CN113621643A - GhTULP34在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用及调控方法 - Google Patents
GhTULP34在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用及调控方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113621643A CN113621643A CN202111023270.0A CN202111023270A CN113621643A CN 113621643 A CN113621643 A CN 113621643A CN 202111023270 A CN202111023270 A CN 202111023270A CN 113621643 A CN113621643 A CN 113621643A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ghtulp34
- protein
- plants
- plant
- gene
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 34
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 title claims abstract description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 112
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 61
- 230000036579 abiotic stress Effects 0.000 claims abstract description 25
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 23
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 71
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 claims description 23
- 241000219195 Arabidopsis thaliana Species 0.000 claims description 18
- 230000035882 stress Effects 0.000 claims description 18
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 15
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 15
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 claims description 14
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 claims description 13
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 12
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 11
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 10
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 claims description 9
- 239000012620 biological material Substances 0.000 claims description 7
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 230000008641 drought stress Effects 0.000 claims description 5
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 claims description 3
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 29
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 28
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 22
- 241000219146 Gossypium Species 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 14
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 13
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 9
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 9
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 8
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 8
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 8
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 8
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 8
- 241001302247 Cotton leaf crumple virus Species 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 7
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 5
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 5
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 5
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 5
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 5
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000008723 osmotic stress Effects 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 4
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 4
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 4
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 240000002024 Gossypium herbaceum Species 0.000 description 3
- 235000004341 Gossypium herbaceum Nutrition 0.000 description 3
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 239000006870 ms-medium Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 3
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 3
- 230000028604 virus induced gene silencing Effects 0.000 description 3
- AMIQZQAAYGYKOP-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AMIQZQAAYGYKOP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- SFJUYBCDQBAYAJ-YDHLFZDLSA-N Asp-Val-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 SFJUYBCDQBAYAJ-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 2
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 101100154794 Drosophila melanogaster ktub gene Proteins 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 238000010802 RNA extraction kit Methods 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- JMBRNXUOLJFURW-BEAPCOKYSA-N Thr-Phe-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N)O JMBRNXUOLJFURW-BEAPCOKYSA-N 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- OJOBTAOGJIWAGB-UHFFFAOYSA-N acetosyringone Chemical compound COC1=CC(C(C)=O)=CC(OC)=C1O OJOBTAOGJIWAGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- JYPCXBJRLBHWME-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-prolyl-L-arginine Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O JYPCXBJRLBHWME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 230000002786 root growth Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 230000015378 stomatal closure Effects 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 241000589155 Agrobacterium tumefaciens Species 0.000 description 1
- HHGYNJRJIINWAK-FXQIFTODSA-N Ala-Ala-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HHGYNJRJIINWAK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N Ala-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- CZPAHAKGPDUIPJ-CIUDSAMLSA-N Ala-Gln-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O CZPAHAKGPDUIPJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NHLAEBFGWPXFGI-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Asn Chemical compound C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N NHLAEBFGWPXFGI-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- SMCGQGDVTPFXKB-XPUUQOCRSA-N Ala-Gly-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N SMCGQGDVTPFXKB-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- JEPNLGMEZMCFEX-QSFUFRPTSA-N Ala-His-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](C)N JEPNLGMEZMCFEX-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 1
- OKIKVSXTXVVFDV-MMWGEVLESA-N Ala-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N OKIKVSXTXVVFDV-MMWGEVLESA-N 0.000 description 1
- MDNAVFBZPROEHO-DCAQKATOSA-N Ala-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MDNAVFBZPROEHO-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- MDNAVFBZPROEHO-UHFFFAOYSA-N Ala-Lys-Val Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(C)N)CCCCN MDNAVFBZPROEHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010011667 Ala-Phe-Ala Proteins 0.000 description 1
- NCQMBSJGJMYKCK-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NCQMBSJGJMYKCK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N Arg-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OVVUNXXROOFSIM-SDDRHHMPSA-N Arg-Arg-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O OVVUNXXROOFSIM-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 1
- GITAWLWBTMJPKH-AVGNSLFASA-N Arg-Met-His Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N GITAWLWBTMJPKH-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- LFAUVOXPCGJKTB-DCAQKATOSA-N Arg-Ser-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N LFAUVOXPCGJKTB-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- SUMJNGAMIQSNGX-TUAOUCFPSA-N Arg-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(O)=O SUMJNGAMIQSNGX-TUAOUCFPSA-N 0.000 description 1
- XVVOVPFMILMHPX-ZLUOBGJFSA-N Asn-Asp-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O XVVOVPFMILMHPX-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- HLTLEIXYIJDFOY-ZLUOBGJFSA-N Asn-Cys-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HLTLEIXYIJDFOY-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- BXUHCIXDSWRSBS-CIUDSAMLSA-N Asn-Leu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BXUHCIXDSWRSBS-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WCRQQIPFSXFIRN-LPEHRKFASA-N Asn-Met-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N WCRQQIPFSXFIRN-LPEHRKFASA-N 0.000 description 1
- ZVUMKOMKQCANOM-AVGNSLFASA-N Asn-Phe-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O ZVUMKOMKQCANOM-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- CBHVAFXKOYAHOY-NHCYSSNCSA-N Asn-Val-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CBHVAFXKOYAHOY-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- MGSVBZIBCCKGCY-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MGSVBZIBCCKGCY-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- OTKUAVXGMREHRX-CFMVVWHZSA-N Asp-Tyr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 OTKUAVXGMREHRX-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 1
- GGBQDSHTXKQSLP-NHCYSSNCSA-N Asp-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N GGBQDSHTXKQSLP-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- PRVVCRZLTJNPCS-FXQIFTODSA-N Cys-Arg-Asn Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)CN=C(N)N PRVVCRZLTJNPCS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- SRIRHERUAMYIOQ-CIUDSAMLSA-N Cys-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SRIRHERUAMYIOQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- IDFVDSBJNMPBSX-SRVKXCTJSA-N Cys-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IDFVDSBJNMPBSX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- DQGIAOGALAQBGK-BWBBJGPYSA-N Cys-Ser-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CS)N)O DQGIAOGALAQBGK-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- YFKWIIRWHGKSQQ-WFBYXXMGSA-N Cys-Trp-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CS)N YFKWIIRWHGKSQQ-WFBYXXMGSA-N 0.000 description 1
- QNNYDGBKNFDYOD-UBHSHLNASA-N Cys-Trp-Cys Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N QNNYDGBKNFDYOD-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 description 1
- 102000018700 F-Box Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010066805 F-Box Proteins Proteins 0.000 description 1
- SHERTACNJPYHAR-ACZMJKKPSA-N Gln-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O SHERTACNJPYHAR-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- PZVJDMJHKUWSIV-AVGNSLFASA-N Gln-Cys-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O PZVJDMJHKUWSIV-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- LLRJEFPKIIBGJP-DCAQKATOSA-N Gln-Glu-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N LLRJEFPKIIBGJP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- LGIKBBLQVSWUGK-DCAQKATOSA-N Gln-Leu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O LGIKBBLQVSWUGK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N Gln-Pro-Gly Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- XKPACHRGOWQHFH-IRIUXVKKSA-N Gln-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O XKPACHRGOWQHFH-IRIUXVKKSA-N 0.000 description 1
- PCBBLFVHTYNQGG-LAEOZQHASA-N Glu-Asn-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N PCBBLFVHTYNQGG-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- ZHNHJYYFCGUZNQ-KBIXCLLPSA-N Glu-Ile-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O ZHNHJYYFCGUZNQ-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- INGJLBQKTRJLFO-UKJIMTQDSA-N Glu-Ile-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O INGJLBQKTRJLFO-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- YRMZCZIRHYCNHX-RYUDHWBXSA-N Glu-Phe-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(O)=O YRMZCZIRHYCNHX-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- WKJKBELXHCTHIJ-WPRPVWTQSA-N Gly-Arg-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCN=C(N)N WKJKBELXHCTHIJ-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- OLPPXYMMIARYAL-QMMMGPOBSA-N Gly-Gly-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN OLPPXYMMIARYAL-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- MHXKHKWHPNETGG-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MHXKHKWHPNETGG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- MHZXESQPPXOING-KBPBESRZSA-N Gly-Lys-Phe Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O MHZXESQPPXOING-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- BBTCXWTXOXUNFX-IUCAKERBSA-N Gly-Met-Arg Chemical compound CSCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O BBTCXWTXOXUNFX-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- JYPCXBJRLBHWME-IUCAKERBSA-N Gly-Pro-Arg Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O JYPCXBJRLBHWME-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- HFPVRZWORNJRRC-UWVGGRQHSA-N Gly-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CN HFPVRZWORNJRRC-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- YOBGUCWZPXJHTN-BQBZGAKWSA-N Gly-Ser-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N YOBGUCWZPXJHTN-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- WCORRBXVISTKQL-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WCORRBXVISTKQL-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- GECLQMBTZCPAFY-PEFMBERDSA-N Ile-Gln-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N GECLQMBTZCPAFY-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- WZDCVAWMBUNDDY-KBIXCLLPSA-N Ile-Glu-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N WZDCVAWMBUNDDY-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- XLCZWMJPVGRWHJ-KQXIARHKSA-N Ile-Glu-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N XLCZWMJPVGRWHJ-KQXIARHKSA-N 0.000 description 1
- YGDWPQCLFJNMOL-MNXVOIDGSA-N Ile-Leu-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N YGDWPQCLFJNMOL-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- ZUPJCJINYQISSN-XUXIUFHCSA-N Ile-Met-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N ZUPJCJINYQISSN-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- YKZAMJXNJUWFIK-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N YKZAMJXNJUWFIK-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- JHNJNTMTZHEDLJ-NAKRPEOUSA-N Ile-Ser-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O JHNJNTMTZHEDLJ-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- PELCGFMHLZXWBQ-BJDJZHNGSA-N Ile-Ser-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N PELCGFMHLZXWBQ-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012880 LB liquid culture medium Substances 0.000 description 1
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 1
- HBJZFCIVFIBNSV-DCAQKATOSA-N Leu-Arg-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HBJZFCIVFIBNSV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- REPPKAMYTOJTFC-DCAQKATOSA-N Leu-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O REPPKAMYTOJTFC-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- MDVZJYGNAGLPGJ-KKUMJFAQSA-N Leu-Asn-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MDVZJYGNAGLPGJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N Leu-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N Leu-Gly-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- OYQUOLRTJHWVSQ-SRVKXCTJSA-N Leu-His-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OYQUOLRTJHWVSQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- USLNHQZCDQJBOV-ZPFDUUQYSA-N Leu-Ile-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O USLNHQZCDQJBOV-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- UBZGNBKMIJHOHL-BZSNNMDCSA-N Leu-Leu-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 UBZGNBKMIJHOHL-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- PKKMDPNFGULLNQ-AVGNSLFASA-N Leu-Met-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O PKKMDPNFGULLNQ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 239000006137 Luria-Bertani broth Substances 0.000 description 1
- ALSRJRIWBNENFY-DCAQKATOSA-N Lys-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ALSRJRIWBNENFY-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- AAORVPFVUIHEAB-YUMQZZPRSA-N Lys-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O AAORVPFVUIHEAB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- NNCDAORZCMPZPX-GUBZILKMSA-N Lys-Gln-Ser Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N NNCDAORZCMPZPX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PBLLTSKBTAHDNA-KBPBESRZSA-N Lys-Gly-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O PBLLTSKBTAHDNA-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- SLQJJFAVWSZLBL-BJDJZHNGSA-N Lys-Ile-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN SLQJJFAVWSZLBL-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- UDXSLGLHFUBRRM-OEAJRASXSA-N Lys-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O UDXSLGLHFUBRRM-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- JOSAKOKSPXROGQ-BJDJZHNGSA-N Lys-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JOSAKOKSPXROGQ-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- MIFFFXHMAHFACR-KATARQTJSA-N Lys-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN MIFFFXHMAHFACR-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- BDFHWFUAQLIMJO-KXNHARMFSA-N Lys-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O BDFHWFUAQLIMJO-KXNHARMFSA-N 0.000 description 1
- USBFEVBHEQBWDD-AVGNSLFASA-N Met-Leu-Val Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O USBFEVBHEQBWDD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- MSSJHBAKDDIRMJ-SRVKXCTJSA-N Met-Lys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MSSJHBAKDDIRMJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- AXHNAGAYRGCDLG-UWVGGRQHSA-N Met-Lys-Gly Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O AXHNAGAYRGCDLG-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- FIZZULTXMVEIAA-IHRRRGAJSA-N Met-Ser-Phe Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 FIZZULTXMVEIAA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 101150037263 PIP2 gene Proteins 0.000 description 1
- DFEVBOYEUQJGER-JURCDPSOSA-N Phe-Ala-Ile Chemical compound N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O DFEVBOYEUQJGER-JURCDPSOSA-N 0.000 description 1
- JEGFCFLCRSJCMA-IHRRRGAJSA-N Phe-Arg-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N JEGFCFLCRSJCMA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- VLZGUAUYZGQKPM-DRZSPHRISA-N Phe-Gln-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VLZGUAUYZGQKPM-DRZSPHRISA-N 0.000 description 1
- HBGFEEQFVBWYJQ-KBPBESRZSA-N Phe-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 HBGFEEQFVBWYJQ-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- WFHRXJOZEXUKLV-IRXDYDNUSA-N Phe-Gly-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 WFHRXJOZEXUKLV-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- 229920002582 Polyethylene Glycol 600 Polymers 0.000 description 1
- SSSFPISOZOLQNP-GUBZILKMSA-N Pro-Arg-Asp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SSSFPISOZOLQNP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- QSKCKTUQPICLSO-AVGNSLFASA-N Pro-Arg-Lys Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O QSKCKTUQPICLSO-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- UVKNEILZSJMKSR-FXQIFTODSA-N Pro-Asn-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 UVKNEILZSJMKSR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- KIPIKSXPPLABPN-CIUDSAMLSA-N Pro-Glu-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 KIPIKSXPPLABPN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NXEYSLRNNPWCRN-SRVKXCTJSA-N Pro-Glu-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NXEYSLRNNPWCRN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- HRIXMVRZRGFKNQ-HJGDQZAQSA-N Pro-Thr-Gln Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O HRIXMVRZRGFKNQ-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 101100262439 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) UBA2 gene Proteins 0.000 description 1
- VAIZFHMTBFYJIA-ACZMJKKPSA-N Ser-Asp-Gln Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O VAIZFHMTBFYJIA-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- VQBCMLMPEWPUTB-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VQBCMLMPEWPUTB-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- VMLONWHIORGALA-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CO VMLONWHIORGALA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Lys Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UGTZYIPOBYXWRW-SRVKXCTJSA-N Ser-Phe-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O UGTZYIPOBYXWRW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FZEUTKVQGMVGHW-AVGNSLFASA-N Ser-Phe-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O FZEUTKVQGMVGHW-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- NUEHQDHDLDXCRU-GUBZILKMSA-N Ser-Pro-Arg Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O NUEHQDHDLDXCRU-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- LGIMRDKGABDMBN-DCAQKATOSA-N Ser-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N LGIMRDKGABDMBN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 1
- UZJDBCHMIQXLOQ-HEIBUPTGSA-N Thr-Cys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N)O UZJDBCHMIQXLOQ-HEIBUPTGSA-N 0.000 description 1
- OQCXTUQTKQFDCX-HTUGSXCWSA-N Thr-Glu-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N)O OQCXTUQTKQFDCX-HTUGSXCWSA-N 0.000 description 1
- XSEPSRUDSPHMPX-KATARQTJSA-N Thr-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XSEPSRUDSPHMPX-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- YJVJPJPHHFOVMG-VEVYYDQMSA-N Thr-Met-Asp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)O YJVJPJPHHFOVMG-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- VGNKUXWYFFDWDH-BEMMVCDISA-N Thr-Trp-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)N3CCC[C@@H]3C(=O)O)N)O VGNKUXWYFFDWDH-BEMMVCDISA-N 0.000 description 1
- RPECVQBNONKZAT-WZLNRYEVSA-N Thr-Tyr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N RPECVQBNONKZAT-WZLNRYEVSA-N 0.000 description 1
- OGOYMQWIWHGTGH-KZVJFYERSA-N Thr-Val-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OGOYMQWIWHGTGH-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- HYNAKPYFEYJMAS-XIRDDKMYSA-N Trp-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HYNAKPYFEYJMAS-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- PGPCENKYTLDIFM-SZMVWBNQSA-N Trp-His-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O PGPCENKYTLDIFM-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- FJKXUIJOMUWCDD-FHWLQOOXSA-N Tyr-Gln-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N)O FJKXUIJOMUWCDD-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 1
- NZFCWALTLNFHHC-JYJNAYRXSA-N Tyr-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 NZFCWALTLNFHHC-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- OLYXUGBVBGSZDN-ACRUOGEOSA-N Tyr-Leu-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 OLYXUGBVBGSZDN-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- RGYCVIZZTUBSSG-JYJNAYRXSA-N Tyr-Pro-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O RGYCVIZZTUBSSG-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- AZSHAZJLOZQYAY-FXQIFTODSA-N Val-Ala-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O AZSHAZJLOZQYAY-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- SYOMXKPPFZRELL-ONGXEEELSA-N Val-Gly-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N SYOMXKPPFZRELL-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- OJOMXGVLFKYDKP-QXEWZRGKSA-N Val-Met-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N OJOMXGVLFKYDKP-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- QTPQHINADBYBNA-DCAQKATOSA-N Val-Ser-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN QTPQHINADBYBNA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GBIUHAYJGWVNLN-AEJSXWLSSA-N Val-Ser-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N GBIUHAYJGWVNLN-AEJSXWLSSA-N 0.000 description 1
- GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N Val-Ser-Pro Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(CO)C(=O)N1CCCC1C(O)=O GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VTIAEOKFUJJBTC-YDHLFZDLSA-N Val-Tyr-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N VTIAEOKFUJJBTC-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- ZHWZDZFWBXWPDW-GUBZILKMSA-N Val-Val-Cys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O ZHWZDZFWBXWPDW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- VVIZITNVZUAEMI-DLOVCJGASA-N Val-Val-Gln Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O VVIZITNVZUAEMI-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- 241000082085 Verticillium <Phyllachorales> Species 0.000 description 1
- 241001123668 Verticillium dahliae Species 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 108010091092 arginyl-glycyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 238000010009 beating Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 1
- 238000007622 bioinformatic analysis Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000004790 biotic stress Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 108010033011 des-Arg- enterostatin Proteins 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000005485 electric heating Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 108010045126 glycyl-tyrosyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010027338 isoleucylcysteine Proteins 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 108010073101 phenylalanylleucine Proteins 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 229940067626 phosphatidylinositols Drugs 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000008640 plant stress response Effects 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 108010020755 prolyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010014614 prolyl-glycyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010015796 prolylisoleucine Proteins 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000021749 root development Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000014793 stomatal movement Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 108010033670 threonyl-aspartyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 108010020532 tyrosyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 1
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 description 1
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 description 1
- 108010000998 wheylin-2 peptide Proteins 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8273—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for drought, cold, salt resistance
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明提供了一种GhTULP34在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用及调控方法，涉及生物技术领域，本发明通过对植物内GhTULP34蛋白的研究，首次鉴定了植物GhTULP34蛋白在在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用，为植物抗旱和盐等渗透胁迫品质的遗传改良提供了有效的途径。通过抑制植物中GhTULP34蛋白的表达，能够增强植物抗非生物逆境胁迫的能力，为培育抗非生物逆境胁迫的植物新品种提供了宝贵的基因资源。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及一种GhTULP34在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用及调控方法。
背景技术
棉花作为固着生物，在生长和繁殖的生命周期中时时刻刻受着周围环境的影响，当其受到旱和盐等非生物性极端环境时，植物的生长发育就会受到严重制约。由于植物在生命受到威胁时无法移动逃跑，因此在长期的演化过程中进化出了一套非常复杂又精密的调控网络，从分子、细胞及生理生化等多维水平来应对生物和非生物胁迫造成的伤害。Tubby类蛋白基因(tubby-like protein，TULP或TLP)家族首先是在一只矮胖的老鼠中发现，在羧基末端拥有一个共同的Tub结构域，但是不同成员之间的氨基末端变化比较大。Tub结构域晶体结构显示其是一个由12条反向平行链形成的一个封闭的β桶，围绕着一个位于蛋白质羧基端的中央疏水α螺旋，并且Tub结构域选择性地与特定的膜磷脂酰肌醇(PIP2)结合，是一种重要的转录因子。
TULP基因在植物应对非生物胁迫过程中起着重要作用。然而在TULP类蛋白在棉花中却鲜有报道，因此，有必要探索GhTULP34基因在调控棉花响应渗透胁迫中的潜在功能。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种GhTULP34蛋白在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用，以至少缓解现有技术存在的问题之一。
本发明的目的之二在于提供GhTULP34蛋白的编码基因或含有所述编码基因的生物材料在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用。
本发明的目的之三在于提供一种调控植物抗非生物逆境胁迫的方法。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
本发明提供了GhTULP34蛋白在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用；
所述GhTULP34蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
所述非生物逆境胁迫包括干旱胁迫和盐胁迫。
进一步的，抑制GhTULP34蛋白的表达，以增强植物抗非生物逆境胁迫的能力。
本发明还提供了GhTULP34蛋白的编码基因或含有所述编码基因的生物材料在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用；
所述GhTULP34蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
所述GhTULP34蛋白的编码基因具有如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。
进一步的，抑制GhTULP34蛋白的编码基因的表达，以增强植物抗非生物逆境胁迫的能力。
进一步的，所述生物材料包括基因表达盒、表达载体或宿主细胞。
进一步的，所述植物包括棉花和/或拟南芥。
本发明还提供了一种调控植物抗非生物逆境胁迫的方法，包括抑制GhTULP34蛋白的编码基因在植物内的表达；
所述GhTULP34蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
所述GhTULP34蛋白的编码基因具有如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。
进一步的，将GhTULP34蛋白的编码基因的沉默片段构建至表达载体上，然后用得到的重组表达载体转化农杆菌，并用转化的农杆菌渗透至植物子叶中，实现GhTULP34蛋白的编码基因的抑制。
进一步的，所述GhTULP34蛋白的编码基因的沉默片段具有如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列；
优选地，所述表达载体包括pCLCrVA。
进一步的，所述植物包括棉花和/或拟南芥。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明通过对植物内GhTULP34蛋白的研究，首次鉴定了植物GhTULP34蛋白在在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用，为植物抗旱和盐等渗透胁迫品质的遗传改良提供了有效的途径。
通过抑制植物中GhTULP34蛋白的表达，能够增强植物抗非生物逆境胁迫的能力，为培育抗非生物逆境胁迫的植物新品种提供了宝贵的基因资源。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例提供的转基因拟南芥和野生型种子的萌发分析：(A)和(B)棉花TM-1和CCRI36种子萌发过程中GhTULP34表达的FPKM和相对表达量；(C)在添加或不添加NaCl的培养基中，测定过表达和野生型拟南芥种子的萌发率；(D)在含有或不含NaCl的平板上培养的种子发芽率。
图2为本发明实施例提供的转基因拟南芥和WT的根系伸长测定：(A)转基因和WT植株在正常MS培养基上的根系生长情况；(B)转基因和WT植株在含有甘露醇的MS培养基上的根系生长情况；(C)转基因和WT植株在含或不含甘露醇的琼脂板上的根长。
图3为本发明实施例提供的转基因拟南芥和WT的气孔运动：(A)甘露醇处理后的转基因和WT植株的气孔开闭状态，红色和蓝色的圆圈分别表示气孔关闭和开放；(B)转基因和WT拟南芥甘露醇处理时的气孔张开率。
图4为本发明实施例提供的GhTULP34沉默株系和空载植株的表型观察。
具体实施方式
除非本文另有定义，连同本发明使用的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员通常理解的含义。术语的含义和范围应当清晰，然而，在任何潜在不明确性的情况下，本文提供的定义优先于任何字典或外来定义。在本申请中，除非另有说明，“或”的使用意味着“和/或”。此外，术语“包括”及其他形式的使用是非限制性的。
一般地，连同本文描述的细胞和组织培养、分子生物学、免疫学、微生物学、遗传学以及蛋白和核酸化学和杂交使用的命名法和其技术是本领域众所周知和通常使用的那些。除非另有说明，本发明的方法和技术一般根据本领域众所周知，且如各种一般和更具体的参考文献中所述的常规方法来进行，所述参考文献在本说明书自始至终引用和讨论。酶促反应和纯化技术根据制造商的说明书、如本领域通常实现的或如本文所述来进行。连同本文描述的分析化学、合成有机化学以及医学和药物化学使用的命名法、以及其实验室程序和技术是本领域众所周知和通常使用的那些。
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
根据本发明的第一个方面，提供了GhTULP34蛋白在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用；
所述GhTULP34蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
所述非生物逆境胁迫包括干旱胁迫和盐胁迫。
本发明通过对植物内GhTULP34蛋白的研究，首次鉴定了植物GhTULP34蛋白在在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用，为植物抗旱和盐等渗透胁迫品质的遗传改良提供了有效的途径。
本发明结合组织表达模式发现GhTULP34在种子萌发过程的表达量逐渐降低，为了研究其功能，将其CDS序列从CCRI36的cDNA中进行扩增，构建了过表达载体，获得了过表达拟南芥株系。在正常情况下过表达拟南芥的种子萌发率受到抑制，并且在渗透胁迫条件下的萌发率和野生型比更低，且根系发育和气孔关闭也受到了极大的抑制。同时，VIGS干涉的棉花植株在干旱胁迫条件下，植株萎蔫现象没有对照植株的明显，由此表明GhTULP34在植物响应非生物逆境胁迫时起到负调控作用。因此，在培育黄萎病菌抗性的转基因棉花中可以利用所述蛋白或基因的功能。
基于上述验证结果，在一些优选地实施方式中，本发明还发现通过抑制GhTULP34蛋白的表达，以增强植物抗非生物逆境胁迫的能力，为培育抗非生物逆境胁迫的植物新品种提供了宝贵的基因资源。
根据本发明的第二个方面，提供了GhTULP34蛋白的编码基因或含有所述编码基因的生物材料在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用；
所述GhTULP34蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
所述GhTULP34蛋白的编码基因具有如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。
其中，所述“具有”指的是所述GhTULP34蛋白的编码基因核苷酸序列可以是只如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，也可以由SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列和其他核苷酸序列组成，例如编码用于蛋白纯化的标签、荧光蛋标记物和DNA的结合位点等功能单元的核苷酸序列，或者编码对基因转录和表达具有调节作用的元件，包括但不限于启动子、强启动子、增强子或转录因子结合位点等；所述“具有”还可以指如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列在GhTULP34蛋白的编码基因中是不连续的，但是可以产生如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列的cDNA。并且，本领域技术人员应该理解，在已知GhTULP34蛋白的氨基酸序列的情况下，根据密码子的简并性，可以获得不同的编码基因的核苷酸序列，上述编码与GhTULP34蛋白具有相同功能蛋白的基因均在本发明的保护范围内。
在一些优选地实施方式中，本发明还发现通过抑制GhTULP34蛋白的编码基因的表达，能够增强植物抗非生物逆境胁迫的能力，为培育抗非生物逆境胁迫的植物新品种提供了宝贵的基因资源。
作为优选，所述生物材料包括基因表达盒、表达载体或宿主细胞。
在一些优选的实施方式中，所述植物包括棉花和/或拟南芥。
根据本发明的第三个方面，本发明还提供了一种调控植物抗非生物逆境胁迫的方法，包括抑制GhTULP34蛋白的编码基因在植物内的表达；
所述GhTULP34蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
所述GhTULP34蛋白的编码基因具有如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。
可以理解的是，由于本发明通过研究已经发现GhTULP34蛋白能与植物抗非生物逆境胁迫的能力是负调控关系，因此抑制植物中GhTULP34蛋白能够起到调控植物抗非生物逆境胁迫的目的。
在一些优选的实施方式中，将GhTULP34蛋白的编码基因的沉默片段构建至表达载体上，然后用得到的重组表达载体转化农杆菌，并用转化的农杆菌渗透至植物子叶中，实现GhTULP34蛋白的编码基因的抑制。
通过转基因的方式实现GhTULP34蛋白的编码基因的抑制，工艺简单易行，周期短，调控效率高。
可选地，所述GhTULP34蛋白的编码基因的沉默片段具有如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列，该序列的沉默片段对GhTULP34蛋白的编码基因的干扰作用明显，通过导入该沉默片段能够显著抑制目的基因的表达。
优选地，所述表达载体包括pCLCrVA。
作为优选，所述植物包括棉花和/或拟南芥。
下面通过实施例对本发明作进一步说明。如无特别说明，实施例中的材料为根据现有方法制备而得，或直接从市场上购得。
实验材料：
本实验选取的棉花材料为中棉所36和TM-1，种植于中国农业科学院棉花研究所棉花生物学国家重点实验室试验田(安阳白璧)，管理措施为正常大田管理。拟南芥为野生型(Colombia-0)均由本课题繁殖与保存。
实验试剂与耗材：
酶及试剂盒：
GXL DNA Polymerase高保真酶、荧光定量试剂盒、RNA反转录试剂盒、胶回收试剂盒、PCR产物纯化试剂盒均购自宝生物工程大连有限公司；
Ultra One Step Cloning Kit试剂盒购自Vazyme公司；质粒少量提取试剂盒购自Magen公司；限制性内切酶购自NEB公司；DNA Marker、植物总RNA提取试剂盒购自TIANGEN公司。
其他药品：琼脂糖为西班牙原装产品，蛋白胨、酵母提取物、氯仿、异戊醇、乙醇、异丙醇、氯化钠等为国产分析纯，氨苄青霉素等购自宝生物工程大连有限公司，大肠杆菌感受态细胞购自北京天根生化科技公司。
培养基：LB液体培养基：胰蛋白胨(Tryptone)10g/L、酵母提取物(Yeast extract)5g/L、氯化钠(NaCl)10g/L；LB固体培养基：胰蛋白胨(Tryptone)10g/L、酵母提取物(Yeastextract)5g/L、氯化钠(NaCl)10g/L、琼脂粉15g/L，定容至1L；
LB选择培养基：在LB铺平板前，待培养基高压灭菌冷却至55度时加入相应浓度抗生素，摇匀后铺平板。
主要仪器：PCR扩增仪(BIO-RAD)，高速离心机(Hettich MIKRO200R)、电泳设备(BIO-RAD)、凝胶成像***(BIO-RAD)、荧光定量PCR仪(ABI7500)、电热恒温培养箱(上海森信)、恒温培养振荡器(上海智城)、人工气候室。
实施例1：棉花GhTULP34的生物信息学分析
从CottonFGD网站上获得GhTULP34基因的CDS序列，设计引物，从中棉所36中的cDNA混合样品中进行克隆。克隆过程如下：
取中棉所36不同组织混合样品，迅速放入液氮中冷冻，在液氮中研磨，并保存于-80℃冰箱备用；植物总RNA提取：RNA的提取采用TIANGEN公司RNA提取试剂盒进行；参照Toyobo的反转录试剂盒FSQ-201得说明书进行cDNA的合成。克隆得到基因GhTULP34的开放阅读框为1218bp，编码405个氨基酸，蛋白的相对分子量为45.398kDa，等电点为9.569。
根据TaKaRa
GXL DNA Polymerase高保真酶说明书，PCR反应体系如下：
PCR扩增程序为：98℃3min；98℃10s；56℃30s；68℃1min，35个循环；68℃10min。引物序列如下：
GhTULP34-F：ATGTCGTTTAAGAGCATTATCCAGGACA(SEQ ID No.4)；
GhTULP34-R：ACTCACAAGCGATCTTAGTATCGAAG(SEQ ID No.5)。
随后对目的片段使用胶回收试剂盒进行切胶回收；将胶回收的产物根据
Ultra One Step Cloning Kit试剂盒进行连接T载体构建和转化大肠杆菌；37℃过夜培养从氨苄抗性LB培养基上挑取单克隆后37℃摇菌培养；菌液PCR验证，挑取阳性克隆样品，送样至生工生物生物科技有限公司测序，测序正确的菌液中加入60％的甘油，-70℃保存。
用结构域预测网站SMART(http://smart.embl heidelberg.de/)预测GhTULP34基因包含有两个结构域(F-box和Tub)，对其功能进行研究。
从TM-1的转录组水平上发现，在种子萌发过程中，GhTULP34的表达逐渐下降(图1)。通过qRT-PCR重新测定CCRI36种子萌发过程中GhTULP34的表达水平，结果表明，GhTULP34在CCRI36中的表达模式与TM-1的表达模式一致(图1)。具体qRT-PCR过程如下：
将提取的中棉所36混合样品的反转录产物cDNA溶液稀释6倍作为PCR反应模板并进行荧光定量。荧光定量引物如下：
qrtGhTULP34-F：GAGGTGTTGCTCCCACTCAGAC(SEQ ID No.6)；
qrtGhTULP34-R：ATGCCACCTCGGTGACTTGTTC(SEQ ID No.7)。
PCR反应体系：
PCR反应程序：
实施例2：GhTULP34降低拟南芥种子萌发率和对NaCl的耐受性
将实施例1克隆得到的GhTULP34的CDS进行过表达载体的构建。
质粒提取步骤参照全式金的EasyPure@Plasmid MiniPrep Kit并作稍微改进。
1)取已经扩摇好的5mL大肠杆菌，10000×g离心1min，倒掉上清液。
2)加入250μL溶液RB(使用前将RNaseA加入RB中，2-8℃保存)，悬浮振荡混匀。
3)加入250μL溶液LB，轻柔地上下颠倒5次，使菌体完全裂解(5分钟以内)。
4)加入350μL溶液NB，轻柔地上下颠倒5次，当完全形成沉淀后，在室温条件下放置2min。
5)12000×g离心5min，仅将上清液吸到离心柱。12000×g快离1min，弃废液。
6)加入650μL溶液WB(已加80ml无水酒精并混匀)，12000×g快离1分钟，弃废液。
7)重复步骤6)。
8)12000×g离心2min，然后室温静置30min。
9)将离心柱放到干净的EP管中，向离心柱的中央滴入已被预热的ddH2O(pH>7.0)30μL，65℃室温条件下放置15min。
10)10000×g离心2min，洗脱质粒，放于-20℃冰箱保存。
过表达载体的构建：
过表达载体的构建：提取的pBI121双元载体用BamHI和SacI进行双酶切，使用过表达GhTULP34基因带接头的引物从测序正确的T载上进行克隆。将酶切和克隆基因的产物使用EasyPure@Quick Gel Extraction Kit进行切胶回收，具体步骤如下：
1)将目的DNA从琼脂糖凝胶中进行切取，转移至离心管中并称重，按照100mg凝胶等于100μL计算。
2)向EP管中加入GSB(凝胶体积的3倍)，在55℃水浴锅中，每间断2分钟颠倒混合一次。
3)待已完全融化的凝胶溶液温度降到与室内温度一样时，转移至离心柱后并室温放置1min，离心机10000×g快离1min，倒掉废液。
4)离心柱中加入WB溶液650μL，离心机10000×g快离1min，倒掉废液。
5)离心机10000×g快离2min。
6)将离心柱转移到另一个离心管中，打开离心柱盖并静置15min，向离心柱的中央滴加已经预热的ddH2O(pH>7.0)30μL，室温条件下放置15min。
7)10000×g离心2min，将所得的胶回收产物放在-20℃冰箱保存。
使用
II One Step Cloning Kit将回收的酶切和PCR产物进行无缝克隆连接，体系如下：
使用移液枪轻轻混匀后，PCR仪37℃反应30min，降至4℃后转移至冰上。
然后将重组产物进行大肠杆菌转化，具体步骤如下：
1)在冰上解冻DH5α克隆感受态细胞。
2)将所得的所有重组产物全部加入到从冰箱中取出的半融化状态的感受态细胞中，手指轻轻弹动离心管壁，于冰上放置30min。
3)在42℃水浴锅中静置45sec，随后放在冰上2min。
4)加入500μL空LB液体培养基(1g蛋白胨、0.5g酵母粉和1g NaCl至100mL ddH2O中)，200rpm摇床37℃摇菌45min。
5)将所有的菌液用灭过菌的黄枪头在已经37℃预热的含有卡那霉素抗性的固体LB(液体LB另加15g/L Agar)平板上轻轻涂匀，晾干。
6)37℃培养箱中倒置过夜培养。
7)第二天用白枪头挑选长势良好的单斑至300μL含有相应抗性的LB培养液中，37℃摇床摇5h。
8)用康为世纪公司的酶进行PCR鉴定阳性单克隆，上游使用35S通用引物，下游为目的基因下游引物，具体PCR程序参照说明书。
9)凝胶电泳结果有条带的单克隆送到生工生物技术有限公司测序。将35:GhTULP34菌液保存在-80℃冰箱的甘油中。
转化农杆菌：将提取好的35:GhTULP34载体质粒利用冻融法转化根癌农杆菌GV3101感受态细胞，具体转化过程如下：
1)将500ng质粒加入到GV3101感受态细胞中，并手指轻弹EP管壁，然后分别在冰上、液氮、37℃水浴和冰上中各5min；
2)加入700μL空的LB培养液，28℃摇床2.5h；
3)将100μL菌液用黄枪头在同时含有卡那霉素(50mg/L)和利福平(50mg/L)的LB平板上涂匀，28℃培养箱倒置2天；
4)将菌落PCR得到的阳性克隆转移至含有相应抗性的50mL LB培养液中，于28℃摇床。
拟南芥的遗传转化
1、拟南芥的种植，具体步骤如下：
1)取适量的野生型拟南芥种子放在1.5mL的离心管中；
2)向离心管中加入1mL的75％酒精，上下颠倒摇匀消毒2min，顺势离心去掉废液，重复3次；
3)向离心管中加入1mL的无水乙醇，上下颠倒摇匀消毒2min，顺势离心去掉废液，重复3次；
4)向离心管中加入1mL的无菌水，上下颠倒摇匀清洗，顺势离心去掉废液，重复3次；
5)加入少量无菌水，用枪头吹打置于灭菌的滤纸上于超净工作台中吹干；
6)将吹干的拟南芥种子均匀铺在1/2MS固体培养基上(0.22g 1/2 Murashige&Skoog Medium，3g蔗糖，0.8g Agar powder，121℃灭菌15min)，封口膜封口，置于4℃冰箱黑暗条件下春化2天；
7)将春化后的平板转移至拟南芥培养室中继续培养，温度为22℃，光周期为16小时光照/8小时黑暗；
8)两周后挑取长势良好的幼苗移栽至培养土中(蛭石：营养土＝1：1)置于温度为22℃，光周期为16小时光照/8小时黑暗的拟南芥培养室中继续培养；
9)待拟南芥植株长出主茎后，将主茎剪掉以长出更多的侧枝。
2、提取35S:GhTULP34载体质粒，提取好的质粒暗如下步骤转化农杆菌：
1)将500ng质粒加入到农杆菌GV3101感受态细胞中轻轻弹壁混匀，冰浴5min，液氮5min，37℃水浴5min，冰浴5min；
2)加入700μL不含抗生素的LB液体培养基，28℃培养箱振荡培养2.5h；
3)吸取100μL菌液均匀涂布于同时含有卡那霉素(50mg/L)和利福平(50mg/L)抗生素的LB平板上，28℃培养箱倒置培养2天；
4)菌落PCR鉴定阳性克隆，阳性单克隆接种至含有卡那霉素(50mg/L)和利福平(50mg/L)抗生素的50mL液体LB培养基中，于28℃摇床。
3、拟南芥侵染
1)待农杆菌活化至OD600＝1.2左右时，将菌液转移至50mL离心管中，4000rpm室温离心5min收集菌体；
2)将收集到菌体用渗透液(5％蔗糖和终浓度为0.02％的SilwettL-77)重悬。以渗透液为对照，将OD600调至0.8左右；
3)悬浮菌液倒入直径为15cm的玻璃皿中，将已经剪掉花和果荚的拟南芥花序浸没于悬浮菌液中1min，尽量挤出花絮中的空气。
4)将侵染后的拟南芥置于暗处过夜培养，第二天转移至光下继续培养。
5)成熟后收获T0代种子，消毒后均匀的铺在含有50mg/L卡纳霉素的1/2MS培养基上，待长至两周后挑取长势良好的幼苗转移至培养土中于培养室继续培养；
6)待植株正常生长半个月后提取叶片DNA进行PCR阳性植株检测，收获T1代种子继续后代的阳性鉴定，直至筛到T3代种子纯合。
T3代株系做qRT PCR检测，荧光定量验证的过程参照实施例1。
将获得的转基因阳性株进行检测，所用引物如下：
35S：GACGCACAATCCCACTATCC(SEQ ID No.8)；
jGhTULP34oe-R：TGCCCAACAACTCTGCTTGA(SEQ ID No.9)。
转基因植株检测反应体系：
PCR反应程序：
将同时收获在相同的条件下生长的WT和转基因拟南芥种子。参照上述方法将WT和转基因植株种子播种在相同的MS(0和150mM NaCl)板上。在4℃黑暗条件下春化2天，然后转移至22℃、16小时光照和8小时黑暗条件下正常培养。每个实验设立三个生物重复，每个重复至少处理了三个植株。在正常条件下，转基因株系的发芽率明显低于野生型(图1)。野生型和转基因植物萌发后的植物结构和生长没有显着差异。在NaCl处理下，WT和转基因系的种子萌发均受到抑制，而转基因系的种子萌发明显更多(图1)。在发芽的种子中，转基因植株的发芽率相对较慢，幼苗生长较差。
实施例3：在甘露醇条件下GhTULP34降低拟南芥根系伸长和气孔闭合率
如实施例2所述，对转基因阳性拟南芥和WT种子进行种植，待长至两片真叶时，挑选长势相同的转基因阳性拟南芥和WT苗转移至含有300mM甘露醇的MS培养基上，并竖直培养。具体培养基配制、拟南芥培养等过程操作实施例2所述。将平板垂直放置培养两周后测定转基因阳性拟南芥和WT植株的根长(图2)。结果表明在非胁迫条件下，转基因和WT植株的生长势相同，根长相似。甘露醇胁迫处理下，转基因株系和WT根长都变短，但对转基因株系的抑制作用更明显(图2)。
如实施例2所述，将转基因阳性拟南芥和WT种子进行正常种植，待长至两片真叶时将一些WT和转基因植株具有相同生长势的幼苗移栽到营养土中正常培养1个月，用400mM甘露醇处理，在显微镜下观察气孔闭合情况。每个实验设立三个生物重复，每个重复至少处理了三个植株(图3)。
实施例4：GhTULP34转基因棉花响应干旱胁迫
挑选饱满的中棉所36种子种植在人工气候室中，光周期和温度条件为：光照16h，28℃；黑暗8h，22℃。待幼苗子叶展平，第一片真叶露出(约10天)后，进行VIGS菌液注射试验。
VIGS沉默载体的构建：将沉默载体pCLCrVA用SpeI和AscI两个酶进行双酶切，并将酶切产物进行胶回收。GhTULP34沉默片段从中棉所36根得cDNA里通过PCR进行扩增，所用引物为：
GhTLP19clcrv-F:CAAAATGGCATGCCTGCAGACTAGTTCACTCACAAGCGATCTTAGTATCG(SEQID No.10)；
GhTLP19clcrv-R:GAATTCACTAGACCTAGGGGCGCGCCAGGTCCAAGGAGAATGCACTGC(SEQID No.11)。
将克隆到得片段使用infusion方法构建入已酶切的pCLCrVA载体中，将测序正确的质粒转入农杆菌，并进行菌落PCR，条带正确的菌液甘油保存至80℃。
将载体CLCrV:GhTULP34、空载体CLCrV:00、CLCrVB转化入农杆菌LBA4404感受态。使用含有相应抗性的LB培养基扩摇，待菌液摇至橘黄色，离心弃上清。用重悬液(10mMMgCl2、10mM MES、200mM乙酰丁香酮)将活化的农杆菌的OD600调至1.5。将CLCrV:GhTULP34与CLCrVB、CLCrV:00与CLCrVB、CLCrV:GhPDS与CLCrVB按1:1比例混合，室温静置2小时，然后用1mL注射器渗透至CCRI36充分展开的棉花子叶中。过夜暗处理后，转移至25℃、16小时光/8小时暗光周期的温室中。当CLCrV:GhPDS植株表现出表型时，取样鉴定目的基因的沉默效率。随后如实施例2和3所诉进行PEG600模拟干旱处理。用清水处理对照。同时取处理和对照的叶片进行总RNA的提取并反转录，利用qRT-PCR方法进行叶片中黄萎病菌生物量的测定：
处理20天后，CLCrV:GhTULP34植株出现明显的叶片萎蔫现象，而对照植株表现出的这种现象更加严重(图4)。由此表明，沉默GhTULP34可以提高棉花对干旱的耐受性。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 中国农业科学院棉花研究所
<120> GhTULP34在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用及调控方法
<160> 11
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 405
<212> PRT
<213> 棉花
<400> 1
Met Ser Phe Lys Ser Ile Ile Gln Asp Met Lys Gly Glu Phe Gly Ser
1 5 10 15
Ile Ser Arg Lys Gly Phe Asp Val Lys Phe Gly Tyr Gly Met Arg Ser
20 25 30
Arg Ser His Arg Val Val Gln Asp Ser Ser Val Pro Val Asp Val Phe
35 40 45
Lys Gln Ser Cys Trp Ala Asn Met Pro Pro Glu Leu Leu Arg Asp Val
50 55 60
Leu Met Arg Ile Glu Ala Ser Glu Ser Thr Trp Pro Pro Arg Lys Asn
65 70 75 80
Val Val Val Cys Ala Gly Val Cys Arg Asn Trp Arg Glu Ile Met Lys
85 90 95
Glu Ile Val Lys Thr Pro Glu Ile Ser Cys Lys Leu Thr Phe Pro Ile
100 105 110
Ser Leu Lys Gln Pro Gly Pro Arg Asp Ser Leu Leu Gln Cys Tyr Ile
115 120 125
Lys Arg Asn Arg Ser Asn Gln Thr Tyr Tyr Leu Tyr Leu Gly Leu Asn
130 135 140
Gln Ala Ser Asn Asp Asp Gly Lys Phe Leu Leu Ala Ala Arg Lys Cys
145 150 155 160
Arg Arg Pro Thr Cys Thr Asp Tyr Ile Ile Ser Leu Asn Cys Asn Asp
165 170 175
Val Ser Lys Gly Ser Ser Thr Tyr Ile Gly Lys Leu Arg Ser Asn Phe
180 185 190
Leu Gly Thr Lys Phe Thr Val Tyr Asp Ala Gln Pro Pro Asn Ala Gly
195 200 205
Ala Lys Val Thr Lys Ser Cys Ser Thr Arg Leu Ile Asn Met Lys Gln
210 215 220
Val Ser Pro Arg Val Pro Ala Gly Asn Tyr Pro Val Ala His Ile Ser
225 230 235 240
Tyr Glu Leu Asn Val Leu Gly Ser Arg Gly Pro Arg Arg Met His Cys
245 250 255
Val Met Asp Ala Ile Pro Ala Ser Ser Ile Glu Pro Gly Gly Val Ala
260 265 270
Pro Thr Gln Thr Glu Phe Leu His Ser Asn Leu Asp Thr Phe Pro Ser
275 280 285
Leu Leu Phe Phe Arg Ser Lys Ser Thr Arg Ala Glu Ser Phe Gln Ser
290 295 300
Gly Pro Leu Ser Asp Gln Lys Asp Gly Met Leu Val Leu Arg Asn Lys
305 310 315 320
Ser Pro Arg Trp His Glu Gln Leu Gln Cys Trp Cys Leu Asn Phe Asn
325 330 335
Gly Arg Val Thr Val Ala Ser Val Lys Asn Phe Gln Leu Val Ala Ser
340 345 350
Pro Glu Asn Ala Ala Ala Gly Gln Glu His Glu Asn Val Ile Leu Gln
355 360 365
Phe Gly Lys Val Gly Lys Asp Val Phe Thr Met Asp Tyr Gln Tyr Pro
370 375 380
Ile Ser Ala Phe Gln Ala Phe Ala Ile Cys Leu Ser Ser Phe Asp Thr
385 390 395 400
Lys Ile Ala Cys Glu
405
<210> 2
<211> 1218
<212> DNA
<213> 棉花
<400> 2
atgtcgttta agagcattat ccaggacatg aagggagagt ttgggagtat atcgagaaaa 60
gggtttgacg tgaagtttgg gtatggcatg agatcgaggt cacatagggt agttcaggac 120
agctcagttc cagttgatgt gttcaagcag agttgttggg caaacatgcc gcctgagctt 180
ttgagggatg tgttgatgag aatagaggca tcagagagta cttggcctcc acgaaagaat 240
gtggttgttt gtgctggtgt atgtaggaat tggagagaga ttatgaagga aattgtgaaa 300
accccagaaa tttcttgcaa gttgacattc ccaatctcat tgaaacagcc tggtccaagg 360
gactccctcc ttcaatgtta cataaaacgt aaccgtagca accaaacata ttatctttac 420
cttggcttga atcaagcttc caacgatgat ggaaagttcc ttcttgctgc aaggaagtgc 480
cgccgtccta cctgcacaga ttatatcatc tcattaaatt gcaatgatgt gtcaaaagga 540
agcagtacct acattggaaa gttgagatcc aactttttgg ggaccaaatt cacagtctat 600
gatgcacaac ctccaaatgc tggagcaaaa gttactaaaa gttgctccac caggctaatt 660
aatatgaaac aagtttctcc tcgtgtccca gctggcaact atcctgtagc ccacatctct 720
tatgagttga atgtcctggg ttctagaggt ccaaggagaa tgcactgcgt catggatgcc 780
atcccagcct cttctattga acctggaggt gttgctccca ctcagactga attcctacac 840
agtaatctgg ataccttccc atcactgctg ttctttagat caaaatcaac ccgtgcagag 900
agtttccaat ctggaccttt gtctgaccag aaagatggaa tgctagtatt gaggaacaag 960
tcaccgaggt ggcatgaaca actccagtgc tggtgtctga acttcaatgg acgggtaaca 1020
gttgcatcag tcaaaaattt tcagctggtt gcatctcctg aaaatgcagc tgctggtcag 1080
gagcatgaga atgtcattct ccaattcggt aaagtgggga aggatgtatt cactatggat 1140
tatcagtatc caatctcagc ttttcaggca tttgctatat gccttagtag cttcgatact 1200
aagatcgctt gtgagtga 1218
<210> 3
<211> 469
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
aggtccaagg agaatgcact gcgtcatgga tgccatccca gcctcttcta ttgaacctgg 60
aggtgttgct cccactcaga ctgaattcct acacagtaat ctggatacct tcccatcact 120
gctgttcttt agatcaaaat caacccgtgc agagagtttc caatctggac ctttgtctga 180
ccagaaagat ggaatgctag tattgaggaa caagtcaccg aggtggcatg aacaactcca 240
gtgctggtgt ctgaacttca atggacgggt aacagttgca tcagtcaaaa attttcagct 300
ggttgcatct cctgaaaatg cagctgctgg tcaggagcat gagaatgtca ttctccaatt 360
cggtaaagtg gggaaggatg tattcactat ggattatcag tatccaatct cagcttttca 420
ggcatttgct atatgcctta gtagcttcga tactaagatc gcttgtgag 469
<210> 4
<211> 28
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 4
atgtcgttta agagcattat ccaggaca 28
<210> 5
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 5
actcacaagc gatcttagta tcgaag 26
<210> 6
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 6
gaggtgttgc tcccactcag ac 22
<210> 7
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 7
atgccacctc ggtgacttgt tc 22
<210> 8
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 8
gacgcacaat cccactatcc 20
<210> 9
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 9
tgcccaacaa ctctgcttga 20
<210> 10
<211> 50
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 10
caaaatggca tgcctgcaga ctagttcact cacaagcgat cttagtatcg 50
<210> 11
<211> 48
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 11
gaattcacta gacctagggg cgcgccaggt ccaaggagaa tgcactgc 48
Claims (10)
1.GhTULP34蛋白在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用；
所述GhTULP34蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
所述非生物逆境胁迫包括干旱胁迫和盐胁迫。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，抑制GhTULP34蛋白的表达，以增强植物抗非生物逆境胁迫的能力。
3.GhTULP34蛋白的编码基因或含有所述编码基因的生物材料在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用；
所述GhTULP34蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
所述GhTULP34蛋白的编码基因具有如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，抑制GhTULP34蛋白的编码基因的表达，以增强植物抗非生物逆境胁迫的能力。
5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于，所述生物材料包括基因表达盒、表达载体或宿主细胞。
6.根据权利要求1-5任一项所述的应用，其特征在于，所述植物包括棉花和/或拟南芥。
7.一种调控植物抗非生物逆境胁迫的方法，其特征在于，包括抑制GhTULP34蛋白的编码基因在植物内的表达；
所述GhTULP34蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
所述GhTULP34蛋白的编码基因具有如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，将GhTULP34蛋白的编码基因的沉默片段构建至表达载体上，然后用得到的重组表达载体转化农杆菌，并用转化的农杆菌渗透至植物子叶中，实现GhTULP34蛋白的编码基因的抑制。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述GhTULP34蛋白的编码基因的沉默片段具有如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列；
优选地，所述表达载体包括pCLCrVA。
10.根据权利要求7-9任一项所述的方法，其特征在于，所述植物包括棉花和/或拟南芥。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111023270.0A CN113621643A (zh) | 2021-09-01 | 2021-09-01 | GhTULP34在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用及调控方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111023270.0A CN113621643A (zh) | 2021-09-01 | 2021-09-01 | GhTULP34在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用及调控方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113621643A true CN113621643A (zh) | 2021-11-09 |
Family
ID=78388828
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111023270.0A Pending CN113621643A (zh) | 2021-09-01 | 2021-09-01 | GhTULP34在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用及调控方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113621643A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117660522A (zh) * | 2024-02-01 | 2024-03-08 | 河南大学三亚研究院 | 一种提高植物耐盐性的基因及应用 |
| CN117660523A (zh) * | 2024-02-02 | 2024-03-08 | 河南大学三亚研究院 | GhTSD7基因在提高植物干旱胁迫耐受性中的应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101857869A (zh) * | 2010-04-23 | 2010-10-13 | 南京农业大学 | 大豆TLP蛋白编码基因GmTLP1的抗病性基因工程应用 |
| US20150128305A1 (en) * | 2012-05-07 | 2015-05-07 | National Institute Of Plant Genome Research | POLYNUCLEOTIDE ENCODING CaTLP1 PROTEIN AND USES THEREOF |
-
2021
- 2021-09-01 CN CN202111023270.0A patent/CN113621643A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101857869A (zh) * | 2010-04-23 | 2010-10-13 | 南京农业大学 | 大豆TLP蛋白编码基因GmTLP1的抗病性基因工程应用 |
| US20150128305A1 (en) * | 2012-05-07 | 2015-05-07 | National Institute Of Plant Genome Research | POLYNUCLEOTIDE ENCODING CaTLP1 PROTEIN AND USES THEREOF |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| ZHANSHUAI LI ET AL: "GhTULP34, a member of tubby-like proteins, interacts with GhSKP1A to negatively regulate plant osmotic stress", 《GENOMICS》 * |
| 张燕等: "泛素化E3连接酶在植物抗非生物胁迫中功能的研究进展", 《上海交通大学学报(农业科学版)》 * |
| 无: "NCBI Reference Sequence: XM_041106042.1", 《NCBI》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117660522A (zh) * | 2024-02-01 | 2024-03-08 | 河南大学三亚研究院 | 一种提高植物耐盐性的基因及应用 |
| CN117660522B (zh) * | 2024-02-01 | 2024-04-16 | 河南大学三亚研究院 | 一种提高植物耐盐性的基因及应用 |
| CN117660523A (zh) * | 2024-02-02 | 2024-03-08 | 河南大学三亚研究院 | GhTSD7基因在提高植物干旱胁迫耐受性中的应用 |
| CN117660523B (zh) * | 2024-02-02 | 2024-04-16 | 河南大学三亚研究院 | GhTSD7基因在提高植物干旱胁迫耐受性中的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113621643A (zh) | GhTULP34在调控植物抗非生物逆境胁迫中的应用及调控方法 | |
| CN110592137B (zh) | 拟南芥at5g10290基因及其突变体在提高植物耐旱性的应用 | |
| CN111153976A (zh) | 一种水稻防御机制调控蛋白质及其在育种中的应用 | |
| CN111424037B (zh) | 一种春兰CgWRKY70基因及其应用 | |
| CN113444736A (zh) | GhbHLH122基因在调控植物开花中的应用 | |
| CN109096380B (zh) | OsBICs基因在调控植物株高、开花时间中的应用 | |
| CN115851823B (zh) | 一种春兰CgARF18基因及其应用 | |
| CN110564740A (zh) | 一种提高植物抗病性的基因AtPIP2；7及其应用 | |
| CN111454966B (zh) | 一种春兰CgWRKY4基因及其应用 | |
| CN116064568A (zh) | 紫花苜蓿MsASG166基因及在提高植物耐旱中的用途 | |
| CN110396125B (zh) | 拟南芥转录因子基因pif3在植物抗虫胁迫中的应用 | |
| CN108728447B (zh) | 一种花生抗逆相关基因及其应用 | |
| CN108866074B (zh) | 一种抗除草剂基因par3(g311e)的应用 | |
| CN111304222A (zh) | 一种春兰CgWRKY11基因及其应用 | |
| CN111304220A (zh) | 一种春兰CgWRKY3基因及其应用 | |
| CN110904106A (zh) | 春兰miR159b在增强植物冷敏感性中的应用 | |
| CN115927363B (zh) | 一种春兰CgARF8基因及其应用 | |
| CN111424039B (zh) | 一种春兰CgWRKY65基因及其应用 | |
| CN111424038B (zh) | 一种春兰CgWRKY40基因及其应用 | |
| CN111304221B (zh) | 一种春兰CgWRKY31基因及其应用 | |
| CN113278056B (zh) | 一种耐盐cin转录因子基因与应用 | |
| CN117305266B (zh) | 一种与水稻抗逆相关的基因OsBDG1及其编码蛋白的应用 | |
| CN111876430B (zh) | 光皮桦nfya2基因及其在提高植物对氮素吸收中的应用 | |
| CN110628785B (zh) | 野大豆耐盐基因GmSULTR23.1及其应用 | |
| CN113846105B (zh) | GhAIF3基因在调控植物表型中的应用及调控植物表型的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20211109 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |