CN114796287A - 一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉及其应用 - Google Patents

一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114796287A
CN114796287A CN202210648958.6A CN202210648958A CN114796287A CN 114796287 A CN114796287 A CN 114796287A CN 202210648958 A CN202210648958 A CN 202210648958A CN 114796287 A CN114796287 A CN 114796287A
Authority
CN
China
Prior art keywords
probiotic powder
bag
powder
probiotic
oral cavity
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202210648958.6A
Other languages
English (en)
Inventor
金海鹰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bifido Beijing Biological Technology Co ltd
Original Assignee
Bifido Beijing Biological Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bifido Beijing Biological Technology Co ltd filed Critical Bifido Beijing Biological Technology Co ltd
Priority to CN202210648958.6A priority Critical patent/CN114796287A/zh
Publication of CN114796287A publication Critical patent/CN114796287A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/702—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/745—Bifidobacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉及其应用，属于微生物技术领域以及医药技术领域。本发明的益生菌粉由格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4、乳双歧杆菌AD011、糖醇类甜味剂和益生元组成，能够改善口腔问题，具体体现在：这一益生菌粉可抑制口腔细菌生长，改善清新口腔气味；抑制变形链球菌形成，预防龋齿的发生；与毒素和血链球菌有效结合，抑制牙菌斑的形成。因此含有格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4和乳双歧杆菌AD011的益生菌粉在改善口腔问题上具有很大的应用前景。

Description

一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉及其应用
技术领域
本发明涉及一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉及其应用，属于微生物技术领域和医药技术领域。
背景技术
人体的口腔内大约存在700多种微生物，因其有适宜多种微生物繁殖的水分、pH值、营养素等环境，所以在口腔内存在寄居于唾液、齿面牙菌斑、舌背、两腮粘膜及齿龈缝等各种环境下的多种固有菌群是非常理想的微生物培养器。
口腔内与我们的肠道一样，有益菌与有害菌保持均衡的稳态非常重要。口腔菌群的失衡，可以引发各种口腔疾病。因此，要想从根本上解决口腔问题，其关键是利用口腔中固有的菌群长期维持有益菌与有害菌之间的均衡稳态。
口腔健康与人体健康有着密不可分的关系。据报道资料显示，患有口腔疾病的人与口腔健康的人相比，患全身疾病的概率要高出3.4倍；且口腔内易引起牙周炎症以及种植牙周炎症的有害菌易通过血液渗透到全身重要的脏器并且引发第二次感染。当有害菌渗透到血液后对身体各个部位造成不良影响，随着有害菌的代谢产物渗透到全身时将会使病情变得更加恶化。除此之外，各种有害菌到达肠道后，还会引起肠道菌群紊乱，诱发各种疾病。日常生活中，人们出现口腔疾病时，大多选择人工方法、物理机械法、以及药物化学法来缓解疼痛，对于口腔异味问题，大多选择视而不见或是用口气清新剂进行异味的掩盖。
发明内容
为了解决因致病菌增殖引起的牙周炎、虫牙龋齿、牙菌斑、口臭等口腔疾病问题，或因消化代谢不良引起的口气酸臭问题。依据现有临床及研究者发现结果，提出了一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉及其应用，具体如下：
本发明提供了一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉，由格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4、乳双歧杆菌AD011、糖醇类甜味剂和益生元组成；所述格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4和乳双歧杆菌AD011为主要调节成分，益生元和糖醇类甜味剂为辅助调节成分；其中：所述益生元包括低聚半乳糖、低聚果糖和低聚木糖，所述糖醇类甜味剂包括赤藓糖醇和木糖醇。
在本发明的一种实施方式中，按照每袋2g的添加量计，上述益生菌粉各成分添加量如下所示：
格氏乳杆菌HHuMin D 50亿CFU/袋(按活菌数计)
发酵乳杆菌OK 50亿CFU/袋(按活菌数计)
两歧双歧杆菌BGN4 50亿CFU/袋(按活菌数计)
乳双歧杆菌AD011 50亿CFU/袋(按活菌数计)
赤藓糖醇100mg/袋
木糖醇100mg/袋
低聚半乳糖48mg/袋
低聚果糖108mg/袋
低聚木糖16mg/袋
在本发明的一种实施方式中，上述益生菌的冻干菌粉的制备方法，包括如下步骤：
1)将格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4和乳双歧杆菌AD011分别划线于MRS固体培养基上，37℃条件下培养48h，得到单菌落。
2)挑取单菌落分别接种于MRS液体培养基中，37℃条件下培养24～48h进行活化，得到一级种子液。
3)将一级种子液按接种量为3％(v/v)分别转接至种子培养基中得到二级种子液，培养条件为37℃，培养24～48h。
4)将二级种子液分别接入发酵培养基中进行高密度发酵，接种量为3％(v/v)，培养条件为35～37℃，培养24～48h。
5)待发酵液中菌体密度达到108～109CFU/mL，分别收集发酵液；将所述发酵液分别离心收集菌体。
6)收集菌体后分别用冻干保护剂重悬，得到重悬液。
7)将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4和乳双歧杆菌AD011的冻干菌粉。
在本发明的一种实施方式中，所述培养基为MRS培养基：蛋白胨10g、牛肉浸粉10g、葡萄糖20g、乙酸钠2g、酵母浸粉5g、柠檬酸氢二铵2g、K2PO4·3H2O 0.4g、MgSO4·7H2O 0.2g、MnSO40.05g、吐温80 1mL、琼脂15g，pH调至6.2～6.3。
在本发明的一种实施方式中，所述冻干保护剂按重量百分比计由以下成分制成：脱脂奶粉15％、海藻糖6％、甘油4％和木糖醇1.5％。
在本发明的一种实施方式中，上述益生菌粉的制备方法，包括如下步骤：
1)分别取格氏乳杆菌HHuMin D 50亿CFU、发酵乳杆菌OK 50亿CFU、两歧双歧杆菌BGN4 50亿CFU和乳双歧杆菌AD011冻干菌粉50亿CFU后混合。
2)向上述益生菌冻干菌粉混合物中依次加入赤藓糖醇100mg、木糖醇100mg、低聚半乳糖48mg、低聚果糖108mg和低聚木糖16mg，搅拌均匀，充分混合后分装至袋装即得益生菌粉，所述袋装选用密封性好、安全的食品级PE包装材质，规格为2g。
在本发明的一种实施方式中，上述益生菌粉的用法用量为：
对于全年龄层(包含长牙后的所有人群)人群的食用建议为在餐后、刷牙后、睡前用温度低于37℃的水冲饮或直接食用。
针对口腔疾病较严重者，2袋/天，食用1个月，待好转后，改为1袋/天食用，食用两个月。
针对正常维护口腔健康者，1袋/天，食用3个月。
若服用抗生素期间，建议先用抗生素，间隔2～3小时再用益生菌粉。
本发明还提供了一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉在改善因致病菌增殖引起的口腔问题和因消化代谢不良引起的口气酸臭问题表现上的应用。
本发明的有益效果在于：
1)本发明提供了一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉，由格氏乳杆菌HHuMinD、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4、乳双歧杆菌AD011、糖醇类甜味剂和益生元组成。此益生菌粉能够改善因致病菌增殖引起的口腔问题和因消化代谢不良引起的口气酸臭问题，具体体现在：这一益生菌粉可抑制口腔细菌生长，改善清新口腔气味；抑制变形链球菌形成，预防龋齿的发生；与毒素和血链球菌有效结合，抑制牙菌斑的形成。因此含有格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4、乳双歧杆菌AD011的益生菌粉在改善因致病菌增殖引起的口腔问题和因消化代谢不良引起的口气酸臭问题上具有很大的应用前景。
2)本发明中的格氏乳杆菌HHuMin D和发酵乳杆菌OK是从健康人群唾液中分离出来的；两歧双歧杆菌BGN4和乳双歧杆菌AD011是从健康的母乳喂养婴儿的粪便中分离出来的。本发明中的糖醇类甜味剂和益生元的搭配加入，符合国家GB/T 29602-2013及GB 2760-2014允许添加量。因此，本发明的益生菌粉对人体而言，健康且无毒副作用。
具体实施方式
本发明提供了一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉，由格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4、乳双歧杆菌AD011、糖醇类甜味剂和益生元组成。所述格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4和乳双歧杆菌AD011为主要调节成分，益生元和糖醇类甜味剂为辅助调节成分；其中：所述益生元包括低聚半乳糖、低聚果糖和低聚木糖，所述糖醇类甜味剂包括赤藓糖醇和木糖醇。
下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征，只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
下述实施例中涉及的培养基如下：
MRS培养基：蛋白胨10g、牛肉浸粉10g、葡萄糖20g、乙酸钠2g、酵母浸粉5g、柠檬酸氢二铵2g、K2PO4·3H2O 0.4g、MgSO4·7H2O 0.2g、MnSO40.05g、吐温80 1mL、琼脂15g，pH调至6.2～6.3。
实施例1：两歧双歧杆菌BGN4冻干菌粉的制备
1)两歧双歧杆菌BGN4划线于MRS固体培养基上，37℃条件下培养48h，得到单菌落。
2)挑取单菌落接种于MRS液体培养基中，37℃条件下培养24～48h进行活化，得到一级种子液。
3)将一级种子液按接种量为3％(v/v)分别转接至种子培养基中得到二级种子液，培养条件为37℃，培养24～48h。
4)将二级种子液分别接入发酵培养基中进行高密度发酵，接种量为3％(v/v)，培养条件为35～37℃，培养24～48h。
5)待发酵液中菌体密度达到108～109CFU/mL，分别收集发酵液；将所述发酵液分别离心收集菌体。
6)收集菌体后用冻干保护剂重悬(冻干保护剂按重量百分比计由以下成分制成：脱脂奶粉15％、海藻糖6％、甘油4％和木糖醇1.5％)，得到重悬液。
7)将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到两歧双歧杆菌BGN4冻干菌粉。
实施例2格氏乳杆菌HHuMin D冻干菌粉的制备
1)格氏乳杆菌HHuMin D划线于MRS固体培养基上，37℃条件下培养48h，得到单菌落。
2)挑取单菌落接种于MRS液体培养基中，37℃条件下培养24～48h进行活化，得到一级种子液。
3)将一级种子液按接种量为3％(v/v)分别转接至种子培养基中得到二级种子液，培养条件为37℃，培养24～48h。
4)将二级种子液分别接入发酵培养基中进行高密度发酵，接种量为3％(v/v)，培养条件为35～37℃，培养24～48h。
5)待发酵液中菌体密度达到108～109CFU/mL，分别收集发酵液；将所述发酵液分别离心收集菌体。
6)收集菌体后用冻干保护剂重悬(冻干保护剂按重量百分比计由以下成分制成：脱脂奶粉15％、海藻糖6％、甘油4％和木糖醇1.5％)，得到重悬液。
7)将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到格氏乳杆菌HHuMin D冻干菌粉。
实施例3乳双歧杆菌AD011冻干菌粉的制备
1)乳双歧杆菌AD011划线于MRS固体培养基上，37℃条件下培养48h，得到单菌落。
2)挑取单菌落接种于MRS液体培养基中，37℃条件下培养24～48h进行活化，得到一级种子液。
3)将一级种子液按接种量为3％(v/v)分别转接至种子培养基中得到二级种子液，培养条件为37℃，培养24～48h。
4)将二级种子液分别接入发酵培养基中进行高密度发酵，接种量为3％(v/v)，培养条件为35～37℃，培养24～48h。
5)待发酵液中菌体密度达到108～109CFU/mL，分别收集发酵液；将所述发酵液分别离心收集菌体。
6)收集菌体后用冻干保护剂重悬(冻干保护剂按重量百分比计由以下成分制成：脱脂奶粉15％、海藻糖6％、甘油4％和木糖醇1.5％)，得到重悬液。
7)将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到乳双歧杆菌AD011冻干菌粉。
实施例4发酵乳杆菌OK冻干菌粉的制备
1)发酵乳杆菌OK划线于MRS固体培养基上，37℃条件下培养48h，得到单菌落。
2)挑取单菌落接种于MRS液体培养基中，37℃条件下培养24～48h进行活化，得到一级种子液。
3)将一级种子液按接种量为3％(v/v)分别转接至种子培养基中得到二级种子液，培养条件为37℃，培养24～48h。
4)将二级种子液分别接入发酵培养基中进行高密度发酵，接种量为3％(v/v)，培养条件为35～37℃，培养24～48h。
5)待发酵液中菌体密度达到108～109CFU/mL，分别收集发酵液；将所述发酵液分别离心收集菌体。
6)收集菌体后用冻干保护剂重悬(冻干保护剂按重量百分比计由以下成分制成：脱脂奶粉15％、海藻糖6％、甘油4％和木糖醇1.5％)，得到重悬液。
7)将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到发酵乳杆菌OK冻干菌粉。
实施例5益生菌粉的制备
按照每袋2g的添加量计，益生菌粉各成分添加量如下所示：
格氏乳杆菌HHuMin D 50亿CFU/袋(按活菌数计)
发酵乳杆菌OK 50亿CFU/袋(按活菌数计)
两歧双歧杆菌BGN4 50亿CFU/袋(按活菌数计)
乳双歧杆菌AD011 50亿CFU/袋(按活菌数计)
赤藓糖醇100mg/袋
木糖醇100mg/袋
低聚半乳糖48mg/袋
低聚果糖108mg/袋
低聚木糖16mg/袋
上述益生菌粉的制备方法，包括如下步骤：
1)分别取格氏乳杆菌HHuMin D 50亿CFU、发酵乳杆菌OK 50亿CFU、两歧双歧杆菌BGN4 50亿CFU和乳双歧杆菌AD011 50亿CFU后混合。
2)向上述益生菌冻干菌粉混合物中依次加入赤藓糖醇100mg、木糖醇100mg、低聚半乳糖48mg、低聚果糖108mg和低聚木糖16mg，搅拌均匀，充分混合后分装至袋装即得益生菌粉，所述袋装选用密封性好、安全的食品级PE包装材质，规格为2g。
实施例6安全性试验
1.通过评估血细胞的溶血，粘蛋白降解，氨的产生，生物胺的产生，抗菌药的敏感性分析，抗生素耐药性的可转移性，抗生素抗性基因的PCR数据，基因组稳定性以及是否具有毒力因子/致病基因等多方面试验，对格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4及乳双歧杆菌AD011的安全性进行评估。
2.试验结果
1)四株菌均不显示溶血活性也不显示粘蛋白降解活性，没有发现生产氨的现象。
2)四株菌不生产5-戊二胺、组胺、酪胺，产生少量的腐胺，其含量与其他食物(例如菠菜，番茄酱，青豆，酸菜和香肠)相似或更低。
3)四株菌对庆大霉素及四环素的耐药性(敏感性)高于欧洲食品***(EFSA)的临界值。
4)在PCR分析研究中，未发现菌株的抗性基因。
5)四株菌对抗生素的耐药性均未通过与基因片段结合而转移。。
6)四株菌株的整个基因组序列已在GenBank中公开。
7)四株菌均不含有已知的产毒素基因和致病基因。
实施例7益生菌粉的安全性检测
1.检测依据及方法
根据食品安全国家标准食品中污染物限量GB 2762-2017、食品微生物学检验(菌落总数测定GB 4789.2-2016、大肠杆菌计数GB 4789.3-2016、沙门氏菌检验GB 4789.4-2016、霉菌检验GB 4789.15-2016)等标准方法对益生菌粉进行安全性检测。
2.检测结果
采用冷冻干燥微囊三层包埋技术制得的一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉，其色泽为米黄色粉末，无正常视力可见的外来异物、无结块、无异味、无臭。且污染物铅、锡检测结果不活跃，菌落总数、大肠菌群、沙门氏菌、霉菌检测结果均通过。
实施例8具体病例
病例1：患者女，32岁，诉求：自身消化不好，经常性口苦口臭，异味难闻。食用本发明制备的益生菌粉，食用方法为饭后半小时内食用一袋，温水漱口10秒钟，并咽下，每天2次，坚持3个月。期间间隔1个月进行一次回访，口腔内异味有所改善，口气变得清爽了。
病例2：患者女，26岁，诉求：压力大时，爱上火，牙龈会偶尔发炎疼痛。食用本发明制备的益生菌粉，食用方法为饭后半小时内食用一袋，温水漱口10秒钟，并咽下，每天2次，坚持食用1个月。而后，连续食用6个月，期间间隔1个月进行一次回访，有压力上火时，牙龈炎症无再发生，且上火口腔异味有所改善。
病例3：患者男，35岁，诉求：酒局多造成饮食不规律，消化不良引起口气异味难闻。食用本发明制备的益生菌粉，食用方法为饭后半小时内食用一袋，温水漱口10秒钟，并咽下，每天2次，坚持15天。随访2个月，口气异味问题有所改善，且在有需要的时候反复使用以上方法。
病例4：患者女，6岁，诉求：换牙后，发现有的牙齿上有黑点，即龋齿，并且嘴巴里时常有酸臭味。食用本发明制备的益生菌粉，食用方法为饭后半小时内食用一袋，温水漱口10秒钟，并咽下，每天2次，坚持1个月。随访6个月，牙齿上的黑点未增大、亦未扩散，且嘴巴里的酸臭味已减少至正常口气。
病例5：患者男，10岁，诉求：牙齿表面粘附黄色、粗糙可见的污垢，口臭难闻，常伴有牙龈出血、牙龈肿胀，经诊断为不注意清洗长期积存的“牙菌斑”。食用本发明制备的益生菌粉，食用方法为饭后半小时内食用一袋，温水漱口10秒钟吐出，每天2次，坚持2个月，且告知患者及时清除掉表面“牙垢”。随后随访6个月，牙齿表面已无明显附着物，口气异味减少，牙龈出血、肿胀问题的次数减少。
实施例9临床试验
1.研究对象
选择34名8～20岁有口腔异味(口苦口臭)、牙齿有小黑点(龋齿)、牙龈发炎的口腔症状患者。17名患者被分配到治疗组，其余17名患者被分配到安慰剂组。
2.治疗方法
治疗组为食用本发明制备的益生菌粉2袋，安慰剂组为不含益生菌的等量脱脂奶粉(安慰剂包)，在视觉上与益生菌包无区别。每位患者需在饭后30分钟内食用，每天两次，1袋/次，共持续20天。记录治疗期间前后口腔异味改变、牙齿上小黑点的面积、牙龈发炎次数。
3.效果评判标准
以治疗期间前后口腔异味改变、牙齿上小黑点的面积、牙龈发炎次数的情况来评判效果。有效：痊愈或3种问题比治疗前有好的转变；无效：治疗前后3个问题情况持续发生，无明显好转趋势及变化。
4.统计学方法
进行配对t检验以评估两组口腔症状的定量变化：研究期间前后口腔异味改变、牙齿上小黑点的面积、牙龈发炎次数。当p值<0.05时，结果被认为具有统计学意义。
5.试验结果
2组效果评价，结果见表1.
表1 2组效果评价
Figure BDA0003685123440000081
从表1中可以看出，采用本发明的益生菌粉在改善抑制口腔症状方面具有显著效果。
本发明提供了一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉及其应用，所述益生菌粉格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4、乳双歧杆菌AD011、糖醇类甜味剂和益生元组成，能够改善因致病菌增殖引起的口腔问题和因消化代谢不良引起的口气酸臭问题，具体体现在：这一益生菌粉可抑制口腔细菌生长，改善清新口腔气味；抑制变形链球菌形成，预防龋齿的发生；与毒素和血链球菌有效结合，抑制牙菌斑的形成。其中，格氏乳杆菌HHuMin D和发酵乳杆菌OK在抑制口腔细菌生长、改善清新口腔气味、预防龋齿的发生和抑制牙菌斑的形成应用方向上得以验证。两歧双歧杆菌BGN4和乳双歧杆菌AD011通过调节肠道积食、消化不良等问题减少了口腔异味的产生。因此含有格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4和乳双歧杆菌AD011的益生菌粉在改善因致病菌增殖引起的口腔问题和因消化代谢不良引起的口气酸臭问题上具有很大的应用前景。
以上所述，只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人了解本发明内容并加以实施，本申请的保护范围并不受这些具体实施例的限制。对于本领域技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的技术思想和原理之内所作的任何修饰修改、等效变化、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉，其特征在于，所述益生菌粉由格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4、乳双歧杆菌AD011、糖醇类甜味剂和益生元组成；所述格氏乳杆菌HHuMin D、发酵乳杆菌OK、两歧双歧杆菌BGN4和乳双歧杆菌AD011为主要调节成分，益生元和糖醇类甜味剂为辅助调节成分；其中：所述益生元包括低聚半乳糖、低聚果糖和低聚木糖，所述糖醇类甜味剂包括赤藓糖醇和木糖醇。
2.如权利要求1所述的一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉，其特征在于，按照每袋2g的添加量计，所述益生菌粉各成分添加量如下所示：
格氏乳杆菌HHuMin D 50亿CFU/袋(按活菌数计)
发酵乳杆菌OK 50亿CFU/袋(按活菌数计)
两歧双歧杆菌BGN4 50亿CFU/袋(按活菌数计)
乳双歧杆菌AD011 50亿CFU/袋(按活菌数计)
赤藓糖醇100mg/袋
木糖醇100mg/袋
低聚半乳糖48mg/袋
低聚果糖108mg/袋
低聚木糖16mg/袋
所述益生菌粉的制备方法，包括：
1)冻干菌粉的制备
保护剂与活化后的单一纯菌株、菌液分别混合，倒入容器置于真空冷冻干燥机中，制得4种单一益生菌冻干菌粉。
2)配方菌粉制备
分别取上述配方量4种单一益生菌冻干菌粉后混合，再依次加入上述配方量的赤藓糖醇、木糖醇、低聚半乳糖、低聚果糖和低聚木糖混合，搅拌均匀，分装至袋装即得益生菌粉。
3.如权利要求2所述的一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉，其特征在于，所述保护剂按重量百分比计由以下成分制成：脱脂奶粉15％、海藻糖6％、甘油4％和木糖醇1.5％。
4.如权利要求2所述的一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉，其特征在于，所述益生菌粉包装袋选用密封性好、安全的食品级PE包装材质。
5.如权利要求2所述的一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉，其特征在于，所述益生菌粉的用法用量为：在餐后、刷牙后、睡前用温度低于37℃的水冲饮或直接食用。
6.如权利要求5所述的一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉，其特征在于，所述益生菌粉的食用建议为：针对口腔疾病较严重者，2袋/天，食用1个月，待好转后，改为1袋/天食用，食用两个月。
7.如权利要求5所述的一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉，其特征在于，所述益生菌粉的食用建议为：针对正常维护口腔健康者，1袋/天，食用3个月。
8.如权利要求5所述的一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉，其特征在于，所述益生菌粉的食用建议为：服用抗生素期间，先用抗生素，间隔2～3小时再用益生菌粉。
9.如权利要求1或2所述的益生菌粉在改善因致病菌增殖引起的口腔问题和因消化代谢不良引起的口气酸臭问题表现上的应用。
CN202210648958.6A 2022-06-09 2022-06-09 一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉及其应用 Pending CN114796287A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210648958.6A CN114796287A (zh) 2022-06-09 2022-06-09 一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210648958.6A CN114796287A (zh) 2022-06-09 2022-06-09 一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉及其应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114796287A true CN114796287A (zh) 2022-07-29

Family

ID=82521410

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210648958.6A Pending CN114796287A (zh) 2022-06-09 2022-06-09 一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114796287A (zh)

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103190626A (zh) * 2013-04-17 2013-07-10 肖天存 治疗口腔溃疡的果蔬食品及其制备方法
CN107582573A (zh) * 2017-08-23 2018-01-16 江苏微康生物科技有限公司 一种益生菌滴剂及其制备方法
CN107794237A (zh) * 2017-10-26 2018-03-13 广州能靓生物技术有限公司 一种益生菌组合物及其应用、产品
CN108670982A (zh) * 2018-05-31 2018-10-19 南昌大学 一种益生菌口香糖的制备方法
CN109069556A (zh) * 2016-01-19 2018-12-21 西姆莱斯有限公司 用作口腔内抗炎剂的益生菌
CN113980844A (zh) * 2021-10-27 2022-01-28 深圳保时健生物工程有限公司 一种益生菌组合物及其制备方法
CN114149939A (zh) * 2021-09-27 2022-03-08 微康益生菌(苏州)股份有限公司 一种能够缓解龋齿的益生菌组合物及其应用
CN114470010A (zh) * 2022-02-07 2022-05-13 北京华元生物技术研究院 乳双歧杆菌bl-11的新用途

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103190626A (zh) * 2013-04-17 2013-07-10 肖天存 治疗口腔溃疡的果蔬食品及其制备方法
CN109069556A (zh) * 2016-01-19 2018-12-21 西姆莱斯有限公司 用作口腔内抗炎剂的益生菌
CN107582573A (zh) * 2017-08-23 2018-01-16 江苏微康生物科技有限公司 一种益生菌滴剂及其制备方法
CN107794237A (zh) * 2017-10-26 2018-03-13 广州能靓生物技术有限公司 一种益生菌组合物及其应用、产品
CN108670982A (zh) * 2018-05-31 2018-10-19 南昌大学 一种益生菌口香糖的制备方法
CN114149939A (zh) * 2021-09-27 2022-03-08 微康益生菌(苏州)股份有限公司 一种能够缓解龋齿的益生菌组合物及其应用
CN113980844A (zh) * 2021-10-27 2022-01-28 深圳保时健生物工程有限公司 一种益生菌组合物及其制备方法
CN114470010A (zh) * 2022-02-07 2022-05-13 北京华元生物技术研究院 乳双歧杆菌bl-11的新用途

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SOYON MANN等: "Isolation, Characterization and Biosafety Evaluation of Lactobacillus Fermentum OK with Potential Oral Probiotic Properties", PROBIOTICS AND ANTIMICROBIAL POTEINS, no. 13 *
SOYON MANN等: "Oral probiotic activities and biosafetyof Lactobacillus gasseri HHuMIN D", MICROBIAL CELL FACTORIES *
张明等: "益生菌对口腔健康的作用研究进展", 食品研究与开发, vol. 36, no. 11 *
陈忠秀;李嘉文;赵扬;袁杰利;刘党生;: "益生菌的应用现状和发展前景", 中国微生态学杂志, no. 04 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI342750B (zh)
CN110051003A (zh) 一种复合益生菌组合物及其应用
CN109480231A (zh) 抗幽门螺杆菌的组合物及其应用
KR100605992B1 (ko) 구취를 억제하는 유산균
JP4486957B2 (ja) 虫歯および虫歯を惹起する細菌を低減するための乳酸菌の使用
CN1981028A (zh) 选择和利用乳酸杆菌减少龋齿和引发龋齿的细菌
CN114149939B (zh) 一种能够缓解龋齿的益生菌组合物及其应用
JP2016513631A (ja) ラクトバチルス・プランタルムｎｃｃ２９３６調製物及び口腔健康
EP3822338A1 (en) Lactobacillus paracasei et-22 and use thereof
CN111518713B (zh) 一株能够预防和/或治疗龋齿的鼠李糖乳杆菌及其应用
KR19990023039A (ko) 인체 구강내 치태형성을 억제하는 신규한 유산균
CN115153026A (zh) 鼠李糖乳杆菌菌株LRa05在制备抑制幽门螺杆菌和/或变异链球菌制品方面的用途
KR101940001B1 (ko) 신장 기능을 강화시키는 조성물 및 방법
FI113057B (fi) Menetelmä hiivojen kasvun estämiseksi
CN107530382B (zh) 防龋剂和防龋组合物
CN114796287A (zh) 一种可预防龋齿和清新口腔的益生菌粉及其应用
JP4982636B2 (ja) 虫歯予防用組成物
CN116024128B (zh) 一株嗜热链球菌菌株p0012及其制备的口腔健康护理用益生菌组合物和应用
CN116077607B (zh) 一种抗幽门螺杆菌感染的益生菌发酵中药组合物及其应用
CN118146972A (zh) 一种改善口腔健康的瑞士乳杆菌及益生菌组合物
CN112889925A (zh) 灭活益生菌奶片及其制备方法
ES2973007A1 (es) Probiotico oral
CN116904341A (zh) 一株可改善口腔健康的鼠李糖乳杆菌及其益生菌组合物
CN116333913A (zh) 一种唾液乳杆菌、含有其的益生菌组合物及其应用
KR20060043665A (ko) 구취를 억제하는 유산균

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination