CN114235988B - 一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种测定抑芽丹的高液相色谱方法，属于色谱分析领域。将抑芽丹待测溶液通过自动进样器引入高效液相色谱仪，通过苯基色谱柱分离后，利用浓度为0.05％～0.2％的氢氧化钠经80～120℃下碱解、浓度为0.01～0.02％邻苯二甲醛进行衍生后，在激发波长为330nm，发射波长为475nm的荧光检测器条件下测定，通过外标法对测定结果进行定量。利用液相色谱柱后衍生的方法实现对抑芽丹含量的测定，方法干扰小，基质效应低，灵敏度高，重现性好，解决了目前抑芽丹测定存在的突出问题，适合抑芽丹含量的测定。
Description
技术领域
本发明属于色谱分析领域，具体涉及一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法。
背景技术
抑芽丹又叫马来酰肼，具有阻碍植物细胞***和降低光合作用的效果，在农业上主要用 作植物生长调节剂和选择性除草剂。如，用于抑制马铃薯、生姜、大蒜等发芽。抑芽丹具有 诱变致癌性质，在一定剂量下能导致染色体断裂，产生细胞毒性。我国已在大蒜、洋葱、马铃薯等作物上制定了严格的限量标准，因此，强化对抑芽丹的风险监测十分必要。
抑芽丹的检测方法有很多，如分光光度法、高效液相色谱紫外检测法、高效液相色谱质 谱法等。但目前这些主流分析方法都存在一定的缺陷，如分光光度法的前处理繁琐，前处理 用到的强碱容易腐蚀仪器；抑芽丹的极性较强，出峰早，采用液相色谱紫外检测法会导致抑芽丹与干扰杂质分不开，无法准确定量；液相色谱质谱法中抑芽丹与极性杂质共流出，对抑 芽丹产生较大的基质抑制作用，准确定量较困难，而且仪器成本较高。
因此，我们开发一种不同于以上抑芽丹分析的方法，该方法操作简便、成本较低。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术中抑芽丹测定方法的不足，提供一种操作简便、成本较 低的测定方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法，包括：
(1)配制氢氧化钠的浓度为0.05～0.2％，流速为0.3ml/min；
(2)配制邻苯二甲醛的浓度为0.01～0.02％，流速为0.3ml/min；
(3)将抑芽丹待测溶液通过自动进样器引入高效液相色谱仪，通过苯基色谱柱分离后， 在80～120℃下碱解，在激发波长为330nm，发射波长为475nm的荧光检测器条件下测定。
本发明的有益效果在于：
利用液相色谱柱后衍生的方法实现对抑芽丹含量的测定，方法操作简便、干扰小，成本 低，适合抑芽丹含量的测定。
附图说明
图1为实施例2中抑芽丹衍生后色谱图。
具体实施方式
为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方 案进一步的说明，但是本发明不仅限于此。
实施例1
一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法
将抑芽丹待测溶液通过自动进样器引入高效液相色谱仪，通过苯基柱分离，经碱解和衍 生后，在激发波长330nm，发射波长475nm的荧光检测器条件下进行测定。其中碱解液氢氧化钠的浓度为0.05％，碱解的温度为80℃，流速为0.3mL/min，衍生试剂邻苯二甲醛的浓度 为0.01％，流速为0.3mL/min。
实施例2
一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法
将抑芽丹待测溶液通过自动进样器引入高效液相色谱仪，通过苯基柱分离，经碱解和衍 生后，在激发波长330nm，发射波长475nm的荧光检测器条件下进行测定。其中碱解液氢氧化钠的浓度为0.1％，碱解的温度为100℃，流速为0.3mL/min，衍生试剂邻苯二甲醛的浓度 为0.15％，流速为0.3mL/min。根据图1结果可知，在3.75min左右的色谱峰为抑芽丹衍生后 的色谱峰。
实施例3
一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法
将抑芽丹待测溶液通过自动进样器引入高效液相色谱仪，通过苯基柱分离，经碱解和衍 生后，在激发波长330nm，发射波长475nm的荧光检测器条件下进行测定。其中碱解液氢氧化钠的浓度为0.2％，碱解的温度为120℃，流速为0.3mL/min，衍生试剂邻苯二甲醛的浓度 为0.2％，流速为0.3mL/min。
对比例1
现有发明专利《一种烟草中残留抑芽丹的提取方法及测定方法》(CN 107589187A)中抑 芽丹的测定步骤主要为：称取2.0g样品于100mL耐热螺口锥形瓶中，向瓶中加入20mL 4mol/L盐酸水溶液和100μL 200μg/mL的氘代抑芽丹内标溶液，150℃油浴磁力搅拌1h，冷 却室温后，提取液以10000rpm离心5min，用C18固相萃取柱净化，液相色谱串联质谱仪测 定。
实施例与对比例1相比，操作简便，节省时间，消耗试剂少，不需要氘代抑芽丹，成本 低。
对比例2
现有专利《一种液相串联质谱检测烟台质谱中抑芽丹含量的方法》(CN105651882A)中 涉及的测定步骤为：用0.5-2％甲酸甲醇溶液萃取抑芽丹，同时加入马来酰肼-D2内标，振荡 提取5-20min，超声提取5-20min后，取上清液用液相色谱串联质谱法测定。
实施例与对比例2相比，不需要使用马来酰肼-D2内标进行结果校正，不需要使用昂贵 的液相色谱串联质谱仪，成本较低，操作简便。
综上所述，利用液相色谱柱后衍生的方法实现对抑芽丹含量的测定，方法操作简便、干 扰小，成本低，适合抑芽丹含量的测定。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰， 皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (3)
1.一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法，包括：
1)将抑芽丹待测溶液通过自动进样器引入高效液相色谱仪，通过色谱柱分离后，利用浓度为0.05~0.2％的氢氧化钠对抑芽丹进行碱解，产物经浓度为0.01~0.02％的邻苯二甲醛衍生后，在荧光检测器下检测，邻苯二甲醛流速为0.3ml/min，碱解的温度为80~120℃，氢氧化钠的流速为0.3ml/min；
2)通过外标法对测定结果进行定量。
2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法，其中：
所述荧光检测器的激发波长为330nm，发射波长为475nm。
3.根据权利要求1所述的高效液相色谱法，其中：
色谱柱选择苯基柱。
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