CN114983900B - 一种具有抗氧化及修护功效乳液的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种具有抗氧化及修护功效乳液的制备方法，属于化妆品制备技术领域。按质量百分比计，包括以下组分：意大利腊菊提取物、抗菌肽融合蛋白Cb‑SOD‑Cb、异十二烷、积雪草提取物、高山火绒草提取物、马齿苋提取物、粉防己提取物、四氢甲基嘧啶羧酸、欧囊链藻提取物、水解胶原、山茶花提取物、寡肽‑3、甘油葡糖苷、甜菜碱、泛醇、透明质酸钠、寡肽‑5、尿囊素、丁二醇、角鲨烷、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚‑25甲基丙烯酸酯共聚物、甘油、鲸蜡醇乙基己酸酯、燕麦仁油和山梨醇聚醚‑30四异硬脂酸酯。利用该方法制备的乳液可增强皮肤细胞的活力，清除自由基，提升紧致肌肤，抑制肌肤黑色素堆积，构建娇嫩透白的肤色。

Description

一种具有抗氧化及修护功效乳液的制备方法
技术领域
本发明属于化妆品制备技术领域，具体涉及一种具有抗氧化及修护功效乳液的制备方法。
背景技术
随着人类生活水平的不断提高，人们对皮肤健康的需求也越来越高，尤其是对裸露在外的皮肤的保护，如脸部，颈部以及四肢等等。长时间处在户外环境，紫外线的照射会有损裸露在外的皮肤，严重者可造成皮肤伤害、长粉刺、痤疮以及黑色素堆积等。
目前治疗该种情况的化妆品的主要剂型集中在精华水、乳霜和面膜等类别的产品中，这类产品配方成分比较复杂，很多活性物溶解后的稳定性较差，生物活性容易丢失，另外，有些防腐剂也会增加刺激源，从而影响产品的效果。
发明内容
有鉴于此，本发明提出一种具有抗氧化及修护功效乳液的制备方法。
为实现上述目的，本发明提出如下技术方案：
一种具有抗氧化及修护功效乳液，按质量百分比计，包括以下组分：
意大利腊菊提取物0.001-0.01％、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb0.001-0.05％、异十二烷0.5-1.5％、积雪草提取物0.05-0.2％、高山火绒草提取物0.01-0.1％、马齿苋提取物0.005-0.02％、粉防己提取物0.001-0.01％、四氢甲基嘧啶羧酸0.01-0.1％、欧囊链藻提取物0.001-0.01％、水解胶原0.05-0.2％、山茶花提取物0.005-0.02％、寡肽-30.0001-0.001％、甘油葡糖苷0.01-0.2％、甜菜碱0.1-0.5％、泛醇0.15％、透明质酸钠0.05-0.2％、寡肽-50.0001-0.001％、尿囊素0.01-0.1％、丁二醇2-7％、角鲨烷1-4％、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物0.6-1.2％、甘油1.0-2.0％、鲸蜡醇乙基己酸酯1.0-2.0％、燕麦仁油0.2-0.4％、山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯0.8-1.2％、余量为去离子水。
进一步地，按质量百分比计，所述具有抗氧化及修护功效乳液包括以下组分：
意大利腊菊提取物0.001％、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb 0.001％、异十二烷1％、积雪草提取物0.1％、高山火绒草提取物0.05％、马齿苋提取物0.01％、粉防己提取物0.005％、四氢甲基嘧啶羧酸0.05％、欧囊链藻提取物0.002％、水解胶原0.2％、山茶花提取物0.01％、寡肽-30.0002％、甘油葡糖苷0.01％、甜菜碱0.2％、泛醇0.15％、透明质酸钠0.1％、寡肽-50.0002％、尿囊素0.05％、丁二醇5％、角鲨烷3％、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物0.9％、甘油1.5％、鲸蜡醇乙基己酸酯1.5％、燕麦仁油0.3％、山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯1％、余量为去离子水。
本发明还提供一种具有抗氧化及修护功效乳液的制备方法，包括以下步骤：
将去离子水加热至80-83℃，依次加入丁二醇、角鲨烷、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物、甘油、鲸蜡醇乙基己酸酯、燕麦仁油和山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯，搅拌均匀，保温至原料完全溶解，然后降温处理；
降至所需温度后，继续在上述溶液中依次加入意大利腊菊提取物、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb、异十二烷、积雪草提取物、高山火绒草提取物、马齿苋提取物、粉防己提取物、四氢甲基嘧啶羧酸、欧囊链藻提取物、水解胶原、山茶花提取物、寡肽-3、甘油葡糖苷、甜菜碱、泛醇、透明质酸钠、寡肽-5和尿囊素，搅拌，冷却至室温，即得具有抗氧化及修护功效乳液。
进一步地，所述保温时间为20min。
进一步地，所述降温处理是指降温至30-35℃。
抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb是一种多功能性多肽，其既具有抗菌性，又具有超氧化物歧化酶的去除自由基的活力，可有效去除自由基对皮肤带来的伤害，同时抑制痤疮部位细菌。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
角鲨烷是从深海鲨鱼肝脏中提取的角鲨烯经氢化制得的一种烃类油脂，具有加强修护表皮，有效形成天然保护膜；积雪草提取物、高山火绒草提取物、马齿苋提取物、粉防己提取物等植物提取物具有抗氧化及消炎、防敏的作用，寡肽-3、寡肽-5等肽类分子能有效促进细胞增殖，促进新陈代谢，激活细胞活性，促进弹性蛋白、胶原蛋白的生成，达到修复受损皮肤，淡化皮肤皱纹，减少色素沉积等功效。甘油葡糖苷、透明质酸钠等长链亲水性分子可较好的锁住水分，增强保湿性。将上述有效成分制备成乳液后可有助于脂溶性和水溶性功效成分通过乳化技术更好融合，共同作用皮肤，同时乳液具有更好的滋润肌肤的作用，促进功效成分透皮吸收。
本发明制备的抗氧化及修护功效乳液可增强皮肤细胞的活力，清除自由基，提升紧致肌肤，抑制肌肤黑色素堆积，刺激肌肤胶原蛋白的生成，维持肌肤水油平衡，构建娇嫩透白的肤色。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为Cb-SOD-Cb融合蛋白结构示意图；
图2为Cb-SOD-Cb融合蛋白结构预测图；其中绿色：SOD，蓝色：linker，红色：CecropinB；
图3为重组载体pET26-Cb-SOD-Cb的示意图；
图4为Cb-SOD-Cb蛋白及重组菌破碎沉淀SDS-PAGE图；其中M：标准分子量marker，1：复性后的重组Cb-SOD-Cb蛋白(0.5mg/mL)，2：复性后的重组Cb-SOD-Cb蛋白(0.5mg/mL)，3：重组菌破碎后离心获得的沉淀物(含Cb-SOD-Cb包涵体)；
图5为不同乳液含量对细胞增殖率的影响；
图6为患者使用实施例1产品的前后对比图；
图7为患者使用实施例1产品的前后对比图。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
一种具有抗氧化及修护功效乳液，按质量百分比计，包括以下组分：
意大利腊菊(HELICHRYSUM ITALICUM)提取物0.001-0.01％、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb 0.001-0.05％、异十二烷0.5-1.5％、积雪草(CENTELLA ASIATICA)提取物0.05-0.2％、高山火绒草(LEONTOPODIUM ALPINUM)提取物0.01-0.1％、马齿苋(PORTULACAOLERACEA)提取物0.005-0.02％、粉防己(STEPHANIA TETRANDRA)提取物0.001-0.01％、四氢甲基嘧啶羧酸0.01-0.1％、欧囊链藻(CYSTOSEIRATAMARISCIFOLIA)提取物0.001-0.01％、水解胶原0.05-0.2％、山茶花提取物0.005-0.02％、寡肽-30.0001-0.001％、甘油葡糖苷0.01-0.2％、甜菜碱0.1-0.5％、泛醇0.15％、透明质酸钠0.05-0.2％、寡肽-50.0001-0.001％、尿囊素0.01-0.1％、丁二醇2-7％、角鲨烷1-4％、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物0.6-1.2％、甘油1.0-2.0％、鲸蜡醇乙基己酸酯1.0-2.0％、燕麦(AVENA SATIVA)仁油0.2-0.4％、山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯0.8-1.2％、余量为去离子水。
优选的，按质量百分比计，所述具有抗氧化及修护功效乳液包括以下组分：
意大利腊菊提取物0.001％、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb 0.001％、异十二烷1％、积雪草提取物0.1％、高山火绒草提取物0.05％、马齿苋提取物0.01％、粉防己提取物0.005％、四氢甲基嘧啶羧酸0.05％、欧囊链藻提取物0.002％、水解胶原0.2％、山茶花提取物0.01％、寡肽-30.0002％、甘油葡糖苷0.01％、甜菜碱0.2％、泛醇0.15％、透明质酸钠0.1％、寡肽-50.0002％、尿囊素0.05％、丁二醇5％、角鲨烷3％、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物0.9％、甘油1.5％、鲸蜡醇乙基己酸酯1.5％、燕麦仁油0.3％、山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯1％、余量为去离子水。
本发明还提供一种具有抗氧化及修护功效乳液的制备方法，包括以下步骤：
将去离子水加热至80-83℃，依次加入丁二醇、角鲨烷、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物、甘油、鲸蜡醇乙基己酸酯、燕麦仁油和山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯，搅拌均匀，保温20min，至原料完全溶解，然后降温至30-35℃；
降至所需温度后，继续在上述溶液中依次加入意大利腊菊提取物、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb、异十二烷、积雪草提取物、高山火绒草提取物、马齿苋提取物、粉防己提取物、四氢甲基嘧啶羧酸、欧囊链藻提取物、水解胶原、山茶花提取物、寡肽-3、甘油葡糖苷、甜菜碱、泛醇、透明质酸钠、寡肽-5和尿囊素，搅拌，冷却至室温，即得具有抗氧化及修护功效乳液。
每添加一个组分必须搅拌均匀后再加下一个组分。
抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb是一种多功能性多肽，其既具有抗菌性，又具有超氧化物歧化酶的去除自由基的活力，可有效去除自由基对皮肤带来的伤害，同时抑制痤疮部位细菌。
抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb的制备方法为：
(1)重组Cb-SOD-Cb抗氧化抗菌蛋白表达载体构建：天蚕素CecropinB的核苷酸序列3’端连入DQYTD柔性肽段核苷酸序列，再连入编码人锌铜超氧化物歧化酶SOD蛋白的核苷酸序列，再连入DQYTD柔性肽段核苷酸序列，再连入天蚕素CecropinB的核苷酸序列，构成CecropinB-DQYTD-SOD-DQYD-CecropinB串连结构，简称为Cb-SOD-Cb，重组基因结构见图1。
重组蛋白进行3D结构模拟(https://zhanggroup.org/I-TASSER/)所得空间结构(图2)显示，超氧化物歧化酶SOD与两端天蚕素cecropinB在柔性肽连接下，形成自由开放状态，不会对各自功能区造成影响，该重组蛋白既不破坏SOD的空间结构，又可以对细菌外膜进行攻击，达到抗菌目的。
Cb-SOD-Cb基因序列，通过NdeⅠ和XhoI连接于大肠杆菌表达载体pET26b(+)上，得到重组载体pET26-Cb-SOD-Cb，载体结构见图3。合成基因由上海捷瑞生物工程有限公司完成。
天蚕素CecropinB的核苷酸序列(SEQ ID NO.1)：
AAGTGGAAAGTATTTAAAAAGATAGAAAAAATGGGTCGTA ACATTCGTAACGGCATTGTAAAGGCGGGTCCGGCGATCGCCGTT CTGGGCGAAGCTAAAGCTCTG。
编码人锌铜超氧化物歧化酶SOD蛋白的核苷酸序列(SEQ ID NO.2)：
GCAACCAAGGCGGTGTGCGTCTTGAAGGGTGACGGTCCGGTGCAGGGTATTATCAACTTCGAGCAGAAAGAGAGCAATGGCCCGGTGAAAGTTTGGGGTTCTATCAAAGGCTTGACCGAAGGTCTGCATGGTTTTCACGTGCACGAGTTCGGCGACAATACCGCGGGCTGCACCAGCGCAGGTCCGCATTTTAACCCGCTTTCGCGCAAACACGGCGGCCCAAAAGATGAGGAGCGCCACGTTGGTGACCTCGGCAACGTGACTGCGGATAAGGACGGCGTTGCCGACGTGTCCATTGAAGATAGCGTTATCAGCCTGTCCGGTGATCATTGCATCATTGGCCGTACGCTGGTTGTCCACGAGAAGGCGGACGATCTGGGAAAGGGCGGTAATGAAGAAAGCACCAAGACGGGTAACGCGGGTTCTCGTCTGGCTTGTGGTGTTATCGGCATCGCACAA。
DQYTD柔性肽段核苷酸序列(SEQ ID NO.3)：GATCAATATACTGAC。
Cb-SOD-Cb基因序列(SEQ ID NO.4)：
ATGAAGTGGAAAGTATTTAAAAAGATAGAAAAAATGGGTCGTAACATTCGTAACGGCATTGTAAAGGCGGGTCCGGCGATCGCCGTTCTGGGCGAAGCTAAAGCTCTGGACCAATACACCGATGCAACCAAGGCGGTGTGCGTCTTGAAGGGTGACGGTCCGGTGCAGGGTATTATCAACTTCGAGCAGAAAGAGAGCAATGGCCCGGTGAAAGTTTGGGGTTCTATCAAAGGCTTGACCGAAGGTCTGCATGGTTTTCACGTGCACGAGTTCGGCGACAATACCGCGGGCTGCACCAGCGCAGGTCCGCATTTTAACCCGCTTTCGCGCAAACACGGCGGC CCAAAAGATGAGGAGCGCCACGTTGGTGACCTCGGCAACGTGACTGCGGATAAGGACGGCGTTGCCGACGTGTCCATTGAAGATAGCGTTATCAGCCTGTCCGGTGATCATTGCATCATTGGCCGTACGCTGGTTGTCCACGAGAAGGCGGACGATCTGGGAAAGGGCGGTAATGAAGAAAGCACCAAGACGGGTAACGCGGGTTCTCGTCTGGCTTGTGGTGTTATCGGCATCGCACAAGATCAATATACTGACAAGTGGAAAGTCTTTAAAAAAATCGAGAAAATGGGTCGCAACATCCGTAATGGTATTGTTAAGGCGGGCCCAGCGATCGCGGTGCTCGGCGAGGCGAAGGCGCTGTAA。
天蚕素CecropinB的氨基酸序列(SEQ ID NO.5)：
KWKVFKKIEKMGRNIRNGIVKAGPAIAVLGEAKAL。
人锌铜超氧化物歧化酶SOD蛋白氨基酸序列(SEQ ID NO.6)：
ATKAVCVLKGDGPVQGIINFEQKESNGPVKVWGSIKGLTEGLHGFHVHEFGDNTAGCTSAGPHFNPLSRKHGGPKDEERHVGDLGNVTADKDGVADVSIEDSVISLSGDHCIIGRTLVVHEKADDLGKGGNEESTKTGNAGSRLACGVIGIAQ。
Cb-SOD-Cb氨基酸序列(SEQ ID NO.7)：
MKWKVFKKIEKMGRNIRNGIVKAGPAIAVLGEAKALDQYTDATKAVCVLKGDGPVQGIINFEQKESNGPVKVWGSIKGLTEGLHGFHVHEFGDNTAGCTSAGPHFNPLSRKHGGPKDEERHVGDLGNVTADKDGVADVSIEDSVISLSGDHCIIGRTLVVHEKADDLGKGGNEESTKTGNAGSRLACGVIGIAQDQYTDKWKVFKKIEKMGRNIRNGIVKAGPAIAVLGEAKAL。
(2)重组蛋白Cb-SOD-Cb表达菌株BL21(DE3)的筛选及表达：
步骤(1)中获得的重组载体pET26-Cb-SOD-Cb，用热激方法转化大肠杆菌菌株BL21(DE3)，用含有50μg/mL卡那霉素的LB固体培养基平板筛选出的阳性转化子在LB培养基中培养至OD600＝0.6-0.8时，进行IPTG诱导表达，诱导表达3-6小时后，收集菌体，SDS-PAGE检测蛋白质表达量情况。
具体操作为：从步骤(1)中筛选出的诱导型阳性转化子即pET26-Cb-SOD-Cb/BL21(DE3)菌株，在LB平板上划线培养1天，取单菌落接种于含有50μg/mL卡那霉素的1ml LB培养基的5ml离心管中，37℃200rpm过夜培养。第二天，按1％的接种量，接种到新的含有50μg/mL卡那霉素的500mL的LB培养基中，37℃200rpm培养至OD600＝0.8时，加入异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)终浓度为1毫摩尔，37℃200rpm进行重组蛋白的诱导表达，诱导5小时后，经4000rpm离心10min，收集菌体。其中，LB培养基是由酵母粉5g、10g蛋白胨和5g氯化钠，加水至1000mL，调节pH值至7.2-7.4，制成。
(3)重组Cb-SOD-Cb抗氧化抗菌蛋白制备
将步骤(2)中筛选出的高表达Cb-SOD-Cb抗氧化抗菌蛋白的大肠杆菌菌株，进行诱导表达后，6000rpm/min，离心10min，收集菌体，置于-20℃条件下，反复冻融三次，加溶菌酶使溶菌酶终浓度为100μg/mL，37℃，孵育20min，超声破碎，超声破碎条件：300w，4s，间6s，20min。破菌缓冲液：20nM PBS(含150nM NaCl)，pH＝7.4。破碎结束后，20000rpm，4℃离心20min，留取沉淀物(大部分为包涵体蛋白)。
包涵体洗杂：用洗涤液I(50mM Tris-HCl，10mM EDTA，5wt％甘油，1wt％Triton X-100，100mMβ-巯基乙醇，pH 8.0)，洗涤液II(洗涤液I+0.3M尿素)，洗涤液III(洗涤液I+0.6M尿素)依次洗涤包涵体沉淀。
包涵体溶解(变性)：溶解包涵体沉淀按质量比2：1加入纯水并用小型均质机混合均一，按质量1：25加入8M尿素溶液，并置于磁力搅拌器上搅拌4h得到较为澄清的溶液，20000rpm，4℃离心20min，取澄清的上清液即为Cb-SOD-Cb抗氧化抗菌蛋白的变性液。
包涵体复性：将Cb-SOD-Cb抗氧化抗菌蛋白的变性液和缓冲液(50mM Tirs-HCl，150mM氯化钠，1M尿素，pH＝8.4)按照1：9的体积比进行混合，搅拌均匀，置于4℃冰箱冷藏过夜，离心去除少量沉淀后，采用10kDa的超滤膜包脱盐及浓缩后，即获得重组Cb-SOD-Cb抗氧化抗菌蛋白。
用SDS-PAGE检测重组蛋白，结果见图4，重组菌经过破碎后将沉淀电泳后在25kDa大小处有明显条带(泳道3)，判断目的蛋白成功以包涵体表达。将该沉淀物进行洗涤以及包涵体变复性后，按不同浓度进行电泳检测，在25kDa大小处呈现明显条带(泳道1，2)，即为重组Cb-SOD-Cb)。
本发明所用其它原料均为市场上购买。
意大利蜡菊提取物、积雪草提取物、高山火绒草提取物、马齿苋提取物、欧囊链藻提取物、山茶花提取物、甜菜碱、燕麦仁油，购自沫尔生物科技(上海)有限公司。
寡肽-3、寡肽-5、水解胶原、粉防己提取物，购自杭州华玮生物科技有限公司。
四氢甲基嘧啶羧酸、透明质酸钠，购自山东天晟生物科技有限公司。
异十二烷、角鲨烷、丁二醇、甘油、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物，购自陶氏化学(上海)有限公司。
尿囊素购自宁波翔神生化有限公司。
泛醇购自杭州鑫富科技有限公司。
鲸蜡醇乙基己酸酯购自广州科罗德新材料有限公司。
甘油葡糖苷购自青岛中科蓝智生物科技发展有限公司。
山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯购自上海信守助剂有限公司。
本发明所指的室温是指25℃。
实施例1
具有抗氧化及修护功效乳液的组分如下：
意大利腊菊提取物0.001％、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb 0.001％、异十二烷1％、积雪草提取物0.1％、高山火绒草提取物0.05％、马齿苋提取物0.01％、粉防己提取物0.005％、四氢甲基嘧啶羧酸0.05％、欧囊链藻提取物0.002％、水解胶原0.2％、山茶花提取物0.01％、寡肽-30.0002％、甘油葡糖苷0.01％、甜菜碱0.2％、泛醇0.15％、透明质酸钠0.1％、寡肽-50.0002％、尿囊素0.05％、丁二醇5％、角鲨烷3％、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物0.9％、甘油1.5％、鲸蜡醇乙基己酸酯1.5％、燕麦仁油0.3％、山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯1％、余量为去离子水。
制备方法：
将去离子水加热至82℃，依次加入丁二醇、角鲨烷、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物、甘油、鲸蜡醇乙基己酸酯、燕麦仁油和山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯，搅拌均匀，保温20min，至原料完全溶解，然后降温至32℃；
降至所需温度后，继续在上述溶液中依次加入意大利腊菊提取物、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb、异十二烷、积雪草提取物、高山火绒草提取物、马齿苋提取物、粉防己提取物、四氢甲基嘧啶羧酸、欧囊链藻提取物、水解胶原、山茶花提取物、寡肽-3、甘油葡糖苷、甜菜碱、泛醇、透明质酸钠、寡肽-5和尿囊素，搅拌，冷却至室温，即得具有抗氧化及修护功效乳液。
实施例2
具有抗氧化及修护功效乳液的组分如下：
意大利腊菊提取物0.01％、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb 0.05％、异十二烷0.5％、积雪草提取物0.05％、高山火绒草提取物0.01％、马齿苋提取物0.02％、粉防己提取物0.001％、四氢甲基嘧啶羧酸0.01％、欧囊链藻提取物0.01％、水解胶原0.05％、山茶花提取物0.005％、寡肽-30.001％、甘油葡糖苷0.02％、甜菜碱0.1％、泛醇0.15％、透明质酸钠0.2％、寡肽-50.001％、尿囊素0.01％、丁二醇7％、角鲨烷1％、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物0.6％、甘油1.0％、鲸蜡醇乙基己酸酯1.0％、燕麦仁油0.2％、山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯1.2％、余量为去离子水。
制备方法：
将去离子水加热至80℃，依次加入丁二醇、角鲨烷、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物、甘油、鲸蜡醇乙基己酸酯、燕麦仁油和山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯，搅拌均匀，保温20min，至原料完全溶解，然后降温至30℃；
降至所需温度后，继续在上述溶液中依次加入意大利腊菊提取物、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb、异十二烷、积雪草提取物、高山火绒草提取物、马齿苋提取物、粉防己提取物、四氢甲基嘧啶羧酸、欧囊链藻提取物、水解胶原、山茶花提取物、寡肽-3、甘油葡糖苷、甜菜碱、泛醇、透明质酸钠、寡肽-5和尿囊素，搅拌，冷却至室温，即得具有抗氧化及修护功效乳液。
实施例3
具有抗氧化及修护功效乳液的组分如下：
意大利腊菊提取物0.001％、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb 0.001％、异十二烷1.5％、积雪草提取物0.2％、高山火绒草提取物0.1％、马齿苋提取物0.005％、粉防己提取物0.01％、四氢甲基嘧啶羧酸0.1％、欧囊链藻提取物0.001％、水解胶原0.2％、山茶花提取物0.02％、寡肽-30.0001％、甘油葡糖苷0.1％、甜菜碱0.5％、泛醇0.15％、透明质酸钠0.05％、寡肽-50.0001％、尿囊素0.1％、丁二醇2％、角鲨烷4％、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物1.2％、甘油2.0％、鲸蜡醇乙基己酸酯2.0％、燕麦仁油0.4％、山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯0.8％、余量为去离子水。
制备方法：
将去离子水加热至80℃，依次加入丁二醇、角鲨烷、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物、甘油、鲸蜡醇乙基己酸酯、燕麦仁油和山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯，搅拌均匀，保温20min，至原料完全溶解，然后降温至30℃；
降至所需温度后，继续在上述溶液中依次加入意大利腊菊提取物、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb、异十二烷、积雪草提取物、高山火绒草提取物、马齿苋提取物、粉防己提取物、四氢甲基嘧啶羧酸、欧囊链藻提取物、水解胶原、山茶花提取物、寡肽-3、甘油葡糖苷、甜菜碱、泛醇、透明质酸钠、寡肽-5和尿囊素，搅拌，冷却至室温，即得具有抗氧化及修护功效乳液。
试验例1
理化指标如下(以下实验过程均设置重复试验，取平均值)：
1、性状
本发明实施例1-3制备的具有抗氧化及修护功效乳液呈乳白色，粘度及稠度适中，具有较高的稳定性。
2、pH值检查
用pH计测定实施例1-3制备的具有抗氧化及修护功效乳液，pH值均为7.0。
3、冷热保存测试
将实施例1-3制备的具有抗氧化及修护功效乳液分别封装于透明化妆品瓶中，于4℃的冰箱冷藏30日无分层现象。
于45℃的恒温箱内保存72h，制得的具有抗氧化及修护功效乳液无分层、析出、变味等现象。
4、离心测试
将实施例1-3制备的具有抗氧化及修护功效乳液分别装于离心管中，3000rpm离心30min，均无分层现象。
5、室温保存测试
将实施例1-3制备的具有抗氧化及修护功效乳液分别封装于透明化妆品瓶中，置于室温下静置保存6个月，无分层现象，使用感官无变化，无异味产生。
6、刺激性测试、过敏性测试
家兔剪去背部毛，分别涂抹实施例1-3制备的具有抗氧化及修护功效乳液于剪去毛的部位，和没涂部位进行比较，结果没有刺激性和过敏反应。
试验例2
测定实施例1制备的具有抗氧化及修护功效乳液抗氧化活力，采用邻苯三酚自氧化率的测定：
按表1所示，将对照管试剂于25℃水浴下保温20min，按所述体积迅速混合摇匀，立即倒入光径1cm的比色杯中，在325nm波长下每隔60s测光吸收值一次，计算出每分钟A325的增值，即为邻苯三酚自氧化率A0。
将样品管试剂于25℃水浴下保温20min，按所述体积迅速混合摇匀，立即倒入光径1cm的比色杯中，在325nm波长下每隔60s测光吸收值一次，计算出每分钟A325的增值，即为该抑制条件下邻苯三酚的自氧化率Am。
表1邻苯三酚自氧化法所用试剂
所述样品管中样品的制备方法为：将实施例1-3制备的具有抗氧化及修护功效乳液和pH为8.2的磷酸缓冲液(PBS)按体积比1：9的比例加入到漩涡振荡器充分混合，得到乳液的测试样品。
实施例1制备的具有抗氧化及修护功效乳液抗氧化的活力，采用抑制邻苯三酚自氧化率的测定：
根据酶活性单位的定义，按如下公式计算酶活：
A0：邻苯三酚自氧化率；Am：加乳液样品后邻苯三酚自氧化率；总活性(U)＝单位活性×V总乳液样品原液。
经测试每毫升乳液含有SOD酶活>20000U，可迅速去除皮肤表面自由基，降低皮肤伤害。
试验例3
实施例1制备的具有抗氧化及修护功效乳液促细胞增殖实验，具体方法为：
1)将生长状态良好的BALB/3T3 CloneA31细胞进行消化并收集细胞，计数，调整细胞浓度，1×104cells/ml，2000cells/孔接种于96孔板中，100微升/孔，培养基条件10％FBSDMEM(胎牛血清培养基)，37℃，5％CO2条件下培养。
2)24h后进行细胞饥饿培养，即将培养基换成0.4％FBSDMEM维持培养液，其它条件不变，继续培养24h。
3)用PBS缓冲液将乳液稀释到以下浓度(100％，50％，25％，12.5％，6.25％)，并用漩涡振荡器充分混合，并逐级加至96孔板中，10微升/孔，培养48-72h。
4)培养72h后采用MTT检测试剂盒/CCK8试剂盒检测细胞增殖情况。
实验结果如图5。从图5中可以看出，含6.25％乳液的稀释液表现出明显的促BALB/3T3 CloneA31细胞增殖活性，即在促细胞增殖活性方面最显著。
试验例4
功效使用案例：
1、一位敏感性肌肤患者，皮肤角质层较，皮肤容易过敏产生痤疮红肿。使用本发明实施例1制备的具有抗氧化及修护功效乳液，每天涂2次，每次0.3-0.5mL，使用2个月后，皮肤敏感度降低，红肿消失，皮肤光洁度提高。具体如图6所示。
2、一位受试者，皮肤暗淡无光泽，局部有痘印。使用本发明实施例1制备的具有抗氧化及修护功效乳液，每天涂2次，每次0.3-0.5mL，使用1个月后，皮肤白皙，光洁度提高，痘印明显消失。具体如图7所示。
试验例5
采用民意调查评分法，选取80名30-60岁年龄段的人作为试用对象，每人每周用本发明实施例1制备的具有抗氧化及修护功效乳液搽脸14次(即每天2次)，使用时间为两个月。各项使用效果总分为5分：5分为最高分，表示较好，非常满意；4分为很好；3分为可以接受；3分以下为不好，不能接受。以下为各项平均得分，结果见表2。
表2综合效果考察
使用效果 平均得分
滋养性 4.9
美白性 4.9
保湿性 4.8
对比例1
同实施例1，区别在于，不添加抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb组分。
结果如表3，可以看出，该对比例制备的乳液具有滋养、保湿的功效，但其抗氧化功效的降低减弱了其对皮肤的美白效果。
表3综合效果考察
使用效果 平均得分
滋养性 4.6
美白性 3.8
保湿性 4.8
对比例2
同实施例1，区别在于，不添加寡肽-3、寡肽-5组分。
结果如表4，可以看出，结果发现，该对比例制备的乳液具有美白和保湿的功效，但其促细胞增殖功效的降低减弱了其对皮肤的滋养效果。
表4综合效果考察
使用效果 平均得分
滋养性 3.7
美白性 4.5
保湿性 4.8
对比例3
同实施例1，区别在于，不添加甘油葡糖苷，透明质酸钠组分。
结果如表5，可以看出，该对比例制备的乳液具有滋养和美白的功效，但其缺少了亲水性较强的长链聚糖分子，降低了其对皮肤的保湿效果。
表5综合效果考察
使用效果 平均得分
滋养性 4.7
美白性 4.8
保湿性 3.9
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 杭州水芭莎生物医药科技有限公司
<120> 一种具有抗氧化及修护功效乳液的制备方法
<160> 7
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 105
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
aagtggaaag tatttaaaaa gatagaaaaa atgggtcgta acattcgtaa cggcattgta 60
aaggcgggtc cggcgatcgc cgttctgggc gaagctaaag ctctg 105
<210> 2
<211> 459
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
gcaaccaagg cggtgtgcgt cttgaagggt gacggtccgg tgcagggtat tatcaacttc 60
gagcagaaag agagcaatgg cccggtgaaa gtttggggtt ctatcaaagg cttgaccgaa 120
ggtctgcatg gttttcacgt gcacgagttc ggcgacaata ccgcgggctg caccagcgca 180
ggtccgcatt ttaacccgct ttcgcgcaaa cacggcggcc caaaagatga ggagcgccac 240
gttggtgacc tcggcaacgt gactgcggat aaggacggcg ttgccgacgt gtccattgaa 300
gatagcgtta tcagcctgtc cggtgatcat tgcatcattg gccgtacgct ggttgtccac 360
gagaaggcgg acgatctggg aaagggcggt aatgaagaaa gcaccaagac gggtaacgcg 420
ggttctcgtc tggcttgtgg tgttatcggc atcgcacaa 459
<210> 3
<211> 15
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
gatcaatata ctgac 15
<210> 4
<211> 705
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
atgaagtgga aagtatttaa aaagatagaa aaaatgggtc gtaacattcg taacggcatt 60
gtaaaggcgg gtccggcgat cgccgttctg ggcgaagcta aagctctgga ccaatacacc 120
gatgcaacca aggcggtgtg cgtcttgaag ggtgacggtc cggtgcaggg tattatcaac 180
ttcgagcaga aagagagcaa tggcccggtg aaagtttggg gttctatcaa aggcttgacc 240
gaaggtctgc atggttttca cgtgcacgag ttcggcgaca ataccgcggg ctgcaccagc 300
gcaggtccgc attttaaccc gctttcgcgc aaacacggcg gcccaaaaga tgaggagcgc 360
cacgttggtg acctcggcaa cgtgactgcg gataaggacg gcgttgccga cgtgtccatt 420
gaagatagcg ttatcagcct gtccggtgat cattgcatca ttggccgtac gctggttgtc 480
cacgagaagg cggacgatct gggaaagggc ggtaatgaag aaagcaccaa gacgggtaac 540
gcgggttctc gtctggcttg tggtgttatc ggcatcgcac aagatcaata tactgacaag 600
tggaaagtct ttaaaaaaat cgagaaaatg ggtcgcaaca tccgtaatgg tattgttaag 660
gcgggcccag cgatcgcggt gctcggcgag gcgaaggcgc tgtaa 705
<210> 5
<211> 35
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
Lys Trp Lys Val Phe Lys Lys Ile Glu Lys Met Gly Arg Asn Ile Arg
1 5 10 15
Asn Gly Ile Val Lys Ala Gly Pro Ala Ile Ala Val Leu Gly Glu Ala
20 25 30
Lys Ala Leu
35
<210> 6
<211> 153
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
Ala Thr Lys Ala Val Cys Val Leu Lys Gly Asp Gly Pro Val Gln Gly
1 5 10 15
Ile Ile Asn Phe Glu Gln Lys Glu Ser Asn Gly Pro Val Lys Val Trp
20 25 30
Gly Ser Ile Lys Gly Leu Thr Glu Gly Leu His Gly Phe His Val His
35 40 45
Glu Phe Gly Asp Asn Thr Ala Gly Cys Thr Ser Ala Gly Pro His Phe
50 55 60
Asn Pro Leu Ser Arg Lys His Gly Gly Pro Lys Asp Glu Glu Arg His
65 70 75 80
Val Gly Asp Leu Gly Asn Val Thr Ala Asp Lys Asp Gly Val Ala Asp
85 90 95
Val Ser Ile Glu Asp Ser Val Ile Ser Leu Ser Gly Asp His Cys Ile
100 105 110
Ile Gly Arg Thr Leu Val Val His Glu Lys Ala Asp Asp Leu Gly Lys
115 120 125
Gly Gly Asn Glu Glu Ser Thr Lys Thr Gly Asn Ala Gly Ser Arg Leu
130 135 140
Ala Cys Gly Val Ile Gly Ile Ala Gln
145 150
<210> 7
<211> 234
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
Met Lys Trp Lys Val Phe Lys Lys Ile Glu Lys Met Gly Arg Asn Ile
1 5 10 15
Arg Asn Gly Ile Val Lys Ala Gly Pro Ala Ile Ala Val Leu Gly Glu
20 25 30
Ala Lys Ala Leu Asp Gln Tyr Thr Asp Ala Thr Lys Ala Val Cys Val
35 40 45
Leu Lys Gly Asp Gly Pro Val Gln Gly Ile Ile Asn Phe Glu Gln Lys
50 55 60
Glu Ser Asn Gly Pro Val Lys Val Trp Gly Ser Ile Lys Gly Leu Thr
65 70 75 80
Glu Gly Leu His Gly Phe His Val His Glu Phe Gly Asp Asn Thr Ala
85 90 95
Gly Cys Thr Ser Ala Gly Pro His Phe Asn Pro Leu Ser Arg Lys His
100 105 110
Gly Gly Pro Lys Asp Glu Glu Arg His Val Gly Asp Leu Gly Asn Val
115 120 125
Thr Ala Asp Lys Asp Gly Val Ala Asp Val Ser Ile Glu Asp Ser Val
130 135 140
Ile Ser Leu Ser Gly Asp His Cys Ile Ile Gly Arg Thr Leu Val Val
145 150 155 160
His Glu Lys Ala Asp Asp Leu Gly Lys Gly Gly Asn Glu Glu Ser Thr
165 170 175
Lys Thr Gly Asn Ala Gly Ser Arg Leu Ala Cys Gly Val Ile Gly Ile
180 185 190
Ala Gln Asp Gln Tyr Thr Asp Lys Trp Lys Val Phe Lys Lys Ile Glu
195 200 205
Lys Met Gly Arg Asn Ile Arg Asn Gly Ile Val Lys Ala Gly Pro Ala
210 215 220
Ile Ala Val Leu Gly Glu Ala Lys Ala Leu
225 230

Claims (5)

1.一种具有抗氧化及修护功效乳液，其特征在于，按质量百分比计，包括以下组分：
意大利腊菊提取物0.001-0.01％、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb 0.001-0.05％、异十二烷0.5-1.5％、积雪草提取物0.05-0.2％、高山火绒草提取物0.01-0.1％、马齿苋提取物0.005-0.02％、粉防己提取物0.001-0.01％、四氢甲基嘧啶羧酸0.01-0.1％、欧囊链藻提取物0.001-0.01％、水解胶原0.05-0.2％、山茶花提取物0.005-0.02％、寡肽-3 0.0001-0.001％、甘油葡糖苷0.01-0.2％、甜菜碱0.1-0.5％、泛醇0.15％、透明质酸钠0.05-0.2％、寡肽-5 0.0001-0.001％、尿囊素0.01-0.1％、丁二醇2-7％、角鲨烷1-4％、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物0.6-1.2％、甘油1.0-2.0％、鲸蜡醇乙基己酸酯1.0-2.0％、燕麦仁油0.2-0.4％、山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯0.8-1.2％、余量为去离子水；
所述抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。
2.根据权利要求1所述的具有抗氧化及修护功效乳液，其特征在于，按质量百分比计，包括以下组分：
意大利腊菊提取物0.001％、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb 0.001％、异十二烷1％、积雪草提取物0.1％、高山火绒草提取物0.05％、马齿苋提取物0.01％、粉防己提取物0.005％、四氢甲基嘧啶羧酸0.05％、欧囊链藻提取物0.002％、水解胶原0.2％、山茶花提取物0.01％、寡肽-3 0.0002％、甘油葡糖苷0.01％、甜菜碱0.2％、泛醇0.15％、透明质酸钠0.1％、寡肽-5 0.0002％、尿囊素0.05％、丁二醇5％、角鲨烷3％、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物0.9％、甘油1.5％、鲸蜡醇乙基己酸酯1.5％、燕麦仁油0.3％、山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯1％、余量为去离子水。
3.一种如权利要求1或2所述的具有抗氧化及修护功效乳液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将去离子水加热至80-83℃，依次加入丁二醇、角鲨烷、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物、甘油、鲸蜡醇乙基己酸酯、燕麦仁油和山梨醇聚醚-30四异硬脂酸酯，搅拌均匀，保温至原料完全溶解，然后降温处理；
降至所需温度后，继续在所得溶液中依次加入意大利腊菊提取物、抗菌肽融合蛋白Cb-SOD-Cb、异十二烷、积雪草提取物、高山火绒草提取物、马齿苋提取物、粉防己提取物、四氢甲基嘧啶羧酸、欧囊链藻提取物、水解胶原、山茶花提取物、寡肽-3、甘油葡糖苷、甜菜碱、泛醇、透明质酸钠、寡肽-5和尿囊素，搅拌，冷却至室温，即得具有抗氧化及修护功效乳液。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述保温时间为20min。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述降温处理是指降温至30-35℃。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN114903826B (zh) * 2022-04-29 2023-10-20 深圳市珍妮肤化妆品有限公司 一种抗衰老组合物、抗衰老化妆品及其制备方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101845439A (zh) * 2010-04-27 2010-09-29 浙江大学 家蚕培养细胞表达抗菌肽Cecropin B的方法
CN106619175A (zh) * 2016-11-10 2017-05-10 陕西慧康生物科技有限责任公司 一种基因重组超氧化物歧化酶面膜
CN107779464A (zh) * 2017-08-29 2018-03-09 苏州东泉生物科技有限公司 一种人源铜锌超氧化物歧化酶的制备方法
CN109481327A (zh) * 2018-12-04 2019-03-19 珠海依赛思生物科技有限公司 一种多效修护肽精华组合物及其制备方法
CN111450013A (zh) * 2020-05-12 2020-07-28 广州怡嘉生物科技有限公司 一种修护原液

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101845439A (zh) * 2010-04-27 2010-09-29 浙江大学 家蚕培养细胞表达抗菌肽Cecropin B的方法
CN106619175A (zh) * 2016-11-10 2017-05-10 陕西慧康生物科技有限责任公司 一种基因重组超氧化物歧化酶面膜
CN107779464A (zh) * 2017-08-29 2018-03-09 苏州东泉生物科技有限公司 一种人源铜锌超氧化物歧化酶的制备方法
CN109481327A (zh) * 2018-12-04 2019-03-19 珠海依赛思生物科技有限公司 一种多效修护肽精华组合物及其制备方法
CN111450013A (zh) * 2020-05-12 2020-07-28 广州怡嘉生物科技有限公司 一种修护原液

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