CN113755593B - 检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的PCR扩增引物、试剂盒及方法 - Google Patents
检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的PCR扩增引物、试剂盒及方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113755593B CN113755593B CN202111112575.9A CN202111112575A CN113755593B CN 113755593 B CN113755593 B CN 113755593B CN 202111112575 A CN202111112575 A CN 202111112575A CN 113755593 B CN113755593 B CN 113755593B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hla
- primer
- pcr amplification
- gene
- pcr
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 title claims abstract description 35
- 101150118346 HLA-A gene Proteins 0.000 title claims abstract description 22
- 239000003550 marker Substances 0.000 title claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 17
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 9
- 230000003321 amplification Effects 0.000 abstract description 7
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 abstract description 7
- 208000002454 Nasopharyngeal Carcinoma Diseases 0.000 abstract description 5
- 206010061306 Nasopharyngeal cancer Diseases 0.000 abstract description 5
- 201000011216 nasopharynx carcinoma Diseases 0.000 abstract description 5
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 abstract description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 17
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 102000009840 Angiopoietins Human genes 0.000 description 10
- 108010009906 Angiopoietins Proteins 0.000 description 10
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 8
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 102100028972 HLA class I histocompatibility antigen, A alpha chain Human genes 0.000 description 3
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000757236 Homo sapiens Angiogenin Proteins 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 description 2
- 238000012257 pre-denaturation Methods 0.000 description 2
- 238000007480 sanger sequencing Methods 0.000 description 2
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical class [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000010100 anticoagulation Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
- C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
- C12Q1/6858—Allele-specific amplification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/166—Oligonucleotides used as internal standards, controls or normalisation probes
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种检测HLA‑A基因SNP标记rs1136697‑G的PCR扩增引物,包括上游引物rs113‑SF2和下游rs113‑REV1,rs113‑SF2:5’‑CACACCgTCCAgAggATgAg‑3’;rs113‑REV1:5’‑TgCgCTgCAgCgTCTCCTT‑3’。还公开了相应的试剂盒及检测方法,既可特异性检测HLA‑A基因SNPrs1136697‑G,又可作为内参照,只用一对PCR引物就能实现对PCR‑SSP的检测,扩增过程快速、结果准确,避免出现假阳性、假阴性结果,可用于HLA基因SNPrs1136697‑G分型、鼻咽癌易感标记检测和高危人群筛查与预警等领域。
Description
技术领域
本发明属于鼻咽癌易感标记检测领域,尤其涉及一种用于检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的PCR扩增引物、试剂盒及检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的方法。
背景技术
HLA-A基因SNP标记rs1136697-G近期已被证实为中国南方人群鼻咽癌的一个重要的遗传易感标记(OR(95%CI)=1.79(1.54–2.09),P<0.0001)。现有人类白细胞抗原(HLA)基因分型技术均基于聚合酶链式反应(PCR),其中PCR-SSP(Sequence specific priming,序列特异性引物技术)因具有快速、实验操作简洁的特点,被广泛应用。该技术利用了PCR扩增很大程度上依赖引物3’末端与待测序列的互补性这一原理,但现有的PCR-SSP技术至少需要设计2对PCR引物,除特异性引物外,另有一对为内参照引物,由于内参照引物与特异性引物在同一PCR体系内扩增,彼此间存在相互竞争与干扰,需反复优化实验参数和各组分浓度,可出现结果难以判定乃至假阳性、假阴性结果。
因此,开发一套既能检测HLA靶基因SNP标记、又可同时作为内参照的PCR引物具有十分重要的意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是,克服以上背景技术中提到的不足和缺陷,以鼻咽癌易感标记之一——HLA-A基因SNP rs1136697-G为研究对象,研发一种既能检测靶标记、又可同时作为内参照的PCR扩增引物、试剂盒及检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的方法。
为解决上述技术问题,本发明提出的技术方案为:
一种检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的PCR扩增引物,包括上游引物rs113-SF2和下游rs113-REV1,其碱基序列如下:
rs113-SF2:5’-CACACCgTCCAgAggATgAg-3’(由SEQ ID NO:1所示);
rs113-REV1:5’-TgCgCTgCAgCgTCTCCTT-3’(由SEQ ID NO:2所示)。
该PCR扩增引物是在HLA-A基因第3外显子设计的一套PCR引物,通过在上游引物3’末端第2位碱基人为引入错配特异性扩增rs1136697-G,PCR产物长度为268bp;该引物对并识别人类血管生成素(ANG)基因保守区域,PCR产物扩增长度为360bp,可作为PCR反应的内参照。该PCR扩增引物既可检测HLA基因SNP标记,同时又可作为内参照,扩增过程快速、结果准确。
基于一个总的发明构思,本发明还提供一种试剂盒,包含SEQ ID NO:1-2所述的PCR扩增引物。
上述的HLA-A基因的试剂盒,进一步的,包含:1.3pmole上游引物rs113-SF2、1.3pmole下游引物rs113-REV1、5μL 2×Taq MastMix和ddH2O。
基于一个总的发明构思,本发明还提供一种检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的方法,包括如下步骤:
(1)提取样本DNA;
(2)利用所述的PCR扩增引物,对所述步骤(1)得到的样本DNA进行PCR扩增;
(3)将所述步骤(2)得到的PCR扩增产物进行琼脂糖电泳,读取电泳结果;若同时出现268bp和360bp的条带,则鉴定为rs1136697-G阳性样本;若仅出现360bp的条带,则鉴定为rs1136697-G阴性样本。
上述的方法,进一步的,所述PCR扩增的反应体系含:2×Taq MastMix 5μL、上游引物rs113-SF2 1.3pmole、下游引物rs113-REV1 1.3pmole、基因组DNA 50ng,用灭菌ddH2O补足反应体系至10μL。
进一步的,所述PCR扩增的反应参数条件为:预变性95℃,2min;95℃变性30s,63℃退火50s,72℃延伸30s,循环35次,再72℃延伸5min。
进一步的,所述琼脂糖电泳的参数条件为:采用2%琼脂糖电泳,200V,电泳15min。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:
1、本发明的PCR扩增引物,既可检测特异性靶序列(HLA-A基因SNPrs1136697-G),同时又可作为内参照,只用一对PCR引物就能实现对PCR-SSP的检测,扩增过程快速、结果准确,避免出现假阳性、假阴性结果,可用于HLA基因SNPrs1136697-G分型、鼻咽癌易感标记检测和高危人群筛查与预警等领域。
2、本发明的检测方法,以人类外周血基因组DNA为模板,经PCR扩增后行2%琼脂糖电泳,根据PCR产物带型即可判定结果;采用单盲法对经Sanger测序的HLA-A基因型数据进行检测,证实该方法快速、准确。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明的PCR扩增引物与HLA-A基因SNP标记rs1136697序列比对;
图2为本发明的PCR扩增引物核心序列与人类血管生成素(Homo sapiensangiogenin,ANG)基因序列比对;
图3是实施例的PCR扩增产物的琼脂糖电泳结果;
图4是实施例的Sanger测序结果。
具体实施方式
为了便于理解本发明,下文将结合说明书附图和较佳的实施例对本发明做更全面、细致地描述,但本发明的保护范围并不限于以下具体实施例。
除非另有定义,下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解含义相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的,并不是旨在限制本发明的保护范围。
除非另有特别说明,本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
实施例:
一种用于检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的PCR扩增引物,PCR扩增引物信息如下表1所示:
表1:本发明的PCR扩增引物信息
引物名称 | 序列(5’-3’) |
rs113-SF2 | 5’-CACACCgTCCAgAggATgAg-3’(由SEQIDNO:1所示) |
rs113-REV1 | 5’-TgCgCTgCAgCgTCTCCTT-3’(由SEQIDNO:2所示) |
该PCR扩增引物是在HLA-A基因第3外显子设计的一套PCR引物,通过在上游引物3’末端第2位碱基人为引入错配特异性扩增rs1136697-G,PCR产物长度为268bp;该引物对并识别人类血管生成素(ANG)基因保守区域,PCR产物扩增长度为360bp,可作为PCR反应的内参照。该PCR扩增引物与HLA-A基因SNP标记rs1136697序列比对情况如图1所示。PCR扩增引物核心序列与人类血管生成素(Homo sapiens angiogenin,ANG)基因序列比对情况如图2所示。
上述PCR扩增引物还可以制成试剂盒,包含:1.3pmole上游引物rs113-SF2、1.3pmole下游引物rs113-REV1、5μL 2×Taq MastMix和灭菌ddH2O。
采用上述PCR扩增引物检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的方法,包括如下步骤:
(1)人外周血基因组DNA提取:
取5%EDTA-Na2抗凝外周血0.5mL,加1mL红细胞裂解液,混匀,13000rpm离心1min,去上清,用1ml ddH2O洗涤细胞沉淀,去上清后加80μL蛋白酶K缓冲液,40μL 10%SDS,30μL蛋白酶K,220μL ddH2O混匀,56℃孵育10min。加入1/4体积饱和醋酸钠,剧烈震荡15秒,13000rpm离心6min,将上清转移至另一灭菌Eppendorf管内,加入等体积异丙醇,轻轻混匀至DNA呈絮状析出,13000rpm离心1min,收集DNA。用预冷的70%乙醇溶液洗涤DNA,共3次。去上清,于室温放置3~5分钟后加TE液200μL,-20℃保存备用。
(2)PCR扩增:
PCR反应体系含:2×Taq MastMix 5μL、rs113-SF2和rs113-REV1引物各1.3pmole、基因组DNA 50ng,用灭菌ddH2O补足反应体系至10μL;
PCR扩增参数为:预变性95℃,2min;95℃变性30s,63℃退火50s,72℃延伸30s,循环35次,再72℃延伸5min;
(3)PCR产物的2%琼脂糖电泳:200V,电泳15min;
(4)结果记录与分析:读取电泳结果,若同时出现268bp和360bp的条带,则鉴定为rs1136697-G阳性样本;若仅出现360bp的条带,则鉴定为rs1136697-G阴性样本。
上述2%琼脂糖电泳结果如图3所示,DNA标本5-6为rs1136697-G阳性样本,各泳道有明亮的268bp特异性产物,并有360bp条带;(2)DNA标本1-4、7、9-12为rs1136697-G阴性样本,各泳道仅有360bp产物条带;第8孔为空白对照(ddH2O作为模板),M为100bp DNAladder,最小片段为100bp。
上述rs1136697-G阳性、阴性DNA样本均已经Sanger测序做HLA-A基因型测定。对上述360bp条带采用Sanger方法测序(如图4所示),证实均为人类血管生成素(ANG)序列。说明本发明的PCR扩增引物既可检测特异性靶序列(HLA-A基因SNPrs1136697-G),同时又可作为内参照,根据PCR产物的电泳结果带型即可判定HLA-A基因SNP rs1136697-G的检测结果。采用单盲法对经Sanger测序的HLA-A基因型数据进行检测,证实该方法快速、准确。
序列表
<110> 中南大学
<120> 检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的PCR扩增引物、试剂盒及方法
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
cacaccgtcc agaggatgag 20
<210> 2
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
tgcgctgcag cgtctcctt 19
Claims (3)
1.一种检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的PCR扩增引物,其特征在于,包括上游引物rs113-SF2和下游rs113-REV1,其碱基序列如下:
rs113-SF2:5’-CACACCgTCCAgAggATgAg-3’;
rs113-REV1:5’-TgCgCTgCAgCgTCTCCTT-3’。
2.一种试剂盒,其特征在于,包含如权利要求1所述的PCR扩增引物。
3. 根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,包含:1.3 pmole 上游引物rs113-SF2、1.3 pmole 下游引物rs113-REV1、5μL 2×Taq MastMix和ddH2O。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111112575.9A CN113755593B (zh) | 2021-09-23 | 2021-09-23 | 检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的PCR扩增引物、试剂盒及方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111112575.9A CN113755593B (zh) | 2021-09-23 | 2021-09-23 | 检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的PCR扩增引物、试剂盒及方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN113755593A CN113755593A (zh) | 2021-12-07 |
CN113755593B true CN113755593B (zh) | 2024-02-20 |
Family
ID=78796803
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202111112575.9A Active CN113755593B (zh) | 2021-09-23 | 2021-09-23 | 检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的PCR扩增引物、试剂盒及方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN113755593B (zh) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114574563A (zh) * | 2022-04-07 | 2022-06-03 | 东莞兰卫医学检验实验室有限公司 | 一种鳞癌的医学检测方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6030775A (en) * | 1995-12-22 | 2000-02-29 | Yang; Soo Young | Methods and reagents for typing HLA Class I genes |
WO2014065410A1 (ja) * | 2012-10-26 | 2014-05-01 | ジェノダイブファーマ株式会社 | Hla遺伝子のdnaタイピング方法及びキット |
-
2021
- 2021-09-23 CN CN202111112575.9A patent/CN113755593B/zh active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6030775A (en) * | 1995-12-22 | 2000-02-29 | Yang; Soo Young | Methods and reagents for typing HLA Class I genes |
WO2014065410A1 (ja) * | 2012-10-26 | 2014-05-01 | ジェノダイブファーマ株式会社 | Hla遺伝子のdnaタイピング方法及びキット |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
HLA-A SNPs and amino acid variants are associated with nasopharyngeal carcinoma in Malaysian Chinese";Chin, Y.-M等;Int. J. Cancer;第136卷(第3期);摘要 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN113755593A (zh) | 2021-12-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107385064B (zh) | 一种同时扩增人常染色体snp和str位点的荧光标记复合扩增试剂盒及其应用 | |
JP2015534807A (ja) | 胎児の染色体異数性を検出するための非侵襲的方法 | |
CN114457170B (zh) | 一种与鸡屠体性状相关的dnajc30基因分子标记及应用 | |
CN112280848A (zh) | 一种人运动神经元基因拷贝数相对定量检测方法及试剂盒 | |
CN111471775A (zh) | 用于鲟鱼性别鉴定的特异性dna片段ssm2及应用 | |
CN113755593B (zh) | 检测HLA-A基因SNP标记rs1136697-G的PCR扩增引物、试剂盒及方法 | |
CN113604580B (zh) | 一种全血法鉴定鸡玫瑰冠基因型的引物、试剂盒及应用 | |
CN111808994A (zh) | 一种用于检测香蕉条斑病毒gf分离物的rpa引物及检测方法 | |
CN105177118A (zh) | 检测人egfr基因29种突变的引物和探针体系、方法及试剂盒 | |
CN109136382B (zh) | 一种对四种人体体液来源进行鉴定的方法和*** | |
CN111394474B (zh) | 一种检测黄牛gal3st1基因拷贝数变异的方法及其应用 | |
CN108060239B (zh) | 用于区分牦牛与非牦牛牛族的引物对组合产品、试剂盒及方法 | |
CN113637799A (zh) | 一种菊花b病毒的rpa检测方法 | |
CN113604583A (zh) | 一种山羊kcnj15基因cnv标记辅助检测生长性状的方法及其专用试剂盒 | |
CN108728528B (zh) | 基于Taqman探针的肾小管上皮细胞特异性基因检测荧光定量PCR一步法试剂盒 | |
CN113862394A (zh) | 一种番茄***病毒的rpa检测方法 | |
CN108998545B (zh) | 半滑舌鳎外泌体piR-mmu-31018127应用 | |
CN111534634A (zh) | 一种ⅱ型犬腺病毒的可视化等温扩增检测试剂及其应用 | |
CN112111579B (zh) | 滩羊源性成分的鉴别方法 | |
CN110616270A (zh) | 一种基于coi基因序列的*和贝氏*的分子鉴别方法 | |
CN110760597A (zh) | 一种检测黄牛ncstn基因拷贝数变异的方法及其应用 | |
CN115747217B (zh) | 长链非编码rna pdxdc1-as1及其应用 | |
CN114480615B (zh) | 一种用于检测hla-b*5101等位基因的引物组及试剂盒 | |
CN117230184B (zh) | 基于飞行时间核酸质谱技术检测阿尔兹海默病基因的核酸组合及应用 | |
CN115820872B (zh) | 一种与麻黄鸡繁殖性状相关的分子标记及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |