CN113667149A - 一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,属于多糖制备及应用技术领域,该交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,包括以下步骤:步骤一、原料制备、对银耳进行粉碎混合缓冲液。该交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,通过对银耳的粉碎、提取,可以最大程度利用银耳的有效充分,保证提取效率,该交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,通过对维生素、蛋白质的水解、大分子质量的纤维水解,获取更高浓度的多糖和氨基酸成分,提高单位原料的利用效率,降低原料的使用量,直接提高经济效益,通过对银耳的有效成分进行提取,可以极大的方丰富产品内所含的滋养成分,如维生素和氨基酸,提高实际使用效果。
Description
技术领域
本发明涉及多糖制备及应用领域,具体为一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法。
背景技术
银耳多糖是银耳的主要活性成分,包括酸性多糖、中性多糖、中性杂多糖、酸性低聚糖、胞壁多糖和胞外多糖等,具有强心、延缓衰老、抗血栓、抗肿瘤、提高免疫力以及祛除黄褐斑等功效,在食品、保健品及化妆品领域中应用广泛,大分子量的银耳多糖具有良好的保湿能力和优越的成膜性,并具有抗氧化、抗敏消炎作用,但是存在溶解度低、不易被皮肤吸收和在配方中应用会带来黏腻感的缺点,在化妆品中应用存在一定的缺陷,而较低分子量的银耳多糖,溶解度高,容易被皮肤吸收且具备良好的保湿能力,给皮肤提供深层保湿的作用,故低分子量的银耳多糖更适合应用于化妆品领域。
透明质酸(Hyaluronic acid,HA),又名玻尿酸,是粘多糖中最具代表性的一种,广泛分布于人体各部位,以其独特的分子结构和理化性质在机体内显示出多种重要的生理功能,如润滑关节、调节血管壁的通透性,调节蛋白质,水电解质扩散及运转,促进伤口愈合,此外,透明质酸具有特殊的锁水功能,是目前发现的自然界保湿性最好的物质,被称为理想的天然保湿因子。
现有的银耳多糖往往是直接从银耳中直接提取,受制于提取效益的限制,往往在提取的过程中,需要大量使用吸附色素和杂质的工艺,导致了对于多糖制备的经济效益下降,其次是银耳中富含的蛋白质、氨基酸和维生素成为副产物,浪费较为明显,最后是在后续的制备过程中,原料有效充分的提取效率不佳,需要大量的使用银耳,有效成分提取效率的降低,直接降低了交联透明质酸的制备效率。
发明内容
本发明提供的发明目的在于提供一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法。对于银耳多糖的提取效率提升,随后采用反复利用提取物,可以实现经济副产物的产生,保证经济效益,通过对副产物的提取,提高产品滋养成分的富含度。
为了实现上述效果,本发明提供如下技术方案:一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,包括以下步骤:
步骤一、原料制备、对银耳进行粉碎混合缓冲液,加热熟化后冷却待用,随后加入双氧水、盐酸调节pH值,静置分层,取上清液加热析出维生素B固体物、随后将加热产生的蒸馏水和下层混合液、将混合液与蛋白质分解酶、纤维素分解酶和木瓜酶进行指定比例混合。
步骤二、粗提纯、去酶解后的上清液进行离心,再次去上清液进行加热醇化获取银耳多糖。
步骤三、分流制备、取适量银耳多糖固体加入蒸馏水混合制备透明质酸溶液,利用磷酸溶液调节PH。
步骤四、成品制备、N,N-双(丙烯酰)胱胺与透明质酸溶液产生交联反应,产品再次与维生素B固体物混合溶解。
进一步的,根据步骤一中的操作步骤,所述缓冲液为硫酸氢钠溶液,实际的浓度为0.17mol/L。
进一步的,根据步骤一中的操作步骤,所述维生素B固体物的进行再次溶解和萃取进行提纯,萃取剂选用蒸馏水即可。
进一步的,根据步骤二中的操作步骤,所述酶解的反应温度为28摄氏度,随后的加热温度为65摄氏度-72摄氏度,每分钟加热的温度为1.5摄氏度。
进一步的,根据步骤二中的操作步骤,所述银耳多糖为质低分子量银耳多糖。
进一步的,根据步骤三中的操作步骤,所述透明质酸溶液的PH值为8-9之间,所述磷酸溶液调节PH,调节后的PH为7-7.4。
进一步的,根据步骤三中的操作步骤,所述磷酸溶液的浓度为0.09mol/L。
进一步的,根据步骤三中的操作步骤,所述银耳多糖溶解采用加热溶解,加热温度为60摄氏度。
进一步的,根据步骤四中的操作步骤,所述N,N-双(丙烯酰)胱胺为交联剂,所述N,N-双(丙烯酰)胱胺与透明质酸溶液的混合比例为1:10。
进一步的,根据步骤四中的操作步骤,所述交联反应的温度控制在40-50摄氏度之间,反应时间根据原料的剩余量决定,最大控制在8小时。
本发明提供了一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,具备以下有益效果:
(1)该交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,通过对银耳的粉碎、提取,可以最大程度利用银耳的有效充分,保证提取效率。
(2)该交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,通过对维生素、蛋白质的水解、大分子质量的纤维水解,获取更高浓度的多糖和氨基酸成分,提高单位原料的利用效率,降低原料的使用量,直接提高经济效益。
(3)该交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,通过对银耳的有效成分进行提取,可以极大的方丰富产品内所含的滋养成分,如维生素和氨基酸,提高实际使用效果。
附图说明
图1为本发明的制备方法示意图。
具体实施方式
本发明提供一种技术方案:请参阅图1,一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,包括以下步骤:
步骤一、原料制备、对银耳进行粉碎混合缓冲液,加热熟化后冷却待用,随后加入双氧水、盐酸调节pH值,静置分层,取上清液加热析出维生素B固体物、随后将加热产生的蒸馏水和下层混合液、将混合液与蛋白质分解酶、纤维素分解酶和木瓜酶进行指定比例混合。
步骤二、粗提纯、去酶解后的上清液进行离心,再次去上清液进行加热醇化获取银耳多糖。
步骤三、分流制备、取适量银耳多糖固体加入蒸馏水混合制备透明质酸溶液,利用磷酸溶液调节PH。
步骤四、成品制备、N,N-双(丙烯酰)胱胺与透明质酸溶液产生交联反应,产品再次与维生素B固体物混合溶解。
具体的,包括以下步骤:根据步骤一中的操作步骤,缓冲液为硫酸氢钠溶液,实际的浓度为0.17mol/L。
具体的,包括以下步骤:根据步骤一中的操作步骤,维生素B固体物的进行再次溶解和萃取进行提纯,萃取剂选用蒸馏水即可。
具体的,包括以下步骤:根据步骤二中的操作步骤,酶解的反应温度为28摄氏度,随后的加热温度为65摄氏度-72摄氏度,每分钟加热的温度为1.5摄氏度。
具体的,包括以下步骤:根据步骤二中的操作步骤,银耳多糖为质低分子量银耳多糖。
具体的,包括以下步骤:根据步骤三中的操作步骤,透明质酸溶液的PH值为8-9之间,磷酸溶液调节PH,调节后的PH为7-7.4。
具体的,包括以下步骤:根据步骤三中的操作步骤,磷酸溶液的浓度为0.09mol/L。
具体的,包括以下步骤:根据步骤三中的操作步骤,银耳多糖溶解采用加热溶解,加热温度为60摄氏度。
具体的,包括以下步骤:根据步骤四中的操作步骤,N,N-双(丙烯酰)胱胺为交联剂,N,N-双(丙烯酰)胱胺与透明质酸溶液的混合比例为1:10。
具体的,包括以下步骤:根据步骤四中的操作步骤,交联反应的温度控制在40-50摄氏度之间,反应时间根据原料的剩余量决定,最大控制在8小时。
实施例的方法进行检测分析,并与现有技术进行对照,得出如下数据:
提取效率 | 经济效益 | 成分丰富度 | |
实施例 | 较高 | 较好 | 较高 |
现有技术 | 较低 | 较差 | 较低 |
根据上述表格数据可以得出,当实施实施例时,通过本发明一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,对于银耳多糖的提取效率提升,随后采用反复利用提取物,可以实现经济副产物的产生,保证经济效益,通过对副产物的提取,提高产品滋养成分的富含度。
本发明提供了一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,包括以下步骤:步骤一、原料制备、对银耳进行粉碎混合缓冲液,加热熟化后冷却待用,随后加入双氧水、盐酸调节pH值,静置分层,取上清液加热析出维生素B固体物、随后将加热产生的蒸馏水和下层混合液、将混合液与蛋白质分解酶、纤维素分解酶和木瓜酶进行指定比例混合,维生素B固体物的进行再次溶解和萃取进行提纯,萃取剂选用蒸馏水即可,维生素B固体物的进行再次溶解和萃取进行提纯,萃取剂选用蒸馏水即可,利用双氧水、盐酸调节pH值,可以使得溶解于水中的维生素B析出,实际的析出PH为4.0~4.2,通过蛋白质分解酶、纤维素分解酶和木瓜酶,可以实现对银耳含蛋白质6.7%-10%、碳水化合物65%-71.2%、脂肪0.6%-12.8%、粗纤维2.4%-2.75%的成分,进行充足的分解,步骤二、粗提纯、去酶解后的上清液进行离心,再次去上清液进行加热醇化获取银耳多糖,酶解的反应温度为28摄氏度,随后的加热温度为65摄氏度-72摄氏度,每分钟加热的温度为1.5摄氏度,银耳多糖为质低分子量银耳多糖,醇化沉淀为分级沉淀法是指在混合组分的溶液中加入与该溶液能互溶的溶剂,通过改变溶剂的极性而改变混合组分溶液中某些成分的溶解度,使其从溶液中析出。如在含有糖类或蛋白质的水溶液中,分次加入乙醇,使含醇量逐步增高,逐级沉淀出分子量段由大到小的蛋白质、多糖、多肽在含皂苷的乙醇溶液中分次加入***或丙酮可使极性有差异的皂苷逐段沉淀出来等步骤三、分流制备、取适量银耳多糖固体加入蒸馏水混合制备透明质酸溶液,利用磷酸溶液调节PH,透明质酸溶液的PH值为8-9之间,磷酸溶液调节PH,调节后的PH为7-7.4,磷酸溶液的浓度为0.09mol/L,银耳多糖溶解采用加热溶解,加热温度为60摄氏度,步骤四、成品制备、N,N-双(丙烯酰)胱胺与透明质酸溶液产生交联反应,产品再次与维生素B固体物混合溶解,N,N-双(丙烯酰)胱胺为交联剂,N,N-双(丙烯酰)胱胺与透明质酸溶液的混合比例为1:10,交联反应的温度控制在40-50摄氏度之间,反应时间根据原料的剩余量决定,最大控制在8小时。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (10)
1.一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、原料制备、对银耳进行粉碎混合缓冲液,加热熟化后冷却待用,随后加入双氧水、盐酸调节pH值,静置分层,取上清液加热析出维生素B固体物、随后将加热产生的蒸馏水和下层混合液、将混合液与蛋白质分解酶、纤维素分解酶和木瓜酶进行指定比例混合;
S2、粗提纯、去酶解后的上清液进行离心,再次去上清液进行加热醇化获取银耳多糖;
S3、分流制备、取适量银耳多糖固体加入蒸馏水混合制备透明质酸溶液,利用磷酸溶液调节PH;
S4、成品制备、N,N-双(丙烯酰)胱胺与透明质酸溶液产生交联反应,产品再次与维生素B固体物混合溶解。
2.据权利要求1所述的一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S1中的操作步骤,所述缓冲液为硫酸氢钠溶液,实际的浓度为0.17mol/L。
3.据权利要求1所述的一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S1中的操作步骤,所述维生素B固体物的进行再次溶解和萃取进行提纯,萃取剂选用蒸馏水即可。
4.据权利要求1所述的一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S2中的操作步骤,所述酶解的反应温度为28摄氏度,随后的加热温度为65摄氏度-72摄氏度,每分钟加热的温度为1.5摄氏度。
5.据权利要求1所述的一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S2中的操作步骤,所述银耳多糖为质低分子量银耳多糖。
6.据权利要求1所述的一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S3中的操作步骤,所述透明质酸溶液的PH值为8-9之间,所述磷酸溶液调节PH,调节后的PH为7-7.4。
7.据权利要求1所述的一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S3中的操作步骤,所述磷酸溶液的浓度为0.09mol/L。
8.据权利要求1所述的一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S3中的操作步骤,所述银耳多糖溶解采用加热溶解,加热温度为60摄氏度。
9.据权利要求1所述的一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S4中的操作步骤,所述N,N-双(丙烯酰)胱胺为交联剂,所述N,N-双(丙烯酰)胱胺与透明质酸溶液的混合比例为1:10。
10.据权利要求1所述的一种交联透明质酸与银耳多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S4中的操作步骤,所述交联反应的温度控制在40-50摄氏度之间,反应时间根据原料的剩余量决定,最大控制在8小时。
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