CN114354564A - 一种基于荧光猝灭技术的羊肉新鲜度检测方法 - Google Patents

一种基于荧光猝灭技术的羊肉新鲜度检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种基于荧光猝灭技术的羊肉新鲜度检测方法，属于食品无损检测技术领域。该方法利用薄膜荧光传感器，采集并获取羊肉样品在不同贮藏条件(冰温‑1℃、冷藏4℃、中温10℃和常温25℃)下的荧光响应图像，根据不同贮藏条件、贮藏时间下羊肉样品对应的薄膜荧光传感器的响应值，精确判断羊肉的贮藏时间及其新鲜度(一级鲜肉、二级鲜肉和变质肉)，为羊肉在不同贮藏条件下的新鲜度鉴别提供一种新方法。本发明将荧光猝灭技术应用于羊肉新鲜度检测，操作简单、灵敏度高、稳定性好，能够准确、快速、无损地完成羊肉新鲜度的检测任务。

Description

一种基于荧光猝灭技术的羊肉新鲜度检测方法
技术领域
本发明属于食品无损检测技术领域，具体涉及一种基于荧光猝灭技术的羊肉新鲜度检测方法。
背景技术
生活水平的不断提高，畜肉已经成为人们日常消费食品中不可缺少的一部分，而且其消费量在不断增加。畜肉类含有大量的蛋白质、脂肪酸、维生素、矿物质及其他一些生物活性成分。正是由于其含有丰富的营养物质，在加工、贮藏、运输和销售过程中极易受到微生物的污染，导致产品的腐败变质，不仅降低了肉品的营养价值和卫生质量，同时还可能危害消费者的健康。
随着消费者消费习惯的改变和对食品安全问题的重视，肉品新鲜度的检测显得尤为重要，它能够综合反应产品的营养安全性。现如今，肉品新鲜度的评价主要是通过感官检测、理化检测或微生物检测等完成。挥发性盐基氮(Total volatile basic nitrogen,简称TVB-N)是肉类新鲜度检测的重要理化指标，在贮藏过程中由于酶和细菌的作用，蛋白质分解而产生氨及胺类等碱性含氮物质，使肉品质下降。挥发性盐基总氮含量能够直接判断肉品是否符合食用标准，它是GB 2707-2016《食品安全国家标准鲜(冻)畜、禽产品》中规定的唯一理化指标。在贮藏过程中TVB-N含量随着腐败变化而变化，与畜肉新鲜度有明显的对应关系，是衡量肉品新鲜程度的重要指标之一。但是传统的检测TVB-N含量的方法存在分析时间长，操作复杂，样本需要预处理，存在人为误差等缺点；并且肉品储运过程中产生的挥发性化合物成分复杂，目前的无损检测法难以对TVB-N检出；同时，TVB-N易受储运环境如温度、湿度与pH的影响，因此，实现TVB-N的快速无损检测是新鲜度检测领域的一大难题。目前新型的肉品新鲜度检测方法主要有电化学方法、荧光成像技术和红外光谱技术等。然而，由于仪器体积大、成本高，这些方法难以在现场使用。因此在肉品新鲜度检测方面亟待需要开发一种能够快速准确的检测方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种基于荧光猝灭技术的羊肉新鲜度检测方法，该方法能够对原样样本进行实时检测，并且操作简单，便于携带，能够达到快速、无损检测肉品新鲜。
针对上述目的，本发明采用的技术方案由下述步骤组成：
(1)将羊肉放入相应贮藏条件下储藏，在对应采样时间点时将羊肉取出，采集羊肉胴体的背最长肌皮下0～1cm部位的样品；样品采集需要在5分钟内完成，并且采集完后迅速将其余羊肉放回原来的贮藏条件下，以减少温度波动对羊肉新鲜度的影响；
(2)将步骤(1)采集的羊肉样品放置到干燥玻璃集气瓶中，盖好瓶盖并将集气瓶与薄膜荧光传感器连接，待羊肉样品在集气瓶中放置5～10分钟后，打开薄膜荧光传感器开关，调节荧光强度为3000～4000、电压为1.8～3.6V，设置进样时间为2～6s、恢复时间为30～60s、进样次数为10～20次；获得荧光响应图像，选取其中稳定的4～6个样品信号值求平均值，用所得平均值减去空白信号值后的绝对值作为响应值；其中，所述薄膜荧光传感器的荧光薄膜为多氯联苯薄膜。
(3)-1℃贮藏温度下，若响应值小于231，说明羊肉样品是一级鲜肉；响应值大于231、小于323时，羊肉样品是二级鲜肉；响应值大于323时，羊肉样品为变质肉；4℃贮藏温度下，若响应值小于148时，羊肉样品是一级鲜肉；响应值大于148、小于181时，羊肉样品是二级鲜肉；响应值大于181时，羊肉样品为变质肉；10℃贮藏温度下，若响应值小于248，说明羊肉样品是一级鲜肉；响应值大于248、小于310时，羊肉样品是二级鲜肉；响应值大于310时，羊肉样品为变质肉；25℃贮藏温度下，若响应值小于138，说明羊肉样品是一级鲜肉；响应值大于138、小于158时，羊肉样品是二级鲜肉；响应值大于158时，羊肉样品为变质肉。
上述步骤(1)中，优选每个羊肉样品每次采集3份做平行试验，每份8.0～12.0g。
上述步骤(2)中，所述薄膜荧光传感器的荧光薄膜是将1.0×10-4mol/L多氯联苯-环氧乙烷溶液旋涂在玻璃晶片上，然后将玻璃晶片在通风橱中室温风干，并在烘箱中50～55℃烘2～3小时获得。
上述步骤(2)中，优选调节荧光强度为3000～3200、电压为1.8～2.0V，设置进样时间为2～3s、恢复时间为30～40s、进样次数为10～15次；获得荧光响应图像，选取其中稳定的4～6个样品信号值求平均值。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
1、本发明首次使用以多氯联苯为荧光薄膜的传感器，与普通传感器相比，其对胺类物质敏感性强，灵敏度高。
2、本发明所利用的薄膜荧光传感器具有功耗低、体积小便于组装和携带等优点，具有现场传感的独特性，为便携式羊肉新鲜度检测器提供有力的理论依据和技术支撑。
3、针对市场上不同贮藏条件下羊肉新鲜度的检测，可以依据本发明方法判断羊肉新鲜度和贮藏时间。
4、本发明方法适用于各种畜类样品新鲜度检测。
5、本发明操作简单、结果准确、灵敏度高、稳定性好、应用前景广泛，对于畜肉的新鲜度无损检测技术发展具有重要意义。
附图说明
图1是-1℃贮藏条件下羊肉皮下0～1cm传感器响应值测定结果图。
图2是-1℃贮藏条件下羊肉皮下0～1cm挥发性盐基氮含量测定结果图。
图3是-1℃贮藏条件下羊肉皮下0～1cm传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型。
图4是-1℃贮藏条件下羊肉皮下1～2cm传感器响应值测定结果图。
图5是-1℃贮藏条件下羊肉皮下1～2cm挥发性盐基氮含量测定结果图。
图6是-1℃贮藏条件下羊肉皮下1～2cm传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型。
图7是-1℃贮藏条件下羊肉皮下2～3cm传感器响应值测定结果图。
图8是-1℃贮藏条件下羊肉皮下2～3cm挥发性盐基氮含量测定结果图。
图9是-1℃贮藏条件下羊肉皮下2～3cm传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型。
图10是4℃贮藏条件下羊肉皮下0～1cm传感器响应值测定结果图。
图11是4℃贮藏条件下羊肉皮下0～1cm挥发性盐基氮含量测定结果图。
图12是4℃贮藏条件下羊肉皮下0～1cm传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型。
图13是4℃贮藏条件下羊肉皮下1～2cm传感器响应值测定结果图。
图14是4℃贮藏条件下羊肉皮下1～2cm挥发性盐基氮含量测定结果图。
图15是4℃贮藏条件下羊肉皮下1～2cm传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型。
图16是4℃贮藏条件下羊肉皮下2～3cm传感器响应值测定结果图。
图17是4℃贮藏条件下羊肉皮下2～3cm挥发性盐基氮含量测定结果图。
图18是4℃贮藏条件下羊肉皮下2～3cm传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型。
图19是10℃贮藏条件下羊肉皮下0～1cm传感器响应值测定结果图。
图20是10℃贮藏条件下羊肉皮下0～1cm挥发性盐基氮含量测定结果图。
图21是10℃贮藏条件下羊肉皮下0～1cm传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型。
图22是10℃贮藏条件下羊肉皮下1～2cm传感器响应值测定结果图。
图23是10℃贮藏条件下羊肉皮下1～2cm挥发性盐基氮含量测定结果图。
图24是10℃贮藏条件下羊肉皮下1～2cm传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型。
图25是10℃贮藏条件下羊肉皮下2～3cm传感器响应值测定结果图。
图26是10℃贮藏条件下羊肉皮下2～3cm挥发性盐基氮含量测定结果图。
图27是10℃贮藏条件下羊肉皮下2～3cm传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型。
图28是25℃贮藏条件下羊肉皮下0～1cm传感器响应值测定结果图。
图29是25℃贮藏条件下羊肉皮下0～1cm挥发性盐基氮含量测定结果图。
图30是25℃贮藏条件下羊肉皮下0～1cm传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型。
图31是25℃贮藏条件下羊肉皮下1～2cm传感器响应值测定结果图。
图32是25℃贮藏条件下羊肉皮下1～2cm挥发性盐基氮含量测定结果图。
图33是25℃贮藏条件下羊肉皮下1～2cm传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型。
图34是25℃贮藏条件下羊肉皮下2～3cm传感器响应值测定结果图。
图35是25℃贮藏条件下羊肉皮下2～3cm挥发性盐基氮含量测定结果图。
图36是25℃贮藏条件下羊肉皮下2～3cm传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作更详细的描述，但本发明的保护范围不仅限于这些实施例。
实施例1
(一)试验材料
1、样品来源
羊肉样品为屠宰放血后山羊胴体的背最长肌(每块背最长肌2kg左右)装入冰盒运回，分别置于-1℃(冰温)保存13天、4℃(冰箱冷藏温度)保存7天、10℃(中间温度)保存84小时、20℃(室温)保存28小时。
2、试验试剂
氧化镁混悬液(10g/L)，硼酸溶液(20g/L)，盐酸标准滴定溶液(0.01mol/L)，混合指示剂(甲基红为2g/L、溴甲酚绿为1g/L)。
3、主要仪器
薄膜荧光传感器、电热套、烧杯、移液管、试管等玻璃器皿。
(二)实验方法
1、羊肉薄膜荧光传感器响应值的测定
(1)荧光薄膜的制备
准确吸取1.0×10-4mol/L的多氯联苯-环氧乙烷溶液30～35μL，旋涂在直径12mm、厚度1cm的玻璃晶片上，然后将玻璃晶片放在通风橱下，室温风干1～1.2h，再将玻璃晶片置于烘箱中，在50～55℃下烘3h后备用。
(2)羊肉样品的处理
在对应采样时间点时，将不同贮藏条件下储藏的山羊胴体的背最长肌取出，采集皮下0～1cm、1～2cm和2～3cm部位的肌肉样品，每个样品采集3份，每份10.0g；样品采集需要在5分钟内完成，并且采集完后迅速将其余羊肉放回原来的贮藏条件下，以减少温度波动对羊肉新鲜度的影响，且其余未采样部位不做任何处理。
(3)薄膜荧光传感器测试羊肉样品
将与薄膜荧光传感器连接的玻璃集气瓶用滤纸擦拭干净，保证玻璃集气瓶为干燥无水、无味的；将处理好的10.0g羊肉放置到集气瓶中，盖好瓶盖并将集气瓶与薄膜荧光传感器连接，待羊肉样品在集气瓶中放置5～8分钟后，打开薄膜荧光传感器开关，调节荧光强度为3000、电压为1.8～2.0V，设置进样时间为2s、恢复时间为30s、进样次数为10次；点击启动按钮，即开始测样，每隔30s会出现一个信号值，信号值持续时间为2s，获得荧光响应图像。每份样品总共采集10个信号值，并选取其中稳定的5个样品信号值，3份样品共选取15个稳定的信号值求平均值，最后用所得平均值减去空白信号值后的绝对值作为响应值。
2、羊肉中TVB-N含量的测定
对上述羊肉样品进行挥发性盐基氮测定，挥发性盐基氮的测定参照GB5009.228-2016《食品中挥发性盐基氮的测定》中的半微量定氮法进行测定，具体方法为：准确称取羊肉样品20.0g置于锥形瓶中，加入100.0mL蒸馏水，室温静置0.5h后过滤，滤液置冰箱内0～4℃冷藏备用。取10.0mL滤液、5.0mL 10g/L氧化镁混悬液于半微量凯式定氮管中加热，将10mL 20g/L硼酸溶液加入锥形瓶中，并滴加5滴混合指示剂(2g/L甲基红：1g/L溴甲酚绿＝5：1)混匀于锥形瓶中，置于冷凝管下端，液滴从冷凝管管口第一滴滴下开始计时，5min后取出，用0.01mol/L盐酸标准滴定溶液滴定。TVB-N含量≤15mg/100g，羊肉为一级鲜肉；TVB-N含量在15～25mg/100g，羊肉为二级鲜肉；TVB-N含量≥25mg/100g，羊肉为变质肉。
(三)试验结果与分析
(1)-1℃贮藏温度下，羊肉皮下0～1cm样品在不同时间下的传感器响应值测定结果见图1，挥发性盐基氮测定结果见图2。由图1可见，若传感器响应值小于231对应图2中挥发性盐基氮小于15.02mg/100g，说明羊肉样品是一级鲜肉；若传感器响应值在231以上，说明羊肉样品是二级鲜肉或变质肉。因此，贮藏第4天可以作为羊肉在冰温贮藏条件下一级鲜肉和二级鲜肉的临界时间。将挥发性盐基氮和传感器响应值建立数学模型(见图3)，拟合的数学方程为y＝9.259x+91.935(R2＝0.9601)，其中y代表传感器响应值，x代表挥发性盐基氮含量。依据数学方程可以判断当传感器响应值小于231时，羊肉样品是一级鲜肉；传感器响应值大于231、小于323时，羊肉样品是二级鲜肉；传感器响应值大于323时，羊肉样品为变质肉。
-1℃贮藏温度下，羊肉皮下1～2cm样品在不同时间下的传感器响应值测定结果见图4，挥发性盐基氮测定结果见图5。由图4可见，若传感器响应值小于227对应图5中挥发性盐基氮小于14.97mg/100g，说明羊肉样品是一级鲜肉；若传感器响应值在227以上，说明羊肉样品是二级鲜肉或变质肉。因此，贮藏第4天可以作为羊肉在冰温贮藏条件下一级鲜肉和二级鲜肉的临界时间。将挥发性盐基氮和传感器响应值建立数学模型(见图6)，拟合的数学方程为y＝6.735x+126.2(R2＝0.8473)，其中y代表传感器响应值，x代表挥发性盐基氮含量。依据数学方程可以判断当传感器响应值小于227时，羊肉样品是一级鲜肉；传感器响应值大于227、小于295时，羊肉样品是二级鲜肉；传感器响应值大于295时，羊肉样品为变质肉。
-1℃贮藏温度下，羊肉皮下2～3cm样品在不同时间下的传感器响应值测定结果见图7，挥发性盐基氮测定结果见图8。由图7可见，若传感器响应值小于219对应图8中挥发性盐基氮小于14.99mg/100g，说明羊肉样品是一级鲜肉；若传感器响应值在219以上，说明羊肉样品是二级鲜肉或变质肉。因此，贮藏第4天可以作为羊肉在冰温贮藏条件下一级鲜肉和二级鲜肉的临界时间。将挥发性盐基氮和传感器响应值建立数学模型(见图9)，拟合的数学方程为y＝6.684x+118.77(R2＝0.810)，其中y代表传感器响应值，x代表挥发性盐基氮含量。依据数学方程可以判断当传感器响应值小于219时，羊肉样品是一级鲜肉；传感器响应值大于219、小于286时，羊肉样品是二级鲜肉；传感器响应值大于286时，羊肉样品为变质肉。
(2)4℃贮藏温度下，羊肉皮下0～1cm样品在不同时间下的传感器响应值测定结果见图10，挥发性盐基氮测定结果见图11。由图10可见，若传感器响应值小于148对应图11中挥发性盐基氮小于14.99mg/100g，说明羊肉样品是新鲜肉；若传感器响应值在148以上，说明羊肉样品是二级鲜肉或变质肉。因此，贮藏第2天可以作为羊肉在冷藏条件下新鲜肉和次鲜肉的临界时间。将挥发性盐基氮和传感器响应值建立数学模型(见图12)，拟合的数学方程为y＝3.3092x+98.392(R2＝0.9124)，其中y代表传感器响应值，x代表挥发性盐基氮含量。依据数学方程可以判断当传感器响应值小于148时，羊肉样品是一级鲜肉；传感器响应值大于148、小于181时，羊肉样品是二级鲜肉；传感器响应值大于181时，羊肉样品为变质肉。
4℃贮藏温度下，羊肉皮下1～2cm样品在不同时间下的传感器响应值测定结果见图13，挥发性盐基氮测定结果见图14。由图13可见，若传感器响应值小于144对应图11中挥发性盐基氮小于14.93mg/100g，说明羊肉样品是新鲜肉；若传感器响应值在144以上，说明羊肉样品是二级鲜肉或变质肉。因此，贮藏第2天可以作为羊肉在冷藏条件下新鲜肉和次鲜肉的临界时间。将挥发性盐基氮和传感器响应值建立数学模型(见图15)，拟合的数学方程为y＝3.7124x+88.579(R2＝0.9047)，其中y代表传感器响应值，x代表挥发性盐基氮含量。依据数学方程可以判断当传感器响应值小于144时，羊肉样品是一级鲜肉；传感器响应值大于144、小于181时，羊肉样品是二级鲜肉；传感器响应值大于181时，羊肉样品为变质肉。
4℃贮藏温度下，羊肉皮下2～3cm样品在不同时间下的传感器响应值测定结果见图16，挥发性盐基氮测定结果见图17。由图16可见，若传感器响应值小于163对应图11中挥发性盐基氮小于15.04mg/100g，说明羊肉样品是新鲜肉；若传感器响应值在163以上，说明羊肉样品是二级鲜肉或变质肉。因此，贮藏第2天可以作为羊肉在冷藏条件下新鲜肉和次鲜肉的临界时间。将挥发性盐基氮和传感器响应值建立数学模型(见图18)，拟合的数学方程为y＝4.2228x+99.471(R2＝0.8884)，其中y代表传感器响应值，x代表挥发性盐基氮含量。依据数学方程可以判断当传感器响应值小于163时，羊肉样品是一级鲜肉；传感器响应值大于163、小于205时，羊肉样品是二级鲜肉；传感器响应值大于205时，羊肉样品为变质肉。
(3)10℃贮藏温度下，羊肉皮下0～1cm样品在不同时间下的传感器响应值测定结果见图19，挥发性盐基氮测定结果见图20。由图19可见，若传感器响应值小于248对应图15中挥发性盐基氮小于14.93mg/100g，说明羊肉样品是一级鲜肉；若传感器响应值在248以上、310(挥发性盐基氮为25mg/100g)以下，说明羊肉样品是二级鲜肉；若传感器响应值在300以上，说明羊肉样品是变质肉。因此，贮藏第36h和72h可以分别作为羊肉在10℃贮藏条件下一级鲜肉和二级鲜肉、二级鲜肉和变质肉的临界时间。将挥发性盐基氮和传感器响应值建立数学模型(见图21)，拟合的数学方程为y＝6.1173x+156.67(R2＝0.7993)，其中y代表传感器响应值，x代表挥发性盐基氮含量。依据数学方程可以判断当传感器响应值小于248时，羊肉样品是一级鲜肉；传感器响应值大于248、小于310时，羊肉样品是二级鲜肉；传感器响应值大于310时，羊肉样品为变质肉。
10℃贮藏温度下，羊肉皮下1～2cm样品在不同时间下的传感器响应值测定结果见图22，挥发性盐基氮测定结果见图23。由图22可见，若传感器响应值小于280对应图23中挥发性盐基氮小于15.02mg/100g，说明羊肉样品是一级鲜肉；若传感器响应值在280以上、388(挥发性盐基氮为25mg/100g)以下，说明羊肉样品是二级鲜肉；若传感器响应值在388以上，说明羊肉样品是变质肉。因此，贮藏第36h和84h可以分别作为羊肉在10℃贮藏条件下一级鲜肉和二级鲜肉、二级鲜肉和变质肉的临界时间。将挥发性盐基氮和传感器响应值建立数学模型(见图24)，拟合的数学方程为y＝10.866x+116.76(R2＝0.8035)，其中y代表传感器响应值，x代表挥发性盐基氮含量。依据数学方程可以判断当传感器响应值小于280时，羊肉样品是一级鲜肉；传感器响应值大于280、小于388时，羊肉样品是二级鲜肉；传感器响应值大于388时，羊肉样品为变质肉。
10℃贮藏温度下，羊肉皮下2～3cm样品在不同时间下的传感器响应值测定结果见图25，挥发性盐基氮测定结果见图26。由图25可见，若传感器响应值小于296对应图26中挥发性盐基氮小于15.00mg/100g，说明羊肉样品是一级鲜肉；若传感器响应值在233以上、300(挥发性盐基氮为25mg/100g)以下，说明羊肉样品是二级鲜肉；若传感器响应值在300以上，说明羊肉样品是变质肉。因此，贮藏第36h可以作为羊肉在10℃贮藏条件下一级鲜肉和二级鲜肉、变质肉的临界时间。将挥发性盐基氮和传感器响应值建立数学模型(见图27)，拟合的数学方程为y＝12.694x+105.62(R2＝0.8168)，其中y代表传感器响应值，x代表挥发性盐基氮含量。依据数学方程可以判断当传感器响应值小于233时，羊肉样品是一级鲜肉；传感器响应值大于233、小于300时，羊肉样品是二级鲜肉；传感器响应值大于300时，羊肉样品为变质肉。
(4)25℃贮藏温度下，羊肉皮下0～1cm样品在不同时间下的传感器响应值测定结果见图28，挥发性盐基氮测定结果见图29。由图28可见，若传感器响应值小于158对应图29中挥发性盐基氮小于25mg/100g，说明羊肉样品是一级鲜肉或二级鲜肉；若传感器响应值在138以上、158(挥发性盐基氮为25mg/100g)以下，说明羊肉样品是二级鲜肉；若传感器响应值在158以上，说明羊肉样品是变质肉。因此，贮藏第8h和20h可以分别作为羊肉在25℃贮藏条件下一级鲜肉和二级鲜肉、二级级鲜肉和变质肉的临界时间。将挥发性盐基氮和传感器响应值建立数学模型(见图30)，拟合的数学方程为y＝1.9041x+109.93(R2＝0.8326)，其中y代表传感器响应值，x代表挥发性盐基氮含量。依据数学方程可以判断当传感器响应值小于138时，羊肉样品是一级鲜肉；传感器响应值大于138、小于158时，羊肉样品是二级鲜肉；传感器响应值大于158时，羊肉样品为变质肉。
25℃贮藏温度下，羊肉皮下1～2cm样品在不同时间下的传感器响应值测定结果见图31，挥发性盐基氮测定结果见图32。由图31可见，若传感器响应值小于166对应图11中挥发性盐基氮小于25mg/100g，说明羊肉样品是一级鲜肉或二级鲜肉；若传感器响应值在144以上、166(挥发性盐基氮为25mg/100g)以下，说明羊肉样品是二级鲜肉；若传感器响应值在166以上，说明羊肉样品是变质肉。因此，贮藏第10h和20h可以分别作为羊肉在25℃贮藏条件下一级鲜肉和二级鲜肉、二级级鲜肉和变质肉的临界时间。将挥发性盐基氮和传感器响应值建立数学模型(见图33)，拟合的数学方程为y＝2.162x+111.74(R2＝0.7474)，其中y代表传感器响应值，x代表挥发性盐基氮含量。依据数学方程可以判断当传感器响应值小于144时，羊肉样品是一级鲜肉；传感器响应值大于144、小于166时，羊肉样品是二级鲜肉；传感器响应值大于166时，羊肉样品为变质肉。
25℃贮藏温度下，羊肉皮下2～3cm样品在不同时间下的传感器响应值测定结果见图34，挥发性盐基氮测定结果见图35。由图34可见，若传感器响应值小于213对应图35中挥发性盐基氮小于25mg/100g，说明羊肉样品是一级鲜肉或二级鲜肉；若传感器响应值在172以上、213(挥发性盐基氮为25mg/100g)以下，说明羊肉样品是二级鲜肉；若传感器响应值在213以上，说明羊肉样品是变质肉。因此，贮藏第15h和25h可以分别作为羊肉在25℃贮藏条件下一级鲜肉和二级鲜肉、二级级鲜肉和变质肉的临界时间。将挥发性盐基氮和传感器响应值建立数学模型(见图36)，拟合的数学方程为y＝4.0956x+110.52(R2＝0.8283)，其中y代表传感器响应值，x代表挥发性盐基氮含量。依据数学方程可以判断当传感器响应值小于172时，羊肉样品是一级鲜肉；传感器响应值大于172、小于213时，羊肉样品是二级鲜肉；传感器响应值大于213时，羊肉样品为变质肉。
综上，三种采样深度在四种贮藏条件(冰温-1℃、冷藏4℃、中温10℃和常温25℃)下，其传感器响应值与挥发性盐基氮线性关系模型都表现出较好的相关性，R2均大于等于0.8；分析数据可得，在表皮0～1cm采样测得的传感器响应值与挥发性盐基氮两者之间的R2要大于其他两种采样深度下的R2，并且四种贮藏条件下呈现出相同的变化趋势，这说明在表皮0～1cm采样测得的数据稳定真实可靠，更能准确地表现羊肉的新鲜度。

Claims (4)

1.一种基于荧光猝灭技术的羊肉新鲜度检测方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)将羊肉放入相应贮藏条件下储藏，在对应采样时间点时将羊肉取出，采集羊肉胴体的背最长肌皮下0～1cm部位的样品；样品采集需要在5分钟内完成，并且采集完后迅速将其余羊肉放回原来的贮藏条件下，以减少温度波动对羊肉新鲜度的影响；
(2)将步骤(1)采集的羊肉样品放置到干燥玻璃集气瓶中，盖好瓶盖并将集气瓶与薄膜荧光传感器连接，待羊肉样品在集气瓶中放置5～10分钟后，打开薄膜荧光传感器开关，调节荧光强度为3000～4000、电压为1.8～3.6V，设置进样时间为2～6s、恢复时间为30～60s、进样次数为10～20次；获得荧光响应图像，选取其中稳定的4～6个样品信号值求平均值，用所得平均值减去空白信号值后的绝对值作为响应值；其中，所述薄膜荧光传感器的荧光薄膜为多氯联苯薄膜；
(3)-1℃贮藏温度下，若响应值小于231，说明羊肉样品是一级鲜肉；响应值大于231、小于323时，羊肉样品是二级鲜肉；响应值大于323时，羊肉样品为变质肉；
4℃贮藏温度下，若响应值小于148时，羊肉样品是一级鲜肉；响应值大于148、小于181时，羊肉样品是二级鲜肉；响应值大于181时，羊肉样品为变质肉；
10℃贮藏温度下，若响应值小于248，说明羊肉样品是一级鲜肉；响应值大于248、小于310时，羊肉样品是二级鲜肉；响应值大于310时，羊肉样品为变质肉；
25℃贮藏温度下，若响应值小于138，说明羊肉样品是一级鲜肉；响应值大于138、小于158时，羊肉样品是二级鲜肉；响应值大于158时，羊肉样品为变质肉。
2.根据权利要求1所述的基于荧光猝灭技术的羊肉新鲜度检测方法，其特征在于：步骤(1)中，每个羊肉样品每次采集3份做平行试验，每份8.0～12.0g。
3.根据权利要求1所述的基于荧光猝灭技术的羊肉新鲜度检测方法，其特征在于：步骤(2)中，所述薄膜荧光传感器的荧光薄膜是将1.0×10-4mol/L多氯联苯-环氧乙烷溶液旋涂在玻璃晶片上，然后将玻璃晶片在通风橱中室温风干，并在烘箱中50～55℃烘2～3小时获得。
4.根据权利要求1所述的基于荧光猝灭技术的羊肉新鲜度检测方法，其特征在于：步骤(2)中，调节荧光强度为3000～3200、电压为1.8～2.0V，设置进样时间为2～3s、恢复时间为30～40s、进样次数为10～15次；获得荧光响应图像，选取其中稳定的4～6个样品信号值求平均值。
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