CN114829370A - 蛋白质精氨酸甲基转移酶5(prmt5)的选择性抑制剂 - Google Patents

蛋白质精氨酸甲基转移酶5(prmt5)的选择性抑制剂 Download PDF

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Abstract

本公开涉及式I(I)的化合物的药学上可接受的盐。还描述了包含式I的化合物的药学上可接受的盐的药物组合物，以及其使用和制备方法。

Description

蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)的选择性抑制剂
相关申请的交叉引用
本申请要求2019年9月18日提交的美国临时申请号62/902,322的优先权的权益，该美国临时申请的全部内容以引用方式并入本文。
技术领域
本公开涉及PRMT5抑制剂及其使用方法。
背景技术
蛋白质精氨酸甲基化是调节许多细胞过程的常见翻译后修饰，该细胞过程包括基因转录、mRNA剪接、DNA修复、蛋白质细胞定位、细胞命运决定和信号传导。存在三种类型的甲基-精氨酸物质：ωNG单甲基精氨酸(MMA)、ωNG,NG非对称二甲基精氨酸(ADMA)和ωNG,N’G对称二甲基精氨酸(SDMA)。甲基化精氨酸的形成由甲基转移酶的蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT)家族催化。目前，在人类基因组中注释了九种PRMT。这些酶中的大多数是I型酶(PRMT1、-2、-3、-4、-6、-8)，其能够以S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体对精氨酸进行单二甲基化和非对称二甲基化。PRMT-5、-7和-9被认为是催化精氨酸的对称二甲基化的II型酶。每种PRMT物质含有七个β链甲基转移酶的特征基序(Katz等人，2003)以及PRMT亚家族特有的额外的“双E”和“THW”序列基序。
PRMT5是一种通用的转录阻遏物，其与许多转录因子和阻遏物复合物一起发挥作用，包括BRG1和hBRM、Blimp1和Snail。这种酶一旦被募集到启动子，就使H3R8和H4R3发生对称二甲基化。重要的是，H4R3位点是PRMT1甲基化(ADMA)的主要靶标并且通常被认为是转录激活标记。因此，H4R3me2s(阻遏性；me2s指示SDMA修饰)和H4R3me2a(活性；me2a指示ADMA修饰)标记两者在体内产生。PRMT5对H3R8和H4R3的特异性可通过其与COPR5的相互作用而改变，并且这可能在确定PRMT5共阻遏状态中起重要作用。
PRMT在癌症中的作用
已在人类癌症中鉴定了PRMT的异常表达，并且PRMT被认为是治疗性靶标。对***癌中的组蛋白修饰的整体分析显示，组蛋白H4R3的二甲基化与增加的分级正相关，并且这些变化预示临床结果。
已显示，在一组淋巴癌细胞系以及套细胞淋巴瘤临床样品中，PRMT5水平有所升高。PRMT5与参与多种细胞过程的许多底物相互作用，该细胞过程包括RNA加工、信号转导和转录调节。PRMT5可直接修饰组蛋白H3和H4，从而导致对基因表达的阻遏。PRMT5过表达可刺激细胞生长并且通过直接阻遏肿瘤抑制基因来诱导转化。Pal等人，Mol.Cell.Biol.2003,7475；Pal等人Mol.Cell.Biol.2004,9630；Wang等人Mol.Cell.Biol.2008,6262；Chung等人J Biol Chem 2013,5534。除了其在转录和翻译中证据充分的致癌功能之外，转录因子MYC还保护作为淋巴瘤生成中的必要步骤的正确前信使RNA剪接。Koh等人Nature 2015,5237558；Hsu等人Nature 2015 525,384。
癌症依赖性的发现具有告知治疗策略和鉴定推定的药物靶标的潜力。综合来自癌细胞系的全面基因组谱分析和来自癌细胞依赖性的功能表征的数据，最近发现，酶甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)的丢失赋予对蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)及其结合配偶体WDR77的选择性依赖性。MTAP经常由于其接近通常缺失的肿瘤抑制基因CDKN2A而丢失。带有MTAP缺失的细胞具有增加的细胞内浓度的甲硫腺苷(MTA，由MTAP切割的代谢物)。此外，MTA特异性地抑制PRMT5酶活性。MTA或小分子PRMT5抑制剂的施用显示，与同基因表达MTAP的对应物相比，MTAP无效癌细胞系的细胞活力优先受损。总之，这些发现揭示了PRMT5作为一种潜在的跨多种癌症谱系的脆弱性，这种脆弱性因一种常见的“过客”基因组改变而增强。
PRMT5在血红蛋白病中的作用
出生时开始的人珠蛋白基因亚型从胎儿到成人的发育转变预示着血红蛋白病、β-地中海贫血和镰形细胞病(SCD)的发作。观察到成人珠蛋白基因表达增加(在胎儿血红蛋白[HPFH]突变遗传持续的情况下)显著改善了地中海贫血和SCD的临床严重程度，这促使人们寻找逆转γ-珠蛋白基因沉默的治疗策略。γ基因沉默的核心是DNA甲基化，它标志着成人骨髓红系细胞中基因转录起始位点侧翼的关键CpG二核苷酸。已显示，这些标记是由于通过蛋白质精氨酸甲基转移酶PRMT5将DNA甲基转移酶DNMT3A募集到γ-启动子而建立的。Zhao等人Nat Struct Mol Biol.2009 16,304。PRMT5介导的组蛋白H4R3甲基化募集DNMT3A，在基因沉默中偶联组蛋白和DNA甲基化。
PRMT5诱导阻遏性组蛋白标记H4R3me2s，其作为直接结合DNMT3A和随后的DNA甲基化的模板。PRMT5结合或其酶活性的丧失导致CpG二核苷酸的去甲基化和基因激活。除了H4R3me2s标记和DNA甲基化之外，PRMT5与γ-启动子的结合及其酶活性对于γ-启动子上多蛋白复合物的组装是必不可少的，这诱导了一系列协同阻遏性表观遗传标记。这种复合物的破坏导致γ基因表达的重新激活。这些研究为开发PRMT5抑制剂作为地中海贫血和SCD的靶向疗法提供了基础。
发明内容
本公开涉及式I的化合物的药学上可接受的盐：
Figure BDA0003613934800000031
本公开还涉及式I的盐酸盐、磷酸盐和酒石酸盐。
还描述了此类盐的结晶形式，以及此类盐的药物组合物和使用方法。
附图说明
图1示出了式IA-形式I的XRPD。
图2示出了式IA-形式I的DSC热谱图。
图3示出了式IA-形式I的TGA曲线。
图4示出了式IA-形式II的XRPD。
图5示出了式IA-形式II的TGA曲线。
图6示出了式IA-形式IIa的XRPD。
图7示出了式IA-形式IIa的DSC热谱图。
图8示出了式IA-形式III的XRPD。
图9示出了式IA-形式III的DSC热谱图。
图10示出了式IA-形式III的TGA曲线。
图11示出了式IA-形式IV的XRPD。
图12示出了式IA-形式IV的DSC热谱图。
图13示出了式IA-形式IV的TGA曲线。
图14A示出了式IB-形式I的XRPD。
图14B示出了式IB-形式II的XRPD。
图15A示出了式IB-形式I的DSC热谱图。
图15B示出了式IB-形式II的DSC热谱图。
图16A示出了式IB-形式I的TGA曲线。
图16B示出了式IB-形式II的TGA曲线。
图17示出了式IC的XRPD。
图18示出了式IC的DSC热谱图。
图19示出了式IC的TGA曲线。
图20示出了式IC的1H NMR光谱。
图21示出了式I游离碱的XRPD。
具体实施方式
通过参考以下描述，包括以下定义和实施例，可更全面地理解本公开。本文在单独方面的上下文中描述的所公开的组合物和方法的某些特征也可在单个方面中组合提供。另选地，为了简洁起见，在单个方面的上下文中描述的所公开的组合物和方法的各种特征也可单独提供或以任何子组合的形式提供。
“药学上可接受的”意指由联邦或州政府的监管机构或美国以外的国家/地区的对应机构批准或认可的，或者在美国药典或其他公认的药典中列出的用于动物(例如人类)的药物。
“药学上可接受的盐”是指药学上可接受的并且具有母体化合物的期望药理学活性的本公开化合物的盐。具体地，此类盐是无毒的，可以是无机或有机酸加成盐和碱加成盐。具体地，此类盐包括：(1)酸加成盐，其由无机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成；或由有机酸诸如乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡萄糖酸、谷氨酸、羟基萘酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等形成；或(2)当母体化合物中存在的酸性质子被金属离子(例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子)替代时形成的盐；或与有机碱诸如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、N-甲基葡糖胺等配位。仅作为示例，盐还包括钠、钾、钙、镁、铵、四烷基铵等；并且当化合物含有碱性官能团时，无毒的有机或无机酸的盐，诸如盐酸盐、氢溴酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、乙酸盐、马来酸盐、草酸盐等。
“药学上可接受的赋形剂”是指无毒的、生物学上可耐受的并且以其它方式生物学上适于向受试者施用的物质，诸如惰性物质，添加到药理学组合物中或以其它方式用作媒剂、载体或稀释剂以促进药剂的施用并与其相容。赋形剂的示例包括碳酸钙、磷酸钙、各种糖和各种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙二醇。
“溶剂化物”是指式I的化合物与一种或多种溶剂分子的物理缔合。
“受试者”包括人。术语“人”、“患者”和“受试者”在本文中可互换使用。
在一个实施方案中，任何疾病或障碍的“治疗(Treating或treatment)”是指改善疾病或障碍(即，阻止或减少疾病或其临床症状中的至少一种临床症状的发展)。在另一个实施方案中，“治疗”是指改善受试者可能无法辨别的至少一个物理参数。在另一个实施方案中，“治疗”是指调节身体上(例如稳定可辨别的症状)、生理上(例如，稳定物理参数)或两者的疾病或障碍。在另一个实施方案中，“治疗”是指延迟疾病或障碍的发作。在一些实施方案中，“治疗”是指预防性治疗，即预防疾病或障碍的发作。
“本公开的化合物”和等效表达旨在涵盖如本文所述的式I的化合物的药学上可接受的盐，以及它们的亚属，在上下文允许的情况下，该表达包括立体异构体(例如，对映异构体、非对映异构体)和结构异构体(例如，互变异构体)。
如本文所用，术语“同位素变体”是指这样的化合物，该化合物在构成此类化合物的原子中的一个或多个原子处含有的同位素的比例大于天然丰度。例如，化合物的“同位素变体”可以是放射性标记的，即含有一种或多种放射性同位素，或者可用非放射性同位素诸如氘(2H或D)、碳-13(13C)、氮-15(15N)等标记。应当理解，在制备此类同位素取代的化合物中，以下原子(如果存在的话)可变化，使得例如任何氢可以是2H/D，任何碳可以是13C，或者任何氮可以是15N，并且此类原子的存在和放置可在本领域的技术范围内确定。
还应理解，具有相同分子式但其原子的键合性质或顺序或其原子在空间中的排列不同的化合物被称为“异构体”空间原子排列不同的异构体称为“立体异构体”，例如，非对映体、对映体和阻转异构体。本公开的化合物可具有一个或多个非对称中心；因此，此类化合物可在每个非对称中心处产生单独的(R)-或(S)-立体异构体，或它们的混合物。除非另外指明，否则说明书和权利要求书中对特定化合物的描述或命名旨在包括其外消旋的或其他的所有立体异构体和混合物。在结构中存在一个手性中心但没有显示该中心的具体立体化学的情况下，该结构涵盖单独地或作为对映体的混合物的两种对映体。在结构中存在多于一个手性中心但未显示该中心的具体立体化学的情况下，该结构涵盖单独地或作为混合物的所有对映体和非对映体。用于测定立体化学和分离立体异构体的方法在本领域中是众所周知的。
在一些方面，本公开涉及式I的化合物的药学上可接受的盐：
Figure BDA0003613934800000071
在一些实施方案中，药学上可接受的盐是磷酸、硫酸、盐酸、抗坏血酸、L-酒石酸、乙烷-1,2-二磺酸或1-羟基-2-萘甲酸和草酸。
在一些实施方案中，式I的化合物的药学上可接受的盐是盐酸盐，即式IA。
Figure BDA0003613934800000081
在其他实施方案中，式I的化合物的药学上可接受的盐是磷酸盐，即式IB。
在其他实施方案中，式I的化合物的药学上可接受的盐是酒石酸盐，即式IC。
在一些实施方案中，酒石酸盐是L-酒石酸盐。在其他实施方案中，酒石酸盐是D-酒石酸盐。
在其他实施方案中，式I的化合物的药学上可接受的盐是硫酸盐，即式ID。
在其他实施方案中，式I的化合物的药学上可接受的盐是抗坏血酸盐，即式IE。
在其他实施方案中，式I的化合物的药学上可接受的盐是乙烷-1,2-二磺酸盐，即式IF。
在其他实施方案中，式I的化合物的药学上可接受的盐是1-羟基-2-萘甲酸盐，即式IG。
在其他实施方案中，式I的化合物的药学上可接受的盐是草酸盐，即式IH。
在一些方面，本公开涉及式I的药学上可接受的盐的结晶形式。
在一些实施方案中，本公开涉及式IA、式IB或式IC的盐的结晶形式。
根据本公开的式IA、IB或IC的盐的结晶形式可具有有利的特性，包括以下中的一种或多种：化学或多晶型纯度、流动性、溶解度、溶解速率、生物利用度、形态或晶体习性、稳定性-例如，化学稳定性、热稳定性和相对于多晶型转化的机械稳定性、储存稳定性；吸湿性、低含量的残余溶剂、以及有利的加工和处理特性，诸如可压缩性或体密度。
晶体形式在本文中可被称为由“如图所示”的图形数据表征。此类数据包括例如粉末X射线衍射图(XRPD)、差示扫描量热法(DSC)热谱图或热重分析(TGA)曲线。如本领域中已知的，图形数据潜在地提供额外的技术信息，以进一步限定相应的固体形式，该相应的固体形式不一定通过参考数值或峰位置来描述。因此，当参考本文附图中的图形数据时，术语“基本上如图所示”意指不一定与本文所描绘的那些相同的图谱，但是当由本领域普通技术人员考虑时落入实验误差或偏差的限制内。技术人员将能够容易地将本文附图中的图形数据与针对未知晶体形式产生的图形数据进行比较，并确认两组图形数据是表征相同的晶体形式还是两种不同的晶体形式。
固体结晶形式在本文中可称为“多晶型纯”或“基本上不含任何其他形式”如本文在上下文中所用，表述“基本上不含任何其他形式”将被理解为意指固体形式含有约20％或更少、约10％或更少、约5％或更少、约2％或更少、约1％或更少或0％的任何其他形式的主题化合物，如例如通过XRPD测量的。例如，如本文所述的基本上不含任何其他固体形式的式IA的固体形式应被理解为含有大于约80％(w/w)、大于约90％(w/w)、大于约95％(w/w)、大于约98％(w/w)、大于约99％(w/w)或约100％的式IA的主题固体形式。因此，在本公开的一些实施方案中，所述式IA的固体形式可含有约1％至约20％(w/w)、约5％至约20％(w/w)、或约5％至约10％(w/w)的一种或多种其他式IA的固体形式。
如本文所用，除非另外说明，否则本文报道的XRPD峰是使用CuKα辐射测量的，λ＝
Figure BDA0003613934800000102
修饰语“约”应被视为公开了由两个端点的绝对值限定的范围。例如，表述“约2至约4”也公开了“2至4”的范围。当用于修饰单个数字时，术语“约”是指所指示数字的±10％，并且包括所指示的数字。例如，“约10％”指示9％至11％的范围，并且“约1”意指0.9-1.1。
在一些方面，本公开涉及式I的盐酸盐即式IA的结晶形式。在一些实施方案中，式IA的结晶形式是形式I(式IA-形式I)。在一些实施方案中，式IA-形式I基本上不含式IA的任何其他固体形式。
在一些实施方案中，式IA-形式I表现出基本上如图1所示的XRPD。图1所示的式IA-形式I的XRPD包括反射角(度2-θ±0.2度2-θ)、线距(d值)和相对强度，如表1所示：
表1.在图1中示出的式IA-形式I的结晶形式的XRPD数据
Figure BDA0003613934800000101
Figure BDA0003613934800000111
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式I的特征在于在表1中列出的角度中的一个角度处包括峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式I的特征在于在上表1中列出的角度中的一个角度处包括多于一个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式I的特征在于在选自上表1中列出的角度处包括两个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式I的特征在于在选自上表1中列出的角度处包括三个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式I的特征在于在选自上表1中列出的角度处包括四个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式I的特征在于在选自上表1中列出的角度处包括五个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式I的特征在于在选自上表1中列出的角度处包括六个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式I的特征在于在选自上表1中列出的角度处包括七个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式I的特征在于在选自上表1中列出的角度处包括八个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式I的特征在于在选自上表1中列出的角度处包括九个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式I的特征在于在选自上表1中列出的角度处包括十个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式I的特征在于在选自上表1中列出的角度处包括多于十个峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IA-形式I的特征在于在23.8度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式I的特征在于在21.2和23.8度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式I的特征在于在21.2、23.8和27.0度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式I的特征在于在21.2、23.8、27.0和32.5度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式I的特征在于在21.2、23.8、27.0和32.5度±0.2度2-θ中的两者或更多者处包括峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IA-形式I可通过基本上如图2所示的DSC热谱图来表征。如图2显示，当以10℃/min的速率加热时，式IA-形式I产生在244.19℃处的吸热峰，其中峰起始温度为234.71℃，并且熔融焓为252.8J/g。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式I的特征在于在约244℃处包括吸热峰的DSC热谱图。在本公开的其他实施方案中，式IA-形式I的特征在于约253J/g的DSC熔融焓。
在一些实施方案中，式IA-形式I的特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图3所示的TGA曲线。如图3所示，在加热至约300℃时，式IA-形式I损失其重量约18.4％。
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式I的特征在于当以10℃/min的速率加热时在21.2、23.8、27.0和32.5度±0.2度2-θ中的一者或多者处包括峰的XRPD图谱，以及在约244℃处包括吸热峰的DSC热谱图。
在一些实施方案中，式IA的结晶形式是形式II(式IA-形式II)。在一些实施方案中，式IA-形式II基本上不含式IA的任何其他固体形式。
在一些实施方案中，式IA-形式II表现出基本上如图4所示的XRPD。图4所示的式IA-形式II的XRPD包括反射角(度2-θ±0.2度2-θ)、线距(d值)和相对强度，如表2所示：
表2.在图4中示出的式IA-形式II的结晶形式的XRPD数据
Figure BDA0003613934800000131
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式II的特征在于在表2中列出的角度中的一个角度处包括峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式II的特征在于在上表2中列出的角度中的一个角度处包括多于一个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式II的特征在于在选自上表2中列出的角度处包括两个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式II的特征在于在选自上表2中列出的角度处包括三个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式II的特征在于在选自上表2中列出的角度处包括四个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式II的特征在于在选自上表2中列出的角度处包括五个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式II的特征在于在选自上表2中列出的角度处包括六个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式II的特征在于在选自上表2中列出的角度处包括七个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式II的特征在于在选自上表2中列出的角度处包括八个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式II的特征在于在选自上表2中列出的角度处包括九个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式II的特征在于在选自上表2中列出的角度处包括十个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式II的特征在于在选自上表2中列出的角度处包括多于十个峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IA-形式II的特征在于在25.5度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式II的特征在于在14.8、17.5和25.5度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式II的特征在于在14.8、17.5、18.4、24.0和25.5度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式II的特征在于在14.8、17.5、18.4、24.0、25.5、28.0和28.7度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式II的特征在于在17.5、18.4、19.8、24.0、25.5、28.0和28.7度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式II的特征在于在17.5、18.4、19.8、24.0、25.5、28.0和28.7度±0.2度2-θ中的三者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式II的特征在于在17.5、18.4、19.8、24.0、25.5、28.0和28.7度±0.2度2-θ中的四者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式II的特征在于在17.5、18.4、19.8、24.0、25.5、28.0和28.7度±0.2度2-θ中的五者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式II的特征在于在17.5、18.4、19.8、24.0、25.5、28.0和28.7度±0.2度2-θ中的六者或更多者处包括峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IA-形式II的特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图5所示的TGA曲线。如图5所示，在加热至约225℃时，式IA-形式II损失其重量约3％。
在一些实施方案中，式IA的结晶形式是形式IIa(式IA-形式IIa)。在一些实施方案中，式IA-形式IIa基本上不含式IA的任何其他固体形式。
在一些实施方案中，式IA-形式IIa表现出基本上如图6所示的XRPD。图6所示的式IA-形式IIa的XRPD包括反射角(度2-θ±0.2度2-θ)、线距(d值)和相对强度，如表3所示：
表3.在图6中示出的式IA-形式IIa的结晶形式的XRPD数据
Figure BDA0003613934800000151
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于在表3中列出的角度中的一个角度处包括峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IIa的特征在于在上表3中列出的角度中的一个角度处包括多于一个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IIa的特征在于在选自上表3中列出的角度处包括两个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IIa的特征在于在选自上表3中列出的角度处包括三个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IIa的特征在于在选自上表3中列出的角度处包括四个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IIa的特征在于在选自上表3中列出的角度处包括五个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IIa的特征在于在选自上表3中列出的角度处包括六个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IIa的特征在于在选自上表3中列出的角度处包括七个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IIa的特征在于在选自上表3中列出的角度处包括八个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IIa的特征在于在选自上表3中列出的角度处包括九个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IIa的特征在于在选自上表3中列出的角度处包括十个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IIa的特征在于在选自上表3中列出的角度处包括多于十个峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于在26.1度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于在14.0、14.9和26.1度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于在12.5、14.0、14.9、18.4和26.1度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于在12.5、14.0、14.9、18.4、24.9和26.1度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于在12.5、14.0、14.9、18.4、24.9、26.1和28.3度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于在12.5、14.0、14.9、18.4、24.9、26.1和28.3度±0.2度2-θ中的三者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于在12.5、14.0、14.9、18.4、24.9、26.1和28.3度±0.2度2-θ中的四者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于在12.5、14.0、14.9、18.4、24.9、26.1和28.3度±0.2度2-θ中的五者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于在12.5、14.0、14.9、18.4、24.9、26.1和28.3度±0.2度2-θ中的六者或更多者处包括峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IA-形式IIa可通过基本上如图7所示的DSC热谱图来表征。如图7显示，当以10℃/min的速率加热时，式IA-形式IIa产生在199.44℃处的吸热峰，其中峰起始温度为194.14℃，并且熔融焓为55.02J/g；随后是放热峰；随后是在244.53℃处的吸热峰，其中峰起始温度为236.29℃，并且熔融焓为327.1J/g。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于在约199℃处包括吸热峰的DSC热谱图。在本公开的其他实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于约55J/g的DSC熔融焓。
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式IIa的特征在于当以10℃/min的速率加热时在12.5、14.0、14.9、18.4、24.9、26.1和28.3度±0.2度2-θ中的一者或多者处包括峰的XRPD图谱，以及在约199℃处包括吸热峰的DSC热谱图。
在一些实施方案中，式IA的结晶形式是形式III(式IA-形式III)。在一些实施方案中，式IA-形式III基本上不含式IA的任何其他固体形式。
在一些实施方案中，式IA-形式III表现出基本上如图8所示的XRPD。图8所示的式IA-形式III的XRPD包括反射角(度2-θ±0.2度2-θ)、线距(d值)和相对强度，如表4所示：
表4.在图8中示出的式IA-形式III的结晶形式的XRPD数据
Figure BDA0003613934800000171
Figure BDA0003613934800000181
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式III的特征在于在表4中列出的角度中的一个角度处包括峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式III的特征在于在上表4中列出的角度中的一个角度处包括多于一个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式III的特征在于在选自上表4中列出的角度处包括两个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式III的特征在于在选自上表4中列出的角度处包括三个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式III的特征在于在选自上表4中列出的角度处包括四个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式III的特征在于在选自上表4中列出的角度处包括五个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式III的特征在于在选自上表4中列出的角度处包括六个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式III的特征在于在选自上表4中列出的角度处包括七个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式III的特征在于在选自上表4中列出的角度处包括八个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式III的特征在于在选自上表4中列出的角度处包括九个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式III的特征在于在选自上表4中列出的角度处包括十个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式III的特征在于在选自上表4中列出的角度处包括多于十个峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IA-形式III的特征在于在8.1度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式III的特征在于在8.1和23.3度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式III的特征在于在8.1、12.5、16.2和23.3度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式III的特征在于在8.1、12.5、16.2、18.8、23.3和24.5度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式III的特征在于在8.1、12.5、13.7、14.5、16.2、18.8、23.3和24.5度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式III的特征在于在8.1、12.5、13.7、14.5、15.3,16.2、18.8、21.2、23.3和24.5度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式III的特征在于在8.1、12.5、13.7、14.5、15.3,16.2、18.8、21.2、23.3和24.5度±0.2度2-θ中的三者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式III的特征在于在8.1、12.5、13.7、14.5、15.3,16.2、18.8、21.2、23.3和24.5度±0.2度2-θ中的四者或更多者处包括峰的XRPD图谱。
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式III的特征在于在8.1、12.5、13.7、14.5、15.3,16.2、18.8、21.2、23.3和24.5度±0.2度2-θ中的五者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式III的特征在于在8.1、12.5、13.7、14.5、15.3,16.2、18.8、21.2、23.3和24.5度±0.2度2-θ中的六者或更多者处包括峰的XRPD图谱。
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式III的特征在于在8.1、12.5、13.7、14.5、15.3,16.2、18.8、21.2、23.3和24.5度±0.2度2-θ中的七者或更多者处包括峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IA-形式III可通过基本上如图9所示的DSC热谱图来表征。如图9显示，当以10℃/min的速率加热时，式IA-形式III在120.83℃处产生吸热峰，其中峰起始温度为113.61℃，并且熔融焓为187.5J/g；随后是在163.21℃处的放热峰，其中峰起始温度为158.31℃并且熔融焓为67.85J/g；随后是在192.59℃处的吸热峰，其中峰起始温度为190.01℃并且熔融焓为66.36J/g；随后是在233.74℃处的吸热峰，其中峰起始温度为227.54℃并且熔融焓为88.63J/g。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式III的特征在于在约121℃处包括吸热峰的DSC热谱图。在本公开的其他实施方案中，式IA-形式III的特征在于约187.5J/g的DSC熔融焓。
在一些实施方案中，式IA-形式III的特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图10所示的TGA曲线。如图10所示，在加热至约125℃时，式IA-形式III损失其重量约4.1％。
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式III的特征在于当以10℃/min的速率加热时在12.5、13.7、14.5、15.3,16.2、18.8、21.2、23.3和24.5度±0.2度2-θ中的一者或多者处包括峰的XRPD图谱，以及在约121℃处包括吸热峰的DSC热谱图。
在一些实施方案中，式IA的结晶形式是形式IV(式IA-形式IV)。在一些实施方案中，式IA-形式IV基本上不含式IA的任何其他固体形式。
在一些实施方案中，式IA-形式IV表现出基本上如图11所示的XRPD。图11所示的式IA-形式IV的XRPD包括反射角(度2-θ±0.2度2-θ)、线距(d值)和相对强度，如表5所示：
表5.在图11中示出的式IA-形式IV的结晶形式的XRPD数据
Figure BDA0003613934800000201
Figure BDA0003613934800000211
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式IV的特征在于在表5中列出的角度中的一个角度处包括峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IV的特征在于在上表5中列出的角度中的一个角度处包括多于一个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IV的特征在于在选自上表5中列出的角度处包括两个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IV的特征在于在选自上表5中列出的角度处包括三个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IV的特征在于在选自上表5中列出的角度处包括四个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IV的特征在于在选自上表5中列出的角度处包括五个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IV的特征在于在选自上表5中列出的角度处包括六个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IV的特征在于在选自上表5中列出的角度处包括七个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IV的特征在于在选自上表5中列出的角度处包括八个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IV的特征在于在选自上表5中列出的角度处包括九个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IV的特征在于在选自上表5中列出的角度处包括十个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IA-形式IV的特征在于在选自上表5中列出的角度处包括多于十个峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IA-形式IV的特征在于在4.0度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式IV的特征在于在4.0和22.7度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式IV的特征在于在4.0、22.7和27.8度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式IV的特征在于在22.7、27.8和30.6度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式IV的特征在于在14.8、22.7、27.8和30.6度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IA-形式IV的特征在于在4.0、14.8、22.7、27.8和30.6度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式IV的特征在于在4.0、14.8、22.7、27.8和30.6度±0.2度2-θ中的三者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式IV的特征在于在4.0、14.8、22.7、27.8和30.6度±0.2度2-θ中的四者或更多者处包括峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IA-形式IV可通过基本上如图12所示的DSC热谱图来表征。如图12显示，当以10℃/min的速率加热时，式IA-形式IV产生在169.03℃处的吸热峰，其中峰起始温度为161.67℃，并且熔融焓为25.82J/g；随后是在192.83℃处的放热峰；随后是在243.32℃处的吸热峰，其中起始温度为238.22℃，并且焓为366.9J/g。在本公开的一些实施方案中，式IA-形式IV的特征在于在约169℃处包括吸热峰的DSC热谱图。在本公开的其他实施方案中，式IA-形式IV的特征在于约26J/g的DSC熔融焓。
在一些实施方案中，式IA-形式IV的特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图13所示的TGA曲线。如图13所示，在加热至约300℃时，式IA-形式IV损失其重量约12.4％(1.135％+11.23％)。
在本公开的一些实施方案中，式IA-形式IV的特征在于当以10℃/min的速率加热时在4.0、14.8、22.7、27.8和30.6度±0.2度2-θ中的一者或多者处包括峰的XRPD图谱，以及在约169℃处包括吸热峰的DSC热谱图。
在一些方面，本公开涉及式I的磷酸盐即式IB的结晶形式。
在一些实施方案中，式IB的结晶盐是式IB-形式I，表现出基本上如图14A所示的XRPD。图14A所示的式IB-形式I的XRPD包括反射角(度2-θ±0.2度2-θ)、线距(d值)和相对强度，如表6所示：
表6.在图14A中示出的式IB-形式I的结晶形式的XRPD数据
Figure BDA0003613934800000231
在本公开的一些实施方案中，式IB-形式I的特征在于在表6中列出的角度中的一个角度处包括峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式I的特征在于在上表6中列出的角度中的一个角度处包括多于一个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式I的特征在于在选自上表6中列出的角度处包括两个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式I的特征在于在选自上表6中列出的角度处包括三个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式I的特征在于在选自上表6中列出的角度处包括四个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式I的特征在于在选自上表6中列出的角度处包括五个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式I的特征在于在选自上表6中列出的角度处包括六个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式I的特征在于在选自上表6中列出的角度处包括七个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式I的特征在于在选自上表6中列出的角度处包括八个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式I的特征在于在选自上表6中列出的角度处包括九个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式I的特征在于在选自上表6中列出的角度处包括十个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式I的特征在于在选自上表6中列出的角度处包括多于十个峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IB-形式I的特征在于在24.9度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IB-形式I的特征在于在18.2、19.6和24.9度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IB-形式I的特征在于在18.2、19.6、24.9、25.7和27.0度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IB-形式I的特征在于在18.2、18.8、19.6、24.9、25.7和27.0度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。
在本公开的一些实施方案中，式IB-形式I的特征在于在18.2、18.8、19.6、24.9、25.7和27.0度±0.2度2-θ中的三者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IB-形式I的特征在于在18.2、18.8、19.6、24.9、25.7和27.0度±0.2度2-θ中的四者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IB-形式I的特征在于在18.2、18.8、19.6、24.9、25.7和27.0度±0.2度2-θ中的五者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IB-形式I的特征在于在18.2、18.8、19.6、24.9、25.7和27.0度±0.2度2-θ中的六者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IB-形式I的特征在于在18.2、18.8、19.6、24.9、25.7和27.0度±0.2度2-θ中的七者或更多者处包括峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IB-形式I可通过基本上如图15A所示的DSC热谱图来表征。如图15A显示，当以10℃/min的速率加热时，式IB-形式I产生在200.6℃处的吸热峰，其中峰起始温度为198.96℃并且熔融焓为53.99J/g，随后是在224.96℃和235.97℃处的吸热峰。在本公开的一些实施方案中，式IB-形式I的特征在于在约201℃处包括吸热峰的DSC热谱图。在本公开的其他实施方案中，式IB-形式I的特征在于约54J/g的DSC熔融焓。
在一些实施方案中，式IB-形式I的特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图16A所示的TGA曲线。如图16A所示，在加热至约250℃时，式IB-形式I损失其重量约6％。
在本公开的一些实施方案中，式IB-形式I的特征在于当以10℃/min的速率加热时在18.2、18.8、19.6、24.9、25.7和27.0度±0.2度2-θ中的一者或多者处包括峰的XRPD图谱，以及在约201℃处包括吸热峰的DSC热谱图。
在一些实施方案中，式IB的结晶盐是式IB-形式II，其表现出基本上如图14B所示的XRPD。图14B所示的式IB-形式II的XRPD包括反射角(度2-θ±0.2度2-θ)、线距(d值)和相对强度，如表6B所示：
表6B.在图14B中示出的式IB-形式II的结晶形式的XRPD数据
Figure BDA0003613934800000261
在本公开的一些实施方案中，式IB-形式II的特征在于在表6B中列出的角度中的一个角度处包括峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式II的特征在于在上表6B中列出的角度中的一个角度处包括多于一个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式II的特征在于包括在选自上表6B中列出的角度处的两个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式II的特征在于包括在选自上表6B中列出的角度处的三个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式II的特征在于包括在选自上表6B中列出的角度处的四个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式II的特征在于包括在选自上表6B中列出的角度处的五个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式II的特征在于包括在选自上表6B中列出的角度处的六个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式II的特征在于包括在选自上表6B中列出的角度处的七个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式II的特征在于包括在选自上表6B中列出的角度处的八个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式II的特征在于包括在选自上表6B中列出的角度处的九个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式II的特征在于包括在选自上表6B中列出的角度处的十个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IB-形式II的特征在于包括在选自上表6B中列出的角度处的多于十个峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IB-形式II的特征在于在24.6度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IB-形式II的特征在于在19.3、24.6和27.4度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IB-形式II的特征在于在19.3、22.3、23.6、24.6和27.4度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IB-形式II的特征在于在19.3、22.3、23.6、24.6、25.6和27.4度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。
在本公开的一些实施方案中，式IB-形式II的特征在于在19.3、22.3、23.6、24.6、25.6和27.4度±0.2度2-θ中的三者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IB-形式II的特征在于在19.3、22.3、23.6、24.6、25.6和27.4度±0.2度2-θ中的四者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IB-形式II的特征在于在19.3、22.3、23.6、24.6、25.6和27.4度±0.2度2-θ中的五者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IB-形式II的特征在于在19.3、22.3、23.6、24.6、25.6和27.4度±0.2度2-θ中的六者或更多者处包括峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IB-形式II可通过基本上如图15B所示的DSC热谱图来表征。如图15B显示，当以10℃/min的速率加热时，式IB-形式II产生在228.56℃处的吸热峰，其中峰起始温度为225.70℃，并且熔融焓为140.4J/g。在本公开的一些实施方案中，式IB-形式II的特征在于在约229℃处包括吸热峰的DSC热谱图。在本公开的其他实施方案中，式IB-形式II的特征在于约140J/g的DSC熔融焓。
在一些实施方案中，式IB-形式II的特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图16B所示的TGA曲线。如图16B所示，在加热至约275℃时，式IB-形式II损失其重量约7.3％。
在本公开的一些实施方案中，式IB-形式II的特征在于当以10℃/min的速率加热时在19.3、22.3、23.6、24.6、25.6和27.4度±0.2度2-θ中的一者或多者处包括峰的XRPD图谱，以及在约229℃处包括吸热峰的DSC热谱图。
在一些方面，本公开涉及式I的酒石酸盐即式IC的结晶形式。
在一些实施方案中，式IC表现出基本上如图17所示的XRPD。图17所示的式IC的XRPD包括反射角(度2-θ±0.2度2-θ)、线距(d值)和相对强度，如表7所示：
表7.在图17中示出的式IC的结晶形式的XRPD数据
Figure BDA0003613934800000281
Figure BDA0003613934800000291
在本公开的一些实施方案中，式IC的特征在于在表7中列出的角度中的一个角度处包括峰的XRPD图谱。在其他方面，式IC的特征在于在上表7中列出的角度中的一个角度处包括多于一个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IC的特征在于在选自上表7中列出的角度处包括两个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IC的特征在于在选自上表7中列出的角度处包括三个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IC的特征在于在选自上表7中列出的角度处包括四个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IC的特征在于在选自上表7中列出的角度处包括五个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IC的特征在于在选自上表7中列出的角度处包括六个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IC的特征在于在选自上表7中列出的角度处包括七个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IC的特征在于在选自上表7中列出的角度处包括八个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IC的特征在于在选自上表7中列出的角度处包括九个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IC的特征在于在选自上表7中列出的角度处包括十个峰的XRPD图谱。在其他方面，式IC的特征在于在选自上表7中列出的角度处包括多于十个峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IC的特征在于在18.4度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IC的特征在于在18.4、19.9和21.5度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IC的特征在于在18.4、19.4、19.9、21.5和26.3度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IC的特征在于在11.4、18.4、19.4、19.9、21.5、26.3和30.2度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。在其他实施方案中，式IC的特征在于在11.4、18.4、19.4、19.9、21.5、26.3、30.2和33.1度±0.2度2-θ处包括峰的XRPD图谱。
在本公开的一些实施方案中，式IC的特征在于在11.4、18.4、19.4、19.9、21.5、26.3、30.2和33.1度±0.2度2-θ中的三者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IC的特征在于在11.4、18.4、19.4、19.9、21.5、26.3、30.2和33.1度±0.2度2-θ中的四者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IC的特征在于在11.4、18.4、19.4、19.9、21.5、26.3、30.2和33.1度±0.2度2-θ中的五者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IC的特征在于在11.4、18.4、19.4、19.9、21.5、26.3、30.2和33.1度±0.2度2-θ中的六者或更多者处包括峰的XRPD图谱。在本公开的一些实施方案中，式IC的特征在于在11.4、18.4、19.4、19.9、21.5、26.3、30.2和33.1度±0.2度2-θ中的七者或更多者处包括峰的XRPD图谱。
在一些实施方案中，式IC可通过基本上如图18所示的DSC热谱图来表征。如图18显示，当以10℃/min的速率加热时，式IC产生在190.04℃处的吸热峰，其中峰起始温度为180.70℃，并且熔融焓为19.00J/g。在本公开的一些实施方案中，式IC的特征在于在约190℃处包括吸热峰的DSC热谱图。在本公开的其他实施方案中，式IC的特征在于约19J/g的DSC熔融焓。
在一些实施方案中，式IC的特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图19所示的TGA曲线。如图19所示，在加热至约275℃时，式IC损失其重量约9.3％。
在本公开的一些实施方案中，式IC的特征在于当以10℃/min的速率加热时在11.4、18.4、19.4、19.9、21.5、26.3、30.2和33.1度±0.2度2-θ中的一者或多者处包括峰的XRPD图谱，以及在约190℃处包括吸热峰的DSC热谱图。
药物组合物和施用方法
主题药物组合物通常被配制成提供治疗有效量的作为活性成分的本公开的化合物，或其药学上可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、水合物或衍生物。在期望的情况下，药物组合物含有其药学上可接受的盐和/或配位络合物，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂、载体，包括惰性固体稀释剂和填充剂、稀释剂，包括无菌水溶液和各种有机溶剂、渗透增强剂、增溶剂和佐剂。
主题药物组合物可单独施用或与一种或多种其他药剂组合施用，该一种或多种其他药剂也通常以药物组合物的形式施用。在期望的情况下，可将本发明的一种或多种化合物和其他药剂混合成制备物，或者将两种组分配制成单独的制备物，以单独或同时组合使用。
在一些实施方案中，本发明的药物组合物中提供的一种或多种化合物的浓度小于100％、90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％、0.1％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、0.01％、0.009％、0.008％、0.007％、0.006％、0.005％、0.004％、0.003％、0.002％、0.001％、0.0009％、0.0008％、0.0007％、0.0006％、0.0005％、0.0004％、0.0003％、0.0002％或0.0001％(或由以上任何两个数字限定并包括它们的范围内的数字)w/w、w/v或v/v。
在一些实施方案中，本发明的一种或多种化合物的浓度大于90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、19.75％、19.50％、19.25％、19％、18.75％、18.50％、18.25％、18％、17.75％、17.50％、17.25％、17％、16.75％、16.50％、16.25％、16％、15.75％、15.50％、15.25％、15％、14.75％、14.50％、14.25％、14％、13.75％、13.50％、13.25％、13％、12.75％、12.50％、12.25％、12％、11.75％、11.50％、11.25％、11％、10.75％、10.50％、10.25％、10％、9.75％、9.50％、9.25％、9％、8.75％、8.50％、8.25％、8％、7.75％、7.50％、7.25％、7％、6.75％、6.50％、6.25％、6％、5.75％、5.50％、5.25％、5％、4.75％、4.50％、4.25％、4％、3.75％、3.50％、3.25％、3％、2.75％、2.50％、2.25％、2％、1.75％、1.50％、1.25％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％、0.1％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、0.01％、0.009％、0.008％、0.007％、0.006％、0.005％、0.004％、0.003％、0.002％、0.001％、0.0009％、0.0008％、0.0007％、0.0006％、0.0005％、0.0004％、0.0003％、0.0002％或0.0001％(或由以上任何两个数字限定并包括它们的范围内的数字)w/w、w/v或v/v。
在一些实施方案中，本发明的一种或多种化合物的浓度在约0.0001％至约50％、约0.001％至约40％、约0.01％至约30％、约0.02％至约29％、约0.03％至约28％、约0.04％至约27％、约0.05％至约26％、约0.06％至约25％、约0.07％至约24％、约0.08％至约23％、约0.09％至约22％、约0.1％至约21％、约0.2％至约20％、约0.3％至约19％、约0.4％至约18％、约0.5％至约17％、约0.6％至约16％、约0.7％至约15％、约0.8％至约14％、约0.9％至约12％、约1％至约10％w/w、w/v或v/v的范围内。
在一些实施方案中，本发明的一种或多种化合物的浓度在约0.001％至约10％、约0.01％至约5％、约0.02％至约4.5％、约0.03％至约4％、约0.04％至约3.5％、约0.05％至约3％、约0.06％至约2.5％、约0.07％至约2％、约0.08％至约1.5％、约0.09％至约1％、约0.1％至约0.9％w/w、w/v或v/v的范围内。
在一些实施方案中，本发明的一种或多种化合物的量等于或小于10g、9.5g、9.0g、8.5g、8.0g、7.5g、7.0g、6.5g、6.0g、5.5g、5.0g、4.5g、4.0g、3.5g、3.0g、2.5g、2.0g、1.5g、1.0g、0.95g、0.9g、0.85g、0.8g、0.75g、0.7g、0.65g、0.6g、0.55g、0.5g、0.45g、0.4g、0.35g、0.3g、0.25g、0.2g、0.15g、0.1g、0.09g、0.08g、0.07g、0.06g、0.05g、0.04g、0.03g、0.02g、0.01g、0.009g、0.008g、0.007g、0.006g、0.005g、0.004g、0.003g、0.002g、0.001g、0.0009g、0.0008g、0.0007g、0.0006g、0.0005g、0.0004g、0.0003g、0.0002g或0.0001g(或由以上任何两个数字限定并包括它们的范围内的数字)。
在一些实施方案中，本发明的一种或多种化合物的量多于0.0001g、0.0002g、0.0003g、0.0004g、0.0005g、0.0006g、0.0007g、0.0008g、0.0009g、0.001g、0.0015g、0.002g、0.0025g、0.003g、0.0035g、0.004g、0.0045g、0.005g、0.0055g、0.006g、0.0065g、0.007g、0.0075g、0.008g、0.0085g、0.009g、0.0095g、0.01g、0.015g、0.02g、0.025g、0.03g、0.035g、0.04g、0.045g、0.05g、0.055g、0.06g、0.065g、0.07g、0.075g、0.08g、0.085g、0.09g、0.095g、0.1g、0.15g、0.2g、0.25g、0.3g、0.35g、0.4g、0.45g、0.5g、0.55g、0.6g、0.65g、0.7g、0.75g、0.8g、0.85g、0.9g、0.95g、1g、1.5g、2g、2.5、3g、3.5、4g、4.5g、5g、5.5g、6g、6.5g、7g、7.5g、8g、8.5g、9g、9.5g或10g(或由以上任何两个数字限定并包括它们的范围内的数字)。
在一些实施方案中，本发明的一种或多种化合物的量在0.0001g-10g、0.0005g-9g、0.001g-8g、0.005g-7g、0.01g-6g、0.05g-5g、0.1g-4g、0.5g-4g或1g-3g的范围内。
根据本发明的化合物在宽剂量范围内有效。例如，在成人的治疗中，0.01mg/天至1000mg/天、0.5mg/天至100mg/天、1mg/天至50mg/天和5mg/天至40mg/天的剂量是可使用的剂量的示例。示例性剂量为10mg/天至30mg/天。确切剂量将取决于施用途径、化合物施用的形式、待治疗的受试者、待治疗的受试者的体重以及主治医师的偏好和经验。
本发明的药物组合物通常含有本发明的活性成分(即，本公开的化合物)或其药学上可接受的盐和/或配位络合物，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂、载体，包括但不限于惰性固体稀释剂和填充剂、稀释剂、无菌水溶液和各种有机溶剂、渗透增强剂、增溶剂和佐剂。
下文描述了非限制性示例性药物组合物及其制备方法。
用于口服施用的药物组合物。
在一些实施方案中，本发明提供了一种用于口服施用的含有本发明的化合物和适于口服施用的药物赋形剂的药物组合物。
在一些实施方案中，本发明提供了一种用于口服施用的固体药物组合物，其含有：(i)有效量的本发明的化合物；任选地(ii)有效量的第二药剂；和(iii)适于口服施用的药物赋形剂。在一些实施方案中，该组合物还含有：(iv)有效量的第三药剂。
在一些实施方案中，药物组合物可以是适于口服消耗的液体药物组合物。适于口服施用的本发明的药物组合物可以离散剂型形式呈现，诸如胶囊、扁囊剂或片剂，或液体或气溶胶喷雾剂，其各自含有预定量的活性成分作为粉末或颗粒、溶液、或在水性或非水性液体中的悬浮液、水包油乳液、或油包水液体乳液。此类剂型可通过任何药学方法制备，但所有方法都包括将活性成分与载体缔合的步骤，该载体构成一种或多种必要成分。通常，组合物通过将活性成分与液体载体或细分的固体载体或两者均匀且紧密混合，并且然后在必要时使产品成型为期望的呈现形式来制备。例如，可通过压缩或模制，任选地用一种或多种辅助成分来制备片剂。压缩片剂可通过在合适的机器中压缩自由流动形式诸如粉末或颗粒的活性成分，任选地与赋形剂诸如但不限于粘结剂、润滑剂、惰性稀释剂和/或表面活性剂或分散剂混合来制备。模制片剂可通过在适合的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物来制备。
本发明还涵盖包含活性成分的无水药物组合物和剂型，因为水可能促进一些化合物的降解。例如，在药物领域中，可添加水(例如，5％)作为模拟长期储存的手段，以便确定诸如保质期或制剂随时间的稳定性的特性。本发明的无水药物组合物和剂型可使用无水或低水分含量的成分以及低水分或低湿度条件来制备。如果预期在制造、包装和/或储存期间与水分和/或湿气大量接触，则可将含有乳糖的本发明的药物组合物和剂型制成无水的。可以使得无水药物组合物保持无水性质的方式来制备和储存无水药物组合物。因此，无水组合物可使用已知防止暴露于水的材料进行包装，使得它们可包括在合适的配方试剂盒中。适合包装的示例包括但不限于密封箔、塑料等、单位剂量容器、泡罩包装和条形包装。
根据常规药物配混技术，可将活性成分与药物载体紧密混合。载体可根据对于施用而言期望的制备形式而采用各种形式。在制备用于口服剂型的组合物时，在口服液体制备物(诸如悬浮液、溶液和酏剂)或气雾剂的情况下，可将任何常规药物介质用作载体，诸如水、乙二醇、油、醇、调味剂、防腐剂、着色剂等；或者在口服固体制备物的情况下，可使用载体诸如淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、制粒剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂，在一些实施方案中不使用乳糖。例如，在固体口服制备物的情况下，合适的载体包括粉末、胶囊和片剂。如果期望，片剂可通过标准的水性或非水性技术进行包衣。
适用于药物组合物和剂型的粘结剂包括但不限于玉米淀粉、马铃薯淀粉或其他淀粉、明胶、天然和合成树胶诸如***胶、藻酸钠、藻酸、其他藻酸盐、粉状黄蓍胶、瓜尔胶、纤维素及其衍生物(例如，乙基纤维素、醋酸纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠)、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、预糊化淀粉、羟丙基甲基纤维素、微晶纤维素、以及它们的混合物。
用于本文公开的药物组合物和剂型的合适填充剂的示例包括但不限于滑石、碳酸钙(例如，颗粒或粉末)、微晶纤维素、粉状纤维素、葡萄糖结合剂、高岭土、甘露糖醇、硅酸、山梨糖醇、淀粉、预胶凝化淀粉、以及它们的混合物。
崩解剂可用于本发明的组合物中以提供当暴露于水性环境时崩解的片剂。太多的崩解剂可能产生可能在瓶中崩解的片剂。太少可能不足以发生崩解，并因此可能改变活性成分从剂型中释放的速率和程度。因此，可使用既不太少也不太多而不利地改变活性成分释放的足够量的崩解剂来形成本文公开的化合物的剂型。所用崩解剂的量可基于制剂类型和施用模式而变化并且可容易为本领域的普通技术人员所辨别。在药物组合物中可使用约0.5重量％至约15重量％的崩解剂或约1重量％至约5重量％的崩解剂。可用于形成本发明的药物组合物和剂型的崩解剂包括但不限于琼脂、藻酸、碳酸钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、波拉克林钾(polacrilin potassium)、羧甲淀粉钠、马铃薯或木薯淀粉、其他淀粉、预胶凝化淀粉、其他淀粉、粘土、其他藻类、其他纤维素、树胶或它们的混合物。
可用于形成本发明的药物组合物和剂型的润滑剂包括但不限于硬脂酸钙、硬脂酸镁、矿物油、轻质矿物油、甘油、山梨糖醇、甘露糖醇、聚乙二醇、其他二醇、硬脂酸、月桂基硫酸钠、滑石、氢化植物油(例如，花生油、棉籽油、葵花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、硬脂酸锌、油酸乙酯、月桂酸乙酯、琼脂或它们的混合物。附加的润滑剂包括例如微细硅胶(syloid silica gel)、合成二氧化硅的凝结气溶胶或它们的混合物。任选地，可以小于药物组合物的约1重量％的量添加润滑剂。
当水性悬浮液和/或酏剂期望用于口服施用时，其中的活性成分可与各种甜味剂或调味剂、着色物质或染料以及如果期望，乳化剂和/或悬浮剂与稀释剂诸如水、乙醇、丙二醇、甘油和它们的各种组合一起组合。
片剂可以是未包衣的或者可通过已知技术进行包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收并且由此在较长时段内提供持续作用。例如，可采用延时材料诸如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。用于口服使用的制剂也可以呈现为硬明胶胶囊，其中活性成分与惰性固体稀释剂(例如，碳酸钙、磷酸钙或高岭土)混合，或者为软明胶胶囊，其中活性成分与水或油介质(例如花生油、液体石蜡或橄榄油)混合。
可用于形成本发明的药物组合物和剂型的表面活性剂包括但不限于亲水性表面活性剂、亲脂性表面活性剂、以及它们的混合物。即，可采用亲水性表面活性剂的混合物，可采用亲脂性表面活性剂的混合物，或者可采用至少一种亲水性表面活性剂和至少一种亲脂性表面活性剂的混合物。
合适的亲水性表面活性剂通常可具有至少10的HLB值，而合适的亲脂性表面活性剂通常可具有为或小于约10的HLB值。用于表征非离子两亲性化合物的相对亲水性和疏水性的经验参数是亲水-亲脂平衡(“HLB”值)。HLB值较低的表面活性剂的亲脂性或疏水性更强并且在油中的溶解度更大，而HLB值较高的表面活性剂的亲水性更强并且在水溶液中的溶解度更大。
亲水性表面活性剂通常被认为是HLB值大于约10的那些化合物，以及HLB标度通常不适用的阴离子型、阳离子型或两性离子型化合物。类似地，亲脂性(即，疏水性)表面活性剂是HLB值等于或小于约10的化合物。然而，表面活性剂的HLB值仅为通常用于实现工业、药物和化妆品乳液的配制的粗略指导。
亲水性表面活性剂可以是离子型或非离子型的。合适的离子型表面活性剂包括但不限于烷基铵盐；夫西地酸盐；氨基酸、寡肽和多肽的脂肪酸衍生物；氨基酸、寡肽和多肽的甘油酯衍生物；卵磷脂和氢化卵磷脂；溶血卵磷脂和氢化溶血卵磷脂；磷脂及其衍生物；溶血磷脂及其衍生物；肉碱脂肪酸酯盐；烷基硫酸盐；脂肪酸盐；多库酯钠；酰基乳酸盐；单甘油酯和二甘油酯的单乙酰化酒石酸酯和二乙酰化酒石酸酯；琥珀酰化的单甘油酯和二甘油酯；单甘油酯和二甘油酯的柠檬酸酯；以及它们的混合物。
在前述组中，离子型表面活性剂包括例如：卵磷脂、溶血卵磷脂、磷脂、溶血磷脂以及它们的衍生物；肉碱脂肪酸酯盐；烷基硫酸盐；脂肪酸盐；多库酯钠；酰基乳酸盐；单甘油酯和二甘油酯的单乙酰化酒石酸酯和二乙酰化酒石酸酯；琥珀酰化的单甘油酯和二甘油酯；单甘油酯和二甘油酯的柠檬酸酯；以及它们的混合物。
离子型表面活性剂可以是卵磷脂、溶血卵磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、磷脂酸、磷脂酰丝氨酸、溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰甘油、溶血磷脂酸、溶血磷脂酰丝氨酸、PEG-磷脂酰乙醇胺、PVP-磷脂酰乙醇胺、脂肪酸乳酸酯、硬脂酰-2-乳酸酯、硬脂酰乳酸酯、琥珀酰化单甘油酯、单/二甘油酯的单/二乙酰化酒石酸酯、柠檬酸单/二甘油酯、胆酰肌氨酸、己酸酯、辛酸酯、癸酸酯、月桂酸酯、肉豆蔻酸酯、棕榈酸酯、油酸酯、蓖麻油酸酯、亚油酸酯、亚麻酸酯、硬脂酸酯、十二烷基硫酸酯、四乙基硫酸酯、多库酯、月桂酰肉碱、棕榈酰肉碱、肉豆蔻酰肉碱、以及它们的盐和混合物。
亲水性非离子型表面活性剂可包括但不限于，烷基葡糖苷；烷基麦芽糖苷；烷基硫代葡糖苷；月桂基聚乙二醇甘油酯；聚氧化烯烷基醚，诸如聚乙二醇烷基醚；聚氧化烯烷基酚，诸如聚乙二醇烷基酚；聚氧化烯烷基酚脂肪酸酯，诸如聚乙二醇脂肪酸单酯和聚乙二醇脂肪酸二酯；聚乙二醇甘油脂肪酸酯；聚甘油脂肪酸酯；聚氧化烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯，诸如聚乙二醇脱水山梨糖醇脂肪酸酯；多元醇与由甘油酯、植物油、氢化植物油、脂肪酸和甾醇组成的组中的至少一个成员的亲水性酯交换产物；聚氧乙烯甾醇、其衍生物和类似物；聚氧乙烯化维生素及其衍生物；聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物；以及它们的混合物；聚乙二醇脱水山梨糖醇脂肪酸酯和多元醇与由甘油三酯、植物油和氢化植物油组成的组中的至少一个成员的亲水性酯交换产物。多元醇可以是甘油、乙二醇、聚乙二醇、山梨糖醇、丙二醇、季戊四醇或糖。
其他亲水性非离子型表面活性剂包括但不限于PEG-10月桂酸酯、PEG-12月桂酸酯、PEG-20月桂酸酯、PEG-32月桂酸酯、PEG-32二月桂酸酯、PEG-12油酸酯、PEG-15油酸酯、PEG-20油酸酯、PEG-20二油酸酯、PEG-32油酸酯、PEG-200油酸酯、PEG-400油酸酯、PEG-15硬脂酸酯、PEG-32二硬脂酸酯、PEG-40硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、PEG-20二月桂酸酯、PEG-25三油酸甘油酯、PEG-32二油酸酯、PEG-20月桂酸甘油酯、PEG-30月桂酸甘油酯、PEG-20硬脂酸甘油酯、PEG-20油酸甘油酯、PEG-30油酸甘油酯、PEG-30月桂酸甘油酯、PEG-40月桂酸甘油酯、PEG-40棕榈仁油、PEG-50氢化蓖麻油、PEG-40蓖麻油、PEG-35蓖麻油、PEG-60蓖麻油、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油、PEG-60玉米油、PEG-6癸酸/辛酸甘油酯、PEG-8癸酸/辛酸甘油酯、聚甘油-10月桂酸酯、PEG-30胆固醇、PEG-25植物甾醇、PEG-30大豆甾醇、PEG-20三油酸酯、PEG-40脱水山梨糖醇油酸酯、PEG-80脱水山梨糖醇月桂酸酯、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、POE-9月桂基醚、POE-23月桂基醚、POE-10油基醚、POE-20油基醚、POE-20硬脂基醚、生育酚PEG-100琥珀酸酯、PEG-24胆固醇、聚甘油-10油酸酯、吐温40、吐温60、蔗糖单硬脂酸酯、蔗糖单月桂酸酯、蔗糖单棕榈酸酯、PEG 10-100壬基酚系列、PEG 15-100辛基酚系列和泊洛沙姆。
仅以举例的方式，合适的亲脂性表面活性剂包括：脂肪醇；甘油脂肪酸酯；乙酰化甘油脂肪酸酯；低级醇脂肪酸酯；丙二醇脂肪酸酯；脱水山梨糖醇脂肪酸酯；聚乙二醇脱水山梨糖醇脂肪酸酯；甾醇和甾醇衍生物；聚氧乙烯化甾醇和甾醇衍生物；聚乙二醇烷基醚；糖酯；糖醚；单酸甘油酯和二酸甘油酯的乳酸衍生物；多元醇与由甘油酯、植物油、氢化植物油、脂肪酸和甾醇组成的组中的至少一个成员的疏水性酯交换产物；油溶性维生素/维生素衍生物；以及它们的混合物。在该组中，优选的亲脂性表面活性剂包括甘油脂肪酸酯、丙二醇脂肪酸酯、以及它们的混合物，或者是多元醇与由植物油、氢化植物油和甘油三酯组成的组中的至少一个成员的疏水性酯交换产物。
在一个实施方案中，组合物可包含增溶剂以确保本发明化合物的良好增溶和/或溶解并使本发明化合物的沉淀最小化。这对于非口服使用的组合物(例如注射用组合物)来说尤其重要。还可添加增溶剂以增加亲水性药物和/或其他组分诸如表面活性剂的溶解度或使组合物保持作为稳定或均匀的溶液或分散体。
合适的增溶剂的示例包括但不限于以下：醇和多元醇(诸如乙醇、异丙醇、丁醇、苯甲醇、乙二醇、丙二醇、丁二醇及其异构体、甘油、季戊四醇、山梨糖醇、甘露糖醇、乙二醇单乙基醚、二甲基异山梨醇、聚乙二醇、聚丙二醇、聚乙烯醇)、羟丙基甲基纤维素和其他纤维素衍生物、环糊精和环糊精衍生物；平均分子量为约200至约6000的聚乙二醇醚，诸如四氢糠醇PEG醚(糖原质)或甲氧基PEG；酰胺和其他含氮化合物，诸如2-吡咯烷酮、2-哌啶酮、ε-己内酰胺、N-烷基吡咯烷酮、N-羟基烷基吡咯烷酮、N-烷基哌啶酮、N-烷基己内酰胺、二甲基乙酰胺和聚乙烯吡咯烷酮；酯，诸如丙酸乙酯、柠檬酸三丁酯、柠檬酸乙酰基三乙酯、柠檬酸乙酰基三丁酯、柠檬酸三乙酯、油酸乙酯、辛酸乙酯、丁酸乙酯、甘油三乙酸酯、丙二醇单乙酸酯、丙二醇二乙酸酯、ε-己内酯及其异构体、δ-戊内酯及其异构体、β-丁内酯及其异构体；以及本领域已知的其他增溶剂，诸如二甲基乙酰胺、二甲基异山梨醇、N-甲基吡咯烷酮、辛酸单甘油酯、二乙二醇单***和水。
也可使用增溶剂的混合物。示例包括但不限于甘油三乙酸酯、柠檬酸三乙酯、油酸乙酯、辛酸乙酯、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、N-羟乙基吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素、羟丙基环糊精、乙醇、聚乙二醇200-100、糖原质、乙二醇单乙基醚、丙二醇和二甲基异山梨醇。特别优选的增溶剂包括山梨糖醇、甘油、甘油三乙酸酯、乙醇、PEG-400、糖原质和丙二醇。
可包含的增溶剂的量没有特别限制。给定增溶剂的量可限于由本领域的技术人员可容易地确定的生物可接受的量。在一些情况下，可能有利的是，包含远远超过生物可接受量的增溶剂的量，例如以使药物的浓度最大化，其中在向受试者提供组合物之前使用常规技术(诸如蒸馏或蒸发)去除过量的增溶剂。因此，如果存在，基于药物和其他赋形剂的组合重量计，增溶剂的重量比可以是按重量计10％、25％、50％、100％、或至多约200％>。如果期望，也可使用非常少量的增溶剂，诸如5％、2％、1％或甚至更少。通常，增溶剂可以按重量计约1％>至约100％、更通常地约5％>至约25％>的量存在。
该组合物还可包含一种或多种药学上可接受的添加剂和赋形剂。此类添加剂和赋形剂包括但不限于防粘剂、消泡剂、缓冲剂、聚合物、抗氧化剂、防腐剂、螯合剂、粘度调节剂、张力调节剂、风味剂、着色剂、增味剂、遮光剂、悬浮剂、粘结剂、填充剂、增塑剂、润滑剂、以及它们的混合物。
此外，可将酸或碱掺入组合物中以促进加工、增强稳定性或实现其他目的。药学上可接受的碱的示例包括氨基酸、氨基酸酯、氢氧化铵、氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸氢钠、氢氧化铝、碳酸钙、氢氧化镁、硅酸镁铝、合成硅酸铝、合成水滑石、氢氧化铝镁、二异丙基乙胺、乙醇胺、乙二胺、三乙醇胺、三乙胺、三异丙醇胺、三甲胺、三(羟甲基)氨基甲烷(TRIS)等。还合适的碱是药学上可接受的酸诸如乙酸、丙烯酸、己二酸、藻酸、链烷磺酸、氨基酸、抗坏血酸、苯甲酸、硼酸、丁酸、碳酸、柠檬酸、脂肪酸、甲酸、富马酸、葡糖酸、氢醌磺酸、异抗坏血酸、乳酸、马来酸、草酸、对溴苯磺酸、丙酸、对甲苯磺酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、单宁酸、酒石酸、巯基乙酸、甲苯磺酸、尿酸等的盐。也可使用多元酸的盐，诸如磷酸钠、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠。当碱是盐时，阳离子可以是任何方便且药学上可接受的阳离子，诸如铵、碱金属、碱土金属等。示例可包括但不限于钠、钾、锂、镁、钙和铵。
适合的酸是药学上可接受的有机酸或无机酸。适合的无机酸的示例包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、硼酸、磷酸等。合适的有机酸的示例包括乙酸、丙烯酸、己二酸、藻酸、链烷磺酸、氨基酸、抗坏血酸、苯甲酸、硼酸、丁酸、碳酸、柠檬酸、脂肪酸、甲酸、富马酸、葡糖酸、氢醌磺酸、异抗坏血酸、乳酸、马来酸、甲磺酸、草酸、对溴苯磺酸、丙酸、对甲苯磺酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、单宁酸、酒石酸、巯基乙酸、甲苯磺酸、尿酸等。
在一些实施方案中，药物组合物包含式IA的化合物、微晶纤维素、交联聚维酮、月桂基硫酸钠和硬脂酸镁。
在一些实施方案中，药物组合物包含式IA的化合物、甘露糖醇、微晶纤维素、交联聚维酮、月桂基硫酸钠和硬脂酸镁。
在一些实施方案中，药物组合物包含式IA-形式I的化合物、甘露糖醇、微晶纤维素、交联聚维酮、月桂基硫酸钠和硬脂酸镁。
在一些实施方案中，药物组合物包含式IA-形式II的化合物、甘露糖醇、微晶纤维素、交联聚维酮、月桂基硫酸钠和硬脂酸镁。
在一些实施方案中，药物组合物包含式IA-形式IIa的化合物、甘露糖醇、微晶纤维素、交联聚维酮、月桂基硫酸钠和硬脂酸镁。
在一些实施方案中，药物组合物包含式IA-形式III的化合物、甘露糖醇、微晶纤维素、交联聚维酮、月桂基硫酸钠和硬脂酸镁。
在一些实施方案中，药物组合物包含式IA-形式IV的化合物、甘露糖醇、微晶纤维素、交联聚维酮、月桂基硫酸钠和硬脂酸镁。
在一些实施方案中，药物组合物包含式IB的化合物、甘露糖醇、微晶纤维素、交联聚维酮、月桂基硫酸钠和硬脂酸镁。
注射用药物组合物。
在一些实施方案中，本发明提供了一种含有本发明的化合物和适于注射的药物赋形剂的注射用药物组合物。组合物中药剂的组分和量如本文所述。
可掺入以用于通过注射施用的本发明的新型组合物的形式包括具有芝麻油、玉米油、棉籽油或花生油以及酏剂、甘露糖醇、右旋糖或无菌水溶液和类似的药物媒剂的水或油悬浮液或乳液。
盐水中的水溶液也通常用于注射。还可采用乙醇、甘油、丙二醇、液体聚乙二醇等(及其适合的混合物)、环糊精衍生物和植物油。可例如通过使用包衣诸如卵磷脂以在分散体的情况下保持所需的粒度并且通过使用表面活性剂来保持适当的流动性。对微生物的作用的预防可通过各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等来提供。
通过将所需量的本发明的化合物根据需要与如上文枚举的各种其他成分一起掺入适当溶剂中，接着过滤灭菌，来制备无菌注射溶液。通常，通过将各种灭菌的活性成分掺入到无菌媒剂中来制备分散体，该无菌媒剂含有基本分散介质和来自上文枚举的那些的所需其他成分。在无菌粉末用于制备无菌注射溶液的情况下，某些期望的制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，其产生活性成分的粉末加上来自其先前无菌过滤的溶液的任何附加的期望成分。
用于局部(例如，经皮)递送的药物组合物。
在一些实施方案中，本发明提供了一种用于经皮递送的含有本发明的化合物和适于经皮递送的药物赋形剂的药物组合物。
本发明的组合物可被配制成适于局部或局部施用的固体、半固体或液体形式的制备物，诸如凝胶、水溶性凝胶剂、霜剂、洗剂、悬浮液、泡沫、粉末、浆液、膏剂、溶液、油、糊剂、栓剂、喷剂、乳液、盐水溶液、基于二甲基亚砜(DMSO)的溶液。通常，具有较高密度的载体能够提供长效暴露于活性成分的区域。相比之下，溶液制剂可使活性成分更直接地暴露于所选择的区域。
药物组合物还可包含合适的固体或凝胶相载体或赋形剂，它们是允许增加治疗分子跨皮肤角质层渗透性屏障的渗透性或有助于治疗分子跨皮肤角质层渗透性屏障递送的化合物。存在对局部制剂领域受过训练的技术人员已知的许多这些渗透增强分子。
此类载体和赋形剂的示例包括但不限于湿润剂(例如，脲)、二醇(例如，丙二醇)、醇(例如，乙醇)、脂肪酸(例如，油酸)、表面活性剂(例如，肉豆蔻酸异丙酯和月桂基硫酸钠)、吡咯烷酮、单月桂酸甘油酯、亚砜、萜烯(例如，薄荷醇)、胺、酰胺、烷烃、烷醇、水、碳酸钙、磷酸钙、各种糖、淀粉、纤维素衍生物、明胶和聚合物诸如聚乙二醇。
用于本发明的方法中的另一种示例性制剂采用经皮递送装置(“贴剂”)。此类经皮贴剂可用于提供受控量的本发明化合物的连续或不连续输注，无论有或没有另一种药剂。
用于递送药剂的经皮贴剂的构造和使用在本领域中是众所周知的。参见例如美国专利5,023,252、4,992,445和5,001,139。此类贴剂可被构造成用于连续、脉冲或按需递送药剂。
用于吸入的药物组合物。
用于吸入或吹入的组合物包括在药学上可接受的水性或有机溶剂或它们的混合物中的溶液和悬浮液，以及粉末。液体或固体组合物可含有如上所述的适合的药学上可接受的赋形剂。优选地，组合物通过口或鼻呼吸途径施用以产生局部或全身作用。在优选地药学上可接受的溶剂中的组合物可通过使用惰性气体来雾化。可直接从雾化装置吸入雾化溶液，或者雾化装置可附接到面罩塞条或间歇正压呼吸机。可从以适当方式递送制剂的装置优选地口服或经鼻施用溶液、悬浮液或粉末组合物。
其他药物组合物。
药物组合物也可由本文所述的组合物和一种或多种适于舌下、颊、直肠、骨内、眼内、鼻内、硬膜外或椎管内施用的药学上可接受的赋形剂制备。此类药物组合物的制备物在本领域中是众所周知的。参见，例如，Anderson,Philip O.、Knoben,James E.、Troutman,William G编辑，Handbook of Clinical Drug Data，第十版，McGraw-Hill,2002；Pratt和Taylor编辑，Principles of Drug Action，第三版，Churchill Livingston,New York,1990；Katzung编辑，Basic and Clinical Pharmacology，第九版，McGraw Hill,20037ybg；Goodman和Gilman编辑，The Pharmacological Basis of Therapeutics，第十版，McGrawHill,2001；Remingtons Pharmaceutical Sciences，第20版，Lippincott Williams&Wilkins.,2000；Martindale,The Extra Pharmacopoeia，第三十二版(ThePharmaceutical Press,London,1999)；所有这些参考文献全文以引用方式并入本文。
本发明的化合物或药物组合物的施用可通过能够将化合物递送至作用部位的任何方法来实现。这些方法包括口服途径、十二指肠内途径、肠胃外注射(包括静脉内、动脉内、皮下、肌内、血管内、腹膜内或输注)、局部(例如经皮应用)、直肠施用、通过导管或支架局部递送或通过吸入。化合物还可脂肪内或鞘内施用。
所施用的化合物的量将取决于所治疗的受试者、障碍或病症的严重程度、施用速率、化合物的处置和处方医师的判断。然而，有效剂量在约0.001mg/kg体重/天至约100mg/kg体重/天、优选地约1mg/kg/天至约35mg/kg/天的范围内，以单剂量或分剂量给药。对于70kg的人，这将相当于约0.05g/天至7g/天、优选地约0.05g/天至约2.5g/天。在一些情况下，低于上述范围的下限的剂量水平可能远远足够了，而在其他情况下，可使用仍更大的剂量而不引起任何有害副作用，例如通过将此类较大剂量分成几个小剂量以在整天中施用。
在一些实施方案中，本发明的化合物以单剂量施用。
通常，此类施用将通过注射例如静脉内注射施用，以便快速引入药剂。然而，可适当地使用其他途径。单剂量的本发明的化合物也可用于治疗急性病症。
在一些实施方案中，本发明的化合物以多剂量施用。给药可为每天约一次、两次、三次、四次、五次、六次或多于六次。给药可为约每月一次、每两周一次、每周一次或每隔一天一次。在另一个实施方案中，本发明的化合物和另一种药剂一起施用约每天一次至约每天6次。在另一个实施方案中，本发明的化合物和药剂的施用持续少于约7天。在另一个实施方案中，施用持续多于约6天、10天、14天、28天、两个月、六个月或一年。在一些情况下，根据需要实现并保持连续给药。
本发明的化合物的施用根据需要持续进行。在一些实施方案中，本发明的化合物的施用持续多于1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、14天或28天。在一些实施方案中，本发明的化合物的施用持续少于28天、14天、7天、6天、5天、4天、3天、2天或1天。在一些实施方案中，本发明的化合物在持续的基础上长期施用，例如用于治疗的慢性作用。
有效量的本发明的化合物可通过具有类似效用的药剂的可接受施用模式中的任一种，包括直肠、颊、鼻内和经皮途径，通过动脉内注射、静脉内、腹膜内、胃肠外、肌内、皮下、口服、局部或作为吸入剂，以单剂量或多剂量施用。
本发明的组合物也可通过例如浸渍或包衣装置(诸如，支架)或动脉***式圆柱形聚合物来递送。此类施用方法可例如有助于预防或改善手术诸如球囊血管成形术后的再狭窄。不受理论的约束，本发明的化合物可减缓或抑制动脉壁中导致再狭窄的平滑肌细胞的迁移和增殖。本发明的化合物可例如通过从支架的支柱、从支架移植物、从移植物、或从支架的覆盖物或鞘的局部递送来施用。在一些实施方案中，将本发明的化合物与基质混合。此类基质可为聚合物基质并且可用于将化合物结合到支架。适用于此类用途的聚合物基质包括例如基于内酯的聚酯或共聚酯，诸如聚交酯、聚己内酯乙交酯、聚原酸酯、聚酐、聚氨基酸、多糖、聚磷腈、聚(醚-酯)共聚物(例如PEO-PLLA)；聚二甲基硅氧烷、聚(乙烯-乙酸乙烯酯)、丙烯酸酯基聚合物或共聚物(例如聚甲基丙烯酸羟乙酯、聚乙烯吡咯烷酮)、氟化聚合物诸如聚四氟乙烯和纤维素酯。合适的基质可为非降解的或可随时间降解，从而释放一种或多种化合物。本发明的化合物可通过各种方法诸如浸涂/旋涂、喷涂、浸涂和/或刷涂应用于支架的表面。可将化合物应用于溶剂中，并且可允许溶剂蒸发，从而在支架上形成化合物层。另选地，可将化合物定位于支架或移植物的主体中，例如微通道或微孔中。当被植入时，化合物从支架的主体扩散出来以与动脉壁接触。此类支架可以通过将制造成含有此类微孔或微通道的支架浸入本发明的化合物于适合溶剂中的溶液中，然后使溶剂蒸发来制备。支架的表面上的过量的药物可通过附加的短暂溶剂清洗来去除。在其他实施方案中，本发明的化合物可共价连接到支架或移植物。可使用共价接头，该共价接头在体内降解，从而释放本发明的化合物。任何生物不稳定键都可用于此类目的，诸如酯、酰胺或酸酐键。另外，本发明的化合物可由血管成形术期间使用的球囊进行血管内施用。也可通过本发明制剂的心包或外膜应用进行化合物的血管外施用，以减少再狭窄。
例如，在以下参考文献中公开了可如所描述的那样使用的各种支架装置，所有这些文献据此以引用方式并入：美国专利5451233；美国专利5040548；美国专利5061273；美国专利5496346；美国专利5292331；美国专利5674278；美国专利3657744；美国专利4739762；美国专利5195984；美国专利5292331；美国专利5674278；美国专利5879382；美国专利6344053。
本发明的化合物可按剂量施用。本领域已知，由于受试者间化合物药代动力学的可变性，所以给药方案的个体化对于最佳疗法来说是必要的。根据本公开，本发明的化合物的剂量可通过常规实验来确定。
当本发明的化合物在包含一种或多种药剂的组合物中施用，并且该药剂具有比本发明的化合物更短的半衰期时，可相应地调整该药剂和本发明的化合物的单位剂型。
主题药物组合物可为例如适于口服施用的形式如片剂、胶囊、丸剂、粉末、缓释制剂、溶液、悬浮液，适于肠胃外注射的形式如无菌溶液、悬浮液或乳液，适于局部施用的形式如膏剂或霜剂，或适于直肠施用的形式如栓剂。药物组合物可呈适于单次施用精确剂量的单位剂型。药物组合物将包含常规药物载体或赋形剂和作为活性成分的本发明的化合物。此外，药物组合物可包含其他药剂(medicinal agent或pharmaceutical agent)、载体、佐剂等。
示例性肠胃外施用形式包含活性化合物于无菌水溶液例如丙二醇水溶液或右旋糖水溶液中的溶液或悬浮液。如果期望，此类剂型可被适当地缓冲。
使用方法
该方法通常包括向受试者施用治疗有效量的本发明的化合物。主题化合物组合的治疗有效量可根据预期应用(体外或体内)或所治疗的受试者和疾病病症而变化，例如受试者的体重和年龄、疾病病症的严重程度、施用方式等，其可容易地由本领域普通技术人员确定。该术语也适用于将在靶细胞中诱导特定反应(例如，靶蛋白的增殖减少或活性下调)的剂量。特定剂量将根据所选择的特定化合物、待遵循的给药方案、是否与其他化合物组合施用、施用定时、施用其的组织以及其中携带的物理递送***而变化。
如本文所用，术语“IC50”是指抑制剂抑制生物或生物化学功能的半最大抑制浓度。该定量度量指示抑制一半的给定生物过程(或过程的组成部分，即酶、细胞、细胞受体或微生物)需要多少特定抑制剂。换句话讲，它是物质的半最大(50％)抑制浓度(IC)(50％IC或IC50)。EC50是指在体内获得最大效果的50％>所需的血浆浓度。
在一些实施方案中，本发明的方法利用如在体外测定中确定的IC50值为约或小于预定值的PRMT5抑制剂。在一些实施方案中，PRMT5抑制剂抑制PRMT5，其IC50值为约1nM或更小、2nM或更小、5nM或更小、7nM或更小、10nM或更小、20nM或更小、30nM或更小、40nM或更小、50nM或更小、60nM或更小、70nM或更小、80nM或更小、90nM或更小、100nM或更小、120nM或更小、140nM或更小、150nM或更小、160nM或更小、170nM或更小、180nM或更小、190nM或更小、200nM或更小、225nM或更小、250nM或更小、275nM或更小、300nM或更小、325nM或更小、350nM或更小、375nM或更小、400nM或更小、425nM或更小、450nM或更小、475nM或更小、500nM或更小、550nM或更小、600nM或更小、650nM或更小、700nM或更小、750nM或更小、800nM或更小、850nM或更小、900nM或更小、950nM或更小、1μΜ或更小、1.1μΜ或更小、1.2μΜ或更小、1.3μΜ或更小、1.4μΜ或更小、1.5μΜ或更小、1.6μΜ或更小、1.7μΜ或更小、1.8μΜ或更小、1.9μΜ或更小、2μΜ或更小、5μΜ或更小、10μΜ或更小、15μΜ或更小、20μΜ或更小、25μΜ或更小、30μΜ或更小、40μΜ或更小、50μΜ、60μΜ、70μΜ、80μΜ、90μΜ、100μΜ、200μΜ、300μΜ、400μΜ、或500μΜ或更小g(或由以上任何两个数字限定并包括它们的范围内的数字)。
在一些实施方案中，PRMT5抑制剂选择性抑制PRMT5，其IC50值比其对一种、两种或三种其他PRMT的IC50值低至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、100或1000倍(或由以上任何两个数字限定并包括它们的范围内的数字)。
在一些实施方案中，PRMT5抑制剂选择性地抑制PRMT5，其IC50值小于约1nM、2nM、5nM、7nM、10nM、20nM、30nM、40nM、50nM、60nM、70nM、80nM、90nM、100nM、120nM、140nM、150nM、160nM、170nM、180nM、190nM、200nM、225nM、250nM、275nM、300nM、325nM、350nM、375nM、400nM、425nM、450nM、475nM、500nM、550nM、600nM、650nM、700nM、750nM、800nM、850nM、900nM、950nM、1μΜ、1.1μΜ、1.2μΜ、1.3μΜ、1.4μΜ、1.5μΜ、1.6μΜ、1.7μΜ、1.8μΜ、1.9μΜ、2μΜ、5μΜ、10μΜ、15μΜ、20μΜ、25μΜ、30μΜ、40μΜ、50μΜ、60μΜ、70μΜ、80μΜ、90μΜ、100μΜ、200μΜ、300μΜ、400μΜ或500μΜ(或由以上任何两个数字限定并包括它们的范围内的数字)并且所述IC50比其对一种、两种或三种其他PRMT的IC50值低至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、100或1000倍(或由以上任何两个数字限定并包括它们的范围内的数字)。
本发明的方法可用于治疗与PRMT5相关的疾病病症。由PRMT5的异常活性或表达水平直接或间接导致的任何疾病病症可以是预期的疾病病症。
已报告了与PRMT5相关的不同疾病病症。PRMT5与例如多种人类癌症以及许多血红蛋白病有关。
此类病症的非限制性示例包括但不限于棘皮瘤、腺泡细胞癌、听神经瘤、肢端黑色素瘤、肢端汗腺瘤、急性嗜酸性粒细胞白血病、急性成淋巴细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性成巨核细胞性白血病、急性单核细胞性白血病、急性成髓细胞白血病伴成熟、急性髓系树突状细胞白血病、急性髓系白血病、急性骨髓性白血病、急性早幼粒细胞白血病、成釉细胞瘤、腺癌、腺样囊性癌、腺瘤、牙源性腺样瘤、肾上腺皮质癌、成人T细胞性白血病、侵袭性NK细胞白血病、AIDS相关癌症、AIDS相关淋巴瘤、腺泡状软组织肉瘤、成釉细胞纤维瘤、***癌、间变性大细胞淋巴瘤、间变性甲状腺癌、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、血管肌脂瘤、血管肉瘤、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型性畸胎样/横纹肌样肿瘤、基底细胞癌、基底细胞样癌、B细胞白血病、B细胞淋巴瘤、Bellini导管癌、胆道癌、膀胱癌、胚细胞瘤、骨癌、骨肿瘤、脑干胶质瘤、脑肿瘤、乳腺癌、布伦纳瘤、支气管肿瘤、细支气管肺泡癌、棕色瘤、伯基特淋巴瘤、原发部位不明的癌症、类癌瘤、瘤、原位癌、***癌、原发部位不明癌、癌肉瘤、卡斯特莱曼病、中枢神经***胚胎肿瘤、小脑星形细胞瘤、大脑星形细胞瘤、子***、胆管癌、软骨瘤、软骨肉瘤、脊索瘤、绒毛膜癌、脉络丛***状瘤、慢性淋巴细胞性白血病、慢性单核细胞性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性骨髓增生性障碍、慢性中性粒细胞性白血病、透明细胞瘤、结肠癌、结肠直肠癌、颅咽管瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、德戈斯病、隆凸性皮肤纤维肉瘤、皮样囊肿、促纤维增生性小圆细胞瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、胚胎发育不良性神经上皮肿瘤、胚胎性癌、内胚层窦瘤、子宫内膜癌、子宫内膜子宫癌、内膜样瘤、与肠病相关的T细胞淋巴瘤、成室管膜细胞瘤、室管膜瘤、表皮样癌、上皮样肉瘤、红白血病、食管癌、成感觉神经细胞瘤、尤文氏家族肿瘤、尤文氏家族肉瘤、尤文氏肉瘤、颅外生殖细胞瘤、性腺外生殖细胞肿瘤、肝外胆管癌、乳腺外佩吉特病、输卵管癌、胎中胎、纤维瘤、纤维肉瘤、滤泡性淋巴瘤、滤泡性甲状腺癌、胆囊癌、胆囊癌、神经节神经胶质瘤、神经节瘤、胃癌、胃淋巴瘤、胃肠癌、胃肠道类癌瘤、胃肠道间质瘤、胃肠道间质瘤、生殖细胞瘤、胚组织瘤、妊娠性绒毛膜癌、妊娠性滋养层细胞瘤、骨巨细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤、神经胶质瘤、大脑神经胶质瘤病、血管球瘤、胰高血糖素瘤、性腺胚细胞瘤、粒层细胞瘤、毛细胞性白血病、头颈癌、头颈癌、心脏癌、血红蛋白病(诸如β-地中海贫血和镰形细胞病(SCD))、成血管细胞瘤、血管外皮细胞瘤、血管肉瘤、血液***恶性肿瘤、肝细胞癌、肝脾T细胞淋巴瘤、遗传性乳腺-卵巢癌综合征、霍奇金淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤、下咽癌、下丘脑胶质瘤、炎性乳腺癌、眼内黑素瘤、胰岛细胞癌、胰岛细胞瘤、幼年型粒-单核细胞白血病、卡波西肉瘤、卡波西氏肉瘤、肾癌、肝门胆管癌、库肯勃瘤、喉癌、喉癌、恶性雀斑样痣黑素瘤、白血病、唇及口腔癌、脂肉瘤、肺癌、黄体瘤、***瘤、***肉瘤、淋巴上皮瘤、淋巴系白血病、淋巴瘤、巨球蛋白血症、恶性纤维组织细胞瘤、恶性纤维组织细胞瘤、骨恶性纤维组织细胞瘤、恶性胶质瘤、恶性间皮瘤、恶性外周神经鞘瘤、恶性横纹肌样瘤、恶性蝾螈瘤、MALT淋巴瘤、外套细胞淋巴瘤、肥大细胞白血病、肥大细胞增多症、纵膈生殖细胞瘤、纵膈肿瘤、甲状腺髓样癌、成神经管细胞瘤、成神经管细胞瘤、髓上皮瘤、黑素瘤、黑素瘤、脑膜瘤、麦克尔细胞癌、间皮瘤、间皮瘤、原发灶不明的颈部转移性鳞癌、转移性膀胱上皮癌、苗勒氏混合瘤、单核细胞白血病、口腔癌、粘液性瘤、多发性内分泌肿瘤综合征、多发性骨髓瘤、多发性骨髓瘤、蕈样肉芽肿病、蕈样肉芽肿病、骨髓增生异常疾病、骨髓增生异常综合征、髓系白血病、髓系肉瘤、骨髓增生性疾病、粘液瘤、鼻腔癌、鼻咽癌、鼻咽癌、赘生瘤、神经细胞瘤、成神经细胞瘤、成神经细胞瘤、神经纤维瘤、神经瘤、结节性黑素瘤、非霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、非黑素瘤皮肤癌、非小细胞肺癌、眼肿瘤、少突星形细胞瘤、少突神经胶质瘤、嗜酸细胞瘤、视神经鞘脑膜瘤、口腔癌、口腔癌、口咽癌、骨肉瘤、骨肉瘤、卵巢癌、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞瘤、卵巢低度潜在恶性肿瘤、***佩吉特病、肺上沟瘤、胰腺癌、胰腺癌、***状甲状腺癌、***状瘤病、神经节细胞瘤、鼻窦癌、甲状旁腺癌、***癌、血管周围上皮样细胞瘤、鼻咽癌、嗜铬细胞瘤、中分化松果体实质肿瘤、成松果体细胞瘤、垂体细胞瘤、垂体腺瘤、垂体肿瘤、浆细胞瘤、胸膜肺母细胞瘤、多胚瘤、前驱T-淋巴母细胞淋巴瘤、原发性中枢神经***淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、原发性肝细胞癌、原发性肝癌、原发性腹膜癌、原始神经外胚层瘤、***癌、腹膜假性粘液瘤、直肠癌、肾细胞癌、涉及染色体15上的NUT基因的呼吸道癌、成视网膜细胞瘤、横纹肌瘤、横纹肌肉瘤、里希特转化、骶尾部畸胎瘤、唾液腺癌、肉瘤、雪旺氏细胞瘤、皮脂腺癌、继发性瘤、***瘤、浆液瘤、塞-莱二氏细胞瘤、性索-间质肿瘤、塞泽里综合征、印戒细胞癌、皮肤癌、蓝色小圆形细胞瘤、小细胞癌、小细胞肺癌、小细胞淋巴瘤、小肠癌、软组织肉瘤、生长抑素瘤、煤烟疣、脊髓瘤、脊髓肿瘤、脾边缘区淋巴瘤、鳞状细胞癌、胃癌、浅表扩展性黑素瘤、幕上原始神经外胚层肿瘤、表面上皮-间质瘤、滑膜肉瘤、T细胞急性成淋巴细胞性白血病、T细胞大颗粒淋巴细胞白血病、T细胞白血病、T细胞淋巴瘤、T细胞幼淋巴细胞性白血病、畸胎瘤、末期淋巴癌、睾丸癌、泡膜细胞瘤、喉癌、胸腺癌、胸腺瘤、甲状腺癌、肾盂和输尿管的移行细胞癌、移行细胞癌、脐尿管癌、尿道癌、泌尿生殖***肿瘤、子宫肉瘤、葡萄膜黑素瘤、***癌、凡-莫二氏综合征、疣状癌、视路胶质瘤、外阴癌、华氏巨球蛋白血症、沃辛瘤、维尔姆斯肿瘤、或它们的任何组合。
在一些实施方案中，所述方法用于治疗选自由以下项组成的组的疾病：肿瘤血管生成、慢性炎性疾病(诸如类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、炎性肠病)、皮肤病(诸如牛皮癣、湿疹和硬皮病)、糖尿病、糖尿病性视网膜病、早产儿视网膜病、年龄相关黄斑变性、血管瘤、胶质瘤、黑素瘤、卡波西氏肉瘤和卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、***癌、结肠癌和表皮样癌。
在其他实施方案中，所述方法用于治疗选自以下的疾病：乳腺癌、肺癌、胰腺癌、***癌、结肠癌、卵巢癌、子宫癌或***。
在其他实施方案中，所述方法用于治疗选自以下的疾病：白血病(诸如急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓系白血病、毛细胞性白血病)、骨髓增生异常、骨髓增生性障碍、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、肥大细胞增多症、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、多发性骨髓瘤(MM)、骨髓增生异常综合征(MDS)、表皮样癌或血红蛋白病(诸如β-地中海贫血和镰形细胞病(SCD))。
在其他实施方案中，所述方法用于治疗选自以下的疾病：CDKN2A缺失的癌症；9P缺失的癌症；MTAP缺失的癌症；剪接体突变癌、胶质母细胞瘤、NSCLC、头颈癌、膀胱癌或肝细胞癌。
在其他实施方案中，所述方法用于治疗选自以下的疾病：乳腺癌、肺癌、胰腺癌、***癌、结肠癌、卵巢癌、子宫癌、***、白血病(诸如急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓系白血病、毛细胞性白血病)、骨髓增生异常、骨髓增生性障碍、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、肥大细胞增多症、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、多发性骨髓瘤(MM)、骨髓增生异常综合征(MDS)、表皮样癌、血红蛋白病(诸如β-地中海贫血和镰形细胞病(SCD))、CDKN2A缺失的癌症；9P缺失的癌症；MTAP缺失的癌症；剪接体突变癌、胶质母细胞瘤、NSCLC、头颈癌、膀胱癌、肝细胞癌、腺样囊性癌(ACC)、原发性中枢神经***淋巴瘤、输卵管癌或非霍奇金淋巴瘤。
在其他实施方案中，所述方法用于治疗选自以下的疾病：腺样囊性癌(ACC)、原发性中枢神经***淋巴瘤、输卵管癌或非霍奇金淋巴瘤。
本公开的化合物以及包含它们的药物组合物可单独或与医学疗法组合施用以治疗所描述疾病中的任一种。医学疗法包括例如手术和放射疗法(例如，伽马辐射、中子束放射疗法、电子束放射疗法、质子疗法、近距离放射疗法、全身放射性同位素)。
在其他方面，本公开的化合物以及包含它们的药物组合物可单独或与一种或多种其他药剂组合施用以治疗所描述疾病中的任一种。
在其他方法中，本公开的化合物以及包含它们的药物组合物可与核受体药剂的激动剂组合施用。
在其他方法中，本公开的化合物以及包含它们的药物组合物可与核受体药剂的拮抗剂组合施用。
在其他方法中，本公开的化合物以及包含它们的药物组合物可与抗增殖剂组合施用。
在其他方面，本公开的化合物以及包含它们的药物组合物可单独或与一种或多种其他化疗剂组合施用以治疗所描述疾病中的任一种。其他化学治疗剂的示例包括阿巴瑞克(abarelix)、阿地介白素、阿仑单抗(alemtuzumab)、阿利维甲酸(alitretinoin)、別嘌呤醇、全反式视黄酸、六甲蜜胺、阿那曲唑(anastrozole)、三氧化二砷、天冬酰胺酶、阿扎胞苷、苯达莫司汀(bendamustine)、贝伐单抗(bevacizumab)、蓓萨罗丁(bexarotene)、博莱霉素、硼替佐必(bortezombi)、硼替佐米(bortezomib)、静脉内白消安、口服白消安、卡普睾酮(calusterone)、卡培他滨(capecitabine)、卡铂、卡莫司汀(carmustine)、西妥昔单抗(cetuximab)、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、氯法拉滨(clofarabine)、环磷酰胺、阿糖胞苷、达卡巴嗪、更生霉素、达肝素钠(dalteparin sodium)、达沙替尼(dasatinib)、柔红霉素、地西他滨(decitabine)、地尼介白素(denileukin)、地尼介白素融合毒素(denileukindiftitox)、右雷佐生、多烯紫杉醇(docetaxel)、多柔比星、丙酸屈他雄酮(dromostanolonepropionate)、艾库组单抗(eculizumab)、表柔比星(epirubicin)、埃罗替尼(erlotinib)、雌莫司汀(estramustine)、磷酸依托泊苷(etoposide phosphate)、依托泊苷(etoposide)、依西美坦(exemestane)、枸橼酸芬太尼、非格司亭、氟尿苷、氟达拉滨(fludarabine)、氟尿嘧啶、氟维司群(fulvestrant)、吉非替尼(gefitinib)、吉西他滨、奥吉妥珠单抗奥佐米星(gemtuzumab ozogamicin)、醋酸戈舍瑞林、乙酸组胺瑞林(histrelin acetate)、替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)、伊达比星(idarubicin)、异环磷酰胺、甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate)、干扰素α2a、伊立替康(irinotecan)、二甲苯磺酸拉帕替尼(lapatinib ditosylate)、来那度胺(lenalidomide)、來曲唑(letrozole)、甲酰四氢叶酸(leucovorin)、醋酸亮丙瑞林、左咪唑、洛莫司汀(lomustine)、氮芥(meclorethamine)、乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)、美法仑、巯嘌呤、甲氨蝶呤、甲氧沙林(methoxsalen)、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、苯丙酸诺龙(nandrolone phenpropionate)、奈拉滨(nelarabine)、诺莫单抗(nofetumomab)、奥沙利铂(oxaliplatin)、紫杉醇、帕米膦酸盐(pamidronate)、帕尼单抗(panitumumab)、帕比司他(panobinostat)、培加帕酶(pegaspargase)、培非格司亭(pegfilgrastim)、培美曲塞二钠(pemetrexed disodium)、喷司他丁(pentostatin)、哌泊溴烷(pipobroman)、普卡霉素、丙卡巴肼、奎纳克林(quinacrine)、拉布立酶(rasburicase)、利妥昔单抗(rituximab)、鲁索替尼(ruxolitinib)、索拉非尼(sorafenib)、链脲霉素、舒尼替尼(sunitinib)、马来酸舒尼替尼、他莫昔芬(tamoxifen)、替莫唑胺(temozolomide)、替尼泊苷、睪内酯(testolactone)、沙利度胺(thalidomide)、硫鸟嘌呤、噻替哌、拓扑替康(topotecan)、托瑞米芬(toremifene)、托西莫单抗(tositumomab)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、维甲酸(tretinoin)、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)、戊柔比星(valrubicin)、长春碱、长春新碱、长春瑞滨、伏立诺他(vorinostat)、唑来膦酸盐(zoledronate)、以及它们的任何组合。
在其他方面，其他药剂是靶向表观遗传调节剂的治疗剂。表观遗传调节剂的示例包括例如溴结构域抑制剂、组蛋白赖氨酸甲基转移酶、组蛋白精氨酸甲基转移酶、组蛋白脱甲基酶、组蛋白脱乙酰基酶、组蛋白乙酰基酶和DNA甲基转移酶、以及它们的任何组合。组蛋白脱乙酰基酶抑制剂在某些方面是优选的并且包括例如伏立诺他。
在其中待治疗的疾病是癌症或另一种增殖性疾病的其他方法中，本公开的化合物以及包含它们的药物组合物可与靶向疗法药剂组合施用。靶向疗法包括例如JAK激酶抑制剂(例如鲁索替尼)、PI3激酶抑制剂(包括PI3K-δ选择性和广谱PI3K抑制剂)、MEK抑制剂、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(例如，CDK4/6抑制剂)、BRAF抑制剂、mTOR抑制剂、蛋白酶体抑制剂(例如硼替佐米、卡非佐米(Carfilzomib))、HDAC抑制剂(例如，帕比司他、伏立诺他)、DNA甲基转移酶抑制剂、***、溴和额外末端家族成员、BTK抑制剂(例如依鲁替尼(ibrutinib)、阿卡替尼(acalabrutinib))、BCL2抑制剂(例如维奈托克(venetoclax))、MCL1抑制剂、PARP抑制剂、FLT3抑制剂和LSD1抑制剂、以及它们的任何组合。
在其中待治疗的疾病是癌症或另一种增殖性疾病的其他方法中，本公开的化合物以及包含它们的药物组合物可与免疫检查点抑制剂组合施用。免疫检查点抑制剂包括例如PD-1的抑制剂，例如抗PD-1单克隆抗体。抗PD-1单克隆抗体的示例包括例如纳武单抗(nivolumab)、派姆单抗(pembrolizumab)(也称为MK-3475)、匹立珠单抗(pidilizumab)、SHR-1210、PDR001和AMP-224、以及它们的组合。在一些方面，抗PD1抗体是纳武单抗。在一些方面，抗PD1抗体是派姆单抗。在一些方面，免疫检查点抑制剂是PD-L1的抑制剂，例如，抗PD-L1单克隆抗体。在一些方面，抗PD-L1单克隆抗体是BMS-935559、MEDI4736、MPDL3280A(也称为RG7446)或MSB0010718C、或它们的任何组合。在一些方面，抗PD-L1单克隆抗体是MPDL3280A或MEDI4736。在其他方面，免疫检查点抑制剂是CTLA-4的抑制剂，例如，抗CTLA-4抗体。在一些方面，抗CTLA-4抗体是伊匹单抗(ipilimumab)。
在其中待治疗的疾病是癌症或另一种增殖性疾病的其他方法中，本公开的化合物以及包含它们的药物组合物可与烷基化剂(例如，环磷酰胺(CY)、美法仑(MEL)和苯达莫司汀)、蛋白酶体抑制剂(例如，卡非佐米)、皮质类固醇剂(例如，***(DEX))、或免疫调节剂(例如，来那度胺(LEN)或泊马度胺(pomalidomide)(POM))、或它们的任何组合组合施用。
在一些实施方案中，待治疗的疾病是自身免疫性病症或炎性病症。在这些方面，本公开的化合物以及包含它们的药物组合物可与皮质类固醇剂组合施用，该皮质类固醇剂诸如例如曲安西龙、***、氟轻松(fluocinolone)、可的松、***龙或氟甲松龙(flumetholone)、或它们的任何组合。
在其中待治疗的疾病是自身免疫性病症或炎性病症的其他方法中，本公开的化合物以及包含它们的药物组合物可与免疫抑制剂组合施用，该免疫抑制剂诸如例如丙酮化氟轻松(fluocinolone acetonide)(RETISERTTM)、利美索龙(rimexolone)(AL-2178、VEXOLTM、ALCOTM)或环孢素(RESTASISTM)、或它们的任何组合。
在一些实施方案中，待治疗的疾病是β-地中海贫血或镰形细胞病。在这些方面，本公开的化合物以及包含它们的药物组合物可与一种或多种药剂诸如例如HYDREATM(羟基脲)组合施用。
在一些方面，本发明涉及制备本文所述的药学上可接受的盐的方法。在一些实施方案中，制备药学上可接受的盐的方法是在以下实施例中描述的那些。
下面提供的实施例和制备物进一步说明和例示了本发明的化合物和制备此类化合物的方法。应当理解，本发明的范围不以任何方式受以下实施例和制备物的范围的限制。
实验程序
实施例1.(2S,3S,4R,5R)-2-((R)-6-氯异色满-1-基)-5-(4-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氢呋喃-3,4-二醇(式I)的合成
Figure BDA0003613934800000591
步骤1. 2-(2-溴-5-氯-苯基)乙醇(22a)的合成
向2-(2-溴5-氯-苯基)乙酸(20.0g，80.16mmol)于THF(200mL)中的溶液中添加在THF中的硼烷(240.49mL，240.49mmol)，并将混合物在40℃下搅拌8小时。将混合物在0℃下用MeOH淬灭，浓缩，并用EA(400mL×2)萃取。将合并的有机层干燥，浓缩，并通过用CH3CN/H2O(中性)从5/95至95/5洗脱的combi flash纯化，得到22b(18.1g，76.854mmol，95.9％产率)，为无色油状物。LCMS[M-18]：217.0/219.0。
步骤2. 2-(2-溴-5-氯-苯基)乙氧基-叔丁基-二甲基-硅烷(22b)的合成
向22a(18.1g，76.85mmol)于DMF(200mL)中的溶液中添加咪唑(7.85g，115.28mmol)和TBDMSCl(13.9g，92.23mmol)，并将混合物在25℃下搅拌8小时。添加EA(800mL)，并将混合物用盐水(400mL×2)洗涤。将有机层浓缩并通过快速柱(PE)纯化，得到22b(26.7g，76.34mmol，99.3％产率)，为无色油状物。
步骤3.[2-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]-4-氯-苯基]-[(3aR,4R,6S,6aS)-4-(4-氯吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2,2-二甲基-3a,4,6,6a-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-6-基]甲酮(22c)的合成
在-78℃下向22b(8.91g，25.6mmol)于无水THF(50mL)中的溶液中添加n-BuLi(12.8mL，20.48mmol)，并将混合物在氮气下搅拌10分钟。添加1Ad(4.0g，10.24mmol)于无水THF(20mL)中的溶液，并将混合物在-78℃下搅拌5分钟。TLC(PE:EA＝8:1)显示反应完成。将反应物倒入稀HCl(pH6；在淬灭过程期间pH保持<8)中。将混合物用EA(200ml×2)萃取，将合并的有机层干燥，浓缩并通过用CH3CN/H2O(中性)从5/95至95/5洗脱的combi-flash纯化，得到22c(5.1g，8.60mmol，84％产率)，为黄色固体。
步骤4.(R)-[(3aR,4R,6R,6aR)-4-(4-氯吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2,2-二甲基-3a,4,6,6a-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-6-基]-[2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-5-氯-苯基]甲醇(22d)的合成
在-78℃下向22c(5.0g，8.44mmol)于THF(30mL)中的溶液中添加DIBAL-H(16.88mL，25.31mmol)，并将混合物在-78℃下搅拌30分钟。TLC(PE/EA＝8/1)显示SM Rf＝0.5，已被完全消耗，其中主产物Rf＝0.4。将反应物倒入稀HCl(pH6，400mL，在淬灭过程期间保持pH<8)中。将混合物用EA(300ml×2)萃取并将合并的有机层干燥并浓缩，得到粗品22d(5.0g)，为黄色固体。
步骤5. 2-[5-氯-2-[(R)-羟基-[(3aR,4R,6R,6aR)-4-(4-氯吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2,2-二甲基-3a,4,6,6a-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-6-基]甲基]苯基]乙醇(22e)的合成
向22d(3.0g，5.17mmol)于THF(50mL)中的溶液中添加四丁基氟化铵(5.17mL，5.17mmol)。将混合物溶液在25℃下搅拌40分钟。将反应混合物倒入NH4Cl水溶液中并用EA(100mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥并将溶剂在减压下浓缩。将粗产物通过快速柱(PE:EA＝15:1至3:1)纯化，得到22e(2g，4.08mmol，79％产率)，为白色固体。LCMS[M+H]：480.1。
步骤6. 4-氯-7-[(3aR,4R,6R,6aR)-2,2-二甲基-6-[(1R)-6-氯异色满-1-基]-3a,4,6,6a-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基]吡咯并[2,3-d]嘧啶(22f)的合成
向22e(2.0g，4.16mmol)于THF(100mL)中的溶液中添加三丁基膦(2.1mL，8.33mmol)、(NE)-N-异丙氧羰基亚氨基氨基甲酸异丙基酯(1.72mL，8.74mmol)和吡啶(0.34mL，4.16mmol)，并将反应混合物在25℃下搅拌16小时。
TLC(PE/EA＝3/1，Rf＝0.4)显示起始材料被消耗。在真空中去除溶剂，并将粗产物通过硅胶柱色谱法使用石油醚/EtOAc(10:1-5:1)作为洗脱剂纯化，得到22f(1.7g，3.68mmol，88％产率)，为黄色油状物。LCMS[M+H]：462.1。
步骤7. 4-甲基-7-[(3aR,4R,6R,6aR)-2,2-二甲基-6-[(1R)-6-氯异色满-1-基]-3a,4,6,6a-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基]吡咯并[2,3-d]嘧啶(22g)的合成
在5℃下于氮气下将甲基溴化镁(3.68mL，11.04mmol)滴加到乙酰丙酮铁(0.13g，0.37mmol)和22f(1.7g，3.68mmol)于THF(100mL)中的溶液中。将反应混合物升温至室温并搅拌1小时。TLC(EA:PE＝1:1，Rf＝0.3)显示反应完成。滴加饱和NH4Cl以淬灭反应，将其用EA(200mL×2)萃取，然后经Na2SO4干燥并浓缩。将残余物通过快速柱(PE:EA＝10:1至1:1)纯化，得到22g(900mg，1.93mmol，52.6％产率)，为白色固体。
步骤8.(2R,3R,4S,5S)-2-(4-甲基吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-5-[(1R)-6-氯异色满-1-基]四氢呋喃-3,4-二醇(式I)的合成
向HCl(6.0mL，12mmol)于甲醇(10mL)中的溶液中添加22g(900mg，2.04mmol)并将反应混合物在40℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩，并将残余物与EA(50ml)一起搅拌并过滤。将固体通过制备型HPLC用CH3CN/H2O(0.1％NH4OH)从5/95至95/5洗脱纯化。将产物级分用EA(100mL×2)萃取并将萃取物浓缩以产生式I(550mg，1.34mmol，66％产率)，为白色固体。LCMS[M+H]：402.3。1H NMR(400M Hz,DMSO-d6):δ8.67(s,1H),7.76(d,J＝4.0Hz,1H),7.22-7.31(m,3H),6.81(d,J＝3.6Hz,1H),6.31(d,J＝7.6Hz,1H),5.26(d,J＝7.2Hz,1H),5.13(d,J＝4.0Hz,1H),4.90(d,J＝3.6Hz,1H),4.48-4.54(m,1H),4.42-4.43(m,1H),4.23-4.27(m,1H),3.84-3.86(m,1H),3.66-3.72(m,1H),2.91-2.99(m,1H),2.70-2.74(m,1H),2.67(s,3H)。1H NMR(400M Hz,DMSO-d6+D2O):δ8.86(s,1H),7.77(d,J＝4Hz,1H),7.22-7.31(m,3H),6.82(d,J＝3.6Hz,1H),6.31(d,J＝7.6Hz,1H),4.90(d,J＝3.6Hz,1H),4.49-4.53(m,1H),4.42-4.43(m,1H),4.24-4.28(m,1H),3.83-3.85(m,1H),3.66-3.72(m,1H),2.91-2.99(m,1H),2.70-2.75(m,1H),2.69(s,3H)。
实施例2.(2S,3S,4R,5R)-2-((R)-6-氯异色满-1-基)-5-(4-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氢呋喃-3,4-二醇(式I)的合成
将5.84g式IA添加到250mL圆底烧瓶中。添加60mL去离子水并搅拌5分钟，得到悬浮液(pH1.6)。缓慢添加2.5mL浓NH4OH(37％)并搅拌，得到浆液(pH10)。搅拌3小时，pH10。过滤批料，首先用200mL水洗涤，然后用200mL庚烷洗涤。将产物在真空下(温度40℃)在烘箱中的过滤器上干燥，得到5.20g(98.0％)的式I。HPLC纯度为99.7％。式I通过XRPD结晶。
在一些实施方案中，式I游离碱可具有以下XRPD峰(参见图21)：
Figure BDA0003613934800000631
实施例3。
固体可通过用磷酸、硫酸、盐酸、抗坏血酸、L-酒石酸、乙烷-1,2-二磺酸和1-羟基-2-萘甲酸以及草酸处理式I游离碱来获得。
实施例4.(2S,3S,4R,5R)-2-((R)-6-氯异色满-1-基)-5-(4-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氢呋喃-3,4-二醇的盐酸盐(式IA)的合成
Figure BDA0003613934800000641
向60mg式I游离碱(0.150mmol)中添加1.5mL二氯甲烷(DCM)和2.0mL乙腈并将混合物搅拌，得到澄清溶液。添加盐酸(1M异丙醇溶液；0.165mL，0.165mmol，1.10当量)，并将所得混合物在室温下搅拌40分钟。在40-45℃下去除DCM，得到浆液。将浆液在65℃下搅拌60分钟，然后冷却至室温并搅拌2小时。将混合物过滤并用甲基叔丁基醚(MTBE)洗涤。将滤饼在45℃-48℃下真空干燥过夜，得到48.0mg盐酸盐(式IA)。
盐酸盐的XRPD在图1中示出。
盐酸盐的DSC在图2中示出。
盐酸盐的TGA在图3中示出
通过该程序形成的结晶盐酸盐是式IA-形式I。
实施例5.(2S,3S,4R,5R)-2-((R)-6-氯异色满-1-基)-5-(4-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氢呋喃-3,4-二醇的盐酸盐(式IA)的合成
Figure BDA0003613934800000642
向100.3mg式I(0.25mmol，1.0当量)中添加4.0mL丙酮并搅拌5分钟。添加265μL在IPA中的1.0M HCl(0.263mmol，1.06当量)。将所得混合物搅拌以得到稀浆液，然后连续搅拌过夜。将混合物过滤，得到固体，将其在40℃下真空干燥过夜，得到98.8mg(产率90.0％)的盐(式IA)。通过HPLC测得盐的纯度为99.2％。通过XPRD确认盐的结晶度。盐和游离碱的HPLC峰面积比较显示游离碱和盐酸的比率为约1:1。
实施例6.(2S,3S,4R,5R)-2-((R)-6-氯异色满-1-基)-5-(4-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氢呋喃-3,4-二醇的盐酸盐(式IA)的合成
Figure BDA0003613934800000651
向干净且干燥的RBF中装入3476.2g粗品PRT1063(基于先前步骤的理论产率，含有1829.0g的PRT1063)和MeOH(18.3L)。在将浓HCl(1720mL，5.0当量)装入反应器中后，将所得溶液在35℃-45℃下搅拌约8小时。将MTBE(55.0L)添加到反应中，并将所得浆液在室温下搅拌约2小时。将浆液冷却至0℃-5℃，并搅拌约1小时。过滤浆液，并将滤饼转移回RBF。装入MTBE(9.1L)，并将浆液在室温下搅拌0.5-1小时。过滤浆液，并将滤饼用MTBE(3.7L)洗涤。然后将滤饼通过真空在NLT漏斗上干燥2小时。
式IA的重结晶：向干净且干燥的RBF中装入式IA(1500g)和MeOH(15L)。将混合物加热至50℃-60℃并搅拌以形成澄清溶液。将溶液冷却至20℃-30℃，并通过烧结玻璃漏斗过滤。将滤液转移到干净且干燥的反应器中，并记录反应器中的滤液体积。将漏斗用MeOH(3.0L)洗涤。该洗涤MeOH用于在添加到反应器之前冲洗滤液接收烧瓶。将蒸馏设备装配到反应器上。将反应器中的过滤溶液加热至回流并收集馏出物。在保持反应器中的蒸馏的同时，将IPA(15L)以保持溶液的初始记录体积的速度逐渐添加到反应器中。添加IPA后，将庚烷(22.5l)逐渐添加到反应器中，同时保持蒸馏，直到内部体积达到记录的体积。停止加热，并将浆液冷却至15℃-25℃。将浆液在15℃-25℃下搅拌约2小时。过滤该批料，并将滤饼用庚烷(4.5L)洗涤。通过将空气拉过滤饼，将产物在NLT过滤器上干燥2小时。将滤饼转移到托盘中，并在50℃下在烘箱中真空干燥至恒定重量。
实施例7。
已如下所述鉴定式IA的多晶型形式。这些多晶型物-式IA-形式I、式IA-形式II、式IA-形式IIa、式IA-形式III、式IA-形式IV-可使用下述方法制备。
盐酸盐在21±1℃和50±1℃下的溶解度
添加3mL测试溶剂至4mL小瓶中。添加式IA直到在21±1℃下获得混浊溶液。将约30mg另外的式IA添加到混浊溶液中。将混合物在21±1℃下搅拌一个周末，在此期间，温度由
Figure BDA0003613934800000661
ETS-D5温度控制器和
Figure BDA0003613934800000662
RCT基本安全控件控制。将混合物使用注射器过滤器(PTFE，0.22μL，13mm，Agela Technologies Inc.)过滤。将饱和溶液转移到HPLC小瓶中，用甲醇稀释，并通过HPLC分析。
添加2mL测试溶剂至4mL小瓶中。添加式IA直到在50±1℃下获得混浊溶液。将约30mg另外的式IA添加到混浊溶液中。将混合物在50±1℃下搅拌24小时，在此期间，温度由
Figure BDA0003613934800000663
ETS-D5温度控制器和
Figure BDA0003613934800000664
RCT基本安全控件控制。将混合物使用注射器过滤器(PTFE，0.22μL，13mm，Agela Technologies Inc.)过滤。将饱和溶液转移到HPLC小瓶中，用甲醇稀释，并通过HPLC分析。结果在表8中示出。
表8
Figure BDA0003613934800000671
在25±1℃和50±1℃下的相平衡
相平衡研究旨在提供有关主要晶体形式的信息。式IA在25±1℃和50±1℃下在溶剂中达到平衡。温度由
Figure BDA0003613934800000672
ETSD5温度控制器和
Figure BDA0003613934800000673
RCT基本安全控件控制。
向约3mL溶剂中添加式IA晶形I，直到获得混浊溶液，然后将约20mg附加的式IA晶形I添加到混浊溶液中。将混合物在25±1℃和50±1℃下搅拌2.0天。将固体过滤并通过XRPD分析。
在这些实验中，多晶型形式II(式IA-晶形II)是在25℃下从乙醇中的相平衡获得的，并且多晶型形式III(式IA-晶形III)是在21℃下从水中获得的(表2)。在50±1℃下的相平衡(表3)导致从水中得到多晶型形式III，并且从其他溶剂中得到晶形I。结果在表9中示出。
表9
Figure BDA0003613934800000674
蒸发研究
进行蒸发研究以在不受控制的蒸发期间鉴定主要的晶体形式。未进一步研究不导致任何微粒固体(即，透明薄膜和油)的实验。XRPD用于研究在20℃和50℃下蒸发样品的结晶形式的固态形态。在这些研究中，蒸发由式IA-形式I制备的饱和溶液。结果在表10中示出。
表10
Figure BDA0003613934800000681
反溶剂添加实验
通过将式IA-形式I添加到溶剂中来制备式IA的饱和溶液或几乎饱和溶液。添加反溶剂以诱导沉淀。使用己烷、庚烷、甲基叔丁基醚(MTBE)、甲苯、乙酸乙酯、丙酮、甲基乙基酮(MEK)、异丙醇(IPA)、四氢呋喃(THF)、乙腈和乙酸异丙酯(IPAc)作为反溶剂。未进一步研究在添加反溶剂时不产生任何微粒固体的实验。这些结果在下表11中呈现。
表11
Figure BDA0003613934800000682
Figure BDA0003613934800000691
反向添加实验
在溶剂中由式IA-形式I制备式IA的饱和或几乎饱和的溶液。然后将该溶液添加到较大体积的可混溶的反溶剂中。使用己烷、庚烷、MTBE、甲苯、乙酸乙酯、丙酮、MEK、IPA、THF、乙腈和IPAc作为反溶剂。未进一步研究在添加到反溶剂中时不产生任何微粒固体的实验。这些结果在下表12中呈现。
表12
Figure BDA0003613934800000692
Figure BDA0003613934800000702
饱和溶液的冷却
在室温下制备式IA-形式I在甲醇或乙醇中的饱和或几乎饱和的溶液，并淬灭至约-40℃。在35℃下制备在水中的饱和溶液，并将其淬灭至约5℃。两个实验旨在诱导较高能量形式的沉淀。这些实验的结果在下表13中示出。
表13
溶剂(mL) 所获得的多晶型形式
MeOH 不适用
EtOH II
水 III
竞争性浆液实验
为了评估式IA固体形式的转化，如下进行竞争性浆液实验。将式IA添加到溶剂混合物中，直到形成饱和溶液。然后，除了各8mg的式IA-形式IIa、式IA-形式III和式IA-形式IV之外，另外添加的8mg的式IA-形式I。将浆液搅拌并在各个时间点通过XRPD分析，包括过夜和24小时。结果在表14中示出。
表14
Figure BDA0003613934800000701
代表性合成程序
式IA-形式II
向约3mL在乙醇中制备的药物物质中添加约50mg的药物物质，随后在25℃±1℃下搅拌2天，将其过滤，在通风橱中风干24小时，并且通过XRPD分析为式IA-形式II。参见图4、图5
将3.0mL在乙醇中的饱和溶液淬灭冷却至-20℃，并在该温度下保持30分钟，得到浆液，将其过滤并风干。将该固体通过XRPD分析并指定为式IA-形式II。
式IA-形式IIa
式IA-形式IIa通过在48-50℃下真空干燥式IA-形式II 24小时而形成。
式IA-形式III
向约3mL在水中制备的药物物质中添加约50mg的药物物质，随后在25℃±1℃下搅拌2天，将其过滤，在通风橱中风干24小时，并且通过XRPD分析为式IA-形式III。参见图8、图10。
将3.0mL在水中的饱和溶液淬灭冷却至2℃-3℃，并在该温度下保持1.0小时，得到浆液，将其过滤并风干。将该固体通过XRPD分析并指定为式IA-形式III。参见图9。
式IA-形式IV
向2.5mL乙酸乙酯中添加0.6mL在MeOH(50mg/mL)中制备的药物物质的溶液，随后搅拌约5分钟，其中将固体过滤并通过XRPD分析为式IA-形式IV。参见图12和图13。
向0.6mL在MeOH(50mg/mL)中制备的药物物质的溶液中添加1.5mL乙酸乙酯，随后搅拌约5分钟，其中将固体过滤并通过XRPD分析为式IA-形式IV。
实施例8.(2S,3S,4R,5R)-2-((R)-6-氯异色满-1-基)-5-(4-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氢呋喃-3,4-二醇的磷酸盐(式IB)的合成
向50mg式I游离碱(0.125mmol)中添加1.5mL异丙醇(IPA)和1.0mL二氯甲烷(DCM)并将混合物搅拌，得到澄清溶液。添加磷酸(在IPA中的1M溶液；0.15mL，0.15mmol，1.20当量)，并将所得混合物在室温下搅拌40分钟。在40℃下去除DCM，得到浆液。将浆液在65℃下搅拌60分钟，然后冷却至室温并搅拌2小时。将混合物过滤并用甲基叔丁基醚(MTBE)洗涤。将滤饼在45℃-48℃下真空干燥过夜，得到磷酸盐(式IB)。
该磷酸盐的XRPD在图14B中示出。
该磷酸盐的DSC在图15B中示出。
该磷酸盐的TGA在图16B中示出。
实施例9.(2S,3S,4R,5R)-2-((R)-6-氯异色满-1-基)-5-(4-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氢呋喃-3,4-二醇的磷酸盐(式IB)的合成
向100.6mg式I游离碱(0.25mmol，1.0当量)中添加4.0mL EtOH。将所得混合物搅拌5分钟。添加263μL在IPA中的1.0M H3PO4(0.263mmol，1.06当量)。将所得混合物持续搅拌过夜，然后过滤，得到固体。将滤饼在40℃下真空干燥过夜，得到86.7mg(69.3％)的盐。通过HPLC测得盐的纯度为98.5％。盐和游离碱的HPLC峰面积比较表明游离碱和磷酸的比率为约2:1。
该磷酸盐的XRPD在图14A中示出。
该磷酸盐的DSC在图15A中示出。
该磷酸盐的TGA在图16A中示出。
实施例10.(2S,3S,4R,5R)-2-((R)-6-氯异色满-1-基)-5-(4-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氢呋喃-3,4-二醇的酒石酸盐(式IC)的合成
向40.5mgL＝L-酒石酸(0.263mmol，1.05当量)中添加100.2mg(0.25mmol，1.0当量)的式I。添加4.0mL 2-丁酮并将所得混合物连续搅拌过夜。将混合物过滤，得到固体，将其用2.5mL MTBE洗涤。将滤饼在40℃下真空干燥过夜，得到68.8mg(产率50.0％)的酒石酸盐。
式I和酒石酸之间的盐的化学计量比通过其1H NMR光谱(图20)确定为2:1(在DMSO-d6中400MHz)。
该酒石酸盐的XRPD在图17中示出。
该酒石酸盐的DSC在图18中示出。
该酒石酸盐的TGA在图19中示出。
酒石酸盐的1H NMR光谱在图20中示出。
仪器方法
X射线粉末衍射(XRPD)
XRPD图谱也可用Rigaku MiniFlex X射线粉末衍射仪(XRPD)仪器收集。X射线辐射来自带有Kβ滤光片的
Figure BDA0003613934800000731
的铜(Cu)。X射线功率：30KV，15mA。
热重分析(TGA)和差示扫描量热法(DSC)
TGA可通过TA仪器使用TGA Q500以每分钟20℃的扫描速率收集。
也可使用TA仪器差示扫描量热仪(Q20型，带自动进样器)，使用10℃/min的扫描速率和50mL/min的氮气流来获得DSC。
生物化学测定方案
使化合物增溶并在100％DMSO中稀释3倍。将这些稀释的化合物在测定缓冲液(20mM Tris-HCl，pH 8.0，50mM NaCl，0.002％吐温20，1mM TCEP，1％DMSO)中进一步稀释用于10-剂量IC50模式，浓度比期望测定浓度高10倍。在测定缓冲液中以30μL的总体积进行标准反应，用300nM基于组蛋白H4的AcH4-23(Anaspec：AS-65002)作为底物。向其中添加被稀释以提供2.5nM的最终测定浓度的PRMT5/MEP50复合物，并且将化合物在37℃下预温育20分钟。通过添加S-[3H-甲基]-腺苷-L-甲硫氨酸(PerkinElmer：NET155001MC)至1μM的最终浓度来引发反应。在37℃下温育30分钟后，通过添加25μL的8M盐酸胍来终止反应。在测定缓冲液中制备0.3mg/mL的链霉亲和素YSI SPA珠粒(Perkinelmer：RPNQ0012)。向每个反应中添加150μL SPA珠粒悬浮液，并在室温下振荡温育30分钟。在闪烁计数器上读数之前，将板以100×g离心30秒。IC50值通过使用GraphPad Prism软件用Hill斜率将数据拟合到标准4个参数来确定。参见下表15(PRMT5 IC50)。
细胞测定方案
用于检测对称性二甲基精氨酸(sDMA)标记的细胞处理和蛋白质印迹
化合物滴定和细胞培养：将化合物溶解于DMSO中以制备10mM储备液，并进一步进行3倍系列稀释以制备最高1mM的工作储备液。将Granta-519细胞维持在补充有10％v/vFBS(GE Healthcare，目录号：SH30910.03)的PRMI 1640(Corning Cellgro，目录号：10-040-CV)中，并且将U-87 MG细胞维持在具有10％FBS和2mM谷氨酰胺(Corning Cellgro，目录号：25005CV)的DMEM(Corning Cellgro，目录号：10-013-CV)中。
使用蛋白质印迹分析确定Granta-519和U-87 MG细胞中的酶抑制IC50值。实验前一天，将Granta-519细胞传代至0.5×106个细胞/mL的密度。将U-87 MG细胞用胰蛋白酶消化，并将4×105个细胞接种到6孔板中并使其生长过夜。第二天，将Granta-519细胞以1,500rpm离心4分钟，以0.5×106细胞/ml重悬于新鲜培养基中，并将3mL培养物(1.5×106细胞)接种到6孔板中。将八点、3倍系列稀释的化合物工作储备液添加到细胞(3mL，1:1,000稀释，DMSO浓度为0.1％；最终最高浓度为1uM)并温育3天。将用DMSO温育的细胞用作媒剂对照。
3天后收获细胞，重悬于15mL PBS中，在4％SDS中裂解，并通过匀化器柱(OmegaBiotek，目录号：HCR003)匀化。通过BCA测定(ThermoFisher Scientific，目录号：23225)确定总蛋白质浓度。将裂解物与5x Laemmli缓冲液混合并煮沸5分钟。在SDS-PAGE凝胶(Bio-Rad，目录号：4568083、4568043)上分离四十m克总蛋白，转移到PVDF膜上，在室温(RT)下用含0.1％v/v吐温20的TBS(TBST)中的5％干乳(Bio-Rad，目录号：1706404)封闭1小时，并与在TBST中的5％干乳中的一抗(sDMA：细胞信号传导，目录号：13222，1:3,000；β-肌动蛋白：sigma，目录号：1:5,000)在4℃下温育过夜。第二天，将膜用TBST洗涤5×5分钟，并与HRP缀合的二抗(GE Healthcare；目录号：NA934-1ML、NA931-1ML；1:5,000)在室温下温育2小时，随后用TBST洗涤5×5分钟，并用ECL底物(Bio-Rad，目录号：1705061、1705062)温育。用Fluochem HD2成像仪(Proteinsimple)捕获化学发光信号。将SmD3me2s带通过ImageJ定量。将信号相对于β-肌动蛋白和DMSO对照归一化。使用Graphpad Prism计算IC50值([抑制剂]对归一化响应-可变斜率)。参见下表15(sDMA IC50)。
确定Granta-519和U-87 MG细胞中的IC50的细胞增殖测定
实验前一天，将Granta-519细胞传代至0.5×106个细胞/ml的密度。将U-87 MG细胞用胰蛋白酶消化，并将2,000个细胞接种到96孔板中并使其生长过夜。在实验当天(第0天)，将Granta-519细胞以1,500rpm离心4分钟，重悬于新鲜培养基中至0.5×106个细胞/ml，并将190mL细胞添加到96孔板中。对于U-87 MG细胞，去除旧培养基并用190uL新鲜培养基替换。首先将化合物工作储备液在96孔板中用新鲜培养基以1:50稀释，并将10μL稀释的药物添加到含有细胞的96孔板中并温育3天。DMSO用作媒剂对照。
第3天，将50uL Granta-519细胞转移到新的96孔板中，并且添加140uL新鲜培养基。对于U-87 MG细胞，去除旧培养基并用190uL新鲜培养基替换。将化合物工作储备液用培养基以1:50新鲜稀释，并将10μL稀释的药物添加细胞中并再生长3天。在第6天重复相同的过程。使细胞再生长4天。
在第10天，将100mL Granta-519细胞转移到新的96孔板中，并添加10μL CellCounting Kit-8(CCK-8，Jojindo，CK04-13)溶液。对于U-87 MG细胞，去除旧培养基并用100mL新鲜培养基替换，并添加10mL CCK-8溶液。将板在CO2培养箱中温育2小时(Granta-519细胞)或30分钟(U-87 MG细胞)，并用微板读数器(iMark微板读数器，Bio-Rad)测量OD450值。计算相对于DMSO媒剂对照的活细胞百分比，并且绘制在Graphpad Prism中([抑制剂]对归一化响应-可变斜率)，以确定第10天的增殖IC50值。参见下表15(增殖IC50)。
表15.U-87 MG细胞系[Granta-519细胞系]中的生物化学和细胞效力
Figure BDA0003613934800000761
在一些实施方案中，本公开涉及以下方面：
方面1.一种式I的化合物的药学上可接受的盐：
Figure BDA0003613934800000762
方面2.根据方面1所述的药学上可接受的盐，其中所述盐是式IA的盐酸盐
Figure BDA0003613934800000771
方面3.一种根据方面2所述的盐酸盐的结晶形式。
方面4.根据方面3所述的结晶形式，其中所述结晶是式IA-形式I。
方面5.根据方面3或方面4所述的结晶形式，其特征在于基本上如图1所示的X射线粉末衍射图谱。
方面6.根据方面3、4或5中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的23.8度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面7.根据方面3-6中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的21.2和23.8度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面8.根据方面3-7中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的21.2、23.8、27.0和32.5度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面9.根据方面3-8中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图2所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面10.根据方面3-9中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约244℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面11.根据方面3-10中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图3所示的热重分析曲线。
方面12.根据方面3所述的结晶形式，其中所述结晶是式IA-形式II。
方面13.根据方面3或方面12所述的结晶形式，其特征在于基本上如图4所示的X射线粉末衍射图谱。
方面14.根据方面3、12或13中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的25.5度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面15.根据方面3或12-14中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的14.8、17.5和25.5度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面16.根据方面3或12-15中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的14.8、17.5、18.4、24.0、25.5、28.0和28.7度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面17.根据方面3或12-16中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图5所示的热重分析曲线。
方面18.根据方面3所述的结晶形式，其中所述结晶是式IA-形式IIa。
方面19.根据方面3或方面18所述的结晶形式，其特征在于基本上如图6所示的X射线粉末衍射图谱。
方面20.根据方面3、18或19中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的26.1度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面21.根据方面3或18-20中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的14.0、14.9和26.1度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面22.根据方面3或18-21中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的12.5、14.0、14.9、18.4和26.1度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面23.根据方面3或18-22中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图7所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面24.根据方面3或18-23中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约199℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面25.根据方面3所述的结晶形式，其中所述结晶是式IA-形式III。
方面26.根据方面3或方面25所述的结晶形式，其特征在于基本上如图8所示的X射线粉末衍射图谱。
方面27.根据方面3、25或26中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的8.1度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面28.根据方面3或25-27中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的8.1和23.3度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面29.根据方面3或25-28中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的8.1、12.5、13.7、14.5、16.2、18.8、23.3和24.5度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面30.根据方面3或25-29中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图9所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面31.根据方面3或25-30中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约121℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面32.根据方面3、25-31中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图10所示的热重分析曲线。
方面33.根据方面3所述的结晶形式，其中所述结晶是式IA-形式IV。
方面34.根据方面3或方面33所述的结晶形式，其特征在于基本上如图11所示的X射线粉末衍射图谱。
方面35.根据方面3、33或34中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的4.0度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面36.根据方面3或33-35中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的4.0和22.7度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面37.根据方面3或33-36中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的4.0、22.7和27.8度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面38.根据方面3或33-37中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图12所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面39.根据方面3或33-38中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约169℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面40.根据方面3、33-39中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图13所示的热重分析曲线。
方面41.根据方面1所述的药学上可接受的盐，其中所述盐是式IB的磷酸盐。
方面42.一种根据方面41所述的磷酸盐的结晶形式。
方面43.根据方面42所述的结晶形式，其中所述结晶是式IB-形式I。
方面44.根据方面42或方面43所述的结晶形式，其特征在于基本上如图14A所示的X射线粉末衍射图谱。
方面45.根据方面42-44中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的24.9度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面46.根据方面42-45中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的18.2、19.6、24.9度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面47.根据方面42-46中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的18.2、19.6、24.9、25.7和27.0度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面48.根据方面42-47中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图15A所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面49.根据方面42-48中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约201℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面50.根据方面42-49中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图16A所示的热重分析曲线。
方面51.根据方面42所述的结晶形式，其中所述结晶是式IB-形式II。
方面52.根据方面42或方面51所述的结晶形式，其特征在于基本上如图14B所示的X射线粉末衍射图谱。
方面53.根据方面42或51-52中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的24.6度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面54.根据方面42或51-53中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的19.3、24.6和27.4度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面55.根据方面42或51-54中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的19.3、22.3、23.6、24.6和27.4度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面56.根据方面42或51-55中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图15B所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面57.根据方面42或51-56中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约229℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面58.根据方面42或51-57中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图16B所示的热重分析曲线。
方面59.根据方面1所述的药学上可接受的盐，其中所述盐是式IC的酒石酸盐。
方面60.根据方面59所述的结晶形式，其中所述酒石酸盐是结晶的。
方面61.根据方面59或方面60所述的结晶形式，其特征在于基本上如图17所示的X射线粉末衍射图谱。
方面62.根据方面59-61中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的18.4度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面63.根据方面59-62中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的18.4、19.9和21.5度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面64.根据方面59-63中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的18.4、19.4、19.9、21.5和26.3度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
方面65.根据方面59-64中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图18所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面66.根据方面59-65中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约190℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
方面67.根据方面59-66中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图19所示的热重分析曲线。
方面68.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据方面1-67中任一项所述的药学上可接受的盐和/或结晶形式以及药学上可接受的赋形剂。
方面69.一种治疗受试者中与异常PRMT5活性相关的疾病或障碍的方法，所述方法包括向所述受试者施用根据方面1-67中任一项所述的药学上可接受的盐和/或结晶形式。
方面70.根据方面69所述的方法，其中与异常PRMT5活性相关的所述疾病或障碍是乳腺癌、肺癌、胰腺癌、***癌、结肠癌、卵巢癌、子宫癌、***、白血病诸如急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓系白血病、毛细胞白血病、骨髓增生异常、骨髓增生性障碍、急性髓细胞性白血病(AML)、慢性髓细胞性白血病(CML)、肥大细胞增多症、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、多发性骨髓瘤(MM)、骨髓增生异常综合征(MDS)、表皮样癌、血红蛋白病诸如β-地中海贫血和镰形细胞病(SCD)、CDKN2A缺失的癌症；9P缺失的癌症；MTAP缺失的癌症；剪接体突变癌、胶质母细胞瘤、NSCLC、头颈癌、膀胱癌或肝细胞癌。

Claims (70)

1.一种式I的化合物的药学上可接受的盐：
Figure FDA0003613934790000011
2.根据权利要求1所述的药学上可接受的盐，其中所述盐是式IA的盐酸盐
Figure FDA0003613934790000012
3.一种根据权利要求2所述的盐酸盐的结晶形式。
4.根据权利要求3所述的结晶形式，其中所述结晶形式是式IA-形式I。
5.根据权利要求3或权利要求4所述的结晶形式，其特征在于基本上如图1所示的X射线粉末衍射图谱。
6.根据权利要求3、4或5中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的23.8度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
7.根据权利要求3-6中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的21.2和23.8度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
8.根据权利要求3-7中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的21.2、23.8、27.0和32.5度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
9.根据权利要求3-8中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图2所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
10.根据权利要求3-9中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约244℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
11.根据权利要求3-10中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图3所示的热重分析曲线。
12.根据权利要求3所述的结晶形式，其中所述结晶形式是式IA-形式II。
13.根据权利要求3或权利要求12所述的结晶形式，其特征在于基本上如图4所示的X射线粉末衍射图谱。
14.根据权利要求3、12或13中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的25.5度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
15.根据权利要求3或12-14中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的14.8、17.5和25.5度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
16.根据权利要求3或12-15中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的14.8、17.5、18.4、24.0、25.5、28.0和28.7度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
17.根据权利要求3或12-16中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图5所示的热重分析曲线。
18.根据权利要求3所述的结晶形式，其中所述结晶形式是式IA-形式IIa。
19.根据权利要求3或权利要求18所述的结晶形式，其特征在于基本上如图6所示的X射线粉末衍射图谱。
20.根据权利要求3、18或19中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的26.1度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
21.根据权利要求3或18-20中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的14.0、14.9和26.1度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
22.根据权利要求3或18-21中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的12.5、14.0、14.9、18.4和26.1度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
23.根据权利要求3或18-22中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图7所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
24.根据权利要求3或18-23中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约199℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
25.根据权利要求3所述的结晶形式，其中所述结晶形式是式IA-形式III。
26.根据权利要求3或权利要求25所述的结晶形式，其特征在于基本上如图8所示的X射线粉末衍射图谱。
27.根据权利要求3、25或26中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的8.1度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
28.根据权利要求3或25-27中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的8.1和23.3度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
29.根据权利要求3或25-28中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的8.1、12.5、13.7、14.5、16.2、18.8、23.3和24.5度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
30.根据权利要求3或25-29中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图9所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
31.根据权利要求3或25-30中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约121℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
32.根据权利要求3、25-31中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图10所示的热重分析曲线。
33.根据权利要求3所述的结晶形式，其中所述结晶形式是式IA-形式IV。
34.根据权利要求3或权利要求33所述的结晶形式，其特征在于基本上如图11所示的X射线粉末衍射图谱。
35.根据权利要求3、33或34中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的4.0度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
36.根据权利要求3或33-35中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的4.0和22.7度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
37.根据权利要求3或33-36中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的4.0、22.7和27.8度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
38.根据权利要求3或33-37中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图12所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
39.根据权利要求3或33-38中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约169℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
40.根据权利要求3、33-39中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图13所示的热重分析曲线。
41.根据权利要求1所述的药学上可接受的盐，其中所述盐是式IB的磷酸盐。
42.一种根据权利要求41所述的磷酸盐的结晶形式。
43.根据权利要求42所述的结晶形式，其中所述结晶形式是式IB-形式I。
44.根据权利要求42或权利要求43所述的结晶形式，其特征在于基本上如图14A所示的X射线粉末衍射图谱。
45.根据权利要求42-44中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的24.9度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
46.根据权利要求42-45中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的18.2、19.6、24.9度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
47.根据权利要求42-46中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的18.2、19.6、24.9、25.7和27.0度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
48.根据权利要求42-47中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图15A所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
49.根据权利要求42-48中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约201℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
50.根据权利要求42-49中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图16A所示的热重分析曲线。
51.根据权利要求42所述的结晶形式，其中所述结晶形式是式IB-形式II。
52.根据权利要求42或权利要求51所述的结晶形式，其特征在于基本上如图14B所示的X射线粉末衍射图谱。
53.根据权利要求42或51-52中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的24.6度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
54.根据权利要求42或51-53中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的19.3、24.6和27.4度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
55.根据权利要求42或51-54中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的19.3、22.3、23.6、24.6和27.4度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
56.根据权利要求42或51-55中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图15B所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
57.根据权利要求42或51-56中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约229℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
58.根据权利要求42或51-57中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图16B所示的热重分析曲线。
59.根据权利要求1所述的药学上可接受的盐，其中所述盐是式IC的酒石酸盐。
60.一种根据权利要求59所述的酒石酸盐的结晶形式。
61.根据权利要求60所述的结晶形式，其特征在于基本上如图17所示的X射线粉末衍射图谱。
62.根据权利要求60-61中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的18.4度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
63.根据权利要求60-62中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的18.4、19.9和21.5度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
64.根据权利要求60-63中任一项所述的结晶形式，其特征在于在λ＝1.54埃(Cu Kα)的2-θ标度上的18.4、19.4、19.9、21.5和26.3度±0.2度2-θ处包括峰的X射线粉末衍射图谱。
65.根据权利要求60-64中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时基本上如图18所示的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
66.根据权利要求60-65中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以10℃/min的速率加热时在约190℃处包括吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
67.根据权利要求60-66中任一项所述的结晶形式，其特征在于当以20℃/min的速率加热时基本上如图19所示的热重分析曲线。
68.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1-67中任一项所述的药学上可接受的盐和/或结晶形式以及药学上可接受的赋形剂。
69.一种治疗受试者中与异常PRMT5活性相关的疾病或障碍的方法，所述方法包括向所述受试者施用根据权利要求1-67中任一项所述的药学上可接受的盐和/或结晶形式。
70.根据权利要求69所述的方法，其中与异常PRMT5活性相关的所述疾病或障碍是乳腺癌、肺癌、胰腺癌、***癌、结肠癌、卵巢癌、子宫癌、***、白血病诸如急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓系白血病、毛细胞白血病、骨髓增生异常、骨髓增生性障碍、急性髓细胞性白血病(AML)、慢性髓细胞性白血病(CML)、肥大细胞增多症、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、多发性骨髓瘤(MM)、骨髓增生异常综合征(MDS)、表皮样癌、血红蛋白病诸如β-地中海贫血和镰形细胞病(SCD)、CDKN2A缺失的癌症；9P缺失的癌症；MTAP缺失的癌症；剪接体突变癌、胶质母细胞瘤、NSCLC、头颈癌、膀胱癌、肝细胞癌、腺样囊性癌(ACC)、原发性中枢神经***淋巴瘤、输卵管癌或非霍奇金淋巴瘤。
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