CN114304615A - 一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于生物发酵领域，具体涉及一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物及其制备方法。所述制备方法包括以下步骤：S1、将麦卢卡蜂蜜过滤去除杂质，加入一定量的水并加热，之后加入果胶酶，得到混合溶液；S2、将步骤S1得到的混合溶液转移至发酵罐中，先加入活化后的植物乳杆菌发酵12h，再加入活化后的酵母菌和芽孢杆菌混合菌种，继续发酵，发酵完成后过滤杂质，喷雾干燥，得到麦卢卡蜂蜜酵素；S3、将步骤S2得到的麦卢卡蜂蜜酵素与麦芽糊精、羧甲基纤维素、魔芋粉以及辅助原料混合后使用高压均质机进行高压均质处理，最后进行真空减压干燥，即得。本发明通过对麦卢卡蜂蜜酵素的发酵工艺进行改进，有效增强麦卢卡蜂蜜酵素组合物具有的稳定性以及减肥降脂功效。

Description

一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于生物发酵领域，具体涉及一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物及其制备方法。

背景技术

酵素是以动物、植物、菌类等为原料，经微生物发酵制得的含有特定生物活性成分的产品。目前市场上酵素食品主要包括液体状、膏状、粉剂、片剂等形式。近年来，酵素粉凭借其易保存、易运输等特点，成为最有发展潜力的酵素品种。然而目前市场产品存在“密度低、活性差”等问题制约着其发展，同时现有市场上的酵素产品种类稀少，目前市场上出现的酵素产品多以果蔬为原材料，种类单一现阶段酵素主要的发酵工艺主要是自然发酵，耗费时间较长。市场上有许多对蜂蜜进行深加产品，但全部都是通过物理稀释制作成蜂蜜饮料或通过酵母、醋酸菌发酵制备蜂蜜醋饮料而这些制备方法均不能较好的利用蜂蜜中含有的营养物质。因而研发具有高活性成分、稳定性强、易冲泡等的蜂蜜产品已成为行业发展的重要趋势之一。

专利文献CN103931983A公开了一种蜂蜜酵素产品及其制备方法，该发明是先在蜂蜜中加入果胶酶，然后加入植物乳杆菌活化液进行第一梯式发酵，加入青春双岐乳杆菌活化液进行第二梯式发酵，加入嗜酸乳杆菌活化液进行第三梯式发酵，最后当其总酸值达到10g/L值时，密封状态保持温度25℃，窖贮120天；然后300目过滤，在600公斤压力的匀质机进行匀质后，得到蜂蜜酵素产品。该发明的蜂蜜酵素产品口感酸甜可口，远胜蜂蜜，而且具有增强人体免疫力、抗氧化延衰老、修复受损细胞防止癌变等保健功能；同时本品还含有大量的益生活性菌，具有增加人体益生菌群，排毒通肠的功效，但具有的稳定性较差。

专利文献CN113455631A一种蜂蜜酵素果冻及其制备方法，包括质量份比如下的成份：4～7份吉利丁片、23～35份蜂蜜酵素、12～23份水果汁、4～12份茶多酚、2～7份乳品、10～19份水果粒、15～23份蜂蜜、13～24份低聚果糖、11～13魔芋粉、4～7荷叶粉，该发明通过在果冻内添加蜂蜜制备成酵素，同时利用蜂蜜替代传统工艺中的甜味剂、同时添加天然的水果汁，使得果冻减少食品添加剂的含量，使得果冻具有蜂蜜的多种营养成分的同时，利用酵素提高人体的代谢，可以改善肠胃消化，使蜂蜜中和果汁中的营养物质能更好的被人体所吸收，该发明制备的蜂蜜酵素果冻富含维生素和各种营养物质，但具有的稳定性较差。

发明内容

本发明旨在提供一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物，通过在制备过程中选用复合菌种进行发酵，有效提高麦卢卡蜂蜜酵素组合物有效活性组分含量，从而增强麦卢卡蜂蜜酵素组合物具有的降脂减肥效果，同时加入特定质量比例的辅助原料、魔芋粉，通过各组分间的相互作用，最终实现有效增强麦卢卡蜂蜜酵素组合物的长期稳定性，进一步保证了麦卢卡蜂蜜酵素组合物的作用效果。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1、将麦卢卡蜂蜜过滤去除杂质，加入麦卢卡蜂蜜体积10～20％的水并加热使其温度保持在40～50℃，之后加入果胶酶，得到混合溶液；

S2、将步骤S1得到的混合溶液转移至发酵罐中，先加入活化后的植物乳杆菌，在30～38℃下发酵12h后，之后再加入活化后的酵母菌和芽孢杆菌混合菌种，在30～38℃继续发酵24～36h，发酵完成后过滤杂质，喷雾干燥，得到麦卢卡蜂蜜酵素；

S3、将步骤S2得到的麦卢卡蜂蜜酵素与麦芽糊精、羧甲基纤维素、魔芋粉以及辅助原料混合后使用高压均质机在80～120MPa压力下进行高压均质处理3～5次，最后进行真空减压干燥，即得麦卢卡蜂蜜酵素组合物。

优选地，所述步骤S3中辅助原料包括鼠李糖脂和蔗糖脂肪酸酯。

更优选地，所述鼠李糖脂和蔗糖脂肪酸酯的质量百分比为(1～3)：0.25。

优选地，所述步骤S2中植物乳杆菌、酵母菌和芽孢杆菌的质量比为(1～5)：(3～6)：(1～10)。

优选地，所述步骤S2中菌种的接种总量为步骤S1得到的混合溶液体积总量的1％～3％。

优选地，所述步骤S1中果胶酶的添加量为14～20U/g。

优选地，所述麦卢卡蜂蜜酵素组合物包括以下组分及质量百分含量：麦卢卡蜂蜜酵素65～80％、麦芽糊精5～10％、羧甲基纤维素5～10％、辅助原料5～10％和魔芋粉3～5％。

优选地，所述步骤S2中发酵罐中使用的培养基为：蛋白胨1-1.5％，酵母膏0.3-0.7％，牛肉膏0.4-0.8％，氯化钠0.4-1.0％，葡萄糖1.0-3.0％，磷酸氢二钾0.10-0.2％，硫酸镁0.02-0.05％，柠檬酸铵0.1-0.3％。

本发明中选用麦卢卡蜂蜜进行发酵，但其发酵得到的麦卢卡蜂蜜酵素由于具有吸湿性强等的特点容易出现结块、冲泡不开等的问题，而且水分含量的增加，会在一定程度上导致营养成分的氧化分解，还有可能促进微生物的滋长，进而导致产品储藏期缩短，单一组分的魔芋粉同样存在着吸湿性过强而容易受潮结块的问题，本发明人意外发现在麦卢卡蜂蜜酵素中加入魔芋粉与辅助原料(蔗糖脂肪酸酯和鼠李糖脂)，通过各组分间的相互作用能够有效地解决酵素粉和魔芋粉存在的吸湿能力强，易吸潮变质的问题，使得制备得到的麦卢卡蜂蜜酵素组合物长期稳定性大大提高，进一步提高了组合物在降脂减肥方面的功效。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明通过加入特定质量配比的辅助原料组分与麦卢卡蜂蜜酵素间的相互作用，有效增强麦卢卡蜂蜜酵素组合物的稳定性，保证了麦卢卡蜂蜜酵素组合物中含有的有效成分的活性，进一步提高了麦卢卡蜂蜜酵素组合物具有的改善肠道、降脂减肥效果。

(2)本发明在发酵过程中选用植物乳杆菌、酵母菌和芽孢杆菌复合菌种作为发酵菌种对麦卢卡蜂蜜进行发酵得到的麦卢卡蜂蜜酵素能够使麦卢卡蜂蜜中含有的有效成分转化成人体易吸收的小分子物质，能够有效改善人体肠道情况，起到降脂减肥等的作用功效。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1、一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物及其制备方法

配方组成：麦卢卡蜂蜜酵素67％、麦芽糊精10％、羧甲基纤维素10％、辅助原料10％和魔芋粉3％。

所述辅助原料为鼠李糖脂和蔗糖脂肪酸酯；所述鼠李糖脂和蔗糖脂肪酸酯的质量百分比为1：0.25。

制备方法：

S1、将麦卢卡蜂蜜过滤去除杂质，之后加入麦卢卡蜂蜜体积10％的水并加热使其温度保持在40℃，之后加入14U/g果胶酶，得到混合溶液；

S2、将步骤S1得到的混合溶液转移至发酵罐中，然后先加入活化后植物乳杆菌，在30℃下发酵12h后，再加入活化后的酵母菌和芽孢杆菌混合菌种，在30℃继续发酵24h，发酵完成后过滤杂质，喷雾干燥，得到麦卢卡蜂蜜酵素；

S3、将步骤S2得到的麦卢卡蜂蜜酵素与麦芽糊精、羧甲基纤维素、魔芋粉以及辅助原料混合后使用高压均质机在80MPa压力下进行高压均质处理3次，最后进行真空减压干燥，即得麦卢卡蜂蜜酵素组合物。

进一步地，所述步骤S2中植物乳杆菌、酵母菌和芽孢杆菌的质量比为1：3：1。

进一步地，所述步骤S2中菌种的总接种量为步骤S1得到的混合溶液体积总量的1％。

进一步地，所述步骤S2中发酵罐中使用的培养基为：蛋白胨1％，酵母膏0.3％，牛肉膏0.4％，氯化钠0.4％，葡萄糖1.0％，磷酸氢二钾0.10％，硫酸镁0.02％，柠檬酸铵0.1％。

实施例2、一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物及其制备方法

配方组成：麦卢卡蜂蜜酵素75％、麦芽糊精8％、羧甲基纤维素6％、辅助原料7％和魔芋粉4％。

所述辅助原料为鼠李糖脂和蔗糖脂肪酸酯；所述鼠李糖脂和蔗糖脂肪酸酯的质量百分比为1.5：0.25。

制备方法：

S1、将麦卢卡蜂蜜过滤去除杂质，之后加入麦卢卡蜂蜜体积15％的水并加热使其温度保持在45℃，之后加入18U/g果胶酶，得到混合溶液；

S2、将步骤S1得到的混合溶液转移至发酵罐中，然后先加入活化后的植物乳杆菌，在35℃下发酵12h后，再加入活化后的酵母菌和芽孢杆菌混合菌种，在35℃继续发酵24h，发酵完成后过滤杂质，喷雾干燥，得到麦卢卡蜂蜜酵素；

S3、将步骤S2得到的麦卢卡蜂蜜酵素与麦芽糊精、羧甲基纤维素、魔芋粉以及辅助原料混合后使用高压均质机在100MPa压力下进行高压均质处理4次，最后进行真空减压干燥，即得麦卢卡蜂蜜酵素组合物。

进一步地，所述步骤S2中植物乳杆菌、酵母菌和芽孢杆菌的质量比为3：5：5。

进一步地，所述步骤S2中菌种的总接种量为步骤S1得到的混合溶液体积总量的2％。

进一步地，所述步骤S2中发酵罐中使用的培养基为：蛋白胨1％，酵母膏0.5％，牛肉膏0.6％，氯化钠0.8％，葡萄糖2.0％，磷酸氢二钾0.15％，硫酸镁0.03％，柠檬酸铵0.2％。

实施例3、一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物及其制备方法

配方组成：麦卢卡蜂蜜酵素80％、麦芽糊精5％、羧甲基纤维素5％、辅助原料5％和魔芋粉5％。

所述辅助原料为鼠李糖脂和蔗糖脂肪酸酯；所述鼠李糖脂和蔗糖脂肪酸酯的质量百分比为3：0.25。

制备方法：

S1、将麦卢卡蜂蜜过滤去除杂质，之后加入麦卢卡蜂蜜体积20％的水并加热使其温度保持在50℃，之后加入果胶酶，得到混合溶液；

S2、将步骤S1得到的混合溶液转移至发酵罐中，然后先加入活化后的植物乳杆菌，在38℃下发酵12h后，再加入活化后的酵母菌和芽孢杆菌混合菌种，在38℃继续发酵36h，发酵完成后过滤杂质，喷雾干燥，得到麦卢卡蜂蜜酵素；

S3、将步骤S2得到的麦卢卡蜂蜜酵素与麦芽糊精、羧甲基纤维素、魔芋粉以及辅助原料混合后使用高压均质机在120MPa压力下进行高压均质处理5次，最后进行真空减压干燥，即得麦卢卡蜂蜜酵素组合物。

进一步地，所述步骤S2中植物乳杆菌、酵母菌和芽孢杆菌的质量比为5：6：10。

进一步地，所述步骤S2中菌种的总接种量为步骤S1得到的混合溶液体积总量的2％。

进一步地，所述步骤S2中发酵罐中使用的培养基为：蛋白胨1.5％，酵母膏0.7％，牛肉膏0.8％，氯化钠1.0％，葡萄糖3.0％，磷酸氢二钾0.2％，硫酸镁0.05％，柠檬酸铵0.3％。

对比例1、一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物及其制备方法

与实施例2相比，本对比例的区别仅在于：不含有蔗糖脂肪酸酯和鼠李糖脂。

制备方法参考实施例2。

对比例2、一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物及其制备方法

与实施例2相比，本对比例的区别仅在于：辅助原料不含有蔗糖脂肪酸酯。

制备方法参考实施例2。

对比例3、一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物及其制备方法

与实施例2相比，本对比例的区别仅在于：不加入魔芋粉。

制备方法参考实施例2。

对比例4、一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物及其制备方法

与实施例2相比，本对比例的区别仅在于：制备方法步骤S2中先加入酵母菌进行发酵，之后再加入植物乳杆菌和芽孢杆菌混合菌种继续发酵。

其他原料组分、制备参数、所述步骤S2中植物乳杆菌、酵母菌和芽孢杆菌的质量比和菌种总接种量均同实施例2。

制备方法参考实施例2。

对比例5、一种蜂蜜酵素产品及其制备方法

配方组成和制备方法参考专利文献CN103931983A实施例。

试验例一、乳酸菌含量测定

一、实验样品

实施例1～3、对比例4～5制备得到的麦卢卡蜂蜜酵素组合物。

二、实验方法

按照GB/T16347进行乳酸菌含量测定。以无菌操作将通过充分摇匀的检样25mL(或25g)放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内做成1:10的平均稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，沿管壁慢慢注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，领取1mL灭菌吸管，按上述操作顺序，作10倍递增稀释液，如此每次递增一次，即换用1支1mL灭菌吸管。选择2～3个以上示意稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。稀释液移入平皿后，应及时将冷至50℃的乳酸菌技术培养基注入平皿约15mL，并转动平皿使混合平均。同时将乳酸菌培养基倾入加有1mL稀释液检样用的灭菌生理盐水的灭菌平皿内作空白对比。待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养72±3h取出，观看乳酸菌菌落特点，选取菌落数在30～300之间的平板进行计数。

三、实验结果

实验结果如表1所示。

表1各样品的乳酸菌含量

组别	乳酸菌数含量(cfu/100ml)
		实施例1	9.3×10<sup>10</sup>
实施例2	9.8×10<sup>10</sup>
		实施例3	9.5×10<sup>10</sup>
对比例4	8.3×10<sup>10</sup>
		对比例5	8.0×10<sup>10</sup>

从表1中的数据可以得知，本发明实施例1～3制备得到的麦卢卡蜂蜜酵素组合物具有较高含量的乳酸菌活性成分，且均优于对比例1～4；对比例4由于制备过程中加入菌种的顺序为先加入酵母菌进行发酵，之后再加入植物乳杆菌和芽孢杆菌混合菌种继续发酵，导致发酵过程无法充分利用麦卢卡蜂蜜中含有的营养物质，致使最终组合物具有的活性成分含量较低，对比例5为现有技术制备得到蜂蜜酵素产品，具有的乳酸菌数含量仅为8.0×10¹⁰cfu/100ml而本发明实施例1～3制备得到的麦卢卡蜂蜜酵素组合物具有的乳酸菌数含量均在9.3×10¹⁰cfu/100ml以上，显著高于对比例5。

试验例二、对高脂血症大鼠血清指标的影响

一、实验样品

实验例1～3、对比例1～5制备得到的麦卢卡蜂蜜酵素组合物。

二、实验方法

2.1高脂血症大鼠模型的建立

首先大鼠采用基础饲料适应性喂养一周。适应性喂养结束后禁食12h，尾尖取血，血浆3000rpm、4℃离心10min，分离出血清测定TG、TC、LDL-C和HDL-C含量。进入造模期后，将大鼠随机分为正常对照组(10只)和造模组(100只)，正常组大鼠喂食基础饲料，造模组大鼠喂食高脂饲料。造模28d后，禁食12h，尾尖取血，血浆3000rpm、4℃离心10min，分离出血清测定其中TG、TC、LDL-C和HDL-C的含量。参考大鼠体重、主要对照造模前后TG和TC水平以确定是否造模成功。

2.2实验大鼠分组

将造模成功的大鼠重新随机分为10组，每组10只大鼠，空白对照组继续喂食普通饲料，用蒸馏水灌胃；模型组喂食高脂饲料，用蒸馏水灌胃；阳性药物组喂食高脂饲料，并用二甲双胍片灌胃按照50mg·kg^-1·d^-1计算，实验组喂食高脂饲料，同时分别给予相同剂量100mg/kg实施例1～3、对比例1～5制得的麦卢卡蜂蜜酵素组合物。灌胃期为42天，实验结束后，禁食12小时，称重，麻醉大鼠后摘眼球取血，并解剖取样和检测生化指标。

2.3观测指标

用自动生化分析仪测定血清TG、TC、LDL-C、HDL-C。

三、实验结果

实验结果如表2所示。

表2各组大鼠血清TG、TC、LDL-C和HDL-C含量比较

组别	TG(mmol/L)	TC(mmol/L)	HDL-C(mmol/L)	LDL-C(mmol/L)
					空白对照组	2.85±0.03**	2.79±0.12*	0.92±0.04**	1.10±0.19**
模型对照组	4.35±0.12	4.13±0.21	3.56±0.42	0.60±0.13
					阳性对照组	2.90±0.05**	2.86±0.05	1.97±0.33**	1.05±0.17**
实施例1	3.54±0.10**	3.48±0.14	2.50±0.18**	0.89±0.07*
					实施例2	3.44±0.31**	3.27±0.12	2.41±0.15**	0.91±0.12*
实施例3	3.50±0.20**	3.36±0.09	2.45±0.24**	0.90±0.01*
					对比例1	3.88±0.18	3.72±0.25	2.98±0.31	0.75±0.14
对比例2	3.77±0.10	3.62±0.34	2.86±0.15	0.81±0.05
					对比例3	3.80±0.28	3.65±0.18	2.81±0.20	0.80±0.13
对比例4	4.00±0.14	3.80±0.14	2.92±0.04	0.72±0.03
					对比例5	4.13±0.15	3.92±0.08	3.01±0.16	0.69±0.14

注：与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

从表2中的数据可以得知，经过本发明实施例1～3制备得到的麦卢卡蜂蜜酵素组合物处理组与模型对照组大鼠血清TG、TC和HDL-C含量都显著降低，具有的LDL-C数值高于模型对照组，实施例1～3具有的数据且与空白对照正常组的数据相近；对比例1～5组大鼠血清的TG、TC、HDL-C和LDL-C与模型对照组数据不存在显著性差异，由此可以证明本发明通过选用特定的辅助原料组分以及通过限定复合菌种的加入顺序进行麦卢卡蜂蜜发酵，最终制备得到的麦卢卡蜂蜜酵素组合物具有较好的降脂功效，且相比于现有技术制备得到的蜂蜜酵素产品具有更优异的改善高血脂症效果。

试验例三、稳定性实验

一、实验样品

实施例1～3、对比例1～3制备得到的麦卢卡蜂蜜酵素组合物。

二、实验方法

每组取样500g，分别用普通白色塑料袋密封包装，每袋25g，每组共20袋。袋装后分别于温度为40℃、湿度为75％的条件下放置3个月，分别在放置第0、10、30、90天时每组随机取出5袋样品，将样品过60目筛，计算结块率。结块率越高，抗结块性越低。

结块率＝留在筛网上的产品质量/产品质量×100％。

三、实验结果

实验结果如3所示。

从表3中的数据可以得知，本发明实施例1～3制备得到的麦卢卡蜂蜜酵素组合物在经过90d的储存试验之后，具有的结块率最高仅为0.03％，具有良好的稳定性，而对比例1～3由于没有加入特定组分的辅助原料、缺少辅助原料中的一种或者不加入魔芋粉，导致最终制备得到的麦卢卡蜂蜜酵素组合物具有结块率大大增加。由此可以证明，本发明通过加入特定组分配比的辅助原料和魔芋粉，通过辅助原料、魔芋粉与麦卢卡蜂蜜酵素等各种组分间的相互作用，最终显著增强酵素组合物的稳定性，进一步保证了酵素组合物具有的降脂减肥功效。

上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (8)

1.一种麦卢卡蜂蜜酵素组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

S1、将麦卢卡蜂蜜过滤去除杂质，加入麦卢卡蜂蜜体积10～20％的水并加热使其温度保持在40～50℃，之后加入果胶酶，得到混合溶液；

S2、将步骤S1得到的混合溶液转移至发酵罐中，先加入活化后的植物乳杆菌，在30～38℃下发酵12h后，之后再加入活化后的酵母菌和芽孢杆菌混合菌种，在30～38℃继续发酵24～36h，发酵完成后过滤杂质，喷雾干燥，得到麦卢卡蜂蜜酵素；

S3、将步骤S2得到的麦卢卡蜂蜜酵素与麦芽糊精、羧甲基纤维素、魔芋粉以及辅助原料混合后使用高压均质机在80～120MPa压力下进行高压均质处理3～5次，最后进行真空减压干燥，即得麦卢卡蜂蜜酵素组合物。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中辅助原料包括鼠李糖脂和蔗糖脂肪酸酯。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述鼠李糖脂和蔗糖脂肪酸酯的质量百分比为(1～3)：0.25。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中植物乳杆菌、酵母菌和芽孢杆菌的质量比为(1～5)：(3～6)：(1～10)。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中菌种的接种总量为步骤S1得到的混合溶液体积总量的1％～3％。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中果胶酶的添加量为14～20U/g。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述麦卢卡蜂蜜酵素组合物包括以下组分及质量百分含量：麦卢卡蜂蜜酵素65～80％、麦芽糊精5～10％、羧甲基纤维素5～10％、辅助原料5～10％和魔芋粉3～5％。

8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中发酵罐中使用的培养基为：蛋白胨1-1.5％，酵母膏0.3-0.7％，牛肉膏0.4-0.8％，氯化钠0.4-1.0％，葡萄糖1.0-3.0％，磷酸氢二钾0.10-0.2％，硫酸镁0.02-0.05％，柠檬酸铵0.1-0.3％。