CN113527270B - 一种靶向单酰基甘油脂肪酶的protac分子的医药中间体、制备方法及应用 - Google Patents
一种靶向单酰基甘油脂肪酶的protac分子的医药中间体、制备方法及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子的医药中间体、制备方法及应用，涉及医药领域。其具有式I所示的结构：式I：其羟基端具有反应活性，具有连接到衔接物或其他E3泛素连接酶配体上的潜力，是一种即用型MAGL蛋白的PROTAC配体。本发明同时公开了一种靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子，其具有式XI所示的结构。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域，具体而言，涉及一种靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子的医药中间体、制备方法及应用。
背景技术
单酰甘油酯酶(Monoacylglycerol lipase,MAGL)是一种丝氨酸水解酶，不仅能在脂质代谢中将三酰甘油分解为游离脂肪酸和甘油，为机体供能，而且能够水解2-花生四烯酸甘油酯(2-AG)，调节体内***素***信号转导。2-花生四烯酸甘油酯是内源性***素***组成部分，而内源性***素与机体脑损伤保护，免疫应答，炎症反应等有关；最新的研究指出，内源性***素***在部分肿瘤中可以抑制癌细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，在肿瘤生长中影响肿瘤血管生成。
MAGL所属的丝氨酸水解酶所属的丝氨酸水解酶类在多种人体生理过程和疾病中起到关键作用，特别是在消化、凝血和补体***方面。由于MAGL所属的丝氨酸水解酶的重要研究价值，目前已发现大量的不同结构的丝氨酸水解酶抑制剂。而这些抑制剂一方面可作为潜在的治疗药物，另一方面可作为有价值的小分子探针来研究丝氨酸水解酶的功能。但是，尽管有多个先导结构被发现可以抑制丝氨酸水解酶，却依旧缺乏高活性、高选择性的抑制剂。目前没有针对MAGL的蛋白靶向降解类药物。
在过去的10年里，学术界、工业界一直在努力开发新型MAGL抑制剂，现已报道的小分子类MAGL抑制剂大约有20个，主要包括MAGL内源性底物2-AG的模拟类似物和各种从化合物库中筛选获得并改造的化合物。
尽管已经有多个MAGL抑制剂已经被报道，但是高活性、高选择性、具有成药性的MAGL抑制剂依旧却乏。
蛋白水解靶向嵌合体(proteolysis-targeting chimeras,PROTAC)是一种由两个不同功能的配体通过linker(衔接物)连接的化合物。其中一个配体用于靶向目的蛋白(POI)，而另一个配体特异性地募集E3连接酶。当PROTAC结合E3连接酶和目的蛋白时，可以形成三元复合物，通过募集E3连接酶，PROTAC使目的蛋白呈现出有利的空间位置以促进目的蛋白的泛素化，进而选择性地降低靶蛋白的水平。这种方法的优点是PROTAC可以循环使用，可以实现靶向蛋白质的多泛素化，最后通过蛋白酶降解靶蛋白，而这也是PROTAC分子与小分子MAGL抑制剂最大的不同。
JZL184(CAS No：1101854-58-3)是目前已有的一种MAGL的抑制剂。其主要成分的化学结构式为：
而目前，尚无报道JZL184可以用于制备PROTAC从而抑制MAGL酶活。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供一种靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子的医药中间体、制备方法及应用以解决上述技术问题。
发明人对JZL184进行结构改造为JZL184类似物，提供了一种JZL184类似物以期后续可以用于形成PROTAC的应用。发明人提供了一种JZL184类似物的制备方法，该方法简单易行。
本发明是这样实现的：
本发明提供了一种靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子的医药中间体，
式I：
R2＝H.OH
R3＝H.OH.OCH3.OEt.F.Cl.Br.I.OCF3.OAc.NO2.CH3.Et
优选地，所述医药中间体具有式Ⅹ所示的结构：
式Ⅹ：
已有研究表明靶向单酰基甘油脂肪酶(MAGL)蛋白表达的抑制具有多种疾病治疗的意义：
(1)MAGL与脂质代谢网络密切相关，MAGL可通过MAGL-FFA(游离脂肪酸)通路调节脂肪酸代谢网络，对多种代谢疾病有积极意义；
(2)体内研究表明，MAGL的抑制剂在小鼠炎症和神经性疼痛模型中发挥抑制***素Ⅰ型受体(CB1)的作用；
(3)2012年，在阿尔茨海默氏病小鼠模型中证实：抑制MAGL能够显著降低淀粉样神经病理，减少神经炎症和退化，改善突触和认知功能；
(4)另外一些研究发现MAGL抑制剂对非甾体抗炎药引起的胃出血模型和炎症性肠病模型起到良性作用；
(5)在多种疾病中，包括脑胶质瘤、肝癌、恶性黑色素瘤、乳腺癌及卵巢癌细胞中MAGL明显升高，游离脂肪酸(FFAs)水平上升。通过MAGL-FFA通路，恶性肿瘤细胞可以引起溶血磷脂酸(LPA)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、溶血磷脂酸乙醇胺(LPE)、***素E2(PGE2)等一系列脂质信号分子水平上升。其中PGE2的上升，可使下游的Tyr397位点磷酸化，然后与蛋白受体和生长因子结合，促进细胞的转移和侵袭能力。而溶血磷脂酸(LPA)能激活多种G蛋白偶联受体，通过不同的抗凋亡信号通路，促进肿瘤细胞的存活和增殖。
因此，研究靶向MAGL的特定分子尤为必要。
蛋白水解靶向嵌合体(PROTAC)为药物研发领域提供了全新的方法，与普通的小分子抑制剂不同，PROTAC的配体设计只需要能与靶向蛋白结合即可，并不需要竞争抑制，这使得一些在以前认为的不可成药的靶点，“undruggable”的靶点的抑制成为可能，如结构蛋白、转录因子也可以成为小分子药物的靶点，只需要使用能结合该类蛋白质的配体做成PROTAC即可。
针对PROTAC的(蛋白结合端分子配体)部分，是每个PROTAC分子设计的重点所在，由于待降解蛋白质的分子配体是每种PROTAC分子特征性的，需要根据具体蛋白设计，具体分子配体需要进行优化设计。
基于此，发明人设计了一种可以靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子的医药中间体(即为蛋白结合端的分子配体)。其羟基端具有反应活性，具有连接到衔接物或其他E3泛素连接酶配体上的潜力，是一种即用型MAGL蛋白的PROTAC配体。
本发明还提供了一种医药中间体的制备方法，其包括：
将式II所示结构的化合物B9与3,4-亚甲基二氧溴苯、正丁基锂进行反应得到具有式III所示结构的化合物B4；
将式IV所示结构的化合物B2与4-溴苯酚、三苯基膦、偶氮二甲酸二异丙酯反应得到具有式V所示结构的化合物B3；
再将化合物B3与正丁基锂反应，然后加入化合物B4得到具有式VI所示结构的化合物B5；然后将化合物B5进行催化加氢反应得到具有式VII所示结构的化合物B6；再将化合物B6与氯甲酸-4-硝基苯酚酯反应以得到具有式VIII所示结构的化合物B7；
进行脱保护反应，以得到具有式Ⅸ所示结构的化合物B8；
式II：
式III：
式IV：
式V：
式VI：
式VII：
式VIII：
式Ⅸ
此外，在其他实施方式中，也可以通过改变投料，投入带有R1到R4的化合物，获得通式I的结构。
在本发明应用较佳的实施方式中，以N,O-二甲基羟胺盐酸盐、异丙基氯化镁和N-Cbz哌嗪-4-甲酸乙酯为底物反应得到具有式II所示结构的化合物B9；在化合物B9的制备过程中，N,O-二甲基羟胺盐酸盐、异丙基氯化镁和N-Cbz哌嗪-4-甲酸乙酯的添加摩尔比为1-1.2：2-2.2：1。
在一种实施方式中，上述添加摩尔比为1:2:1，在其他实施方式中，上述添加摩尔比下可以制备获得收率较高的化合物B9。
化合物B9的制备是先在0-4℃条件下将N,O-二甲基羟胺盐酸盐与异丙基氯化镁混合反应，然后加入N-Cbz哌嗪-4-甲酸乙酯，反应完成后分离获得化合物B9。
在低温条件下，可以确保反应的进行，避免副反应的发生。可选的，上述低温可以是在冰上操作，或者在该反应温度下的反应釜或反应装置内进行。
上述反应后通过水淬灭，用乙酸乙酯萃取后，收集有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗涤以去除水溶性杂质，然后用饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用干燥剂干燥，旋干，柱层析得到化合物B9。
在其他实施方式中，上述化合物B9可市售购买获得。
可选的，上述干燥剂可以为硫酸钠，在其他实施方式中，上述干燥剂也可以是氧化钙、硅胶、氯化钙等。
在本发明应用较佳的实施方式中，化合物B4的制备包括：在氮气氛围下，在-70～-80℃下将3,4-亚甲基二氧溴苯与正丁基锂混合反应，然后加入化合物B9，升温反应，分离获得化合物B4。
在其他实施方式中，上述惰性气体氛围也可选自氩气等氛围。
在超低温度(-70～-80℃)下以避免副反应的发生。
优选地，3,4-亚甲基二氧溴苯、正丁基锂与化合物B9的添加摩尔比为1-1.1：1-1.2：1；可选的，添加摩尔比为1:1:1，可选的，添加摩尔比为1:1.1:1。
优选地，-70～-80℃下混合反应20-30min，升温反应2-3h；可选的，在-78℃下混合反应30min，升温反应2h。
优选地，分离包括萃取、洗涤、干燥和层析；优选地，萃取剂为乙酸乙酯，洗涤是先用碳酸氢钠溶液进行洗涤，然后用氯化钠溶液进行洗涤。通过萃取以去除未反应的有机反应物，通过干燥以去除产物中的溶剂。
在本发明应用较佳的实施方式中，将乙二醇、咪唑与叔丁基二甲基氯硅烷反应得到式IV所示结构的化合物B2。
优选地，化合物B2的制备包括：将添加摩尔比为1.5-1.6:2-2.2:1的乙二醇、咪唑与叔丁基二甲基氯硅烷混合反应，经分离，获得化合物B2。
在一种实施方式中，经上述反应后加入水稀释，用乙酸乙酯萃取。先以饱和碳酸氢钠溶液洗涤，再以饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，旋干，柱层析得到B2。
在一种实施方式中，上述添加摩尔比为1.5:2:1或1.6:2.1:1。
在一种实施方式中，上述化合物B2(式IV所示的结构)可以直接市售购买获得，并不局限于本申请提供的制备方法。
在本发明应用较佳的实施方式中，化合物B3的制备包括：在氮气范围下，将化合物B2与4-溴苯酚、三苯基膦混合，冷却至-4℃～0℃，加入偶氮二甲酸二异丙酯，反应后进行分离获得化合物B3。
在一种实施方式中，加入偶氮二甲酸二异丙酯后，缓慢升温至室温反应过夜。加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取。先以饱和碳酸氢钠溶液洗涤，再以饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，旋干，柱层析得到化合物B3。
优选地，化合物B2、4-溴苯酚、三苯基膦和偶氮二甲酸二异丙酯的添加摩尔比为1-1.2:1-1.2:2-2.2:2-2.2。
在本发明应用较佳的实施方式中，上述化合物B5的制备包括：在氮气氛围以及-70～-80℃条件下，将化合物B3与正丁基锂混合，反应30-40min；然后加入化合物B4，升温反应，经分离获得化合物B5。
在其他实施方式中，上述惰性气体氛围也可选自氩气等氛围。
可选的，上述分离是指依次进行萃取、洗涤、干燥和层析。
在一种实施方式中，用乙酸乙酯萃取。先以饱和碳酸氢钠溶液洗涤，再以饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，旋干，柱层析。
化合物B3、正丁基锂与化合物B4的混合摩尔比为1-1.1：1.2-1.3:1；优选地，化合物B3是在四氢呋喃溶剂中与正丁基锂的己烷溶液进行反应；优选地，加入化合物B4后的反应时间为3-4h，自然升温，可选的，在室温下自然升温。
在本发明应用较佳的实施方式中，上述化合物B7的制备包括：在三乙胺、二氯甲烷的环境下，将化合物B6与氯甲酸-4-硝基苯酚酯混合反应，升温反应，分离获得化合物B7。可选的，上述分离是指萃取、洗涤、干燥和层析。在一种实施方式中，用乙酸乙酯萃取。先以饱和碳酸氢钠溶液洗涤，再以饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，旋干，柱层析。优选地，在0-4℃环境下将摩尔比为1.2-1.4:1的氯甲酸-4-硝基苯酚酯与化合物B6混合。
在本发明应用较佳的实施方式中，上述化合物B8的制备包括：将化合物B7与四丁基氟化铵混合反应制得化合物B8；
优选地，化合物B7与四丁基氟化铵的混合摩尔比为1：3-3.2；优选地，混合反应时间为3-4h，混合反应后进行分离。
本发明还提供了一种医药中间体在制备靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子或抗肿瘤药物中的应用。
肿瘤包括不限于：脑胶质瘤、肝癌、恶性黑色素瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、结直肠癌、结直肠癌、脑部继发性肿瘤、脑部血管性疾病。脑部继发性肿瘤为肺癌、乳腺癌、***癌或结直肠癌发生的脑部转移；脑部血管性疾病为颅内动脉瘤或高血压性脑出血。
一种单酰基甘油脂肪酶PROTAC蛋白降解化合物，其包括第一配体和第二配体，且第一配体通过衔接物与第二配体连接，第一配体具有上述医药中间体的结构或如上述医药中间体的羟基被取代的结构；第二配体为E3泛素连接酶配体；
单酰基甘油脂肪酶PROTAC蛋白降解化合物具有式XI所示的结构：
式XI：
优选地，第二配体选自：靶向VHL、CRBN、MDM2或IAPE3泛素连接酶复合体的配体；优选地，第二配体选自MDM2的配体；衔接物选自线性或分支分子；优选地，衔接物选自聚乙二醇；
优选地，单酰基甘油脂肪酶PROTAC蛋白降解化合物具有式XII所示的结构：
式XII：
第二配体结构不限于多肽、小分子、核酸适配体等。
根据业界共识衔接物可以为任何线性或分支分子，优选地在实施例中选择了聚乙二醇。E3泛素连接酶配体和衔接物已广泛被开发和合成，易于购买并接入具有创造性的第一配体。
本发明具有以下有益效果：
本发明设计了一种可以靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子的医药中间体(即为蛋白结合端的分子配体)。其羟基端具有反应活性，具有连接到衔接物或其他E3泛素连接酶配体上的潜力，是一种即用型MAGL蛋白的PROTAC配体。本发明同时公开了一种靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为化合物B8的核磁碳谱结果；
图2为化合物B8的核磁氢谱结果；
图3为JZL184分子与MAGL蛋白对接结果图；
图4为B8分子与MAGL蛋白对接结果图；
图5为MAGL蛋白(PDB:3HJU)和由B8分子合成的Protac-1分子的分子对接结果图；
图6为蛋白电泳条带图；
图7为细胞增殖实验结果图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供了一种靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子的医药中间体，其合成方法如下：
将1当量(即为摩尔比例)N,O-二甲基羟胺盐酸盐溶于四氢呋喃，零度下滴加2当量异丙基氯化镁，0度下反应2小时，加入1当量N-Cbz哌嗪-4-甲酸乙酯，反应过夜。加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取。依次用饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，旋干，柱层析得到化合物B9。
氮气氛围下，将1当量3,4-亚甲基二氧溴苯溶于干燥的四氢呋喃，冷却到-78度，滴加1.2当量正丁基锂的己烷溶液，保持-78℃反应30分钟。滴加1当量化合物B9的四氢呋喃溶液，缓慢升温至室温，反应3小时。加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取。饱和碳酸氢钠溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，旋干，柱层析得到化合物B4。
将1.5当量乙二醇溶于DMF，加入2当量咪唑，加入1当量叔丁基二甲基氯硅烷。室温搅拌24小时。加入水稀释，用乙酸乙酯萃取。萃取后的有机相先用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，再用饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，旋干，柱层析得到化合物B2。在其他实施方式中，可以选择CH2Cl2、THF替换DMF。
氮气氛围下，将1当量化合物B2溶于干燥的四氢呋喃，加入1当量4-溴苯酚，加入2当量三苯基膦，搅拌均匀，冷却到0度，缓慢滴加2当量偶氮二甲酸二异丙酯。缓慢升温至室温反应过夜。加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取。萃取后的有机相先用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，再用饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，旋干，柱层析得到化合物B3。
氮气氛围下，将1当量化合物B3溶于干燥的四氢呋喃，冷却到-78度，滴加1.2当量正丁基锂的己烷溶液，保持-78度反应30分钟。滴加1当量化合物B4的四氢呋喃溶液，缓慢升温至室温，反应3小时。加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取。萃取后的有机相先用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，再用饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，旋干，柱层析得到化合物B5。
将化合物B5溶于甲醇，加入10％质量比的Pd/C(20％)，通入氢气置换三次，保持1个大气压的氢气反应24小时。将反应直接用硅藻土过滤，旋干得到化合物B6。
将1当量化合物B6溶于干燥的二氯甲烷，加入2当量三乙胺，冷却到0度。加入1.2当量氯甲酸-4-硝基苯酚酯，缓慢升温至室温，搅拌过夜。加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取。萃取后的有机相先用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，再用饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，旋干，柱层析得到化合物B7。
将1当量的化合物B7溶于四氢呋喃，加入3当量四丁基氟化铵，搅拌3小时。加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取。萃取后的有机相先用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，再用饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，旋干，柱层析得到化合物B8。
化合物B8的羟基具有反应活性，可以通过简单反应连接PEG或其他E3泛素连接酶配体。
化合物B8的核磁碳谱结果参照图1所示，13C NMR(75MHz,Chloroform-d)δ157.4,156.4,152.1,147.7,146.2,144.7,139.9,139.8,138.1,127.2,125.0,122.3,119.0,114.2,107.8,106.9,101.1,79.2,69.2,60.5,45.1,44.7,44.2,26.7,26.4。
化合物B8的核磁氢谱结果参照图2所示，1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ8.3–8.1(m,2H),7.4(d,J＝8.8Hz,2H),7.3–7.2(m,2H),7.0–6.7(m,5H),5.9(s,2H),4.3(d,J＝12.5Hz,2H),4.1–3.9(m,4H),3.0(dt,J＝39.9,12.6Hz,2H),2.6–2.4(m,3H),1.5(m,4H)。
实验例1
本实验例提供了化合物B8与MAGL蛋白的结合自由能计算机化学分子模拟测试试验。其包括如下步骤：从蛋白质结构数据库中获得PBD数据并使用gaussian 16对分子和蛋白结构优化，使用的方法和基组为B3LYP-D3/6-31g(d)，进一步通过vina软件进行结合自由能的计算和分子对接，随后使用pymol软件绘图，ligpot软件标注分子互作位点。
分别将JZL184分子与MAGL蛋白(PDB:3HJU)对接、B8分子与MAGL蛋白(PDB:3HJU)对接、MAGL蛋白(PDB:3HJU)和由B8分子合成的Protac-1分子的分子对接，并分别检测对接结果和合自由能。
JZL184分子与MAGL蛋白对接结果参照图3所示，结果表明JZL184分子与MAGL蛋白发生互作，结合自由能-10.6kcal/mol。
B8分子与MAGL蛋白对接结果参照图4所示，结果表明B8分子与MAGL蛋白发生互作，结合自由能-9.6kcal/mol。
Protac-1分子如下所示：
MAGL蛋白(PDB:3HJU)和由B8分子合成的Protac-1分子的分子对接结果参照图5所示，结果表明Protac-1分子的B8分子端具有结合MAGL蛋白能力，结合自由能-7.2kcal/mol。
实验例2
本实验例进行蛋白电泳试验。Protac-1分子处理培养中的人脑胶质瘤干细胞MT细胞72小时，收细胞于RIPA裂解液中，随后蛋白定量使用SDS-PAGE蛋白电泳***进行电泳，随后将蛋白转至PVDF膜上。5％脱脂牛奶封闭1小时，随后抗体孵育在4度过夜，次日TBS-T缓冲液洗膜3次每次10分钟，随后使用HRP标记的二抗进行1小时孵育，随后使用ECL发光液对蛋白条带进行检测。
实验结果参照图6所示，由图6可知，在原代人脑胶质瘤干细胞MT细胞中，通过B8合成的PROTAC分子，展现出浓度依赖的MAGL蛋白降解能力。Alpha-tubulin是细胞上样量内参。
实验例3
本实验例进行细胞增殖实验。实验步骤如下：初始对细胞计数，种1万细胞于12孔板中，每日更换携有不同浓度药物的培养基，在对应时间点对细胞进行计数，通过细胞数与首日1万个细胞倍数关系作图。统计使用了t-test。
实验结果参照图7所示，由图7可知，MT和528NS脑胶质瘤干细胞经过JZL184处理以及经过JZL184改造的B8分子合成的PROTAC分子可以抑制MT和528NS细胞的增殖。相比JZL184，Protac分子具有更好的一致效果，并且使用浓度较低。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (27)
1.一种靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子的医药中间体，其特征在于，其具有式I所示的结构：
式I：
。
2.根据权利要求1所述的靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子的医药中间体，其特征在于，所述医药中间体具有式Ⅹ所示的结构：
式Ⅹ：。
3.一种如权利要求1-2任一项所述的医药中间体的制备方法，其特征在于，其包括：
将式II所示结构的化合物B9与3,4-亚甲基二氧溴苯、正丁基锂进行反应得到具有式III所示结构的化合物B4；
将式IV所示结构的化合物B2与4-溴苯酚、三苯基膦、偶氮二甲酸二异丙酯反应得到具有式V所示结构的化合物B3；
再将化合物B3与正丁基锂反应，然后加入所述化合物B4得到具有式VI所示结构的化合物B5；然后将所述化合物B5进行催化加氢反应得到具有式VII所示结构的化合物B6；再将所述化合物B6与氯甲酸-4-硝基苯酚酯反应以得到具有式VIII所示结构的化合物B7；
进行脱保护反应，以得到具有式Ⅸ所示结构的化合物B8；
式II：；
式III：；
式IV：；
式V：；
式VI：；
式VII：；
式VIII：;
式Ⅸ。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，以N,O-二甲基羟胺盐酸盐、异丙基氯化镁和N-Cbz哌嗪-4-甲酸乙酯为底物反应得到具有式II所示结构的化合物B9；
所述化合物B9的制备过程中，所述N,O-二甲基羟胺盐酸盐、异丙基氯化镁和N-Cbz哌嗪-4-甲酸乙酯的添加摩尔比为1-1.2：2-2.2：1。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述化合物B9的制备是先在0-4℃条件下将所述N,O-二甲基羟胺盐酸盐与异丙基氯化镁混合反应，然后加入N-Cbz哌嗪-4-甲酸乙酯，反应完成后分离获得化合物B9。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述化合物B4的制备包括：在惰性气体氛围下，在-70~-80℃下将3,4-亚甲基二氧溴苯与正丁基锂混合反应，然后加入化合物B9，升温反应，分离获得所述化合物B4。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述3,4-亚甲基二氧溴苯、正丁基锂与化合物B9的添加摩尔比为1-1.1：1-1.2：1。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述化合物B4的制备包括：-70~-80℃下混合反应20-30min，升温反应2-3h。
9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述分离包括萃取、洗涤、干燥和层析；萃取剂为乙酸乙酯，所述洗涤是先用碳酸氢钠溶液进行洗涤，然后用氯化钠溶液进行洗涤；所述惰性气体为氮气或氩气。
10.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，将乙二醇、咪唑与叔丁基二甲基氯硅烷反应得到式IV所示结构的化合物B2。
11.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，所述化合物B2的制备包括：将添加摩尔比为1.5-1.6:2-2.2:1的乙二醇、咪唑与叔丁基二甲基氯硅烷混合反应，经分离，获得化合物B2。
12.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，所述化合物B3的制备包括：在氮气范围下，将化合物B2与4-溴苯酚、三苯基膦混合，冷却至-4℃~0℃，加入偶氮二甲酸二异丙酯，反应后进行分离获得化合物B3。
13.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，所述化合物B2、4-溴苯酚、三苯基膦和偶氮二甲酸二异丙酯的添加摩尔比为1-1.2:1-1.2:2-2.2:2-2.2。
14.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，所述化合物B5的制备包括：在氮气氛围以及-70~-80℃条件下，将所述化合物B3与所述正丁基锂混合，反应30-40min；然后加入化合物B4，升温反应，经分离获得化合物B5。
15.根据权利要求14所述的制备方法，其特征在于，所述化合物B3、正丁基锂与化合物B4的混合摩尔比为1-1.1：1.2-1.3:1。
16.根据权利要求15所述的制备方法，其特征在于，所述化合物B3是在四氢呋喃溶剂中与正丁基锂的己烷溶液进行反应。
17.根据权利要求14所述的制备方法，其特征在于，加入化合物B4后的反应时间为3-4h，自然升温。
18.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述化合物B7的制备包括：在三乙胺、二氯甲烷的环境下，将所述化合物B6与氯甲酸-4-硝基苯酚酯混合反应，升温反应，分离获得化合物B7。
19.根据权利要求18所述的制备方法，其特征在于，在0-4℃环境下将摩尔比为1.2-1.4:1的氯甲酸-4-硝基苯酚酯与所述化合物B6混合。
20.根据权利要求18所述的制备方法，其特征在于，所述化合物B8的制备包括：将化合物B7与四丁基氟化铵混合反应制得化合物B8。
21.根据权利要求20所述的制备方法，其特征在于，所述化合物B7与四丁基氟化铵的混合摩尔比为1：3-3.2；所述混合反应时间为3-4h，混合反应后进行分离。
22.一种如权利要求1或2所述的医药中间体在制备靶向单酰基甘油脂肪酶的PROTAC分子或抗肿瘤药物中的应用。
23.一种单酰基甘油脂肪酶PROTAC蛋白降解化合物，其特征在于，其包括第一配体和第二配体，且所述第一配体通过衔接物与所述第二配体连接，所述第一配体具有如权利要求1或2所述的医药中间体的结构或如权利要求1或2所述的医药中间体的羟基被取代的结构；所述第二配体为E3泛素连接酶配体；
所述单酰基甘油脂肪酶PROTAC蛋白降解化合物具有式XI所示的结构：
式XI：。
24.根据权利要求23所述的单酰基甘油脂肪酶PROTAC蛋白降解化合物，其特征在于，所述第二配体选自：靶向VHL、CRBN、MDM2或IAPE3泛素连接酶复合体的配体。
25.根据权利要求24所述的单酰基甘油脂肪酶PROTAC蛋白降解化合物，其特征在于，所述第二配体选自MDM2的配体；衔接物选自线性或分支分子。
26.根据权利要求25所述的单酰基甘油脂肪酶PROTAC蛋白降解化合物，其特征在于，所述衔接物选自聚乙二醇。
27.根据权利要求23所述的单酰基甘油脂肪酶PROTAC蛋白降解化合物，其特征在于，所述单酰基甘油脂肪酶PROTAC蛋白降解化合物具有式XII所示的结构：
式XII：
。
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