CN113577823A - 葡聚糖凝胶色谱柱及脐血间充质干细胞外泌体的分离方法 - Google Patents
葡聚糖凝胶色谱柱及脐血间充质干细胞外泌体的分离方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113577823A CN113577823A CN202110845519.XA CN202110845519A CN113577823A CN 113577823 A CN113577823 A CN 113577823A CN 202110845519 A CN202110845519 A CN 202110845519A CN 113577823 A CN113577823 A CN 113577823A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- collecting
- tube
- sephadex
- shaped column
- stem cell
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 title claims abstract description 49
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 32
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 title claims abstract description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 claims abstract description 54
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 claims abstract description 54
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 claims abstract description 7
- 235000009161 Espostoa lanata Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- 240000001624 Espostoa lanata Species 0.000 claims abstract description 7
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 claims abstract 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 43
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 15
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 12
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 11
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 6
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 5
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 5
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 claims description 5
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 5
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 claims description 4
- 238000010266 Sephadex chromatography Methods 0.000 claims 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 3
- 230000005484 gravity Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
- B01D15/22—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to the construction of the column
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
- C12N5/0665—Blood-borne mesenchymal stem cells, e.g. from umbilical cord blood
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2509/00—Methods for the dissociation of cells, e.g. specific use of enzymes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种葡聚糖凝胶色谱柱及脐血间充质干细胞外泌体的分离方法,所述葡聚糖凝胶色谱柱包括U型柱管、脱脂棉球和收集管;所述U型柱管内部设置有葡聚糖凝胶,并且底部设置有收集口,所述收集口上设置有开关;所述脱脂棉球设置于所述收集口内;所述收集管位于所述收集口的下方。本发明葡聚糖凝胶色谱柱够快速分离得到外泌体,仅仅通过自身重力实现体积超过300ml的外泌体分离,无需真空抽离,操作简单,效率高,此外,该葡聚糖凝胶可以重复使用,降低了分离制备成本。
Description
技术领域
本发明涉及细胞外泌体分离制备技术领域,具体涉及一种葡聚糖凝胶色谱柱及脐血间充质干细胞外泌体的分离方法。
背景技术
目前脐血间充质干细胞外泌体的制备技术基本上都是利用超速离心,从细胞培养液中分离沉淀而获得,这个过程中导致许多分子量接近的杂质也随之沉淀,得到的是一种带有外泌体的混合物。这些方法得到的外泌体纯度都不是很高,运用上也会受到限制。而使用色谱柱凝胶过滤法进行过滤则可以获得更为纯净的外泌体,由于外泌体是一个大小约几十纳米的囊状小体,大于一般蛋白质,利用不同截留相对分子质量(MWCO)的凝胶柱对样品进行分子大小的选择性分离,便可获得外泌体。凝胶柱过滤法简单高效,且不影响外泌体的生物活性,是提取细胞外泌体的一种新方法。外泌体的粒径较蛋白质和脂类物质大,能够快速通过分离柱;而蛋白质和脂类物质与填料间的相互作用力较大,通过色谱柱的速度较慢,从而实现外泌体与杂质的高效分离,以得到纯度较高的外泌体。该技术操作简单、使用方便、富集效率高。然而,常规色谱柱对于上样量有严格的要求,一般在0.5mL以内,否则会降低外泌体的分离效率。此外,由于蛋白质和脂类的严重污染,该色谱柱无法多次重复使用(<3次),限制了该产品的应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种葡聚糖凝胶色谱柱及脐血间充质干细胞外泌体的分离方法,该葡聚糖凝胶色谱柱能够快速分离得到外泌体,效率高,而且该葡聚糖凝胶可以重复使用,降低了分离制备成本。
为了实现本发明的上述目的,特采用以下技术方案:
本发明第一方面提供一种葡聚糖凝胶色谱柱,所述葡聚糖凝胶色谱柱包括U型柱管、脱脂棉球和收集管;
所述U型柱管内部设置有葡聚糖凝胶,并且底部设置有收集口,所述收集口上设置有开关;
所述脱脂棉球设置于所述收集口内;
所述收集管位于所述收集口的下方。
优选地,所述葡聚糖凝胶色谱柱还包括固定支架、环套、连杆和固定螺丝;
所述环套设置在所述U型柱管外壁上;
所述连杆一端与所述环套连接,另一端通过所述固定螺丝固定在所述固定支架上。
优选地,所述葡聚糖凝胶占所述U型柱管体积的0.15~0.3倍,所述U型柱管的体积为800~1200ml。
本发明第二方面提供一种采用上述葡聚糖凝胶色谱柱分离脐血间充质干细胞外泌体的方法,所述方法包括如下步骤:
(a)将葡聚糖凝胶进行溶胀,再置于所述U型柱管中;
(b)在所述U型柱管中添加灭菌去离子水进行搅拌,然后,打开所述收集口开关进行排液,重复2~4次;
(c)将脐血干细胞培养液进行高速离心,收集上清液;
(d)将所述上清液缓慢加入至所述U型柱管中,待液面平衡后,打开所述收集口开关,采用所述收集管收集排出液,待液面降至距葡聚糖凝胶表面0~0.5cm时,关掉所述收集口开关,将生理盐水缓慢加入至所述U型柱管中,待液面平衡,再打开所述收集口开关,继续收集排出液,其中,排出液按照每管5~7ml进行收集;
(e)采用全波长紫外分光光度仪对每管排出液进行测定,并进行高倍显微镜观察,根据测定和观察结果确定含有脐血间充质干细胞外泌体的收集管;
(f)按照收集时间将含有脐血间充质干细胞外泌体的收集管的第一管和最后一管进行去除,再将中间的收集管进行合并,即得脐血间充质干细胞外泌体。
优选地,所述步骤(c)中,高速离心的离心力rcf不低于12000g。
优选地,所述步骤(d)中,上清液的添加体积为所述葡聚糖凝胶体积的0.3~0.5倍。
优选地,所述步骤(e)中还包括标记含有脐血间充质干细胞外泌体的收集管的收集时间和顺序,作为后续处理的参照。
优选地,所述步骤(a)中,溶胀包括:
将葡聚糖凝胶置于去离子水中加热煮沸3~5h。
优选地,所述方法还包括:
葡聚糖凝胶使用3~4次后,将葡聚糖凝胶置于去离子水进行高温煮沸4~5h,然后,再继续装柱使用。
与现有技术相比,本发明的有益效果至少包括:
本发明葡聚糖凝胶色谱柱够快速分离得到外泌体,仅仅通过自身重力实现体积超过300ml的外泌体分离,无需真空抽离,操作简单,效率高,此外,该葡聚糖凝胶可以重复使用,降低了分离制备成本。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。在所有附图中,类似的元件或部分一般由类似的附图标记标识。附图中,各元件或部分并不一定按照实际的比例绘制。
图1为本发明实施例提供的葡聚糖凝胶色谱柱的结构示意图;
附图中,
1-U型柱管;2-脱脂棉球;3-收集管;4-葡聚糖凝胶;5-收集口;6-开关;7-固定支架;8-环套;9-连杆;10-固定螺丝。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明技术方案的实施例进行详细的描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案,因此只作为示例,而不能以此来限制本发明的保护范围。
需要注意的是,除非另有说明,本申请使用的技术术语或者科学术语应当为本发明所属领域技术人员所理解的通常意义。
实施例1
本实施例为一种葡聚糖凝胶色谱柱,如图1所示,该葡聚糖凝胶色谱柱包括U型柱管1、脱脂棉球2、收集管3、固定支架7、环套8、连杆9和固定螺丝10;
U型柱管1内部设置有葡聚糖凝胶4,并且底部设置有收集口5,收集口5上设置有开关6;
脱脂棉球2设置于收集口5内;
收集管3位于收集口5的下方;
环套8设置在U型柱管1外壁上;
连杆9一端与环套8连接,另一端通过固定螺丝10固定在固定支架7上。
本发明葡聚糖凝胶色谱柱够快速分离得到外泌体,仅仅通过自身重力实现体积超过300ml的外泌体分离,无需真空抽离,操作简单,效率高,此外,该葡聚糖凝胶可以重复使用,降低了分离制备成本。
在本发明中,对U型柱管1中葡聚糖凝胶4的添加量不作严格限制,本领域技术人员可以根据实际需要进行添加;例如,在一实施方式中,葡聚糖凝胶4的添加量占U型柱管1体积倍数为0.15~0.3中的任一数值;具体可以为0.15、0.2或0.3。
实施例2
本实施例为一种采用实施例1中葡聚糖凝胶色谱柱分离脐血间充质干细胞外泌体的方法,该方法包括如下步骤:
(a)将葡聚糖凝胶置于去离子水中加热煮沸5h,再置于U型柱管中;
(b)在U型柱管中添加灭菌去离子水进行搅拌,然后,打开收集口开关进行排液,重复上述操作2次;
(c)将脐血干细胞培养液进行高速离心,收集上清液,其中,高速离心的离心力rcf为12000g;能够有效去除液体中颗粒性物质以及死细胞,减少杂质污染;
(d)将所述上清液缓慢加入至所述U型柱管中,待液面平衡后,打开所述收集口开关,采用所述收集管收集排出液,待液面降至距葡聚糖凝胶表面0.2cm时,关掉所述收集口开关,将生理盐水缓慢加入至所述U型柱管中,待液面平衡,再打开所述收集口开关,继续收集排出液,其中,上清液的添加体积为所述葡聚糖凝胶体积的0.5倍,排出液按照每管7ml进行收集;
(e)采用全波长紫外分光光度仪对每管排出液进行测定,并进行高倍显微镜观察,根据测定和观察结果确定含有脐血间充质干细胞外泌体的收集管,并标记收集管的收集时间和顺序,作为后续处理的参照;
(f)按照收集时间将含有脐血间充质干细胞外泌体的收集管的第一管和最后一管进行去除,再将中间的收集管进行合并,即得脐血间充质干细胞外泌体。
实施例3
本实施例为一种采用实施例1中葡聚糖凝胶色谱柱分离脐血间充质干细胞外泌体的方法,该方法包括如下步骤:
(a)将葡聚糖凝胶置于去离子水中加热煮沸3h,再置于U型柱管中;
(b)在U型柱管中添加灭菌去离子水进行搅拌,然后,打开收集口开关进行排液,重复上述操作4次;
(c)将脐血干细胞培养液进行高速离心,收集上清液,其中,高速离心的离心力rcf为12000g;能够有效去除液体中颗粒性物质以及死细胞,减少杂质污染;
(d)将所述上清液缓慢加入至所述U型柱管中,待液面平衡后,打开所述收集口开关,采用所述收集管收集排出液,待液面降至距葡聚糖凝胶表面0.5cm时,关掉所述收集口开关,将生理盐水缓慢加入至所述U型柱管中,待液面平衡,再打开所述收集口开关,继续收集排出液,其中,上清液的添加体积为所述葡聚糖凝胶体积的0.3倍,排出液按照每管5ml进行收集;
(e)采用全波长紫外分光光度仪对每管排出液进行测定,并进行高倍显微镜观察,根据测定和观察结果确定含有脐血间充质干细胞外泌体的收集管,并标记收集管的收集时间和顺序,作为后续处理的参照;
(f)按照收集时间将含有脐血间充质干细胞外泌体的收集管的第一管和最后一管进行去除,再将中间的收集管进行合并,即得脐血间充质干细胞外泌体。
实施例4
本实施例为一种采用实施例1中葡聚糖凝胶色谱柱分离脐血间充质干细胞外泌体的方法,该方法包括如下步骤:
(a)将葡聚糖凝胶置于去离子水中加热煮沸4h,再置于U型柱管中;
(b)在U型柱管中添加灭菌去离子水进行搅拌,然后,打开收集口开关进行排液,重复上述操作3次;
(c)将脐血干细胞培养液进行高速离心,收集上清液,其中,高速离心的离心力rcf为12000g;能够有效去除液体中颗粒性物质以及死细胞,减少杂质污染;
(d)将所述上清液缓慢加入至所述U型柱管中,待液面平衡后,打开所述收集口开关,采用所述收集管收集排出液,待液面降至距葡聚糖凝胶表面0.4cm时,关掉所述收集口开关,将生理盐水缓慢加入至所述U型柱管中,待液面平衡,再打开所述收集口开关,继续收集排出液,其中,上清液的添加体积为所述葡聚糖凝胶体积的0.4倍,排出液按照每管6ml进行收集;
(e)采用全波长紫外分光光度仪对每管排出液进行测定,并进行高倍显微镜观察,根据测定和观察结果确定含有脐血间充质干细胞外泌体的收集管,并标记收集管的收集时间和顺序,作为后续处理的参照;
(f)按照收集时间将含有脐血间充质干细胞外泌体的收集管的第一管和最后一管进行去除,再将中间的收集管进行合并,即得脐血间充质干细胞外泌体。
本发明上述分离方法得到脐血间充质干细胞外泌体具有更加有的纯度,且能够实现超过300ml的外泌体的分离,分离效率较高,而且操作简单,易于生产。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围,其均应涵盖在本发明的权利要求和说明书的范围当中。
Claims (9)
1.一种葡聚糖凝胶色谱柱,其特征在于,包括U型柱管、脱脂棉球和收集管;
所述U型柱管内部设置有葡聚糖凝胶,并且底部设置有收集口,所述收集口上设置有开关;
所述脱脂棉球设置于所述收集口内;
所述收集管位于所述收集口的下方。
2.根据权利要求1所述的葡聚糖凝胶色谱柱,其特征在于,所述葡聚糖凝胶色谱柱还包括固定支架、环套、连杆和固定螺丝;
所述环套设置在所述U型柱管外壁上;
所述连杆一端与所述环套连接,另一端通过所述固定螺丝固定在所述固定支架上。
3.根据权利要求1或2所述的葡聚糖凝胶色谱柱,其特征在于,所述葡聚糖凝胶占所述U型柱管体积的0.15~0.3倍,所述U型柱管的体积为800~1200ml。
4.一种采用权利要求1~3任一所述的葡聚糖凝胶色谱柱分离脐血间充质干细胞外泌体的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(a)将葡聚糖凝胶进行溶胀,再置于所述U型柱管中;
(b)在所述U型柱管中添加灭菌去离子水进行搅拌,然后,打开所述收集口开关进行排液,重复2~4次;
(c)将脐血干细胞培养液进行高速离心,收集上清液;
(d)将所述上清液缓慢加入至所述U型柱管中,待液面平衡后,打开所述收集口开关,采用所述收集管收集排出液,待液面降至距葡聚糖凝胶表面0~0.5cm时,关掉所述收集口开关,将生理盐水缓慢加入至所述U型柱管中,待液面平衡,再打开所述收集口开关,继续收集排出液,其中,排出液按照每管5~7ml进行收集;
(e)采用全波长紫外分光光度仪对每管排出液进行测定,并进行高倍显微镜观察,根据测定和观察结果确定含有脐血间充质干细胞外泌体的收集管;
(f)按照收集时间将含有脐血间充质干细胞外泌体的收集管的第一管和最后一管进行去除,再将中间的收集管进行合并,即得脐血间充质干细胞外泌体。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述步骤(c)中,高速离心的离心力rcf不低于12000g。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述步骤(d)中,上清液的添加体积为所述葡聚糖凝胶体积的0.3~0.5倍。
7.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述步骤(e)中还包括标记含有脐血间充质干细胞外泌体的收集管的收集时间和顺序,作为后续处理的参照。
8.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述步骤(a)中,溶胀包括:
将葡聚糖凝胶置于去离子水中加热煮沸3~5h。
9.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述方法还包括:
葡聚糖凝胶使用3~4次后,将葡聚糖凝胶置于去离子水进行高温煮沸4~5h,然后,再继续装柱使用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110845519.XA CN113577823A (zh) | 2021-07-26 | 2021-07-26 | 葡聚糖凝胶色谱柱及脐血间充质干细胞外泌体的分离方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110845519.XA CN113577823A (zh) | 2021-07-26 | 2021-07-26 | 葡聚糖凝胶色谱柱及脐血间充质干细胞外泌体的分离方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN113577823A true CN113577823A (zh) | 2021-11-02 |
Family
ID=78250221
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202110845519.XA Pending CN113577823A (zh) | 2021-07-26 | 2021-07-26 | 葡聚糖凝胶色谱柱及脐血间充质干细胞外泌体的分离方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN113577823A (zh) |
Citations (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1163902A (zh) * | 1996-04-30 | 1997-11-05 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种分离氨基酸和多肽的介质及其分离方法 |
CN102435756A (zh) * | 2011-09-21 | 2012-05-02 | 长春博迅生物技术有限责任公司 | ABO、RhD血型定型检测卡的制备方法 |
CN202638050U (zh) * | 2012-05-25 | 2013-01-02 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种分离原油及岩石中可溶有机物族组分的层析柱 |
CN104692358A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-06-10 | 中国科学院物理研究所 | 碳纳米管分离装置及方法 |
CN204723802U (zh) * | 2015-07-07 | 2015-10-28 | 贵州理工学院 | 微柱分离装置 |
CN205850419U (zh) * | 2016-07-22 | 2017-01-04 | 上海海洋大学 | 一种应用于固相萃取仪的气液分离装置 |
CN206089581U (zh) * | 2016-09-09 | 2017-04-12 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种重质油组分分离设备 |
CN106621461A (zh) * | 2016-12-13 | 2017-05-10 | 北京科技大学 | 一种基于层析原理的高效分离装置 |
CN207193407U (zh) * | 2017-09-12 | 2018-04-06 | 淄博山分分析仪器有限公司 | 带纯化装置的色谱用氢气发生器 |
CN108103017A (zh) * | 2018-02-28 | 2018-06-01 | 江苏大学 | 人脐带间质干细胞外泌体的分离纯化方法和人脐带间质干细胞外泌体的应用 |
KR20180126365A (ko) * | 2017-05-17 | 2018-11-27 | 한국과학기술원 | 생체시료로부터 엑소좀과 지질단백질의 분리 방법 |
CN109180485A (zh) * | 2018-09-30 | 2019-01-11 | 河南省商业科学研究所有限责任公司 | 一种分离绿原酸的方法 |
CN109628391A (zh) * | 2018-12-30 | 2019-04-16 | 深圳光彩生命工程技术有限公司 | 一种脐带间质干细胞外泌体分离方法 |
CN110499287A (zh) * | 2019-08-30 | 2019-11-26 | 博雅干细胞科技有限公司 | 简易制备胎盘间充质干细胞外泌体的方法 |
CN210815295U (zh) * | 2019-09-10 | 2020-06-23 | 湖南华腾医药有限公司 | 聚合物纯化装置 |
CN111420117A (zh) * | 2020-03-31 | 2020-07-17 | 陕西朗泰生物科技有限公司 | 一种用于皮肤创面修复的含干细胞外泌体的凝胶制备方法 |
CN112410292A (zh) * | 2020-11-19 | 2021-02-26 | 广州杜德生物科技有限公司 | 脐带间充质干细胞脂质囊泡体的制备方法及其在促进皮肤再生中的应用 |
CN112553149A (zh) * | 2019-09-25 | 2021-03-26 | 深圳光彩生命工程技术有限公司 | 一种外泌体的制备方法 |
CN112553151A (zh) * | 2019-09-26 | 2021-03-26 | 深圳光彩生命工程技术有限公司 | 一种人脐带间质干细胞外泌体的分离纯化方法 |
CN213609920U (zh) * | 2020-11-04 | 2021-07-06 | 合肥学院 | 一种洗脱持久性有机物氧化铝硅胶层析柱 |
-
2021
- 2021-07-26 CN CN202110845519.XA patent/CN113577823A/zh active Pending
Patent Citations (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1163902A (zh) * | 1996-04-30 | 1997-11-05 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种分离氨基酸和多肽的介质及其分离方法 |
CN102435756A (zh) * | 2011-09-21 | 2012-05-02 | 长春博迅生物技术有限责任公司 | ABO、RhD血型定型检测卡的制备方法 |
CN202638050U (zh) * | 2012-05-25 | 2013-01-02 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种分离原油及岩石中可溶有机物族组分的层析柱 |
CN104692358A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-06-10 | 中国科学院物理研究所 | 碳纳米管分离装置及方法 |
CN204723802U (zh) * | 2015-07-07 | 2015-10-28 | 贵州理工学院 | 微柱分离装置 |
CN205850419U (zh) * | 2016-07-22 | 2017-01-04 | 上海海洋大学 | 一种应用于固相萃取仪的气液分离装置 |
CN206089581U (zh) * | 2016-09-09 | 2017-04-12 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种重质油组分分离设备 |
CN106621461A (zh) * | 2016-12-13 | 2017-05-10 | 北京科技大学 | 一种基于层析原理的高效分离装置 |
KR20180126365A (ko) * | 2017-05-17 | 2018-11-27 | 한국과학기술원 | 생체시료로부터 엑소좀과 지질단백질의 분리 방법 |
CN207193407U (zh) * | 2017-09-12 | 2018-04-06 | 淄博山分分析仪器有限公司 | 带纯化装置的色谱用氢气发生器 |
CN108103017A (zh) * | 2018-02-28 | 2018-06-01 | 江苏大学 | 人脐带间质干细胞外泌体的分离纯化方法和人脐带间质干细胞外泌体的应用 |
CN109180485A (zh) * | 2018-09-30 | 2019-01-11 | 河南省商业科学研究所有限责任公司 | 一种分离绿原酸的方法 |
CN109628391A (zh) * | 2018-12-30 | 2019-04-16 | 深圳光彩生命工程技术有限公司 | 一种脐带间质干细胞外泌体分离方法 |
CN110499287A (zh) * | 2019-08-30 | 2019-11-26 | 博雅干细胞科技有限公司 | 简易制备胎盘间充质干细胞外泌体的方法 |
CN210815295U (zh) * | 2019-09-10 | 2020-06-23 | 湖南华腾医药有限公司 | 聚合物纯化装置 |
CN112553149A (zh) * | 2019-09-25 | 2021-03-26 | 深圳光彩生命工程技术有限公司 | 一种外泌体的制备方法 |
CN112553151A (zh) * | 2019-09-26 | 2021-03-26 | 深圳光彩生命工程技术有限公司 | 一种人脐带间质干细胞外泌体的分离纯化方法 |
CN111420117A (zh) * | 2020-03-31 | 2020-07-17 | 陕西朗泰生物科技有限公司 | 一种用于皮肤创面修复的含干细胞外泌体的凝胶制备方法 |
CN213609920U (zh) * | 2020-11-04 | 2021-07-06 | 合肥学院 | 一种洗脱持久性有机物氧化铝硅胶层析柱 |
CN112410292A (zh) * | 2020-11-19 | 2021-02-26 | 广州杜德生物科技有限公司 | 脐带间充质干细胞脂质囊泡体的制备方法及其在促进皮肤再生中的应用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
吴成军: ""生物技术实践"教学研讨(7) "血红蛋白的提取和分离"的实验分析及教学组织", 生物学通报, vol. 44, no. 4, pages 27 - 30 * |
徐建强: "禾谷镰孢菌β2-微管蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化", 中国农业科学, vol. 45, no. 6, pages 1084 - 1092 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Leif et al. | The distribution of buoyant density of human erythrocytes in bovine albumin solutions | |
EIK-NES | Determination of 17, 21-dihydroxy-20-ketosteroids in blood plasma | |
Girard | [75] Isolation of ribonucleic acids from mammalian cells and animal viruses | |
CN114540271B (zh) | 一种植物外泌体的纯化方法 | |
CN105111255A (zh) | 一种肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷的提取分离方法 | |
CN108299552A (zh) | 用于蛋白质组学研究的山羊乳乳脂肪球膜蛋白的提取方法 | |
CN115449505A (zh) | 一种分离外泌体的纯化方法及外泌体试剂盒 | |
CN113577823A (zh) | 葡聚糖凝胶色谱柱及脐血间充质干细胞外泌体的分离方法 | |
CN110540550A (zh) | 蚓激酶与粗制蚯蚓卵磷脂的联合制备工艺 | |
CN111961636B (zh) | 一种外泌体的提取试剂及其应用 | |
CN114397388B (zh) | 一种基于peg沉淀法与sec柱法相结合的尿液外泌体提取试剂盒及应用 | |
Hadjiolov et al. | Isolation and some characteristics of cell nuclei from brain cortex of adult cat | |
CN103642794A (zh) | 一种大量制备BCG-CpG-DNA的方法 | |
CN103059149B (zh) | 一种prp多糖提取方法 | |
Hudack et al. | Studies on Ehrlich ascites cell nuclei: I. Methods of isolation of nuclei | |
CN110606880B (zh) | 蚯蚓弹力蛋白与蚓激酶的联合制备工艺 | |
CN114317402A (zh) | 一种山羊乳外泌体的提取及鉴定方法 | |
CN113880963A (zh) | 一种桑黄多糖及其制备方法和应用 | |
JP5261732B2 (ja) | シアル酸含有オリゴ糖の製造方法 | |
CN109730975B (zh) | 一种维持载药红细胞生物活性同时提高其载药量的方法 | |
CN103333938A (zh) | 重组酿酒酵母表达的乙肝表面抗原及其生产方法、乙肝疫苗及其生产方法 | |
JP2023519371A (ja) | ヒト月経血から子宮内膜間葉系幹細胞を取得する方法 | |
CN101659939A (zh) | 单核细胞分离方法 | |
CN208554636U (zh) | 一种用于线虫的纯化浓缩柱 | |
CN116768985B (zh) | 一种有效纯化病毒样颗粒的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20211102 |