CN113735859A

CN113735859A - 一种激酶抑制剂

Info

Publication number: CN113735859A
Application number: CN202110927920.8A
Authority: CN
Inventors: 刘学松; 陈昭琳; 陈清领; 何木子; 吴因心; 周建文; 李嘉雯; 许宇涵; 徐新雨; 张睿
Original assignee: Anhui Medical University
Current assignee: Anhui Medical University
Priority date: 2021-08-12
Filing date: 2021-08-12
Publication date: 2021-12-03

Abstract

本发明涉及一种激酶抑制剂，其包括式(I)的化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药。本发明还涉及包括该激酶抑制剂的药物组合物，以及使用这些化合物和组合物来抑制细胞或受试者的JAK1、JAK2、JAK3、TYK2激酶活性，并且/或者在受试者中预防或治疗JAK1、JAK2、JAK3、TYK2活性相关病症的用途和方法。

Description

一种激酶抑制剂

技术领域

本申请涉及一种激酶抑制剂、以及使用这样的激酶抑制剂抑制激酶活性的方法和用途。更具体地，本发明涉及能够抑制JAK1、JAK2、JAK3、TYK2激酶活性的抑制剂。

背景技术

细胞因子在调节免疫和炎症的许多方面具有重要功能。范围从免疫细胞的发育和分化到免疫反应的抑制。I型和II型细胞因子受体缺乏能够介导信号转导的内在酶活性，因此需要与酪氨酸激酶结合以用于此目的。JAK激酶家族包括四个不同成员，即JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2，其结合至Ⅰ型和II型细胞因子受体以控制信号转导(MurrayPJ，(2007).TheJAK-STAT signalling pathway:input and output integration.J Immunol,178:2623)。每种JAK激酶对于某些细胞因子的受体具有选择性。就这一点而言，JAK缺陷细胞株和小鼠已证实了每种JAK蛋白在受体信号传导中的重要作用：JAK1在II型细胞因子受体(IFN和IL-10家族)中，这些受体共用gp130链(IL-6家族)以及常见的Y链(IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21)》(Rodig等人(1998).Disruption of the JAK1L gene demonstratesobligatory and nonfredundant roles of the Jaks in cytokine-induced biologicalresponse.Cel1,93:373；Guschin等人(1995).A major tole for the protein tyrosinekinase JAKL in the JAK/STAT signal transduction bpathway in response tointerleukin-6.EMBO JJ.14:1421；Briscoe等人(1996).Kinase-negative mutants ofJAKL can sustain intereferon-gamma-inducible gene exptression but not anantiviral state.EMB0 J.15:799)；JAK2在造血因子(Epo、Tpo、GM-CSF、IL-3、IL-5)和II型IFN中(Parganas等人，(1998).JAK2 is essential for signalling through a_varietyof cytokine receptors.Cel1,93:385)；JAK3在共用常见Y链的受体(IL-2家族)中(Park等人，(1995).Developmental defects of 1ymphoid cells in JAK3kinase-deficientmice.Immunity,3:771；Thomis等人，(1995).Defects in B 1ymphocyte maturation andTlymphocyte activation in mice lacking JAK3.Science,270:794；Russell 等人,(1995).Mutation ofJAK3 in a partient with SCID:Essential role of JAK3 in1lymphoid development.Science,270:797)；以及Tyk2在IL-12、IL-23、IL-13以及Ⅱ型IFN的受体中(Karaghiosoff等人，(2000).Partial impairment of cytokine responses inTyk2-deficient mice.Immunity,13:549；Shimoda等人，(2000).Tyk2 plays arestricted role in IFNg signaling,although it is redquired for IL-1L2-mnediated T cell function.Imnunity,13:561；Minegishi等人，(2006).Human Tyrosinekinase 2defficiency reveals its redquisite roles in multiple cytokine signalsinvolved in innate and acquired immunity.Immunity,25:745)。

上游蛋白磷酸化引起JAK活化、继而导致下游蛋白STAT募集、活化、二聚化。接着STAT二聚物起到转录因子的作用，从而移位至细胞核并活化多种应答基因的转录。存在七种鉴别出的STAT蛋白：STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5a、STAT5b以及STAT6。每种特定的细胞因子受体优选地与特定STAT蛋白结合。一些结合与细胞类型无关(例如：IFNg-STAT1)，而其它结合可与细胞类型有关(Murray PJ，(2007).The JAK-STATsignaling pathway:input and output integration.J Imnunol,178:2623)。

缺陷小鼠的表型已提供了对各JAK和通过该JAK进行信号转导的细胞因子受体的功能的了解。JAK3专门与IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15以及IL-21细胞因子的受体的常见Y链结合。由于该特异性结合，JAK3敲除小鼠与常见Y链缺陷小鼠具有相同表型(Thomis等人，(1995).Defects in B 1ymphocyte maturation and T 1ymphocyte activation in micelacking JAK3.Science,270:794；DiSanto等人，(1995).Lymphoid development in micewith a targeted deletion of the interleukin 2receptor gamma chain.PNAS,92:377)。此外，该表型在很大程度上是在常见Y链或JAK3基因具有突变/缺陷的SCID患者中所共有的(O’Shea等人，(2004).JAK3and the pathogenesis of severe combinedimmunodeficiency.Mol Immunol,41:727)。JAK3缺陷小鼠可存活，但呈现淋巴细胞异常生成，这导致胸腺尺寸减小(是野生型1/100-1/10)。JAK3缺陷的外周T细胞无反应且具有活化的记忆细胞表型(Baird等人，(1998).T cell development and activation in JAK3-deficient mice.J.Leuk.Biol.63:669)。这些小鼠的胸腺缺陷与在IL-7和TIL-7受体基因敲除小鼠中所见的缺陷非常类似，从而表明IL-7信号传导的敲除可引起JAK3小鼠缺陷(vonFreeden-Jeffry等人，(1995)。Lymphopenia in Interleukin(IL)-7Gene-deleted MiceIdentifies IL-7as a non-redundant Cytokine.J丁Exp Med,,181:1519；Peschon等人,(1994).Early lymphocyte expansion is severely impaired in interleukin7receptor-deficient mice.丁Exp Med,180:1955)。类似于SCID小鼠，这些小鼠无NK细胞，这可能归因于不存在IL-15信号传导(IL-15信号转导是这些细胞的存活因子)。不同于SCID小鼠，JAK3基因敲除小鼠显示出有缺陷的B细胞淋巴细胞生成，而在人类患者中，B细胞存在于循环中，但无反应，从而导致低球蛋白血症(O’Shea等人，(2004).JAK3 and thepathogenesis of severe combined immunodeficiency.Mol Imnunol,41:727)。对于此的解释是IL-7在小鼠以及人类的BE和T细胞发育中的功能上有物种特异性差异。另一方面，Grossman等人(1999.Dysregulated myelopoiesis in mice lacking JAK3.Blood,94:932:939)已示出T细胞区室中损失JAK3促使骨介系的扩增，从而导致失调的骨髓形成。

JAK2缺陷小鼠由于不存在定向型红血球生成而在胚胎时致命。骨髓祖细胞无法对Epo、Tpo、IL-3或GM-CSF有反应，而G-CSF以及IL-6信号传导不受影响。JAK2并非是淋巴祖细胞的产生、扩增或功能分化所需的(Parganas等人，(1998).JAK2 is essential forsignaling through a variety of cytokine receptors.Cel1,93:385)。JAK1缺陷小鼠由于哺乳缺陷而在围产期死亡。JAK1专门结合于IL-6细胞因子家族(即LIF\CNTF、OSM\CT-1)共用的gp130链，且通过结合于非共用的受体亚单位而与JAK3同为共用常见y链的受体的基本组分。就此而言，JAK1缺陷小鼠显示与JAK3缺陷小鼠类似的血细胞生成缺陷。另外，其显示对神经营养因子以及所有干扰素(II型细胞因子受体)的缺陷反应(Rodig等人，(1998).Disruption of the JAK1L gene demonstrates obligatory and non-tfedundanttoles of the JAKsS in cytokine-induced biological fresponse，Cell1,93:37)。

最后，Tyk2缺陷小鼠显示对IL-12以及IL-23的反应减弱且对IFN-a的反应仅部分减弱(Karaghiosoff等人，(2000).Partial impairment of cytokine responses inTyk2-deficient mice.Immunity,13:549；Shimoda等人，(2000).Tyk2 plays atestricted role in IFNg signaling,although it is required for ITIL-12-mediated T cell function.Immunity,13:561)。然而，人类Tyk2缺陷证明Tyk2与来自IFN-a、IL-6、IL-10、IL-12以及IL-23的信号传导有关(Minegishi等人，(2006).Human Tyrosinekinase 2deficiency reveals its trequisite roles in multiple cytokine signalsinvolved in innate and acquired immunity.Immunity,25:745)。

JAK激酶在转导大量细胞因子的信号中的作用使其成为用于治疗其中细胞因子具有病原性作用的疾病的潜在靶点，所述疾病比如炎症性疾病，包含(但不限于)过敏以及哮喘、慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease；COPD)、牛皮瘤、自身免疫疾病(比如类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)肌肉葵缩性侧索硬化(amyotrophiclateral sclerosis)以及多发性硬化症C(multiple sclerosis))、葡萄膜炎、移植排斥反应，以及实体与血液学恶性疾病(比如骨散增生性病症(myeloproliferative disorder)、白血病以及淋巴瘤)。

在类风湿性关节炎中，促炎性细胞因子的活性与消炎性细胞因子的活性之间的不平衡促使诱导自身免疫，随后诱导慢性炎症以及组织破坏。就此而言，IL-6在类风湿性关节炎(CRA)中的病原性作用已通过使用抗IL-6R抗体妥利株单抗(tocilizumab)而在临床上得到证实。IL-6通过使用结合于gp130受体链的JAK1而活化转录因子STAT3 Heinrich等人，(2003).Principles of interleukin(IL)-6-type_cytokine signaling and itsregulation.Biochem J.374:1)。组成性STAT3介导了RA滑膜细胞的异常生长以及存活性质(CIvashkiv等人，(2003).The JAK/ZSTAT pathway in rheumatoid arthritis:pathogenic ofr protective？Arth&Rheum.48:2092)。与关节炎发病机制有关的其它细胞因子包含：IL-12以及ITIL-23，其分别与Thl以及Thl7细胞增殖有关；IL-15以及GM-CSF(McInnes及Schett，(2007).Cytokines in the pathogenesis of rheumatoidarthritis.Nature Rew Imnunol.7:429.)。这些细胞因子的受体也使用JAK蛋白进行信号转导，使得JAK抑制剂成为此病理学中的潜在的多效性药物。因此，在鼠类胶原蛋白诱导的关节炎以及大鼠佐剂诱导的关节炎的动物模型中给药，如JAK抑制剂可减少炎症发生以及组织破坏(Milici等人，(2008).Cartilage preservation by inhibition of Januskinase 3in two rodent models of rheumatoid arthritis.Arth.Res.10:R14)。

炎症性肠病(inflammatory bowel disease；IBD)包括两种主要形式的肠炎：溃疡性结肠炎(ulcerative colitis)以及克罗恩氏病CCrohn'sdisease)。越来越多的证据已显示多种细胞因子(包含介白素以及干扰素)与IBD发病机制有关(Strober等人,(2002).Theimmunology of mucosal models of inflamnmnation.Annu Rev Immunol.20:495)。已显示固有层(laninapropia)T细胞中的IL-6/ZSTAT3级联反应的活化诱导病原性T细胞的长时间存活(CAtreya等人，(2000).Blockade of interleukin 6trans signalingsuppfresses T-cell resistance against apoptosis in chronic intestinalinflammation:Evidence in Crohn's disease and experimental colitis invivo.Nature Med.6:583)。具体而言，已显示，STAT3在克罗恩氏病患者的肠道T细胞中具有组成性活性，且已显示，JAK抑制剂阻断这些细胞中的STAT3的组成性活化(Lovato等人，(2003).Constitutive STAT3 activation in intestinal T cells frompatients withCrohn's disease.J Biol Chem.278:16777)。这些观察结果指示JAK-STAT路径在IBD中起病原性作用且JAK抑制剂可在此环境中具有治疗性。多发性硬化症是一种自身免疫脱髓鞘疾病，其特征为白质中形成殉块。早就已知细胞因子在产生多发性硬化症中的作用。潜在疗法包含阻断IFN-g、IL-12以及IL-23(Steinman L.(2008).Nuanced roles of cytokinesin three major human prain disorders.J Clin Invest.118:3557)，它们为通过JAK-STAT路径进行信号传导的细胞因子。已显示酪氨酸磷酸化抑制剂(tyrphostin)(JAK抑制剂)的用途为抑制IL-12诱导的STAT3磷酸化以及降低主动和被动实验性自身免疫性脑炎(EAE)的发病率与严重性(Bright等人，(1999)Tyrphostin B42 inhibits IL-12-inducedtyrosine phosphorylation and activation of Janus kinase-2and preventsexperimental allergic encephalomyelitis.本Imnunol.162:6255)。已显示另一多激酶抑制剂即CEP701减少TNF-a、IL-6以及IL-23的分泌，且降低患有EAE的小鼠的外周DC中的磷酸化STAT1、STAT3以及STAT5的含量，从而明显改善小鼠的EAE的临床发病病程(CSkarica等人，(2009).Signal transduction inhibition of APCs diminishes Thl7 and Thltesponses in experimental autoimmune encephalomyelitis.J.Immunol.182:4192.)。

牛皮癣是一种皮肤炎症性疾病，其涉及以上皮重塑(Cepithelial remodeling)终结的免疫细胞渗透和活化的过程。探究牛皮癣病成因的当前理论表明，存在控制免疫与上皮细胞之间的相互作用的细胞因子网(CNickoloffBJ.(2007).Cracking the cytokinecode in psoriasis,Nat Med,13:2420)。就此而言，在牛皮癣性皮肤中发现由树突状细胞产生的IL-23与IL-12一起增加。IL-23诱导形成Thl7细胞，其转而又产生IL-17以及IL-22，后者负责表皮变厚。IL-23以及IL-22诱导STAT-3的磷酸化，STAT-3的磷酸化大量地存在于牛皮瘤性皮肤中。因此，JAK抑制剂可在此环境中具有治疗性。因此，已发现在牛皮癣的自发性T细胞依赖性小鼠模型中，JAK173抑制剂即R348减少牛皮瘤状皮肤发炎(CChang等人，(2009).JAK3 inhibition significantly attenuates psoriasiform skininflammation on CD18 mutant PL/J mice.J Immunol1.183:2183)。

JAK-STAT路径失调的血液学恶性疾病可受益于JAK抑制。最新研究已表明，在人骨髓增生性疾病范围CIhIe以及Gililand,2007(包含真性多血症(polycythemiavera)、骨髓纤维化(myelofibrosis)以及原发性血小板增多症(essential thrombocythemia)中通过假性激酶域中的染色体易位以及突变(比如JAK2V617F突变)使JAK2激酶活性失调。就此而言，已提出有效处理JAK2的数种JAK抑制剂，比如TG-101209(Pardanani等人，(2007).TG101209,a small molecular JAK2-selective inhibitor potently inhibitsmyeloproliferative disorder-associated JAK2V617F and MPLW515L7/K mutationsLeukemia.21:1658-68)、TG101348(Wernig等人，(2008).Efficacy of TG101348,a_selective JAK2 inhibitor,in treatment of a murine model of JAK2V617F-inducedpolycythemia vera.Cancer Cell,13:311)、CEP701(Hexner等人，(2008).Lestaurtinib(CEP701)is a JAK2 inhibitor that suppresses JAK2/STAT5 signaling and theproliferation of primary erythroid cells from patients withmyeloproliferative disorders.Blood,111:5663)、CP-690,550(Manshouri等人，(2008).The JAK kinase inhibitor CP-690,550suppresses the growth of humanpolycythemia vetra cells cartrying the JAK2V617F mutation.Cancer Sci,99:1265)和CYT387(Pardanani等人，(2009).CYT387,a_selective JAK1/JAK2 inhipbitor:invitroasseSssment ofkinase selectivity and pfreclinical studies using cell linesand primary cells from polycythemia vera patients.Leukemia,23:1441)，用于基于其对带有JAK2V617F突变的细胞的抗增殖活性来治疗骨髓增生性疾病。类似地，由人的细胞白血病病毒CHTLV-1)转型引起的T细胞白血病与JAK3和STAT5组成性活化相关(Migone等人，(1995).Constitutively activated JAK-STAT pathway in T cells transformedwith HTLV-I.Science,269:79)。JAK抑制剂可在此环境中具有治疗效果(CTomita等人，(2006).Inhibition of constitutively active JAK-STAT pathway suppresses_cellgrowth ofhuman T-cell leukemia virus type TI-infected T_cell lines andprimary adult T-cell leukemia cells.Retrovirology,3:22)。JAK1突变活化会造成急性淋巴母细胞瘤和白血病(Flex等人，(2008).Somatically acquired JAK1 mutations inadult acute lymphoblastic leukemia.J.Exp.Med.205:751-8)，表明此激酶可作为开发新型抗白血病药物的靶点。

预期靶向JAK路径或调节JAK激酶(尤其JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2激酶)在治疗上适用于治疗或预防疾病的病状包含：肿瘤性疾病(例如白血病，淋巴瘤等)；移植排斥反应，骨髓移植应用(例如移植物抗宿主疾病)；自身免疫疾病(例如糖尿病、多发性硬化症、类风湿性关节炎、炎症性肠病)；呼吸道发炎疾病(例如哮喘、慢性阻塞性肺病)；发炎相关眼病或过敏性眼病(例如干眼症青光眼、葡萄膜炎、糖尿病性视网膜病Cdiabetic retinopathy)、过敏性结膜炎或年龄相关黄斑变性(age-related macular degeneration))以及皮肤炎症性疾病(例如特应性皮肤炎(Catopic dermatitisy)或牛皮癣)。

鉴于预期许多病状受益于涉及调节JAK路径或JAK激酶的治疗，则显而易见，调节JAK路径的新型化合物以及这些化合物的用途应向各种患者提供实质的治疗性益处。

本发明提供一种新型激酶抑制剂化合物，其用于治疗靶向JAK路径或抑制JAK激酶可在治疗上有用的病状。

本发明主要是发现一种结构全新的针对JAK激酶有很强抑制作用的抑制剂。

发明内容

本发明提供一种选择性的激酶抑制剂，包括式(I)的化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，

其中，

X为氮原子或者碳原子；

Y为氮原子或者碳原子；

Z为直接键或-NH-；

R₁选自氢原子，卤素原子，C_1-6烷基，甲酰胺基；

R₂选自任选地被1-3个独立的R₃基团取代的苯基、吡啶基、吡唑基或嘧啶基；

R₃独立地选自卤素、氨基、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_1-6烷氧基、(4-甲基哌嗪-1-基)甲基、甲氧基取代的苯基、萘基、4-吡啶基、3-哌啶基或任选地被甲基取代的4-哌啶基。

一种药物组合物，其包括一种或多种如上所述的激酶抑制剂，以及药学上可接受的载体或赋形剂，以及任选的其它治疗剂，该药物组合物用于治疗疾病、障碍或病症，其中，疾病、障碍或病症选自以下自身免疫性疾病：关节炎、风湿性关节炎、骨关节炎、狼疮、类风湿性关节炎、炎性肠病、银屑病性关节炎、骨关节炎、斯蒂尔病、青少年关节炎、糖尿病、重症肌无力症、桥本甲状腺炎、奥德甲状腺炎、格雷夫斯病、类风湿性关节炎综合征、多发性硬化症、传染性神经元炎、急性播散性脑脊髓炎、阿狄森病、视性眼阵孪-肌阵孪综合征、强直性脊椎炎、抗磷脂抗体综合征、再生障碍性贫血、自身免疫性肝炎、乳糜泻、古德帕斯彻综合征、特发性血小板减少性紫癜、视神经炎、硬皮病、原发性胆汁性肝硬化、莱特尔综合征、高安动脉炎、颞动脉炎、温型自身免疫性溶血性贫血、韦格纳肉芽肿病、银屑病、全身脱毛、贝赫切特病、慢性疲劳、家族性自主神经功能异常、子宫内膜异位、间质性膀胱炎、神经肌强直、硬皮病或外阴痛。

一种或多种如上所述的激酶抑制剂在制备用于抑制JAK1、JAK2、JAK3、TYK2激酶活性的药物中的用途，该药物用于治疗疾病、障碍或病症，其中，疾病、障碍或病症为JAK1、JAK2、JAK3、TYK2激酶相关疾病。

一种或多种如上所述的激酶抑制剂在制备用于治疗或预防JAK1、JAK2、JAK3、TYK2活性相关病、障碍或病症的药物中的用途。

具体实施方式

术语

除非另外定义，所有本文使用的科技术语都具有与要求保护的主题所属领域的技术人员一般理解相同的含义。

除非另有说明，本发明采用本领域技术范围内的质谱、NMR、HPLC、蛋白质化学、生物化学、重组DNA技术和药理学等常规方法。除非提供具体的定义，否则与本文描述的分析化学、合成有机化学、以及医学和药物化学等化学上相关的命名和实验室操作和技术，是本领域技术人员已知的。一般而言，前述技术和步骤可以通过本领域众所周知的和在各种一般文献和更具体文献中描述的常规方法来实施，这些文献在本说明书中被引用和讨论。

术语“烷基”是指脂肪族烃基团，可以是支链或直链的烷基。根据结构，烷基可以是单价基团或双价基团(即亚烷基)。在本发明中，烷基优选是具有1-8个碳原子的烷基，更优选具有1-6个碳原子的“低级烷基”，甚至更优选具有1-4个碳原子的烷基。典型的烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基等。应理解，本文提到的“烷基”包括可能存在的所有构型和构象的该烷基，例如本文提到的“丙基”包括正丙基和异丙基，“丁基”包括正丁基、异丁基和叔丁基，“戊基”包括正戊基、异丙基、新戊基、叔戊基、和戊-3-基等。

术语“烷氧基”是指-O-烷基，其中烷基如本文中定义。典型的烷氧基包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基等。

术语“烷氧基烷基”是指本文定义的烷基被本文定义的烷氧基取代。

术语“环烷基”是指单环或多环基，其仅含有碳和氢。环烷基包括具有3-12个环原子的基团。根据结构，环烷基可以是单价基团或双价基团(例如亚环烷基)。在本发明中，环烷基优选是具有3-8个碳原子的环烷基，更优选具有3-6个碳原子的“低级环烷基”。环烷基的例子包括但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基和金刚烷基。

术语“烷基(环烷基)”或“环烷基烷基”是指本文定义的烷基被本文定义的环烷基取代。非限制性的环烷基烷基包括环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基等。

术语“芳香基”是指平面环具有离域的π电子***并且含有4n+2个π电子，其中n是整数。芳香基环可以由五、六、七、八、九或多于九个原子构成。芳香基可以是任选取代的。术语“芳香基”包括碳环芳基(例如苯基)和杂环芳基(或“杂芳基”或“杂芳香基”)基团(例如吡啶)。该术语包括单环或稠环多环(即共用相邻的碳原子对的环)基团。

本文使用的术语“芳基”是指芳香基环中每一个构成环的原子都是碳原子。芳基环可以由五、六、七、八、九或多于九个原子构成。芳基可以是任选取代的。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基、菲基、蒽基、芴基和茚基。根据结构，芳基可以是单价基团或双价基团(即亚芳基)。

术语“芳氧基”是指-O-芳基，其中芳基如本文中定义。

术语“杂芳基”是指芳基中包括一个或多个选自氮、氧和硫的环杂原子。含N“杂芳基”部分是指芳香基中环上至少有一个骨架原子是氮原子。根据结构，杂芳基可以是单价基团或双价基团(即亚杂芳基)。杂芳基的实例包括但不限于吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、***基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、吲唑基、吲嗪基、酞嗪基、哒嗪基、异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、萘啶基和呋喃并吡啶基等。

术语“烷基(芳基)”或“芳烷基”是指本文定义的烷基被本文定义的芳基取代。非限制性的烷基(芳基)包括苄基、苯乙基等。

术语“烷基(杂芳基)”或“杂芳基烷基”是指本文定义的烷基被本文定义的杂芳基取代。

本文使用的术语“杂烷基”是指本文定义的烷基中的一个或多个骨架链原子是杂原子，例如氧、氮、硫、硅、磷或它们的组合。所述杂原子(一个或多个)可以位于杂烷基内部的任意位置或在杂烷基与分子的其余部分相连的位置。

本文使用的术语“杂环烷基”或“杂环基”是指非芳香基环中一个或多个构成环的原子是选自氮、氧和硫的杂原子。杂环烷基环可以由三、四、五、六、七、八、九或多于九个原子构成。杂环烷基环可以是任选取代的。杂环烷基的实例包括但不限于内酰胺、内酯、环亚胺、环硫代亚胺、环氨基甲酸酯、四氢噻喃、4H-吡喃、四氢吡喃、哌啶、1,3-二噁英、1,3-二噁烷、1,4-二噁英、1,4-二噁烷、哌嗪、1,3-氧硫杂环己烷、1,4-氧硫杂环己二烯、1,4-氧硫杂环己烷、四氢-1,4-噻嗪、2H-1,2-噁嗪、马来酰亚胺、琥珀酰亚胺、巴比妥酸、硫代巴比妥酸、二氧代哌嗪、乙内酰脲、二氢尿嘧啶、吗啉、三噁烷、六氢-1,3,5-三嗪、四氢噻吩、四氢呋喃、吡咯啉、吡咯烷、咪唑烷，吡咯烷酮、吡唑啉、吡唑烷、咪唑啉、咪唑烷、1,3-二氧杂环戊烯、1,3-二氧杂环戊烷、1,3-二硫杂环戊烯、1,3-二硫杂环戊烷、异噁唑啉、异噁唑烷、噁唑啉、噁唑烷、噁唑烷酮、噻唑啉、噻唑烷和1,3-氧硫杂环戊烷。根据结构，杂环烷基可以是单价基团或双价基团(即亚杂环烷基)。

术语“烷基(杂环烷基)”或“杂环烷基烷基”是指本文定义的烷基被本文定义的杂环烷基取代。

术语“烷氧基(杂环烷基)”或“杂环烷基烷氧基”是指本文定义的烷氧基被本文定义的杂环烷基取代。

术语“卤”或“卤素”是指氟、氯、溴和碘。

术语“卤代烷基”、“卤代烷氧基”和“卤代杂烷基”包括烷基、烷氧基或杂烷基的结构，其中至少一个氢被卤原子置换。在某些实施方式中，如果两个或更多氢原子被卤原子置换，所述卤原子彼此相同或不同。

术语“羟基”是指-OH基团。

术语“氰基”是指-CN基团。

术语“酯基”是指具有式-COOR的化学部分，其中R选自烷基、环烷基、芳基、杂芳基(通过环碳连接)和杂环基(通过环碳连接)。

术语“氨基”是指-NH₂基团。

术语“氨酰基”是指-CO-NH₂基团。

术语“酰胺基”或“酰氨基”是指-NR-CO-R’，其中R和R’各自独立地为氢或烷基。

术语“烷基氨基”是指进一步被一个或两个烷基取代的氨基取代基，具体是指基团-NRR’，其中R和R’各自独立地选自氢或低级烷基，条件是-NRR’不是-NH₂。“烷基氨基”包括其中-NH₂的氮连接至少一个烷基基团的化合物的基团。烷基氨基基团的例子包括但不限于，甲基氨基、乙基氨基等。“二烷基氨基”包括其中-NH₂的氮连接至少两个其它烷基基团的基团。二烷基氨基基团的例子包括但不限于，二甲基氨基、二乙基氨基等。

术语“芳基氨基”和“二芳基氨基”是指进一步被一个或两个芳基取代的氨基取代基，具体是指基团-NRR’，其中R和R’各自独立地选自氢、低级烷基、或芳基，其中N分别连接至少一个或两个芳基基团。

术语“环烷基氨基”是指进一步被一个或两个本文所定义的环烷基取代的氨基取代基。

术语“杂烷基氨基”是指进一步被一个或两个本文所定义的杂烷基取代的氨基取代基。

本文的术语“芳烷基氨基”是指其中R是低级芳烷基且R’是氢、低级烷基、芳基或低级芳烷基的基团-NRR’。

术语“杂芳基氨基”是指进一步被一个或两个本文所定义的杂芳基取代的氨基取代基。

术语“杂环烷基氨基”是指本文定义的氨基被本文定义的杂环烷基取代。

术语“烷基氨基烷基”是指本文定义的烷基被本文定义的烷基氨基取代。

术语“氨基烷基”是指进一步被一个或多个氨基取代的烷基取代基。

术语“氨基烷氧基”是指进一步被一个或多个氨基取代的烷氧基取代基。

术语“羟烷基”或“羟基烷基”是指进一步被一个或多个羟基取代的烷基取代基。

术语“氰基烷基”是指进一步被一个或多个氰基取代的烷基取代基。

术语“酰基”是指有机或无机含氧酸去掉羟基后剩下的一价原子团，通式为R-M(O)-，其中M通常为C。

术语“羰基”是由碳和氧两种原子通过双键连接而成的有机官能团(C＝O)。

术语“烷酰基”或“烷基羰基”是指进一步被一个烷基取代的羰基。典型的烷酰基包括但不限于乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基、己酰基等。

术语“芳基羰基”是指本文定义的羰基被本文定义的芳基取代。

术语“烷氧基羰基”是指进一步被一个烷氧基取代的羰基。

术语“杂环烷基羰基”是指进一步被一个杂环烷基取代的羰基。

术语“烷基氨基羰基”、“环烷基氨基羰基”、“芳基氨基羰基”、“芳烷基氨基羰基”、“杂芳基氨基羰基”分别是指本文定义的羰基分别被本文定义的烷基氨基、环烷基氨基、芳基氨基、芳烷基氨基、或杂芳基氨基取代。

术语“烷基羰基烷基”或“烷酰基烷基”是指进一步被一个烷基羰基取代的烷基。

术语“烷基羰基烷氧基”或“烷酰基烷氧基”是指进一步被一个烷基羰基取代的烷氧基。

术语“杂环烷基羰基烷基”是指进一步被一个杂环烷基羰基取代的烷基。

术语“巯基”是指-SH基团。术语“烷硫基”是指本文所定义的巯基被本文所定义的烷基取代。

术语“砜基”或“磺酰基”是指磺酸失去羟基后的官能团，具体是指-S(＝O)₂-基团。

术语“亚砜基”或“亚磺酰基”是指-S(＝O)-。

术语“氨基砜基”或“氨基磺酰基”是指-S(＝O)₂-NH₂基团。

术语“烷基亚砜基”或“烷基亚磺酰基”是指-S(＝O)-R，其中R为烷基。

术语“烷基砜基”或“烷基磺酰基”是指-S(＝O)₂-R，其中R为烷基。

术语“烷基氨基砜基”是指本文定义的砜基被本文定义的烷基氨基取代。

术语“烷基砜基氨基”或“环烷基砜基氨基”是指本文定义的氨基被本文定义的烷基砜基或环烷基砜基取代。

术语“环烷基砜基”和“环烷基磺酰基”是指-S(＝O)₂-R，其中R为环烷基。

术语“烷基磺酰胺基”和“环烷基磺酰胺基”是指-NH-S(＝O)₂-R，其中R分别为烷基和环烷基。

术语“季铵基”是指-N⁺RR’R”，其中R、R’和R”各自独立地选自具有1-8个碳原子的烷基。

术语“任选”指后面描述的一个或多个事件可以发生或可以不发生，并且包括发生的事件和不发生的事件两者。术语“任选取代的”或“取代的”是指所提及的基团可以被一个或多个额外的基团取代，所述额外的基团各自并且独立地选自烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、羟基、烷氧基、氰基、卤素、酰胺基、硝基、卤代烷基、氨基、甲磺酰基、烷基羰基、烷氧基羰基、杂芳基烷基、杂环烷基烷基、氨酰基、氨基保护基等。其中，氨基保护基优选选自新戊酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基、9-芴甲氧羰基、苄基、对甲氧苄基、烯丙氧羰基、和三氟乙酰基等。

本文使用的术语“酪氨酸蛋白激酶(tyrosine protein kinase，TPK)”是一类催化ATP上γ-磷酸转移到蛋白酪氨酸残基上的激酶，能催化多种底物蛋白质酪氨酸残基磷酸化，在细胞生长、增殖、分化中具有重要作用。

本文使用的术语激酶的“抑制”、“抑制的”或“抑制剂”，是指磷酸转移酶活性被抑制。

本文公开的化合物的“代谢物”是当该化合物被代谢时形成的化合物的衍生物。术语“活性代谢物”是指当该化合物被代谢时形成的化合物的生物活性衍生物。本文使用的术语“被代谢”，是指特定物质被生物体改变的过程总和(包括但不限于水解反应和由酶催化的反应，例如氧化反应)。因此，酶可以产生特定的结构转变为化合物。例如，细胞色素P450催化各种氧化和还原反应，同时二磷酸葡萄糖甘酸基转移酶催化活化的葡萄糖醛酸分子至芳香醇、脂肪族醇、羧酸、胺和游离的巯基的转化。新陈代谢的进一步的信息可以从《ThePharmacological Basis ofTherapeutics》，第九版，McGraw-Hill(1996)获得。本文公开的化合物的代谢物可以通过将化合物给予宿主并分析来自该宿主的组织样品、或通过将化合物与肝细胞在体外孵育并且分析所得化合物来鉴别。这两种方法都是本领域已知的。在一些实施方式中，化合物的代谢物是通过氧化过程形成并与相应的含羟基化合物对应。在一些实施方式中，化合物被代谢为药物活性代谢物。本文使用的术语“调节”，是指直接或间接与靶标相互作用，以改变靶标的活性，仅仅举例来说，包括增强靶标的活性、抑制靶标的活性、限制靶标的活性或者延长靶标的活性。

本文使用的术语“靶蛋白”是指能被选择性结合化合物所结合的蛋白质分子或部分蛋白质。在某些实施方式中，靶蛋白是酪氨酸激酶KIT(野生型或各种突变或其组合)、ABL(野生型或各种突变或其组合)、EGFR(野生型或各种突变或其组合)、FLT3(野生型或各种突变或其组合)、VEGFR2(野生型或各种突变或其组合)、RET(野生型或各种突变或其组合)、PDGFRα(野生型或各种突变或其组合)、PDGFRβ(野生型或各种突变或其组合)、BCR/ABL(野生型或各种突变或其组合)、FGFR1(野生型或各种突变或其组合)、FGFR2(野生型或各种突变或其组合)、FGFR3(野生型或各种突变或其组合)、FGFR4(野生型或各种突变或其组合)。

本文使用的IC₅₀是指在测量这样的效应的分析中获得最大效应的50％抑制的特定测试化合物的量、浓度或剂量。

本文使用的EC₅₀是指测定化合物的剂量、浓度或量，其引起特定测定化合物诱导、刺激或加强的特定反应的50％的最大表达的剂量依赖反应。

本文使用的GI₅₀是指使50％细胞生长被抑制所需的药物浓度，即药物使50％细胞(如癌细胞)的生长得到抑制或控制时的药物浓度。

本发明新型的激酶抑制剂

本发明提供一种新型的激酶抑制剂，包括式(I)的化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前体药物，

其中，

X为氮原子或者碳原子；

Y为氮原子或者碳原子；

Z为直接键或-NH-；

R₁选自氢原子、卤素原子、C_1-6烷基或甲酰胺基；

对于各个变量，上述基团的任意组合也在本文考虑之中。可以理解的是：本文所提供的化合物上的取代基和取代模式可以由本领域技术人员进行选择，以便提供化学上稳定的且可以使用本领域已知的技术以及本文阐述的技术合成的化合物。

在优选的实施方式中，本发明的抑制剂包括下表1的化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药。

表1

本文描述的是新型的激酶抑制剂。本文也描述了此化合物的药学可接受的盐、溶剂化物、酯、酸、药物活性代谢物和前药。

在另外的或进一步的实施方式中，将本文描述的化合物给予有需要的生物体后在其体内代谢产生代谢物，所产生的代谢物然后用于产生期望的效果，包括期望的治疗效果。

本文描述的化合物可以被制成和/或被用作药学可接受的盐。药学可接受的盐的类型包括但不限于：(1)酸加成盐、通过将化合物的游离碱形式与药学可接受的无机酸反应形成，所述无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、偏磷酸等；或与有机酸反应形成，所述有机酸如乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、马来酸、酒石酸、反丁烯二酸、三氟乙酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、1,2-乙二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、4-甲基双环-[2.2.2]辛-2-烯-1-甲酸、2-萘磺酸、叔丁基乙酸、葡庚糖酸、4,4'-亚甲基双-(3-羟基-2-烯-1-甲酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、水杨酸、羟基萘酸、硬脂酸、粘康酸等；(2)碱加成盐，其在母体化合物中的酸性质子被金属离子置换时形成，例如碱金属离子(例如锂、钠、钾)、碱土金属离子(例如镁或钙)或铝离子；或与有机碱或无机碱配位，可接受的有机碱包括乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、三甲胺、N-甲基葡萄糖胺等；可接受的无机碱包括氢氧化铝、氢氧化钙、氢氧化钾、碳酸钠、氢氧化钠等。

药学可接受的盐的相应的平衡离子可以使用各种方法分析和鉴定，所述方法包括但不限于离子交换色谱、离子色谱、毛细管电泳、电感耦合等离子体、原子吸收光谱、质谱或它们的任何组合。

使用以下技术的至少一种回收所述盐：过滤、用非溶剂沉淀接着过滤、溶剂蒸发，或水溶液的情况下使用冻干法。

筛选和表征药学可接受的盐、多晶型和/或溶剂化物可以使用多种技术完成，所述技术包括但不限于热分析、X射线衍射、光谱、显微镜方法、元素分析。使用的各种光谱技术包括但不限于Raman、FTIR、UVIS和NMR(液体和固体状态)。各种显微镜技术包括但不限于IR显微镜检术和拉曼(Raman)显微镜检术。

本发明的药物组合物

本申请还提供药物组合物，其包含至少一种式(I)的化合物或所述化合物的药学可接受的盐、溶剂化物、酯、酸、药物活性代谢物或前药、以及药学可接受的载体或赋形剂、以及任选的其它治疗剂。

在治疗过程中，可以根据情况单独或与一种或多种其它的治疗剂组合使用。可以通过注射、口服、吸入、直肠和经皮施用中的至少一种将包含本发明化合物的药物施用给患者。其它的治疗剂可以选自以下药物：免疫抑制剂(例如他克莫司、环抱菌素、雷帕霉素、甲氨蝶岭、环磷酰胺、硫唑嘌呤、巯嘌呤、麦考酚酯或FTY720)、糖皮质激素类药(例如***、醋酸可的松、***龙、甲泼尼龙、***、倍他米松、曲安西龙、氢羟强的松龙、倍氯米松、醋酸氟氢可的松、醋酸脱氧皮质酮、醛固酮)、非甾体抗炎药(例如水杨酸盐、芳基烷酸、2-芳基丙酸、N-芳基邻氨基苯甲酸、昔康类、考昔类或硫酰替苯胺)、***反应疫苗、抗组胺药、抗白三烯药、β-激动剂、茶碱、抗胆碱药或其它选择性激酶抑制剂(例如mTOR抑制剂、c-Met抑制剂)或her2抗体-药物。另外，所提及的其它治疗剂还可以是雷帕霉素(Rapamycin)、克唑替尼(Crizotinib)、他莫昔芬、雷洛昔芬、阿那曲唑、依西美坦、来曲唑、赫赛汀^TM(曲妥珠单抗)、格列卫^TM(伊马替尼)、紫杉醇^TM(紫杉醇)、环磷酰胺、洛伐他汀、美诺四环素(Minosine)、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶(5-FU)、甲氨蝶呤(MTX)、紫杉特尔^TM(多西他赛)、诺雷德^TM(戈舍瑞林)、长春新碱、长春碱、诺考达唑、替尼泊苷、依托泊苷、健择^TM(吉西他滨)、埃博霉素(Epothilone)、诺唯本、喜树碱、柔红霉素(Daunonibicin)、更生霉素、米托蒽醌、安吖啶、多柔比星(亚德里亚霉素)、表柔比星或伊达比星。或者，其它治疗剂也可以是细胞因子例如G-CSF(粒细胞集落刺激因子)。或者，其它治疗剂也可以是，例如但不限于，CMF(环磷酰胺、甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶)、CAF(环磷酰胺、亚德里亚霉素和5-氟尿嘧啶)、AC(亚德里亚霉素和环磷酰胺)、FEC(5-氟尿嘧啶、表柔比星和环磷酰胺)、ACT或ATC(亚德里亚霉素、环磷酰胺和紫杉醇)或CMFP(环磷酰胺、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶和***)。

在本发明的实施方式中，在根据本发明对患者进行治疗时，给定药物的量取决于诸多因素，如具体的给药方案、疾病或病症类型及其严重性、需要治疗的受治疗者或宿主的独特性(例如体重)，但是，根据特定的周围情况，包括例如已采用的具体药物、给药途径、治疗的病症、以及治疗的受治疗者或宿主，施用剂量可由本领域已知的方法常规决定。通常，就成人治疗使用的剂量而言，施用剂量典型地在0.02-5000mg/天，例如约1-1500mg/天的范围。该所需剂量可以方便地被表现为一剂、或同时给药的(或在短时间内)或在适当的间隔的分剂量，例如每天二、三、四剂或更多分剂。本领域技术人员可以理解的是，尽管给出了上述剂量范围，但具体的有效量可根据患者的情况并结合医师诊断而适当调节。

本发明的药物的用途

本发明的激酶抑制剂包括至少一种式(I)的化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药、或药物组合物，用于降低或抑制细胞或受试者的JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2激酶激酶活性，并且/或者在受试者中预防或治疗JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2激酶活性相关病症。

式(I)所述化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，或其药物组合物可用于治疗、预防或改善选自下组的自身免疫性疾病：关节炎、风湿性关节炎、骨关节炎、狼疮、类风湿性关节炎、炎性肠病、银屑病性关节炎、骨关节炎、斯蒂尔病(Still'sdisease)、青少年关节炎、糖尿病、重症肌无力症、桥本甲状腺炎(Hashimoto'sthyroiditis)、奥德甲状腺炎(Ord's hyroiditis)、格雷夫斯病(Graves'disease)、类风湿性关节炎综合征(

syndrome)、多发性硬化症、传染性神经元炎(Guillain-Barrésyndrome)、急性播散性脑脊髓炎、阿狄森病(Addison's disease)、视性眼阵孪-肌阵孪综合征、强直性脊椎炎、抗磷脂抗体综合征、再生障碍性贫血、自身免疫性肝炎、乳糜泻(coeliac disease)、古德帕斯彻综合征(Goodpasture's syndrome)、特发性血小板减少性紫癜、视神经炎、硬皮病、原发性胆汁性肝硬化、莱特尔综合征(Reiter's syndrome)、高安动脉炎(Takayasu's arteritis)、颞动脉炎、温型自身免疫性溶血性贫血、韦格纳肉芽肿病(Wegener's granulomatosis)、银屑病、全身脱毛、贝赫切特病(Behcet's disease)、慢性疲劳、家族性自主神经功能异常、子宫内膜异位、间质性膀胱炎、神经肌强直、硬皮病或外阴痛。

化合物的制备

使用本领域技术人员已知的标准合成技术或使用本领域已知的方法与本文描述的方法组合，可以合成式(I)的化合物。另外，本文给出的溶剂、温度和其它反应条件可以根据本领域技术而改变。作为进一步的指导，也可以利用以下的合成方法。

所述反应可以按顺序使用，以提供本文描述的化合物；或它们可以用于合成片段，所述片段通过本文描述的方法和/或本领域已知的方法随后加入。

在某些实施方式中，本文提供的是本文描述的激酶抑制剂化合物的制备方法及其使用方法。在某些实施方式中，本文描述的化合物可以使用以下合成的方案合成。可以使用与下述类似的方法，通过使用适当的可选择的起始原料，合成化合物。

用于合成本文描述的化合物的起始原料可以被合成或可以从商业来源获得。本文描述的化合物和其它相关具有不同取代基的化合物可以使用本领域技术人员已知的技术和原料合成。制备本文公开的化合物的一般方法可以来自本领域已知的反应，并且该反应可以通过由本领域技术人员所认为适当的试剂和条件修改，以引入本文提供的分子中的各种部分。

如果需要，反应产物可以使用常规技术分离和纯化，包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱等方法。这些产物可以使用常规方法表征，包括物理常数和图谱数据。

制备式(I)的化合物的合成方案的非限制性实施例参见以下合成路线。

实施例1：

N-(4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苄基)-2-氯苯甲酰胺

4-溴-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶：在100mL圆底烧瓶中加入4-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(2g)、对甲苯磺酰氯(2.3g)后加入丙酮(50mL)、水(1mL)，氢氧化钠(0.53g)。反应体系在室温下反应10h。反应结束后，体系在减压下蒸干溶剂，向瓶中加100mL水，有白色固体析出，过滤、用水淋洗、少量石油醚淋洗，干燥后得白色固体。MS(ESI)m/z(M+1)+：351.97。

(4-(7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苯基)甲胺：在圆底烧瓶中加入4-溴-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(1.0g)后加入二氧六环(40mL)、水(10mL)、(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)甲胺(1.0g)、四三苯基膦钯(0.33g)和碳酸钾(0.59g)。反应体系在氩气保护下加热至100℃反应14h。反应结束后，体系在减压下蒸干溶剂，所得物用乙酸乙酯溶解。有机相先后用水、饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥。有机相经过滤，减压蒸干后得粗品。粗品经加压硅胶柱层析提纯后得纯品，MS(ESI)m/z(M+1)+：379.12。

2-氯-N-(4-(7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苄基)苯甲酰胺：在25mL圆底烧瓶中加入4-溴-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(0.1g)、2-氯苯甲酰氯(0.04mL)、四氢呋喃(6mL)、三乙胺(0.06mL)。反应体系在室温下反应5h。反应结束后，体系在减压下蒸干溶剂，用乙酸乙酯溶解产品，有机相先后用水、饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥。有机相经过滤，减压蒸干后得粗品。粗品经加压硅胶柱层析提纯后得纯品，MS(ESI)m/z(M+1)+：517.10。

N-(4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苄基)-2-氯苯甲酰胺：在25mL圆底烧瓶中加入2-氯-N-(4-(7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苄基)苯甲酰胺(0.08g)后加入氢氧化钠(0.06g)、四氢呋喃(2mL)、水(2mL)。反应体系在室温下搅拌8h。反应结束后，体系在减压下蒸干溶剂，用乙酸乙酯溶解产品，有机相先后用水、饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥。有机相经过滤，减压蒸干后得粗品。粗品经加压硅胶柱层析提纯后得纯品，MS(ESI)m/z(M+1)+：363.09。

实施例2：

N-(4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苄基)-4-甲基苯甲酰胺

实施例2的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：343.15。

实施例3：

N-(4-(1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)苯基)-4-甲基苯甲酰胺

实施例3的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：330.13。

实施例4：

N-(4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苯基)环丙烷甲酰胺

实施例4的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：279.12。

实施例5：

N-(4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苯基)-4-甲基苯甲酰胺

实施例5的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：329.13。

实施例6：

N-(4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苄基)-4-乙基苯甲酰胺

实施例6的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：357.16。

实施例7：

N-(4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苄基)-4-异丙基苯甲酰胺

实施例7的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：371.18。

实施例8：

N-(4-(1H-吲唑-4-基)苯基)-4-(叔丁基)苯甲酰胺

实施例8的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：370.18。

实施例9：

N-(4-(1H-吲唑-4-基)苯基)-4-甲基苯甲酰胺

实施例9的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：328.14。

实施例10：

N-(4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)苯基)-4-(叔丁基)苯甲酰胺

实施例10的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：370.18。

实施例11：

4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-N-(对甲苯基)苯甲酰胺

实施例11的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：329.38。

实施例12：

4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺

实施例12的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：383.35。

实施例13：

N-(4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苄基)-4-氟苯甲酰胺

实施例13的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：347.12。

实施例14：

N-(4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苄基)-4-甲基苯甲酰胺

实施例14的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：343.40。

实施例15：

4-(4-((4-(叔丁基)苯甲酰胺基)甲基)苯基)-N-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺

4-氯-N-甲基-1-甲苯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺：在圆底烧瓶中加入1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-羧酸(1.0g)后加入二(1H-咪唑-1-基)甲酮(1.0g)、DMF(5mL)，室温下反应3h后，再加入40％的甲胺水溶液(1.0g)，反应体系在室温下搅拌过夜。反应结束后，向体系中加入50mL水，静置一段时间后固体析出，过滤干燥得粗品。再向粗品中加入对甲苯磺酰氯(2.1g)，丙酮(40mL)、水(1mL)，氢氧化钠(0.23g)。反应体系在室温下反应10h。反应结束后，体系在减压下蒸干溶剂，向瓶中加100mL水，有白色固体析出，过滤、用水淋洗、少量石油醚淋洗，干燥后得白色固体粗品。粗品经加压硅胶柱层析提纯后得纯品，MS(ESI)m/z(M+1)+：364.04。

4-(叔丁基)-N-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苄基)苯甲酰胺：在圆底烧瓶中加入(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)甲胺(1.0g)后加入无水DCM(10mL)、4-(叔丁基)苯甲酰氯(1.68mL)、三乙胺(1.4mL)。反应体系在室温下反应5h。反应结束后，体系在减压下蒸干溶剂，所得物用水稀释后用乙酸乙酯萃取。有机相分别用水、饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥。有机相经过滤，减压蒸干后得粗品。粗品经加压硅胶柱层析提纯后得纯品，MS(ESI)m/z(M+1)+：394.25。

4-(4-((4-(叔丁基)苯甲酰胺基)甲基)苯基)-N-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺：在圆底烧瓶中加入4-氯-N-甲基-1-甲苯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺(0.1g)、4-(叔丁基)-N-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苄基)苯甲酰胺(0.11g)、碳酸钾(0.57g)和Pd(dppf)Cl2(0.02g)、碘化钾(0.004g)、DMF 2mL。反应体系在氩气保护下加热至110℃反应14h。反应结束后，体系在减压下蒸干溶剂，所得物用水稀释后，水相用乙酸乙酯萃取，有机相分别用水、饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥。有机相经过滤，减压蒸干后得粗品。向粗品中加入氢氧化钠(0.11g)、四氢呋喃(2mL)、水(2mL)。反应体系在室温下搅拌8h。反应结束后，体系在减压下蒸干溶剂，用乙酸乙酯溶解产品，有机相分别用水、饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥。有机相经过滤，减压蒸干后得粗品。粗品经加压硅胶柱层析提纯后得纯品，MS(ESI)m/z(M+1)+：441.22。

实施例16：

4-(4-(4-(叔丁基)苯甲酰胺基)苯基)-N-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺

实施例16的合成通过使用类似于实施例15中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：427.52。

实施例17：

N-甲基-4-(4-(4-甲基-苯甲酰胺基)苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺

实施例17的合成通过使用类似于实施例15中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：385.44。

实施例18：

4-(4-(3-氯苯甲酰胺基)苯基)-N-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺

实施例18的合成通过使用类似于实施例15中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：405.85。

实施例19：

4-(4-(2-氯苯甲酰胺基)苯基)-N-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺

实施例19的合成通过使用类似于实施例15中所述的步骤完成。MS(ESI)m/z(M+1)+：405.85。

实施例20：

4-((3-(5-氟嘧啶-2-基)-2-甲氧基苯基)氨基)-N-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺

4-氯-N-甲基-1-甲苯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺：在圆底烧瓶中加入1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-羧酸(1.0g)后加入二(1H-咪唑-1-基)甲酮(1.0g)、DMF(5mL)，室温下反应3h后，再加入40％的甲胺水溶液(1.0g)，反应体系在室温下搅拌过夜。反应结束后，向体系中加入50mL水，静置一段时间后固体析出，过滤干燥得粗品。再向粗品中加入对甲苯磺酰氯(2.1g)、丙酮(40mL)、水(1mL)、氢氧化钠(0.23g)。反应体系在室温下反应10h。反应结束后，体系在减压下蒸干溶剂，向瓶中加100mL水，有白色固体析出，过滤、用水淋洗、少量石油醚淋洗，干燥后得白色固体粗品。粗品经加压硅胶柱层析提纯后得纯品，MS(ESI)m/z(M+1)+：364.04。

3-(5-氟嘧啶-2-基)-2-甲氧基苯胺：在圆底烧瓶中加入4-氯-N-甲基-1-甲苯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺(1.08g)、3-(5-氟嘧啶-2-基)-2-甲氧基苯胺(0.7g)、四三苯基膦钯(0.46g)和碳酸钾(1.36g)后加入二氧六环(10mL)、水(2mL)。反应体系在氩气保护下加热至80℃反应14h。反应结束后，体系在减压下蒸干溶剂，所得物用乙酸乙酯溶解。有机相分别用水、饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥。有机相经过滤，减压蒸干后得粗品。粗品经加压硅胶柱层析提纯后得纯品，MS(ESI)m/z(M+1)+：220.08。

4-((3-(5-氟嘧啶-2-基)-2-甲氧基苯基)氨基)-N-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺：向干燥后的烧瓶中加入4-氯-N-甲基-1-甲苯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺(0.06g)、3-(5-氟嘧啶-2-基)-2-甲氧基苯胺(0.11g)、无水THF(2mL)、双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(0.7mL)，反应体系在氩气保护下室温下反应6h。反应结束后，反应体系用饱和氯化铵水溶液淬灭，所得物用饱和碳酸氢钠中和后用乙酸乙酯萃取。有机相分别用水、饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥。有机相经过滤，减压蒸干后得粗品。向粗品中加入氢氧化钠(0.11g)、四氢呋喃(2mL)、水(2mL)。反应体系在室温下搅拌8h。反应结束后，体系在减压下蒸干溶剂，用乙酸乙酯溶解产品，有机相分别用水、饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥。有机相经过滤，减压蒸干后得粗品。粗品经加压硅胶柱层析提纯后得纯品，MS(ESI)m/z(M+1)+：393.14。

实施例21：

对癌细胞增殖的影响

通过测试本发明的化合物对JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2激酶高表达细胞生长的影响(表2)，进一步评估文中化合物对JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2高表达细胞增殖的抑制作用。

本实施例中选用了本实施例选用了小鼠Tel-(JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2)-BaF3(稳定表达JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2激酶)上述细胞系均由测试公司构建，构建方法为：经PCR分别扩增人类C-KIT、C-KIT T670I、PDGFRα、PDGFRβ、VEGFR2、FLT3激酶区序列，并分别***到带有N端TEL片段和/或NPM片段和/或TPR片段的MSCV-Puro载体(购自Clontech)，通过逆转录病毒方法，稳定转入小鼠BaF3细胞，并且撤除IL-3生长因子，最终得到依赖JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2转入蛋白的细胞系。

在实施例中将不同浓度(0.000508μM、0.00152μM、0.00457μM、0.0137μM、0.0411μM、0.123μM、0.370μM、1.11μM、3.33μM、10μM于DMSO中)的分子分别加入到上述细胞中，并孵育72h，通过CCK-8(购自贝博生物公司，中国上海)细胞活力检测试剂盒(CCK-8可被活细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物，生成的甲瓒物数量与活细胞的数量成正比)对孵育后的细胞进行检测，通过酶标仪对活细胞的数目进行定量，并计算各个化合物和对照化合物的GI₅₀(结果示于表2和表3中)。

表2所示的实验结果表明，本发明的化合物对突变型JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2有一定的抑制作用。在表2中，“A”表示GI₅₀值小于1μM(100nM)，“B”表示GI₅₀值在1μM至10μM的范围内，且“C”表示GI₅₀值高于10μM。

表2

实施例22：

工业应用性

本发明提供一种新型的激酶抑制剂化合物，其可以用于降低或抑制细胞或受试者的JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2激酶活性，并且/或者在受试者中预防或治疗JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2活性相关病症。因而，可将其制成相应的药物，适于工业应用。

尽管本文对本发明作了详细说明，但本发明不限于此，本技术领域的技术人员可以根据本发明的原理进行修改，因此，凡按照本发明的原理进行的各种修改都应当理解为落入本发明的保护范围。

Claims

1.一种激酶抑制剂，其包括式(I)的化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前体药物，

其中，

X为氮原子或者碳原子。

2.根据权利要求1所述的激酶抑制剂，其中，Y为氮原子或者碳原子，Z为直接键或-NH-。

3.根据权利要求2所述的激酶抑制剂，其中，R₁选自氢原子、卤素原子、C_1-6烷基或甲酰胺基，R₂选自任选地被1-3个独立的R₃基团取代的苯基、吡啶基、吡唑基或嘧啶基。

4.根据权利要求3所述的激酶抑制剂，其中，R₃独立地选自卤素、氨基、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_1-6烷氧基、(4-甲基哌嗪-1-基)甲基、甲氧基取代的苯基、萘基、4-吡啶基、3-哌啶基或任选地被甲基取代的4-哌啶基。

5.根据权利要求1-4任一项所述的激酶抑制剂，其中，所述化合物选自，

6.一种药物组合物，其包括一种或多种如权利要求1-4中任一项所述的激酶抑制剂，以及药学上可接受的载体或赋形剂，以及任选的其它治疗剂。

7.一种或多种如权利要求1-4中任一项所述的激酶抑制剂在制备用于抑制JAK1、JAK2、JAK3、TYK2激酶活性的药物中的用途。

8.如权利要求6所述的治疗疾病、障碍或病症的药物组合物的用途，其中，所述疾病、障碍或病症选自以下自身免疫性疾病：关节炎、风湿性关节炎、骨关节炎、狼疮、类风湿性关节炎、炎性肠病、银屑病性关节炎、骨关节炎、斯蒂尔病、青少年关节炎、糖尿病、重症肌无力症、桥本甲状腺炎、奥德甲状腺炎、格雷夫斯病、类风湿性关节炎综合征、多发性硬化症、传染性神经元炎、急性播散性脑脊髓炎、阿狄森病、视性眼阵孪-肌阵孪综合征、强直性脊椎炎、抗磷脂抗体综合征、再生障碍性贫血、自身免疫性肝炎、乳糜泻、古德帕斯彻综合征、特发性血小板减少性紫癜、视神经炎、硬皮病、原发性胆汁性肝硬化、莱特尔综合征、高安动脉炎、颞动脉炎、温型自身免疫性溶血性贫血、韦格纳肉芽肿病、银屑病、全身脱毛、贝赫切特病、慢性疲劳、家族性自主神经功能异常、子宫内膜异位、间质性膀胱炎、神经肌强直、硬皮病或外阴痛。

9.一种或多种如权利要求1-4中任一项所述的激酶抑制剂在制备用于治疗或预防JAK1、JAK2、JAK3、TYK2活性相关病、障碍或病症的药物中的用途。

10.如权利要求7所述的治疗疾病、障碍或病症的药物的用途，其中，所述疾病、障碍或病症为JAK1、JAK2、JAK3、TYK2激酶相关疾病。