CN114099378A - 一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法 - Google Patents
一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114099378A CN114099378A CN202111056040.4A CN202111056040A CN114099378A CN 114099378 A CN114099378 A CN 114099378A CN 202111056040 A CN202111056040 A CN 202111056040A CN 114099378 A CN114099378 A CN 114099378A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- parts
- freckle
- preparation
- culture
- natural antioxidant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000006210 lotion Substances 0.000 title claims abstract description 39
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 title claims abstract description 27
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 title claims abstract description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 59
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims abstract description 47
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims abstract description 42
- 208000003351 Melanosis Diseases 0.000 claims abstract description 38
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 35
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 33
- 239000000047 product Substances 0.000 claims abstract description 21
- 244000042430 Rhodiola rosea Species 0.000 claims abstract description 17
- 235000003713 Rhodiola rosea Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 241000205585 Aquilegia canadensis Species 0.000 claims abstract description 16
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims abstract description 16
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 15
- 241000132012 Atractylodes Species 0.000 claims abstract description 14
- 241000112528 Ligusticum striatum Species 0.000 claims abstract description 14
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 13
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 5
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims abstract description 5
- 241000186016 Bifidobacterium bifidum Species 0.000 claims abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 20
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 19
- 239000004909 Moisturizer Substances 0.000 claims description 17
- 230000001333 moisturizer Effects 0.000 claims description 17
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 17
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 14
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 11
- 235000015193 tomato juice Nutrition 0.000 claims description 10
- 241000628997 Flos Species 0.000 claims description 9
- 108091005508 Acid proteases Proteins 0.000 claims description 8
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 claims description 7
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 claims description 7
- 230000003068 static effect Effects 0.000 claims description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 6
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 6
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 6
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims description 6
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 claims description 6
- 244000020518 Carthamus tinctorius Species 0.000 claims description 5
- 235000003255 Carthamus tinctorius Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 5
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 claims description 4
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 4
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 claims description 4
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 claims description 4
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 4
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 3
- 241000219784 Sophora Species 0.000 claims description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 claims description 3
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 claims description 2
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940002008 bifidobacterium bifidum Drugs 0.000 claims description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 abstract description 14
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 13
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 abstract description 10
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 abstract description 8
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 abstract description 7
- 239000013543 active substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 abstract description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 abstract description 3
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 87
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 39
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 24
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 13
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 13
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 11
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 10
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 241000235645 Pichia kudriavzevii Species 0.000 description 8
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 8
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 5
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 5
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 5
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000015096 spirit Nutrition 0.000 description 5
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 4
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 4
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 4
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MIDXCONKKJTLDX-UHFFFAOYSA-N 3,5-dimethylcyclopentane-1,2-dione Chemical compound CC1CC(C)C(=O)C1=O MIDXCONKKJTLDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 description 3
- 241001134770 Bifidobacterium animalis Species 0.000 description 3
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 3
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 3
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229940118852 bifidobacterium animalis Drugs 0.000 description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 3
- 235000013736 caramel Nutrition 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 3
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 3
- TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N hydroxyl Chemical compound [OH] TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 241000186018 Bifidobacterium adolescentis Species 0.000 description 2
- 235000005976 Citrus sinensis Nutrition 0.000 description 2
- 240000002319 Citrus sinensis Species 0.000 description 2
- 206010014970 Ephelides Diseases 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N L-lactic acid Chemical compound C[C@H](O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000007933 dermal patch Substances 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 238000011056 performance test Methods 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 238000011076 safety test Methods 0.000 description 2
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000010563 solid-state fermentation Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 210000000434 stratum corneum Anatomy 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 235000000604 Chrysanthemum parthenium Nutrition 0.000 description 1
- 241000756943 Codonopsis Species 0.000 description 1
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000612153 Cyclamen Species 0.000 description 1
- AHMIDUVKSGCHAU-UHFFFAOYSA-N Dopaquinone Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC(=O)C(=O)C=C1 AHMIDUVKSGCHAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002045 Endothelin Human genes 0.000 description 1
- 108050009340 Endothelin Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 239000000940 FEMA 2235 Substances 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 102100031413 L-dopachrome tautomerase Human genes 0.000 description 1
- AHMIDUVKSGCHAU-LURJTMIESA-N L-dopaquinone Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC(=O)C(=O)C=C1 AHMIDUVKSGCHAU-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 1
- 240000007890 Leonurus cardiaca Species 0.000 description 1
- 235000000802 Leonurus cardiaca ssp. villosus Nutrition 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001522129 Pinellia Species 0.000 description 1
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 240000003152 Rhus chinensis Species 0.000 description 1
- 235000014220 Rhus chinensis Nutrition 0.000 description 1
- 241000235342 Saccharomycetes Species 0.000 description 1
- 241000304195 Salvia miltiorrhiza Species 0.000 description 1
- 235000011135 Salvia miltiorrhiza Nutrition 0.000 description 1
- 241000133134 Saussurea Species 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 206010040830 Skin discomfort Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 1
- LJSAJMXWXGSVNA-UHFFFAOYSA-N a805044 Chemical compound OC1=CC=C(O)C=C1.OC1=CC=C(O)C=C1 LJSAJMXWXGSVNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011481 absorbance measurement Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000005282 brightening Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 229910001431 copper ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930186364 cyclamen Natural products 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108010051081 dopachrome isomerase Proteins 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- ZUBDGKVDJUIMQQ-UBFCDGJISA-N endothelin-1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]2CSSC[C@@H](C(N[C@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2)=O)NC(=O)[C@@H](CO)NC(=O)[C@H](N)CSSC1)C1=CNC=N1 ZUBDGKVDJUIMQQ-UBFCDGJISA-N 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 239000012676 herbal extract Substances 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 1
- 230000003780 keratinization Effects 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 210000002780 melanosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 1
- -1 salvia miltiorrhiza Chemical compound 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 235000019614 sour taste Nutrition 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010025 steaming Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9794—Liliopsida [monocotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/59—Mixtures
- A61K2800/592—Mixtures of compounds complementing their respective functions
- A61K2800/5922—At least two compounds being classified in the same subclass of A61K8/18
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
- A61K2800/78—Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists
- A61K2800/782—Enzyme inhibitors; Enzyme antagonists
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
- A61K2800/85—Products or compounds obtained by fermentation, e.g. yoghurt, beer, wine
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Birds (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
本发明提供一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,是利用酵母菌与双歧杆菌混合发酵红景天、金银花、白术、川芎、黄豆芽这几味中药,同时添加浓香型白酒发酵副产物黄水中的护肤活性物质来制备护肤品,包括:将黄水活性成分提取液按照5‑20%(v/v)的添加量添加到酵母及双歧杆菌混合发酵的中药活性产物中,再添加植物提取液调香,之后依次均质、除菌过滤、分装、密封,并于0‑10℃保藏。采用本发明获得的天然抗氧化祛斑淡斑护肤液具有高保湿性、美白祛斑淡斑性、舒缓性和安全性,并且该护肤液稀释5倍后室温储存1年,其最大吸收波长190nm处(肽的吸收区)的吸光值仅降低8.9%。
Description
技术领域
本发明属于护肤品制备技术领域,具体涉及一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法。
背景技术
皮肤黑色素的形成过程与酪氨酸酶、多巴色素互变酶、氧化酶等物质以及内皮素(简称“三酶一素”)密切相关,当前主流的美白祛斑产品绝大多数都是围绕控制这“三酶一素”的活性展开的,一些美白祛斑活性成分的作用机理大致可分五种:一是通过还原作用直接将黑色的氧化型黑色素还原为无色的还原型色素,如VC,但此类药物需要口服,且对已经形成的斑点无效;二是采用对苯二酚(氢醌)等物质使酪氨酸酶变性;三是采用果酸等物质作用于酪氨酸酶的铜离子,降低皮肤角质层细胞之间的粘着力,加快角质层细胞脱落和黑色素代谢来达到美白祛斑的效果,但长期使用果酸有可能使皮肤变薄,变敏感,从而令肌肤脆弱,失去对抗紫外线的功能。四是通过破坏自由基来改变黑色素小体结构,进而破坏黑色素细胞。五是通过具有靶向作用的营养物质促进黑色素细胞的代谢从而缩短黑色素细胞的生理周期,加快黑色素细胞角质化而排出体外。但在干扰或阻断皮肤黑色素生成过程中,将产生许多如多巴、多巴醌等中间体的有害物质,导致皮肤受损。
随着护肤品行业的快速发展,人们对护肤品提出了更高的要求——天然、高效、环保。植物是天然护肤品原料的主要来源,中草药在护肤品中的应用由来已久,已有研究发现,多种中药或其提取物具有护肤活性,其护肤机制大致可分为两类,一是通过抑制酪氨酸酶活性抑制黑色素生成实现美白,如丹参、益母草、红花、红景天等;二是通过消除细胞自由基实现抗衰老,如人参、雪莲、红景天等。目前中草药在护肤品中的应用方式一般为直接添加或提取活性成分后添加。但中药中的有效成分通常含量较低,且被纤维等物质包裹,微生物发酵技术已被证实为提升中药药用价值、减少毒副作用的重要手段。如半夏曲、六神曲、百药煎等经过发酵的中药其活性明显改善,毒副作用下降,人参经发酵后其稀有皂苷含量大幅上升,目前用于中草药发酵的微生物包括药用真菌(30余种)、双歧杆菌、芽孢杆菌、乳酸菌和酵母(仅见酿酒酵母一个种)等。但迄今为止,尚未见发酵后中药用于护肤品原料的相关报道。
同时,微生物本身也会产生一些具有护肤活性的成分,如酵母发酵可产生多种小分子氨基酸、多肽、核苷酸、维生素等天然活性成分物质,是非常好的综合皮肤调理剂,具有抗衰老、保湿、美白的护肤活性,人体实验证实酵母提取物具有可以媲美维生素的安全性,可改善皮肤粗糙度,具有良好的亮白皮肤作用,并且,其发酵成分活性高、分子小,吸收率比其他天然成分高36倍以上,一些酵母提取物已用在功能性护肤品中,实现补水、美白、抗氧化、减少皮肤油水等功效。双歧杆菌富含B族维生素,该菌的代谢产物富含L-乳酸、小分子肽及具有微生态作用的酶,许多中药成分对双歧杆菌具有促进作用,如人参、党参、枸杞、大黄等提取物是良好的促双歧因子。
浓香型白酒采用传统的混菌自然固态发酵工艺,数百年来经多轮次的续糟发酵,在糟醅中逐渐形成了相对稳定的功能微生物群体,这些功能微生物是我国重要的特色微生物资源。在长达70天的浓香型白酒固态发酵过程中,这些功能微生物不仅产生乙醇及多种风味物质,还产生氨基酸、小分子肽等多种护肤活性物质,这些物质与菌体分解物一起,经渗滤运移富集到发酵副产物黄水中,沉积在窖池中下部,在生产中通常用于串蒸提香、养窖护窖。
在前期研究中,我们从白酒糟醅中分离到可产多种护肤活性产物的65株Pichiakudriavzevii酵母,其中大部分菌株与双歧杆菌不存在相互之间的生长抑制,存在混菌发酵制备活性产物的可能。
基于上述背景,本发明开展了酵母与双歧杆菌混合发酵中药制备护肤品的相关研究。
发明内容
针对现有技术存在的上述问题,本发明提供一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,是利用酵母菌与双歧杆菌混合发酵具有护肤活性的中药,同时添加浓香型白酒发酵副产物黄水中的护肤活性物质来制备护肤品。本发明的技术方案为:
第一个方面,本发明提供一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,包括以下步骤:
步骤1、中药培养液制备:在红景天、金银花、白术、川芎、黄豆芽的混合提取液中加入番茄汁混匀,得到中药培养液;
步骤2、酵母菌预生长:在WL固体培养基中划线接种酵母菌株,挑取绿色凸起的单菌落转接入麦芽汁培养基,于25-32℃、40-80r/min条件下振荡培养18-24h,再以5-10%(v/v)的接种量接种到所述中药培养液中,按照前述培养条件继续培养6-12h,得到酵母培养液;
步骤3、双歧杆菌预生长:在蔬菜复合培养基中接种双歧杆菌,37℃静置培养24h;再将双歧杆菌菌悬液以5-10%的接种量接种到步骤2获得的酵母培养液中共发酵,28-32℃静置培养30-40h,再以5℃/d的升温梯度逐天升温培养3d,得到混菌发酵液;
步骤4、发酵液后处理:向步骤3获得的混菌发酵液中添加5-10万U/L的酸性蛋白酶、10-20万U/L的中性蛋白酶,于40-50℃超声条件下酶解30-50min,再离心取上清液,即得酵母及双歧杆菌混合发酵的中药活性产物;
步骤5、黄水活性成分提取:在浓香型白酒发酵得到的黄水中加入5-15万U/L的酸性蛋白酶,于40-50℃处理30-50min,再离心取上清液;将上清液进行透析并收集其中的活性成分,浓缩,得到黄水活性成分提取液;
步骤6、护肤水调配:将步骤5获得的黄水活性成分提取液按照10-30%(v/v)的添加量添加到步骤4获得的上清液中,再添加用于香味调节的植物提取液混匀,之后依次均质、0.22μm滤膜过滤、分装、密封,于0-10℃保藏。
进一步地,所述红景天、金银花、白术、川芎、黄豆芽的混合提取液的制备方法包括:将红景天、金银花、白术、川芎、黄豆芽、水按照重量份配比为:红景天8~12份,金银花5~8份,白术10~15份,川芎15~20份,黄豆芽5~10份,水80~150份混合均匀,浸泡后再煎煮,过滤,保留滤液,加入占滤液重量1-2%的糖,灭菌。
优选地,所述红景天、金银花、白术、川芎、黄豆芽、水的重量份配比为:红景天10份,金银花6份,白术12份,川芎18份,黄豆芽7份,水100份。
可选地,所述红景天8~12份替换成红花8~12份,优选为9份。
可选地,所述金银花5~8份替换成槐花5~8份,优选为6份。
可选地,所述糖为葡萄糖或蔗糖。
优选地,所述番茄汁的制备方法包括:将番茄切块添加9倍重量的水煮沸20min,纱布过滤,4000rpm离心5min,0.22μm过滤。
优选地,所述番茄汁的加入量为红景天、金银花、白术、川芎、黄豆芽的混合提取液的1-5%(v/v)。
进一步地,所述酵母菌具体为Pichia kudriavzeviiYB05菌株,保藏于中国普通微生物菌种保藏中心,保藏编号CGMCC NO:22732。
可选地,所述麦芽汁培养基替换为豆芽汁培养基。
优选地,所述豆芽汁培养基按照重量份的组成为:1份葡萄糖,50份豆芽汁,50份水。本发明对豆芽汁做了些许改进,以更好的适应本发明这种酵母菌的预生长。
进一步地,所述双歧杆菌具体为动物双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)。
进一步地,所述蔬菜复合培养基按照重量份的组成为:番茄汁80~120份,豆芽汁180~200份,水260~320份,葡萄糖9~12份,L-半胱氨酸1~3份。
可选地,所述步骤4中的离心方法替换为其他过滤方法。
优选地,所述黄水采用浓香型白酒发酵完毕取出的头道黄水。
进一步地,所述透析的操作过程包括:将上清液加入到截留1000分子量的透析袋中,于0.5倍体积去离子水中搅拌透析12-18h,收集水中分子量1000以下的小分子肽等活性成分。
可选地,所述步骤5中浓缩具体为旋转蒸发、薄层蒸发等方案。
可选地,所述植物提取液包括但不限于玫瑰提取液或甜橙提取液,以玫瑰提取液为例,可添加玫瑰精油或玫瑰花露水,添加量分别为酵母及双歧杆菌混合发酵中药的活性产物的0.005-0.03%(wt/v)和0.05-0.3%(wt/v)。也可根据个人喜好采用其他植物精油或花露水,并相应调整用量。均质处理也可根据添加精油后的澄清状态灵活选择是否使用。
第二个方面,本发明提供一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液,是采用上述制备方法获得。
与现有技术相比,本发明的有益效果总结如下,具体实施例中还有进一步证明:
1)美白祛斑:本发明的天然抗氧化祛斑淡斑护肤液对酪氨酸酶抑制率在80-95%。
2)抗氧化性:本发明的天然抗氧化祛斑淡斑护肤液羟自由基清除率在90%以上。
3)养颜特性:本发明的天然抗氧化祛斑淡斑护肤液中低于1000分子量的小分子肽共420种,占肽类物质总量的99.1%,其最大吸收波长在190nm左右。
4)安全性:本发明所用原料均为天然原料,具有可媲美维生素的安全性。参考《化妆品安全技术规范》进行24h皮肤斑贴试验及30日皮肤安全试验,该护肤液试验结果均为阴性。
5)本发明所得护肤液稀释5倍后室温储存1年,其最大吸收波长190nm处(肽的吸收区)的吸光值仅降低8.9%,表明活性肽的存储稳定性较好。
附图说明
此处所说明的附图用来提供对本发明的进一步理解,构成本发明的一部分,本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明,并不构成对本发明的不当限定。在附图中:
图1是本发明采用的Pichia kudriavzeviiYB05菌株的菌落及细胞形态图,其中图(a)为菌落形态图;图(b)为细胞形态图。
图2是本发明实施例制备得到的护肤液样品的实物图,其中图(a)为实施例1的护肤液实物图;图(b)为实施例2的护肤液实物图。
图3是本发明实施例1的护肤液的蛋白质谱总离子图。
图4是本发明实施例1的护肤液的扫描光谱图。
图5是本发明实施例1的护肤液稀释5倍后储存1年内的吸光值变化趋势图。
具体实施方式
本发明实施例采用的Pichia kudriavzeviiYB04酵母菌株,保藏于中国普通微生物菌种保藏中心,保藏编号CGMCC NO:22732。其菌落及细胞形态如图1所示。
本发明实施例采用的动物双歧杆菌购自中国普通微生物保藏中心,保藏号CGMCC:1.2268。
本发明实施例采用的WL固体培养基、麦芽汁培养基购自青岛海博公司或环凯公司。
此外,在本发明的描述中,需要说明的是,实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面结合附图和具体的实施例对本发明做进一步详细说明,所述是对本发明的解释而不是限定。
实施例1
本实施例提供一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,包括以下步骤:
步骤1、中药培养液制备:100克番茄切块添加900mL水煮沸20分钟,纱布过滤,4000rpm离心5min,0.22μm过滤制得番茄汁备用。称取红景天100g、金银花60g、白术120g、川芎180g、黄豆芽70g,加入1L水浸泡30分钟,煎煮30分钟后四层纱布过滤,得600mL左右滤液,加入12g葡萄糖,分装入2个500mL的三角瓶中,115℃灭菌30min,无菌条件下每瓶加入上述除菌过滤后的番茄汁6mL,混匀。
步骤2、Pichia kudriavzeviiYB05酵母菌预生长:该酵母分离自浓香型白酒发酵糟醅,现保存于中国普通微生物菌种保藏中心。在WL固体培养基中划线接种酵母菌株YB05,挑取绿色凸起的单菌落转接入麦芽汁培养基,于28℃、60r/min条件下振荡培养24h,再以10%(v/v)的接种量接种到所述中药培养液中,按照前述培养条件继续培养12h,得到酵母培养液。
步骤3、双歧杆菌预生长:在蔬菜复合培养基中接种双歧杆菌,37℃静置培养24h;再将双歧杆菌菌悬液以10%的接种量接种到步骤2获得的酵母培养液中共发酵,30℃静置培养36h,再以5℃/d的升温梯度逐天升温培养3d,得到混菌发酵液。
步骤4、发酵液后处理:向步骤3所得混菌发酵液中添加活性为10万U/g的酸性蛋白酶0.25g、活性为10万U/g的中性蛋白酶0.5g,45℃超声条件下酶解40min,再5000rpm离心10min,得到约500mL上清液备用。
步骤5、黄水活性成分提取:浓香型白酒发酵完毕开窖后第一次取到的黄水(头道黄水)100mL,加入活性为10万U/g的酸性蛋白酶0.1g,于50℃处理30min,5000rpm离心5min,取80mL上清液,加入到截留1000分子量的透析袋中,于40mL去离子水中搅拌透析14h,收集40mL左右透析袋外液体,再在40℃下氮吹20min,去除部分挥发性有机物,收集氮吹残液备用。
步骤6、护肤液调配:将步骤4所得500mL上清液及步骤5所得100mL黄水提取液混合,再添加0.06g玫瑰精油混匀,30Mpa均质5min,0.22μm除菌过滤,分装到无菌容器中,密封,0-10℃保藏。制备得到的护肤液的实物如图2中左图所示。
实施例2
本实施例提供一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,包括以下步骤:
步骤1、中药培养液制备:100克番茄切块添加900mL水煮沸20分钟,纱布过滤,4000rpm离心5min,0.22μm过滤制得番茄汁备用。称取红花90g、槐花60g、白术120g、川芎180g、黄豆芽70g,加入1L水浸泡30分钟,煎煮30分钟后四层纱布过滤,得600mL左右滤液,加入12g葡萄糖,分装入2个500mL的三角瓶中,115℃灭菌30min,无菌条件下每瓶加入上述除菌过滤后的番茄汁5mL,混匀。
步骤2、Pichia kudriavzeviiYB05酵母菌预生长:该酵母分离自浓香型白酒发酵糟醅,现保存于中国普通微生物菌种保藏中心。在WL固体培养基中划线接种酵母菌株YB05,挑取绿色凸起的单菌落转接入麦芽汁培养基,于32℃、40r/min条件下振荡培养18h,再以5%(v/v)的接种量接种到所述中药培养液中,按照前述培养条件继续培养12h,得到酵母培养液。
步骤3、双歧杆菌预生长:在蔬菜复合培养基中接种双歧杆菌,37℃静置培养24h;再将双歧杆菌菌悬液以5%的接种量接种到步骤2获得的酵母培养液中共发酵,30℃静置培养36h,再以5℃/d的升温梯度逐天升温培养3d,得到混菌发酵液。
步骤4、发酵液后处理:向步骤3所得混菌发酵液中添加活性为10万U/g的酸性蛋白酶0.2g、活性为10万U/g的中性蛋白酶0.4g,42℃超声条件下酶解40min,再5000rpm离心10min,得到约500mL上清液备用;
步骤5、黄水活性成分提取:浓香型白酒发酵完毕开窖后第一次取到的黄水(头道黄水)200mL,加入活性为10万U/g的酸性蛋白酶0.3g,于40℃处理50min,5000rpm离心5min,取170mL上清液,加入到截留1000分子量的透析袋中,于85mL去离子水中搅拌透析14h,收集85mL左右透析袋外液体,再在50℃下薄层(平铺,0.5cm厚)鼓风蒸发20min,去除部分挥发性有机物,收集浓缩液备用。
步骤6、护肤液调配:将步骤4所得500mL上清液及步骤5所得100mL黄水提取液混合,再添加0.1g甜橙精油混匀,分装到无菌容器中,密封,0-10℃保藏。制备得到的护肤液的实物如图2中右图所示。
实施例3
性能测试
对实施例1和2所得的护肤液进行性能测试,性能测试方法如下:
1)外观及气味
微黄,清澈透明,气味芳香,有酵母及乳酸菌发酵液特有的微酸味。
2)抗氧化特征:羟自由基清除率90%以上。
在试管中1.0mLH2O2(8.8mmol/L),1.0mLFeSO4溶液(0.9mmol/L),1.0mL水杨酸(9mmol/L),1.0mL样品溶液,H2O2最后加入以启动反应,将反应体系在37℃水浴中孵育60min,在510nm处检测吸光度,并计算·OH清除率。
·OH清除率=[1–(As–Ab)÷Ac]×100%。
式中:As—溶剂空白管吸光值(以蒸馏水代替水杨酸);Ab—样品管吸光值;Ac—样品空白管吸光值。
按照上述方法测得实施例1和2中不同批次护肤液的羟自由基清除率在90%-98%之间。并且设置对照组:添加0.01%焦糖色素的蒸馏水。以某一批次为准平行测定3次,结果如表2所示。
3)美白特性:酪氨酸酶抑制率80%以上;
使用L-酪氨酸作为底物,于37℃下,按表1准确添加试剂,并测量475nm处样品的吸光度。
将底物和pH=6.8的磷酸盐缓冲液分别添加到实验试管中,然后再添加1.0mL的样品溶液,在37℃的水浴中充分进行反应10分钟,然后再添加酪氨酸酶溶液,再在37℃的水浴中充分进行反应。10分钟后,在475nm处进行测定吸收光度,并对每一个样本进行3次测定,以便获得平均值。
磷酸盐缓冲液(PBS):磷酸二氢钾(KH2PO4):0.24g,磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.44g,氯化钠(NaCl):8g,氯化钾(KCl):0.2g,加入约800mL去离子水充分搅拌使其溶解,然后加入浓盐酸调节pH至7.4,最后调至1L。
表1实验体系设计
IR(%)=[(C1-C0)-(T1-T0)]/(C1-C0)×100%;其中,IR—酪氨酸酶抑制率,C1—空白对照组吸光值,C0—不加酪氨酸酶的空白对照吸光度值,T1—样品组吸光度值,T0—不加酪氨酸酶的样品组吸光度值。
按照上述方法测得不同批次护肤液的酪氨酸酶抑制率在80-95%之间,结果如表2所示。
4)保湿特性:失水率低于对照(蒸馏水)的50%;
在室温下,吸取0.5mL样品滴加在滤纸片上,对滴加样品前后、15min后分别进行称重,计算水分残存率,并与对照(蒸馏水)比较,结果显示不同批次护肤液的水分残存率为对照的200-280%,即失水率为对照的46-50%。
水分残存率(%)=Hn/H0×100%,其中,Hn—为放置后样品的质量;H0—为放置前样品的质量。结果如表2所示。
表2实施例1和2的其它性能测试结果
5)营养特性:参考国标《GB 5009.5-2016食品安全国家标准食品中蛋白质的测定》测得两个实施例中不同批次护肤液的总氮含量在8-10大于8g/L之间;参考《GB 5009.235-2016食品安全国家标准食品中氨基酸态氮的测定》测得不同批次护肤液中的氨态氮(氨基酸)含量在4-6g/L之间。此外,实施例1的护肤液中可被皮肤吸收利用的420种小分子肽中,230种来自于酵母代谢产物或裂解物,190种来自于双歧杆菌。结果如表3所示。蛋白质谱的总离子流图如图3所示。进一步对实施例1的护肤液进行扫描光谱测试,如图4所示,表明其最大吸收波长在190nm左右。
表3护肤液中检测到的434种活性肽
6)安全性及致敏性:参考《化妆品安全技术规范》进行24h皮肤斑贴试验及30日皮肤安全试验,该护肤液试验结果均为阴性。
7)储存稳定性:将实施例1的护肤液稀释5倍后室温储存1年,其最大吸收波长190nm处(肽的吸收区)的吸光值仅降低8.9%,如图5所示,表明活性肽的存储稳定性较好。
实施例4
本实施例提供实施例1和2的多效天然活性护肤液日常护肤效果评价,具体评价过程如下:
使用3个棕色喷雾瓶分别装入实施例1和2的护肤液及蒸馏水(添加0.01%焦糖色素),试验时间为30日,选择90名年龄在20-30岁之间的志愿者,随机分发随机编码的30个实施例1的护肤液、30个实施例2的护肤液及30个对照(添加0.01%焦糖色素的蒸馏水),每天早晚直接喷雾或均匀涂抹于清洁后的左手背皮肤,持续30日,右手背不做处理,30日后对结果进行统计分析,结果如表4所示,表明护肤液具有显著美白效果(P<0.05),同时所有志愿者无报告不适,根据《化妆品安全技术规范》中人体试用试验安全性评价相关规定,判定该护肤液具有良好的皮肤安全性。
表4护肤液美白祛斑实验结果
实施例5
本实施例提供一种多效天然活性护肤液用于改善皮肤不良状况的应用效果评价,包括以下步骤:
使用棕色喷雾瓶分别装入护肤液及蒸馏水,于4-7月,选择90名年龄在20-30岁之间具有敏感、易长斑、易出油或干燥等皮肤不适情况的志愿者,随机分发随机编码的30个实施例1的护肤液、30个实施例2的护肤液及30个对照(添加0.01%焦糖色素的蒸馏水),要求每天早晚直接喷雾或均匀涂抹于清洁后的左手臂皮肤,右手臂不做处理,最后对结果进行统计分析,结果如表5所示,发现护肤液可显著舒缓皮肤(P<0.05)。
表5护肤液改善皮肤基本状况实验结果
实施例6
酵母菌和双歧杆菌的复配选择
本发明在研究初期考察首先考察了3种常见双歧杆菌对13种中药的适应性,其方法为分别接种3种双歧杆菌到13种中药提取物中37℃静置培养2d,检测菌悬液在560nm处的吸光值,其结果如表6所示,可以看出青春双歧杆菌与动物双歧杆菌在9种中药提取物中的生长情况更好,因而作为下一步筛选酵母的背景。
表6双歧杆菌在中药中的生长情况
我们从酒糟中一共分离出85株Pichia kudriavzevii酵母,从中筛选到16株具有抗氧化活性和抑制酪氨酸酶活性双重功能的酵母,表7展示这16株酵母在不同中药提取物中的生长情况,可以看出,同是Pichia kudriavzevii酵母,其在9种中药提取物中的生长情况各不相同。YB04可发酵川芎、白芨、金银花、槐花、白术、红景天、覆盆子,YB05可发酵川芎、金银花、红景天、白术、红花、槐花,二者相比,YB04可适应白芨,但无法适应红花,YB05可适应红花,却无法适应白芨、覆盆子。
表7 16株Pichia kudriavzevii酵母在9种中药提取物中的生长情况(OD560nm)
表8酵母与两种双歧杆菌在中药培养基中单独及协同生长情况
根据表7将各酵母菌株可适应的中药制成复合配方培养基,在其中分别接种两种双歧杆菌、酵母或二者混合物,30℃震荡培养1d转入37℃静置培养2d后,检测培养液的OD560nm,结果如表8所示,YB03、YB04、YB05、YB07、YB08、YB12、YB15、YB16这8株酵母可单独或同时与至少一种双歧杆菌在中药混合提取物中生长。
在表8的基础上进一步将YB03、YB04、YB05、YB07、YB08、YB12、YB15、YB16与动物双歧杆菌或青春双歧杆菌共培养的中药进行抗氧化活性及抑制酪氨酸酶效果测定,测试方法同实施例3中的2)、3)、4),结果如表9所示。表9表明这些酵母与不同双歧杆菌共培养物的抗氧化活性及抑制酪氨酸酶效果分别以YB04、YB05效果最好,且二者各有侧重,其中YB04更适宜与青春双歧杆菌搭配使用,YB05更适宜与动物双歧杆菌搭配使用。
表9酵母与两种双歧杆菌共培养物的美白特性
综上所述,本发明开发出一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,该护肤液具有高保湿性、美白祛斑淡斑活性、舒缓皮肤活性和安全性。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤1、中药培养液制备:在红景天、金银花、白术、川芎、黄豆芽的混合提取液中加入番茄汁混匀,得到中药培养液;
步骤2、酵母菌预生长:在WL固体培养基中划线接种酵母菌株YB05,挑取绿色凸起的单菌落转接入麦芽汁培养基,于25-32℃、40-80r/min条件下振荡培养18-24h,再以5-10%(v/v)的接种量接种到所述中药培养液中,按照前述培养条件继续培养6-12 h,得到酵母培养液;
步骤3、双歧杆菌预生长:在蔬菜复合培养基中接种双歧杆菌,37℃静置培养24 h;再将双歧杆菌菌悬液以5-10%的接种量接种到步骤2获得的酵母培养液中共发酵,28-32℃静置培养30-40h,再以5℃/d的升温梯度逐天升温培养3d,得到混菌发酵液;
步骤4、发酵液后处理:向步骤3获得的混菌发酵液中添加5-10万U/L的酸性蛋白酶、10-20万U/L的中性蛋白酶,于40-50℃超声条件下酶解30-50min,再离心取上清液,即得酵母及双歧杆菌混合发酵的中药活性产物;
步骤5、黄水活性成分提取:在浓香型白酒发酵得到的黄水中加入5-15万U/L的酸性蛋白酶,于40-50℃处理30-50min,再离心取上清液;将上清液进行透析并收集其中的活性成分,浓缩,得到黄水活性成分提取液;
步骤6、护肤水调配:将步骤5获得的黄水活性成分提取液按照10-30%(v/v)的添加量添加到步骤4获得的上清液中,再添加用于香味调节的植物提取液混匀,之后依次均质、0.22μm滤膜过滤、分装、密封,于0-10℃保藏。
2.根据权利要求1所述的一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,其特征在于:所述红景天、金银花、白术、川芎、黄豆芽的混合提取液的制备方法包括:将红景天、金银花、白术、川芎、黄豆芽、水按照重量份配比为:红景天8~12份,金银花5~8份,白术10~15份,川芎15~20份,黄豆芽5~10份,水80~150份混合均匀,浸泡后再煎煮,过滤,保留滤液,加入占滤液重量1-2%的糖,灭菌。
3.根据权利要求1或2所述的一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,其特征在于:所述红景天、金银花、白术、川芎、黄豆芽、水的重量份配比为:红景天10份,金银花6份,白术12份,川芎18份,黄豆芽7份,水100份。
4.根据权利要求2所述的一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,其特征在于:所述红景天8~12份替换成红花8~12份。
5.根据权利要求2所述的一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,其特征在于:所述金银花5~8份替换成槐花5~8份。
6.根据权利要求1所述的一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,其特征在于:所述酵母菌具体为Pichia kudriavzeviiYB05菌株,保藏于中国普通微生物菌种保藏中心,保藏编号CGMCC NO:22732。
7.根据权利要求1所述的一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,其特征在于:所述麦芽汁培养基替换为豆芽汁培养基。
8.根据权利要求1所述的一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,其特征在于:所述双歧杆菌具体为动物双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)。
9.根据权利要求1所述的一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法,其特征在于:所述蔬菜复合培养基按照重量份的组成为:番茄汁80~120份,豆芽汁180~200份,水260~320份,葡萄糖9~12份,L-半胱氨酸1~3份。
10.一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液,其特征在于:是采用权利要求1~9任意一项所述的制备方法获得。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111056040.4A CN114099378A (zh) | 2021-09-09 | 2021-09-09 | 一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111056040.4A CN114099378A (zh) | 2021-09-09 | 2021-09-09 | 一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN114099378A true CN114099378A (zh) | 2022-03-01 |
Family
ID=80441333
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202111056040.4A Pending CN114099378A (zh) | 2021-09-09 | 2021-09-09 | 一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN114099378A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN116270360A (zh) * | 2023-04-14 | 2023-06-23 | 广西杨森生物药业有限公司 | 一种忍冬花发酵液及其制备方法和应用 |
CN117771152A (zh) * | 2024-02-26 | 2024-03-29 | 妙越缇卡生物医药科技(山东)有限公司 | 嫩肤抗皱的长双歧杆菌sf-b-60发酵物及其制备方法和应用 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109528602A (zh) * | 2019-01-22 | 2019-03-29 | 广州睿森生物科技有限公司 | 一种植物发酵组合物、其制备方法及其应用 |
CN110772460A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-02-11 | 华熙生物科技股份有限公司 | 一种红景天发酵提取液的制备方法及应用 |
CN110974740A (zh) * | 2019-11-14 | 2020-04-10 | 肽源(广州)生物科技有限公司 | 一种具有皮肤抗刺激抗氧化功效的植物二步发酵物及其制备方法和用途 |
CN111419752A (zh) * | 2020-04-24 | 2020-07-17 | 上海全丽生物科技有限公司 | 一种四物发酵水及其制备方法、应用 |
CN111840180A (zh) * | 2019-04-29 | 2020-10-30 | 石小和 | 一种祛斑美白的中药组合物及其制备方法和应用 |
CN112754960A (zh) * | 2021-02-03 | 2021-05-07 | 现代百朗德生物科技(江苏)有限公司 | 一种含有酵母菌和红景天发酵产物提取物的化妆品、制备方法及其应用 |
-
2021
- 2021-09-09 CN CN202111056040.4A patent/CN114099378A/zh active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109528602A (zh) * | 2019-01-22 | 2019-03-29 | 广州睿森生物科技有限公司 | 一种植物发酵组合物、其制备方法及其应用 |
CN111840180A (zh) * | 2019-04-29 | 2020-10-30 | 石小和 | 一种祛斑美白的中药组合物及其制备方法和应用 |
CN110974740A (zh) * | 2019-11-14 | 2020-04-10 | 肽源(广州)生物科技有限公司 | 一种具有皮肤抗刺激抗氧化功效的植物二步发酵物及其制备方法和用途 |
CN110772460A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-02-11 | 华熙生物科技股份有限公司 | 一种红景天发酵提取液的制备方法及应用 |
CN111419752A (zh) * | 2020-04-24 | 2020-07-17 | 上海全丽生物科技有限公司 | 一种四物发酵水及其制备方法、应用 |
CN112754960A (zh) * | 2021-02-03 | 2021-05-07 | 现代百朗德生物科技(江苏)有限公司 | 一种含有酵母菌和红景天发酵产物提取物的化妆品、制备方法及其应用 |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN116270360A (zh) * | 2023-04-14 | 2023-06-23 | 广西杨森生物药业有限公司 | 一种忍冬花发酵液及其制备方法和应用 |
CN117771152A (zh) * | 2024-02-26 | 2024-03-29 | 妙越缇卡生物医药科技(山东)有限公司 | 嫩肤抗皱的长双歧杆菌sf-b-60发酵物及其制备方法和应用 |
CN117771152B (zh) * | 2024-02-26 | 2024-05-24 | 妙越缇卡生物医药科技(山东)有限公司 | 嫩肤抗皱的长双歧杆菌sf-b-60发酵物及其制备方法和应用 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101456052B1 (ko) | 주름개선용 화장료 조성물 | |
KR101423573B1 (ko) | 항산화 활성을 갖는 화장료 조성물 | |
CN103976052A (zh) | 一种发酵型茶汁及其制备方法 | |
KR20080094459A (ko) | 항산화 활성을 갖는 화장료 조성물 | |
KR20080094458A (ko) | 주름개선용 화장료 조성물 | |
CN114099378A (zh) | 一种天然抗氧化祛斑淡斑护肤液的制备方法 | |
CN113520942B (zh) | 一种抗氧化、抗衰老的五参发酵物及其制备方法和应用 | |
KR20080094456A (ko) | 미백용 화장료 조성물 | |
CN116211767B (zh) | 一种茉莉花/红茶发酵滤液的制备方法及其应用 | |
KR20080094455A (ko) | 미백용 화장료 조성물 | |
CN109528568A (zh) | 一种具有延缓衰老和美白功效的组合物及其制备方法 | |
CN104306323A (zh) | 一种含蛹虫草成分的眼霜及其制备方法 | |
CN110755344A (zh) | 灵芝-黄精双向发酵工艺及组合物 | |
CN108743501B (zh) | 一种植物发酵原浆组合物及其应用 | |
CN104434760A (zh) | 一种含蛹虫草成分的面霜及其制备方法 | |
CN114099407A (zh) | 一种天然多效护肤液的制备方法 | |
CN108165409A (zh) | 雪梨黑果腺肋花楸红酒及其制备方法 | |
CN107823026A (zh) | 一种发酵复方组合物及其在制备美白保湿护肤品的应用 | |
CN113893310A (zh) | 一种高山植物发酵组合物及其制备方法和应用 | |
KR20120053564A (ko) | 영지발효삼 음료 제조방법과 그 음료 | |
KR101761771B1 (ko) | 닥나무 또는 그 추출물의 발효방법, 그 발효 추출물 및 이를 포함하는 화장료 조성물 | |
CN104352422A (zh) | 一种含蛹虫草成分的眼霜及其制备方法 | |
CN104306322A (zh) | 一种含蛹虫草成分的眼霜及其制备方法 | |
KR20120119520A (ko) | 대나무수액의 균발효 추출물을 함유하는 피부외용제 조성물 | |
KR101456064B1 (ko) | 주름개선용 화장료 조성물 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220301 |