中，所述ACTED化合物为选自组1、组2和组3的化合物，且R和R1各自独立地为R"。
在另一优选例中，所述ACTED化合物选自：表D。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
图1显示了本发明化合物对NCI-H821细胞系中Aurora A降解情况。
图2显示了本发明化合物对MV4；11细胞系中BRD4和PLK1的降解情况。
具体实施方式
本发明人经过广泛而深入的研究，首次开发了一种结构新颖的TED偶联物，本发明的TED偶联物具有式I所示的结构。此外，本发明的TED偶联物非常适合进一步与多肽元件(尤其是抗体、蛋白配体)和/或其他具有靶向性的分子连接，或者进一步与多肽元件和/或其他具有靶向性的分子等进一步连接后或进一步连接了多肽元件和/或其他具有靶向性的分子的偶联物中的多肽元件和/或其他具有靶向性的分子，使得本发明偶联物具有优异的特异性(例如靶向肿瘤细胞的特异性)，能够显著提高药物选择性，对致病蛋白实施更精准降解，减少非特异性降解可能引起的周身毒性，并有可能克服药物吸收代谢遇到的困难，铲除产生耐药性的机会。在此基础上发明人完成了本发明。
术语
如本文所用，术语“本发明化合物”、“本发明偶联物”可互换使用，指本发明第一方面中所述的式I化合物或偶联物。
如本文所用，除非另有定义，术语“烷基”本身或作为另一取代基的一部分是指具有指定碳原子数的直链或支链烃基(即，C1-6表示1-6个碳)。较佳地，烷基具体1～4个碳即C1-4烷基。烷基的例子包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基等。术语“烯基”指具有一个或多个双键的不饱和烷基。较佳地，烯基具体2～4个碳即C2-4烯基。类似地，术语“炔基”指具有一个或多个三键的不饱和烷基。较佳地，炔基具体2～4个碳即C2-4炔基。此类不饱和烷基的例子包括但不限于：乙烯基、2-丙烯基、巴豆基、2-异戊烯基、2-(丁二烯基)、2,4-戊二烯基、3-(1,4-戊二烯基)、乙炔基、1-和3-丙炔基、3-丁炔基和更高级的同系物和异构体。术语“环烷基”是指具有指定环原子数(例如，C3-6环烷基)并且完全饱和的或在环顶之间具有不超过一个双键的烃环。
如本文所用，术语“环烷基”是指具有指定环原子数(例如，C3-8环烷基)并且完全饱和的或在环顶之间具有不超过一个双键的烃环。该术语也包括双环和多环烃环，例如双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2] 辛烷等。术语“杂环烷基”是指含有一至五个选自N、O和S的杂原子的环烷基，其中氮和硫原子任选被氧化，且氮原子任选被季铵化。杂环烷基可以是单环、双环或多环体系。杂环烷基的非限制性例子包括吡咯烷、咪唑烷、吡唑烷、丁内酰胺、戊内酰胺、咪唑烷酮、乙内酰脲、二氧戊环、苯邻二甲酰亚胺、哌啶、1,4-二噁烷、吗啉、硫代吗啉、硫代吗啉-S-氧化物、硫代吗啉-S,S-氧化物、哌嗪、吡喃、吡啶酮、3-吡咯啉、噻喃、吡喃酮、四氢呋喃、四氢噻吩、奎宁环等。杂环烷基可以经环碳或杂原子连接于分子的其余部分。对于诸如环烷基烷基和杂环烷基烷基的术语，是指环烷基或杂环烷基通过烷基或亚烷基连接体连接到分子的其余部分。例如，环丁基甲基-是连接到分子其余部分的亚甲基连接基上的环丁基环。
术语“亚烷基”本身或作为另一取代基的一部分是指衍生自烷烃的二价基团，例如-CH2CH2CH2CH2-。烷基(或亚烷基)通常具有1-24个碳原子，其中本发明优选具有10个或更少碳原子的那些基团。“低级烷基”或“低级亚烷基”是较短链烷基或亚烷基，通常具有4个或更少的碳原子。类似地，“亚烯基”或“亚炔基”分别指具有双键或三键的不饱和形式的“亚烷基”。
除非另有说明，术语“杂烷基”本身或与其它术语组合是指的稳定的直链或支链或环状烃基或其组合，由指定数目的碳原子和和1至3个选自O，N，Si和S的杂原子组成，且其中氮和硫原子可选地被氧化，氮杂原子可任选地被季铵化。杂原子O，N和S可以位于杂烷基的任何内部位置。杂原子Si 可以位于杂烷基的任何位置，包括烷基连接到分子其余部分的位置。实施例包括-CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3,-CH2-CH2-N(CH3)-CH3,-CH2-S-CH2-CH3,-CH2-CH2,-S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3,-CH＝CH-O-CH3,-Si(CH3)3,-CH2-CH＝N-OCH3,和-CH＝CH-N(CH3)-CH3。最多两个杂原子可以是连续的，例如-CH2-NH-OCH3和-CH2-O-Si(CH3)3。类似地，除非另有说明，术语“杂烯基”和“杂炔基”其本身或与另一个术语的组合分别指烯基或炔基，其分别含有指定数目的碳和1至3 个选自O，N，Si和S的杂原子，且其中氮和硫原子可选地被氧化，氮杂原子可任选地被季铵化。杂原子O，N和S可以位于杂烷基的任何内部位置。
术语“杂亚烷基”本身或作为另一取代基的一部分是指由杂烷基衍生的饱和或不饱和或多不饱和的二价基团，例如-CH2-CH2-S-CH2CH2-和
-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-,-O-CH2-CH＝CH-,-CH2-CH＝C(H)CH2-O-CH2-和-S-CH2-C≡C-。对于杂亚烷基，杂原子也可以占据链末端中的任一个或两个(例如，亚烷基氧基，亚烷基二氧基，亚烷基氨基，亚烷基二氨基等)。
术语"烷氧基"、"烷氨基"和"烷硫基"(或硫代烷氧基)以其常规意义使用，指代分别经氧原子、氨基或硫原子连接于分子的其余部分的那些烷基。此外，对于二烷基氨基，烷基部分可以相同或不同，也可和与各烷基相连的氮原子组合形成3-7元环。因此，-NRaRb所示基团表示包括哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、氮杂环丁烷基(azetidinyl)等。
除非另有表述，术语“卤代”或“卤素”本身或作为另一取代基的一部分是指氟、氯、溴、或碘原子。此外，诸如“卤代烷基”等术语表示包括单卤代烷基或多卤代烷基。例如，术语“C1-4卤代烷基”表示包括三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。
除非另有表述，术语“芳基”表示多不饱和的(通常芳香性)的烃基，其可以是单环或稠合在一起或共价连接的多环(最多三环)。术语"杂芳基"是指含有1至5个选自N、O、和S的杂原子的芳基(或环)，其中氮和硫原子任选被氧化，氮原子任选被季铵化。杂芳基可通过杂原子连接于分子的其余部分。芳基的非限制性例子包括苯基、萘基和联苯基，而杂芳基的非限制性例子包括吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、酞嗪基、苯并三嗪基(benzotriazinyl)、嘌呤基、苯并咪唑基、苯并吡唑基、苯并***基、苯并异噁唑基、异苯并呋喃基(isobenzofuryl)、异吲哚基、中氮茚基、苯并三嗪基、噻吩并吡啶基、噻吩并嘧啶基、吡唑并嘧啶基、咪唑并吡啶、苯并噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、异噻唑基、吡唑基、吲唑基、蝶啶基、咪唑基、***基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻二唑基、吡咯基、噻唑基、呋喃基、噻吩基等等。以上芳基和杂芳基环***各自的取代基选自下述可接受的取代基的组。
为简洁起见，当术语“芳基”与其它术语(例如芳氧基，芳硫基，芳烷基)组合使用时，包括如上所定义的芳基和杂芳基环。因此，术语“芳烷基”是指包括其中芳基连接到与分子的其余部分连接的烷基的那些基团(例如苄基，苯乙基，吡啶基甲基等)。
在一些实施例中，上述术语(如“烷基”，“芳基”和“杂芳基”)将包括指定基团的取代和未取代形式。下面提供了每种类型基团的优选取代基。为简洁起见，术语芳基和杂芳基将指代如下文所提供的取代或未取代的形式，而术语“烷基”和相关的脂肪族基团是指未取代的形式，除非指明被取代。
烷基(包括通常称为亚烷基，烯基，炔基和环烷基的那些基团)的取代基可以是选自下组的各种基团：-卤素、-OR'、-NR'R"、-SR'、-SiR'R"R"‘、-OC(O)R'、-C(O)R'、-CO2R'、-CONR'R"、-OC(O)NR'R"、 -NR"C(O)R'、-NR'-C(O)NR"R"‘、-NR"C(O)2R'、-NH-C(NH2)＝NH、-NR'C(NH2)＝NH、-NH-C(NH2)＝NR'、 -S(O)R'、-S(O)2R'、-S(O)2NR'R"、-NR'S(O)2R"、-CN和-NO2，数量从零到(2M'+1)，其中M'是这种基团中的碳原子总数。R'、R"和R"‘各自独立地表示氢，未取代的C1-8烷基，未取代的杂烷基，未取代的芳基，被1-3个卤素取代的芳基，未取代的C1-8烷基，C1-8烷氧基或C1-8硫代烷氧基，或未取代的芳基-C1-4烷基。当R'和R"连接到相同的氮原子时，它们可以与氮原子结合形成3-，4-，5-，6-或7-元环。例如，-NR'R"是指包括1-吡咯烷基和4-吗啉基。术语“酰基”，单独或作为另一基团的一部分使用，是指其中在最接近该基团的连接点的碳上两个取代基的被取代基＝O取代(例如-C(O)CH3, -C(O)CH2CH2OR'等)。
类似地，芳基和杂芳基的取代基是多种的，并且通常选自：-卤素、-OR'、-OC(O)R'、-NR'R"、 -SR'、-R'、-CN、-NO2、-CO2R'、-CONR'R"、-C(O)R'、-OC(O)NR'R"、-NR"C(O)R'、-NR"C(O)2R'、 -NR'-C(O)NR"R"'、-NH-C(NH2)＝NH、-NR'C(NH2)＝NH、-NH-C(NH2)＝NR'、-S(O)R'、 -S(O)2R'、-S(O)2NR'R"、-NR'S(O)2R"、-N3、全氟(C1-C4)烷氧基和全氟(C1-C4)烷基，数量从零到芳香环体系上的开放化合价的总数；其中R'、R"和R"'独立地选自氢，C1-8烷基，C3-6环烷基，C2-8烯基， C2-8炔基，未取代的芳基和杂芳基，(未取代的芳基)-C1-4烷基和未取代的芳氧基-C1-4烷基。其它合适的取代基包括通过1-4个碳原子的亚烷基链连接到环原子上的每一个上述芳基取代基。
芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地被式-T-C(O)-(CH2)q-U-的取代基取代，其中T和U独立地为-NH-，-O-，-CH2-或单键，且q是0至2的整数。或者，芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地被式-A-(CH2)r-B-，其中A和B独立地是-CH2-、-O-、-NH-、-S-、-S(O)-、 -S(O)2-、-S(O)2NR'-或单键，且r是1至3的整数。由此形成的新环中的一个单键可以任选地被双键取代。或者，芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地被式-(CH2)s-X-(CH2)t-的取代基替代，其中s和t独立地为0至3的整数，并且X是-O-、-NR'-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、或-S(O)2NR'-。-NR'-和-S(O)2NR'-中的取代基R'选自氢或未取代的C1-6烷基。
在本发明中，环烷基或杂环烷基为二价基时，所述的环烷基或杂环烷基可失去位于同一环原子 (环碳原子上)的两个氢从而与链上的其他链原子连接(形成类似于螺环结构)，或者可失去位于不同环原子上的两个氢从而与链上的其他链原子连接(如-亚环戊基-)。
如本文所用，术语“杂原子”意在包括氧(O)、氮(N)、硫(S)和硅(Si)。
对于本文提供的化合物，从取代基(通常为R基团)到芳香环(例如苯，吡啶等)的中心的键将被理解为是指在芳香环的任何可用顶点提供连接的键。在一些实施例中，该描述也包括稠合在芳环上的环上的连接。例如，绘制到吲哚苯部分的中心的键将表示与吲哚的六元或五元环部分的任何可用顶点连接的键。
如本文所用，术语“氨基酸残基”是指氨基酸的N端-NH2脱去一个H，C端的-COOH脱去-OH所形成的基团。除非另有定义，在本文中，氨基酸包括天然氨基酸或非天然氨基酸，包括D型和/或L型氨基酸。氨基酸的例子包括但不限于Ala(A)、Arg(R)、Asn(N)、Asp(D)、Cys(C)、Gln(Q)、Glu(E)、 Gly(G)、His(H)、Ile(I)、Leu(L)、Lys(K)、Met(M)、Phe(F)、Pro(P)、Ser(S)、Thr(T)、Trp(W)、 Tyr(Y)、Val(V)。优选地，在本文中，氨基酸为选自下组的氨基酸：L-甘氨酸(L-Gly)，L-丙氨酸(L-Ala)，β-丙氨酸(β-Ala)，L-谷氨酸(L-Glu)，L-天冬氨酸(L-Asp)，L-组氨酸(L-His)，L-精氨酸(L-Arg)，L-赖氨酸(L-Lys)，L-缬氨酸(L-Val)，L-丝氨酸(L-Ser)，L-苏氨酸(L-Thr)；此外，当氨基酸存在2个或以上的氨基和/或者2个或以上的羧基时，该术语还包括不在同一个碳原子上的-NH2脱去一个H和 -COOH脱去-OH所形成的基团，例如由谷氨酸的-NH2和非α位-COOH分别脱去一个H后形成的二价基团-C(O)-(CH2)2-C(COOH)-NH-。
术语"药学上可接受的盐"意在包括活性化合物与相对无毒的酸或碱制备的盐，其取决于本文所述化合物上具体的取代基。当本发明化合物含有相对酸性的官能团时，可通过将中性形式的此类化合物与充足量的所需碱(无溶剂的或在合适的惰性溶剂中的)接触来获得碱加成盐。衍生自药学上可接受的无机碱的盐的例子包括铝、铵、钙、铜、铁，亚铁、锂、镁、锰，亚锰、钾、钠、锌等。衍生自药学上可接受的有机碱的盐包括伯胺、仲胺和叔胺的盐，包括取代的胺、环状胺、自然产生的胺等等，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、 2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺(glucamine)、葡萄糖胺 (glucosamine)、组氨酸、海巴明、异丙胺、赖氨酸、甲葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等等。当本发明化合物含有相对碱性的官能团时，可通过将中性形式的此类化合物与充足量的所需酸(无溶剂的或在合适的惰性溶剂中的)接触来获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的例子包括衍生自无机酸的那些，例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、单氢碳酸、磷酸、单氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、单氢硫酸、氢碘酸、或亚磷酸等等；以及衍生自相对无毒的有机酸的盐，例如乙酸、丙酸、异丁酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、扁桃酸、苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸，酒石酸、甲磺酸等等。还包括氨基酸的盐，例如精氨酸盐等等，和有机酸的盐，例如葡萄糖醛酸(glucuronic acid)或半乳糖醛酸(galactunoric acid)等。本发明的某些具体化合物同时含有碱性和酸性官能团，从而能将化合物转换成碱加成盐或酸加成盐。
通过将盐与碱或酸接触并以常规方式分离母体化合物，可以再生该化合物的中性形式。化合物的母体形式与各种盐形式在某些物理性能(例如在极性溶剂中的溶解度)上不同，但除此之外，就本发明的目的而言，那些盐与母体形式化合物是等价的。
除盐形式外，本发明提供前药形式的化合物。本文所述的化合物的前药是在生理条件下很容易经历化学变化以提供本发明化合物的那些化合物。另外，前药可以在离体环境中通过化学或生物化学方法转变为本发明化合物。例如，当置于含合适的酶或化学试剂的经皮贴片贮器中时，前药可缓慢转变为本发明的化合物。
本发明的某些化合物可以非溶剂化形式以及溶剂化形式存在，包括水化形式。溶剂化形式通常与非溶剂化形式等价，应包括在本发明范围内。本发明的某些化合物可以多晶型或无定形形式存在。通常，就本发明所考虑的应用而言，所有物理形式是等价的，应包括在本发明范围内。
本发明的某些化合物拥有不对称碳原子(光学中心)或双键；消旋体、非对映体、几何异构体、区域异构体和单独的异构体(例如，分离的对映体)均应包括在本发明范围内。当本文提供的化合物具有确定的立体化学(表示为R或S，或具有虚线或楔形键指明)时，被本领域技术人员将理解那些化合物为基本上不含其他异构体(例如至少80％，90％，95％，98％，99％和至多100％不含其他异构体)。
本发明化合物还可在构成此类化合物的一个或多个同位素原子处含有非天然比例的原子同位素。某同位素的非天然比例可以定义为从所讨论原子的天然发现的量到100％该原子的量。例如，化合物可以掺入放射性同位素，例如氚(3H)、碘-125(125I)或碳-14(14C)，或非放射性同位素，例如氘(2H) 或碳-13(13C)。除了本申请所述的那些用途，此类同位素变体可提供额外的用途。例如，本发明化合物的同位素变体可以有额外的用途，包括但不限于作为诊断的和/或成像试剂，或作为细胞毒性/放射毒性治疗剂。另外，本发明化合物的同位素变体可具有改变的药代动力学和药效学特征，从而有助于增加治疗期间的安全性、耐受性或疗效。无论是否有放射性，本发明化合物的所有同位素变体均应包括在本发明范围内。
靶向蛋白酶降解(Targeted Enzyme Degradation,TED)平台
本发明提供基于本发明偶联物的靶向蛋白酶降解(TED)平台，该平台利用了细胞内的“清洁工”—泛素-蛋白酶体***。
典型地，基于本发明TED技术，可利用细胞自身的蛋白质破坏机制来从细胞中去除特定致癌病蛋白，因此是一种靶向治疗的替代方法。
与传统蛋白抑制剂作用原理不同，本发明的TED技术是一个双功能杂合化合物，一边用来结合目标蛋白，另一边用来结合一个E3连接酶，使得目标蛋白可以与E3连接酶结合，把目标蛋白泛素化，从而被蛋白组降解。理论上TED技术只是提供结合活性，不需直接抑制目标蛋白的功能活性，又可以重复利用，因此，具有优异的应用前景。
特别地，本发明的经过优化的TED分子，具备优越的靶蛋白降解能力，从而抑制病灶细胞生长。此外，本发明的TED(即RTED)通过具有特定结构的连接头(例如，链上存在细胞表面或细胞质内可裂解的二价连接部分(如-S-S-，或-AN-、-AAN-、-VA-、-GGFG-、-AAFG、-VCit-、-VL-等肽链) 和亲水性二价连接部分(如PEG链、含酸性官能团的侧链如-SO3H、-PO3H2、-COOH等))跟具有靶向肿瘤组织的配体(如叶酸等)偶联形成本文所述的ACTED分子(或偶联物)。
具有上述结构的ACTED进入血液循环，其通过特定结构的连接头所偶联的配体部分跟肿瘤细胞表面的抗原或受体结合，从而能够快速富集到肿瘤组织。在与肿瘤细胞结合后，本发明的ACTED 可发生以下作用：例如，1.经过受体介导的内吞作用进入细胞，在细胞质中，被酸性环境，或者 GSH(谷胱甘肽)，或者特异性酶切割，释放出活性分子TED，TED再与细胞内的靶蛋白和E3酶结合，通过泛素介导的蛋白酶体，降解靶蛋白，进而杀死肿瘤细胞；2.ACTED在细胞表面即被微环境的酸性环境，或者GSH，或特异性酶切割，释放出TED，TED再扩散进入细胞内发挥降解靶蛋白并杀伤肿瘤细胞的作用。可见，本发明还提供了一种基于靶向肿瘤微环境及低氧状态的前药(Pro-drug) 偶联物”。
因此，本发明的ACTED的优点可以分为两个方面：1.将更多的TED富集到肿瘤组织，并帮助 TED进入肿瘤细胞，降解靶蛋白从而杀伤肿瘤细胞，提高了TED的利用率；和2.ACTED极少结合正常细胞，故循环过程中更少的TED进入正常组织，减少了毒副作用。
一些示例性的跟具有靶向肿瘤组织的配体的连接头如下，其中仅示例性地列举了代表性的连接片段，应当理解，其中各片段之间还可能存在诸如-NHCO-、-NH-、-CO-、亚甲基、常见氨基酸的残基等常见的连接基团
(1)例如，连接头可通过与Ligand里的半胱氨酸上-SH的共价结合：
Figure BDA0003295775120000171
该式中，
Figure BDA0003295775120000181
其中，Wx可以是以上片段单一使用，也可以组合使用
Figure BDA0003295775120000182
(2)例如，连接头通过与Ligand里的赖氨酸上的-NH2的共价结合：
Figure BDA0003295775120000183
一些双配体偶联TED的示例性结构如下
Figure BDA0003295775120000184
其中，Wx可以是以上片段单一使用，也可以组合使用
Figure BDA0003295775120000191
各式中，Ligand1和Ligand2的定义也可与RP1和RP2的定义相同。
一些示例性的ACTED如下所示
Figure BDA0003295775120000192
Figure BDA0003295775120000201
各式中，Ligand1和Ligand2的定义分别与RP1和RP2的定义相同。
多肽元件
如本文所用，术语“多肽元件”包括肽段(如3-20aa的短肽)或蛋白。此外，该术语还包括完整的蛋白或其片段。优选的多肽元件包括抗体(如完整抗体、单链抗体、纳米抗体、抗体片段)，尤其是针对肿瘤细胞标志物(如位于肿瘤细胞表面的肿瘤标志物，如细胞表面的受体)或针对炎性因子(如与自身免疫疾病相关的炎性因子)的抗体。
如本文所用，术语“抗体”或“免疫球蛋白”是有相同结构特征的约150000道尔顿的异四聚糖蛋白，其由两个相同的轻链(L)和两个相同的重链(H)组成。每条轻链通过一个共价二硫键与重链相连，而不同免疫球蛋白同种型的重链间的二硫键数目不同。每条重链和轻链也有规则间隔的链内二硫键。每条重链的一端有可变区(VH)，其后是多个恒定区。每条轻链的一端有可变区(VL)，另一端有恒定区；轻链的恒定区与重链的第一个恒定区相对，轻链的可变区与重链的可变区相对。特殊的氨基酸残基在轻链和重链的可变区之间形成界面。
如本文所用，术语“单域抗体”、“纳米抗体”具有相同的含义，指克隆抗体重链的可变区，构建仅由一个重链可变区组成的单域抗体，它是具有完整功能的最小的抗原结合片段。通常先获得天然缺失轻链和重链恒定区1(CH1)的抗体后，再克隆抗体重链的可变区，构建仅由一个重链可变区组成的单域抗体。
如本文所用，术语“可变”表示抗体中可变区的某些部分在序列上有所不同，它形成了各种特定抗体对其特定抗原的结合和特异性。然而，可变性并不均匀地分布在整个抗体可变区中。它集中于轻链和重链可变区中称为互补决定区(CDR)或超变区中的三个片段中。可变区中较保守的部分称为构架区(FR)。天然重链和轻链的可变区中各自包含四个FR区，它们大致上呈β-折叠构型，由形成连接环的三个CDR相连，在某些情况下可形成部分折叠结构。每条链中的CDR通过FR区紧密地靠在一起并与另一链的CDR一起形成了抗体的抗原结合部位(参见Kabat等,NIH Publ.No.91-3242,卷I， 647-669页(1991))。恒定区不直接参与抗体与抗原的结合，但是它们表现出不同的效应功能，例如参与抗体的依赖于抗体的细胞毒性。
脊椎动物抗体(免疫球蛋白)的“轻链”可根据其恒定区的氨基酸序列归为明显不同的两类(称为κ和λ)中的一类。根据其重链恒定区的氨基酸序列，免疫球蛋白可以分为不同的种类。主要有5类免疫球蛋白：IgA,IgD,IgE,IgG和IgM，其中一些还可进一步分成亚类(同种型)，如IgG1,IgG2,IgG3,IgG4, IgA和IgA2。对应于不同类免疫球蛋白的重链恒定区分别称为α、δ、ε、γ、和μ。不同类免疫球蛋白的亚单位结构和三维构型是本领域人员所熟知的。
一般，抗体的抗原结合特性可由位于重链和轻链可变区的3个特定的区域来描述，称为可变区域(CDR)，将该段间隔成4个框架区域(FR)，4个FR的氨基酸序列相对比较保守，不直接参与结合反应。这些CDR形成环状结构，通过其间的FR形成的β折叠在空间结构上相互靠近，重链上的CDR和相应轻链上的CDR构成了抗体的抗原结合位点。可以通过比较同类型的抗体的氨基酸序列来确定是哪些氨基酸构成了FR或CDR区域。
本发明中，多肽元件不仅可包括完整的抗体，还包括具有免疫活性的抗体的片段(如如Fab或 (Fab’)2片段；抗体重链；或抗体轻链)或抗体与其他序列形成的融合蛋白。因此，本发明还包括所述抗体的片段、衍生物和类似物。
靶向配体
靶向配体(或靶蛋白部分或靶蛋白配体或配体)是能够结合目标靶蛋白的小分子。
本申请的一些实施方案涉及靶标分子，代表性的靶标分子其包括但不限于：叶酸、Hsp90抑制剂、激酶抑制剂、MDM2抑制剂、靶向含人BET溴结构域的蛋白的化合物、靶向胞质信号蛋白FKBP12 的化合物、HDAC抑制剂、人赖氨酸甲基转移酶抑制剂、血管生成抑制剂、免疫抑制化合物和靶向芳基烃受体(AHR)的化合物。
在某些实施方案中，靶向配体是能够结合激酶、BET含溴结构域的蛋白、胞质信号蛋白(例如 FKBP12)、核蛋白、组蛋白脱乙酰酶、赖氨酸甲基转移酶、调节血管生成的蛋白、调节免疫应答的蛋白、芳烃受体(AHR)、***受体、雄激素受体、糖皮质激素受体或转录因子(例如，SMARCA4、 SMARCA2、TRIM24)。
在某些实施方案中，靶向配体能够结合的激酶包括但不限于：酪氨酸激酶(例如，AATK、ABL、 ABL2、ALK、AXL、BLK、BMX、BTK、CSF1R、CSK、DDR1、DDR2、EGFR、EPHA1、EPHA2、EPHA3、EPHA4、EPHA5、EPHA6、EPHA7、EPHA8、EPHA10、EPHB1、EPHB2、EPHB3、EPHB4、 EPHB6、ERBB2、ERBB3、ERBB4、FER、FES、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4、FGR、FLT1、 FLT3、FLT4、FRK、FYN、GSG2、HCK、HRAS、HSP90、IGF1R、ILK、INSR、INSRR、IRAK4、 ITK、JAK1、JAK2、JAK3、KDR、KIT、KRAS、KSP、KSR1、LCK、LMTK2、LMTK3、LTK、 LYN、MATK、MERTK、MET、MLTK、MST1R、MUSK、NPR1、NRAS、NTRK1、NTRK2、NTRK3、 PDGFRA、PDGFRB、PLK4、PTK2、PTK2B、PTK6、PTK7、RET、ROR1、ROR2、ROS1、RYK、 SGK493、SRC、SRMS、STYK1、SYK、TEC、TEK、TEX14、TIE1、TNK1、TNK2、TNNI3K、TXK、TYK2、TYRO3、YES1或ZAP70)、丝氨酸/苏氨酸激酶(例如酪蛋白激酶2、蛋白激酶A、蛋白激酶B、蛋白激酶C、Raf激酶、CaM激酶、AKT1、AKT2、AKT3、ALK1、ALK2、ALK3、ALK4、 AuroraA、AuroraB、AuroraC、CHK1、CHK2、CLK1、CLK2、CLK3、DAPK1、DAPK2、DAPK3、 DMPK、ERK1、ERK2、ERK5、GCK、GSK3、HIPK、KHS1、LKB1、LOK、MAPKAPK2、MAPKAPK、 MEK、MNK1、MSSK1、MST1、MST2、MST4、NDR、NEK2、NEK3、NEK6、NEK7、NEK9、 NEK11、PAK1、PAK2、PAK3、PAK4、PAK5、PAK6、PIM1、PIM2、PLK1、RIP2、RIP5、RSK1、 RSK2、SGK2、SGK3、SIK1、STK33、TAO1、TAO2、TGF-β、TLK2、TSSK1、TSSK2、ΜLK1 或ΜLK2)、周期素依赖性蛋白激酶(例如Cdk1-Cdk11)和富含亮氨酸的重复激酶(例如LRRK2)。
靶标分子
在本发明的式I所示的偶联物中，通过偶联物中的RT(靶标分子部分)来结合靶标蛋白。
在本发明中，靶标分子可以是靶标分子A、靶标分子T、或其组合。
在本发明中，所述靶标分子可以是所述靶标蛋白的任意一种抑制剂。所述靶标分子可以是所述靶标蛋白的高效抑制剂，也可以活性比较差的抑制剂。具体地，本发明的靶标分子可以是针对本领域任一种靶标蛋白的本领域已知的小分子抑制剂。
在某些实施方案中，本文所用的靶标分子具有可与连接头进行连接的基团(如-O-，-NRa-(其中，Ra为H、或C1-6烷基等取代基，-CO-、-COO-等等)，以一价与本发明的连接体分子(如本发明中L1) 对接成醚、胺、酰胺等等，从而形成靶标分子部分。
所述靶标蛋白可以是本领域已知的各种靶标蛋白，代表性的例子包括(但并不限于)：MDM2、 AKT、BCR-ABL、Tau、BET(BRD2,BRD3,BRD4)、ERRα、FKBP12、RIPK2、ERBB3、雄激素受体、MetAP2、TACC3、FRS2α、PI3K、DHFR、GST、Halo Tag、CRABPI,CRABPII、RAR、芳烃受体、***受体。不同的靶标蛋白和一些相应的抑制剂可市售获得或用常规方法制备。例如，对于MDM2，其抑制剂可参见WO2017176957、WO2017176958A1等文献。
在另一个具体实施方案中，RT选自表B1或表B2
表B1
Figure BDA0003295775120000221
表B2
Figure BDA0003295775120000222
各式中，RPa选自下组：任选取代的C1-6烷基、任选取代的C2-6烯基、任选取代的C2-6炔基。
在另一个优选方案中，式P1如下述任一所示
Figure BDA0003295775120000223
E3连接酶配体
在本发明中，E3连接酶配体部分(RE3)用于结合E3连接酶。
在一个具体实施方案中，代表性的E3连接酶配体部分具有如式A1或A2所示的结构：
Figure BDA0003295775120000224
式A中，RX选自：无、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、O、NH、S、CO或SOn(n为1或2)等；RY为CH2、C＝S、CO；而且，所述E3连接酶配体(式I中的RE3)可通过其中的RX基团与本发明的 L1进行连接，如-Rx-L1-RT(如-O-L1-RT)；
或者，代表性的E3连接酶配体部分具有如式A1b所示的结构：
Figure BDA0003295775120000231
式A1b中，R'为H或C1-C6烷基(如Me)，R为H、或C1-C6烷基(如Me或Et)。
在某些实施方案中，本文所用E3连接酶配体具有可与连接头进行连接的基团(如-O-，-NRa-(其中，Ra为H、或C1-C6烷基等取代基)，-CO-、-COO-等等)，以一价与本发明的连接体分子(如本发明中L1等)对接成醚、胺、酰胺等等。
在另一个具体实施方案中，本发明所用的RE3(E3连接酶配体部分)选自表C：
表C
Figure BDA0003295775120000232
在另一优选例中，RE3为式A1.2或式A2.2。
连接体分子(如本文中所述的L1)
本发明的连接体分子用于连接靶标分子和E3连接酶配体。例如通过两端的官能团(例如-OH、 -SH、-NH2、-NHR、-SOOH或-COOH)与靶标分子或E3连接酶配体连接；其中，R选自：取代或未取代的C1-C10烷基、-(C＝O)-R'、(C＝O)NH-R'、-NH(C＝O)-R'、-SO2-R'、-NHSO2-R'、-SO2NH-R'、 -SO-R'、-NHSO-R'、-SONH-R'、-PO3-R'、-NHCOO-R'、-COO-R'或-NH-CO-NH-R'、-NH-CO-O-R' 或-X’-L3-Z；其中L3为连接基团，而Z为多肽元件(如配体、抗体或其肽段等)或者靶向分子如具有靶向功能的小分子(如叶酸、HSP90抑制剂等)。
连接体(头)和偶联方法
本发明的连接体(头)L1用于连接靶标分子(部分)RT和E3连接酶配体(部分)RE3。
优选地，所述靶标分子(部分)或E3连接酶配体(部分)可以通过-O-、-S-、-NH-、-NR-、-(C＝O)-、 -(C＝O)O-、-SO2-等基团与连接体连接。
在本发明的连接体上，还可进一步含有其它各种官能团，例如-OH、-NHR、-SH等官能团。
典型地，本发明的连接体L1，可以以下通式II表示：
-W1-L2-W2-              式II
式中，W1、L2、W2的定义如本发明第一方面中所述。
在另一优选例中，W1和W2各自独立地为以下一价基团失去1个氢原子形成的二价所形成的二价基团：-OH、-NH2、-SH、-COOH、-SO2H等等。例如，连接体与靶标分子的连接方式可以通过如下所示的连接基团进行连接：
Figure BDA0003295775120000241
或者，W1和W2各自独立地包括具有刚性的部分(如含四元、五元、或六元脂肪环(饱和碳环)部分、或者五元或、六元芳香性杂环部分等)的二价连接基团，示例性的实例如下以及实施例中所示：
Figure BDA0003295775120000242
其中，上述各式中的R如上定义；n为1或2或3。
在一个具体实施方案中，W1和W2各自独立地选自下组：
无、-N(Ra)-、-C(Rb)2-、-N(Ra)-C(Rb)2-、-C(O)-、-C(O)-N(Ra)-、-C(Rb)2-C≡C-、-C≡C-、-C(O)-C≡C-、 -CH(OH)-C≡C-、-O-、-S-、-SO2-、-SO-、-PO3-、-C(Rb)＝C(Rb)-、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的5至10元杂芳基。
活性成分
如本文所用，术语“本发明化合物”指式I所示的化合物或偶联物。该术语还包括及式I化合物的各种晶型形式、或药学上可接受的盐。
具体地，本发明提供了一类具有适于进一步与多肽元件(例如，抗体、蛋白配体等)或靶标分子 T连接或者连接有多肽元件或靶标分子T的如式I所示的偶联物；
RT-L1-RE3      (I)
其中，RL为E3连接酶配体部分，RT为靶标分子部分，L1为连接RT和RE3部分的连接头。
优选地，RL、RT和L1的定义如前所述。
在一个具体实施例中，本发明提供的适于进一步与多肽元件或靶标分子T连接的偶联物如式IV 所示；
RT-W1-L6-W2-RE3      (IV)
其中，RT、RE3、W1、W2和L7如前定义。
在一个具体实施例中，本发明提供的连接有多肽元件或靶标分子T的偶联物如式V所示；
RT-W1-L7-W2-RE3      (V)；
其中，RT、RE3、W1、W2和L7的定义如前所述。
在一个具体实施方案中，本发明还提供了如RT-W1-L5-Wb-C≡C-RE3(1-1)、RT-W1-L5-CO-RE3(1-2) 或RT-W1-L5-CONH-RE3(1-3)所示的偶联物；
其中，Wb的定义同W的定义；W1、RT、RE3和L5的定义如前所述。
在另一优选例中，式1-1中，W1选自下组：NH、O；较佳地，W为NH。
在另一优选例中，式1-1中，Wb选自下组：无、-CH2-、-CH(OH)-、-C(O)-。
在一个具体实施方案中，本发明提供了如下式所示的偶联物；
Figure BDA0003295775120000243
其中，W1、RT、RE3和R的定义如前所述；优选地，R为H、C1-6烷基(如Me、Et等)；
m＝0、1、2、3等(优选地，m不为0)；
X1、X2和X3各自独立地选自：O、C1-4亚烷基、
Figure BDA0003295775120000251
优选地，W1为W，且W如前定义。更优选地，W1为NH。
在一个具体实施方案中，本发明还提供了如下式所示的偶联物；
Figure BDA0003295775120000252
各式中，
R、R1、RT和RE3如前定义；
Z1、Z2和Z3各自独立地选自：O、C1-4亚烷基、-CH(OH)-、
Figure BDA0003295775120000253
m＝0,1,2,3,4等整数。
在另一个具体实施方案中，所述的偶联物选自组1的偶联物：
组1
Figure BDA0003295775120000254
Figure BDA0003295775120000261
Figure BDA0003295775120000271
Figure BDA0003295775120000281
Figure BDA0003295775120000291
Figure BDA0003295775120000301
其中，RT、RE3、R和R1如前定义；优选地，R和R1各自独立地为-W3-L3-W4-(RP)q，其中，W3、 L3、W4、RP和m如前定义。
在一个具体实施方案中，本发明还提供了如RT-W1-L6-Wb-C≡C-RE3(1a-1)、 RT-W1-L6-CO-RE3(1a-2)或RT-W1-L6-CONH-RE3(Ia-3)所示的偶联物；
其中，Wb的定义同W的定义；W1、RT、RE3和L5的定义如前所述。
在一个具体实施方案中，本发明还提供了如RT-Wa-L6-Wb-C≡C-RE3所示的偶联物；其中，Wa和Wb的定义同W的定义；RT、RE3和L6的定义如前所述。
在另一个优选的实施方案中，Wa选自下组：NH、O；较佳地，W为NH。
在另一个优选的实施方案中，Wb选自下组：无、-CH2-、-CH(OH)-、-C(O)-。
在另一个具体实施方案中，所述的偶联物选自组1a的偶联物：
组1a
Figure BDA0003295775120000302
Figure BDA0003295775120000311
Figure BDA0003295775120000321
Figure BDA0003295775120000331
Figure BDA0003295775120000341
其中，RT和RE3如前定义。
在一个具体实施方案中，
本发明还提供了如RT-Wa-Cr1-Wa-Cr2-L5-W2-RE3(2)所示的偶联物；
其中，
Wa的定义同W的定义；
Cr1为无，或者未取代或被C1-4烷基所取代的C4-7环烷基或4至6元杂环基；
Cr2为未取代或被C1-4烷基所取代的4至6元含氮杂环基，且Cr2中至少一个氮杂原子与L5连接；
W、RT、RE3、W2和L5的定义如前所述。
在另一优选例中，W2选自下组：Wb-C≡C、C(O)、C(O)NH。
在另一个具体实施方案中，本发明还提供了如RT-Wa-Cr1-Cr2-L5-Wb-C≡C-RE3所示的偶联物；
其中，Wa和Wb的定义同W的定义；
Cr1为无，或者未取代或被C1-4烷基所取代的C4-7环烷基或4至6元杂环基；
Cr2为未取代或被C1-4烷基所取代的4至6元含氮杂环基，且Cr2中至少一个氮杂原子与L5连接；
RT、RE3和L5的定义如前所述。
优选地，Wa选自下组：NH、O；较佳地，Wa为NH。
优选地，Wb选自下组：无、-CH2-、-CH(OH)-、-C(O)-。
优选地，所述的偶联物选自下组：
RT-NH-Cr1-Cr2-L5-CH2-C≡C-RE3；
RT-NH-Cr1-Cr2-L5-C(O)-C≡C-RE3；
RT-NH-Cr1-Cr2-L5-CH(OH)-C≡C-RE3；
RT-NH-Cr1-Cr2-L5-C≡C-RE3；各式中，RT、RE3、Cr1、Cr2和L5的定义如前所述。
优选地，所述的偶联物选自下组：
RT-NH-Cr1-Cr2-L8-C≡C-RE3；
其中，RT、RE3、Cr1、Cr2和L8的定义如前所述。
在另一优选例中，Cr1为无或
Figure BDA0003295775120000351
其中，Y1和Y2各自独立地选自：CH和N；n1＝0、1或2；和n2＝1或2。
在另一优选例中，Cr2为
Figure BDA0003295775120000352
其中，*代表与L5连接的位置；Y3选自：CH和N，n3＝0、1 或2；和n4＝1或2。
在另一优选例中，Cr1选自下组：
无、
Figure BDA0003295775120000353
在另一优选例中，Cr2选自下组：
Figure BDA0003295775120000354
在一个具体实施方案中，本发明提供了如下式所示的偶联物；
Figure BDA0003295775120000355
Figure BDA0003295775120000361
其中，
X4选自下组：CH2、O、NH、NR；
Y1和Y3各自独立地选自下组：CH、N；
Wa选自下组：NH、O；
m＝0、1、2、3等(优选地，m不为0)；
n＝0、1、2、3等(优选地，n不为0)；
RT、RE3和R的定义如前所述；优选地，R为H、C1-6烷基(如Me、Et等)、Ac、CHO、CONH2。
在另一个具体实施方案中，所述的偶联物为选自组2的偶联物：
组2
Figure BDA0003295775120000362
Figure BDA0003295775120000371
其中，RT、RE3、R和R1如前定义；优选地，R和R1各自独立地为-W3-L3-W4-(RP)q，其中，W3、 L3、W4、RP和m如前定义。
在一个具体实施方案中，本发明还提供了如RT-Wa-Cr1-Wa-Cr2-L6-W2-RE3(I-2a)所示的偶联物；
其中，
Wa的定义同W的定义；
Cr1为无，或者未取代或被C1-4烷基所取代的C4-7环烷基或4至6元杂环基；
Cr2为未取代或被C1-4烷基所取代的4至6元含氮杂环基，且Cr2中至少一个氮杂原子与L5连接；
W、RT、RE3、W2和L5的定义如前所述。
在另一优选例中，W2选自下组：Wb-C≡C、C(O)、C(O)NH。
在另一个具体实施方案中，本发明还提供了如RT-Wa-Cr1-Cr2-L6-Wb-C≡C-RE3所示的偶联物；其中，Wa、Wb、Cr1、Cr2、RT、RE3和L5的定义如前所述。
优选地，所述的偶联物选自下组：
RT-NH-Cr1-Cr2-L6-CH2-C≡C-RE3；
RT-NH-Cr1-Cr2-L6-C(O)-C≡C-RE3；
RT-NH-Cr1-Cr2-L6-CH(OH)-C≡C-RE3；
和RT-NH-Cr1-Cr2-L6-C≡C-RE3；
各式中，RT、RE3、Cr1、Cr2和L6的定义如前所述。
在另一个具体实施方案中，所述的偶联物为选自组2a中的偶联物：
组2a
Figure BDA0003295775120000381
Figure BDA0003295775120000391
Figure BDA0003295775120000401
在一个具体实施方案中，本发明提供了如RT-Ar1-L5-W2-RE(3)所示的偶联物；
其中，Ar1为-五或六元含氮杂芳基-；L5、RT、W2和RE3如前定义。
在另一优选例中，W2选自：-CONH-、-CO-、-CONH-、-Wb-C≡C-。
在一个具体实施方案中，本发明提供了如RT-Ar1-L5-CONH-RE3、RT-Ar1-L5-CO-RE3或RT- -Ar1-L5-Wb-C≡C-RE3所示的偶联物；
其中，Ar1为-五或六元含氮杂芳基-；L5、RT和RE3如前定义。
在另一优选例中，Ar1为
Figure BDA0003295775120000402
其中，V1、V2和V4各自独立地选自：-O-、-S-、-N＝、-NH-、 -CH＝、-CH2-；V3选自下组：-N＝、-CH＝。
在一个具体实施方案中，本发明提供了如下式所示的偶联物；
Figure BDA0003295775120000403
各式中，
V1、V2和V4各自独立地选自：-O-、-S-、-N＝、-NH-、-CH＝、-CH2-；
V3选自下组：-N＝、-CH＝；
R、R1、RT和RE3如前定义；
m＝0,1,2,3,4等整数(较佳地，m不为0)。
在一个具体实施方案中，本发明提供了如下式所示的偶联物；
Figure BDA0003295775120000411
各式中，
R、R1、RT和RE3如前定义；
m＝0,1,2,3,4等整数(较佳地，m不为0)。
在另一个具体实施方案中，所述的偶联物选自组3：
组3
Figure BDA0003295775120000421
Figure BDA0003295775120000431
Figure BDA0003295775120000441
Figure BDA0003295775120000451
Figure BDA0003295775120000461
Figure BDA0003295775120000471
Figure BDA0003295775120000481
其中，RT、RE3、R和R1如前定义；优选地，R和R1各自独立地为-W3-L3-W4-(RP)q，其中，W3、 L3、W4、RP和m如前定义。
在一个具体实施方案中，本发明还提供了如RT-Ar1-L6-W2-RE所示的偶联物；
其中，Ar1、L5、RT、W2和RE3如前定义。
在一个具体实施方案中，本发明提供了如RT-Ar1-L6-CONH-RE3、RT-Ar1-L6-CO-RE3或RT- -Ar1-L6-Wb-C≡C-RE3所示的偶联物；其中，Ar1、L6、RT和RE3如前定义。
在另一个具体实施方案中，所述的偶联物选自组3a-1～组3a-5；组3a
Figure BDA0003295775120000491
Figure BDA0003295775120000501
Figure BDA0003295775120000511
Figure BDA0003295775120000521
Figure BDA0003295775120000531
Figure BDA0003295775120000541
其中，RT和RE3如前定义。
ACTED
在本发明中，当靶标分子为抗体，或多肽，或环肽，或者叶酸受体配体，或者HSP90配体，或其他细胞外靶蛋白配体时，也可将本发明的偶联物简称为ACTED或ACTED分子或ACTED化合物。
一些ACTED化合物列举如下：
其中，TED是指如式I所示偶联物或如式VI所示的TED化合物失去N上的基团所形成的一价基团；
RP、L4如前定义。
在一个具体实施例中，本发明的ACTED实例包括但不限于选自下组的化合物或偶联物：
Figure BDA0003295775120000552
本发明的主要优点包括：
(a)本发明的偶联物TED，对肿瘤细胞上活性高，且具有细胞选择性，安全性好。
(b)本发明的偶联物TED，可以催化量发挥抑制细胞增殖的效果。细胞内能够循环发挥降解靶蛋白的作用，实现减少给药剂量，延长给药周期，达到安全有效的抗肿瘤效果。
(c)本发明的偶联物TED,连接头(L1)部分带有可与药物递送载体(如抗体，多肽，其他小分子配体)链接的活性位点。
下面结合具体实施方案，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。
除非特别说明，实施例中所用的起始原料或化合物均可市售获得或者通过本领域技术人员已知方法制备得到。
制备实施例
除非特别说明，实施例中所用的起始原料或化合物均可市售获得或者通过本领域技术人员已知方法制备得到。
通用方法
通用方法1:化合物P1.1-Linker-Ligand A的合成方法
Figure BDA0003295775120000561
式中，A为A1或A2所示的结构。在N2条件保护下，化合物P1.1(20mg,1eq.),Linker-Ligand A (1eq.),HATU(2eq.)and DIEA(3eq.)溶解于DMF(2mL)中，室温反应18小时。将反应液倒入5mL 水中，用乙酸乙酯萃取(5mL*3)。合并有机相后用饱和食盐水洗(10mL*3)，无水Na2SO4干燥，减压浓缩，得到粗品进行薄层色谱硅胶板(DCM/MeOH＝10/1)分离制备得到目标物。
在上述目标物溶于DCM(3mL),加入0.5mL(HCl/二氧六环4M)，室温反应1小时。反应液浓缩后用***洗(5mL*3)，过滤得到白色固体目标产物P1.1-Linker-Ligand A
通用方法2:化合物P1.1–Linker g-Ligand A的合成方法
Figure BDA0003295775120000562
式中，A为A1或A2所示的结构。
化合物(R)-8-环戊基-7-乙基-2-((4-乙炔基-2-甲氧基苯基)氨基)-5-甲基-7,8-二氢蝶呤-6(5H)-酮 (1eq)、N3-linker-Ligand A(1eq.)、TBTA(1eq.),[Cu(CH3CN)4]PF6(Cat.)溶解于叔丁醇(5mL)和水，该混合物室温反应16小时至4天。反应液减压浓缩后用硅胶柱纯化(MeOH/DCM＝10％)得到白色固体化合物。
在上述目标物溶于DCM(3mL),加入0.5mL(HCl/二氧六环4M)，室温反应1小时。反应液浓缩后用***洗(5mL*3)，过滤得到白色固体目标产物P1-Linker-Ligand A
通用方法3:化合物R1-Linker-Lig和A的合成方法
Figure BDA0003295775120000563
式中，A为A1或A2所示的结构。
化合物R1/R2(20mg,1eq.)、Linker-Lig和A(1eq.)、HATU(2eq.)和DIEA(3eq.)加料完成后，在氮气保护下室温反应18小时。将反应液倒入5mL水中，用乙酸乙酯萃取(5mL*3)。合并有机相后用饱和食盐水洗(10mL*3)，无水Na2SO4干燥，减压旋蒸浓缩，得到粗品进行薄层色谱硅胶板(DCM/MeOH＝10/1)分离制备得到目标物
在上述目标物溶于DCM(3mL),加入0.5mL(HCl/二氧六环4M)，室温反应1小时。反应液浓缩后用***洗(5mL*3)，过滤得到白色固体目标产物R1-Linker-Lig和A
通用方法4:化合物R2-Linker-Lig和A的合成方法
Figure BDA0003295775120000571
式中，A为A1或A2所示的结构。
化合物R1/R2(20mg,1eq.),Linker-Lig和A(1eq.),EDCI(2eq.),HOBT(2eq.)溶解于DIEA (3eq.)in DMF(2mL)加料完成后，在氮气保护下室温反应18小时。将反应液倒入5mL水中，用乙酸乙酯萃取(5mL*3)。合并有机相后用饱和食盐水洗(10mL*3)，无水Na2SO4干燥，减压旋蒸浓缩，得到粗品进行薄层色谱硅胶板(DCM/MeOH＝10/1)分离制备得到目标物
在上述目标物溶于DCM(3mL),加入0.5mL(HCl/二氧六环4M)，室温反应1小时。反应液浓缩后用***洗(5mL*3)，过滤得到白色固体目标产物R2-Linker-Lig和A
通用方法5:化合物R1/R2–Linker-Lig和A的合成方法
Figure BDA0003295775120000572
式中，A为A1或A2所示的结构。
化合物R1/R2(1eq.),N3-Linker-Lig和A(1eq.),TBTA(1eq.),[Cu(CH3CN)4]PF6(Cat.)溶于 t-BuOH(5mL)和water(1mL)，室温反应16小时至4天。反应完成后，浓缩得到粗品，粗品用硅胶柱纯化得到白色固体。
在上述目标物溶于DCM(3mL),加入0.5mL(HCl/二氧六环4M)，室温反应1小时。反应液浓缩后用***洗(5mL*3)，过滤得到白色固体目标产物R1/R2–Linker-Lig和A
通用方法6:化合物M–Linker-Lig和A的合成方法
Figure BDA0003295775120000581
式中，A为A1或A2所示的结构。
化合物NH2-Linke-Lig和A(1eq.)溶于吡啶，然后加入二(对硝基苯)碳酸酯(1eq)，室温反应2 小时。然后加入M(1eq)和DIPEA后得到黄色反应液，接着室温反应1小时。反应液浓缩后用硅胶柱纯化得到白色固体。
在上述目标物溶于DCM(3mL),加入0.5mL(HCl/二氧六环4M)，室温反应1小时。反应液浓缩后用***洗(5mL*3)，过滤得到白色固体目标产物M–Linker-Lig和A
通用方法7:化合物R3-Linker-Ligand E的合成方法
Figure BDA0003295775120000582
式中，E为A1、A2或B1所示的结构。
化合物R3(20mg,1eq.)，Linker-Ligand E(2eq.)以及催化量AcOH(1drop)溶于甲醇/二氯甲烷＝1/10(10mL)室温反应18小时。再加入NaCNBH3(3eq.)并继续室温反应3小时。反应液浓缩后水(5 mL)洗一次,乙酸乙酯(10mL)萃取两次,有机相浓缩后通过制备得到目标产物R3-Linker-Ligand E。
制备实施例
化合物UB-180937的合成方法
Figure BDA0003295775120000583
以类似于通用方法1的方法合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.01(s,1H),9.70(s,1H), 8.98(s,2H),7.95(d,J＝5.4Hz,1H),7.87–7.80(m,2H),7.73(dd,J＝7.6,1.1Hz,1H),7.68–7.58 (m,3H),7.53(t,J＝7.6Hz,1H),5.16(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H),4.51–4.45(m,2H),4.33(s,1H),4.17 (d,J＝8.8Hz,1H),3.94(s,4H),3.81(t,J＝5.3Hz,2H),3.70(t,J＝6.7Hz,2H),3.18(d,J＝26.3Hz, 6H),2.99–2.88(m,1H),2.80(t,J＝6.7Hz,2H),2.59(d,J＝17.8Hz,1H),2.46(dd,J＝13.1,4.2Hz, 1H),2.09–1.73(m,13H),1.63–1.39(m,6H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H).LCMS[M/2+1]+＝431.1
化合物UB-180934的合成方法
Figure BDA0003295775120000591
以类似于通用方法1的方法合成。LCMS[M+1]+＝899.7
1H NMR(400MHz,)δ11.02(s,1H),8.41(d,J＝8.5Hz,1H),7.84(d,J＝12.8Hz,2H),7.69(t,J ＝14.8Hz,2H),7.57–7.51(m,2H),7.51–7.44(m,2H),5.17(dd,J＝13.2,5.2Hz,1H),4.46(d,J＝17.7Hz,1H),4.39–4.28(m,2H),4.25(dd,J＝7.7,3.6Hz,1H),3.95(d,J＝7.9Hz,4H),3.25(s,3H), 2.96(d,J＝18.8Hz,2H),2.72–2.63(m,2H),2.59(s,1H),2.43(s,1H),2.06(d,J＝18.5Hz,7H),1.94 –1.71(m,11H),1.71–1.50(m,9H),0.77(t,J＝7.4Hz,3H).
化合物UB-180961的合成
Figure BDA0003295775120000592
步骤1:UB-180961c
化合物UB-180961a(20g,71.1mmol)溶于干燥的DMF(80mL)并冷却至0℃，再加入NaH (16.8g,107mmol)至反应液中。半小时后，UB-180961b(21.1g,107mmol)溶于干燥DMF(20mL)并滴加至反应液中，室温反应过夜。向反应液中加入冰水(100mL)并用EtOAc(60mL)萃取三次,有机相合并后通过柱层析(PE/EtOAc＝0-100％)分离得到无色油状目标产物UB-180961c(25g，47％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.63(t,J＝5.2Hz,1H),3.72–3.52(m,8H),2.47(td,J＝7.0,2.6 Hz,2H),1.98(t,J＝2.7Hz,1H),1.28-1.21(m,6H).
步骤2:UB-180961d
化合物UB-180961c(15g,285.4mmol)溶于水(40mL)后加入浓HCl(10mL)并室温反应过夜。反应液用DCM(50mL)萃取3次，有机相用无水硫酸钠干燥后，浓缩得到无色油状目标产物 UB-180961d(7.6g)。该粗产物直接用于下一步反应。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.74(d,J＝0.8Hz,1H),4.15(d,J＝0.8Hz,2H),3.72–3.67(m, 2H),2.54(t,J＝2.7Hz,2H),2.02(t,J＝3.4Hz,1H).
步骤3:UB-180961f
化合物UB-180961d(7.8g,68mmol)和UB-180961e(7.6g,68mmol)溶于DCE(100mL)后室温反应1小时，再加入NaBH(OAc)3(29.6g,136mmol)继续室温反应过夜，向反应液中加入TEA(5mL, sat)以及Boc2O(6g,23.8mmol)后室温反应18小时，反应液用EtOAc(15mL)萃取2次,有机相用无水 Na2SO4干燥后通过柱层析分离(PE/EtOAc＝0-100％)得到黄色油状目标产物UB-180961f(4.6g,57％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.14(ddd,J＝28.9,14.7,7.4Hz,5H),2.67(t,J＝11.7Hz,2H),1.82 (dd,J＝14.1,7.0Hz,2H),1.70(d,J＝12.3Hz,2H),1.59(d,J＝18.5Hz,4H),1.46(s,9H),1.19(dd,J＝ 12.2,4.0Hz,2H).
步骤4:UB-180961g
化合物UB-180961f(4.6g,15mmol)以及A1-I(3.7g,10mmol),Pd(PPh3)2Cl2(701mg，1mmol), CuI(190mg,1mmol),TEA(4.2ml,30mmol)溶于干燥的DMF(120mL)后在80℃条件下反应过夜。反应液用EtOAc(15mL)萃取两次,有机相用无水Na2SO4干燥后通过柱层析分离(PE/EtOAc＝0-100％) 得到黄色固体目标产物UB-180961g(3.6g,57％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.00(s,1H), 7.72(d,J＝6.9Hz,1H),7.63(d,J＝7.2Hz,1H),7.53(t,J＝7.6Hz,1H),5.15(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H), 4.46(dd,J＝18.0,11.1Hz,2H),4.30(d,J＝17.7Hz,1H),3.62(t,J＝6.6Hz,2H),3.47(t,J＝6.5Hz, 2H),3.30–3.15(m,3H),2.98–2.87(m,1H),2.71(t,J＝6.7Hz,2H),2.59(d,J＝18.0Hz,1H),2.44(dd, J＝13.1,4.4Hz,1H),2.07–1.98(m,1H),1.79-1.77(d,J＝11.1Hz,2H),1.53(s,4H),1.37(s,9H),1.21 –1.08(m,2H).
步骤5:UB-180961h
化合物UB-180961g(3.6g,33.8mmol),TEA(10.3g,10.2mmol)以及DMAP(12.4g,10.2mmol) 溶于干燥的DMF(140mL)后在0℃条件下加入TsCl(14.6g,7.7mmol)。反应液升至30℃后反应15 小时。反应液用DCM(50mL)萃取两次,有机相浓缩后通过柱层析分离(PE/EtOAc＝0-100％)得到白色固体目标产物UB-180961h(3.6g,86％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.01(s,1H),7.78(d,J＝8.3Hz,2H),7.73(dd,J＝7.5,0.8Hz,1H), 7.63–7.59(m,1H),7.52(t,J＝7.6Hz,1H),7.46(d,J＝8.0Hz,2H),5.16(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H), 4.37(dt,J＝41.1,17.7Hz,3H),3.60(t,J＝6.6Hz,2H),3.44(t,J＝6.5Hz,2H),3.19(s,2H),2.91(d,J＝ 12.3Hz,1H),2.70(t,J＝6.6Hz,2H),2.59(d,J＝16.2Hz,1H),2.46–2.37(m,4H),2.05–2.00(m,1H), 1.78(d,J＝8.3Hz,2H),1.64–1.43(m,6H),1.36(d,J＝5.1Hz,9H).
步骤6:UB-180961i
化合物V2407-048(3.6g,5.1mmol)以及NaN3(667mg,10.2mmol)溶于DMF(10mL)后在 80℃反应过夜。反应液用EtOAc(100mL)萃取两次,有机相干燥后通过柱层析分离(PE/EtOAc＝ 0-100％)得到白色固体目标产物UB-180961i(2.4g,68％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.00(s,1H),7.72(d,J＝7.4Hz,1H),7.63(d,J＝7.3Hz,1H),7.52 (t,J＝7.6Hz,1H),5.15(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H),4.44(d,J＝17.7Hz,1H),4.31(d,J＝17.7Hz,1H), 3.92(s,1H),3.63(t,J＝6.6Hz,2H),3.49(t,J＝6.3Hz,2H),3.24(s,2H),3.00–2.85(m,1H),2.73(t,J ＝6.6Hz,2H),2.61(s,1H),2.46–2.37(m,1H),2.02(d,J＝5.5Hz,1H),1.93–1.44(m,8H),1.38(s, 10H).
步骤7:UB-180961
以类似于通用方法2的方法合成。LCMS[M+H]+＝884.6；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.08(s,1H),11.01(s,1H),9.62(s,1H),8.96(m,3H),7.76–7.68(m,3H),7.66–7.61(m,2H),7.56– 7.49(m,2H),5.16(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H),4.71(m,1H),4.51–4.44(m,2H),4.32(d,J＝17.8Hz,1H), 3.91(s,3H),3.80(t,J＝5.3Hz,2H),3.69(t,J＝6.7Hz,2H),3.32(m,1H),3.21(s,3H),3.16(m,2H), 2.97–2.89(m,1H),2.79(t,J＝6.7Hz,2H),2.59(m,1H),2.44(m,1H),2.05–1.73(m,14H),1.46(m, 2H),1.41–1.33(m,2H),0.75(t,J＝7.4Hz,3H).
化合物UB-181103的合成
Figure BDA0003295775120000611
步骤1:UB-181103b(V2714-018)
向UB-181103a(10g,22mmol)和三乙胺(7.05g,70mmol)的二氯甲烷溶液(10ml)中滴加甲基磺酰氯(6.89g,60mmol)，在室温下搅拌过夜。反应完成后将混合物加水(10ml)并用DCM(10ml*3) 萃取。有机层经Na2SO4干燥并浓缩，得到白色固体UB-181103b(13g,收率:98％.)LCMS[M+H]+＝294.3
步骤2:UB-181103c(V2714-019)
将UB-181103b(13g,44mmol)与叠氮化钠(3.75g,58mmol)混合后溶于DMF(10ml)中，室温搅拌过夜，反应完成后用H2O(300ml)稀释反应液并使用***(2x150 ml)萃取。用H2O(3x100 ml)和盐水(1x100 ml)洗涤有机相，经MgSO4干燥，过滤，并在低压下去除溶剂，得到产物UB-181103c (9g,收率:88％)LCMS[M+H]+＝241.3
步骤3:UB-181103d(V2714-020)
化合物UB-181103c(10g,0.042mmol)以及盐酸二氧六环溶液(100mL,4N)加入到四氢呋喃(10mL)中,室温反应2小时，反应完成后减压旋蒸浓缩，得到化合物UB-181103d(5.8g,收率99％) LCMS[M+H]+＝141.3
步骤4:UB-181103e(V2714-027)
化合物UB-181103d(1.0g,5.68mmol)、对甲苯磺酸3-丁炔酯(1.27g,5.68mmol)以及三乙胺(6.06g, 60mmol)混合后溶于甲苯(20mL)中，80℃下反应18小时，反应完成后过滤，滤液减压旋蒸浓缩，色谱硅胶柱层析分离(DCM/MeOH＝10/1)得到无色油状物UB-181103e(818mg,收率75％)LCMS [M+H]+＝193.3步骤5:UB-181103f(V2714-032)
化合物UB-181103e(350mg,1.82mmol),二叔丁基二碳酸酯(441mg,2.03mmol)以及碳酸氢钠(360mg,4.29mmol)依次加入到四氢呋喃(20mL)中，室温反应2小时。反应完成后倒入10mL水，二氯甲烷提取(5mL*3)。合并有机相后用饱和食盐水洗，无水Na2SO4干燥，减压旋蒸浓缩，得到无色油状化合物UB-181103f(463mg，收率87％)LCMS[M+H]+＝293.3
步骤6:UB-181103g(V2714-033)
将化合物UB-181103f(30mg,0.103mmol)和A3-I(38mg,0.103mmol)溶于DMF(10mL)，加入二氯二(三苯基磷)钯(7.2mg,0.010mmol)、碘化亚铜(3.91mg,0.021mmol)和三乙胺(150mg，1.49 mmol)，80℃反应过夜。反应液经硅藻土过滤，滤液浓缩得到粗品，用快速层析法纯化(用 DCM/MeOH＝0％～20％30min洗脱)，得到产物UB-181103g(9mg,收率17％)。LCMS[M+H]+＝435.5
步骤7:UB-181103h(V2714-034)
将UB-181103g(1g,1.87mmol)溶于THF(10mL)中，加入三甲基膦(402mg，1.87mmol)。室温反应过夜，反应完成后浓缩得到粗品，用快速层析法(DCM/MeOH＝10/1)纯化得到产物 UB-181103h(510mg，产率91％)。LCMS[M+H]+＝409.5
步骤8:UB-181103(V2714-035)
以类似于通用方法6的方法合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.85(s,1H),11.00(s,1H), 9.78(s,1H),9.16(s,2H),8.84(d,J＝4.5Hz,1H),8.69(s,1H),8.27(s,1H),7.80(d,J＝6.8Hz,1H), 7.70(dd,J＝8.3,2.3Hz,2H),7.56(dt,J＝15.9,9.9Hz,3H),7.20(dd,J＝18.0,10.0Hz,1H),6.20(s, 1H),5.11(dd,J＝13.3,5.0Hz,1H),4.46(d,J＝7.7Hz,1H),4.33(d,J＝7.7Hz,1H),3.80(d,J＝7.9Hz, 4H),3.31(t,J＝6.2Hz,4H),3.30–3.15(m,4H),2.98-2.76(m,3H),2.67(dd,J＝3.4,5.7Hz,3H),2.65– 2.51(m,2H),2.45–2.31(m,2H),2.05–1.97(m,1H),1.93–1.77(m,4H),1.70–1.59(m,2H).LCMS [M+H]+＝872.9
化合物UB-181189的合成
Figure BDA0003295775120000621
步骤1:UB-181189(V2962-030)
以类似于通用方法6的方法合成。LCMS[M+H]+＝859.4.
化合物M17的合成方法
Figure BDA0003295775120000622
步骤1:M17-c
向在t-BuOH(30mL)溶液的M17-a(2g，13.2mmol)中加入M17-b(2.4g，13.2mmol)和3.1ml  DIPEA，然后将混合物在90℃下搅拌18小时。将混合物在真空中浓缩，得到固体。加入***超声 10分钟，然后过滤，得到M17-c(1.8g，46％收率)，为白色固体。LCMS[M+H]+＝298.1
步骤2:M17-e
向在n-BuOH(7mL)溶液的M17-c(300mg，1.0mmol)中加入M17-d(279mg，1.0mmol)，将 HCl(0.5mL)加入混合物中，然后搅拌混合物在N2保护下的微波150℃反应1h。将反应混合物加入到***中，过滤，得到M17-e(400mg，90％产率)，为黄色固体。LCMS[M+H]+＝439.1
步骤3:M17-f
向在DCM/MeOH(20ml)溶液的M17-e(480mg,1.6mmol)中加入TEA(325mg,3.2mmol)和 Boc2O(702mg,3.2mmol)，混合物在常温下搅拌2h，浓缩反应混合物，得到粗产物然后通过硅胶色谱柱(DCM/MeOH)中得到M17-f(300mg，51％收率)，为白色固体。LCMS[M+H]+＝539.4
步骤4:M17-g
向在THF/MeOH/H2O(100mL)溶液的M17-f(300mg，0.56mmol)中加入NaOH(111mg，2.78mmol)，然后将混合物在40℃下搅拌16小时。浓缩反应混合物，用1M HCl调节pH为5，用乙酸乙酯(200mL*1)萃取，浓缩有机相，得到M17-g(250mg)，为灰色固体。LCMS[M+H]+＝525.5
步骤5:M17-i
向在DMF(2mL)溶液的M17-g(50mg，0.095mmol)中加入HATU(109mg，0.286mmol)和DIEA(37mg，0.286mmol)，然后在常温中搅拌混合物2小时。然后将M17-h(5.8mg，0.095mmol)加入混合物中，将混合物在常温搅拌持续1小时。浓缩反应混合物，得到粗产物，通过制备TLC 纯化，得到M17-i(40mg，74％收率)，为白色固体。LCMS[M+H]+＝568.6
步骤6:M17
向在DCM(5ml)溶液中的M17-i(30mg，0.056mmol)中加入4M HCl(1ml)，在常温下搅拌1h。将反应混合物加入到***中，过滤，得到M17(45mg)，为白色固体。LCMS[M+H]+＝468.4
化合物M18的合成方法
Figure BDA0003295775120000631
步骤1:M18
向在DCM(3ml)溶液中的M18-a(30mg，0.056mmol)中加入4M HCl(1ml)，在常温下搅拌1h。将反应混合物加入到***中，过滤，得到M18(25mg，90％收率)，为白色固体LCMS[M+H]+＝ 425.4
化合物M19的合成方法
Figure BDA0003295775120000632
步骤1:M19-c
向在DMF(10mL)溶液中的M19-a(200mg，0.381mmol)中加入HATU(434mg，1.14mmol)和 DIEA(147mg，1.14mmol)，然后将混合物在常温下搅拌2小时。然后将M19-b(132mg，1.91mmol) 加入混合物中，将混合物在常温搅拌持续1小时。浓缩反应混合物通过硅胶色谱纯化，得到 M19-c(30mg，15％收率)，为黄色固体。LCMS[M+H]+＝540.6
步骤2:M19
向在DCM(5ml)溶液中的M19-c(30mg，0.056mmol)中加入4M HCl(1ml)，在常温下搅拌1h。将反应混合物加入到***中，过滤，得到M19(25mg，90％收率)，为白色固体。LCMS[M+H]+＝ 440.5
化合物M23的合成方法
Figure BDA0003295775120000633
步骤1:M23-c
化合物M23-a(70mg,0.25mmol),M23-b(68mg,0.25mmol)溶于正丁醇(2mL)后加入催化量 4M HCl二氧六环溶液，微波至150℃1小时。反应液浓缩后通过柱层析分离(MeOH/DCM＝1/10) 得到棕色固体目标产物M23-c(80mg,收率62.3％)。LCMS[M+H]+＝521.2
步骤2:M23-d
M23-c(40mg,0.07mmol)，HATU(44mg,0.11mmol)，DIEA(29mg,0.23mmol)加入 DMF(1mL)在常温中搅拌混合物2小时。然后将BOC-肼(15mg,0.1mol)加入，反应体系在常温搅拌持续1小时。浓缩反应混合物，得到粗产物，制备板纯化得到白色固体M23-d(40mg,收率82％收率)。LCMS[M+H]+＝635.2
步骤3:M23
K2CO3(100mg)加入到M23-d(30mg,0.05mmol)的MeOH(2mL)溶液中，在常温下搅拌反应 16h。将反应混合物过滤，浓缩得到黄色M23(15mg,收率58.9％)。LCMS[M+H]+＝539.2
化合物M24的合成方法
Figure BDA0003295775120000641
步骤1:M24-c
化合物M24-a(50mg,0.18mmol),M24-b(66.25mg,0.18mmol)溶于正丁醇(12mL)后加入 DIPEA(0.1mL)，并通过微波合成仪加热至150℃2小时。反应液浓缩后加入***超声十分钟，过滤得到白色固体M24-c(100mg,收率91.2％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(s,1H),8.39(s,1H),7.70(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.43(dd, J＝7.6,1.6Hz,1H),7.35(td,J＝7.7,1.7Hz,1H),7.24(td,J＝7.5,1.3Hz,1H),5.67(t,J＝5.2Hz,1H), 4.55(d,J＝5.1Hz,2H).LCMS[M+H]+＝298.1
步骤2:M24-e
化合物M24-c(100mg,0.37mmol),M24-d(102.9mg,0.37mmol)溶于正丁醇(5mL)后加入4M HCl二氧六环溶液(0.1mL)，并通过微波合成仪加热至150℃1小时。反应液浓缩后得到黄色固体 M24-c M24-e(70mg,收率37％。LCMS[M+H]+＝511.2
步骤3:M24-f
将化合物M24-e(39mg,0.08mol)以及盐酸二氧六环溶液(1mL,4N)加入到二氯甲烷(5mL) 中,室温反应1小时，反应完成后减压旋蒸浓缩，得到化合物M24(20mg,收率27％)
LCMS[M+H]+＝411.2
化合物M25的合成方法
Figure BDA0003295775120000642
步骤1:M25-c
化合物M24-a M25-a(1500mg,8.29mmol),M25-b(903mg,8.29mmol)溶于正丁醇(30mL)后加入DIPEA(3mL)，反应体系加热至90℃过夜。反应液浓缩后通过硅胶色谱纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到黄色固体M25-c(1.1g,31.2％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.93(s,1H),8.84(s,1H),8.35(s,1H),7.59(dd,J＝7.9,1.7Hz, 1H),7.08(dd,J＝7.8,1.7Hz,1H),6.94(dd,J＝8.1,1.4Hz,1H),6.86(d,J＝1.5Hz,1H).LCMS[M+H] +＝255.2
步骤2:M25
将化合物M25-c(100mg,0.37mmol)，M25-d(103mg,0.37mmol)以及4N盐酸二氧六环溶液 (0.1mL)加入到正丁醇(4mL)中,微波150℃反应1小时，反应完成后减压旋蒸浓缩，得到黄色固体M25(80mg,收率51.6％)LCMS[M+H]+＝397.4
化合物UB-181235的合成方法：
Figure BDA0003295775120000651
步骤1:UB-181235a
将化合物UB-181235a(10g,50mmol)溶解于二氯甲烷(100mL)中，加入甲烷磺酰氯
(6.89g,60mmol)以及三乙胺(7.05g,70mmol)，25℃下反应1小时,反应完成后倒入10mL 水，二氯甲烷提取(10mL*3)萃取。合并有机相后用饱和食盐水洗，无水Na2SO4干燥，减压、旋蒸浓缩，得到粗品经快速柱层析(DCM/MeOH＝10/1)纯化，得到无色油状物UB-181235b(13g,收率:94％.)。LCMS[M+H]+＝280.3
步骤2:UB-181235c
将UB-181235b(13g,47mmol)溶于DMF(100mL)中，添加叠氮化钠(3.75g,58mmol)，在 85℃下于N2下搅拌过夜。反应完成后，过滤浓缩得到粗品，通过硅胶柱层析(DCM/MeOH＝30/1) 纯化得到无色油状物UB-181235c(9g，收率86％)。LCMS[M+H]+＝227.3
步骤3:UB-181235d
在0℃下，将化合物UB-181235c(10g,0.042mmol)以及盐酸二氧六环溶液(100mL,4N)加入到四氢呋喃(10mL)中,室温反应12小时，反应完成后，减压、旋蒸浓缩，得到化合物UB-181235d(5.6g,收率100％)LC-MS:[M+H]+＝127.3
步骤4:UB-181235e
将化合物UB-181235d(1.0g，5.68mmol)、2-氯乙酰氯(1.27g，5.68mmol)和三乙胺(6.06g， 60mmol)加入到二氯甲烷(15ml)中，在30℃下搅拌18小时。粗品通过快速柱层析(PE/乙酸乙酯＝50％～100％20min，然后MeOH/DCM＝0％～10％40min)纯化，得到无色油状化合物 UB-181235e(818mg，收率52％)。LCMS[M+H]+＝203.6
步骤5:UB-181235f
将UB-181235e(0.72g，3.56mmol)、正丁炔胺(0.37g，5.34mmol)和碳酸钾(1.38g，10mmol) 加入到甲苯(15mL)中，在30℃下搅拌18小时。反应完成后通过快速柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝50％～100％20min，然后MeOH/DCM＝0％～10％40min)纯化，得到无色油状化合物UB-181235f(464mg，收率75％)。LCMS[M+H]+＝236.2
步骤6:UB-181235g
将UB-181235f((350mg,1.49mmol)、二叔丁基二碳酸酯(441mg，2.03mmol)加入到二氧六环(13mL)中，在室温下搅拌2小时。反应完成后加水(15mL)，用乙酸乙酯(10mL*3)萃取。浓缩得到的粗品溶解在MeOH/DCM＝10/1(30mL)中并过滤、浓缩，得到无色油状化合物UB-181235g(434mg，收率87％)。LCMS[M+H]+＝336.2
步骤7:UB-181235g
将UB-181235f(30mg，0.09mmol)和3-(5-碘代-1-氧异吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(38mg，0.103 mmol)溶解在无水DMF(10mL)中、加入Pd(PPh3)2Cl2(7.2mg，0.010mmol)和CuI(3.91mg，0.021 mmol)，在氮气保护下，在90℃下反应1h。过滤反应液，真空浓缩得到粗品，通过TLC制备 (DCM/MeOH＝10/1)纯化得到产物UB-181235g(9mg，收率17％)，为白色固体。LCMS[M+H]+＝578.8
步骤8:UB-181235h
将UB-181235g(1g，1.73mmol)溶于THF(10mL)中，在N2保护下加入PMe3(402mg，1.87 mmol)，在室温下搅拌过夜。过滤反应液，滤液浓缩得到粗品，然后通过硅胶柱层析(DCM/MeOH＝10/1)纯化得到产物UB-181235h(867mg，收率91％)，为白色固体。 LCMS[M+H]+＝552.6
步骤9:UB-181235
以类似于通用方法6的方法合成。LCMS[M+H]+＝915.6；1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ11.75(s,1H),11.00(s,1H),9.57(s,1H),9.01–8.77(m,2H),8.71(d,J＝7.4Hz,2H),8.22(s1H),7.82–7.68(m,3H),7.68–7.51(m,3H),7.47(t,J＝7.9Hz,1H),7.17(dd,J＝7.5,5.4Hz,3H), 5.93(s,1H),5.11(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H),4.46(d,J＝7.7Hz,1H),4.33(d,J＝7.7Hz,1H),3.68(s, 1H),3.19(d,J＝7.7Hz,3H),3.21–2.90(m,3H),2.90–2.49(m,7H),2.37(ddd,J＝6.2,10.5,7.3Hz, 2H),2.04–1.99(m,2H),1.83(dd,J＝2.7,9.1Hz,1H),1.65(d,J＝4.4Hz,8H),1.57–1.27(m,4H).
化合物UB-181236的合成方法
Figure BDA0003295775120000661
步骤1:UB-181236
以类似于通用方法6的方法合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.62(s,1H),11.00(s,1H), 10.24–10.19(m,1H),9.24(s,1H),8.80(s,1H),8.16(s,1H),7.82–7.65(m,3H),7.59(t,J＝13.4Hz, 1H),7.48(dd,J＝14.1,8.3Hz,3H),6.92(d,J＝9.0Hz,2H),6.48(s,1H),5.12(dd,J＝13.2,5.0Hz, 1H),4.46(d,J＝17.7Hz,2H),4.39–4.28(m,1H),4.28–3.86(m,1H),3.69(d,J＝13.1Hz,2H), 3.23(d,J＝8.2Hz,4H),3.18–2.92(m,7H),2.92–2.85(m,3H),2.85–2.47(m,6H),1.99(dd,J＝12.3, 10.1Hz,1H),1.81(s,2H),1.20(t,J＝7.3Hz,3H).LCMS[M+H]+＝901.7
化合物UB-181239的合成方法
Figure BDA0003295775120000662
步骤1:UB-181239
以类似于通用方法6的方法合成。LCMS[M+H]+＝901.8；1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ11.87(s,1H),11.00(s,1H),10.28(s,2H),9.24(s,1H),8.80(s,1H),8.46(s,1H),8.16(s,1H),7.87–7.66(m,5H),7.48(t,J＝10.2Hz,3H),7.09(s,1H),6.93(d,J＝9.1Hz,2H),6.58-6.43(m, 1H),5.12(dd,J＝13.2,5.0Hz,1H),4.39–4.23(m,3H),4.07(dd,J＝3.48,1.66Hz,2H),3.73– 3.49(m,4H),3.46(s,2H),3.05(q,J＝7.3Hz,44H),2.92(dd,J＝5.9,11.8Hz,2H),2.46–2.25(m,1H), 1.99(dd,J＝12.3,10.1Hz,1H),1.78(d,J＝22.7Hz,2H),1.46–1.27(m,2H),1.20(t,J＝7.3Hz,3H), 1.03(t,J＝7.3Hz,1H).
化合物UB-181240的合成方法
Figure BDA0003295775120000671
步骤1:UB-181240c
化合物UB-181240a(400mg,1.37mmol)溶于ACN 10mL)加入UB-181240b(222mg,1.37 mmol),K2CO3(569mg,4.12mmol)80℃反应过夜。反应液冷却后过滤。将反应液浓缩粗品用柱层析分离(PE/EtOAc＝0～10％)得到无色油状产物UB-181240c(180mg,收率40.8％)。LCMS[M+H]+＝ 322.4
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ3.92–3.53(m,3H),3.42(t,J＝6.6Hz,2H),3.32–3.04(m,4H), 3.03–2.71(m,2H),2.45(td,J＝6.6,2.7Hz,2H),2.23(t,J＝7.8Hz,2H),2.09(s,2H),2.04–1.79(m, 3H),1.48(s,9H).
步骤2:UB-181240d
把混合物UB-181240c(50mg,0.16mmol),A3-I(57.6mg,0.16mmol),Pd(PPh3)2Cl2(6mg),CuI (3mg),TEA(32mg)溶于干燥的DMF(5mL)N2保护下80℃反应2小时反应液浓缩粗品用柱层析分离(DCM/MeOH＝0-10％)得到黄色油状产物UB-181240d(35mg,收率40％)。LCMS[M+H]+＝ 564.3.
步骤3:UB-181240e
化合物UB-181240d(70mg,0.14mmol)溶于THF(2mL)加入水(0.5mL)和1M Me3P(0.5mL,0.5mmol)室温反应过夜。反应液浓缩得到黄色固体粗品UB-181240e(50mg,75％收率)。LCMS [M+H]+＝538.4.
步骤4:UB-181240
以类似于通用方法6的方法合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.00(s,1H),11.02(s,1H), 10.93(s,1H),10.17(s,1H),10.01(s,2H),9.01(q,J＝4.4Hz,1H),8.61(d,J＝8.3Hz,1H),8.32(s,1H), 7.85(d,J＝7.9Hz,1H),7.77–7.59(m,7H),7.53(s,1H),7.19(s,1H),6.95(d,J＝20.9Hz,1H),5.16– 5.06(m,1H),4.51–4.33(m,2H),3.59(s,2H),3.54–3.48(m,4H),3.43(s,4H),3.25(s,5H),3.01(d,J＝ 7.2Hz,2H),2.90(ddd,J＝17.9,13.5,5.2Hz,1H),2.79(d,J＝4.3Hz,3H),2.62–2.54(m,1H), 2.38(qd,J＝13.2,4.4Hz,1H),2.03–1.81(m,5H),1.33–1.22(m,4H).LCMS[M+H]+＝901.98.
化合物UB-181249的合成方法
Figure BDA0003295775120000681
步骤1:UB-181249b
化合物UB-181249(4g,16.7mmol)溶于DCM(15mL)加入4M HCl/二氧六环(20mL,80mmol)室温反应过夜。将溶剂旋干，得到白色固体粗产物UB-181249b(2.9g,收率100％)。LCMS [M+H]+＝140.6
步骤2:UB-181249d
化合物UB-181249b(700mg,4mmol)溶于DCM(20mL)加入DIPEA(1.4mL,8mmol)和UB-181249c(1.13g,8mmol)室温反应4小时。反应液浓缩，粗品用柱层析分离(PE/EtOAc＝0～80％) 得到白色固体产物UB-181249d(300mg,收率31％)LCMS[M+H]+＝236.0.
步骤3&4:UB-181249g
把混合物UB-181249d(300mg,1.27mmol),UB-181249e(160mg,1.53mmol)溶于MeOH(5mL)和 DCM(10mL)室温反应2小时，加入NaBH3CN(160mg,2.54mmol)室温反应过夜。在上述反应液中加入TEA(0.3mL)和Boc2O(0.5mL)室温反应4小时将反应液浓缩粗品用柱层析分离得到黄色油状产物(DCM/MeOH＝0～10％)UB-181249g(100mg,收率20％)。LCMS[M+H]+＝389.4.
步骤5:UB-181249h
化合物UB-181249g(100mg,0.25mmol)溶于MeOH(15mL)加入K2CO3(107mg,0.77mmol)30℃反应过夜。反应液过滤掉不溶物，滤液浓缩粗品用柱层析分离(DCM/MeOH＝0-100％) 得到黄色油状产物UB-181249h(50mg,收率68％)。LCMS[M+H]+＝293.3
步骤6:UB-181249i
把混合物UB-181249h(50mg,0.17mmol),A3-I(63mg,0.17mmol),Pd(PPh3)2Cl2(11mg, 0.017mmol),CuI(3mg,0.017mmol),TEA(17mg,0.17mmol)溶于干燥的DMF(4mL)N2保护下 80℃反应2小时。反应液浓缩粗品用柱层析分离(DCM/MeOH＝0-100％)得到棕色固体粗品 UB-181249i(20mg,收率22％)。LCMS[M+H]+＝535.6
步骤7:UB-181249j
化合物UB-181249i(20mg,0.037mmol),M13(18mg,0.037mmol),HATU(76mg,0.2mmol), DIPEA(0.1mL)溶于DMF(3mL)室温反应4小时。反应液浓缩粗品用大板纯化(DCM/MeOH＝12/1) 得到黄色固体产物UB-181249j(2mg,收率5.4％)。LCMS[M+H]+＝998
步骤8:UB-181249
化合物UB-181249j(2mg,0.002mmol)溶于DCM(3mL)和MeOH(0.5mL)加入4M HCl/二氧六环(0.5mL)室温反应30分钟。反应上清液除掉，固体用Et2O(10mL*2)打浆。把固体干燥得到淡黄色固体产物UB-181249(0.6mg,收率32％)。LCMS[M/2+H]+＝443.9.
NMR:NA
化合物UB-181250的合成方法
Figure BDA0003295775120000691
步骤1:UB-181250b
化合物UB-181250a(3.4g,13mmol),NaN3(1.7g,26mmol)溶于DMF(50mL)85℃反应过夜。反应液中加入饱和食盐水(20mL),再用EtOAc(30mL*2)萃取。有机相用水洗，食盐水洗干燥浓缩得到黄色固体产物(2.2g,收率80％)。LCMS[M+H]+＝213.2
步骤2:UB-181250c(3)
化合物UB-181250b(1g,4.7mmol)溶于DCM(10mL)加入4M HCl/二氧六环(6mL,23.5mmol)室温反应4小时。将溶剂旋干得到白色固体粗产物UB-181250c(0.7g,收率100％)。LCMS [M+H]+＝113.1
步骤3&4:UB-181250f
化合物UB-181250c(0.7g,4.7mmol)in ACN(30mL)加入UB-181250d(1.2g,5.6mmol), K2CO3(0.77g,5.6mmol)80℃反应过夜。反应液冷却后过滤，滤液加入aq.NaHCO3(1mL)和 Boc2O(1.5mL)室温反应4小时。将反应液浓缩粗品用柱层析分离(PE/EtOAc＝0～20％)得到无色油状产物UB-181250f(300mg,收率25％)。LCMS[M+H]+＝265.3
步骤5:UB-181250g
把混合物UB-181250f(75mg,0.28mmol),A1-I(100mg,0.28mmol),Pd(PPh3)2Cl2(20mg, 0.028mmol),CuI(5.3mg,0.028mmol),TEA(28mg,0.28mmol)溶于干燥的DMF(4mL)N2保护下 80℃反应2小时。反应液浓缩粗品用柱层析分离(DCM/MeOH＝0-10％)得到棕色固体产物 UB-181250g(30mg,收率21％)。LCMS[M+H]+＝507.5
步骤6:UB-181250h
化合物UB-181250g(30mg,0.059mmol)溶于THF(2mL)加入1M Me3P(0.5mL,0.5mmol) 室温反应1小时。然后水(0.5mL)加入室温反应过夜。反应液浓缩粗品大板纯化(EtOAc)得到黄色油状产物UB-181250h(20mg,收率71％)。LCMS[M+H]+＝481.5
步骤7:UB-181250
以类似于通用方法6的方法合成。LCMS[M/2+H]+＝423.2.NMR:NA
化合物UB-181251的合成方法
Figure BDA0003295775120000701
步骤1:UB-181251b
将化合物UB-181251a(800mg，6.96mmol)和1-苯甲酰氮杂丁-3-酮(1255mg，5.30mmol)溶于二氯甲烷(25mL)。反应3小时后，加入氰基硼氢化钠(1700mg，17.9mmol)，在室温下反应20 h。加入水(10mL)，减压旋转移去有机溶剂，然后用二氯甲烷处理，用饱和NaHCO3溶液洗涤有机层。用无水Na2SO4干燥后，在减压下去除溶剂，并使用CHCl3/MeOH(体积比9:1)作为洗脱剂，通过快速色谱柱层析纯化。得到化合物UB-181251b(890mg，收率50％)为白色固体。
LCMS[M+H]+＝337.5
步骤2:UB-181251c
将UB-181251b(200mg，0.60mmol)和(Boc)2O(160mg，0.74mmol)混合后溶在tBuOH(10mL) 中，加入tBuOK(82mg)，在N2保护下室温下反应30min。然后将反应加热至60℃反应8h，然后冷却至室温，用二氯甲烷处理，并用饱和NaHCO3溶液清有机层。在使用Na2SO4干燥后，在减压下去除溶剂，并使用环己烷/乙酸乙酯(7:3)作为洗脱剂，通过快速色谱柱层析纯化。得到化合物UB-181251c(195mg，收率75％)。LCMS[M+H]+＝437.5
步骤3:UB-181251d
将UB-181251c(50mg,0.10mmol)、10％钯炭(5mg)加入到甲醇/二氯甲烷(1mL/10mL)混合溶剂中,在氢气环境下室温反应16小时。过滤后浓缩滤液得到粗品，用冷的***洗涤(10mL*3)，干燥后得到化合物UB-181251d(39mg,收率83％)。LCMS[M+H]+＝271.2
步骤4:UB-181251e
化合物UB-181251d(0.72g,2.14mmol),三氟乙酸乙酯(0.37g,2.60mmol)以及DIEA(1.38g,10 mmol)加入到无水DCM(15mL)中，80℃反应18小时。反应完成后将反应液浓缩，粗品用快速柱层析分离(DCM/MeOH＝10/1)得到无色油状化合物UB-181251e(464mg,收率75％)。LCMS [M+H]+＝367.6
步骤5:UB-181251f
将化合物UB-181251e(500mg,0.984mmol)、甲烷磺酰氯(145mg,1.28mmol)以及三乙胺 (149mg,1.476mmol)依次加入到二氯甲烷(10mL)中，25℃下反应过夜。反应完成后倒入10mL 水，二氯甲烷提取(10mL*3)萃取。合并有机相后用饱和食盐水洗，无水Na2SO4干燥，减压旋蒸浓缩，得到粗品经快速柱层析(DCM/MeOH＝10/1)纯化，得到白色固体化合物UB-181251f((560mg, 收率97％)。LCMS[M+H]+＝445.7
步骤6:UB-181251g
将UB-181251f(3g,5mmol)溶于DMF(100mL)中，加入叠氮化钠(0.43g,7mmol)，在85℃下搅拌过夜。反应完成后。过滤得到滤液并在真空中浓缩得到粗品，通过色谱柱层析分离(DCM/MeOH＝30/1)纯化得到无色油状物UB-181251g(2.7g,收率98％)。LCMS[M+H]+＝533.6
步骤7:UB-18181251h
将化合物UB-181251g(6g,18mmol)，氢氧化钠(1.42g,36mmol)依次加入到甲醇(50mL)中， 30℃反应16小时。反应完成后浓缩，水相用盐酸(1M)酸化至pH＝5。然后用二氯甲烷萃取(10ml*3)，合并有机层经无水Na2SO4干燥，浓缩得到白色化合物UB-181251h(3.5g,收率81％)。LCMS [M+H]+＝339.4
步骤8:UB-181251i
化合物UB-181251h(78mg,0.20mmol)、UB-181251h-1(51mg,0.20mmol)以及DIEA(50mg, 0.39mmol)加入到无水乙腈中(30mL)，80℃反应18小时。反应完成后将反应液浓缩，粗品用硅胶柱层析分离(DCM/MeOH＝10/1)得到化合物UB-181251i(51mg,收率46％)。
步骤9:UB-181251j
将UB-181251i(50mg,0.081mmol)溶于THF(10mL)中，加入三甲基膦(402mg，1.87mmol)。室温反应过夜，反应完成后浓缩得到粗品，用快速层析法(DCM/MeOH＝10/1)纯化得到产物 UB-181251j(45mg,收率96％)。
步骤10:UB-181251
以类似于通用方法6的方法合成。LCMS[M+H]+＝915.1
化合物UB-181257的合成方法
Figure BDA0003295775120000711
步骤1:UB-181257
以类似于通用方法6的方法合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.76(s,1H),11.01(s,1H), 9.66(s,2H),9.49(s,1H),8.82–8.68(m,2H),8.21(s,1H),7.83–7.73(m,3H),7.64(d,J＝7.9Hz,1H), 7.58–7.44(m,3H),7.20–7.04(m,3H),6.99(m,1H),5.13(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H),4.50(d,J＝17.7 Hz,1H),4.37(d,J＝17.7Hz,1H),4.17(t,J＝4.7Hz,2H),3.93(dm,1H),3.54(m,4H),3.15(m,2H), 2.94–2.88(m,1H),2.81(d,J＝4.4Hz,3H),2.59(m,4H),2.40(m,2H),2.23(m,2H),2.06–1.96(m, 2H).LCMS[M/2+H]+＝416.
化合物UB-181258的合成方法
Figure BDA0003295775120000712
步骤1&2:UB-181258c
化合物UB-181258a(0.4g,2.7mmol)溶于ACN(50mL)加入UB-181258b(0.56g,2.7mmol), K2CO3(0.447g,3.24mmol)60℃反应过夜。反应液冷却后过滤，滤液加入aq.NaHCO3(3mL)和 Boc2O(1mL)室温反应4小时。将反应液浓缩粗品用柱层析分离(PE/EtOAc＝0～10％)得到无色油状产物UB-181258c(300mg,收率44％)。LCMS[M+H]+＝251.3.1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.05–3.98(m,2H),3.60–3.52(m,1H),3.46(brs,1H),2.70–2.61(m,2H),2.32–2.24(m,2H),2.19(t,J＝ 2.4Hz,1H),1.47(s,9H).
步骤3:UB-181258d
把混合物UB-181258c(300mg,1.2mmol),A3-I(444mg,1.2mmol),Pd(PPh3)2Cl2(84mg,0.12 mmol),CuI(23mg,0.12mmol),TEA(121mg,0.12mmol)溶于干燥的DMF(5mL)N2保护下80℃反应2小时反应液浓缩粗品用柱层析分离(DCM/MeOH＝0-3％)得到黄色油状产物UB-181258d(200 mg,收率34％)。LCMS[M+H]+＝493.6
步骤4:UB-181258e
化合物UB-181258d(100mg,0.2mmol)溶于THF(5mL)加入1M Me3P(1mL,1mmol)室温反应过夜。反应液浓缩得到黄色固体粗品UB-181258e(70mg,收率75％)。LCMS[M+H]+＝467.6
步骤5:UB-181258
以类似于通用方法6的方法合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.07(s,1H),11.01(s,1H), 9.77(s,2H),9.62(s,1H),8.74(s,1H),8.34(s,1H),8.23(s,1H),7.88–7.75(m,4H),7.66–7.46(m,4H), 7.15(m,3H),7.05(m,1H),5.13(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H),4.50(d,J＝17.7Hz,1H),4.37(d,J＝17.6 Hz,1H),4.14(m,2H),3.94(m,1H),3.59(m,4H),3.21(m,2H),2.92(m,2H),2.60(m,4H),2.40(m,1H), 2.25(m,2H),2.02(m,2H).LCMS[M/2+H]+＝409.
化合物UB-181259的合成方法
Figure BDA0003295775120000721
步骤1:UB-181259
以类似于通用方法6的方法合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.22(s,1H),11.00(s,1H), 9.94(s,1H),9.54(s,2H),8.68(s,1H),8.38(s,1H),8.29(s,1H),7.92–7.80(m,2H),7.76–7.69(m,2H), 7.61(m,3H),7.52(t,J＝7.9Hz,1H),7.43(s,2H),7.19(t,J＝7.5Hz,2H),5.11(dd,J＝13.3,5.1Hz, 1H),4.47(d,J＝17.6Hz,1H),4.34(d,J＝17.5Hz,1H),3.93(m,1H),3.35(m,4H),3.09(t,J＝5.9Hz, 2H),2.97–2.91(m,2H),2.60(d,J＝11.9Hz,3H),2.45–2.36(m,2H),2.28(m,2H),2.09–1.92(m, 2H).LCMS[M/2+H]+＝416.1.
化合物UB-181261的合成方法
Figure BDA0003295775120000722
步骤1：UB-181261b
化合物UB-181261a(2g,10.68mmol)在DCM(20mL)中的溶液加入TEA(2.1g,21.36mmol) 和MsCl(1.8g,16.02mmol)，然后在室温下搅拌2小时。反应液加入水并用DCM(30mL*2)萃取，有机层经Na2SO4干燥，残余物通过硅胶色谱法(PE/EtOAc＝0～40％)纯化，得到产物 UB-181261b(2.6g,93％产率)，为白色固体。LCMS[M+H]+＝266.3。
步骤2:UB-181261c
化合物UB-181261b(2.6g,9.8mmol),NaN3(1.27g,19.6mmol)溶于DMF(30mL)85℃反应过夜。反应液中加入饱和食盐水(20mL),再用EtOAc(30mL*2)萃取。有机相用水洗，食盐水洗干燥浓缩得到黄色固体产物UB-181261c(1.8g,收率86.5％)。LCMS[M+H]+＝213.2
步骤3:UB-181261d
化合物B-181261c(1.8g,8.5mmol)溶于DCM(10mL)加入4M HCl/二氧六环(10.6mL,42.5 mmol)室温反应4小时。将溶剂旋干得到白色固体粗产物UB-181261d(1.3g,收率100％)。LCMS [M+H]+＝113.1
步骤4&5:UB-181250g
化合物UB-181261-d(0.5g,3.4mmol)在ACN(30mL)中加入UB-181261e(0.9g,4mmol), K2CO3(0.56g,4mmol).80℃反应过夜。反应液冷却后过滤，滤液加入aq.NaHCO3(3mL)和 Boc2O(1.5mL)室温反应4小时。将反应液浓缩粗品用柱层析分离(PE/EtOAc＝0～20％)得到无色油状产物UB-181250g(400mg,收率44％)。LCMS[M+H]+＝265.3
步骤6:UB-181261h
把混合物UB-181250g(60mg,0.23mmol),A3-I(85mg,0.38mmol),Pd(PPh3)2Cl2(16mg, 0.038mmol),CuI(4.4mg,0.038mmol),TEA(23mg,0.38mmol)溶于干燥的DMF(4mL)N2保护下 80℃反应2小时。反应液浓缩粗品用柱层析分离(DCM/MeOH＝0-10％)得到棕色固体产物 UB-181261h(49mg,收率42％)。LCMS[M+H]+＝507.5
步骤7:UB-181261i
化合物UB-181261h(49mg,0.097mmol)溶于THF(5mL)加入1M Me3P(0.5mL,0.5mmol) 室温反应1小时。然后水(0.5mL)加入室温反应过夜。反应液浓缩粗品大板纯化(EtOAc)得到黄色油状产物UB-181261i(26mg,收率56％)。LCMS[M+H]+＝481.5
步骤8:UB-181261以类似于通用方法6的方法合成。LCMS[M/2+H]+＝433.2.
化合物UB-181269的合成方法
Figure BDA0003295775120000731
步骤1:UB-181269b
化合物UB-181269a(1.00g,5.0mmol)、1-溴-4-硝基苯(1.01g,5.0mmol)以及DIEA(1.29g, 10.0mmol)加入到无水乙腈中(30mL)，80℃反应18小时。反应完成后将反应液浓缩，粗品用硅胶柱层析分离(DCM/MeOH＝10/1)得到化合物UB-181269b(1.38g,收率86％)。LCMS:[M+H]+＝322.3
步骤2:UB-181269c
将UB-181269b(1.38g,4.3mmol)、10％Pd/C(130mg)加入到甲醇(80mL)中,在氢气环境下室温反应16小时。过滤后浓缩滤液得到粗品，用冷的***洗涤(10mL*3)，干燥后得到化合物 UB-181269c(1.25g,收率100％)。LCMS:[M+H]+＝292.3.
步骤3:UB-181269d
将UB-181269c(780mg，2.68mmol)、con HCl(0.01mL)和UB-181269a-1(796mg，2.68mmol) 溶解在MeCN(90mL)中，在80℃下搅拌18小时。然后通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝70％～100％20min，然后MeOH/DCM＝0％～10％40min)纯化，得到化合物UB-181269d(822mg，收率68％)。LCMS:[M+H]+＝452.9
步骤4:UB-181269e
将UB-181269d(300mg，0.67mmol)、DIEA(100mg，0.78mmol)和3-丁基对甲苯磺酸酯(246 mg，1.1mmol)溶解在乙腈(30mL)中，在80℃下搅拌18小时。然后通过快速柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝70％～100％20min，然后MeOH/DCM＝0％～10％40min)纯化，得到化合物UB-181269e(187mg，产率56％)。
LCMS:[M+H]+＝505.3
步骤5:UB-181269f
化合物UB-181269e(187mg,0.37mmol),二叔丁基二碳酸酯(160mg,0.74mmol)以及三乙胺 (82mg)依次加入到四氢呋喃(20mL)中，室温反应2小时。反应完成后倒入10mL水，二氯甲烷提取(5mL*3)。合并有机相后用饱和食盐水洗，无水Na2SO4干燥，减压旋蒸浓缩，得到无色油状化合物UB-181269f(165mg,收率74％)LCMS[M+H]+＝605.5
步骤6:UB-181269g
将化合物UB-181269f(30mg,0.050mmol)和A3-I(38mg,0.103mmol)溶于DMF(10mL)，加入二氯二(三苯基磷)钯(7.2mg,0.010mmol)、碘化亚铜(3.91mg,0.021mmol)和三乙胺(150mg，1.49mmol)，在氮气下于80℃反应过夜。反应液经硅藻土过滤，滤液浓缩得到粗品，用快速层析法纯化(用DCM/MeOH＝0％～20％，30min洗脱)，得到产物UB-181269g(10mg,收率24％)LCMS [M+H]+＝847.4
步骤7:UB-181269
将化合物UB-181269g(10mg,0.012mmol)以及盐酸二氧六环溶液(10mL,4N)加入到四氢呋喃(10mL)中,室温反应2小时，反应完成后，减压旋蒸浓缩，得到化合物UB-181269(5.6mg,收率100％).
LCMS[M+H]+＝747.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.00(s,1H),9.78-9.69(m,1H)，9.68-9.47(m,2H), 8.80(s,1H),8.46(s,1H),8.16(s,1H),7.87–7.66(m,5H),7.75(dt,J＝15.4,9.6Hz,1H),7.63–7.49(m, 2H),7.18(t,J＝7.5Hz,1H),5.12(dd,J＝13.2,5.0Hz,1H),4.56–4.35(m,2H),3.44-3.11(m,4H), 3.00(s,3H),2.89–2.70(m,7H),2.68(s,3H),2.61(d,J＝9.9Hz,2H),2.35(dd,J＝3.3,7.5Hz,4H), 2.19–2.08(m,2H),2.01–1.93(m,2H).
化合物UB-181270的合成方法
Figure BDA0003295775120000751
步骤1:UB-181270a
化合物UB-181251d(180mg,0.61mmol)、UB-181251d-1(468mg,1.20mmol)以及DIEA(100 mg,0.78mmol)依次加入到无水乙腈中(30mL)，80℃反应18小时。反应完成后将反应液浓缩，粗品用柱层析分离(DCM/MeOH＝10/1)得到化合物
UB-181270a(161mg,收率46％)。LCMS[M+H]+＝576.6
步骤2:UB-181270b
将UB-181270a(161mg,0.28mmol)溶于THF(10mL)中，加入三甲基膦(402mg，1.87mmol)。室温反应过夜，反应完成后浓缩得到粗品，用快速层析法(DCM/MeOH＝10/1)纯化得到产物 UB-181270b(147mg,收率96％)。LCMS[M+H]+＝550.6
步骤3:UB-181270
方法类似于通用方法6。LCMS[M+H]+＝900.2
化合物UB-181272的合成方法
Figure BDA0003295775120000752
步骤1和2:UB-181272d(/57)
化合物UB-181272a(1000mg,11.24mmol)溶于ACN(40mL)加入UB-181272b(1.76g,7.87 mmol),K2CO3(2.17g,15.7mmol)于80℃反应过夜。反应液冷却后过滤，滤液加入aq.NaHCO3(3mL) 和Boc2O(2.5mL)室温反应4小时。将反应液浓缩粗品用柱层析分离(PE/EtOAc＝0～10％)得到无色油状产物UB-181272d(850mg,收率53.6％)。LCMS[M+H]+＝242.2
步骤3:UB-181272e
化合物UB-181071d(200mg,0.83mmol)溶于乙醇(5mL)加入2M NaOH(2mL).室温反应18 小时.反应液浓缩加入水(3mL),然后用***萃取(10mL*3)，除去有机杂质.水相用1MHCl中和至pH～6冻干得到白色固体产物UB-181272e(120mg,收率35.1％)。LCMS[M+H]+＝227.3
步骤4:UB-181272f
将UB-181272e(30mg,0.1mmol),A3-I(73mg,0.2mmol),Pd(PPh3)2Cl2(4.64mg),CuI(3mg), TEA(40mg)加入无水DMF(2mL)中。反应体系在80℃搅拌2小时，反应完成后冷却至室温。将混合物加入水中，用二氯甲烷萃取，盐水(30mL)，硫酸钠干燥，过滤，浓缩后通过硅胶柱层析分离(二氯甲烷/甲醇＝10％),得到黄色固体UB-181272f(50mg,收率80.7％)。LCMS[M+H]+＝470.4
步骤5:UB-181272
方法类似于通用方法1。LCMS[M+H]+＝789.9.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.04(s,1H), 11.02(s,1H),9.97(s,1H),9.34(s,2H),8.91(d,J＝4.8Hz,1H),8.64(s,1H),8.30(s,1H),7.82(dd,J ＝8.0,1.6Hz,1H),7.75–7.69(m,2H),7.62–7.46(m,4H),7.31–7.08(m,3H),5.12(dd,J＝13.3,5.1 Hz,1H),4.49–4.34(m,2H),4.24(d,J＝5.5Hz,2H),3.80(s,2H),3.68(s,2H),3.37(d,J＝18.0Hz, 2H),3.30–3.18(m,4H),3.00(t,J＝7.4Hz,2H),2.93–2.87(m,1H),2.81(d,J＝4.4Hz,3H),2.66 –2.56(m,1H),2.42–2.33(m,1H),2.05–1.96(m,1H).
化合物UB-181273的合成方法
Figure BDA0003295775120000761
步骤1:UB-181273
以类似于通用方法6的方法合成。LCMS[M+H]+＝775.9.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.23(s,1H),11.02(s,1H),9.86(s,1H),9.31(s,2H),8.70(s,1H),8.40(s,1H),8.28(s,1H),7.90– 7.79(m,2H),7.77–7.69(m,2H),7.63–7.45(m,4H),7.17(t,J＝7.6Hz,3H),5.12(dd,J＝13.3,5.1Hz, 1H),4.52–4.33(m,2H),4.23(s,2H),3.77(s,2H),3.65(s,2H),3.31(s,2H),3.23(d,J＝7.9Hz,4H), 3.00(t,J＝7.4Hz,2H),2.94–2.86(m,1H),2.70–2.54(m,1H),2.40–2.33(m,1H),2.04–1.94(m, 1H).
化合物UB-181274的合成方法
Figure BDA0003295775120000762
步骤1:UB-181274
以类似于通用方法6的方法合成。LCMS[M/2+H]+＝887.6.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.23(s,1H),11.02(s,1H),9.85(s,1H),9.30(s,2H),8.71(s,1H),8.39(s,1H),8.28(s,1H),7.88– 7.80(m,2H),7.76–7.69(m,2H),7.62–7.45(m,5H),7.22–7.11(m,3H),5.12(dd,J＝13.3,5.0Hz, 1H),4.50–4.30(m,2H),4.23(d,J＝6.0Hz,2H),3.30(s,2H),3.23(s,4H),3.20–3.07(m,2H),3.03– 2.81(m,4H),2.60(d,J＝16.5Hz,1H),2.41–2.33(m,1H),2.05–1.97(m,1H).
化合物UBI-1376(M12)的合成方法：
Figure BDA0003295775120000763
步骤1:UBI-1376b
将化合物2-氨基苯甲酰胺(6.2g,45.8mmol)置于100毫升三颈烧瓶中，加入异丙醇(100毫升)，加入2，4，5-三氯嘧啶(7g,38mmol)、二异丙基乙胺(8mL,45.8mmol)，80℃搅拌过夜。反应完成后，冷却至室温，然后加入100毫升水和乙酸乙酯。有机相用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，得到黄色固体UB-1376b(9g，产率83％).LCMS[M+H]+＝284.1.1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.50(s,1H),8.60(d,J＝0.6Hz,1H),8.60–8.28(m,1H),8.24(s,1H),7.89(dd,J＝8.0,1.4Hz, 2H),7.72–7.57(m,1H),7.56–7.20(m,1H),7.22(td,J＝7.9,1.1Hz,1H).
步骤2:UBI-1376c
将UBI-1375b(1g,4mmol)和叔丁基4-(4-氨基苯基)哌啶-1-羧酸酯(1.03g,4mmol)溶于无水 DMF(10mL)，加入Pd(OAc)2(120mg,1mmol)和xanphos(310mg,1mmol)，130℃下搅拌过夜。反应完成后加水，用乙酸乙酯(10毫升*3)萃取。有机层用Na2SO4干燥，浓缩得到粗产物。通过硅胶色谱纯化(DCM/MeOH＝20/1)，得到产物UBI-1375c(929mg,产率51％).LCMS[M+H]+＝524.1
步骤3:UBI-1376
将化合物UBI-1376c(925mg,1.78mmol)以及盐酸二氧六环溶液(10mL,4N)加入到四氢呋喃(10mL)中,室温反应2小时，反应完成后减压旋蒸浓缩，得到化合物UBI-1376(747mg,收率100％).LCMS[M+H]+＝424.1
化合物UB-181279的合成方法
Figure BDA0003295775120000771
步骤8:UB-181279f
化合物UB-181279e(95mg,0.198mmol),双(4-硝基苯基)碳酸酯(120mg,0.396mmol)溶于 Py.(1mL)室温反应过夜。化合物M12(90mg,0.198mmol)和DIPEA(51mg,0.396mmol)加入上述反应液，室温反应2h。将溶剂旋干，粗品使用制备大板分离制备型TLC(DCM/MeOH＝15/1)得到黄色固体产品UB-181279f(40mg,收率22％)。LCMS[M+H]+＝930.1
步骤9:UB-181279
化合物UB-181279f(20mg,0.02mmol)溶于DCM(2ml)加入二氧六环中的HCl(1mL)室温反应1hr。反应液加入MTBE(10ml)出现固体，静置澄清，倒出上清液，反复上述操作三次。瓶内的固体加入水(10ml),冻干得到白色固体产品UB-181279(8.7mg,收率48％)。LCMS[M/2+H]+＝ 415.7.1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.04(s,1H),11.00(s,1H),9.62(s,1H),9.40(s,2H),8.74(d,J＝ 6.8Hz,1H),8.35(d,J＝9.9Hz,1H),8.23(t,J＝3.3Hz,1H),7.84(d,J＝7.9Hz,1H),7.78(s,1H), 7.75–7.69(m,2H),7.60(d,J＝8.0Hz,1H),7.55(d,J＝8.3Hz,2H),7.48(t,J＝7.3Hz,1H),7.16(t,J ＝8.6Hz,3H),6.86(s,1H),5.11(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H),4.40(dd,J＝51.1,17.7Hz,2H),4.13(d,J＝ 12.4Hz,2H),3.89(d,J＝7.9Hz,2H),3.53–3.43(m,1H),3.09(d,J＝5.5Hz,2H),2.97–2.83(m,3H), 2.79–2.54(m,6H),2.45–2.31(m,2H),2.24(d,J＝9.8Hz,2H),2.03–1.96(m,1H),1.74(d,J＝12.5 Hz,2H),1.53–1.40(m,2H).
化合物UB-181283的合成方法
Figure BDA0003295775120000781
步骤1:UB-181283a
将UB-181269c(1.0g,3.4mmol)、浓盐酸(0.01mL)和UBI-1376b(970mg,3.4mmol)溶在 n-BuOH(90mL)中，在150℃下反应5小时。然后通过快速柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝70％～100％ 20min，然后MeOH/DCM＝0％～10％40min)纯化，得到化合物UB-181283a(993mg,收率66％)。 LCMS[M+H]+＝438.9
步骤2:UB-181283b
将UB-181283a(993mg,2.3mmol)、DIEA(500mg,3.9mmol)和3-丁基对甲苯磺酸酯(1.03g, 4.6mmol)溶解在乙腈(80mL)中，在80℃下搅拌18小时。然后通过快速柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝70％～100％20min，然后MeOH/DCM＝0％～10％40min)纯化，得到化合物UB-181283b(612mg,收率55％).LCMS[M+H]+＝491.5。
步骤3:UB-181283c
化合物UB-181283b(612mg,1.25mmol),二叔丁基二碳酸酯(320mg,1.48mmol)以及三乙胺(82mg)依次加入到四氢呋喃(20mL)中，室温反应2小时。反应完成后倒入10mL水，二氯甲烷提取(5mL*3)。合并有机相后用饱和食盐水洗，无水Na2SO4干燥，减压旋蒸浓缩，得到无色油状化合物UB-181283c(552mg,收率75％).LCMS[M+H]+＝591.5
步骤4:UB-181283d
将化合物UB-181283c(30mg,0.050mmol)和A3-I(38mg,0.103mmol)溶于DMF(10mL)，加入二氯二(三苯基磷)钯(7.2mg,0.010mmol)、碘化亚铜(3.91mg,0.021mmol)和三乙胺(150mg， 1.49mmol)，在氮气下于80℃反应过夜。反应液经硅藻土过滤，滤液浓缩得到粗品，用快速层析法纯化(用DCM/MeOH＝0％～20％，30min洗脱)，得到产物UB-181283d(10mg,收率24％)LCMS [M+H]+＝832.4
步骤5:UB-181283
将化合物UB-181283d(10mg,0.012mmol)以及盐酸二氧六环溶液(10mL,4N)加入到四氢呋喃(10mL)中,室温反应2小时，反应完成后减压旋蒸浓缩，得到化合物UB-181283(8.8mg,收率100％)。LCMS[M+H]+＝732.8.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.98(s, 1H),11.00(s,1H),9.78-9.69(m,2H)，9.68-9.47(m,2H),8.80(s,1H),8.46(s,1H),8.16(s,1H),7.87–7.66(m,5H),7.75(d,J＝9.9Hz,2H),7.66(d,J＝4.3Hz,4H),7.63–7.49(m,2H),7.32(dd,J＝100.9, 49.4Hz,4H)7.18(t,J＝7.5Hz,1H),5.12(dd,J＝13.2,5.0Hz,1H),4.40(dd,J＝5.8,7.7Hz,2H), 3.86-3.66(m,3H),3.22-3.02(m,4H),2.96-2.80(m,3H),2.66-2.60(m,1H),2.39–2.18(m,3H),2.01– 1.93(m,3H).
化合物UB-181237的合成方法
Figure BDA0003295775120000791
步骤1:UB-181237b
向UB-181149i(2g,3.22mmol)，UB-181237a(430mg,3.2mmol)和HATU(1.8g,4.73mmol) 的DMF(20ml)溶液中加入DIEA(1.25g,9.66mmol)。反应液室温下搅拌2小时。反应液油泵旋干得到的固体进行柱层析纯化(DCM/DCM:MeOH:THF(10:0.5:0.5)＝0-96％)得到UB-181237b(750mg, 40％收率)的白色固体LCMS[M+H]+＝738.3
步骤2:UB-181237c
向UB-181237b(700mg,0.95mmol)的TIS(5mL)溶液中加入CF3COOH(8ml),反应液0℃搅拌15min。将NaHCO3(2.25g,水溶液25ml)加入反应液中.混合物过滤，滤液经反相柱层析纯化(H2O:乙腈＝0％-12％)得到UB-181237c(230mg,49％收率)的白色固体.LCMS[M+H]+＝ 496.6
步骤3:UB-181237e
向UB-181237c(230mg,0.46mmol)和UB-181237d(285mg,0.93mmol)的DMF(5ml)溶液中加入 DIEA(192mg,1.4mmol)。室温反应2。反应液油泵拉干，得到的固体用***打浆。混合物经制备型 TLC(DCM/MeOH＝10/1)纯化得到黄色固体UB-181237e(230mg,49％收率)。LCMS[M+H]+＝661.5
步骤4:UB-181237
向UB-181237e(230mg,0.34mmol)、UB-181103(316mg,0.34mmol)和HOBt(94mg,0.7mmol)的DMF(2mL)溶液中加入DIPEA(135mg,1.1mmol)室温搅拌18h。反应液经制备型HPLC纯化得到白色固体UB-181237(98mg,21％收率)。LCMS[M+H]+＝1394.0.
化合物UB-181238的合成方法
Figure BDA0003295775120000792
步骤1:UB-181238
向在DMF(3mL)溶液中的UB-181238a(49mg，0.04mmol)中加入UB-180961(42mg，0.04mmol)， HOBT(5.9mg，0.04mmol)和DIEA(11.3mg，0.09mmol),反应在N2保护下室温搅拌16小时。浓缩溶液并通过制备TLC纯化，得到(12.8mg，99％纯度)黄色固体作为纯产品。LCMS[M+H]+＝1866.0
化合物UB-181241d的合成方法
Figure BDA0003295775120000801
步骤1:UB-181241a
将奥曲肽(200mg,0.19mmol)和DIEA(48mg,0.37mmol)溶于DMF(5mL)并冷却至-40℃。然后加入BocOSu(40mg,0.19mmol)并在氮气保护下室温搅拌2小时。反应液浓缩后通过反相柱层析得到白色固体目标产物UB-181241a(200mg,收率91％)。LCMS[M+H]+＝1120.0
步骤2:UB-181241c
化合物UB-181241a(200mg,0.18mmol)溶于DMF(5mL)后加入UB-181241b(100mg,0.18 mmol)以及DIEA(35mg,0.27mmol)并在氮气保护下室温搅拌过夜。反应液通过反相柱层析得到白色固体目标产物UB-181241c(130mg,收率47％)。LCMS[M+H]+＝1565.5
步骤3:UB-181241d
化合物UB-181241c(930mg,0.10mmol)溶于TFA(3mL)后加入催化量的iPr3SiH并室温搅拌 10分钟。反应液在低温下浓缩后用异丙醚打浆，固体滤出烘干后得到白色固体目标产物 UB-181241d(880mg,收率100％)。LCMS[M+H]+＝1123.2.
化合物UB-181242的合成方法
Figure BDA0003295775120000802
步骤1:UB-181242b
向UB-181149i(559mg,0.9mmol),UB-181242a(200mg,0.9mmol),HATU(513mg,1.35mmol)的DMF(5ml)溶液中加入DIEA(350mg,2.7mmol)。反应液室温下搅拌2小时。反应液油泵拉干得到的固体进行柱层析纯化(DCM/DCM:MeOH:THF(10:0.5:0.5)＝0-96％)得到 UB-181242b(380mg,40％收率)的白色固体LCMS[M+H]+＝826.7
步骤2:UB-181242c
向UB-181242b(360mg,0.44mmol)的TIS(1.5mL)溶液中加入CF3COOH(3ml),反应液0℃搅拌15min。将NaHCO3(2.25g,水溶液25ml)加入反应液中.混合物过滤，滤液经反相柱层析纯化(H2O:乙腈＝0％-12％)得到UB-181242c(80mg,31％收率)的白色固体.LCMS[M+H]+＝584.6
步骤9:UB-181242e
向UB-181242c(80mg,0.14mmol)和UB-181242d(84mg,0.28mmol)的DMF(5ml)溶液中加入DIEA(60 mg,0.41mmol)。室温反应2h。反应液油泵拉干，得到的固体用***打浆。混合物经制备型 TLC(DCM/MeOH＝10/1)纯化得到黄色固体UB-181242e(70mg,60％收率)。LCMS[M+H]+＝749.5
步骤10:UB-181242
向UB-181242e(20mg,0.03mmol),1103(24.3mg,0.03mmol),HOBt(7.2mg,0.06mmol)的 DMF(1mL)溶液中加入DIPEA(10.3mg,0.09mmol)室温搅拌18h。反应液经制备型HPLC纯化得到白色固体UB-181242(9mg,23％收率)。LCMS[M+H]+＝1482.1
化合物UB-181243的合成方法
Figure BDA0003295775120000811
步骤1:UB-181243
化合物UB-181241d(150mg,0.13mmol)溶于1M TEAA(2mL)后加入UB-181266a(74mg,0.07 mmol)的DMF(3mL)溶液。反应液室温搅拌2小时后通过反向柱层析分离得到100mg粗产物。该粗产物通过制备得到白色固体目标产物UB-181243(50mg,收率18％)。LCMS[M/2+H]+＝1064.2
化合物UB-181246的合成方法
Figure BDA0003295775120000821
步骤1:UB-181246b
化合物UB-181246a(60mg,0.08mmol)溶于DMF(1mL)后加入UB-181103(71mg,.0.08mmol),HOBT(22mg,0.16mmol)以及DIEA(32mg,0.24mmol)。室温反应过夜后通过制备得到白色固体目标产物UB-181246b(20mg,收率17％)。LCMS[M+H]+＝1472.4
步骤2:UB-181246
化合物UB-181241d(16mg,0.01mmol)溶于DMF(1mL)和DIEA(0.3mL)后加入 UB-181246b(21mg,0.01mmol)并室温反应过夜。反应液通过制备得到白色固体目标产物 UB-181243(4.5mg,收率12％)。LCMS[M/2+H]+＝1298.4
化合物UB-181247的合成方法
Figure BDA0003295775120000822
步骤1:UB-181247
化合物UB-181241d(16mg,0.01mmol)溶于DMF(1mL)和DIEA(0.3mL)后加入 UB-181302(21mg,0.01mmol)。室温反应过夜后通过制备得到白色固体目标产物UB-181247(5.1mg,收率18％)。LCMS[M/2+H]+＝1297.6
化合物UB-181263的合成方法
Figure BDA0003295775120000831
步骤1:UB-181263c
化合物UB-181263a(160mg,0.14mmol)溶于DMF(2mL)后加入UB-181263b(107mg,0.13 mmol)以及DIEA(28mg,0.21mmol)。室温反应2小时后通过反相柱层析得到白色固体目标产物 UB-181263c(100mg,收率41％)。LCMS[M+H]+＝1687.3
步骤2:UB-181263d
化合物UB-181263c(20mg,0.01mmol)溶于THF(3mL)后加入DMA/THF(5mL)并室温反应2 小时。反应液低温浓缩后得到粗产物。该粗产物通过***打浆后得到白色固体目标产物UB-181263d(20mg,收率100％)。LCMS[M+H]+＝1465.8
步骤3:UB-181263f
化合物UB-181263d(100mg,0.07mmol)溶于DMF(2mL)后加入UB-181263e(110mg,0.20 mmol)和DIEA(13mg,0.10mmol)并室温反应过夜。反应液通过反相柱层析分离得到黄色固体目标产物UB-181263f(80mg,收率62％)。LCMS[M+H]+＝1890.2
步骤4:UB-181263g
化合物UB-181263f(30mg,0.02mmol)溶于TFA(2mL)后加入催化量iPr2SiH。室温反应10分钟后浓缩得到黄色固体目标粗产物UB-181263g(30mg,100％收率)。LCMS[M+H]+＝1547.5
步骤5:UB-181263
化合物UB-181263g(15mg,0.01mmol)溶于DMF(2mL)和DIEA(0.3mL)后加入 UB-181302(14mg,0.01mmol)。室温反应过夜后通过制备得到淡黄色固体目标产物 UB-181263g(2.8mg,收率10％)。LCMS[M/2+H]+＝1510.2
化合物UB-181265的合成方法
Figure BDA0003295775120000841
步骤1:UB-181265
化合物UB-181246b(20mg,0.01mmol)溶于DMF(2mL)和DIEA(0.3mL)后加入 UB-181263g(19mg,0.01mmol)。室温反应过夜后通过制备得到淡黄色固体目标产物 UB-181243(3.1mg,收率8％)。LCMS[M/2+H]+＝1511.4
化合物UB-181266&181267的合成方法
Figure BDA0003295775120000842
步骤1:UB-181266&181267
以类似UB-181326的方法合成化合物UB-181266a。化合物UB-181266a(20mg,0.01mmol) 溶于DMF(2mL)和DIEA(0.2mL)后加入UB-181263g(14mg,0.01mmol)。室温反应过夜后通过制备得到淡黄色固体目标产物UB-181266(1.9mg,收率4％)和淡黄色固体目标产物UB-181267(1.6 mg,收率3％)。LCMS[M/2+H]+＝1275.6
化合物UB-181268的合成方法
Figure BDA0003295775120000843
步骤1:UB-181268
UB-181268a的合成方法同化合物UB-181325。化合物UB-181268a(20mg,0.01mmol)溶于 DMF(2mL)和DIEA(0.2mL)后加入UB-181243g(14mg,0.01mmol)。室温反应过夜后通过制备得到白色固体目标产物UB-181268(5.9mg,收率13％)。LCMS[M/2+H]+＝1281.2.
化合物UB-181275的合成方法
Figure BDA0003295775120000851
步骤1:UB-181275
化合物UB-181275a以类似UB-181325的合成方法制备。化合物UB-181275a(20mg,0.02 mmol)溶于DMF(1mL)和DIEA(0.3mL)后加入UB-181241d(20mg,0.02mmol)。室温反应过夜后通过制备得到白色固体目标产物UB-181275(6.6mg,收率17％)。LCMS[M/2+H]+＝1056.8
化合物UB-181280的合成方法
Figure BDA0003295775120000852
步骤1:UB-181280b
化合物UB-181280a(272mg,0.41mmol)溶于DMF(5mL)后加入HATU(234mg,0.62mmol)以及DIEA(158mg,1.23mmol)。室温反应1小时后加入UB-181263d(600mg,0.41mmol)并继续室温反应2小时。反应液浓缩后通过反向柱层析分离得到黄色固体目标产物UB-181280b(550mg,收率 64％)。LCMS[M/2+H]+＝1056.9
步骤2:UB-181280c
化合物UB-181280b(560mg,0.27mmol)溶于THF(3mL)后加入DMA/THF(6mL)并室温反应 2小时。反应液浓缩后通过***打浆得到黄色固体目标产物UB-181280c(450mg,收率90％)。 LCMS[M+H]+＝1889.3
步骤3:UB-181280d
化合物UB-181280c(500mg,0.26mmol)溶于DMF(3mL)后加入UB-181263g(427mg,0.79 mmol)和DIEA(51mg,0.40mmol)。室温反应过夜后通过反相柱层析得到黄色固体目标产物 UB-181280d(80mg,收率13％)。LCMS[M/2+H]+＝1158.1
步骤4:UB-181280e
化合物UB-181280d(60mg,0.03mmol)溶于TFA(2mL)后加入催化量iPr2SiH并室温反应10 分钟。反应液低温下反应液低温下浓缩后通过反向柱层析得到黄色固体目标产物UB-181280e(40 mg,收率78％)。LCMS[M/2+H]+＝986.1
步骤5:UB-181280
化合物UB-181280e(20mg,0.01mmol)溶于DMF(1mL)和DIEA(0.3mL)后加入 UB-181275a(11mg,0.01mmol)。室温反应过夜后通过制备得到淡黄色固体目标产物UB-181280(2 mg,收率7％)。LCMS[M/3+H]+＝987.6
化合物UB-181285的合成方法
Figure BDA0003295775120000861
步骤1:UB-181285
化合物UB-181241d(25mg,0.02mmol)溶于1M TEAA(1mL)后加入UB-181295(32mg,0.02 mmol)的DMF(2mL)溶液。室温反应2小时后通过制备得到白色固体目标产物UB-181285(2.1mg, 收率4％)。LCMS[M/3+H]+＝861.4
化合物UB-181289的合成方法
Figure BDA0003295775120000871
步骤1:UB-181289b
化合物UB-181280c(200mg,0.11mmol),UB-181289a(48mg,0.16mmol)溶于吡啶(3mL)后室温反应过夜。反应液通过反相柱层析得到黄色固体目标产物UB-181289b(160mg,收率74％)。 LCMS[M-Trt-Boc+H]+＝1711.8
步骤2:UB-181289c
化合物UB-181289b(140mg,0.07mmol)溶于DMF(2mL)后加入DIEA(0.3mL)以及HSP-90(31mg,0.07mmol)并室温反应30分钟。反应液通过反相柱层析分离得到白色固体目标产物UB-181280c(100mg,收率62％)。LCMS[M/2+H]+＝1189.8
步骤3:UB-181289d
化合物UB-181280c(50mg,0.02mmol)溶于TFA(0.8mL)后加入催化量iPr3SiH并室温反应10 分钟。反应液通过反向柱层析分离得到白色固体目标产物UB-181280d(30mg,收率70％)。LCMS [M+H]+＝1018.9
步骤5:UB-181289
化合物UB-181280d(20mg,0.01mmol)溶于DMF(1mL)和DIEA(0.3mL)后加入 UB-181285a(14mg,0.01mmol)。室温反应过夜后通过制备得到白色固体目标产物UB-181289(1.9 mg,收率6％)。LCMS[M/3+H]+＝1165.2
化合物UB-181290的合成方法
Figure BDA0003295775120000881
步骤1:UB-181290b
UB-181290b(100mg,0.17mmol),2,5-二氧代吡咯烷-1-基3-巯基丙酸酯(40mg,0.21mmol) 溶于吡啶(1mL)室温反应过夜。
Jul-13-2021:反应液旋干，爬大板(DCM/MeOH＝15/1)得到白色固体UB-181290c(60mg,收率64％)。LCMS[M+H]+＝550.8.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.87(s,1H),9.54(d,J＝21.5Hz,2H), 7.50–7.40(m,3H),6.93(dd,J＝8.6,1.9Hz,1H),6.68(s,1H),6.43(d,J＝2.6Hz,1H),6.24(s,1H), 4.33(s,1H),4.21(d,J＝6.8Hz,2H),3.80(d,J＝11.4Hz,1H),2.96–2.83(m,3H),2.64(dd,J＝29.0, 5.1Hz,4H),2.33(d,J＝1.8Hz,2H),1.70(dd,J＝19.0,11.0Hz,4H),1.44(s,1H),0.79(d,J＝6.9Hz, 6H).
步骤10:UB-181290
UB-181290b(11mg,0.02mmol)，UB-181295(30mg,0.02mmol),DIEA(5mg,0.04mmol)溶于DMF(1mL)室温反应1小时。反应液用高压制备纯化(MeCN/H2O/FA)得到黄色固体 UB-181290(2.3mg,收率7.6％)。LCMS[M/2+H]＝1005.17
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.86(d,J＝15.4Hz,2H),10.98(s,1H),9.70(s,1H),9.55(d,J＝ 23.7Hz,2H),9.22(s,1H),8.79(s,1H),8.28(s,2H),8.16(d,J＝6.2Hz,2H),8.11(d,J＝7.6Hz,1H), 8.01(d,J＝7.0Hz,1H),7.79(s,1H),7.73(s,1H),7.67(m,J＝16.0,8.2Hz,3H),7.60(s,1H),7.52– 7.43(m,6H),7.42(d,J＝1.8Hz,1H),7.40(s,1H),7.31(d,J＝8.2Hz,2H),7.08(s,1H),6.98–6.87(m, 4H),6.67(s,1H),6.42(d,J＝2.9Hz,1H),6.24(s,1H),6.12(d,J＝5.5Hz,1H),5.08(m,J＝15.0,6.5 Hz,3H),4.61(d,J＝7.2Hz,1H),4.41(d,J＝17.7Hz,1H),4.28(m,J＝16.4,9.7Hz,3H),4.20(m,J＝ 12.5,6.7Hz,3H),4.00(d,J＝6.9Hz,1H),3.78(s,3H),3.48(s,5H),3.17(m,J＝18.4,9.0Hz,2H), 3.03(s,4H),2.97–2.78(m,6H),2.76–2.56(m,10H),2.45–2.31(m,2H),2.09(t,J＝7.2Hz,2H), 2.04–1.95(m,1H),1.82(d,J＝10.6Hz,4H),1.69(m,J＝18.7,10.9Hz,4H),1.47(s,9H),1.21(t,J＝7.4Hz,9H),0.81(t,J＝15.8Hz,6H).
化合物UB-181291的合成方法
Figure BDA0003295775120000882
步骤1:UB-181291
UB-181291a是利用固相合成制备得到(WO2011/145707A1)
向UB-181291a(150mg,0.14mmol),Py-S-S-1189(30mg,0.05mmol)的DMF(3ml)溶液中加入DIEA(20mg,0.07mmol)。反应液室温搅拌18h。反应液经制备型HPLC纯化得到白色固体 UB-181291(4mg,1％收率)。LCMS[M+H]+＝1018.9.
化合物UB-181294的合成方法
Figure BDA0003295775120000891
步骤1:UB-181294
UB-181290c(50mg,0.09mmol)，Py-S-S-1189(50mg,0.045mmol),DIEA(11mg,0.09mmol) 溶于DMF(1mL)室温反应1小时。反应液用高压制备纯化(MeCN/H2O/FA)得到白色固体 UB-181294(3.8mg,收率2.8％)。LCMS[M/2+H]＝756.90
化合物UB-181295的合成方法
Figure BDA0003295775120000892
步骤1:UB-181295b
向UB-181149i(2.66g,4.28mmol)和UB-181295a(1.2g,3.86mmol)的DMF(20ml)溶液中加入 DIEA(830mg,6.43mmol)。反应液室温下搅拌18小时。反应液油泵拉干得到的固体进行柱层析纯化(DCM/DCM:MeOH:THF(10:0.5:0.5)＝0-96％)得到UB-181295b(1.9g,60％收率)的白色固体 LC-MS:[M+H]+＝816.0
步骤2:UB-181295c
向UB-181295b(500mg,0.6mmol)的TIS(1mL)溶液中加入CF3COOH(2ml),反应液0℃搅拌15min。将NaHCO3(2.25g,水溶液25ml)加入反应液中.混合物过滤，滤液经反相柱层析纯化(H2O:乙腈＝0％-12％)得到UB-181295c(90mg,25％收率)的白色固体.LCMS[M+H]+＝573.7
步骤3:UB-181295e
向UUB-181295c(180mg,0.3mmol)和UB-181295d(190mg,0.6mmol)的DMF(15ml)溶液中加入DIEA(81mg,0.6mmol)。室温反应2。反应液油泵拉干，得到的固体用***打浆。混合物经制备型TLC(DCM/MeOH＝10/1)纯化得到黄色固体UB-181295e(210mg,90％收率)。LCMS[M+H]+ ＝738.9
步骤4:UB-181295
向UB-181295e(210mg,0.28mmol),UB-181189(244mg,0.28mmol)和HOBt(77mg,0.56 mmol)的DMF(2mL)溶液中加入DIPEA(110mg,0.85mmol)室温搅拌18h。反应液经制备型HPLC 纯化得到白色固体UB-1812957(220mg,53％收率)。LCMS[M+H]+＝1458.6
化合物UB-181302的合成方法
Figure BDA0003295775120000901
步骤1:UB-181302
化合物UB-181295e(369mg,0.50mmol),UB-181103(349mg,0.40mmol),HOBt(68mg,0.50mmol)以及DIPEA(194mg,1.50mmol)溶于DMF(5mL)后室温反应过夜，反应液通过制备得到白色固体目标产物UB-181302(259mg,收率35％)。LCMS[M+H]+＝1472.3
化合物UB-181297的合成方法
Figure BDA0003295775120000902
步骤1:UB-181297
化合物UB-181285d(30mg,0.01mmol)溶于TEAA(2mL)后加入UB-181275a(16mg,0.01 mmol)的DMF(2.5mL)溶液。室温反应2小时后通过反相柱层析分离得到15mg粗产物。该粗产物通过制备得到白色固体目标产物UB-181297(7.5mg,17％收率)。LCMS[M/2+H]+＝1499.2
化合物UB-181298的合成方法
Figure BDA0003295775120000903
步骤1:UB-181298
化合物UB-181291a(10mg,0.9*10-3mmol)溶于醋酸缓冲溶液(1mL)后加入UB-181302(7mg, 4.7*10-3mmol)的DMF(2mL)溶液。该反应液在室温下过夜。反应液通过制备得到黄色固体产物 UB-181298(9mg,收率76.6％)。LCMS[M/2+H]+＝1260
化合物UB-181299的合成方法
Figure BDA0003295775120000911
步骤1:UB-181299
化合物UB-181241d(50mg,0.02mmol)溶于1M TEAA(1mL)后加入Py-S-S-1103(24mg,0.02 mmol)的DMF(1.5mL)溶液。室温反应2小时后通过反向柱层析分离得到15mg粗产物。该粗产物通过制备得到白色固体目标产物UB-181299(8mg,收率9％)。LCMS[M/2+H]+＝1050.2
化合物UB-181301的合成方法
Figure BDA0003295775120000912
步骤1:UB-181301
室温下，UB-181295(93mg,0.064mmol)溶于DMF(4ml)滴加到UB-181291a(100mg,0.096 mmol)和TEAA(2ml)的反应液中.室温反应半小时.反应液使用Flash纯化 (MeCN/H2O/50mmol/l NH4HCO3)得到产品黄色固体UB-181301(23.9mg,收率15％). LCMS[M/2+H]＝1253.05
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.84(s,1H),9.72(d,J＝22.3Hz,1H),9.22(s,1H),8.79(s,1H), 8.63(s,1H),8.49(s,2H),8.28(s,3H),8.15(s,3H),7.87(s,1H),7.80(d,J＝8.0Hz,2H),7.75–7.55(m, 10H),7.52–7.38(m,8H),7.31(d,J＝8.3Hz,3H),7.08(t,J＝7.8Hz,2H),6.90(d,J＝9.1Hz,5H), 6.62(d,J＝8.3Hz,2H),6.11(s,1H),5.08(dd,J＝14.7,6.4Hz,3H),4.61(d,J＝7.2Hz,2H),4.54– 4.35(m,6H),4.33–4.11(m,7H),4.00(d,J＝41.0Hz,3H),3.78(s,3H),3.47(s,8H),3.03(s,6H), 2.68(dd,J＝7.7,5.8Hz,3H),2.57(d,J＝6.6Hz,5H),2.12(d,J＝24.8Hz,6H),1.97(s,4H),1.83(s, 6H),1.64(s,2H),1.47(s,12H),1.21(t,J＝6.7Hz,9H).
化合物UB-181303的合成方法
Figure BDA0003295775120000921
步骤1:步骤1:UB-181303
UB-181295(40mg,0.017mmol)溶于DMF(2ml)室温滴加到UB-181303a(40mg,0.016mmol) 和TEAA(1ml)里，室温反应半小时。反应液使用C-18反相色谱柱纯化MeCN/H2O/50mmol/l TEAA 得到黄色固体产品UB-181303(9.5mg,收率14.5％)LCMS[M/3+H]＝1275
化合物UB-181308的合成方法
Figure BDA0003295775120000922
步骤1:UB-181308c
向UB-181308a(3.1g,2.77mmol)的DMF(10mL)溶液中加入UB-181308b(1.87g,2.77mmol) 和DIEA(536mg,4.16mmol)。反应在N2保护下室温搅拌18h。混合物经反相色谱柱纯化得到白色固体UB-181308c(3g,71％收率).LCMS[M+H]＝1545.7
步骤2:UB-181308d
向UB-181308c(3g,1.9mmol)的THF(50ml)溶液中加入DMA(20ml).反应液室温搅拌2h。反应液旋干得到的固体用***打浆得到黄色固体UB-181308d(2.0g,70％收率)。LCMS[M+H]＝1465.5
步骤3:UB-181308f
向UB-181308d(200mg,0.14mmol)的DMF(5mL)溶液中加入UB-181308e(42mg,0.14mmol) 和DIEA(271mg,0.2mmol)。室温反应过夜。混合物经反相色谱柱纯化(AcOH:H2O/ACN-0-100％) 得到白色固体UB-181308f(30mg,15％收率)。LCMS[M+H]+＝1687.5
步骤4:UB-181308g(即UB-181303a)
UB-181308f(600mg,0.36mmol)溶于DMF(6ml)室温滴加到UB-181298a(417mg,0.4mmol) 和TEAA(3ml)的溶液中，室温反应半小时。反应液使用C-18反相色谱柱纯化MeCN/H2O/50mmol/l TEAA得到黄色固体产品UB-181308g(780mg,收率80％)。 LCMS[M/2+H]＝1353.7
步骤5:UB-181308h
TIPS(3ml)溶于TFA(30ml)零摄氏度滴加到5(780mg,0.29mmol)里，零摄氏度反应半小时。反应液溶剂低温旋干，用diisopropyl ether(100ml)洗，上清液倒出，重复此操作4次，沉淀旋干得到黄色固体产品UB-181308h 7(600mg,收率88％)。LCMS[M/2+H]＝1182.1
步骤6:UB-181308
UB-181302(15mg,0.014mmol)溶于DMF(2ml)室温滴加到6(40mg,0.016mmol)和TEAA(1ml)里，室温反应半小时。反应液使用C-18反相色谱柱纯化MeCN/H2O/50mmol/l TEAA得到黄色固体产品UB-181308(5.6mg,10.4收率％)。LCMS[M/3+H]＝1279.76
化合物UB-181309的合成方法：
Figure BDA0003295775120000931
步骤1:UB-181309b
化合物UB-181309a(5.0g,12.2mmol),化合物对氨基苯甲醇(1.5g,12.2mmol),HATU(9.3g, 24.4mmol)溶于DMF(50mL)中，向反应液中滴加DIEA(3.2g,24.4mmol)后在室温反应2小时。反应完成后减压浓缩除去DMF得到粗品，并用硅胶柱层析分离(二氯甲烷/(甲醇/四氢呋喃)＝ 10％～40％,20分钟得到黄色固体目标产物(7.6g粗品)。LCMS:[M+1]+＝516.
步骤2:UB-181309c
将化合物UB-181309b(3.8g,7.4mmol)溶于THF(40mL)，向反应中加入DMA(25mL,500 mmol)后在室温反应2小时，反应结束后减压浓缩除去THF得到粗品，用异丙醚清洗粗品(30mL*3)，将异丙醚倾倒，将剩余不溶物减压浓缩得到黄色油状目标产物UB-181309c(2.0gcrude)。LCMS: [M+1]+＝294.
步骤3:UB-181309e
将化合物UB-181309c(2g,6.8mmol),UB-181309d(2.0g,3.0mmol),HATU(2.3g,6.0mmol) 溶于DMF(20mL)中，向反应液中滴加DIEA(0.77g,6.0mmol)后在室温反应2小时。反应完成后减压浓缩除去DMF得到粗品，并用硅胶柱层析分离(二氯甲烷/(甲醇/四氢呋喃)＝10％～40％,20分钟得到黄色固体目标产物UBI-180857e(2.5g,收率71.4％)。LCMS:[M+1]+＝940.
步骤4:UB-181309f
将化合物UB-181309e(2.5g,2.6mmol)溶于THF(25mL)，向反应中加入DMA(9.2mL,182 mmol)后在室温反应2小时，反应结束后减压浓缩除去THF得到粗品，用异丙醚清洗粗品(10mL*3)，将异丙醚倾倒，将剩余不溶物减压浓缩得到黄色油状目标产物UB-181309f(1.9gcrude)。LCMS: [M+1]+＝718.
步骤5:UB-181309g
将化合物UB-181309f(400mg,0.55mmol)溶于THF(4mL)，将N-甲氧基羰基顺丁烯二酰亚胺 (172mg,1.1mmol)的水溶液(2mL)加入反应液中，在0℃的条件下将碳酸钾(152mg,1.1mmol)的水溶液(2mL)缓慢滴加于反应液中，在室温反应20分钟，反应结束后用1N的盐酸溶液调节反应液至中性，反应液直接反相柱分离(H2O/CH3CN＝20％～60％20分钟)，将所得液体冻干得到白色固体化合物UB-181309g(140mg,收率31.4％)。LCMS:[M+1]+＝798.
步骤6:UB-181309h
将化合物UB-181309g(120mg,0.15mmol),二(对硝基苯)碳酸酯(92mg,0.3mmol)溶于 DMF(2mL),向反应中滴加DIEA(38.7mg,0.3mmol)后室温条件下过夜反应。反应结束后减压旋蒸除去DMF得到粗品，用异丙醚清洗粗品(5mL*3)，将异丙醚倾倒，将剩余不溶物减压浓缩得到荧光黄色油状物UB-181309h(152mg粗品)。LCMS:[M+1]+＝963.
步骤7:UB-181309
将化合物UB-181309h(152mg,0.16mmol),UB-180961(97.5mg,0.11mol),HOBt(42.7mg, 0.32mmol)溶于DMF(2mL)，向反应中滴加DIEA(60.6mg,0.47mmol)后室温条件下过夜反应。反应液直接反相色谱分离(5‰三氟乙酸水溶液/乙腈＝35％～60％10分钟)将所得液体冻干得到白色固体化合物UB-181309(21.8mg,收率11.5％)。[M+1]+＝1708。
化合物UB-181310的合成方法
Figure BDA0003295775120000941
步骤1:UB-181310
Py-S-S-1189(15mg,0.014mmol)溶于DMF(2ml)室温滴加到6(40mg,0.016mmol)和TEAA(1ml)里，室温反应半小时。反应液使用C-18反相色谱柱纯化MeCN/H2O/50mmol/l TEAA得到黄色固体产品(18mg,收率39％)。LCMS[M/3+H]＝1109.06
化合物UB-181311的合成方法
Figure BDA0003295775120000942
步骤6:UB-181311
Py-S-S-1103(15mg,0.014mmol)溶于DMF(2ml)室温滴加到6(40mg,0.016mmol)和TEAA(1ml)里，室温反应半小时。反应液使用C-18反相色谱柱纯化MeCN/H2O/50mmol/l TEAA得到黄色固体产品UB-181311(10.2mg,收率22％)。LCMS[M/3+H]＝1122.91
化合物M26的合成方法
Figure BDA0003295775120000951
步骤1:M26-c
化合物M26-a(50mg,0.096mmol),M26-b(31mg,0.19mmol)溶于正丁醇(2mL)后加入催化量4M HCl二氧六环溶液，微波至150℃ 1小时。反应液浓缩得到黄色固体M26-c(40mg,收率 62.8％)。LCMS[M+1]+＝663.4
步骤2:M26
化合物M26-c(40mg,0.06mmol)溶于甲醇(2mL)后加入K2CO3(42mg)，反应体系于室温搅拌过夜反应。反应液浓缩后通过柱层析分离(DCM:MeOH＝10:1)得到黄色固体M26-c(25mg,收率73％)。LCMS[M+1]+＝568.3
化合物UB-181315的合成方法
Figure BDA0003295775120000952
步骤1:UB-181315b
化合物UB-181315a(700mg,2.47mmol)溶于ACN(20mL)加入对氟硝基苯(418.2mg,2.96mmol),K2CO3(853mg,6.17mmol)于80℃反应过夜。反应液冷却后过滤，浓缩粗品用柱层析分离(PE/EtOAc＝0～10％)得到黄色固体UB-181315b(800mg,收率80％)。LCMS[M+H]+＝405.2
步骤2:UB-181315c
化合物UB-181315b(800mg)溶于DCM(20mL)加入Pd/C(100mg)H2保护下室温反应2小时。过滤滤液浓缩得到黄色油状粗产物UB-181315c(500mg)。LCMS[M+H]+＝375.3
步骤3:UB-181315e
化合物UB-181315c(200mg,0.53mmol),UB-181315d(151mg,0.53mmol)溶于正丁醇(2 mL)后加入催化量4M HCl二氧六环溶液，并通过微波合成仪加热至150℃ 1小时。反应液浓缩后通过柱层析分离(MeOH/DCM＝1/10)得到黄色固体UB-181315(200mg,收率72％)。
步骤4&5:UB-181315g
化合物UB-181315e(200mg,0.38mmol)溶于ACN(40mL)加入UB-181315f(258g,1.15mmol),K2CO3(160mg,1.15mmol)80℃反应过夜。反应液冷却后过滤，滤液加入aq.NaHCO3(3mL) 和Boc2O(1mL)室温反应4小时。将反应液浓缩粗品用柱层析分离(PE/EtOAc＝10～40％)得到白色固体UB-181315d(60mg,23.2％yield)。LCMS[M+H]+＝673.4
步骤6:UB-181315
通用方法1。LCMS[M+H]+＝816.9
化合物UB-181313的合成方法
Figure BDA0003295775120000961
步骤1:UB-181313
化合物UB-181313a(20mg,0.06mmol)溶于DMF(3mL)后加入UB-180961(40mg,.0.05mmol),HOBT(8mg,0.06mmol)以及DIEA(15mg,0.11mmol)并室温反应16小时。反应液通过制备得到白色固体目标产物UB-181313(35.6mg,收率57％)。LCMS[M+H]+＝1098.3
化合物UB-181321的合成方法
Figure BDA0003295775120000962
步骤1:UB-181321(V3441-114)
Py-S-S-1103(35mg,0.033mmol)溶于DMF(2ml)室温滴加到PS-FA(30mg,0.028mmol) 和TEAA(1ml)里，室温反应半小时。反应液使用C-18反相色谱柱纯化和中压制备色谱 MeCN/H2O/50mmol/l TEAA得到黄色固体产品V3441-114(38.6mg,收率68％)。LCMS[M/2+H]＝1011.33
化合物UB-181322的合成方法
Figure BDA0003295775120000963
Step 1:UB-181322
将化合物UB-181320(30mg，0.016mmol)和UB-181320a(18mg，0.016mmol)混合后溶解在TEEA/DMF(V/V＝1:1，3mL)中，在室温下搅拌1小时。反应混合物然通过反相柱(MeOH/H2O＝5％～95％，45min)直接纯化。得到白色固体化合物UB-181322(8.7mg，产率19％)。LCMS:[1/3M+1]+＝935.9。
化合物UB-181325的合成方法
Figure BDA0003295775120000971
步骤1:UB-181325c
化合物UB-181325a(500mg,6.4mmol)溶于MeOH(25mL)后加入UB-181325b(2.8g,12.8 mmol)，反应液室温反应过夜后浓缩并通过柱层析分离(乙酸乙酯/石油醚＝1/1)得到黄色油状目标产物UB-181325c(1.08g,收率91％)。LCMS[M+H]+＝188.3.
步骤2:UB-181325e
化合物UB-181325c(1.0g,5.3mmol)溶于DCM(20mL)后加入UB-181325d(2.4g,8.0mmol) 以及TEA(1.48mL,10.7mmol)，反应液室温反应过夜后浓缩并通过柱层析分离(二氯甲烷/石油醚＝2/1)得到黄色油状目标产物UB-181325e(950mg,收率51％)。LCMS[M+H]+＝353.5.
步骤3:UB-181325
化合物UB-181325e(200mg,0.57mmol)溶于DMF(20mL)后加入UB-181189(508mg,0.57 mmol)，DIEA(0.2mL.1.14mmol)以及HOBt(77mg,0.57mmol)，反应液室温过夜后通过反向柱层析得到棕色固体目标产物UB-181325(279mg,收率46％)。LCMS[M+H]+＝1072.8.
化合物UB-181326的合成方法
Figure BDA0003295775120000972
步骤1:UB-181326(即Py-S-S-1103)
化合物UB-181325e(200mg,0.57mmol)溶于DMF(20mL)后加入UB-181103(495mg,0.57 mmol)，DIEA(0.2mL.1.14mmol)以及HOBt(77mg,0.57mmol)，反应液室温过夜后通过反相柱层析分离得到棕色固体目标产物UB-181326(270mg,收率44％)。LCMS[M+H]+＝1086.7.
本申请示例性的TED、ACTED、中间体如下表所示：
表A1示例性的TED化合物
Figure BDA0003295775120000973
Figure BDA0003295775120000981
表A2示例性的TED化合物
Figure BDA0003295775120000982
Figure BDA0003295775120000991
Figure BDA0003295775120001001
Figure BDA0003295775120001011
Figure BDA0003295775120001021
表E1
Figure BDA0003295775120001022
表E2
Figure BDA0003295775120001023
Figure BDA0003295775120001031
Figure BDA0003295775120001041
表D示例性的ACTED偶联物
Figure BDA0003295775120001042
Figure BDA0003295775120001051
Figure BDA0003295775120001061
Figure BDA0003295775120001071
Figure BDA0003295775120001081
Figure BDA0003295775120001091
Figure BDA0003295775120001101
Figure BDA0003295775120001111
Figure BDA0003295775120001121
Figure BDA0003295775120001131
Figure BDA0003295775120001141
测试例
测试例1细胞增殖实验：
试剂：RPMI-1640培养基、McCoy’s5A培养基、IMDM培养基、MEM培养基、L-15培养基、胎牛血清、青-链双抗、胰蛋白酶等、2-巯基乙醇、NEAA、丙酮酸酯等。
本实验使用的部分细胞株，如下表1：
表1.细胞株列表
Figure BDA0003295775120001142
细胞进行常规培养，细胞铺板前至少传2代以上。收集处于对数生长期细胞，制备成单细胞悬液并计数，调整细胞浓度至所需浓度，以每孔加入100μl接种到96孔细胞培养板内。每孔加入100μL 受试化合物的完全培养基，每个浓度皆设2个复孔，5倍梯度往下稀释，继续培养72h。所有细胞都进行相对应受试样品的EC50测定。实验结果如测试例4所示。
使用Alarm blue法检测各孔荧光强度，并计算IC50。
IC50由以下公式计算：
Y＝Max+(Min-Max)/[1+(X/IC50)×Slope]
其中Min、Max和Slope分别表示最小值、最大值和斜率。
测试例2蛋白质印迹
细胞用化合物处理一定时间后，离心收集细胞，PBS清洗后，加入RIPA缓冲液裂解细胞；细胞裂解液加入加样缓冲液(Loading buffer)后取适量体积缓慢加到胶板对应的孔中，跑SDS-PAGE胶 (4％-12％)。跑胶结束后转到PVDF膜上，用5％脱脂奶粉室温封闭1小时。将膜放到用5％脱脂奶粉稀释的一抗中，4℃慢摇过夜。一抗孵育结束后，用TBST摇床洗膜3次；加入与一抗对应的用5％脱脂奶粉稀释的二抗，室温慢摇1小时。二抗孵育结束后，再次用TBST摇床洗膜3次。将PVDF膜平放到暗盒中，用ECL显影液均匀浸润条带，置于ChemDocXRS+凝胶成像仪中拍照。使用ImageJ软件定量分析蛋白条带强度，结果如图1和图2所示。
可见，本发明的偶联物(或TED分子)对靶蛋白表现出浓度相关的降解活性。
测试例3体外激酶活性实验
用1x反应缓冲液(reaction buffer)将化合物、酶、底物和ATP稀释到所需浓度。384孔板中加入1μL不同浓度化合物、2μL酶、2μL底物/ATP混合溶液，室温孵育1小时。然后每孔加入5μL ADP1-GloTM试剂，室温孵育40分钟。最后加入10μL检测试剂，室温孵育30分钟后使用Envision检测化学发光信号。
可见，本发明中合成制备的TED分子，在多种肿瘤细胞系中表现出很强的细胞增殖抑制活性，具有成为抗肿瘤药物的前景。
测试例4
按照前述测试例的方法对表A1中部分化合物(或偶联物)进行了活性测试，测试结果汇总如表2 所示：
表2
Figure BDA0003295775120001151
Figure BDA0003295775120001161
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种如式I所示的偶联物或其药学上可接受的盐，其特征在于，
RT-L1-RE3  (I)
其中，
(a)所述RE3为E3连接酶配体部分；
(b)所述RT为靶标分子部分；
(c)所述L1为连接RE3和RT部分的连接头，且L1如式II所示；
-W1-L2-W2-    (II)
其中，
W1和W2各自独立地为-(W)s-；
W各自独立地选自下组：无(键)、-C(Rb)2-、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、-SO2-、-SO-、-PO3-、-C(Rb)＝C(Rb)-、-C≡C-、NR、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的5至10元杂芳基；
s＝0、1、2、3、或4；
L2如式III所示，
-(ML)o-    (III)
其中，
ML各自独立地为M、MT或MN；
其中，
o为5～50的整数；
M各自独立地为选自下组的二价基团：-C(Rb)2-、、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、-SO2-、-SO-、-PO3-、-C(Rb)＝C(Rb)-、-C≡C-、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的5至10元杂芳基、氨基酸残基；
MN各自独立地为选自下组的二价基团：-N(R')-、-N(含N(R')环原子的4至10元杂环烷基)-、含N(R')环原子的4至10元杂环烷基、被至少一个-N(Rb)R'(较佳地，-NHR')所取代的-C(Rb)2-、C3-8环烷基、4至10元杂环烷基、C6-10芳基或5至10元杂芳基；
MT各自独立地为选自下组的二价基团：-N(R")-、-N(含N(R")环原子的4至10元杂环烷基)-、含N(R")环原子的4至10元杂环烷基、被至少一个-N(Rb)R"所取代的-C(Rb)2-、C3-8环烷基、4至10元杂环烷基、C6-10芳基或5至10元杂芳基；
R为R'或R"；
R'各自独立地选自下组：H、C1-6烷基、OH、SH、-COO-C1-6烷基、-OC(O)-C1-6烷基、氨基保护基团；
R"为-W3-LT1-WP1-(RP)q1；
下标q1＞0(较佳地，q1＝1)；
WP1为无、-S-S-或
Figure FDA0003295775110000011
其中，*代表与LT1连接的部分；较佳地，WP1为-S-S-或
Figure FDA0003295775110000012
RP为-W4-RP1；W4为无或-(W")s1-WP2-(W")s2-；其中，下标s1和s2各自独立地为0、1、2、3或4，WP2为无、NH、-C(Rb)(NRa)-(如-CH(-NH2)-)、-N(R"')-或-C(Rb)(NH(R"'))-；
R"'为-W5-LT2-W6-LT3-RP2；
LT1为-(M')t1-WY-(M')t2-；
LT2为-(M')t3-；
LT3为-(M')t4-；
下标t1、t2、t3和t4各自独立地为0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10(较佳地，t1、t2、t3和t4各自独立地为0、1、2或3)；
M'各自独立选自下组：-C(Rb)2-、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、-SO2-、-SO-、-PO3-、取代或未取代的C1-10亚烷基、-(CH2CH2O)1-10-、氨基酸残基、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基、取代或未取代的C6-10芳基、和取代或未取代的5至10元杂芳基；并且任选地1或2个M'为WX；
WX为亲水性二价连接部分；
WY为无或在细胞表面或细胞质内可裂解的二价连接部分；
W3为-(W')s3-；其中，下标s3＝0、1或2；
W5为-(W')s4-；其中，下标s4＝0、1或2；
W6为
Figure FDA0003295775110000021
或-(W")s6-；其中，下标s6＝0、1、2、3或4；
W'各自独立地为选自下组的二价基团：-C(Rb)2-、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、-SO2-、-SO-、-PO3-、氨基酸残基、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的5至10元杂芳基；
W"各自独立地为选自下组的二价基团：-C(Rb)2-、-O-、-S-、-N(Ra)-、-C(O)-、-SO2-、-SO-、-PO3-、氨基酸残基、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基、取代或未取代的C6-10芳基、和取代或未取代的5至10元杂芳基；
RP1和RP2各自独立地为相同或不同的多肽元件或者靶标分子T；优选地，RP1和RP2各自独立地为不同的多肽元件或者靶标分子T；
Ra各自独立地选自下组：H、OH、SH、取代或未取代的C1-6烷基、氨基保护基团、含N(Rc)环原子的4至10元杂环烷基；
Rb各自独立地选自下组：H、卤素、OH、SH、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的C2-6烯基、取代或未取代的C2-6炔基、取代或未取代的C1-6烷氧基、取代或未取代的C1-6烷基酰基(-C(O)-C1-6烷基)、羧基、-COO-C1-6烷基、-OC(O)-C1-6烷基；或者，位于相同碳上的2个Rb以及与它们相连的碳共同构成取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的4至10元杂环烷基；
Rc各自独立地选自下组：H、OH、SH、取代或未取代的C1-6烷基、氨基保护基团；
除非特别说明，所述的取代是指基团中一个或多个(如1、2、或3个)氢被选自下组的取代基所取代：卤素(较佳地，F、Cl、Br或I)、氰基(CN)、氧代(＝O)、硫代(＝S)、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6烷基酰基(C1-6烷基-C(O)-)、-COO-C1-6烷基、-OC(O)-C1-6烷基、NH2、NH(C1-6烷基)、N(C1-6烷基)2。
2.如权利要求1所述的偶联物，其特征在于，
W不为NR；并且
L2为L7，且L7如式IIIb所示；
-(M)o1-(MT)-(M)o2- (IIIb)
其中，M、MT如前定义；
o1和o2各自独立地为1～50的整数且4≤o1+o2≤49。
3.如权利要求1或2所述的偶联物，其特征在于，
所述细胞表面或细胞质内可裂解的二价连接部分选自下组：
Figure FDA0003295775110000031
和/或，
所述亲水性二价连接部分选自下组：
Figure FDA0003295775110000032
其中，n5为0-30的整数。
4.如权利要求1或2所述的偶联物，其特征在于，
RP1和RP2各自独立地选自下组：
Figure FDA0003295775110000033
和/或，
RT选自表B1或表B2
表B1
Figure FDA0003295775110000034
表B2
Figure FDA0003295775110000041
各式中，RPa选自下组：任选取代的C1-6烷基、任选取代的C2-6烯基、任选取代的C2-6炔基和/或，
RE具有如式A1或A2所示的结构：
Figure FDA0003295775110000042
式A中，RX选自：无、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、O、NH、S、CO或SOn(n为1或2)等；RY为CH2、C＝S、CO。
5.如权利要求1或2所述的偶联物，其特征在于，所述偶联物选自：
Figure FDA0003295775110000043
6.如权利要求1所述的偶联物，其特征在于，L2为L6，且L6如式IIIa所示；
-(M)o1-(MN)-(M)o2-   (IIIa)
其中，
M、MN如前定义；
o1和o2各自独立地为1～50的整数且4≤o1+o2≤49。
7.如权利要求1或6所述的偶联物，其特征在于所述偶联物选自表A2。
8.一种药物组合物，其中，所述的药物组合物含有如权利要求1所述的偶联物和药学上可接受的载体。
9.一种如权利要求1所述的偶联物在制备用于治疗或预防与靶标蛋白过量相关的疾病的药物中的的用途。
10.一种如权利要求1所述的偶联物在治疗或预防与靶标蛋白过量相关的疾病中用途。
CN202111176342.5A 2021-10-09 2021-10-09 靶向蛋白酶降解(ted)平台 Pending CN115960104A (zh)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111176342.5A CN115960104A (zh) 2021-10-09 2021-10-09 靶向蛋白酶降解(ted)平台
PCT/CN2022/124206 WO2023056981A1 (zh) 2021-10-09 2022-10-09 靶向蛋白酶降解(ted)平台

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111176342.5A CN115960104A (zh) 2021-10-09 2021-10-09 靶向蛋白酶降解(ted)平台

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN115960104A true CN115960104A (zh) 2023-04-14

Family

ID=85803191

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111176342.5A Pending CN115960104A (zh) 2021-10-09 2021-10-09 靶向蛋白酶降解(ted)平台

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN115960104A (zh)
WO (1) WO2023056981A1 (zh)

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201614134D0 (en) * 2016-08-18 2016-10-05 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Novel compounds
EP3706736A4 (en) * 2017-11-10 2021-08-11 The Regents of the University of Michigan ASH1L DEGRADATION AGENTS AND METHODS OF TREATMENT THROUGH THEM
CN111018857B (zh) * 2018-10-09 2023-06-02 嘉兴优博生物技术有限公司 靶向蛋白酶降解平台(ted)
WO2021078301A1 (zh) * 2019-10-24 2021-04-29 上海科技大学 蛋白降解剂及其在疾病治疗中的应用
CN111285851A (zh) * 2020-03-23 2020-06-16 沈阳药科大学 靶向降解黏着斑激酶的化合物及其在医药上的应用
CN113509557A (zh) * 2020-04-09 2021-10-19 嘉兴优博生物技术有限公司 靶向蛋白酶降解平台(ted)

Also Published As

Publication number Publication date
WO2023056981A1 (zh) 2023-04-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7195402B2 (ja) シリコン系薬物複合体及びその使用方法
AU2017277949B2 (en) Silanol based therapeutic payloads
ES2783624T3 (es) Dímeros de benzodiacepina, conjugados de los mismos y métodos de preparación y uso
JP2024038168A (ja) 生物活性分子コンジュゲート、その調製法及び使用
WO2020073930A1 (zh) 靶向蛋白酶降解平台(ted)
ES2604668T3 (es) Nuevos derivados de benzodiacepina
CN106255513B (zh) 用于药物偶联物的含磺酰胺连接***
US20140243322A1 (en) Bivalent bromodomain ligands, and methods of using same
WO2021205391A1 (zh) 靶向蛋白酶降解(ted)平台
ES2722103T9 (es) Agentes citotóxicos bifuncionales
KR20230035332A (ko) 항엽산제 링커-약물 및 항체-약물 접합체
CN115209922A (zh) 缀合物及其用途
CN111542324B (zh) 细胞毒性剂及其偶联物、其制备方法及用途
CN115960104A (zh) 靶向蛋白酶降解(ted)平台
WO2023098831A1 (zh) 靶向蛋白酶降解(ted)平台
US20240066138A1 (en) Antibody-drug conjugates, pharmaceutical compositions, and therapeutic applications
WO2024041661A1 (zh) 细胞周期蛋白调节剂

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication