CN115011510B

CN115011510B - 一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用

Info

Publication number: CN115011510B
Application number: CN202210550115.2A
Authority: CN
Inventors: 刘新; 刘广超; 李宁; 叶青; 赵方贵; 李雅华; 车永梅
Original assignee: Qingdao Agricultural University
Current assignee: Qingdao Agricultural University
Priority date: 2022-05-20
Filing date: 2022-05-20
Publication date: 2023-04-28
Anticipated expiration: 2042-05-20
Also published as: CN115011510A

Abstract

本发明公开了一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用，该菌被命名为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)43B4，在2022年4月18日，被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No 24710。微生物菌剂的活性成分包括上述嗜麦芽寡养单胞菌。该菌株是从盐碱地土壤中筛选到的高效稳定的多功能菌种，具有优异的耐盐能力，同时还具有降盐、解有机磷、解钾和固氮等多种促生特性，利用该菌制备的微生物菌剂能在盐胁迫下显著提高植物的耐盐能力，减缓盐害现象，增加生物量，提高其种子萌发率，促进番茄与辣椒生长的作用，提高植物的耐盐性，减少化学肥料的使用，基于其优异的综合生物学特性，菌株43B4及其微生物菌剂具有广泛的应用前景。

Description

一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用。

背景技术

目前，全球盐碱地的累计覆盖面积已经高达9.5亿hm²，占世界平均地表所含覆盖总面积的10％左右，并且每年仍以125万hm²左右的速度在持续增加，因此，土壤盐碱化问题已成为当下全球最严重的环境问题之一。就我国而言，现在我国盐渍土的面积约为9913万hm²，主要分布在我国的23个省、市、自治区的平原、盆地和沿海地区，其中我国滨海地区、东北地区、长江以北以及黄河中下游拥有超过14亿亩的盐碱土壤，土地盐碱化严重影响着这些地区的农业生产。

盐碱地土壤的物理化学性质一般都比较差，且土壤肥力偏低，这很大程度上限制了植物的生长和农作物生产。过量的盐分离子也会对植物生长有显著的胁迫和抑制作用，土壤中盐分过多，会导致土壤渗透压急剧增大，打破植物根系的内外渗透压平衡，从而影响植物水分吸收；同时，盐胁迫还会改变细胞内抗氧化酶的结构和功能，损伤细胞的结构，影响细胞的渗透压；盐胁迫除了影响植物的吸水和细胞的抗氧化酶外，还会降低植物的净光合速率，最后导致植物减产甚至绝产。

微生物菌剂是一种新兴的生物改良方式，与传统方式相比具有明显的安全、高效、环保的优势。微生物菌剂通过发挥耐盐性土壤微生物的多种功能直接改善植物在盐碱地中的根际不良生长环境，有效缓解土壤盐渍化胁迫对作物生长的不良影响，大大改善盐碱盐渍化土壤肥力。其中微生物菌肥改良作为一种新兴的生物改良措施，因其环保、生态效益高等优点而极具潜力。

但目前用于研发微生物菌肥的菌种存在着效果不稳定、功能单一、资源有限等问题，筛选出高效稳定的多功能菌种并研发出一款耐盐促生微生物菌肥具有重要的意义与应用价值。

目前，虽然已有嗜麦芽寡养单胞菌(或称为嗜麦芽窄食单胞菌)的相关报道，但是主要是发现该种微生物对污染物的降解能力，应用集中在环境污染物的治理方面，如公开号为CN111254091A的专利公开了一种嗜麦芽寡养单胞菌GYH及其在降解氯代烃类污染物中的应用；公开号为CN110951643A的专利公开了一株嗜麦芽寡养单胞菌DIF3，具有较强的异化还原Fe(III)的还原功能，可以高效的还原可溶性Fe(III)和固态Fe(III)，为异化铁还原菌在环境污染物的治理方面提供了新的材料；公开号为IN202141053272A的专利公开了一株嗜麦芽寡养单胞菌GS-108bph b基因增强降解2-氯联苯(CB)(多氯联苯同源物)。其上述公开的嗜麦芽寡养单胞菌也存在功能单一的问题。

目前还未发现具有耐盐、降盐、促进植物在盐碱环境下生长能力的嗜麦芽寡养单胞菌，因此，现有技术还有待进一步改进。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用，该嗜麦芽寡养单胞菌43B4是一株高效稳定的多功能菌种，具有解磷、解钾、固氮、降盐、促进植物在盐胁迫下的种子萌发以及植株生长等综合性能，可作为微生物菌剂(或微生物菌肥)在农作物生产中进行实际应用。

为解决上述问题，本发明提供以下技术方案：

第一方面，本发明提供一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌，其被命名为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)43B4，保藏号为：CGMCC No24710。该菌株是申请人从东营市盐碱地土壤采集土样中分离的促生细菌，其丰富了耐盐促生的菌种资源，为研究开发促生菌菌剂奠定基础。

该嗜麦芽寡养单胞菌43B4的形态特征为：菌落呈现湿润，光滑，边缘整齐，颜色为淡黄色，显微镜下显示为杆状菌，革兰氏染色结果显示为浅红色，属于革兰氏阴性菌，直径为1～2mm。综合各项生理生化试验结果和分子生物学分析，该菌鉴定为嗜麦芽寡养单胞菌。

该嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)43B4是属于黄单胞菌目的黄单胞菌科，黄单胞菌属，嗜麦芽寡养单胞菌种。在2022年4月18日，被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No 24710，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

经过实验发现，该菌株具有优异的解磷、解钾、固氮、降盐的作用；进一步研究盐胁迫下嗜麦芽寡养单胞菌43B4对番茄萌发与生长及辣椒生长和幼苗生长过程中生理生化的影响，发现：嗜麦芽寡养单胞菌43B4具有较好的促生特性，能够稳定促进作物生长。

第二方面，本发明提供一种微生物菌剂，其活性成分包括上述的嗜麦芽寡养单胞菌。基于嗜麦芽寡养单胞菌43B4的前述优异的解磷、解钾、固氮、降盐和促生等综合生物学特性，可将其作为活性成分，用于制备微生物菌剂，作为生物菌肥或者土壤改良剂进行使用，提高植物的耐盐性，减少化学肥料的使用，提高植物的生物量。

优选地，所述微生物菌剂中，嗜麦芽寡养单胞菌43B4的有效活菌数不低于0.5亿/g。

优选地，所述微生物菌剂的活性成分为前述嗜麦芽寡养单胞菌43B4的菌液、菌体或发酵上清液。

优选地，所述微生物菌剂的剂型为片剂、种衣剂、干悬浮剂、水分散粒剂或可湿性粉剂。此外，所述微生物菌剂还包括载体，还可进一步的包括各种助剂，用以延长其持效期和稳定性。

第三方面，本发明提供前述的微生物菌剂的制备方法，其包括以下步骤：

从固体培养基平板上挑取耐盐促生菌菌的单菌落到液体培养基中，制备种子液，再将种子液接种于液体培养基中，在温度25～29℃、转速120～190r/min的摇瓶中培养，待菌株生长至对数生长期时，使用无菌水稀释菌液，获得所述微生物菌剂。

可选地，所述固体培养基为LB固体培养基，固体LB培养基由以下成分制备而成：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、NaCl 10g/L、质量百分浓度为2.5％琼脂；而所述液体培养基为LB液体培养基，而所述液体LB培养基由以下成分制备而成：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、NaCl 10g/L。

第四方面，本发明提供前述嗜麦芽寡养单胞菌或前述的微生物菌剂在解磷、解钾、固氮中的应用。

现有技术中并未公开嗜麦芽寡养单胞菌应用于降盐、解钾、固氮、解磷和促进植物生长，该菌嗜麦芽寡养单胞菌43B4不同于公开的氧化微杆菌。通过功能性鉴定试验可以看出，嗜麦芽寡养单胞菌43B4能够降低环境盐度、溶有机磷、难溶性钾和固氮。

第五方面，本发明提供前述嗜麦芽寡养单胞菌或前述的微生物菌剂在降低环境中盐含量中的应用。

所述嗜麦芽寡养单胞菌43B4具有优异的耐盐能力，对NaCl有较宽的适应范围，在NaCl浓度达到8％情况下仍然可保持较高的菌体浓度，0～10％的盐浓度下均可生长，菌株43B4的耐盐性最高可达10％。并且，该菌株也具有降盐能力，当外界盐浓度为3％时，耐盐菌株43B4的相对降盐率达到8.57％。

第六方面，本发明提供前述嗜麦芽寡养单胞菌或前述的微生物菌剂在促进植物在盐胁迫下的种子萌发以及植株生长中的应用。

该菌株43B4在NaCl的盐胁迫下能够提高番茄与辣椒的叶长、叶宽、叶片数及株高，表明菌株43B4可以缓解盐胁迫对植物幼苗造成的氧化胁迫，也为本发明的耐盐促生菌菌株在促生耐盐方面的作用提供了依据。

优选地，所述植物包括番茄和辣椒。

本发明具有以下有益效果：

1、本发明提供了一株耐盐促生嗜麦芽寡养单胞菌43B4及其应用，该菌株是从盐碱地土壤中筛选到的高效稳定的多功能菌种，具有优异的耐盐能力，该菌株耐盐度为0～10％，最适耐盐度为3～5％；同时，该菌还具有降盐、解有机磷、解钾和固氮等多种促生特性，利用嗜麦芽寡养单胞菌43B4制备的菌液(微生物菌剂的一种形式)能在盐胁迫下显著提高番茄与辣椒的耐盐能力，减缓盐害现象，增加生物量，提高其种子萌发率，促进番茄与辣椒生长的作用，有助于提高番茄与辣椒的耐盐性，减少化学肥料的使用，基于其优异的综合生物学特性，该耐盐促生菌菌株及其微生物菌剂具有广泛的应用前景。

2、上述微生物菌剂的制备方法简单，培养条件要求低，发酵成本低，周期短，适合工业化大批量生产的需要，便于推广使用。

附图说明

图1为嗜麦芽寡养单胞菌43B4的菌落形态图；

图2为嗜麦芽寡养单胞菌43B4的功能性鉴定结果；

图3为嗜麦芽寡养单胞菌43B4的耐盐性分析结果；图3A为不同盐浓度平板培养结果；图3B为耐盐度柱状图结果；

图4为嗜麦芽寡养单胞菌43B4的降盐性分析；

图5为嗜麦芽寡养单胞菌43B4的基于16SrDNA基因序列构建的***发育树；图5A为16SrDNA序列扩展产物的电泳结果；图5B为菌43B4的基于16SrDNA基因序列构建的***发育树；

图6为嗜麦芽寡养单胞菌43B4对盐胁迫下番茄种子萌发的发芽率及发芽势的影响；

图7为嗜麦芽寡养单胞菌43B4对盐胁迫下番茄生长的促进作用；

图8为嗜麦芽寡养单胞菌43B4对盐胁迫下辣椒生长的促进作用。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。在本发明中，若非特指，所采用的设备和原料等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。

实施例1菌株43B4的分离筛选

1、实验方法：

从东营市盐碱地土壤采集土样，从中分离出不同的微生物，并将菌株通过平板划线保存于LB固体培养基平板上，待用。LB成品培养基中加入不同含量的氯化钠，将其配制成NaCl质量百分浓度分别为1％、2％、4％、6％、8％、10％等不同浓度的LB固体培养基，再将活化24h的菌株分别稀释成1x10^-5、1x10^-6的菌液，各吸取200μL，用涂布棒均匀的涂抹在制备好的前述LB固体培养基上，通过菌落计数鉴定分析菌株耐盐性，并对筛选出的生长良好的菌株进行反复平板划线纯化。

2、实验结果及分析：

经过筛选和纯化后，得到单一菌落的耐盐菌株，将该单一菌落命名为菌株43B4，其菌落和菌体形态具体见图1。

实施例2菌株43B4的鉴定

1.形态学鉴定

如图1所示，43B4菌落的呈现湿润且光滑，边缘整齐，颜色为淡黄色，显微镜下显示43B4为杆状菌，革兰氏染色结果显示菌43B4为浅红色，属于革兰氏阴性菌，直径为1～2mm，好氧，化能异养。

2.生理生化鉴定

参考《常见细菌***鉴定手册》，通过对耐盐促生菌菌株进行生理生化测定进行初步鉴定，鉴定结果显示：菌43B4产生长素，接触酶、赖氨酸脱羧酶阳性，硝酸盐还原反应阳性，明胶水解、淀粉水解阳性，L-***糖、果糖发酵为阳性，与单胞菌属微生物的生理生化特征相似。

3.分子生物学鉴定

在前述形态学鉴定和生理生化鉴定的基础上，进一步对菌43B4进行分子生物学鉴定。

(1)实验方法：

提取菌株43B4的DNA并将其作为模板，采用16SrDNA通用上游引物27F和下游引物1492R对16S rDNA核苷酸片段进行扩增，扩增体系见表1，将扩增得到的产物送至生工公司进行测序。

引物序列如下：

上游引物27F:5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′；

下游引物1492R:5′-TACGGTTACCTTGTTACGACTT-3′。

表1 16S rDNA的PCR体系

(2)实验结果及分析

测序结果显示，菌株43B4的16SrDNA的长度为1483bp，测序结果见序列表中SEQ IDN0:1。将测序得到的序列提交到NCBI进行BLAST比对，选择相似度较高的菌株序列进行下载。利用软件MEGA 6.0构建***发育进化树，具体见图5。16SrDNA的序列比对结果显示，43B4与Stenotrophomas的相似度最高。

因此，结合该菌的形态、生理生化特征和16S rDNA序列分析结果可确定，该菌株为嗜麦芽寡养单胞菌，将其命名为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)43B4。

实施例3菌株43B4的功能定性鉴定

本实验目的在于研究耐盐促生菌菌株43B4在增加可溶性钾、可溶磷含量及固氮的应用，确定所述耐盐促生菌菌株43B4能够溶有机磷、难溶性钾和固氮。

1、本实验采用的培养基及其配方：

有机磷培养基：葡萄糖10.0g/L，硫酸铵0.5g/L，酵母浸粉0.5g/L，氯化0.3g/L，氯化钾0.3g/L，硫酸镁0.3g/L，硫酸亚铁0.03g/L，硫酸锰0.03g/L，卵磷脂0.2g/L，碳酸钙1.0g/L，琼脂15g/L，pH 7.0。

无机磷培养基：葡萄糖10.0g/L硫酸铵0.5g/L，酵母浸粉0.5g/L，氯化钠0.3g/L，氯化钾0.3g/L，硫酸镁0.3g/L，硫酸亚铁0.03g/L，硫酸锰0.03g/L，磷酸钙5.0g/L，琼脂15.0g/L，pH 7.0。

阿须贝氏培养基：磷酸二氢钾0.2g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠0.2g/L，碳酸钙5.0g/L，甘露醇10.0g/L，硫酸钙0.1g/L，琼脂15g/L，pH 7.0。

解钾培养基：葡萄糖10g/L，磷酸氢二钠0.2g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠0.2g/L，硫酸钙0.2g/L，碳酸钙5g/L，钾长石粉25g/L，琼脂20g/L，pH7.2。

2、实验方法：

将43B4进行摇瓶培养，活化扩繁，分别按照上述配方分别配制解钾、解磷及固氮固体培养基，准备好灭好菌的平板，培养基灭好菌之后倒板，待凝固之后，吸取菌液1μL点到各种平板上，封好板放置27℃倒置培养，待有透明水解圈或者菌落时，观察实验结果。

解钾解磷评估标准：直径比＝透明圈直径/菌斑直径*100％

固氮评估标准：测定菌落直径。

表2菌株43B4的解钾解钾固氮性能分析

3、实验结果及分析

从表2的结果可知，所述菌株具有一定的解钾、解有机磷、固氮的促生特性，其中对于解钾的能力较强，其溶解指数可以达到7。

实施例4菌株43B4的耐盐性测定

1、实验方法：

将菌株43B4的菌液分别转接相同量到不同盐浓度的LB液体培养基中，本实施例中，液体培养基中NaCl的质量浓度分别为2％、4％、6％、8％和10％，于温度27～29℃、转速120～180r/min条件下摇床培养24h后，观察不同盐浓度下菌株43B4的生长情况，测试菌的生物量，从而确定耐盐促生菌菌株的耐盐度。24h后测其菌浓度(OD₆₀₀)，以确定该菌株的耐盐程度，得到如图3B所示的耐盐度柱状图。

2、实验结果及分析

图3A和3B的结果显示，耐盐促生菌菌株43B4对NaCl有较大的适应范围，其在1～10％的盐浓度下均可生长；尤其是在盐浓度达到10％情况下，该菌株仍然能够生长且保持较高的菌体浓度，这说明菌株43B4的耐盐性最高可达10％。

实施例5菌株43B4的降盐测定

1、实验方法

为了研究菌株43B4的降盐能力，配制3％-6％的不同盐浓度的LB液体培养基，27℃培养24h后，使用盐度计测定培养基电导率。

相对降盐率＝(1-培养后盐度)/培养前盐度×100％

2、实验结果及分析

如图4的结果显示，在NaCl的质量浓度为3-6％范围内，耐盐菌株43B4的降盐能力呈现出差异：相对比其他盐浓度，环境中NaCl浓度为3％时，耐盐菌株43B4的降盐能力最高，其相对降盐率达到8.57％。

实施例6菌株43B4对盐胁迫下番茄种子萌发的影响

1、实验方法：

将菌株43B接种于培养基中，于28℃条件下振荡培养24h。挑选颗粒饱满无霉变、大小一致无损的番茄种子，无菌水洗涤后置于70％酒精溶液内表面消毒20s，后用5％次氯酸钠消毒2min，无菌水洗涤5～6次。每个培养皿铺上两层滤纸，各放置50粒番茄种子，设置空白对照组、0.6‰NaCl处理组1与43B4+NaCl处理组2，并且进行三次重复；其中，处理组1加入2mL的0.6‰NaCl，处理组2中加入2mL的0.6‰NaCl和2mL的43B稀释菌液，对照组仅加入2mL蒸馏水。25℃恒温培养3d，测定番茄种子的发芽率及发芽势。

发芽率＝(发芽种子粒数÷供试种子粒数)×100％。

发芽势＝发芽总粒数÷试验总粒数×100％。

2、实验结果及分析

图6为三组不同处理的番茄种子发芽结果，统计番茄种子萌发率，得到表3的实验结果，其显示：空白对照组中，番茄种子萌发率达到94.23％；经过NaCl处理后的番茄种子的萌发率仅为4.71％，而NaCl胁迫下经过43B4处理的种子萌发率提升至14％，其相对处理组1，其种子萌发率提高了9.29％。

表3不同处理的番茄种子的发芽率和发芽势

实施例7菌株43B4对盐胁迫下番茄与辣椒生长的影响

1、实验方法：

将草炭土与珍珠岩按照9:1的比例进行混合得到育苗基质。取番茄和辣椒的种子分别放置于育苗穴盘中在28℃黑暗条件下萌发，萌发1周后移栽于花盆中放置于28℃，4h/10h光周期，光强为1200Lux的温室中进行培养2周。分别选取长势一致的材料进行如下的盆栽实验。

对辣椒和番茄分别设置以下四个处理组：

①空白对照组(不做任何处理)；

②盐胁迫处理组(150mmol/L NaCl盐水)；

③43B4菌液单独处理；

④盐水(150mmol/L的NaCl)和43B4菌液共同处理(27℃，培养24h后的菌液稀释10倍使用)。

对以上各个处理的番茄和辣椒幼苗每5-7天进行按水土质量比1：10固定用量灌根，番茄处理两次，辣椒处理三次。期间使用吡蚜酮和烯啶虫胺进行喷洒，防止病虫害。待番茄生长2周、辣椒生长3周后分别对其进行生长指标的测量。

2、实验结果及分析

(1)从图7A和表4可知，盐胁迫条件下耐盐菌株43B4能够有效促进番茄的生长；从图7B-7E的结果可知，相对于盐胁迫处理组，盐胁迫下进行43B4菌液处理组的番茄的株高及叶片数显著增加，分别依次提高了26.51％和27.78％。同时发现，与空白对照组相比，单独施加耐盐菌株43B4能够促进番茄的生长。

(2)从图8A和表5的结果可知，盐胁迫条件下耐盐菌株43B4能够有效促进辣椒的生长；从图8B-8E的结果可知，相对于盐胁迫处理组，盐胁迫下进行43B4菌液处理组的辣椒的株高、叶长、叶片数和叶宽都显著提升，其中，株高和叶片数分别提高了26.72％和21.62％。

上述实验结果说明，耐盐菌株43B4能够有效缓解盐胁迫对植物生长的影响，且对植物生长具有促进作用。

表4 43B4对番茄生长的影响

表5 43B4对辣椒生长的影响

可以理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据本发明的技术方案及本发明构思加以等同替换或改变，而所有这些改变或替换都应属于本发明所附的权利要求的保护范围。

序列表

<110> 青岛农业大学

<120> 一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1483

<212> DNA

<213> 嗜麦芽寡养单胞菌43B4的16S rDNA (16S rDNA of Stenotrophomonasmaltophilia 43B4)

<400> 1

agtgaacgct ggcggtaggc ctaacacatg caagtcgaac ggcagcacag gagagcttgc 60

tctctgggtg gcgagtggcg gacgggtgag gaatacatcg gaatctacct tttcgtgggg 120

gataacgtag ggaaacttac gctaataccg catacgacct acgggtgaaa gcaggggacc 180

ttcggacctt gcgcgattga atgagccgat gtcggattag ctagttggcg gggtaaaggc 240

ccaccaaggc gacgatccgt agctggtctg agaggatgat cagccacact ggaactgaga 300

cacggtccag actcctacgg gaggcagcag tggggaatat tggacaatgg gcgcaagcct 360

gatccagcca taccgcgtgg gtgaagaagg ccttcgggtt gtaaagccct tttgttggga 420

aagaaaacca gctggttaat acccggttgg gttgacggta cccaaagaat aagcaccggc 480

taacttcgtg ccagcagccg cggtaatacg aagggtgcaa gcgttactcg gaattactgg 540

gcgtaaagcg tgcgtaggtg gtcgtttaag tccgttgtga aagccctggg ctcaacctgg 600

gaactgcagt ggatactggg cgactagagt gtggtagagg gtagcggaat tcctggtgta 660

gcagtgaaat gcgtagagat caggaggaac atccatggcg aaggcagcta cctggaccaa 720

cactgacact gaggcacgaa agcgtgggga gcaaacagga ttagataccc tggtagtcca 780

cgccctaaac gatgcgaact ggatgttggg tgcaatttgg cacgcagtat cgaagctaac 840

gcgttaagtt cgccgcctgg ggagtacggt cgcaagactg aaactcaaag gaattgacgg 900

gggcccgcac aagcggtgga gtatgtggtt taattcgatg caacgcgaag aaccttacct 960

ggccttgaca tgtcgagaac tttccagaga tggattggtg ccttcgggaa ctcgaacaca 1020

ggtgctgcat ggctgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag 1080

cgcaaccctt gtccttagtt gccagcacgt aatggtggga actctaagga gaccgccggt 1140

gacaaaccgg aggaaggtgg ggatgacgtc aagtcatcat ggcccttacg gccagggcta 1200

cacacgtact acaatggtag ggacagaggg ctgcaagccg gcgacggtaa gccaatccca 1260

gaaaccctat ctcagtccgg attggagtct gcaactcgac tccatgaagt cggaatcgct 1320

agtaatcgca gatcagcatt gctgcggtga atacgttccc gggccttgta cacaccgccc 1380

gtcacaccat gggagtttgt tgcaccagaa gcaggtagct taaccttcgg gagggcgctt 1440

gccacggtgt ggccgatgac tggggtgaag tcgtaacaag gta 1483

Claims

1.一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌，其特征在于，被命名为嗜麦芽寡养单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）43B4，其保藏号为CGMCC No 24710。

2.一种微生物菌剂，其特征在于，包括如权利要求1所述的嗜麦芽寡养单胞菌。

3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂的活性成分为所述嗜麦芽寡养单胞菌的菌液或菌体。

4.如权利要求2所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

从固体培养基平板上挑取如权利要求1所述的耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌的单菌落到液体培养基中，制备种子液，再将种子液接种于液体培养基中，在温度25～29℃、转速120～190r/min 的摇瓶中培养，待菌株生长至对数生长期时，使用无菌水稀释菌液，获得所述微生物菌剂。

5.根据权利要求4的制备方法，其特征在于，所述固体培养基为LB固体培养基，所述液体培养基为LB液体培养基。

6.如权利要求1所述的嗜麦芽寡养单胞菌或如权利要求2或3所述的微生物菌剂在解磷、解钾、固氮中的应用。

7.如权利要求1所述的嗜麦芽寡养单胞菌或如权利要求2或3所述的微生物菌剂在降低环境中盐含量中的应用。

8.如权利要求1所述的嗜麦芽寡养单胞菌或如权利要求2或3所述的微生物菌剂在促进植物在盐胁迫下的种子萌发以及植株生长中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述植物包括番茄和辣椒。