CN114163272A - 一种富硒微生物菌剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本申请涉及菌剂材料的领域，具体公开了一种富硒微生物菌剂及其制备方法。一种富硒微生物菌剂包括以下重量份物质：复合微生物菌剂5～10份；蛋白胨3～6份；酵母粉2～3份；***钠溶液6～10份；水150～200份；所述复合微生物菌剂包括枯草芽孢杆菌菌剂、解淀粉芽孢杆菌菌剂和胶冻样类芽孢杆菌菌剂中的至少两种。其制备方法为：S1、菌剂固定化；S2、富硒处理；S3、共混制备。本申请优化了该富硒微生物菌剂材料的结合方式，通过采用水作为分散，改善了传统微生物菌剂与无机硒材料结合性能不佳的问题，无机硒有效分散在水中并与微生物菌剂有效结合，提高了富硒微生物菌剂的均匀稳定性能。

Description

一种富硒微生物菌剂及其制备方法

技术领域

本申请涉及菌剂材料的领域，尤其是涉及一种富硒微生物菌剂及其制备方法。

背景技术

硒是人体必需的微量元素之一，具有维护心脏生理功能、增加免疫能力、抗氧化、抗癌、排毒解毒、保肝护肝等作用。同时，硒对白内障、心血管疾病、克山病、大骨节病、关节炎等疾病也有一定的防治作用。但是，硒在人和动物体内无法自主合成，必须从食物中获取，植物是自然界硒生态循环中的关键性环节，是人和动物获取硒的最直接来源。因此，生产富硒作物，对解决人体缺硒问题至关重要。

微生物菌肥是一种新型的复合肥料，可以诱导植物产生过氧化物酶、多酚氧化酶、苯甲氨酸解氨酶等参与植物防御反应。将传统有机肥、微生物菌肥和化肥等按照一定比例混合施用后比传统施肥增产超过10％，不同微生物菌肥增产效果也不尽相同。所以通过将微生物菌剂与硒肥有机复合形成良好的富硒微生物菌剂，不仅能有效提高农作物的产量，同时通过对农作物中添加硒元素，还能使无机硒转化为有机硒，提高人或动物体内硒含量。

针对上述相关技术，发明人认为，现有的将微生物菌剂与无机硒复配的方案，由于无机硒与微生物菌剂混合的均匀度不佳，导致微生物对无机硒的吸收性能不佳，从而降低了植物对无机硒吸收效率。

发明内容

为了改善将植物对无机硒吸收效率不佳的缺陷，本申请提供一种富硒微生物菌剂及其制备方法。

第一方面，本申请提供一种富硒微生物菌剂，采用如下的技术方案：

一种富硒微生物菌剂，包括以下重量份物质：复合微生物菌剂5～10份、蛋白胨3～6份、酵母粉2～3份、***钠溶液6～10份和水150～200份；所述复合微生物菌剂包括枯草芽孢杆菌菌剂、解淀粉芽孢杆菌菌剂和胶冻样类芽孢杆菌菌剂中的至少两种。

通过采用上述技术方案，本申请一方面优化了该富硒微生物菌剂材料的结合方式，通过采用水作为分散，改善了传统微生物菌剂与无机硒材料结合性能不佳的问题，无机硒有效分散在水中并与微生物菌剂有效结合，提高了富硒微生物菌剂的均匀稳定性能。

另一方面，本申请进一步优化了复合微生物菌剂的菌种，采用枯草芽孢杆菌菌剂、解淀粉芽孢杆菌菌剂和胶冻样类芽孢杆菌菌剂的有机复配，先通过胶冻样类芽孢杆菌菌剂改善根际生态***，提高微生物菌剂的初始繁殖性能，其次，再通过枯草芽孢杆菌与解淀粉芽孢杆菌对***钠溶液中的无机硒有效吸附，从而进一步优化富硒微生物菌剂中微生物对无机硒材料的利用率。

优选的，所述富硒微生物菌剂还包括45～50重量份多孔分散凝胶基质，所述多孔分散凝胶基质为MOF基水凝胶基质。

通过采用上述技术方案，本申请进一步优化了富硒微生物菌剂的组分，通过在富硒微生物菌剂中添加了MOF基水凝胶基质来改善微生物菌剂与无机硒材料之间的结合效果。

由于本申请采用的MOF基水凝胶基质为金属-有机骨架基水凝胶材料。MOF是配位金属离子和有机配体通过配位键连接起来的具有特殊空间结构的多孔晶体材料，本身具有的多孔性、多功能性、小尺寸结构，将MOF和水凝胶材料结合来。

由于水凝胶是一类高度含水的具有立体结构的交联三维网络凝胶，由于其本身携带大量亲水性基团，MOF骨架能有效与水凝胶网络结构形成良好的复合结构，提高MOF水凝胶基质的机械强度、吸水性能和总孔体积等性质，从而有效吸附微生物菌剂和无机硒材料，使两者之间的复配效果进一步提高。

优选的，所述MOF基水凝胶基质中***钠的质量分数1～20％。

通过采用上述技术方案，本申请进一步优化了MOF基水凝胶基质的结构组分，通过在MOF基水凝胶基质中添加***钠。与单一MOF基水凝胶基质相比，负载有***钠的MOF基水凝胶基质，具有良好的分散性和流动性，便于微生物菌剂在实际繁殖过程中，提高对该MOF基水凝胶基质中***钠的吸附性能，从而进一步优化了微生物菌剂对无机硒材料的利用率。

优选的，所述MOF基水凝胶基质采用以下方案制成：

（1）取纤维素水凝胶、***钠溶液添加至十六烷基三甲基溴化铵中，搅拌混合并超声分散，收集分散液，再对分散液中添加抗坏血酸水溶液后，升温加热并添加氢氧化钠溶液，搅拌混合，洗涤至中性后，制备得凝胶液；

（2）将凝胶液、无水乙醇添加至N,N-二甲基甲酰胺中，搅拌混合并超声分散，收集分散混合液并添加硝酸锌和对苯二甲酸，加热反应后，静置冷却至室温，洗涤干燥，制备得MOF基水凝胶基质。

通过采用上述技术方案，本申请通过将***钠掺杂至MOF基水凝胶基质中，形成三元结构的水凝胶材料。所以本申请技术方案先将***钠与水凝胶形成良好的复合体系，再通过在水凝胶表面构建MOF骨架材料，使三者之间的结合更加稳定，提高了***钠在水凝胶材料中的分散性能，从而进一步优化了微生物菌剂对无机硒材料的利用率。

优选的，所述复合微生物菌剂还包括多孔包覆载体，所述多孔包覆载体与所述复合微生物菌剂的质量比为2.2～2.8:1。

通过采用上述技术方案，本申请还在复合微生物菌剂中添加了多孔包覆载体，一方面多孔包覆载体能有效改善复合微生物菌剂的稳定性能，通过多孔包覆载体包覆后的微生物菌剂具有良好的环境耐受性；另一方面，多孔包覆载体可以有效改善其活性和生物稳定性能，降低微生物菌剂在使用时的损失率，从而提高了复合微生物菌剂的稳定性能。

优选的，所述多孔包覆载体为海藻类多孔包覆颗粒，所述海藻类多孔包覆颗粒中采用的海藻包括海带、绿藻、浒苔中的一种或多种。

通过采用上述技术方案，本申请优化了多孔包覆载体的组分，通过选用海藻材料作为多孔包覆载体的原料。一方面，海藻材料中含有丰富的C、N、P等营养元素，对微生物具有很好的生长辅助性。另一方面，通过对海藻材料的再利用，增加了多孔包覆载体的循环利用性能，降低了生产成本。

优选的，所述多孔包覆载体孔隙率为55～80％。

通过采用上述技术方案，本申请进一步优化了多孔包覆载体的孔隙率，优化孔隙率的多孔包覆载体能提高对微生物菌剂的负载量，有效提高微生物菌剂后续繁殖需要的空间，同时多孔结构的设计能有效抵抗环境胁迫，并能为微生物菌剂的繁殖生长提供了便利。

优选的，所述海藻类多孔包覆颗粒采用以下方案制成：

取海藻颗粒并洗涤，粉碎过筛后用纤维素酶酶解处理，加热灭酶灭菌后，真空冷冻干燥，收集得海藻类多孔包覆颗粒。

通过采用上述技术方案，本申请在制备海藻类多孔包覆颗粒时，还对其进行酶解处理，由于酶解后的海藻表面的细胞壁中的纤维素有效分解形成多糖，有效提高了海藻类多孔包覆颗粒的孔隙率，同时也使海藻类多孔包覆颗粒之间形成良好的交联结构，进一步改善了海藻类多孔包覆颗粒的力学性能和机械强度。

第二方面，本申请提供一种富硒微生物菌剂的制备方法，采用如下的技术方案：

一种富硒微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：S1、菌剂固定化：采用海藻类多孔包覆颗粒为负载基质，将菌剂种子液、粘结剂和负载基质混合后，置于制粒机中压制制粒，收集复合微生物菌剂并自然晾干；

S2、富硒处理：取上述制备的复合微生物菌剂、***钠溶液和多孔分散凝胶基质混合后静置，收集得富硒混合物；

S3、共混制备：将富硒混合液、蛋白胨、酵母粉和水搅拌混合后，超声分散处理，即可制备得所述富硒微生物菌剂。

通过采用上述技术方案，本申请通过海藻类多孔包覆颗粒对菌剂种子液形成良好的包覆，改善菌体活性保留率，提高了菌体存活率；其次本申请再通过富硒处理并共混制备，有效简化了制备该富硒微生物菌剂的工艺，从而进一步提高了富硒微生物菌剂的生产效率。

优选的，所述粘结剂包括海藻酸钠、桃胶、***胶中的一种或多种。

通过采用上述技术方案，本申请优化了粘结剂的种类，通过优选的这类天然高分子粘结材料，不仅能使微生物菌剂有效包覆在海藻类多孔包覆颗粒中，有效提高微生物菌剂的存活率，同时该类天然高分子材料能在使用过程中作为微生物菌剂材料的养分，进一步改善微生物菌剂的繁殖效率。

综上所述，本申请具有以下有益效果：

第一、本申请一方面优化了该富硒微生物菌剂材料的结合方式，通过采用水作为分散，改善了传统微生物菌剂与无机硒材料结合性能不佳的问题，无机硒有效分散在水中并与微生物菌剂有效结合，提高了富硒微生物菌剂的均匀稳定性能。

另一方面，本申请进一步优化了复合微生物菌剂的菌种，采用枯草芽孢杆菌菌剂、解淀粉芽孢杆菌菌剂和胶冻样类芽孢杆菌菌剂的有机复配，先通过胶冻样类芽孢杆菌菌剂改善根际生态***，提高微生物菌剂的初始繁殖性能，其次，再通过枯草芽孢杆菌与解淀粉芽孢杆菌对***钠溶液中的无机硒有效吸附，从而进一步优化富硒微生物菌剂中微生物对无机硒材料的利用率。

第二、本申请进一步优化了富硒微生物菌剂的组分，通过在富硒微生物菌剂中添加了MOF基水凝胶基质来改善微生物菌剂与无机硒材料之间的结合效果。

由于本申请采用的MOF基水凝胶基质为金属-有机骨架基水凝胶材料。而MOF是配位金属离子和有机配体通过配位键连接起来的具有特殊空间结构的多孔晶体材料，本身具有的多孔性、多功能性、小尺寸结构，能有效与水凝胶材料形成结合。

由于水凝胶是一类高度含水的具有立体结构的交联三维网络凝胶，由于其本身携带大量亲水性基团，MOF骨架能有效与水凝胶网络结构形成良好的复合结构，提高MOF水凝胶基质的机械强度、吸水性能和总孔体积等性质，从而有效吸附微生物菌剂和无机硒材料，使两者之间的复配效果进一步提高。

第三、本申请通过将***钠掺杂至MOF基水凝胶基质中，形成三元结构的水凝胶材料，所以本申请技术方案先将***钠与水凝胶形成良好的复合体系，再通过在水凝胶表面构建MOF骨架材料，使三者之间的结合更加稳定，提高了***钠在水凝胶材料中的分散性能，从而进一步优化了微生物菌剂对无机硒材料的利用率。

第四、本申请还在复合微生物菌剂中添加了多孔包覆载体，一方面多孔包覆载体能有效改善复合微生物菌剂的稳定性能，通过多孔包覆载体包覆后的微生物菌剂具有良好的环境耐受性；另一方面，多孔包覆载体可以有效改善其活性和生物稳定性能，降低微生物菌剂在使用时的损失率，从而提高了复合微生物菌剂的稳定性能。

具体实施方式

以下结合实施例对本申请作进一步详细说明。

本申请实施例中，所选用的仪器设备如下所示，但不以此为限：

仪器：种子罐，上海广世生物工程设备有限公司；发酵罐，上海广世生物工程设备有限公司；蒸汽锅炉，江苏多乐热能设备有限公司WNS6-1.25-Y、Q；无菌灌装机，昆山银洲机器科技有限公司双头BIB。

药品：枯草芽孢杆菌菌剂，江苏植丰生物科技有限公司生产，有效活菌数为200亿/mL；解淀粉芽孢杆菌菌剂，江苏植丰生物科技有限公司生产，有效活菌数为100亿/mL；胶冻样类芽孢杆菌菌剂，江苏植丰生物科技有限公司生产，有效活菌数为100亿/mL；有机肥A，石家庄茂***业有限公司羊粪有机肥。

制备例

MOF基水凝胶基质制备

制备例1

一种MOF基水凝胶基质：

（1）取1.5kg纤维素水凝胶、50kg 0.1mol/L***钠溶液添加至100kg十六烷基三甲基溴化铵中，搅拌混合并置于200W下超声分散，收集分散液，再对分散液中添加10kg抗坏血酸水溶液后，升温加热至55℃，添加3kg0.1mol/L氢氧化钠溶液，搅拌混合，用去离子水洗涤至洗涤液呈中性后，制备得凝胶液；

（2）将1kg凝胶液、12kg无水乙醇添加至20kgN,N-二甲基甲酰胺中，搅拌混合并置于200W下超声分散，收集分散混合液并添加0.5kg硝酸锌和0.2kg对苯二甲酸，在120℃下加热反应后，静置冷却至室温，用去离子水洗涤处理后，再干燥至***钠质量分数为1％，即可制备得MOF基水凝胶基质1。

制备例2

一种MOF基水凝胶基质：

（1）取1.5kg纤维素水凝胶、50kg 0.1mol/L***钠溶液添加至100kg十六烷基三甲基溴化铵中，搅拌混合并置于200W下超声分散，收集分散液，再对分散液中添加10kg抗坏血酸水溶液后，升温加热至55℃，添加3kg0.1mol/L氢氧化钠溶液，搅拌混合，用去离子水洗涤至洗涤液呈中性后，制备得凝胶液；

（2）将1kg凝胶液、12kg无水乙醇添加至20kgN,N-二甲基甲酰胺中，搅拌混合并置于200W下超声分散，收集分散混合液并添加0.5kg硝酸锌和0.2kg对苯二甲酸，在120℃下加热反应后，静置冷却至室温，用去离子水洗涤处理后，再干燥至***钠质量分数为10％，即可制备得MOF基水凝胶基质1。

制备例3

一种MOF基水凝胶基质：

（1）取1.5kg纤维素水凝胶、50kg 0.1mol/L***钠溶液添加至100kg十六烷基三甲基溴化铵中，搅拌混合并置于200W下超声分散，收集分散液，再对分散液中添加10kg抗坏血酸水溶液后，升温加热至55℃，添加3kg0.1mol/L氢氧化钠溶液，搅拌混合，用去离子水洗涤至洗涤液呈中性后，制备得凝胶液；

（2）将1kg凝胶液、12kg无水乙醇添加至20kgN,N-二甲基甲酰胺中，搅拌混合并置于200W下超声分散，收集分散混合液并添加0.5kg硝酸锌和0.2kg对苯二甲酸，在120℃下加热反应后，静置冷却至室温，用去离子水洗涤处理后，再干燥至***钠质量分数为20％，即可制备得MOF基水凝胶基质1。

制备例4

一种海藻类多孔包覆颗粒：

取2kg海带、1kg绿藻和3kg浒苔，搅拌混合并洗涤，自然晾干后粉碎过500目筛，将过筛颗粒添加至200kg水中，得混合液，按50U/g，将纤维素酶添加至混合液中，在30℃下酶解处理，加热灭酶灭菌后，真空冷冻干燥，收集得孔隙率55％的海藻类多孔包覆颗粒1。

制备例5

一种海藻类多孔包覆颗粒：

取2kg海带、1kg绿藻和3kg浒苔，搅拌混合并洗涤，自然晾干后粉碎过500目筛，将过筛颗粒添加至200kg水中，得混合液，按50U/g，将纤维素酶添加至混合液中，在30℃下酶解处理，加热灭酶灭菌后，真空冷冻干燥，收集得孔隙率65％的海藻类多孔包覆颗粒2。

制备例6

一种海藻类多孔包覆颗粒：

取2kg海带、1kg绿藻和3kg浒苔，搅拌混合并洗涤，自然晾干后粉碎过500目筛，将过筛颗粒添加至200kg水中，得混合液，按50U/g，将纤维素酶添加至混合液中，在30℃下酶解处理，加热灭酶灭菌后，真空冷冻干燥，收集得孔隙率80％的海藻类多孔包覆颗粒3。

制备例7

将20kg枯草芽孢杆菌菌剂与10kg解淀粉芽孢杆菌菌剂搅拌混合，制备得复合微生物菌剂1。

制备例8

20kg枯草芽孢杆菌菌剂与10kg胶冻样类芽孢杆菌菌剂搅拌混合，制备得复合微生物菌剂2。

制备例9

10kg解淀粉芽孢杆菌菌剂、20kg枯草芽孢杆菌菌剂和10kg胶冻样类芽孢杆菌菌剂搅拌混合，制备得复合微生物菌剂3。

实施例

实施例1

一种富硒微生物菌剂，包括以下物质：5kg复合微生物菌剂1、3kg蛋白胨、2kg酵母粉、6kg0.1mol/L***钠溶液和150kg水；

一种富硒微生物菌剂的制备方法：

共混制备：将复合微生物菌剂1、蛋白胨、酵母粉、0.1mol/L***钠溶液和水搅拌混合后，在200W下超声分散处理，即可制备得所述富硒微生物菌剂。

实施例2

一种富硒微生物菌剂，包括以下物质：7.5kg复合微生物菌剂1、5kg蛋白胨、2.5kg酵母粉、8kg0.1mol/L***钠溶液和175kg水；

一种富硒微生物菌剂的制备方法：

共混制备：将复合微生物菌剂1、蛋白胨、酵母粉、0.1mol/L***钠溶液和水搅拌混合后，在200W下超声分散处理，即可制备得所述富硒微生物菌剂。

实施例3

一种富硒微生物菌剂，包括以下物质：10kg复合微生物菌剂1、6kg蛋白胨、3kg酵母粉、10kg0.1mol/L***钠溶液和200kg水；

一种富硒微生物菌剂的制备方法：

共混制备：将复合微生物菌剂1、蛋白胨、酵母粉、0.1mol/L***钠溶液和水搅拌混合后，在200W下超声分散处理，即可制备得所述富硒微生物菌剂。

实施例4

一种富硒微生物菌剂，与实施例1区别在于，实施例4采用的是复合微生物菌剂2。

实施例5

一种富硒微生物菌剂，与实施例1区别在于，实施例5采用的是复合微生物菌剂3。

实施例6

一种富硒微生物菌剂，与实施例1区别在于，实施例6中还添加了45kgMOF基水凝胶基质1。

一种富硒微生物菌剂的制备方法：

S1、富硒处理：取复合微生物菌剂1、***钠溶液和MOF基水凝胶基质1混合后静置，收集得富硒混合物；

S2、共混制备：将富硒混合液、蛋白胨、酵母粉和水搅拌混合后，超声分散处理，即可制备得所述富硒微生物菌剂。

实施例7

一种富硒微生物菌剂，与实施例1区别在于，实施例7中还添加了45kgMOF基水凝胶基质2。

一种富硒微生物菌剂的制备方法：

S1、富硒处理：取复合微生物菌剂1、***钠溶液和MOF基水凝胶基质2混合后静置，收集得富硒混合物；

S2、共混制备：将富硒混合液、蛋白胨、酵母粉和水搅拌混合后，超声分散处理，即可制备得所述富硒微生物菌剂。

实施例8

一种富硒微生物菌剂，与实施例1区别在于，实施例8中还添加了45kgMOF基水凝胶基质3。

一种富硒微生物菌剂的制备方法：

S1、富硒处理：取复合微生物菌剂1、***钠溶液和MOF基水凝胶基质3混合后静置，收集得富硒混合物；

S2、共混制备：将富硒混合液、蛋白胨、酵母粉和水搅拌混合后，超声分散处理，即可制备得所述富硒微生物菌剂。

实施例9

一种富硒微生物菌剂，与实施例6区别在于，实施例9中MOF基水凝胶基质1的添加量为47.5kg。

实施例10

一种富硒微生物菌剂，与实施例6区别在于，实施例10中MOF基水凝胶基质1的添加量为50kg。

实施例11

一种富硒微生物菌剂，与实施例6区别在于，实施例11中的富硒微生物菌剂采用以下方案制成：

S1、菌剂固定化：取20kg制备例7制备的复合微生物菌剂3，与3kg海藻酸钠和44kg海藻类多孔包覆颗粒1搅拌混合并置于制粒机中，压制制粒，收集得复合微生物菌剂；

S2、富硒处理：取5kg上述制备的复合微生物菌剂、6kg0.1mol/L***钠溶液和45kgMOF基水凝胶基质1混合后静置，收集得富硒混合物；

S3、共混制备：将富硒混合液、3kg蛋白胨、2kg酵母粉和150kg水搅拌混合后，超声分散处理，即可制备得所述富硒微生物菌剂。

实施例12

一种富硒微生物菌剂，与实施例11区别在于，实施例12中的复合微生物菌剂采用以下方案制成：

S1、菌剂固定化：取20kg制备例7制备的复合微生物菌剂3，与3kg海藻酸钠和50kg海藻类多孔包覆颗粒1搅拌混合并置于制粒机中，压制制粒，收集得复合微生物菌剂。

实施例13

一种富硒微生物菌剂，与实施例11区别在于，实施例13中的复合微生物菌剂采用以下方案制成：

S1、菌剂固定化：取20kg制备例7制备的复合微生物菌剂3，与3kg海藻酸钠和56kg海藻类多孔包覆颗粒1搅拌混合并置于制粒机中，压制制粒，收集得复合微生物菌剂。

实施例14

一种富硒微生物菌剂，与实施例11区别在于，实施例14中的复合微生物菌剂采用的制备例5制备的海藻类多孔包覆颗粒2。

实施例15

一种富硒微生物菌剂，与实施例11区别在于，实施例15中的复合微生物菌剂采用的制备例6制备的海藻类多孔包覆颗粒3。

需要说明的是，本申请中采用的粘接剂不仅包括海藻酸钠，还可以为桃胶或***胶等高分子天然粘接剂。

对比例

对比例1

一种微生物菌剂，与实施例1区别在于，对比例1中未添加***钠溶液。

对比例2

一种微生物菌剂，与实施例1区别在于，对比例2中复合微生物菌剂中采用的是单一的枯草芽孢杆菌菌剂。

对比例3

一种微生物菌剂，与实施例1区别在于，对比例2中复合微生物菌剂中采用的是单一的解淀粉芽孢杆菌菌剂。

对比例4

一种微生物菌剂，与实施例1区别在于，对比例4中复合微生物菌剂中采用的是单一的胶冻样类芽孢杆菌菌剂。

性能检测试验

（1）按GB 20287-2006、NY/T2321-2013标准，对本申请实施例的1制备的富硒微生物菌剂进行检测，检测效果如下表表3所示；

（2）按农业部《肥料登记管理办法》、农业行业标准《肥料效应鉴定田间试验技术规程》（NY/T497-2002）和《微生物肥料田间试验技术规程及肥效评价指南》（NY/T1536-2007）的要求，对实施例1～15、对比例1～4制备的富硒微生物菌剂和微生物菌剂在葡萄树上施用效果；

试验时间：4月-7月。

供试土壤养分如下表表1所示：

表1 土壤养分状况表

供试品种及种植方式：金滕葡萄，行距1.5m，株距0.8m，树龄6年。

施肥方式：种植当年的前一年11月，穴施45％硫酸钾复混肥50kg/666.7m²，种植当月的前一个月施加有机肥A 240kg/66.7m²，种植当月和种植次月结合浇水冲施硫酸钾复合肥（15-5-20）30kg/666.7m²。

种植当天施加实施例1～15和对比例1～4中制备的富硒微生物菌剂和微生物菌剂，按1公斤亩/次，稀释150倍进行冲施，待冲施后，正常生长至7月收获，对收获情况进行统计，具体结果如下表表2所示。

表2 种植产物生物学性状和抗病性影响表

表3 性能检测表

结合实施例1～15、对比例1～4和表2性能检测表，对比可以发现：

现将实施例1～5、实施例6～10、实施例11～15分为三组，对比例1、对比例2～4分为两组，进行对比，具体如下：

（1）首先，将实施例1～5结合对比例1进行性能对比，从表2中数据可以看出，实施例1～5的数据明显优于对比例1的数据，说明本申请技术方案中通过优化了该富硒微生物菌剂材料的结合方式，采用水作为分散，改善了传统微生物菌剂与无机硒材料结合性能不佳的问题，无机硒有效分散在水中并与微生物菌剂有效结合，提高了富硒微生物菌剂的均匀稳定性能。

其次，将实施例1～4、实施例5和对比例2～4进行对比，从表2中数据可以看出，实施例1～4的数据略低于实施例5的数据，而对比例2～4的数据明显低于实施例5，说明本申请技术方案通过进一步优化了复合微生物菌剂的菌种优化富硒微生物菌剂中微生物对无机硒材料的利用率。

（2）将实施例6～10和实施例1进行对比，实施例6～10的数据明显高于实施例1的数据，由于实施例6～10在富硒微生物菌剂中添加了MOF基水凝胶基质，说明本申请技术方案通过在富硒微生物菌剂中添加了MOF基水凝胶基质来改善微生物菌剂与无机硒材料之间的结合效果。MOF骨架能有效与水凝胶网络结构形成良好的复合结构，提高MOF水凝胶基质的机械强度、吸水性能和总孔体积等性质，从而有效吸附微生物菌剂和无机硒材料，使两者之间的复配效果进一步提高。

（3）将实施例11～15和实施例6进行对比，由于实施例11～15中还添加了海藻类多孔包覆颗粒，结合表2可以看出，实施例11～15的数据明显提高，说明本申请技术方案通过添加多孔包覆载体，有效改善复合微生物菌剂的稳定性能，通过多孔包覆载体包覆后的微生物菌剂具有良好的环境耐受性，有效改善其活性和生物稳定性能，降低微生物菌剂在使用时的损失率，从而提高了复合微生物菌剂的稳定性能。

本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (10)

1.一种富硒微生物菌剂，其特征在于，包括以下重量份物质：

复合微生物菌剂5～10份；

蛋白胨3～6份；

酵母粉2～3份；

***钠溶液6～10份；

水150～200份；所述复合微生物菌剂包括枯草芽孢杆菌菌剂、解淀粉芽孢杆菌菌剂和胶冻样类芽孢杆菌菌剂中的至少两种。

2.根据权利要求1所述的一种富硒微生物菌剂，其特征在于，所述富硒微生物菌剂还包括45～50重量份多孔分散凝胶基质，所述多孔分散凝胶基质为MOF基水凝胶基质。

3.根据权利要求2所述的一种富硒微生物菌剂，其特征在于，所述MOF基水凝胶基质中***钠的质量分数1～20％。

4.根据权利要求3所述的一种富硒微生物菌剂，其特征在于，所述MOF基水凝胶基质采用以下方案制成：

（1）取纤维素水凝胶、***钠溶液添加至十六烷基三甲基溴化铵中，搅拌混合并超声分散，收集分散液，再对分散液中添加抗坏血酸水溶液后，升温加热并添加氢氧化钠溶液，搅拌混合，洗涤至中性后，制备得凝胶液；

（2）将凝胶液、无水乙醇添加至N,N-二甲基甲酰胺中，搅拌混合并超声分散，收集分散混合液并添加硝酸锌和对苯二甲酸，加热反应后，静置冷却至室温，洗涤干燥，制备得MOF基水凝胶基质。

5.根据权利要求1所述的一种富硒微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂还包括多孔包覆载体，所述多孔包覆载体与所述复合微生物菌剂的质量比为2.2～2.8:1。

6.根据权利要求5所述的一种富硒微生物菌剂，其特征在于，所述多孔包覆载体为海藻类多孔包覆颗粒，所述海藻类多孔包覆颗粒中采用的海藻包括海带、绿藻、浒苔中的一种或多种。

7.根据权利要求5所述的一种富硒微生物菌剂，其特征在于，所述多孔包覆载体孔隙率为55～80％。

8.根据权利要求6所述的一种富硒微生物菌剂，其特征在于，所述海藻类多孔包覆颗粒采用以下方案制成：

取海藻颗粒并洗涤，粉碎过筛后用纤维素酶酶解处理，加热灭酶灭菌后，真空冷冻干燥，收集得海藻类多孔包覆颗粒。

9.根据权利要求1～8任一项所述的一种富硒微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：

S1、菌剂固定化：采用海藻类多孔包覆颗粒为负载基质，将菌剂种子液、粘结剂和负载基质混合后，置于制粒机中压制制粒，收集复合微生物菌剂并自然晾干；

S2、富硒处理：取上述制备的复合微生物菌剂、***钠溶液和多孔分散凝胶基质混合后静置，收集得富硒混合物；

S3、共混制备：将富硒混合液、蛋白胨、酵母粉和水搅拌混合后，超声分散处理，即可制备得所述富硒微生物菌剂。

10.根据权利要求9所述的一种富硒微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述粘结剂包括海藻酸钠、桃胶、***胶中的一种或多种。