CN115558622A - 卷曲乳杆菌及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及卷曲乳杆菌及其应用。本发明提供了保藏编号为CCTCC NO:M 20221273的卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)及其应用。实验表明，本发明提供的卷曲乳杆菌能够促进细胞增殖、修护皮肤屏障，在皮肤保湿、抗衰老等方面具有优异的效果，适用于制备改善皮肤相关功能的食品、药品、化妆品等。

Description

卷曲乳杆菌及其应用

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及卷曲乳杆菌及其应用。

背景技术

皮肤是人体最大的器官，覆盖整个全身，它能保护各种组织和器官免受多种侵害，同时也可以防止机体内的各种营养物质、水分等流失，对人体有重要作用。目前，由于环境变化、空气污染、饮食习惯变化、护肤品刺激等多种因素，所造成的皮肤屏障受损，进而导致皮肤干燥、老化以及炎症等问题，时刻困扰着人们。

其中，皮肤衰老是所有机体均不可逆转的过程，因皮肤作为人体最外在、最表浅的器官，其老化状态可更为直观的展现出来。长期受紫外线辐射所导致的光老化是外源性老化的主要类型。光老化皮肤主要表现为毛细血管扩张、粗糙干燥、松弛、皱纹加深加粗、色素沉着等。并且长期紫外线的照射可能引起***的退化、DNA损伤及免疫抑制，从而导致各种良性或恶性肿瘤(如鱗状细胞癌、恶性黑素瘤等)的出现。因皮肤光老化的状态可最为直接显著的影响人们的外观，以及可能造成恶性肿瘤等不良预后，对人们的心身健康均可产生严重的影响，故对光老化的研究成为目前皮肤科热点

近年来，越来越多的研究发现微生态对于皮肤健康有重要影响，而微生物作为调节皮肤微生态平衡的手段，通过抗氧化、减少细胞外基质降解和抑制炎症因子的表达，从而实现了延缓皮肤光老化。如有研究发现短双歧杆菌Yakult能显著抵抗UV辐射引起的无毛小鼠皮肤损伤问题，具体表现为皮肤中弹性蛋白酶的活性下降，皮肤弹性较不使用短双歧杆菌的小鼠明显增加的现象。

因此，提供一种利用微生物技术开发的皮肤微生态相关产品，在改善皮肤状态方面具有广大的应用价值。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供卷曲乳杆菌及其在修护皮肤屏障、延缓皮肤衰老的产品中的应用。

本发明提供了保藏编号为CCTCC NO:M 20221273的卷曲乳杆菌(Lactobacilluscrispatus)。

进一步的，本发明提供了所述卷曲乳杆菌在制备改善皮肤细胞状况的产品中的应用。

进一步的，本发明提供了改善皮肤状况的产品，由包括所述卷曲乳杆菌的原料制成。

更进一步的，所述产品包括如下Ⅰ或Ⅱ所示的一种或两种：

Ⅰ、所述的卷曲乳杆菌的灭活菌和/或灭活上清液；

Ⅱ、所述的卷曲乳杆菌的培养物、外泌体、裂解物和/或提取物。

所述产品的剂型包括膏霜类、乳液类、油剂类、水剂类、凝胶类、粉剂类、冻干类中的至少一种，本发明对此不做限定。

本发明还提供了所述的产品在以下1)～4)至少一项中的应用：

1)、促进细胞增殖；

2)、修护皮肤屏障；

3)、皮肤保湿；

4)、抗衰老。

进一步的，所述促进细胞增殖包括促进皮肤角质细胞和/或成纤维细胞增殖。

在一些具体的实施例中，本发明以HaCaT角质细胞为受试对象，对所述的卷曲乳杆菌的促进细胞增殖效果进行研究。结果表明，所述的卷曲乳杆菌可促进可修复SDS引起的HaCaT角质细胞损伤，提高细胞增殖率，促进增殖率为6.98％～10.57％。

在一些具体的实施例中，本发明以HFF成纤维细胞为受试对象，对所述的卷曲乳杆菌的促进细胞增殖效果进行研究。结果表明，所述的卷曲乳杆菌可促进HFF成纤维细胞，促进增殖率为19.34％～20.57％。

进一步的，所述修护皮肤屏障包括恢复细胞活力和/或正调控屏障修护相关基因的表达；所述屏障修护相关基因包括FLG、IVL、OVOL1和OCLN中的至少一种。

在一些具体的实施例中，本发明以HaCaT角质细胞为受试对象，对所述的卷曲乳杆菌的SDS损伤修复能力进行了研究，结果表明，所述的卷曲乳杆菌可修复SDS引起的细胞损伤，提高细胞增殖率，并上调非损伤细胞的屏障修护相关基因的表达。

进一步的，所述皮肤保湿包括但不限于正调控保湿相关基因的表达，所述的保湿相关基因包括但不限于AQP3和/或GBA。

在一些具体的实施例中，本发明以HaCaT角质细胞为受试对象，研究所述的卷曲乳杆菌的对皮肤的保湿效果，结果显示，所述的卷曲乳杆菌可上调保湿相关基因AQP3和/或GBA的表达，促进皮肤细胞保湿。

进一步的，所述抗衰老包括以下①～⑧中的至少一项：

①、正调控细胞外基质相关基因的表达；所述细胞外基质相关基因包括SPTSSA、SMAD3、LN、MKX和COL1A1中的至少一种；

②、负调控降解细胞外基质相关基因的表达；所述降解细胞外基质相关基因包括MMP家族中的至少一种；

③、负调控细胞凋亡相关基因Caspase-3的表达；

④、负调控抑制细胞凋亡相关基因BCL-2的表达；

⑤、正调控细胞自噬相关基因LC3B的表达；

⑥、正调控细胞抗氧化相关基因PTEN和/或SIRT-1的表达；

⑦、正调控免疫调节因子相关基因MOR的表达；

⑧、正调控细胞生长因子相关基因的表达；所述细胞生长因子相关基因包括FGF1、FGF2、FGF7和HGF中的至少一种。

为了探究所述的卷曲乳杆菌的抗衰老效果，本发明对细胞衰老相关的指标进行了测定，所述的指标包括细胞外基质合成、细胞外基质降解、细胞抗氧化、细胞免疫调节因子、细胞凋亡、细胞自噬、抑制细胞凋亡以及细胞生长因子中的至少一个。

在一些具体实施例中，本发明以HaCaT角质细胞为受试对象，研究所述的卷曲乳杆菌对HaCaT细胞外基质合成相关基因和降解相关基因的影响。结果表明，所述的卷曲乳杆菌可上调细胞外基质合成相关基因COL1A1的表达，促进细胞外基质的合成，下调降解细胞外基质相关基因MMP1的表达，抑制细胞外基质的降解。

本发明以HaCaT角质细胞为受试对象，研究所述的卷曲乳杆菌对HaCaT细胞自噬的影响。结果表明，所述的卷曲乳杆菌可上调细胞自噬相关基因LC3B的表达，促进细胞自噬以清除老化细胞。

本发明以HFF成纤维细胞为受试对象，研究所述的卷曲乳杆菌对HFF细胞外基质合成相关基因和降解相关基因的影响。结果表明，所述的卷曲乳杆菌可上调细胞外基质合成相关基因SPTSSA、SMAD3、LN和MKX的表达，促进细胞外基质的合成，下调降解细胞外基质相关基因MMP3和MMP10的表达，抑制细胞外基质的降解。

本发明以HFF成纤维细胞为受试对象，研究所述的卷曲乳杆菌对HFF细胞凋亡的影响。结果表明，所述的卷曲乳杆菌可下调细胞凋亡相关基因Caspase3的表达，抑制细胞凋亡。

本发明以HFF成纤维细胞为受试对象，研究所述的卷曲乳杆菌对HFF细胞抑制细胞凋亡的影响。结果表明，所述的卷曲乳杆菌可上调抑制细胞凋亡相关基因BCL-2的表达，抑制细胞凋亡。

本发明以HFF成纤维细胞为受试对象，研究所述的卷曲乳杆菌对HFF细胞抗氧化相关基因的表达的影响。结果表明，所述的卷曲乳杆菌可上调抗氧化相关基因PTEN和SIRT-1的表达，增强细胞的抗氧化能力。

本发明以HFF成纤维细胞为受试对象，研究所述的卷曲乳杆菌对HFF细胞免疫调节因子相关基因的表达的影响。结果表明，所述的卷曲乳杆菌可上调免疫调节因子相关基因MOR的表达，增强细胞的免疫调节能力。

本发明以HFF成纤维细胞为受试对象，研究所述的卷曲乳杆菌对HFF细胞生长因子相关基因的表达的影响。结果表明，所述的卷曲乳杆菌可上调细胞生长因子相关基因FGF1、FGF2、FGF7和HGF的表达，增强细胞的生长能力。

本发明还提供了改善皮肤状况的方法，包括：使用本发明所述的产品。所述的产品的使用方法包括内服或外用，所述外用包括涂抹、外敷、熏蒸或注射，本发明对此不做限定。

本发明提供了保藏编号为CCTCC NO:M 20221273的卷曲乳杆菌。本发明提供的卷曲乳杆菌能够促进细胞增殖、修护皮肤屏障，在皮肤保湿、抗衰老等方面具有优异的效果，适用于制备改善皮肤相关功能的食品、药品、化妆品等。

生物保藏说明

卷曲乳杆菌GforU-30(Lactobacillus crispatus GforU-30)，于2022年8月12日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址:中国.武汉.武汉大学，保藏编号为CCTCC NO:M20221273。

具体实施方式

本发明提供了卷曲乳杆菌及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明的卷曲乳杆菌菌株GforU-30，来源于6岁健康女童粪便，经16SrDNA鉴定为卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)。该菌株革兰氏阳性，显微镜下呈杆状；在MRS平板上生长，可形成表面光滑不透明的圆形菌落，白色，边缘整齐；在MRS液体培养基中呈均匀浑浊生长，久置菌体呈白色沉淀，最适生长温度37℃。

卷曲乳杆菌GforU-30(Lactobacillus crispatus GforU-30)，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内，保藏日期：2022年8月12日，保藏编号为CCTCC NO:M 20221273。

进一步，本发明提供的卷曲乳杆菌GforU-30在本发明所述的应用或产品中,存在形式是活的或死的或经间歇灭菌的，或为裂解物和/或提取物的形式，或为细菌产物的形式或为上清液形式或衍生物形式，所述衍生物形式优选地选自：代谢产物、代谢生物产物、外泌体、益生素、细胞壁及其成分、胞外多糖，和含有免疫原性成分的化合物，优选地选自：上清液、灭活菌体。

本发明采用的试材皆为普通市售品，均可市售购买得到，下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1GforU-30的分离

于6岁健康女童粪便中采样。将样品适当处理后于生理盐水中震荡混匀，取上清划线于MRS固体平板，37℃恒温培养48h后，挑取白色菌落反复接种筛选，直至得到均匀的单个菌落，命名为GforU-30。

革兰氏染色镜检：菌株GforU-30为革兰氏染色阳性，显微镜下呈杆状；在MRS平板上生长，可形成白色、表面光滑圆润不透明圆形小菌落，边缘整齐；在MRS液体培养基中呈均匀浑浊生长，久置菌体呈白色沉淀。

实施例2GforU-30的核酸鉴定

1、16S rDNA基因序列分析：

挑取单菌落置MRS液体培养基中，37℃培养过夜后，12000转离心1min收集菌体，按照DNA提取试剂盒步骤进行操作。引物采用细菌通用引物27F,1492R，PCR扩增体系为50μL体系，95℃预变性5min；94℃15s，57℃15s，72℃40s，35个循环；72℃延伸10min。

2、结果

PCR产物测序结果与GenBank中已发表的标准序列进行同源性比较(BLASTN)后得出GforU-30菌株为卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)。

实施例3GforU-30促进SDS诱导的人永生化角质形成细胞HaCaT损伤修复实验

1、GforU-30上清液和灭活菌体制备：

挑取卷曲乳杆菌GforU-30单菌落于MRS液体培养基，37℃培养箱静置培养16～18h，酶标仪检测并以PBS稀释调整OD₆₀₀＝0.2，121℃，30min高压灭活，12000转离心2min，经0.22μm滤膜过滤为上清液。离心沉淀以适量PBS重悬，稀释调整OD₆₀₀＝0.2，为灭活菌体。

2、促进HaCaT细胞修复实验

接种HaCaT细胞(5×10⁴cells/孔)至96孔板，过夜培养至细胞贴壁。配制50μg/mlSDS，每孔加入100μl，5％二氧化碳培养箱37℃培养8h。各孔分别添加5％上清液，10％灭活菌体(对照组分别以等体积PBS替代上清液/灭活菌体)培养24h。向每孔加入10μl的CCK-8溶液，培养4h，检测450nm处吸亮度A。细胞增殖率计算公式及结果如表1所示。

表1GforU-30促进HaCaT细胞修复

上表结果可知，GforU-30上清液及灭活菌体均可促进可修复SDS引起的HaCaT角质细胞损伤，提高细胞增殖率，促进增殖率为106.98％～110.57％。实施例4GforU-30促进HaCaT屏障修护相关基因表达实验

1、GforU-30上清液和灭活菌体制备：

制备方法参照实施例3。

2、促进HaCaT屏障修护相关基因表达实验

接种人永生化角质形成细胞HaCaT(2ml/孔，内含5×10⁵细胞)至6孔板，5％二氧化碳培养箱37℃过夜培养至细胞贴壁。分别加入上清液5％(V/V)，灭活菌体10％(V/V)(对照组分别以等体积PBS替代上清液/灭活菌体)，培养24h后，加入裂解液，提取细胞总RNA，检测RNA浓度及纯度后反转录为cDNA，以GAPDH为内参基因，采用实时qPCR检测FLG、IVL、OVOL1和OCLN基因的表达。分别以添加等体积PBS处理组为对照(基因相对表达倍数F＝1)，利用2^-ΔΔCT法计算各样品F值。

公式：F＝2^-ΔΔCT，其中：

△CT_实验＝CT_实验-CT_{内参(实验)}；

△CT_对照＝CT_对照-CT_{内参(对照)}；

△△CT＝△CT_实验-△CT_对照。

结果见表2及表3。

表2GforU-30上清液上调修复基因的表达

表3GforU-30灭活菌体上调修复基因的表达

体外细胞实验表明，本发明的卷曲乳杆菌GforU-30上清液和灭活菌体具有上调皮肤屏障修护相关因子丝聚合蛋白基因FLG、内皮蛋白基因IVL、OVO样转录因子1基因OVOL1和紧密连接蛋白基因OCLN表达的作用，基因表达量上调1.11～1.76倍。表明GforU-30具有促进皮肤屏障修护的作用。

实施例5GforU-30上调HaCaT保湿相关基因表达实验

1、GforU-30上清液制备：

制备方法参照实施例3。

2、上调HaCaT保湿相关基因表达实验

接种人永生化角质形成细胞HaCaT(2ml/孔，内含5×10⁵细胞)至6孔板，5％二氧化碳培养箱37℃过夜培养至细胞贴壁。加入上清液5％(V/V)(对照组以等体积PBS替代)，培养24h后，加入裂解液，提取细胞总RNA，检测RNA浓度及纯度后反转录为cDNA，以GAPDH为内参基因，采用实时qPCR检测AQP3和GBA基因的表达。以等体积PBS处理组为对照(基因相对表达倍数F＝1)，利用2^-ΔΔCT法计算各样品F值。结果见表4。

表4GforU-30上清液上调保湿基因的表达

体外细胞实验表明，本发明的卷曲乳杆菌GforU-30具有上调保湿相关的水通道蛋白3基因AQP3和葡萄糖脑苷脂酶基因GBA表达的作用，基因表达量上调1.38～1.57倍。表明GforU-30具有促进皮肤保湿的作用。

实施例6：GforU-30调节光老化HaCaT细胞外基质/细胞自噬/降解细胞外基质相关基因表达实验

1、GforU-30上清液及灭活菌体制备：

制备方法参照实施例3。

2、HaCaT细胞制备及紫外线损伤

将HaCaT细胞消化后以0.5ml/孔(内含2×10⁵细胞)接种至24孔板，5％二氧化碳培养箱37℃培养过夜。对孔内细胞进行总剂量为2J/cm²的紫外线UVB照射损伤。

3、GforU-30添加

将上清液5％(V/V)、灭活菌体10％(V/V)分别加入刺激过的HaCaT细胞(对照组分别以等体积PBS替代上清液/灭活菌体)。每组3平行，37℃培养过夜。

4、qPCR法检测细胞外基质/细胞自噬/降解细胞外基质相关基因相对表达倍数

将上述细胞弃去培养基后，加入裂解液，提取细胞总RNA，检测RNA浓度及纯度后反转录为cDNA，以GAPDH为内参基因，采用实时qPCR检测细胞外基质相关基因COL1A1，细胞自噬相关基因LC3B，以及降解细胞外基质相关基因MMP1的表达。以对照组基因相对表达倍数F＝1，利用2^-ΔΔCT法计算各样品F值。

上清液上调细胞外基质相关基因COL1A1；下调降解细胞外基质相关基因MMP1。结果见表5。

表5GforU-30上清液调节细胞外基质/降解细胞外基质相关基因的表达

灭活菌体上调细胞自噬基因LC3B；下调降解细胞外基质相关基因MMP1。结果见表6。

表6GforU-30灭活菌体调节细胞自噬/降解细胞外基质相关基因的表达

体外细胞实验表明，本发明的卷曲乳杆菌GforU-30具有上调HaCaT细胞外基质相关的I型胶原α1链基因COL1A1，细胞自噬相关的微管相关蛋白1轻链3β基因LC3B表达的作用，基因相对表达倍数1.14～1.57；具有下调降解细胞外基质相关的基质金属蛋白酶家族基因MMP1表达的作用，基因相对表达倍数0.41～0.71。

实施例7：GforU-30促进人成纤维细胞HFF的增殖

1、GforU-30灭活菌体的制备：

制备方法参照实施例3。

2、HFF细胞制备及GforU-30添加

接种以DMEM培养的HFF细胞，以100ul/孔(每孔含3×10⁴细胞)转接至96孔板，过夜培养至细胞贴壁。配制200μM H₂O₂，每孔加入100μl，5％二氧化碳培养箱37℃培养1h。弃掉原培养基，PBS清洗两次，加入100μl新培养基，各孔加入灭活菌体10％(V/V)，(对照组以等体积PBS替代)。培养24h。向每孔加入10μl的CCK-8溶液，培养4h，检测450nm处吸亮度A。计算公式及结果如表7所示。

表7GforU-30促进HFF细胞增殖

体外细胞实验表明，本发明的卷曲乳杆菌GforU-30具有促进人成纤维细胞HFF增殖的作用，增殖率119.34％～120.57％。

实施例8：GforU-30调节氧化损伤HFF细胞外基质/抗氧化/免疫调节因子/抑制细胞凋亡/细胞生长因子/降解细胞外基质/细胞凋亡相关基因表达实验

1、GforU-30上清液及灭活菌体制备：

制备方法参照实施例3。

2、HFF细胞制备及H₂O₂诱导氧化损伤

将DMEM培养的HFF细胞消化后以0.5ml/孔(内含2×10⁵细胞)接种至24孔板，5％二氧化碳培养箱37℃培养过夜。每孔加入终浓度为200μM的H₂O₂进行刺激，37℃静置1h。

3、GforU-30添加

将上清液5％(V/V)、灭活菌体10％(V/V)分别加入刺激过的HFF细胞(对照组分别以等体积PBS替代上清液/灭活菌体)。每组3平行，37℃培养过夜。

4、qPCR法检测细胞外基质/抗氧化/免疫调节因子/抑制细胞凋亡/细胞生长因子/降解细胞外基质/细胞凋亡相关基因相对表达倍数

将上述细胞弃去培养基后，加入裂解液，提取细胞总RNA，检测RNA浓度及纯度后反转录为cDNA，以GAPDH为内参基因，采用实时qPCR检测细胞外基质相关基因LN、SPTSSA、MKX和SMAD3，抗氧化相关基因PTEN和SIRT-1，免疫调节因子MOR，抑制细胞凋亡相关基因BCL-2，细胞生长因子相关基因FGF1、FGF2、FGF7和HGF，降解细胞外基质相关基因MMP3和MMP10，以及细胞凋亡相关基因Caspase-3的表达。以对照组基因相对表达倍数F＝1，利用2^-ΔΔCT法计算各样品F值。

上清液上调细胞外基质相关基因LN、SPTSSA和MKX，抗氧化相关基因PTEN，免疫调节因子相关基因MOR，抑制细胞凋亡基因BCL-2，细胞生长因子相关基因FGF7和HGF；下调降解细胞外基质相关基因MMP10，细胞凋亡相关基因Caspase-3，结果见表8。

表8GforU-30上清液调节细胞外基质/抗氧化/免疫调节因子/抑制细胞凋亡/细胞生长因子/降解细胞外基质/细胞凋亡相关基因的表达

灭活菌体上调细胞外基质相关基因SMAD3和SPTSSA，抗氧化相关基因PTEN和SIRT-1，抑制细胞凋亡相关基因BCL-2，细胞生长相关基因FGF1、FGF2、FGF7和HGF；下调降解细胞外基质相关基因MMP3和MMP10。结果见表9。

表9GforU-30灭活菌体调节细胞外基质/抗氧化/抑制细胞凋亡/细胞生长因子/降解细胞外基质相关基因的表达

体外细胞实验表明，本发明的卷曲乳杆菌GforU-30具有上调HFF细胞外基质相关的层粘连蛋白基因LN、丝氨酸棕榈酰转移酶基因SPTSSA、莫霍克蛋白基因MKX和信号转导蛋白基因SMAD3，免疫调节因子相关的β-内啡肽受体基因MOR，抗氧化相关的10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因PTEN、Sirtuins蛋白家族基因SIRT-1，抑制细胞凋亡相关的B淋巴细胞瘤-2基因BCL-2，以及细胞生长因子相关的成纤维细胞生长因子基因FGF1、FGF2、角质细胞生长因子基因FGF7、肝细胞生长因子基因HGF表达的作用，基因相对表达倍数1.13～3.65倍；具有下调降解细胞外基质相关的基质金属蛋白酶家族基因MMP，以及细胞凋亡相关的半胱氨酸蛋白酶家族基因Caspase-3，基因相对表达倍数0.30～0.77。

以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.保藏编号为CCTCC NO:M 20221273的卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)。

2.权利要求1所述的卷曲乳杆菌在制备改善皮肤细胞状况的产品中的应用。

3.改善皮肤状况的产品，其特征在于，由包括权利要求1所述卷曲乳杆菌的原料制成。

4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述产品包括如下Ⅰ或Ⅱ所示的一种或两种：

Ⅰ、权利要求1所述的卷曲乳杆菌的灭活菌和/或灭活上清液；

Ⅱ、权利要求1所述的卷曲乳杆菌的培养物、外泌体、裂解物和/或提取物。

5.根据权利要求3或4所述的产品，其特征在于，所述产品的剂型包括膏霜类、乳液类、油剂类、水剂类、凝胶类、粉剂类、冻干类中的至少一种。

6.权利要求3～5任一项所述的产品在以下1)～4)至少一项中的应用：

1)、促进细胞增殖；

2)、修护皮肤屏障；

3)、皮肤保湿；

4)、抗衰老。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述促进细胞增殖包括促进皮肤角质细胞和/或成纤维细胞增殖。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述修护皮肤屏障包括恢复细胞活力和/或正调控屏障修护相关基因的表达；所述屏障修护相关基因包括FLG、IVL、OVOL1和OCLN中的至少一种。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述皮肤保湿包括正调控保湿相关基因AQP3和/或GBA的表达。

10.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述抗衰老包括以下①～⑧中的至少一项：

①、正调控细胞外基质相关基因的表达；所述细胞外基质相关基因包括SPTSSA、SMAD3、LN、MKX和COL1A1中的至少一种；

②、负调控降解细胞外基质相关基因的表达；所述降解细胞外基质相关基因包括MMP家族中的至少一种；

③、负调控细胞凋亡相关基因Caspase-3的表达；

④、负调控抑制细胞凋亡相关基因BCL-2的表达；

⑤、正调控细胞自噬相关基因LC3B的表达；

⑥、正调控细胞抗氧化相关基因PTEN和/或SIRT-1的表达；

⑦、正调控免疫调节因子相关基因MOR的表达；

⑧、正调控细胞生长因子相关基因的表达；所述细胞生长因子相关基因包括FGF1、FGF2、FGF7和HGF中的至少一种。