CN114630679A - 抗garp抗体和免疫调节剂的组合 - Google Patents

抗garp抗体和免疫调节剂的组合 Download PDF

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Abstract

提供了用于治疗或预防癌症的药物组合物等。所述用于治疗癌症的药物组合物和治疗方法的特征在于组合施用抗GARP抗体和免疫调节剂。

Description

抗GARP抗体和免疫调节剂的组合
技术领域
本发明涉及用于癌症治疗的药物组合物和用于治疗癌症的方法，其中组合施用特定的抗GARP抗体和一种或多种免疫调节剂。
背景技术
调节性T细胞(Treg)是在癌症患者的肿瘤区域中发现的带来免疫耐受的主要致病细胞。具体地，在癌症患者中，设想发挥作用的抗肿瘤免疫细胞群被由肿瘤活化的Treg抑制，并且该状态导致肿瘤的生长(非专利文献1)。
糖蛋白-A为主的重复(GARP)是具有单程跨膜结构的蛋白(非专利文献2)。GARP在活化的Treg的细胞表面上表达，并且与潜伏TGF-β (TGF-β的前体，用于诱导免疫耐受的重要因子)形成复合物(非专利文献3)。
通过Treg和表达αvβ6整合素的细胞、诸如DC之间的细胞-细胞相互作用，成熟TGF-β从经由GARP锚定至Treg的细胞表面的潜伏TGF-β分泌，使得TGF-β的免疫抑制信号直接转导至靶细胞(非专利文献4和5)。该TGF-β的成熟显示需要GARP在细胞膜上的表达(非专利文献5)。另一方面，向CD4-阳性T细胞直接添加跨膜区域缺陷的可溶性GARP的情况下，CD4-阳性T细胞的增殖也受到抑制(非专利文献6)。因此，不能否认存在可归因于GARP的免疫抑制机制，而无需细胞膜上TGF-β成熟机制的介导。
GARP的表达见于外周血来源的活化Treg中。另外，在临床上发现其在癌症患者中的肿瘤浸润性T细胞中存在的Treg(非专利文献7)，和腹水中存在的Treg(非专利文献8)或患者外周血中存在的Treg(非专利文献9)中的表达。
WO2017/051888(专利文献1)、WO2015/015003(专利文献2)、WO2016/125017(专利文献3)中描述的抗体以及WO2018/206790(专利文献4)中描述的MHG-8和LHG-10被称为抗GARP抗体(非专利文献10)。
免疫调节剂是活化抗肿瘤免疫的药物(非专利文献11至13)。作为免疫检查点抑制剂已知的抗PD-1抗体(纳武单抗(专利文献5)、派姆单抗(专利文献6)等)、抗PD-L1抗体(阿特珠单抗(专利文献7)、德瓦鲁单抗(专利文献8)、阿维鲁单抗(专利文献)9)等)和抗CTLA-4抗体(伊匹单抗(专利文献10)、曲美木单抗(专利文献11)等)被称为免疫调节剂。
然而，没有任何的抗GARP抗体和免疫调节剂的已知的特定组合作用。
引文列表
专利文献
专利文献1: WO2017/051888
专利文献2: WO2015/015003
专利文献3: WO2016/125017
专利文献4: WO2018/206790
专利文献5: WO2006/121168
专利文献6: WO2008/156712
专利文献7: WO2010/077634
专利文献8: WO2011/066389
专利文献9: WO2013/079174
专利文献10: WO2001/014424
专利文献11: WO2000/037504。
非专利文献
非专利文献1: Int J Cancer. 2010 Aug 15; 127(4): 759-67.
非专利文献2: PLoS One. 2008; 3(7): e2705.
非专利文献3: Proc Natl Acad Sci U S A. 2009; 106(32): 13445-50.
非专利文献4: Eur J Immunol. 2009; 39(12): 3315-22.
非专利文献5: Mol Biol Cell. 2012; 23(6): 1129-39.
非专利文献6: Blood. 2013; 122(7): 1182-91.
非专利文献7: Eur J Immunol. 2012 Jul; 42(7): 1876-85.
非专利文献8: Clin Immunol. 2013 Oct; 149(1): 97-110.
非专利文献9: Cancer Res. 2013; 73: 2435.
非专利文献10: Sci Transl Med. 2015 Apr 22; 7(284)
非专利文献11: Cancers. 2016 Nov 8(12); 106.
非专利文献12: Nat Rev Cancer. 2012 Mar 12(4); 252-264
非专利文献13: Cell.2015 Aug 162(5); 937。
发明概述
技术问题
本发明提供了包含组合施用的抗GARP抗体和一种或多种免疫调节剂的用于癌症治疗的药物组合物，以及用于治疗癌症的方法，其包括组合施用抗GARP抗体和一种或多种免疫调节剂。
问题的解决方案
本发明人为了解决该问题已经进行了深入研究，并且随后发现组合施用的抗GARP抗体和免疫调节剂表现出优异的抗肿瘤效果。
具体地，本发明涉及以下内容。
[1]用于癌症治疗的药物组合物，其包含具有以下特征(1)至(3)的抗体或其抗原结合片段以及免疫调节剂，其组合施用：
(1) 特异性结合糖蛋白-A为主的重复(GARP)，
(2) 具有针对调节性T细胞的免疫抑制功能的抑制活性，和
(3) 具有抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)活性。
[2]根据[1]所述的药物组合物，其中所述抗体具有体内抗肿瘤活性。
[3]根据[1]或[2]所述的药物组合物，其中所述抗体包含如以下(1)或(2)中所述的包含CDRH1、CDRH2和CDRH3的重链和包含CDRL1、CDRL2和CDRL3的轻链：
(1)由如SEQ ID NO:13的氨基酸位置45至54中所示的氨基酸序列组成的CDRH1、由如SEQ ID NO:13的氨基酸位置69至78中所示的氨基酸序列组成的CDRH2和由如SEQ ID NO:13的氨基酸位置118至125中所示的氨基酸序列组成的CDRH3，以及由如SEQ ID NO:15的氨基酸位置44至54中所示的氨基酸序列组成的CDRL1、由如SEQ ID NO:15的氨基酸位置70至76中所示的氨基酸序列组成的CDRL2和由如SEQ ID NO:15的氨基酸位置109至117中所示的氨基酸序列组成的CDRL3，或
(2)由如SEQ ID NO:17的氨基酸位置45至54中所示的氨基酸序列组成的CDRH1、由如SEQ ID NO:17的氨基酸位置69至77中所示的氨基酸序列组成的CDRH2和由如SEQ ID NO:17的氨基酸位置117至128中所示的氨基酸序列组成的CDRH3，以及由如SEQ ID NO:19的氨基酸位置44至54中所示的氨基酸序列组成的CDRL1、由如SEQ ID NO:19的氨基酸位置70至76中所示的氨基酸序列组成的CDRL2和由如SEQ ID NO:19的氨基酸位置109至117中所示的氨基酸序列组成的CDRL3。
[4]根据[1]至[3]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体包含如以下(1)至(3)中任一者中所述的重链可变区和轻链可变区：
(1)由如SEQ ID NO:21的氨基酸位置20至136中所示的氨基酸序列组成的重链可变区和由如SEQ ID NO:25的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区，
(2)由如SEQ ID NO:23的氨基酸位置20至136中所示的氨基酸序列组成的重链可变区和由如SEQ ID NO:27的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区，或
(3)由如SEQ ID NO:29的氨基酸位置20至139中所示的氨基酸序列组成的重链可变区和由如SEQ ID NO:31的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区。
[5]根据[1]至[4]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体是嵌合抗体。
[6]根据[1]至[4]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体是人源化抗体。
[7]根据[1]至[6]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体包含人IgG1、人IgG2或人IgG4的重链恒定区。
[8]根据[6]或[7]所述的药物组合物，其中所述抗体包含如以下(1)至(3)中任一者中所述的重链和轻链：
(1)具有如SEQ ID NO:21的氨基酸位置20至466中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:25的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链，
(2)具有如SEQ ID NO:23的氨基酸位置20至466中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:27的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链，或
(3)具有如SEQ ID NO:29的氨基酸位置20至469中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:31的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链。
[9]根据[1]所述的药物组合物，其中所述抗体与根据[2]至[8]中任一项所述的抗体竞争结合GARP。
[10]根据[1]至[9]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体包含一种或两种或更多种选自以下的修饰：N-连接糖基化、O-连接糖基化、N-末端加工、C-末端加工、脱酰胺化、天冬氨酸的异构化、甲硫氨酸的氧化、N-末端添加甲硫氨酸残基、脯氨酸残基的酰胺化和在重链的羧基末端缺失一个或两个氨基酸残基。
[11]根据[10]所述的药物组合物，其中在重链的羧基末端缺失一个或几个氨基酸残基。
[12]根据[10]或[11]所述的药物组合物，其中在两条重链的羧基末端均缺失一个氨基酸残基。
[13]根据[10]至[12]中任一项所述的药物组合物，其中所述重链的羧基末端脯氨酸残基进一步被酰胺化。
[14]根据[1]至[13]中任一项所述的药物组合物，其中所述免疫调节剂是抗PD-1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L2抗体或其抗原结合片段、抗CTLA-4抗体或其抗原结合片段、包含这些抗体或其抗原结合片段中的任一种的多特异性抗体、放射疗法、化学放射疗法或其组合。
[15]根据[14]所述的药物组合物，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗、派姆单抗、兰博利珠单抗、MK-3475、AMP-224、匹地利珠单抗或LOPD18。
[16]根据[14]所述的药物组合物，其中所述抗PD-L1抗体是阿特珠单抗、德瓦鲁单抗或阿维鲁单抗。
[17]根据[14]所述的药物组合物，其中所述抗CTLA-4抗体是伊匹单抗或曲美木单抗。
[18]根据[1]至[17]中任一项所述的用于癌症治疗的药物组合物，其中所述抗体和所述免疫调节剂作为活性成分包含在分开的制剂中，并且同时或不同时施用。
[19]包含根据[1]至[13]中任一项所述的抗体的用于癌症治疗的药物组合物，其将与免疫调节剂组合。
[20]包含根据[1]至[13]中任一项所述的抗体的用于癌症治疗的药物组合物，其用于治疗给予免疫调节剂的癌症患者。
[21]包含免疫调节剂的用于癌症治疗的药物组合物，其中所述药物组合物与根据[1]至[13]中任一项所述的抗体组合，由此增加所述抗体的效果。
[22]包含免疫调节剂的用于癌症治疗的药物组合物，其将与根据[1]至[13]中任一项所述的抗体组合。
[23]包含免疫调节剂的用于癌症治疗的药物组合物，其用于治疗给予根据[1]至[13]中任一项所述的抗体的癌症患者。
[24]包含根据[1]至[13]中任一项所述的抗体的用于癌症治疗的药物组合物，其中所述药物组合物与免疫调节剂组合，由此增加所述免疫调节剂的效果。
[25]根据[1]至[24]中任一项所述的药物组合物，其用于治疗至少一种选自以下的癌症：肺癌、肾癌、尿路上皮癌、大肠癌、***癌、多形性胶质母细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、肝癌、膀胱癌、胃癌、食道癌、头颈癌、血癌、皮肤癌、甲状腺癌、胆道癌、唾液腺癌、小肠癌、肾上腺癌、睾丸癌、子***、子宫内膜癌、子宫肉瘤、胸腺瘤、间皮瘤、肉瘤及其转移形式。
[26]用于治疗癌症的方法，其包括组合施用具有以下特征(1)至(3)的抗体或其抗原结合片段以及免疫调节剂：
(1) 特异性结合糖蛋白-A为主的重复(GARP)，
(2) 具有针对调节性T细胞的免疫抑制功能的抑制活性，和
(3) 具有抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)活性。
[27]根据[26]所述的用于治疗癌症的方法，其中所述抗体具有体内抗肿瘤活性。
[28]根据[26]或[27]所述的方法，其中所述抗体包含如以下(1)或(2)中所述的包含CDRH1、CDRH2和CDRH3的重链和包含CDRL1、CDRL2和CDRL3的轻链：
(1)由如SEQ ID NO:13的氨基酸位置45至54中所示的氨基酸序列组成的CDRH1、由如SEQ ID NO:13的氨基酸位置69至78中所示的氨基酸序列组成的CDRH2和由如SEQ ID NO:13的氨基酸位置118至125中所示的氨基酸序列组成的CDRH3，以及由如SEQ ID NO:15的氨基酸位置44至54中所示的氨基酸序列组成的CDRL1、由如SEQ ID NO:15的氨基酸位置70至76中所示的氨基酸序列组成的CDRL2和由如SEQ ID NO:15的氨基酸位置109至117中所示的氨基酸序列组成的CDRL3，或
(2)由如SEQ ID NO:17的氨基酸位置45至54中所示的氨基酸序列组成的CDRH1、由如SEQ ID NO:17的氨基酸位置69至77中所示的氨基酸序列组成的CDRH2和由如SEQ ID NO:17的氨基酸位置117至128中所示的氨基酸序列组成的CDRH3，以及由如SEQ ID NO:19的氨基酸位置44至54中所示的氨基酸序列组成的CDRL1、由如SEQ ID NO:19的氨基酸位置70至76中所示的氨基酸序列组成的CDRL2和由如SEQ ID NO:19的氨基酸位置109至117中所示的氨基酸序列组成的CDRL3。
[29]根据[26]至[28]中任一项所述的方法，其中所述抗体包含如以下(1)至(3)中任一者中所述的重链可变区和轻链可变区：
(1)由如SEQ ID NO:21的氨基酸位置20至136中所示的氨基酸序列组成的重链可变区和由如SEQ ID NO:25的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区，
(2)由如SEQ ID NO:23的氨基酸位置20至136中所示的氨基酸序列组成的重链可变区和由如SEQ ID NO:27的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区，或
(3)由如SEQ ID NO:29的氨基酸位置20至139中所示的氨基酸序列组成的重链可变区和由如SEQ ID NO:31的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区。
[30]根据[26]至[29]中任一项所述的方法，其中所述抗体是嵌合抗体。
[31]根据[26]至[29]中任一项所述的方法，其中所述抗体是人源化抗体。
[32]根据[26]至[31]中任一项所述的方法，其中所述抗体包含人IgG1、人IgG2或人IgG4的重链恒定区。
[33]根据[31]或[32]所述的方法，其中所述抗体包含如以下(1)至(3)中任一者中所述的重链和轻链：
(1)具有如SEQ ID NO:21的氨基酸位置20至466中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:25的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链，
(2)具有如SEQ ID NO:23的氨基酸位置20至466中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:27的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链，或
(3)具有如SEQ ID NO:29的氨基酸位置20至469中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:31的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链。
[34]根据[26]所述的方法，其中所述抗体与根据[27]至[33]中任一项所述的抗体竞争结合GARP。
[35]根据[26]至[34]中任一项所述的方法，其中所述抗体包含一种或两种或更多种选自以下的修饰：N-连接糖基化、O-连接糖基化、N-末端加工、C-末端加工、脱酰胺化、天冬氨酸的异构化、甲硫氨酸的氧化、N-末端添加甲硫氨酸残基、脯氨酸残基的酰胺化和在重链的羧基末端缺失一个或两个氨基酸残基。
[36]根据[35]所述的方法，其中在重链的羧基末端缺失一个或几个氨基酸残基。
[37]根据[35]或[36]所述的方法，其中在两条重链的羧基末端均缺失一个氨基酸残基。
[38]根据[35]至[37]中任一项所述的方法，其中所述重链的羧基末端脯氨酸残基进一步被酰胺化。
[39]根据[26]至[38]中任一项所述的方法，其中所述免疫调节剂是抗PD-1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L2抗体或其抗原结合片段、抗CTLA-4抗体或其抗原结合片段、包含这些抗体或其抗原结合片段中的任一种的多特异性抗体、放射疗法、化学放射疗法或其组合。
[40]根据[39]所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗、派姆单抗、兰博利珠单抗、MK-3475、AMP-224、匹地利珠单抗或LOPD18。
[41]根据[39]所述的方法，其中所述抗PD-L1抗体是阿特珠单抗、德瓦鲁单抗或阿维鲁单抗。
[42]根据[39]所述的方法，其中所述抗CTLA-4抗体是伊匹单抗或曲美木单抗。
[43]用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的癌症患者施用有效量的根据[26]至[38]中任一项所述的抗体，其中所述方法与施用免疫调节剂组合。
[44]用于治疗给予免疫调节剂的癌症患者的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的根据[26]至[38]中任一项所述的抗体。
[45]用于治疗癌症的方法，其与根据[26]至[38]中任一项所述的抗体的施用组合，由此增加所述抗体的效果，所述方法包括向有此需要的患者施用有效量的免疫调节剂。
[46]用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的免疫调节剂，其中所述方法与根据[26]至[38]中任一项所述的抗体的施用组合。
[47]用于治疗给予根据[26]至[38]中任一项所述的抗体的癌症患者的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的免疫调节剂。
[48]用于治疗癌症的方法，其与免疫调节剂的施用组合，由此增加所述免疫调节剂的效果，所述方法包括向有此需要的患者施用有效量的根据[26]至[38]中任一项所述的抗体。
[49]根据[26]至[48]中任一项所述的方法，其中所述方法用于治疗至少一种选自以下的癌症：肺癌、肾癌、尿路上皮癌、大肠癌、***癌、多形性胶质母细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、肝癌、膀胱癌、胃癌、食道癌、头颈癌、血癌、皮肤癌、甲状腺癌、胆道癌、唾液腺癌、小肠癌、肾上腺癌、睾丸癌、子***、子宫内膜癌、子宫肉瘤、胸腺瘤、间皮瘤、肉瘤及其转移形式。
[50]用于癌症治疗的试剂盒制剂，其包含根据[1]至[12]中任一项所述的抗体和一种或两种或更多种选自以下的免疫调节剂：抗PD-1抗体、抗PD-L1抗体、抗PD-L2抗体和抗CTLA-4抗体。
[51]根据[50]所述的制剂，其进一步包含使用所述试剂盒的说明书手册。
[52]根据[14]所述的药物组合物，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗。
[53]根据[14]所述的药物组合物，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗。
[54]根据[39]所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗。
[55]根据[39]所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗。
[56]根据[1]至[13]中任一项所述的药物组合物，其中所述免疫调节剂是抗PD-1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L2抗体或其抗原结合片段、抗CTLA-4抗体或其抗原结合片段、包含这些抗体或其抗原结合片段中的任一种的多特异性抗体、放射疗法、化学放射疗法、化疗剂或其组合。
[57]根据[26]至[38]中任一项所述的方法，其中所述免疫调节剂是抗PD-1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L2抗体或其抗原结合片段、抗CTLA-4抗体或其抗原结合片段、包含这些抗体或其抗原结合片段中的任一种的多特异性抗体、放射疗法、化学放射疗法、化疗剂或其组合。
发明的有益效果
本发明可以通过组合施用特定的抗GARP抗体和一种或多种免疫调节剂来提供其抗肿瘤效果和安全性优异的药物组合物和治疗方法。
附图简述
[图1]图1是显示c151D抗体重链的氨基酸序列(SEQ ID NO:13)的图。
[图2]图2是显示c151D抗体轻链的氨基酸序列(SEQ ID NO:15)的图。
[图3]图3是显示c198D抗体重链的氨基酸序列(SEQ ID NO:17)的图。
[图4]图4是显示c198D抗体轻链的氨基酸序列(SEQ ID NO:19)的图。
[图5]图5是显示h151D-H1重链的氨基酸序列(SEQ ID NO:21)的图。
[图6]图6是显示h151D-L1轻链的氨基酸序列(SEQ ID NO:25)的图。
[图7]图7是显示h151D-H4重链的氨基酸序列(SEQ ID NO:23)的图。
[图8]图8是显示h151D-L4轻链的氨基酸序列(SEQ ID NO:27)的图。
[图9]图9是显示h198D-H3重链的氨基酸序列(SEQ ID NO:29)的图。
[图10]图10是显示h198D-L4轻链的氨基酸序列(SEQ ID NO:31)的图。
[图11-1]图11-1是显示供体A和B中的对照组、抗GARP抗体h151D_H1L1单一药剂治疗组、抗PD-1抗体纳武单抗单一药剂治疗组和抗GARP抗体h151D_H1L1/纳武单抗组合治疗组的摄入Teff细胞中的[3H]-胸苷的量的平均值和标准偏差(6孔/组)的图。
[图11-2]图11-2是显示供体C和D中的对照组、抗GARP抗体h151D_H1L1单一药剂治疗组、抗PD-1抗体纳武单抗单一药剂治疗组和抗GARP抗体h151D_H1L1/纳武单抗组合治疗组的摄入Teff细胞中的[3H]-胸苷的量的平均值和标准偏差(6孔/组)的图。
[图12]图12是显示四个供体中的对照组、抗GARP抗体h151D_H1L1单一药剂施用组、抗PD-1抗体纳武单抗单一药剂施用组和抗GARP抗体h151D_H1L1/抗PD-1抗体纳武单抗组合施用组的相对AUC值的图，所述相对AUC值是Teff细胞增殖活化的指标。
[图13]图13是显示当组合抗GARP抗体(h151D_H1L1)和抗PD-1抗体纳武单抗时，使用CANscript(R)预测临床效力的图。
实施方案的描述
在下文中，将参考附图描述用于实施本发明的优选模式。下面描述的实施方案举例说明了本发明的示例性典型实施方案，本发明的范围不以任何方式受其限制。
1.GARP
人GARP的氨基酸序列描述于序列表的SEQ ID NO:1 (NP_001122394)中。
GARP还包括由通过一个或几个氨基酸的取代、缺失和/或添加衍生自上述GARP的氨基酸序列的氨基酸序列组成且具有与该蛋白等效的生物活性的蛋白。
没有信号序列的成熟人GARP对应于由SEQ ID NO:1代表的氨基酸序列的位置20至662的氨基酸残基组成的氨基酸序列。
GARP还包括由如下氨基酸序列组成且具有与GARP等效的生物活性的蛋白，所述氨基酸序列衍生自序列表的SEQ ID NO:1代表的氨基酸序列或通过从该序列除去信号序列、通过一个或几个氨基酸的取代、缺失或添加获得的氨基酸序列。GARP进一步包括由如下氨基酸序列组成且具有与GARP等效的生物活性的蛋白：由从人GARP基因座转录的剪接变体编码的氨基酸序列或通过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸而衍生自该氨基酸序列的氨基酸序列。
2.抗GARP抗体
本发明的抗体的功能的实例可以包括但不限于抗原结合活性、中和抗原活性的活性、增强抗原活性的活性和效应子活性(ADCC活性、抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)活性和补体依赖性细胞毒性(CDC)活性等)。
本发明的抗体优选具有GARP特异性结合活性、效应子活性、Treg功能抑制活性和细胞毒活性(抗肿瘤活性)中的任一种或其组合，且更优选具有可归因于经由效应子活性(优选ADCC活性)的Treg功能抑制活性的GARP特异性结合活性或细胞毒活性(抗肿瘤活性)或其组合。
在本发明中，“癌症”和“肿瘤”具有相同的含义。
本发明的抗体识别GARP蛋白。换言之，本发明的抗体结合GARP蛋白。这种抗体被称为“抗GARP抗体”。本发明的优选抗体特异性识别GARP蛋白。换言之，本发明的优选抗体特异性结合GARP蛋白。
在本发明中，“特异性识别”，即，“特异性结合”，意指不是非特异性吸附的结合。用于确定结合是否特异性的标准的实例可以包括解离常数(在下文中，被称为“KD”)。本发明的优选抗体对于GARP蛋白的KD值是1 x 10-5 M或更小，5 X 10-6 M或更小，2 X 10-6 M或更小或1 X 10-6 M或更小，更优选5 X 10-7 M或更小，2 X 10-7 M或更小或1 X 10-7 M或更小，仍更优选5 X 10-8 M或更小，2 X 10-8 M或更小或1 X 10-8 M或更小，又更优选5 X 10-9 M或更小，2 X 10-9 M或更小或1 X 10-9 M或更小。
在本发明中，抗体与抗原的结合可以通过ELISA、RIA、表面等离振子共振(在下文中，被称为“SPR”)分析方法等来测量或测定。用于SPR分析中的设备的实例可以包括BIAcore(TM)(由GE Healthcare Japan Corp.制造)，ProteOn(TM) (由Bio-RadLaboratories, Inc.制造)，SPR-Navi(TM) (由BioNavis Ltd.制造)，Spreeta(TM) (由Texas Instruments Inc.制造)，SPRi-PlexII(TM) (由HORIBA, Ltd.制造)和Autolab SPR(TM) (由Metrohm AG制造)。可以通过流式细胞术、细胞ELISA等测量抗体与细胞表面上表达的抗原的结合。
在本发明中，ADCC(抗体依赖性细胞性细胞毒性)是指细胞介导的反应，通过该反应，表达Fcγ受体的非特异性细胞毒性细胞(例如NK细胞、中性粒细胞和巨噬细胞)识别结合至靶细胞上的抗体，且然后引起靶细胞的裂解。
在本发明中，ADCP(抗体依赖性细胞吞噬作用)是指细胞介导的反应，通过该反应，表达Fc受体的吞噬细胞(例如巨噬细胞和中性粒细胞)识别结合至靶细胞上的抗体，且然后吞噬靶细胞。
在本发明中，CDC(补体依赖性细胞毒性)是指补体经由抗体破坏靶细胞、诸如肿瘤细胞的作用或活性。
ADCC活性、CDC活性和ADCP活性可以通过本领域已知的方法测量。
ADCC活性的测量采用表达目标抗原的细胞(靶细胞)和杀死靶细胞的效应细胞。所述效应细胞经由Fcγ受体识别与靶细胞结合的抗体的Fc区。所述效应细胞通过从Fcγ受体转导的信号杀死靶细胞。在测量具有人来源的Fc区的抗体的ADCC活性的情况下，将人NK细胞用作效应细胞。可以通过本领域已知的方法从人外周血单核细胞(PBMC)制备人NK细胞。或者，PBMC可以直接用作效应细胞。
ADCP活性的测量采用表达目标抗原的细胞(靶细胞)和吞噬靶细胞的效应细胞，诸如单核细胞或巨噬细胞。这些效应细胞可以通过经由本领域已知的方法诱导通过本领域已知的方法从人外周血单核细胞(PBMC)分离的单核细胞级分分化成巨噬细胞来制备。
CDC活性的测量采用表达目标抗原的细胞(靶细胞)和补体组分。补体组分通过结合与靶细胞结合的抗体而被活化，且由此在细胞表面上引起一系列反应以形成膜侵入复合物，其进而杀死靶细胞。作为该补体组分，可以使用人血清等。
<抗GARP抗体的产生>
抗GARP抗体可以通过用GARP或选自GARP的氨基酸序列的任意多肽免疫动物，并收集和纯化体内产生的抗体而获得。
(1)抗原的制备
用于制备抗GARP抗体的抗原的实例可以包括GARP、由其至少6个连续氨基酸的部分氨基酸序列组成的多肽以及进一步具有向其添加的任意氨基酸序列或载体的衍生物。
GARP可以直接从人肿瘤组织或肿瘤细胞中纯化并使用，或者GARP可以通过体外合成或通过经由基因工程改造从宿主细胞产生来获得。具体地，在这样的基因工程改造中，GARP cDNA被整合至允许表达的载体中。然后，可以通过在含有转录和翻译所必需的酶、底物和能量物质的溶液中合成，或通过从用载体转化的原核或真核宿主细胞表达GARP来获得抗原。
或者，可以通过在适当的宿主-载体***中表达与抗体的恒定区连接的膜蛋白GARP的胞外区的融合蛋白，获得作为分泌蛋白的抗原。
(2)抗GARP单克隆抗体的产生
本发明的抗体可以通过本领域已知的方法获得。例如，可以根据本领域通常实施的方法，通过用抗原GARP或选自GARP的氨基酸序列的任意多肽免疫动物，并收集和纯化体内产生的抗体来获得抗体。抗原的来源不限于人。可以用源自非人动物、诸如小鼠或大鼠的抗原免疫动物。在该情况下，可以通过测试结合获得的异种抗原的抗体与人抗原的交叉反应性来选择适用于人疾病的抗GARP抗体。
而且，可以通过经由产生针对抗原的抗体的产生抗体的细胞和骨髓瘤细胞的融合而建立杂交瘤来获得单克隆抗体(例如，Kohler和Milstein, Nature (1975) 256, p.495-497; 和Kennet, R. 编, Monoclonal Antibodies, p. 365-367, Plenum Press,N.Y.(1980))。
因此建立的杂交瘤系的实例可以包括针对GARP的杂交瘤151D和198D。在本说明书中，由针对GARP的杂交瘤151D和198D产生的抗体分别被称为“151D抗体”和“198D抗体”，或简称为“151D”和“198D”(参见US2018258184)。
151D抗体的重链可变区具有由SEQ ID NO:3代表的氨基酸序列。151D抗体的轻链可变区具有由SEQ ID NO:5代表的氨基酸序列。由SEQ ID NO:3代表的重链可变区的氨基酸序列由SEQ ID NO:2代表的核苷酸序列编码。由SEQ ID NO:5代表的轻链可变区的氨基酸序列由SEQ ID NO:4代表的核苷酸序列编码。
198D抗体的重链可变区具有由SEQ ID NO:7代表的氨基酸序列。198D抗体的轻链可变区具有由SEQ ID NO:9代表的氨基酸序列。由SEQ ID NO:7代表的重链可变区的氨基酸序列由SEQ ID NO:6代表的核苷酸序列编码。由SEQ ID NO:9代表的轻链可变区的氨基酸序列由SEQ ID NO:8代表的核苷酸序列编码。
(3)其他抗体
本发明的抗体的实例可以包括与151D抗体或198D抗体结合相同表位的抗体。由于151D抗体(人源化151D抗体等)识别由SEQ ID NO:1代表的序列中的氨基酸位置352至392，并且198D抗体(人源化198D抗体等)识别并结合由SEQ ID NO:1代表的序列中的氨基酸位置18至112，表位的实例可以包括GARP的氨基酸序列中的这些区域。
如果新制备的单克隆抗体结合151D抗体等结合的部分肽或部分构象，则该单克隆抗体可以被确定为与抗体诸如151D抗体结合相同的表位。只要证实单克隆抗体与抗体、诸如151D抗体竞争结合GARP(即单克隆抗体干扰151D抗体等与GARP的结合)，该单克隆抗体可以被确定为与抗体诸如151D抗体结合相同的表位，即使特定表位的序列或结构尚未确定。当证实结合相同的表位时，强烈预期单克隆抗体具有与抗体诸如151D抗体等效的特征。
本发明的抗体包括针对GARP的单克隆抗体以及为了例如降低针对人的异抗原性的目的而人工工程改造的重组抗体，例如嵌合抗体和人源化抗体，以及人抗体等。这些抗体可以通过使用已知的方法产生。
根据本发明的抗GARP抗体的实例还可以包括以下嵌合抗体和人源化抗体。
嵌合抗体的实例可以包括包含源自不同物种的抗体的可变区和恒定区的抗体，例如，包含与源自人的恒定区连接的源自小鼠或大鼠的抗体的可变区的嵌合抗体(参见Proc.Natl. Acad. Sci. U.S.A., 81, 6851-6855, (1984))。
源自大鼠抗人GARP抗体151D的嵌合抗体是由重链和轻链组成的抗体且可以具有任意的人来源的恒定区，所述重链包含由如SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列组成的重链可变区，且所述轻链包含由如SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区。
源自大鼠抗人GARP抗体198D的嵌合抗体是由重链和轻链组成的抗体且可以具有任意的人来源的恒定区，所述重链包含由如SEQ ID NO:7中所示的氨基酸序列组成的重链可变区，且所述轻链包含由如SEQ ID NO:9中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区。
这种嵌合抗体的实例可以包括由具有如SEQ ID NO:13的氨基酸位置20至466中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:15的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链组成的抗体，和由具有如序列表的SEQ ID NO:17的氨基酸位置20至469中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:19的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链组成的抗体。
在由序列表的SEQ ID NO:13代表的重链序列中，如位置1至19中所示的氨基酸序列对应于信号序列，如位置20至136中所示的氨基酸序列对应于可变区，且如位置137至466中所示的氨基酸序列对应于恒定区。
在由序列表的SEQ ID NO:15代表的轻链序列中，如位置1至20中所示的氨基酸序列对应于信号序列，如位置21至129中所示的氨基酸序列对应于可变区，且如位置130至234中所示的氨基酸序列对应于恒定区。
在由序列表的SEQ ID NO:17代表的重链序列中，如位置1至19中所示的氨基酸序列对应于信号序列，如位置20至139中所示的氨基酸序列对应于可变区，且如位置140至469中所示的氨基酸序列对应于恒定区。
在由序列表的SEQ ID NO:19代表的轻链序列中，如位置1至20中所示的氨基酸序列对应于信号序列，如位置21至129中所示的氨基酸序列对应于可变区，且如位置130至234中所示的氨基酸序列对应于恒定区。
人源化抗体的实例可以包括包含单独整合至人来源的抗体的互补决定区(CDR)的抗体(参见Nature (1986) 321, p. 522-525)，和包含通过CDR移植方法移植至人抗体中的CDR序列以及框架区的一部分的氨基酸残基的抗体(WO90/07861)。
然而，源自151D抗体的人源化抗体不限于特定的人源化抗体，只要人源化抗体维持151D抗体的所有六个CDR序列并且具有抗肿瘤活性。
151D抗体的重链可变区保留由如序列表的SEQ ID NO:3的氨基酸位置26至35中所示的氨基酸序列组成的CDRH1 (GFTFSNYYMA)，由如SEQ ID NO:3的氨基酸位置50至59中所示的氨基酸序列组成的CDRH2 (SIGTVGGNTY)，和由如SEQ ID NO:3的氨基酸位置99至106中所示的氨基酸序列组成的CDRH3 (EDYGGFPH)。
151D抗体的轻链可变区保留由如序列表的SEQ ID NO:5的氨基酸位置24至34中所示的氨基酸序列组成的CDRL1 (KASQNVGTNVD)，由如SEQ ID NO:5的氨基酸位置50至56中所示的氨基酸序列组成的CDRL2 (GASNRYT)，和由如SEQ ID NO:5的氨基酸位置89至97中所示的氨基酸序列组成的CDRL3 (LQYKYNPYT)。
198D抗体的重链可变区保留由如序列表的SEQ ID NO:7的氨基酸位置26至35中所示的氨基酸序列组成的CDRH1 (GFSLTSFHVS)，由如SEQ ID NO:7的氨基酸位置50至58中所示的氨基酸序列组成的CDRH2 (TISSGGGTY)，和由如SEQ ID NO:7的氨基酸位置98至109中所示的氨基酸序列组成的CDRH3 (ISGWGHYYVMDV)。
198D抗体的轻链可变区保留由如序列表的SEQ ID NO:9的氨基酸位置24至34中所示的氨基酸序列组成的CDRL1 (QASEDIYSGLA)，由如SEQ ID NO:9的氨基酸位置50至56中所示的氨基酸序列组成的CDRL2 (GAGSLQD)，和由如SEQ ID NO:9的氨基酸位置89至97中所示的氨基酸序列组成的CDRL3 (QQGLKFPLT)。
大鼠抗体151D的人源化抗体的实际实例可以包括重链和轻链的任意组合，所述重链包含由以下中的任一者组成的重链可变区：(1)如序列表的SEQ ID NO:21 (h151D-H1)或SEQ ID NO:23 (h151D-H4)的氨基酸位置20至136中所示的氨基酸序列，(2)与序列(1)中CDR序列以外的框架区的序列具有至少95%或更高同源性的氨基酸序列，和(3)通过在CDR序列以外的框架区的序列中缺失、取代或添加一个或几个氨基酸而衍生自序列(1)的氨基酸序列，且所述轻链包含由以下中的任一者组成的轻链可变区：(4)如SEQ ID NO:25 (h151D-L1)或SEQ ID NO:27 (h151D-L4)的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列，(5)与序列(4)中CDR序列以外的框架区的序列具有至少95%或更高同源性的氨基酸序列，和(6)通过在CDR序列以外的框架区的序列中缺失、取代或添加一个或几个氨基酸而衍生自序列(4)的氨基酸序列。
大鼠抗体198D的人源化抗体的实际实例可以包括重链和轻链的任意组合，所述重链包含由以下中的任一者组成的重链可变区：(1)如序列表的SEQ ID NO:29 (h198D-H3)的氨基酸位置20至139中所示的氨基酸序列，(2)与序列(1)中CDR序列以外的框架区的序列具有至少95%或更高同源性的氨基酸序列，和(3)通过在CDR序列以外的框架区的序列中缺失、取代或添加一个或几个氨基酸而衍生自序列(1)的氨基酸序列，且所述轻链包含由以下中的任一者组成的轻链可变区：(4)如SEQ ID NO:31 (h198D-L4)的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列，(5)与序列(4)中CDR序列以外的框架区的序列具有至少95%或更高同源性的氨基酸序列，和(6)通过在CDR序列以外的框架区的序列中缺失、取代或添加一个或几个氨基酸而衍生自序列(4)的氨基酸序列。
人源化151D抗体的重链和轻链的优选实例可以包括由重链和轻链组成的抗体，所述重链具有由如SEQ ID NO:21的氨基酸位置20至136中所示的氨基酸序列组成的重链可变区且所述轻链具有由如SEQ ID NO:25的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区；和由重链和轻链组成的抗体，所述重链具有由如SEQ ID NO:23的氨基酸位置20至136中所示的氨基酸序列组成的重链可变区且所述轻链具有由如SEQ ID NO:27的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区。
所述组合的更优选实例可以包括由具有如SEQ ID NO:21的氨基酸位置20至466中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:25的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链组成的抗体(h151D-H1L1)，和由具有如SEQ ID NO:23的氨基酸位置20至466中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:27的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链组成的抗体(h151D-H4L4)。
人源化198D抗体的重链和轻链的优选实例可以包括由重链和轻链组成的抗体，所述重链具有由如SEQ ID NO:29的氨基酸位置20至139中所示的氨基酸序列组成的重链可变区且所述轻链具有由如SEQ ID NO:31的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区。
所述组合的更优选实例可以包括由具有如SEQ ID NO:29的氨基酸位置20至469中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:31的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链组成的抗体(h198D-H3L4)。
可以通过组合表现出与重链氨基酸序列和轻链氨基酸序列的高度同源性的序列来选择具有与上述每种抗体等效的细胞毒性活性的抗体。这种同源性为通常80%或更高同源性、优选85%或更高同源性、更优选90%或更高同源性、仍更优选95%或更高同源性、最优选99%或更高同源性。此外，可以通过组合通过取代、缺失或添加一个至几个氨基酸残基而衍生自重链或轻链的氨基酸序列的氨基酸序列来选择具有与上述每种抗体等效的细胞毒性活性的抗体。
在本说明书中，术语“几个”意指1个至10个、1个至9个、1个至8个、1个至7个、1个至6个、1个至5个、1个至4个、1个至3个或1个或2个。
两种类型的氨基酸序列之间的同一性可以使用Blast算法版本2.2.2的默认参数确定(Altschul, Stephen F., Thomas L. Madden, Alejandro A. Schaffer, JinghuiZhang, Zheng Zhang, Webb Miller, 和David J. Lipman (1997), "Gapped BLAST andPSI-BLAST: a new generation of protein database search programs", NucleicAcids Res. 25: 3389-3402)。Blast算法也通过在互联网上访问www.ncbi.nlm.nih.gov/blast可得。与本发明的抗体相关的核苷酸序列和另一种抗体的核苷酸序列之间的同源性也可以通过Blast算法确定。
在与人源化151D抗体相关的由序列表的SEQ ID NO:21或SEQ ID NO:23代表的重链的氨基酸序列中，如位置1至19中所示的氨基酸序列对应于信号序列，如位置20至136中所示的氨基酸序列对应于可变区，且由如位置137至466中所示的氨基酸残基组成的氨基酸序列对应于恒定区。
在与人源化151D抗体相关的由序列表的SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:27代表的轻链的氨基酸序列中，如位置1至20中所示的氨基酸序列对应于信号序列，如位置21至129中所示的氨基酸序列对应于可变区，且如位置130至234中所示的氨基酸序列对应于恒定区。
在与人源化198D抗体相关的由序列表的SEQ ID NO:29代表的重链的氨基酸序列中，如位置1至19中所示的氨基酸序列对应于信号序列，如位置20至139中所示的氨基酸序列对应于可变区，且如140至469中所示的氨基酸序列对应于恒定区。
在与人源化198D抗体相关的由序列表的SEQ ID NO:31代表的轻链的氨基酸序列中，如位置1至20中所示的氨基酸序列对应于信号序列，如位置21至129中所示的氨基酸序列对应于可变区，且如130至234中所示的氨基酸序列对应于恒定区。
与人源化151D抗体相关的由序列表的SEQ ID NO:21或SEQ ID NO:23代表的重链的氨基酸序列分别由序列表的SEQ ID NO:20或SEQ ID NO:22代表的核苷酸序列编码。
与人源化198D抗体相关的由序列表的SEQ ID NO:29代表的重链的氨基酸序列由序列表的SEQ ID NO:28代表的核苷酸序列编码。
与人源化151D抗体相关的由序列表的SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:27代表的轻链的氨基酸序列分别由序列表的SEQ ID NO:24或SEQ ID NO:26代表的核苷酸序列编码。
与人源化198D抗体相关的由序列表的SEQ ID NO:31代表的轻链的氨基酸序列由序列表的SEQ ID NO:30代表的核苷酸序列编码。
本发明的抗GARP抗体的一个实例可以包括人抗体。人抗体可以通过使用具有含有人抗体重链和轻链基因的人染色体片段的产生人抗体的小鼠的方法获得(参见例如NatureGenetics (1997) 16, p. 133-143; Nucl. Acids Res. (1998) 26, p. 3447-3448;Animal Cell Technology: Basic and Applied Aspects vol. 10, p. 69-73(Kitagawa, Y., Matsuda, T. 和Iijima, S. 编), Kluwer Academic Publishers,1999; 和Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2000) 97, p. 722-727)。
此外，人抗体可以通过用于获得选自人抗体文库的源自噬菌体展示的人抗体的方法获得(参见例如，Investigative Ophthalmology & Visual Science. (2002) 43 (7),p. 2301-2308; Briefings in Functional Genomics and Proteomics (2002), 1 (2),p. 189-203; Ophthalmology (2002) 109 (3), p. 427-431; 和Nature Biotechnology(2005), 23, (9), p. 1105-1116)。
可以分析基于其结合抗原的能力选择的噬菌体的基因，以测定编码结合抗原的人抗体的可变区的DNA序列。如果确定结合抗原的scFv的DNA序列，则可以通过将抗体恒定区的DNA序列与其连接而制备具有该序列的IgG表达载体，并转移至适当的宿主，随后表达，以获得人抗体(WO92/01047, WO92/20791, WO93/06213, WO93/11236, WO93/19172, WO95/01438, WO95/15388, Annu. Rev. Immunol (1994) 12, p.433-455, NatureBiotechnology (2005) 23(9), p.1105-1116)。
本发明的人抗体的另外的实例可以包括与人源化151D抗体或人源化198D抗体结合相同表位的人抗体。
本发明的抗体还包括所述抗体的修饰变体。修饰的变体意指通过使根据本发明的抗体进行化学或生物修饰而获得的变体。所述化学修饰变体包括，例如，通过将化学部分连接至氨基酸骨架而化学修饰的变体，和用N-连接或O-连接的碳水化合物链化学修饰的变体。生物学修饰变体包括，例如，通过翻译后修饰(例如，N-连接或O-连接的糖基化，N-末端或C-末端加工，脱酰胺，天冬氨酸的异构化或甲硫氨酸的氧化)获得的变体，或具有通过使用原核宿主细胞表达而在N-末端添加的甲硫氨酸残基的变体。进一步，修饰的变体的含义中还包括经标记以便允许检测或分离本发明的抗体或抗原的抗体，例如酶促标记的抗体、荧光标记的抗体和亲和标记的抗体。本发明的抗体的这种修饰变体可用于改善本发明的抗体的原始稳定性和血液保留、降低抗原性、检测或分离该抗体或抗原等。
可以通过调节附接至本发明的抗体的聚糖的修饰(糖基化、去岩藻糖基化等)来加强抗体依赖性细胞性细胞毒性活性。已知WO99/54342、WO00/61739、WO02/31140、WO2007/133855等，作为用于调节抗体的聚糖修饰的技术，尽管该技术不限于此。本发明的抗体还包括其中聚糖修饰已被调节的抗体。
用于本发明的目的的抗体还包括“抗体的功能片段”或“抗体的抗原结合片段”。“抗体的功能片段”意指发挥由原始抗体发挥的功能的至少一部分的抗体片段。“抗体的功能片段”或“抗体的抗原结合片段”的实例可以包括，但不限于，Fab、F(ab')2、scFv、Fab'和单链免疫球蛋白。这种抗体的功能片段可以通过用酶诸如木瓜蛋白酶或胃蛋白酶处理抗体蛋白的全长分子来获得，并且此外，可以是使用重组基因在适当的宿主细胞中产生的重组蛋白。
本发明的抗体还包括具有两个或更多个抗原结合位点的抗体。具体地，这种抗体是能够结合一种抗原上的彼此不同的两个或更多个表位或两种或更多种抗原上的彼此不同的表位的抗体，并且含有多个彼此不同的抗原结合片段。这种多特异性抗体包括但不限于IgG型多特异性抗体，具有两种或更多种类型的可变区的多特异性抗体，例如抗体片段、诸如串联scFv、单链双抗体、双抗体和三抗体，和通过共价结合或非共价结合连接的抗体片段。所述多特异性抗体可以含有Fc。
本发明的抗体可以通过如下获得自培养上清液：通过基因工程改造技术用分别编码本发明的抗体的重链和轻链的cDNA、优选用包含所述cDNA的载体转化真核细胞，和培养转化的细胞，产生重组人单克隆抗体。
在通过暂时分离抗体基因且然后将该基因转移至适当的宿主来制备抗体的情况下，可以将适当的宿主与表达载体组合使用。抗体基因的具体实例可以包括编码本说明书中所述的抗体的重链序列的基因和编码其轻链序列的基因的组合。为了转化宿主细胞，可以将重链序列基因和轻链序列基因***相同的表达载体中，或者可以***分开的表达载体中。
在使用宿主真核细胞的情况下，可以使用动物细胞、植物细胞或真核微生物。具体地，动物细胞的实例可以包括哺乳动物细胞，例如，作为猴细胞的COS细胞(Gluzman, Y.,Cell (1981) 23, p. 175-182, ATCC CRL-1650)，小鼠成纤维细胞NIH3T3 (ATCC No.CRL-1658)，和中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞，ATCC CCL-61)的二氢叶酸还原酶缺陷系(Urlaub, G. 和Chasin, L.A., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. (1980) 77, p. 4126-4220)。
在使用原核细胞的情况下，其实例可以包括大肠杆菌和枯草芽孢杆菌。
将目标抗体基因通过转化转移至这些细胞，并将转化的细胞在体外培养以获得抗体。取决于抗体的序列，这种培养物的产率可能不同。可以其产率作为指标，从具有等效结合活性的抗体中选择容易作为药物生产的抗体。因此，本发明的抗体还包括通过用于产生抗体的方法可获得的抗体，所述方法包括以下步骤：培养转化的宿主细胞；和从由此获得的培养物收集目标抗体。
已知由培养的哺乳动物细胞产生的抗体的重链缺乏羧基末端赖氨酸残基(Journal of Chromatography A, 705: 129-134 (1995))。此外，已知这种抗体的重链缺乏两个羧基末端氨基酸残基，甘氨酸和赖氨酸，并且反而具有位于羧基末端的酰胺化脯氨酸残基(Analytical Biochemistry, 360: 75-83 (2007))。然而，重链序列中的这种缺失和修饰不影响抗体结合抗原的能力及其效应子功能(补体活化、抗体依赖性细胞性细胞毒性作用等)。
因此，本发明还包括已经经历修饰的抗体。其实例可以包括在重链的羧基末端缺乏一个或两个氨基酸的缺失变体，以及该缺失变体的酰胺化形式(例如，在羧基末端位点具有酰胺化脯氨酸残基的重链)。然而，根据本发明的抗体的重链的缺乏羧基末端氨基酸的缺失变体不限于上述类型，只要缺失变体维持结合抗原的能力和效应子功能。
构成根据本发明的抗体的两条重链可以是选自全长重链和上述缺失变体的任何一种类型的重链，或者可以是选自其中的任何两种类型的重链的组合。每种缺失变体的定量比率可以受产生根据本发明的抗体的培养的哺乳动物细胞的类型和培养条件的影响。这种情况的实例可以包括其中作为根据本发明的抗体的主要组分的两条重链中都缺失一个羧基末端氨基酸残基的情况。具体地，这种抗体的实例可以包括如以下(1)至(3)中所述的抗体：
(1)具有如SEQ ID NO:21的氨基酸位置20至465中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:25的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链，
(2)具有如SEQ ID NO:23的氨基酸位置20至465中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:27的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链，和
(3)具有如SEQ ID NO:29的氨基酸位置20至468中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:31的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链。
本发明的抗体的同种型的实例可以包括IgG (IgGl、IgG2、IgG3和IgG4)，并且可以优选包括IgGl、IgG2和IgG4。
本发明的抗体可以通过多聚化具有增强的对抗原的亲和力。待多聚化的抗体可以是识别相同抗原的多个表位的一种类型的抗体或多种抗体。用于将这种抗体多聚化的方法的实例可以包括两个scFv(单链Fv)与IgG CH3结构域的结合，其与链霉抗生物素蛋白的结合，以及螺旋-转角-螺旋基序的引入。
本发明的抗体可以是多克隆抗体。多克隆抗体的一个实例可以包括CDR不同的多种类型的抗体的混合物。通过培养产生不同抗体的细胞混合物、随后从培养物纯化而获得的抗体可以用作这种多克隆抗体(参见WO2004/061104)。
与任何各种分子、诸如聚乙二醇(PEG)缀合的抗体也可以用作抗体的修饰变体。
本发明的抗体可以进一步是由这些抗体与其他药物形成的任何缀合物(免疫缀合物)。这种抗体的实例可以包括与放射性物质或具有药理作用的化合物缀合的抗体(NatureBiotechnology (2005) 23, p. 1137-1146)，例如，铟(111In)卡罗单抗-喷地肽(capromabpendetide)、锝(99mTc)诺非妥莫单抗-默喷坦(nofetumomab merpentan)、铟(111In)替伊莫单抗、钇(90Y)替伊莫单抗和碘(131I)托西莫单抗。
2. 免疫调节剂
在本发明中，“免疫调节剂”是活化抗肿瘤免疫的药物，并且包括免疫检查点抑制剂、免疫诱导剂或免疫刺激剂等。
在本发明中，“免疫检查点抑制剂”是指抑制免疫抑制***并活化抗肿瘤免疫的药物。
本发明中使用的免疫检查点抑制剂的实例可以优选包括但不特别限于抗PD-1抗体、抗PD-L1抗体、抗PD-L2抗体和抗CTLA-4抗体，并且可以更优选包括抗PD-1抗体和抗PD-L1抗体。
在本发明中，“抗PD-1抗体”是指具有特异性结合PD-1(程序性细胞死亡-1；CD279；PDCD1)且由此减少、抑制和/或干扰由PD-1及其结合配偶体PD-L1或PD-L2之间的相互作用导致的信号转导的效果的抗体。本发明中使用的抗PD-1抗体没有特别限制，只要其效力和安全性已经得到临床证实。其实例可以优选地包括纳武单抗(WO2006/121168等)、派姆单抗(WO2008/156712等)、兰博利珠单抗、MK-3475、AMP-224、匹地利珠单抗和LOPD18，更优选纳武单抗和派姆单抗。例如，在临床前研究中，为了证实与本发明中使用的抗GARP抗体的组合效果的目的，可以使用市售的用于研究的抗PD-1抗体(例如克隆RMP1-14)。
在本发明中，“抗PD-L1抗体”是指具有特异性结合PD-L1(程序性细胞死亡配体1；CD274；B7-H1)且由此减少、抑制和/或干扰由PD-L1及其结合配偶体PD-1或B7.1 (CD80)之间的相互作用导致的信号转导的效果的抗体。本发明中使用的抗PD-L1抗体没有特别限制，只要其效力和安全性已经得到临床证实。其实例可以优选地包括阿特珠单抗(WO 2010/077634等)、德瓦鲁单抗(WO 2011/066389等)和阿维鲁单抗(WO 2013/079174等)。例如，在临床前研究中，为了证实与本发明中使用的抗GARP抗体的组合效果的目的，可以使用市售的用于研究的抗PD-L1抗体(例如克隆10F.9G2)。
在本发明中，“抗CTLA-4抗体”是指具有特异性结合CTLA-4(细胞毒性T-淋巴细胞相关蛋白4；CD152)且由此减少、抑制和/或干扰由CTLA-4及其结合配偶体B7.1 (CD80)或B7.2 (CD86)之间的相互作用导致的信号转导的效果的抗体。本发明中使用的抗CTLA-4抗体没有特别限制，只要其效力和安全性已经得到临床证实。其实例可以优选地包括伊匹单抗(WO 2001/014424等)和曲美木单抗(WO 2000/037504等)。例如，在临床前研究中，为了证实与本发明中使用的抗GARP抗体的组合效果的目的，可以使用市售的用于研究的抗CTLA-4抗体(例如克隆9H10)。
本发明中使用的免疫检查点抑制剂包括多特异性抗体。这种多特异性分子包括但不限于IgG型多特异性分子，具有两种或更多种类型的可变区的多特异性分子，例如，抗体片段诸如串联scFv，单链双抗体，双抗体和三抗体，和通过共价结合或非共价结合连接的抗体片段。所述多特异性分子可以含有Fc。具体地，其实例可以包括但不限于包含两种或更多种选自抗PD-1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L2抗体或其抗原结合片段、以及抗CTLA-4抗体或其抗原结合片段的抗体或其抗原结合片段的多特异性抗体，更优选包含抗PD-1抗体或其抗原结合片段和抗CTLA-4抗体或其抗原结合片段的双特异性抗体。
在本发明中，“免疫诱导剂”的实例可以优选地包括但不特别限于放射疗法(辐射放射)、化学放射疗法和化学治疗剂。在本发明中，“化学治疗剂”是指引发抗肿瘤免疫(诸如除去Treg或减少髓源性抑制细胞(MDSC)的数量)的药物。其实例包括但不限于舒尼替尼、环磷酰胺、奥沙利铂、顺铂、多柔比星、米托蒽醌、柔红霉素、甲氨蝶呤、吉西他滨、多西他赛、紫杉醇、长春新碱、卡铂、长春瑞滨、厄洛替尼、伊马替尼、尼洛替尼、达沙替尼、索拉非尼、硼替佐米、ABT-737、5-FU、替莫唑胺和达卡巴嗪(Nat Rev Drug Discov. 2012 Feb 3; 11(3):215-33, Front Immunol. 2019 Jul 17; 10: 1654, Clin Cancer Res 2009; 15: 2148-2157, Cancer Immunol Immunother (2007) 56: 641-648)。
在本发明中，“免疫刺激剂”的实例可以优选包括但不特别限于激动剂抗体和佐剂。
3.药剂
在下文中，将描述其中组合施用根据本发明的抗GARP抗体和免疫调节剂的药物组合物和治疗方法，以及其中含有根据本发明的抗GARP抗体的药物组合物和治疗方法，并且所述药物组合物和治疗方法用于治疗通过活化抗肿瘤免疫的作用而改善的疾病中。
在本发明的药物组合物和治疗方法中，抗GARP抗体和免疫调节剂可以作为活性成分包含在分开的制剂中，或者抗GARP抗体可以与使用免疫调节剂的放射疗法或化学放射疗法组合，并且抗GARP抗体和免疫调节剂可以同时或不同时施用。抗GARP抗体和免疫调节剂可以作为活性成分包含在单一制剂中并施用。或者，根据本发明的抗GARP抗体可以作为活性成分之一包含在单一制剂中，并施用以用于治疗通过活化抗肿瘤免疫的作用而改善的疾病。
在本发明中，短语“增加抗体的效果”意指与施用作为单一药剂的抗体的情况相比，抗肿瘤效果加强。
在本发明中，短语“增加免疫调节剂的效果”意指与施用作为单一药剂的免疫调节剂的情况相比，抗肿瘤免疫活化效果加强。
本发明的药物组合物和治疗方法可用于治疗癌症，且优选可用于治疗至少一种选自以下的疾病：肺癌、肾癌、尿路上皮癌、大肠癌、***癌、多形性胶质母细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、肝癌、膀胱癌、胃癌、食道癌、头颈癌、血癌、皮肤癌、甲状腺癌、胆道癌、唾液腺癌、小肠癌、肾上腺癌、卵巢癌、子***、子宫内膜癌、子宫肉瘤、胸腺瘤、间皮瘤、肉瘤及其转移形式。更优选地，所述药物组合物和治疗方法可用于治疗至少一种选自头颈癌、胃癌、食道癌及其转移形式的疾病。
可以选择本发明的药物组合物和治疗方法并用作药物或药物治疗方法，其为癌症的主要治疗，且因此，可以延缓癌细胞的生长，抑制它们的增殖，并进一步破坏癌细胞。这些作用可以使癌症患者免于由癌症引起的症状或实现癌症患者的QOL的改善，并通过维持癌症患者的生命来获得治疗效果。本发明的药物组合物及治疗方法，即使无法破坏癌细胞，也可以通过抑制或控制癌细胞的增殖，实现癌症患者的更高QOL，同时实现长期存活。
本发明的药物组合物和治疗方法可以作为单独的药物或治疗方法用于这种药物中，且此外，还可以作为药物或治疗方法与额外疗法组合用于辅助治疗中，并且可以与外科手术、放射疗法、激素疗法等组合。此外，所述药物组合物和治疗方法可以作为药物用于新辅助疗法中的药物。
除了如上所述的治疗用途以外，还可以预期本发明的药物组合物和治疗方法具有预防效果，诸如抑制和破坏小的转移性癌细胞。例如，可以预期在转移过程中抑制和破坏体液中的癌细胞的效果，或者例如在植入任何组织后立即抑制和破坏小癌细胞的效果。因此，可以预期癌症转移的抑制或预防效果，特别是在手术切除癌症之后。
可以预期本发明的药物组合物和治疗方法通过作为全身疗法应用于患者以及通过局部应用于癌组织来发挥治疗效果。
本发明的药物组合物和治疗方法可以优选用于哺乳动物，并且可以更优选用于人。
本发明的药物组合物可以作为含有一种或多种药学上相容的成分的药物组合物施用。可以根据剂量或施用浓度，从本领域中通常使用的药物添加剂和其他物质适当地选择和应用用于本发明的药物组合物中的物质。所述药物组合物通常含有例如一种或多种药物载体(例如，无菌液体)。在该上下文中，液体包括例如水和油(石油和动物来源、植物来源或合成来源的油)。所述油可以是例如花生油、大豆油、矿物油或芝麻油。当静脉内施用药物组合物时，水是更典型的载体。盐水溶液、右旋糖水溶液和甘油水溶液也可用作液体载体，特别是用于可注射的溶液。合适的药物赋形剂可以适当地选自本领域已知的那些。如果期望，所述组合物还可以含有小量的保湿剂或乳化剂或pH缓冲剂。合适的药物载体的实例描述于E. W. Martin的"Remington's Pharmaceutical Sciences"中。其处方对应于施用形式。
各种递送***是本领域已知的，并且可用于施用本发明的药物组合物。引入途径的实例可以包括但不限于皮内、肌内、腹膜内、静脉内和皮下途径。施用可以基于例如输注或大剂量注射。根据一个特别优选的实施方案，本发明中使用的抗GARP抗体和免疫调节剂通过输注进行施用。肠胃外施用是优选的施用途径。
在一个典型实施方案中，根据常规程序，将药物组合物作为适合于静脉内施用于人的药物组合物开具。用于静脉内施用的组合物通常是无菌和等渗水性缓冲溶液中的溶液。如果必要，所述药物组合物也可以含有增溶剂和局部麻醉剂以用于减轻注射部位处的疼痛(例如，利多卡因)。通常，提供这些成分，例如分开或一起作为单位剂型中的混合物、作为干燥或冷冻干燥粉末或无水浓缩物，在通过在指示活性剂的量的安瓿或小袋中气密密封的容器中。当药物组合物呈通过输注施用的形式时，它可以例如从含有无菌药用级的水或盐水的输注瓶中施用。当通过注射施用药物组合物时，可以提供可注射的无菌水或盐水的安瓿，使得例如在施用前混合成分。
除了根据本发明的抗GARP抗体和免疫调节剂以外，本发明的药物组合物和治疗方法可以含有癌症治疗剂。本发明的药物组合物和治疗方法可以与额外的癌症治疗剂组合用于施用，并且可以由此增强抗肿瘤效果。用于这种目的的额外的癌症治疗剂可以与本发明的药物组合物同时、分开或连续地施用于个体，或者它们的施用可以间隔错开。这种癌症治疗剂的实例可以包括5-氟尿嘧啶(5-FU)、帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、紫杉醇、卡铂、顺铂、吉西他滨、卡培他滨、伊立替康(CPT-11)、多西他赛、培美曲塞、索拉非尼、长春碱、长春瑞滨、依维莫司、坦螺旋霉素、贝伐单抗、奥沙利铂、拉帕替尼、曲妥珠单抗-恩美坦新(T-DM1)和WO2003/038043中描述的药物，和此外，LH-RH类似物(亮丙瑞林、戈舍瑞林等)、雌莫司汀磷酸盐、***拮抗剂(他莫昔芬、雷洛昔芬等)和芳香酶抑制剂(阿那曲唑、来曲唑、依西美坦等)，但是所述治疗剂不限于此，只要药物具有抗肿瘤活性。
这种药物组合物可以配制成冻干制剂或液体制剂，作为具有选定组成和必要纯度的制剂。为了配制成冻干制剂，该制剂可以含有本领域使用的适当的药物添加剂。同样，液体药剂也可以配制成含有本领域使用的各种药物添加剂的液体制剂。
本发明的药物组合物和治疗方法的抗肿瘤效果可以通过测量免疫刺激活性或肿瘤细胞增殖抑制活性等来证实。抗肿瘤效果也可以通过如下来证实：将肿瘤移植至测试动物来制备模型，然后对其施用本发明的治疗剂或治疗方法。当本发明的抗GARP抗体不结合模型动物中的GARP时，可以使用替代抗体验证本发明的治疗剂和治疗方法的抗肿瘤效果。期望替代抗体应当具有与本发明的抗GARP抗体相同或相似的结合活性或功能特征。
此外，可以使用离体评估***，诸如CANscript (Mitra RxDx, Inc.)来预测效果(Nat Commun. 2015 Feb 27 (6); 6169)。
免疫刺激活性和抗肿瘤效果可以通过WO2017/051888中描述的方法测量。
本发明的药物组合物和治疗方法的抗肿瘤效果也可以在临床试验中得到证实。具体地，向癌症患者施以本发明的治疗剂或治疗方法，并且抗肿瘤效果可以通过实体瘤中应答评估标准(RECIST)评估方法、WHO评估方法、Macdonald评估方法、体重测量或其他方法来证实，并且可以基于指标诸如完全应答(CR)、部分应答(PR)、疾病进展(PD)、客观应答率(ORR)、应答持续时间(DoR)、无进展存活期(PFS)或总体存活期(OS)来确定。
药物组合物的组成和浓度根据施用方法而变化。本发明的药物组合物中含有的抗GARP抗体和免疫调节剂，就对抗原的亲和力(即，对抗原的解离常数(Kd值))而言，当亲和力更高(Kd值更低)时，甚至在较小的剂量下也可以发挥药效。因此，抗GARP抗体和免疫调节剂的剂量可以基于对它们的抗原的亲和程度来设定。对于根据本发明的抗GARP抗体和免疫调节剂对人的施用，例如，可以以每1至180天一次的间隔施用近似0.001至100 mg/kg一次或多次。
用于施用本发明的抗GARP抗体的方法的实例可以包括施用0.01 mg/kg至100 mg/kg一次或两次或更多次的方法。剂量的实例可以包括0.01 mg/kg、0.03 mg/kg、0.1 mg/kg、0.3 mg/kg、1 mg/kg、3 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg、30.0 mg/kg和100 mg/kg。可以每周一次(q1w)、每两周一次(q2w)、每三周一次(q3w)或每四周一次(q4w)进行施用。施用方法的优选实例包括以每三周一次的间隔施用0.3 mg/kg、1 mg/kg、3 mg/kg或10 mg/kg的本发明的抗体一次或两次或更多次。
本发明中使用的免疫检查点抑制剂可以静脉内施用(例如，通过静脉内滴注)，例如，以每剂近似1至20 mg/kg(体重)或每剂近似80至1500 mg，经近似30分钟、近似60分钟、近似90分钟、近似30分钟或更长时间或近似60分钟或更长时间，间隔为2至6周。基于体重的每次施用的剂量的实例包括1 mg/kg、2 mg/kg、3 mg/kg、4 mg/kg、5 mg/kg、6 mg/kg、7 mg/kg、8 mg/kg、9 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg。每次施用的剂量的实例包括80 mg、200 mg、240 mg、250 mg、280 mg、300 mg、320 mg、350 mg、360 mg、400 mg、420 mg、450 mg、480 mg、500 mg、540 mg、560 mg、600 mg、640 mg、700 mg、720 mg、750 mg、800 mg、840 mg、900 mg、1000 mg、1080 mg、1100 mg、1120 mg、1200 mg和1500 mg。施用间隔的实例包括2周、3周、4周和6周。一次施用的时间的实例包括近似30分钟、近似60分钟、近似90分钟、近似30分钟或更长、以及近似60分钟或更长时间。
给出这些剂量和施用是为了举例说明而不限于此。
当本发明中使用的抗PD-1抗体是纳武单抗时，施用方法的实例包括但不限于以下剂量和施用。例如，每剂2 mg/kg(体重)的纳武单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用，或每剂3 mg/kg(体重)的纳武单抗以2周间隔通过静脉内滴注施用。
作为另一种剂量和施用，每剂1 mg/kg(体重)的纳武单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用四次，且然后，每剂3 mg/kg(体重)的纳武单抗以2周间隔通过静脉内滴注施用。
作为一种替代剂量和施用，每剂3 mg/kg(体重)的纳武单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用四次，且然后，每剂3 mg/kg(体重)的纳武单抗以2周间隔通过静脉内滴注施用。
作为一种替代剂量和施用，例如，每剂240 mg的纳武单抗以2周间隔通过静脉内滴注施用，或每剂480 mg的纳武单抗以4周间隔通过静脉内滴注施用。
作为一种替代剂量和施用，例如，每剂80 mg的纳武单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用四次，且然后，每剂240 mg的纳武单抗以2周间隔通过静脉内滴注施用，或每剂480mg的纳武单抗以4周间隔通过静脉内滴注施用。
作为一种替代剂量和施用，例如，每剂240 mg的纳武单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用四次，且然后，每剂240 mg的纳武单抗以2周间隔通过静脉内滴注施用，或每剂480mg的纳武单抗以4周间隔通过静脉内滴注施用。
纳武单抗可以通过静脉内滴注经30分钟或更长时间施用。
对于术后辅助疗法，施用时段可以是，例如，长达12个月。
当本发明中使用的抗PD-1抗体是派姆单抗时，施用方法的实例包括但不限于以下剂量和施用。例如，每剂2 mg/kg(体重)的派姆单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用。
作为另一种剂量和施用，每剂10 mg/kg(体重)的派姆单抗以2周间隔通过静脉内滴注施用。
作为一种替代剂量和施用，每剂10 mg/kg(体重)的派姆单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用。
作为一种替代剂量和施用，例如，每剂200 mg的派姆单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用，或每剂400 mg的派姆单抗以6周间隔通过静脉内滴注施用。例如，每剂200 mg的派姆单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用，且每剂200 mg的派姆单抗以3周间隔通过静脉内滴注持续施用。
派姆单抗可以通过静脉内滴注例如经30分钟进行施用。因此，作为一种替代剂量和施用，例如，每剂200 mg的派姆单抗以3周间隔经30分钟通过静脉内滴注施用，或每剂400mg的派姆单抗以6周间隔经30分钟通过静脉内滴注施用。
对于术后辅助疗法，施用时段可以是，例如，长达12个月。
当本发明中使用的抗PD-L1抗体是阿特珠单抗时，施用方法的实例包括但不限于以下剂量和施用。例如，每剂1200 mg的阿特珠单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用。
作为另一种剂量和施用，每剂840 mg的阿特珠单抗以2周间隔通过静脉内滴注施用。
作为一种替代剂量和施用，例如，每剂1200 mg的阿特珠单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用，且然后每剂1200 mg的阿特珠单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用。
阿特珠单抗可以通过静脉内滴注例如经60分钟进行施用。因此，例如，每剂1200mg的阿特珠单抗以3周间隔经60分钟通过静脉内滴注施用，或每剂840 mg的阿特珠单抗以2周间隔经60分钟通过静脉内滴注施用。
如果初始施用的耐受性是有利的，则第二次或后来的施用时间可以缩短至长达30分钟。
当本发明中使用的抗PD-L1抗体是德瓦鲁单抗时，施用方法的实例包括但不限于以下剂量和施用。例如，每剂10 mg/kg(体重)的德瓦鲁单抗以2周间隔通过静脉内滴注施用。
作为另一种剂量和施用，例如，每剂1500 mg的德瓦鲁单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用四次，且然后每剂1500 mg的德瓦鲁单抗以4周间隔通过静脉内滴注施用。
德瓦鲁单抗可以通过静脉内滴注经60分钟或更长时间进行施用。因此，作为一种替代剂量和施用，例如，每剂10 mg/kg(体重)的德瓦鲁单抗以2周间隔经60分钟或更长时间通过静脉内滴注施用。作为一种替代剂量和施用，例如，每剂1500 mg的德瓦鲁单抗以3周间隔经60分钟或更长时间通过静脉内滴注施用四次，且然后每剂1500 mg的德瓦鲁单抗以4周间隔经60分钟或更长时间通过静脉内滴注施用。
30 kg或更低的体重的单剂量可以是20 mg/kg(体重)。
当本发明中使用的抗PD-L1抗体是阿维鲁单抗时，施用方法的实例包括但不限于以下剂量和施用。例如，每剂10 mg/kg(体重)的阿维鲁单抗以2周间隔通过静脉内滴注施用。
阿维鲁单抗可以通过静脉内滴注经1小时或更长时间进行施用。因此，作为一种替代剂量和施用，例如，每剂10 mg/kg(体重)的阿维鲁单抗以2周间隔经1小时或更长时间通过静脉内滴注施用。
当本发明中使用的抗CTLA-4抗体是伊匹单抗时，施用方法的实例包括但不限于以下剂量和施用。例如，每剂3 mg/kg(体重)的伊匹单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用四次。
作为另一种替代剂量和施用，例如，每剂1 mg/kg(体重)的伊匹单抗以3周间隔通过静脉内滴注施用四次。
伊匹单抗可以通过静脉内滴注经30分钟或90分钟进行施用。
本发明还包括本发明的抗体用于制备用于癌症治疗的药物组合物的用途、本发明的抗体用于癌症治疗的用途、以及包含本发明的抗体的用于癌症治疗的试剂盒。
实施例
在下文中，将参考实施例具体描述本发明。然而，本发明不限于这些实施例。这些实施例决不以限制的方式进行解释。
参考例1. 抗GARP抗体的制备
根据WO2017/051888中描述的生产方法制备抗GARP抗体h151D_H1L1、h151D_H4L4和h198D_H3L4。
实施例1. 抗GARP抗体和抗PD-1抗体对Teff细胞增殖活化的组合作用
1)-1 Treg、Teff和辅助细胞的制备
CD4-阳性T细胞分离自健康供体的外周血单核细胞(PBMC)，且然后通过添加荧光标记的抗CD4抗体和抗CD25抗体进行染色。通过使用流式细胞仪的分选收集CD4-阳性和CD25-阴性(Teff)细胞以及CD4-阳性和CD25-强阳性(Treg)细胞。
在从PBMC除去CD3-阳性细胞后，通过以0.35 C/kg的曝光剂量用X射线辐射来制备辅助细胞。
1)-2 共培养测定
将Teff细胞(2000个细胞/孔)和辅助细胞(20000个细胞/孔)混合。然后，以1000、500、250或125个细胞/孔进一步添加Treg细胞。在抗CD3抗体和抗CD28抗体(各自1 nM)存在的情况下，向其中以各1 μg/mL (最终浓度)添加抗GARP抗体(h151D_H1L1)和抗PD-1抗体(纳武单抗)，并且细胞在5% CO2的条件下在37℃下培养5天。然后，向其中添加[3H]-胸苷(最终浓度：18.5 kBq/mL)，并且进一步继续培养20小时。在细胞回收后，使用闪烁计数器测量每个孔中[3H]-胸苷的细胞内摄取值作为每分钟的校正计数(CCPM)。
图11-1和11-2显示四个供体中的每一个在各自的培养条件下吸收至细胞中的[3H]-胸苷的量的平均值和标准偏差(6孔/组)。随着Treg细胞与Teff细胞的比率的增加，吸收至细胞中的[3H]-胸苷的量减少，显示Treg细胞抑制了Teff细胞的增殖。此外，显示吸收至细胞中的[3H]-胸苷的量在h151D_H1L1治疗组和纳武单抗治疗组中增加，并且在组合组中进一步增加。因此，证实了抗GARP抗体和抗PD-1抗体的组合效果。
1)-3相对活性的计算和统计分析
对于每个供体，计算相对于1)-2中获得的培养基对照组中Teff:Treg=1:0 (不添加Treg细胞)的平均计数的平均计数。当培养基中Teff细胞和Treg细胞之间的比率(Teff:Treg)为1:0、1:1/16、1:1/8、1:1/4和1:1/2的情况下获得的相对平均计数为分别定义为A、B、C、D和E时，根据以下表达式确定相对AUC。
Figure DEST_PATH_IMAGE001
通过参数Dunnett氏检验(SAS System Release 9.2，SAS Institute Inc.)，使用获得的四个供体对于h151D_H1L1治疗组和纳武单抗治疗组vs.培养基对照组(作为受试者组)以及对于h151D_H1L1治疗组和纳武单抗治疗组vs.组合组(作为受试者组)的相对AUC值，进行统计分析。
图12显示四个供体的相对AUC值及其平均值。与培养基对照组相比，在h151D_H1L1治疗组(P=0.0102)和纳武单抗治疗组(P=0.0065)中发现相对AUC值(其为Teff细胞增殖活化的指标)的显著增加。此外，与h151D_H1L1治疗组(P=0.0123)和纳武单抗治疗组(P=0.0180)相比，在组合组中发现其中的显著增加。对照IgG治疗组的平均相对AUC是培养基对照组的1.08倍。
实施例2. 使用CANscript(R)预测当组合抗GARP抗体和抗PD-1抗体时的临床效力
CANscript(R) (Mitra RxDx, Inc. (下文中称为Mitra))是使用癌症患者来源的癌组织的离体培养模型，并且用于癌症患者来源的癌组织(其维持癌症微环境结构，并且含有基质细胞、免疫细胞和癌细胞)以及来自与其相同患者的血清和PBMC的共培养测试(NatCommun. 2015 Feb 27 (6); 6169)。在共培养3天后，基于病理组织图像和代谢活性来定量癌组织对药物的应答。具体地，通过Ki67和活化胱天蛋白酶-3的免疫化学染色来评估细胞增殖和凋亡诱导，并通过H&E (苏木精-伊红)染色来评估细胞形态的变化。此外，时间依赖性定量通过使用市售的代谢活性和细胞存活率测定试剂盒评估培养上清液来实施。使用由Mitra开发的学习算法(SVMpAUC算法)对所有这些评估结果进行评分(M-评分)。SVMpAUC能够通过比较学习在相同患者中临床获得的实际药物应答与从CANscript获得的定量结果来预测每种药物的临床效力。迄今为止，已经分析了来自4000例或更多病例的数据，并且对于高于25的M-评分，临床上指示CR(完全应答)或PR(部分应答)的概率(阳性预测值)为87%。
使用从20个头颈部鳞状细胞癌患者获得的样品，通过CANscript测定评估和预测抗GARP抗体(h151D_H1L1)、抗PD-1抗体(纳武单抗)以及与纳武单抗组合的h151D_H1L1的临床效力。在开始共培养之前，使用NanoString IO360组，通过RNA表达分析来分析浸润至癌组织中的免疫细胞的比例和组成。作为结果，患者间的免疫学概况差异很大。当h151D_H1L1和纳武单抗各自单独作用于源自头颈鳞状细胞癌患者的这些不同样品时，表现出大于25的M-评分的患者样品的比例分别为20% (4/20)和15% (3/20)。相比之下，当组合h151D_H1L1和纳武单抗时，比例增加至30% (6/20)。因此，预测抗GARP抗体和抗PD-1抗体对头颈鳞状细胞癌的组合作用(图13)。
实施例3：使用CT26.WT皮下移植小鼠模型的抗肿瘤测试和肿瘤浸润性白细胞(TIL)分析
3)-1抗GARP替代抗体和抗PD-1替代抗体在抗肿瘤测试中的组合作用
将购自美国典型培养物保藏中心(ATCC)的小鼠大肠癌细胞系CT26.WT悬浮于生理盐水中，并以2.0 X 105个细胞皮下移植至雌性CD2F1小鼠(Charles River LaboratoriesJapan, Inc.)的右腹部区域中(第0天)。在第3天和第6天，向其施用抗小鼠PD-1抗体(5 mg/kg)。在第9天，将小鼠随机分组(对于每组，n=9)。在第9天和第16天，将抗小鼠GARP抗体(1mg/kg)和抗小鼠PD-1抗体(5 mg/kg)施用于它们各自的单一药剂施用组和组合组。对照组在第9天和第16天不经历药物治疗。每种抗体用D-PBS稀释，并且稀释液以10 mL/kg的量经由尾静脉施用。使用电子数显卡尺(Mitutoyo Corp.)每周两次测量各肿瘤的长轴和短轴，并根据以下计算表达式计算估计的肿瘤体积。
[表达式1]
估计的肿瘤体积(mm3)= 1 / 2 X长轴(mm) X [短轴(mm)]2
与抗小鼠PD-1抗体单一施用组相比，抗小鼠PD-1抗体/抗小鼠GARP抗体组合组在第20天表现出对估计的肿瘤体积(平均值 ± 标准偏差)的显著的抗肿瘤效果。
3)-2抗GARP替代抗体和抗PD-1替代抗体对TIL的组合作用
将CT26.WT悬浮于生理盐水中，并以2.0 X 105个细胞皮下移植至雌性CD2F1小鼠的右腹部区域中(第0天)。在第6天，将小鼠随机分组(对于每组，n = 10)。在第6天和第10天，将抗小鼠GARP抗体(1 mg/kg)和抗小鼠PD-1抗体(5 mg/kg)施用于它们各自的单一药剂施用组和组合组。对照组不经历药物治疗。每种抗体用D-PBS稀释，并且稀释液以10 mL/kg的量经由尾静脉施用。在第14天，切除各肿瘤并研磨以获得TIL。通过流式细胞术分析，确定CD8-阳性T细胞群体中可诱导的T-细胞共刺激(ICOS)-阳性细胞的比率(%)，作为针对癌症的免疫活化的指标。与每种单一药剂组相比，在组合组中发现ICOS-阳性CD8-阳性T细胞的比率的显著增加。在这方面，证实CD4-阳性T细胞中的GARP-阳性Treg (GARP-阳性、FOXP3-阳性和CD4-阳性T细胞)的比率(平均 ± 标准偏差)在抗小鼠GARP抗体施用组中显著降低和抗小鼠PD-1抗体施用组中显著增加。与对照组相比，该比率在组合组中显著降低。
3)-3抗GARP替代抗体和抗PD-L1替代抗体在抗肿瘤测试中的组合作用
将CT26.WT悬浮于生理盐水中，并以2.0 X 105个细胞皮下移植至雌性CD2F1小鼠的右腹部区域中(第0天)。在第6天，将小鼠随机分组(对于每组，n = 10)。在第6天和第11天，将抗小鼠GARP抗体(1 mg/kg)和抗小鼠PD-L1抗体(10 mg/kg)施用于它们各自的单一药剂施用组和组合组。对照组不经历药物治疗。每种抗体用D-PBS稀释，并且稀释液以10 mL/kg的量经由尾静脉施用。使用电子数显卡尺每周两次测量各肿瘤的长轴和短轴，并根据以下计算表达式计算估计的肿瘤体积。
[表达式2]
估计的肿瘤体积(mm3)= 1 / 2 X长轴(mm) X [短轴(mm)]2
经证实，在第18天，与抗GARP抗体和抗PD-L1抗体各自的单一药剂组相比，组合组中的估计的肿瘤体积减小。
实施例4：使用MC38皮下移植的小鼠模型的抗肿瘤测试
4)-1抗GARP替代抗体和抗PD-1替代抗体的组合作用
将获得自美国国立癌症研究所(NCI)的小鼠大肠癌细胞系MC38悬浮于生理盐水中，并以5.0 X 105个细胞皮下移植至雌性C57BL/6小鼠(Charles River LaboratoriesJapan, Inc.)的右腹部区域中(第0天)。在第4天，将小鼠随机分组(对于每组，n = 10)。在第4天和第10天，将抗小鼠GARP抗体(1 mg/kg)和抗小鼠PD-1抗体(1 mg/kg)施用于它们各自的单一药剂施用组和组合组。对照组不经历药物治疗。每种抗体用D-PBS稀释，并且稀释液以10 mL/kg的量经由尾静脉施用。使用电子数显卡尺每周两次测量各肿瘤的长轴和短轴，并根据以下计算表达式计算估计的肿瘤体积。
[表达式3]
估计的肿瘤体积(mm3)= 1 / 2 X长轴(mm) X [短轴(mm)]2
经证实，在第18天，与抗GARP抗体和抗PD-1抗体各自的单一药剂组相比，组合组中的估计的肿瘤体积减小。
4)-2抗GARP替代抗体和抗CTLA-4替代抗体的组合作用
将MC38悬浮于生理盐水中，并以5.0 X 105个细胞皮下移植至雌性C57BL/6小鼠的右腹部区域中(第0天)。在第4天，将小鼠随机分组(对于每组，n = 10)。在第4天和第11天，将抗小鼠GARP抗体(1 mg/kg)施用于它们各自的单一药剂施用组和组合组，并且在第4天、第7天、第11天和第14天，将抗小鼠CTLA-4抗体(10 mg/kg)施用于它们各自的单一药剂施用组和组合组。每种抗体用D-PBS稀释，并且稀释液以10 mL/kg的量经由尾静脉施用。对照组不经历药物治疗。使用电子数显卡尺每周两次测量各肿瘤的长轴和短轴，并根据以下计算表达式计算估计的肿瘤体积。
[表达式4]
估计的肿瘤体积(mm3)= 1 / 2 X长轴(mm) X [短轴(mm)]2
经证实，在第18天，与抗GARP抗体和抗CTLA4抗体各自的单一药剂组相比，组合组中的估计的肿瘤体积减小。
产业适用性
使用本发明的抗GARP抗体使得能够治疗或预防各种癌症。
序列表的自由文本
SEQ ID NO:1: GARP的氨基酸序列
SEQ ID NO:2: 编码151D的重链可变区的cDNA的核苷酸序列
SEQ ID NO:3: 151D的重链可变区的氨基酸序列
SEQ ID NO:4: 编码151D的轻链可变区的cDNA的核苷酸序列
SEQ ID NO:5: 151D的轻链可变区的氨基酸序列
SEQ ID NO:6: 编码198D的重链可变区的cDNA的核苷酸序列
SEQ ID NO:7: 198D的重链可变区的氨基酸序列
SEQ ID NO:8: 编码198D的轻链可变区的cDNA的核苷酸序列
SEQ ID NO:9: 198D的轻链可变区的氨基酸序列
SEQ ID NO:10: 含有编码人轻链信号序列和人κ链恒定区的氨基酸序列的序列的DNA片段的核苷酸序列
SEQ ID NO:11: 含有编码人重链信号序列和人IgG1恒定区的序列的DNA片段的核苷酸序列
SEQ ID NO:12: 人嵌合抗体c151D的重链的核苷酸序列
SEQ ID NO:13: 人嵌合抗体c151D的重链的氨基酸序列
SEQ ID NO:14: 人嵌合抗体c151D的轻链的核苷酸序列
SEQ ID NO:15: 人嵌合抗体c151D的轻链的氨基酸序列
SEQ ID NO:16: 人嵌合抗体c198D的重链的核苷酸序列
SEQ ID NO:17: 人嵌合抗体c198D的重链的氨基酸序列
SEQ ID NO:18: 人嵌合抗体c198D的轻链的核苷酸序列
SEQ ID NO:19: 人嵌合抗体c198D的轻链的氨基酸序列
SEQ ID NO:20: 人源化抗体的h151D-H1的核苷酸序列
SEQ ID NO:21: 人源化抗体的h151D-H1的氨基酸序列
SEQ ID NO:22: 人源化抗体的h151D-H4的核苷酸序列
SEQ ID NO:23: 人源化抗体的h151D-H4的氨基酸序列
SEQ ID NO:24: 人源化抗体的h151D-L1的核苷酸序列
SEQ ID NO:25: 人源化抗体的h151D-L1的氨基酸序列
SEQ ID NO:26: 人源化抗体的h151D-L4的核苷酸序列
SEQ ID NO:27: 人源化抗体的h151D-L4的氨基酸序列
SEQ ID NO:28: 人源化抗体的h198D-H3的核苷酸序列
SEQ ID NO:29: 人源化抗体的h198D-H3的氨基酸序列
SEQ ID NO:30: 人源化抗体的h198D-L4的核苷酸序列
SEQ ID NO:31: 人源化抗体的h198D-L4的氨基酸序列。
Figure IDA0003612204590000011
Figure IDA0003612204590000021
Figure IDA0003612204590000031
Figure IDA0003612204590000041
Figure IDA0003612204590000051
Figure IDA0003612204590000061
Figure IDA0003612204590000071
Figure IDA0003612204590000081
Figure IDA0003612204590000091
Figure IDA0003612204590000101
Figure IDA0003612204590000111
Figure IDA0003612204590000121
Figure IDA0003612204590000131
Figure IDA0003612204590000141
Figure IDA0003612204590000151
Figure IDA0003612204590000161
Figure IDA0003612204590000171
Figure IDA0003612204590000181
Figure IDA0003612204590000191
Figure IDA0003612204590000201
Figure IDA0003612204590000211
Figure IDA0003612204590000221
Figure IDA0003612204590000231
Figure IDA0003612204590000241
Figure IDA0003612204590000251
Figure IDA0003612204590000261
Figure IDA0003612204590000271
Figure IDA0003612204590000281
Figure IDA0003612204590000291
Figure IDA0003612204590000301
Figure IDA0003612204590000311
Figure IDA0003612204590000321
Figure IDA0003612204590000331
Figure IDA0003612204590000341
Figure IDA0003612204590000351
Figure IDA0003612204590000361
Figure IDA0003612204590000371
Figure IDA0003612204590000381
Figure IDA0003612204590000391

Claims (55)

1.用于癌症治疗的药物组合物，其包含具有以下特征(1)至(3)的抗体或其抗原结合片段以及免疫调节剂，其组合施用：
(1) 特异性结合糖蛋白-A为主的重复(GARP)，
(2) 具有针对调节性T细胞的免疫抑制功能的抑制活性，和
(3) 具有抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)活性。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述抗体具有体内抗肿瘤活性。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述抗体包含如以下(1)或(2)中所述的包含CDRH1、CDRH2和CDRH3的重链和包含CDRL1、CDRL2和CDRL3的轻链：
(1)由如SEQ ID NO:13的氨基酸位置45至54中所示的氨基酸序列组成的CDRH1、由如SEQ ID NO:13的氨基酸位置69至78中所示的氨基酸序列组成的CDRH2和由如SEQ ID NO:13的氨基酸位置118至125中所示的氨基酸序列组成的CDRH3，以及由如SEQ ID NO:15的氨基酸位置44至54中所示的氨基酸序列组成的CDRL1、由如SEQ ID NO:15的氨基酸位置70至76中所示的氨基酸序列组成的CDRL2和由如SEQ ID NO:15的氨基酸位置109至117中所示的氨基酸序列组成的CDRL3，或
(2)由如SEQ ID NO:17的氨基酸位置45至54中所示的氨基酸序列组成的CDRH1、由如SEQ ID NO:17的氨基酸位置69至77中所示的氨基酸序列组成的CDRH2和由如SEQ ID NO:17的氨基酸位置117至128中所示的氨基酸序列组成的CDRH3，以及由如SEQ ID NO:19的氨基酸位置44至54中所示的氨基酸序列组成的CDRL1、由如SEQ ID NO:19的氨基酸位置70至76中所示的氨基酸序列组成的CDRL2和由如SEQ ID NO:19的氨基酸位置109至117中所示的氨基酸序列组成的CDRL3。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体包含如以下(1)至(3)中任一者中所述的重链可变区和轻链可变区：
(1)由如SEQ ID NO:21的氨基酸位置20至136中所示的氨基酸序列组成的重链可变区和由如SEQ ID NO:25的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区，
(2)由如SEQ ID NO:23的氨基酸位置20至136中所示的氨基酸序列组成的重链可变区和由如SEQ ID NO:27的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区，或
(3)由如SEQ ID NO:29的氨基酸位置20至139中所示的氨基酸序列组成的重链可变区和由如SEQ ID NO:31的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体是嵌合抗体。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体是人源化抗体。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体包含人IgG1、人IgG2或人IgG4的重链恒定区。
8.根据权利要求6或7所述的药物组合物，其中所述抗体包含如以下(1)至(3)中任一者中所述的重链和轻链：
(1)具有如SEQ ID NO:21的氨基酸位置20至466中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:25的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链，
(2)具有如SEQ ID NO:23的氨基酸位置20至466中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:27的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链，或
(3)具有如SEQ ID NO:29的氨基酸位置20至469中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:31的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链。
9.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述抗体与根据权利要求2至8中任一项所述的抗体竞争结合GARP。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体包含一种或两种或更多种选自以下的修饰：N-连接糖基化、O-连接糖基化、N-末端加工、C-末端加工、脱酰胺化、天冬氨酸的异构化、甲硫氨酸的氧化、N-末端添加甲硫氨酸残基、脯氨酸残基的酰胺化和在重链的羧基末端缺失一个或两个氨基酸残基。
11.根据权利要求10所述的药物组合物，其中在重链的羧基末端缺失一个或几个氨基酸残基。
12.根据权利要求10或11所述的药物组合物，其中在两条重链的羧基末端均缺失一个氨基酸残基。
13.根据权利要求10至12中任一项所述的药物组合物，其中所述重链的羧基末端脯氨酸残基进一步被酰胺化。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的药物组合物，其中所述免疫调节剂是抗PD-1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L2抗体或其抗原结合片段、抗CTLA-4抗体或其抗原结合片段、包含这些抗体或其抗原结合片段中的任一种的多特异性抗体、放射疗法、化学放射疗法、化学治疗剂或其组合。
15.根据权利要求14所述的药物组合物，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗、派姆单抗、兰博利珠单抗、MK-3475、AMP-224、匹地利珠单抗或LOPD18。
16.根据权利要求14所述的药物组合物，其中所述抗PD-L1抗体是阿特珠单抗、德瓦鲁单抗或阿维鲁单抗。
17.根据权利要求14所述的药物组合物，其中所述抗CTLA-4抗体是伊匹单抗或曲美木单抗。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的用于癌症治疗的药物组合物，其中所述抗体和所述免疫调节剂作为活性成分包含在分开的制剂中，并且同时或不同时施用。
19.包含根据权利要求1至13中任一项所述的抗体的用于癌症治疗的药物组合物，其将与免疫调节剂组合。
20.包含根据权利要求1至13中任一项所述的抗体的用于癌症治疗的药物组合物，其用于治疗给予免疫调节剂的癌症患者。
21.包含免疫调节剂的用于癌症治疗的药物组合物，其中所述药物组合物与根据权利要求1至13中任一项所述的抗体组合，由此增加所述抗体的效果。
22.包含免疫调节剂的用于癌症治疗的药物组合物，其将与根据权利要求1至13中任一项所述的抗体组合。
23.包含免疫调节剂的用于癌症治疗的药物组合物，其用于治疗给予根据权利要求1至13中任一项所述的抗体的癌症患者。
24.包含根据权利要求1至13中任一项所述的抗体的用于癌症治疗的药物组合物，其中所述药物组合物与免疫调节剂组合，由此增加所述免疫调节剂的效果。
25.根据权利要求1至24中任一项所述的药物组合物，其用于治疗至少一种选自以下的癌症：肺癌、肾癌、尿路上皮癌、大肠癌、***癌、多形性胶质母细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、肝癌、膀胱癌、胃癌、食道癌、头颈癌、血癌、皮肤癌、甲状腺癌、胆道癌、唾液腺癌、小肠癌、肾上腺癌、睾丸癌、子***、子宫内膜癌、子宫肉瘤、胸腺瘤、间皮瘤、肉瘤及其转移形式。
26.用于治疗癌症的方法，其包括组合施用具有以下特征(1)至(3)的抗体或其抗原结合片段以及免疫调节剂：
(1) 特异性结合糖蛋白-A为主的重复(GARP)，
(2) 具有针对调节性T细胞的免疫抑制功能的抑制活性，和
(3) 具有抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)活性。
27.根据权利要求26所述的方法，其中所述抗体具有体内抗肿瘤活性。
28.根据权利要求26或27所述的方法，其中所述抗体包含如以下(1)或(2)中所述的包含CDRH1、CDRH2和CDRH3的重链和包含CDRL1、CDRL2和CDRL3的轻链：
(1)由如SEQ ID NO:13的氨基酸位置45至54中所示的氨基酸序列组成的CDRH1、由如SEQ ID NO:13的氨基酸位置69至78中所示的氨基酸序列组成的CDRH2和由如SEQ ID NO:13的氨基酸位置118至125中所示的氨基酸序列组成的CDRH3，以及由如SEQ ID NO:15的氨基酸位置44至54中所示的氨基酸序列组成的CDRL1、由如SEQ ID NO:15的氨基酸位置70至76中所示的氨基酸序列组成的CDRL2和由如SEQ ID NO:15的氨基酸位置109至117中所示的氨基酸序列组成的CDRL3，或
(2)由如SEQ ID NO:17的氨基酸位置45至54中所示的氨基酸序列组成的CDRH1、由如SEQ ID NO:17的氨基酸位置69至77中所示的氨基酸序列组成的CDRH2和由如SEQ ID NO:17的氨基酸位置117至128中所示的氨基酸序列组成的CDRH3，以及由如SEQ ID NO:19的氨基酸位置44至54中所示的氨基酸序列组成的CDRL1、由如SEQ ID NO:19的氨基酸位置70至76中所示的氨基酸序列组成的CDRL2和由如SEQ ID NO:19的氨基酸位置109至117中所示的氨基酸序列组成的CDRL3。
29.根据权利要求26至28中任一项所述的方法，其中所述抗体包含如以下(1)至(3)中任一者中所述的重链可变区和轻链可变区：
(1)由如SEQ ID NO:21的氨基酸位置20至136中所示的氨基酸序列组成的重链可变区和由如SEQ ID NO:25的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区，
(2)由如SEQ ID NO:23的氨基酸位置20至136中所示的氨基酸序列组成的重链可变区和由如SEQ ID NO:27的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区，或
(3)由如SEQ ID NO:29的氨基酸位置20至139中所示的氨基酸序列组成的重链可变区和由如SEQ ID NO:31的氨基酸位置21至129中所示的氨基酸序列组成的轻链可变区。
30.根据权利要求26至29中任一项所述的方法，其中所述抗体是嵌合抗体。
31.根据权利要求26至29中任一项所述的方法，其中所述抗体是人源化抗体。
32.根据权利要求26至31中任一项所述的方法，其中所述抗体包含人IgG1、人IgG2或人IgG4的重链恒定区。
33.根据权利要求31或32所述的方法，其中所述抗体包含如以下(1)至(3)中任一者中所述的重链和轻链：
(1)具有如SEQ ID NO:21的氨基酸位置20至466中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:25的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链，
(2)具有如SEQ ID NO:23的氨基酸位置20至466中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:27的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链，或
(3)具有如SEQ ID NO:29的氨基酸位置20至469中所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:31的氨基酸位置21至234中所示的氨基酸序列的轻链。
34.根据权利要求26所述的方法，其中所述抗体与根据权利要求27至33中任一项所述的抗体竞争结合GARP。
35.根据权利要求26至34中任一项所述的方法，其中所述抗体包含一种或两种或更多种选自以下的修饰：N-连接糖基化、O-连接糖基化、N-末端加工、C-末端加工、脱酰胺化、天冬氨酸的异构化、甲硫氨酸的氧化、N-末端添加甲硫氨酸残基、脯氨酸残基的酰胺化和在重链的羧基末端缺失一个或两个氨基酸残基。
36.根据权利要求35所述的方法，其中在重链的羧基末端缺失一个或几个氨基酸残基。
37.根据权利要求35或36所述的方法，其中在两条重链的羧基末端均缺失一个氨基酸残基。
38.根据权利要求35至37中任一项所述的方法，其中所述重链的羧基末端脯氨酸残基进一步被酰胺化。
39.根据权利要求26至38中任一项所述的方法，其中所述免疫调节剂是抗PD-1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L1抗体或其抗原结合片段、抗PD-L2抗体或其抗原结合片段、抗CTLA-4抗体或其抗原结合片段、包含这些抗体或其抗原结合片段中的任一种的多特异性抗体、放射疗法、化学放射疗法、化学治疗剂或其组合。
40.根据权利要求39所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗、派姆单抗、兰博利珠单抗、MK-3475、AMP-224、匹地利珠单抗或LOPD18。
41.根据权利要求39所述的方法，其中所述抗PD-L1抗体是阿特珠单抗、德瓦鲁单抗或阿维鲁单抗。
42.根据权利要求39所述的方法，其中所述抗CTLA-4抗体是伊匹单抗或曲美木单抗。
43.用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的癌症患者施用有效量的根据权利要求26至38中任一项所述的抗体，其中所述方法与施用免疫调节剂组合。
44.用于治疗给予免疫调节剂的癌症患者的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的根据权利要求26至38中任一项所述的抗体。
45.用于治疗癌症的方法，其与根据权利要求26至38中任一项所述的抗体的施用组合，由此增加所述抗体的效果，所述方法包括向有此需要的患者施用有效量的免疫调节剂。
46.用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的免疫调节剂，其中所述方法与根据权利要求26至38中任一项所述的抗体的施用组合。
47.用于治疗给予根据权利要求26至38中任一项所述的抗体的癌症患者的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的免疫调节剂。
48.用于治疗癌症的方法，其与免疫调节剂的施用组合，由此增加所述免疫调节剂的效果，所述方法包括向有此需要的患者施用有效量的根据权利要求26至38中任一项所述的抗体。
49.根据权利要求26至48中任一项所述的方法，其中所述方法用于治疗至少一种选自以下的癌症：肺癌、肾癌、尿路上皮癌、大肠癌、***癌、多形性胶质母细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、肝癌、膀胱癌、胃癌、食道癌、头颈癌、血癌、皮肤癌、甲状腺癌、胆道癌、唾液腺癌、小肠癌、肾上腺癌、睾丸癌、子***、子宫内膜癌、子宫肉瘤、胸腺瘤、间皮瘤、肉瘤及其转移形式。
50.用于癌症治疗的试剂盒制剂，其包含根据权利要求1至12中任一项所述的抗体和一种或两种或更多种选自以下的免疫调节剂：抗PD-1抗体、抗PD-L1抗体、抗PD-L2抗体和抗CTLA-4抗体。
51.根据权利要求50所述的制剂，其进一步包含使用所述试剂盒的说明书手册。
52.根据权利要求14所述的药物组合物，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗。
53.根据权利要求14所述的药物组合物，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗。
54.根据权利要求39所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗。
55.根据权利要求39所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102176921A (zh) * 2008-08-11 2011-09-07 梅达雷克斯股份有限公司 结合淋巴细胞活化基因3(lag-3)之人类抗体及其用途
WO2016125017A1 (en) * 2015-02-03 2016-08-11 Universite Catholique De Louvain Anti-garp protein and uses thereof
CN108026521A (zh) * 2015-09-24 2018-05-11 第三共株式会社 抗garp抗体
WO2018181425A1 (ja) * 2017-03-29 2018-10-04 塩野義製薬株式会社 癌治療用医薬組成物
CN109195990A (zh) * 2016-03-30 2019-01-11 Musc研究发展基金会 通过靶向糖蛋白a重复优势蛋白(garp)治疗和诊断癌症以及单独或联合提供有效免疫疗法的方法

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL162181A (en) 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
WO1992020791A1 (en) 1990-07-10 1992-11-26 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
DK0605522T3 (da) 1991-09-23 2000-01-17 Medical Res Council Fremgangsmåde til fremstilling af humaniserede antistoffer
ES2227512T3 (es) 1991-12-02 2005-04-01 Medical Research Council Produccion de anticuerpos contra auto-antigenos a partir de repertorios de segmentos de anticuerpos fijados en un fago.
JP3507073B2 (ja) 1992-03-24 2004-03-15 ケンブリッジ アンティボディー テクノロジー リミティド 特異的結合対の成員の製造方法
GB9313509D0 (en) 1993-06-30 1993-08-11 Medical Res Council Chemisynthetic libraries
EP0731842A1 (en) 1993-12-03 1996-09-18 Medical Research Council Recombinant binding proteins and peptides
PT1071700E (pt) 1998-04-20 2010-04-23 Glycart Biotechnology Ag Modificação por glicosilação de anticorpos para melhorar a citotoxicidade celular dependente de anticorpos
ES2340745T3 (es) 1998-12-23 2010-06-08 Pfizer Inc. Anticuerpos monoclonales humanos contra ctla-4.
EP1212422B1 (en) 1999-08-24 2007-02-21 Medarex, Inc. Human ctla-4 antibodies and their uses
CA2785941C (en) 2000-10-06 2017-01-10 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Antibody composition-producing cell
BRPI0213846B8 (pt) 2001-11-01 2021-05-25 Uab Research Foundation composição que compreende um anticorpo que liga especificamente uma dr5 do receptor de trail e um ou mais agentes terapêuticos
PT1583830E (pt) 2003-01-07 2006-11-30 Symphogen As Método para produzir proteínas policlonais recombinantes
CA2970873C (en) 2005-05-09 2022-05-17 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Human monoclonal antibodies to programmed death 1 (pd-1) and methods for treating cancer using anti-pd-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
WO2007133855A2 (en) 2006-03-27 2007-11-22 University Of Maryland Biotechnology Institute Glycoprotein synthesis and remodeling by enzymatic transglycosylation
EP3222634A1 (en) 2007-06-18 2017-09-27 Merck Sharp & Dohme B.V. Antibodies to human programmed death receptor pd-1
PE20120341A1 (es) 2008-12-09 2012-04-24 Genentech Inc Anticuerpos anti-pd-l1 y su uso para mejorar la funcion de celulas t
KR101573109B1 (ko) 2009-11-24 2015-12-01 메디뮨 리미티드 Ｂ７―ｈ１에 대한 표적화된 결합 물질
LT2785375T (lt) 2011-11-28 2020-11-10 Merck Patent Gmbh Anti-pd-l1 antikūnai ir jų panaudojimas
KR20220025174A (ko) * 2013-08-01 2022-03-03 위니베르시트카솔리끄드루뱅 항garp 단백질 항체와 그 용도
EP2832747A1 (en) * 2013-08-01 2015-02-04 Université Catholique de Louvain Anti-GARP protein and uses thereof
WO2018013939A1 (en) * 2016-07-14 2018-01-18 Scholar Rock, Inc. Tgfb antibodies, methods, and uses
GB201707561D0 (en) 2017-05-11 2017-06-28 Argenx Bvba GARP-TGF-beta antibodies
SI3631454T1 (sl) * 2017-05-30 2023-12-29 Bristol-Myers Squibb Company Zdravljenje lag-3 pozitivnih tumorjev
WO2021231732A1 (en) * 2020-05-15 2021-11-18 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to garp

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102176921A (zh) * 2008-08-11 2011-09-07 梅达雷克斯股份有限公司 结合淋巴细胞活化基因3(lag-3)之人类抗体及其用途
WO2016125017A1 (en) * 2015-02-03 2016-08-11 Universite Catholique De Louvain Anti-garp protein and uses thereof
CN108026521A (zh) * 2015-09-24 2018-05-11 第三共株式会社 抗garp抗体
CN109195990A (zh) * 2016-03-30 2019-01-11 Musc研究发展基金会 通过靶向糖蛋白a重复优势蛋白(garp)治疗和诊断癌症以及单独或联合提供有效免疫疗法的方法
WO2018181425A1 (ja) * 2017-03-29 2018-10-04 塩野義製薬株式会社 癌治療用医薬組成物

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ARCE VARGAS 等: "Fc-Optimized Anti-CD25 Depletes Tumor-Infiltrating Regulatory T Cells and Synergizes with PD-1 Blockade to Eradicate Established Tumors", IMMUNITY, vol. 46, pages 577 - 586, XP055487134, DOI: 10.1016/j.immuni.2017.03.013 *

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