CN113521167B - 一种治疗帕金森病的中药组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于帕金森病的中药组合物，原料包括半枝莲1‑25份，北败酱草1‑25份，红花1‑20份，金银花1‑20份，马鞭草1‑15份和木蝴蝶1‑15份。药理试验证明，该中药组合物对帕金森病斑马鱼和帕金森模型小鼠的运动功能障碍有显著的改善作用。

Description

一种治疗帕金森病的中药组合物及其应用

技术领域

本发明属于中医药和医药学技术领域，具体涉及一种用于帕金森病的中药组合物及其应用。

背景技术

帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种神经***变性疾病，多发于老年人，平均发病年龄为60岁左右。帕金森病的病因十分复杂，可能是由遗传因素与环境因素相互作用的结果。帕金森病的发病机制尚不明确，可能是多巴胺能神经元的变性坏死和路易小体聚集的共同作用结果。帕金森病患者会在临床上表现出运动障碍，包括进行性运动迟缓、静止性震颤、肌强直和步态姿势异常等。随着病情的进展和脑内多巴胺浓度的减少，往往同时会伴随一些非运动症状(Non-motor Symptoms，NMS)，如焦虑抑郁、嗅觉减退、便秘、失眠等，给帕金森病患者带来身体和精神上的双重伤害，严重影响病人生活质量。

2018年5月11日，国家卫生健康委员会等5部门联合制定了《第一批罕见病目录》，帕金森病被收录其中。

帕金森病的治疗问题一直是社会研究的热点问题。现行的帕金森病治疗方式有很多，包括药物治疗，神经外科手术，细胞和组织移植治疗以及基因治疗，其中药物治疗是现在最主要的治疗手段。临床上治疗的药物有复方左旋多巴制剂、多巴胺受体激动剂、单胺氧化酶B(MAO-B)抑制剂、儿茶酚-氧位-甲基转移酶(COMT)抑制剂等，用来补充和维持脑内多巴胺的浓度。但是这些药物都只能改善症状而不能治愈疾病，且长期使用会引起精神症状、异动症和“开-关现象”等副作用。

中医药在认识和治疗帕金森病上有其鲜明的特色。帕金森病属中医“颤证”之范畴，在病因病机的认识上，年老体虚、情志失调、饮食不节、劳逸失当均可导致本病。中医认为其病位在脑在筋，与肝、脾、肾三脏相关，病机本虚标实，本虚以肝肾阴虚为主，标实是风火痰瘀的病理因素作祟，内风是贯穿本病的重要病理因素。基于这样的认识，现有技术中出现了多种治疗帕金森病的中药组合物。如公开号CN105535247A(公开日 2016年5月4日)的中国专利申请公开了一种治疗帕金森病的药物组合物，由下列重量份的中药原料制备而成：金果榄8-20份、白头翁10-18份、败酱草6-15份、车前草10-18份、巴戟8-16份、节节草6-15份、当归6-17 份、小通草5-15份、菟丝子5-12份、莨菪6-15份、鹿角5-13份、枳实 4-12份、女贞子4-10份、厚朴4-12份、冰片3-11份、甘草4-13份等。公开号CN105687767A(公开日2016年6月22日)的中国专利申请也公开了一种治疗帕金森病的中药组合物，由飞扬草，川芎，升麻，乌梅，白及，防风，苦参，马鞭草和佩兰按照一定的重量配比制成。再如公开号CN106266354A(公开日2017年1月4日)公开了一种治疗帕金森的中药组合物，由以下重量份的药用原料制成：宽筋藤16-24份、玄参4-10份、生赭石20-28份、珍珠草10-20份、茵陈4-12份、胆南星10-16份、桃仁 14-20份、海松子6-12份、使君子8-14份、牡丹皮10-18份、金银花4-8 份、垂盆草6-10份、水飞蓟2-8份、防己4-10份。还有，如专利号为 CN111686209A(公开日2020年9月22日)的中国发明专利申请公开了一种治疗帕金森病的中药复方制剂，原料包括：钩藤6-5份、天麻3-9份、秦艽6-12份、生黄芪10-20份、熟地黄10-20份、怀牛膝10-20份、枸杞子10-20份、当归10-20份、炒白术10-20份、炒酸枣仁6-15份、桃仁3-12 份、红花3-9份、乌梢蛇20-30份。

随着人口老龄化趋势的加快，帕金森病的患病率逐步提升，其已成为全球第二大神经变性病，影响全球1-5％的60岁以上老年人。由于帕金森病的发病机理尚不清楚，病因复杂，因此，临床上的医疗需求远未得到满足，需要不断地寻找、发现和开发疗效确切的药物，减轻患者的痛苦。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供一种用于治疗帕金森病的中药组合物。该中药组合物组方思路新颖，初步实验显示其对6-(OHDA)所致的帕金森病斑马鱼模型的运动障碍具有明显的改善作用，对MPTP所致的帕金森小鼠的运动障碍有显著的改善作用，提示其能够为帕金森病的治疗提供一种新的选择。

为了达到上述技术效果，本发明采用了如下的技术方案：

一种用于帕金森病的中药组合物，原料包括如下重量份的药材：

半枝莲1-25份，北败酱草1-25份，红花1-20份，金银花1-20份，马鞭草1-15份，木蝴蝶1-15份。

作为一个优选的实施方案，本发明提供一种用于帕金森病的中药组合物，原料包括如下重量份的药材：

半枝莲10-20份、北败酱草10-20份、红花10-15份、金银花10-15份、马鞭草5-10份、木蝴蝶5-10份。

作为一个更优选的实施方案，本发明提供一种用于帕金森病的中药组合物，原料包括如下重量份的药材：

半枝莲18份、北败酱草18份、红花15份、金银花9份、马鞭草9份、木蝴蝶9份。

优选地，上述中药组合物的原料由半枝莲、被败酱草、红花、金银花、马鞭草和木蝴蝶组成，各药材的重量份如前所定义。

本发明的另一个目的在于提供一种药物，包括上述用于帕金森病的中药组合物。

优选地，所述药物还可以包括药学上可以接受的辅料。

优选地，所述药物是临床上可以接受的任意一种制剂。

更优选地，所述药物是口服制剂。

进一步优选地，所述口服制剂选自汤剂、散剂、胶囊剂、片剂、蜜丸剂、水蜜丸剂、水丸剂、浓缩丸剂、糊丸剂、蜡丸剂、颗粒剂、口服液或滴丸剂中的一种或多种。

本发明的第三个目的在于提供上述药物的制备方法，包括按照所述重量份准备各药材，按照本领域常规制剂方法，加入或不加入药学上可以接受的辅料，制备成所述床上可以接受的制剂。

此外，本发明还有一个目的在于提供上述中药组合物、上述药物或者按照上述制备方法制备得到的药物在制备治疗帕金森病的药物中的应用。

所述药学上可以接受的辅料，包括但不限于：(1)稀释剂，例如淀粉、糖粉、糊精、乳糖、预胶化淀粉、微晶纤维、无机钙盐(如硫酸钙、磷酸氢钙、药用碳酸钙等)、甘露醇、植物油、聚乙二醇、蒸馏水等；(2)粘合剂，例如蒸馏水、乙醇、淀粉浆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、甲基纤维素和乙基纤维素、羟丙甲纤维素等；(3)崩解剂，例如干淀粉、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠等；(4)润滑剂，例如硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、氢化植物油、聚乙二醇类、月桂醇硫酸镁等。

与现有技术已经出现的用于帕金森病的中药组合物以补肝肾为主，同时祛风、清热、祛痰、化瘀的组方原则不同，本发明提供的中药组合物侧重清热解毒。其中：

半枝莲，味辛性平，归心、小肠和肺经。具有清热解毒，利尿消肿之功效。《外科正宗》记载的“七星剑”，方含半枝莲、野菊、地丁等，用好酒煎服，可治各种疔疮初起，憎寒发热、心烦昏愦，草药以鲜品入药，宜预采阴干，为冬月备用。《外科正宗》还记述半枝莲治毒蛇伤：“蛇毒伤人，半枝莲捣汁二两与热酒四两共服之，盖汗为效，渣敷伤处”。

败酱草，性微寒，味辛、苦，归胃、大肠和肝经，功效为清热解毒，消痈排脓，祛瘀止痛，常用于肠痈肺痈，痈肿疮毒和产后瘀阻腹痛。《本草纲目》中记载:“败酱,善排脓破血,故仲景治痈及古方妇人科皆用之。”现代药理研究表明，败酱草具有良好的抗菌和抗炎效果，同时还有镇静、抗肿瘤等作用。

红花，性温味辛，归心、肝经；功效为活血通经，散瘀止痛。临床常用于瘀血阻滞之经闭、痛经和恶露不行，瘀滞腹痛、胸痹心痛、胸胁刺痛以及癥瘕痞块，跌扑损伤、疮疡肿痛，热郁血瘀、斑疹色暗等。《本草纲目》记载红花，“活血润燥，止痛散肿，通经”。

金银花，性寒味甘，归肺、心、胃经，功效是清热解毒，疏散风热。临床适用于痈肿疔疮，喉痹，丹毒，风热感冒，温病发热还有热毒血痢等热证。《本草求真》记载“金银花，诸书皆言补虚养血，又言入肺散热，能治恶疮、肠澼、痈疽、痔漏，为外科治毒通行要剂。按此似属两歧。殊不知书言能补虚者，因其芳香味甘，性虽入内逐热，而气不甚迅利伤损之意也；书言能养血者，因其毒结血凝，服此毒气顿解，而血自尔克养之谓也。究之止属清热解毒之品耳，是以一切痈疽等病，无不藉此内人，取其气寒解热，力主通利。如谓久服轻身延年益寿，不无过谀。”众所周知，金银花具有解热、抗炎，抗菌、抗病毒，抗氧化、抗紫外线以及保护肝胆，提高免疫力等药理作用。

马鞭草，性凉，味微苦，有凉血、散瘀、通经、清热、解毒、止痒、驱虫、消胀的功效。《本草从新》记载“马鞭草破血通经,杀虫消胀,治气血癥瘕,下部疮阴肿,发背痈疽,杨梅毒气。专以驱逐为长,疮证久而虚者, 斟酌用之”。马鞭草具有抗肿瘤、抗炎镇痛、调节免疫功能、抗真菌抗氧化和抗早孕、神经保护等药理学作用。

木蝴蝶，性凉味苦、甘，归肺、肝和胃经，功效为清肺利咽，疏肝和胃。临床常用于肺热咳嗽，喉痹喑哑，肝胃气痛等，在治疗痈肿疔疮，蛇虫咬伤，鼓胀水肿，湿热黄疸，湿疮湿疹等疾病同样有效。《滇南本草》中记载：“定喘、消痰、破盅积、通行十二经气血,除血盅、气盅之毒,又能补虚、宽中、进食”。木蝴蝶具有抗炎、利尿、利胆等作用，以及出色的抗肿瘤作用。

本发明的中药组合物配伍组合新颖，没有补益肝肾的药物，也没有针对中医“颤证”中风火痰瘀的病邪中风邪和痰湿的药物，仅有针对火热之毒和血瘀之邪的药物。经过药理试验证明，本发明所述的中药组合物对6-(OHDA)所致的斑马鱼模型运动障碍具有显著的改善作用，所述中药组合物中高剂量组的神经保护作用强于阳性对照药诺米芬新。因此，提示本发明所述的中药组合物可以改善帕金森病的运动障碍，从而治疗帕金森病。

附图说明

以下结合附图，对本发明做进一步的说明。

图1的折线图示出的是实施例12的小鼠爬杆实验中，各组小鼠在不同天数的爬杆时间，图中：

正常组

模型组

美多芭组

本发明胶囊低剂量组

本发明胶囊中剂量组

本发明胶囊高剂量组。

图2示出的是实施例12的小鼠旷场实验中各组小鼠的行为轨迹图，其中，A：正常组；B：模型组；C：美多芭组；D：本发明胶囊低剂量组； E：本发明胶囊中剂量组；F：本发明胶囊高剂量组。

具体实施方式

以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的药材原料、试剂材料等，如无特殊说明，均为市售购买产品。

实施例1一种用于帕金森病的中药组合物

本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1kg＝1重量份)：

半枝莲18kg，北败酱草18kg，红花15kg，金银花9kg，马鞭草9kg，木蝴蝶9kg。

实施例2一种用于帕金森病的中药组合物

本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1g＝1重量份)：

半枝莲10g，北败酱草20g，红花10g，金银花10g，马鞭草5g，木蝴蝶 5g。

实施例3一种用于帕金森病的中药组合物

本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1g＝1重量份)：

半枝莲20g，北败酱草10g，红花15g，金银花15g，马鞭草10g，木蝴蝶10g。

实施例4一种用于帕金森病的中药组合物

本实施例的所述中药组合物的原料组成为(5g＝1重量份)：

半枝莲5g，北败酱草5g，红花5g，金银花5g，马鞭草5g，木蝴蝶5g。

实施例5一种用于帕金森病的中药组合物

本实施例的所述中药组合物的原料组成为(1g＝1重量份)：

半枝莲25g，北败酱草25g，红花20g，金银花20g，马鞭草15g，木蝴蝶15g。

实施例6一种胶囊剂

取实施例1的中药组合物，混合后碾成细粉，过100目筛，装入胶囊， 0.6g生药/粒，即得。

用量用法：每日三次，每次服用2-4粒，温水送服。

实施例7一种颗粒剂

按1重量份＝1kg，按照实施例2的中药组合物的重量份配比称取各味药材，混合后碾成细粉，过200目筛，加入适量糊精做填充剂，制粒、压制成颗粒剂，10g/袋，分装，即得。

用量用法：每日三次，每次10g，温水送服。

实施例8一种片剂

按1重量份＝1kg，按照实施例2的中药组合物的重量份配比称取各味药材，混合后碾成细粉，过80-100目筛，加糊精直接压制成片剂，0.4g生药/片，即得。

用量用法：每日三次，每次3-6片，温水送服。

实施例9一种蜜丸剂

按1重量份＝1kg，按照实施例1的中药组合物的重量份配比称取各味药材，混合后碾成细粉，过60-100目筛，加入适当炼蜜后，按照常规方法制备成小蜜丸剂，5g/10丸，即得。

用量用法：每日三次，每次5克，温水送服。

实施例10一种汤剂

如下质量称取各药材：

半枝莲18g，北败酱草18g，红花15g，金银花15g，马鞭草9g，木蝴蝶9g。

各味药材混合，加入5～10倍重量的水，加热至沸腾，煎煮20～30分钟，乘热过滤；药渣加入5～10倍重量的水，加热至沸腾，煎煮20～30分钟，乘热过滤，合并两次的药液，即得。分2～3次，1日内服完。

实施例11药效学实验

1.材料

1.1实验药物

实施例6的胶囊剂(以下称为“本发明的胶囊”)，褐色粉末，于2020 年04月22日接收并登记，由中国中医科学院临床基础研究所提供，阴凉柜储存。临用前用养鱼用水配制成2mg/mL母液，现用现配。

6-OHDA，淡黄色粉末，批号为MKCG8786，购自SIGMA公司。临用前用超纯水配制成250mM母液，现配现用。

诺米芬新，白色粉末，批号为029M4053V，购自SIGMA公司。临用前用超纯水配制成10mg/mL母液，-20℃保存。

木丹颗粒：棕黄色至棕褐色的颗粒，批号为Z20080033，购自辽宁奥达制药有限公司。成分为黄芪、延胡索(醋制)、三七、赤芍、丹参、川芎、红花、苏木、鸡血藤。临用前用超纯水配制成250mM母液，现配现用。

1.2实验动物

野生型AB系斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行。共180尾，年龄为受精后4天，用于本发明的胶囊对帕金森氏症运动功能障碍的改善作用评价实验。

以上斑马鱼均饲养于28℃的养鱼用水中(水质：每1L反渗透水中加入 200mg速溶海盐，电导率为480～510μS/cm；pH为6.9～7.2；硬度为53.7～71.6 mg/L CaCO3)，由本公司养鱼中心繁殖提供，实验动物使用许可证号为： SYXK(浙)2012-0171。饲养管理符合国际AAALAC认证的要求。

1.3实验仪器和试剂

解剖显微镜(SZX7，OLYMPUS，Japan)；CCD相机(VertA1，上海土森视觉科技有限公司)；6孔板和96孔板(Nest Biotech，Shanghai，China)；精密电子天平(CP214，OHAUS，America)；行为分析仪(V3.11，ViewPoint Life Sciences，France)。

2.方法

2.1实验例1：本发明的胶囊最大检测浓度(MTC)测定

(1)浓度组别

(2)模型制作

用250μM 6-OHDA处理4dpf野生型AB品系斑马鱼48h，建立帕金森氏症运动功能障碍模型。

(3)实验方法

随机选取240尾受精后4天(4dpf)野生型AB品系斑马鱼于六孔板中，用6-OHDA建立斑马鱼帕金森氏症运动功能障碍模型。分别水溶给予本发明的胶囊62.5、125、250、500、1000和2000μg/mL浓度，同时设置正常对照组(养鱼用水处理斑马鱼)和模型对照组，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼，每孔容量为3mL。本发明的胶囊和6-OHDA共同处理48h后，观察并统计斑马鱼死亡数量和毒性表型，确定本发明的胶囊对斑马鱼的MTC。

(4)实验结果

根据浓度摸索实验结果，本发明的胶囊的MTC为1000μg/mL，故根据 [1904-24]项目建议书，确定本发明的胶囊对帕金森氏症运动功能障碍的改善作用评价实验浓度设置为：111μg/mL(1/9MTC)、333μg/mL(1/3MTC) 和1000μg/mL(MTC)。在实验终点，模型对照组斑马鱼出现侧翻，且对刺激不敏感。本发明的胶囊62.5μg/mL浓度组斑马鱼状态与模型对照组相似； 125、250、500和1000μg/mL浓度组均较模型对照组状态佳；2000μg/mL 浓度组诱发16.7％(5/30)死亡。故确定本发明的胶囊对斑马鱼MTC为1000 μg/mL。详见表1。

表1本发明的胶囊浓度摸索实验结果(n＝30)

2.2实验例2：本发明的胶囊防治帕金森氏症作用评价

(1)浓度组别

(2)浓度确定依据

根据浓度摸索实验结果，本发明的胶囊的MTC为1000μg/mL，故根据 [1904-24]项目建议书，确定本发明的胶囊对帕金森氏症运动功能障碍的改善作用评价实验浓度设置为：111μg/mL(1/9MTC)、333μg/mL(1/3MTC) 和1000μg/mL(MTC)。

(3)实验方法

随机选取180尾受精后4天(4dpf)野生型AB品系斑马鱼于六孔板中，用6-OHDA建立斑马鱼帕金森氏症运动功能障碍模型。分别水溶给予本发明的胶囊111、333和1000μg/mL，中药阳性对照药木丹颗粒111μg/mL，阳性对照药诺米芬新1.5μg/mL浓度，同时设置正常对照组(养鱼用水处理斑马鱼)和模型对照组，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼，每孔容量为3mL。本发明的胶囊和6-OHDA共同处理48h后，每组随机选取10尾斑马鱼转移至96孔板中，1尾/孔，200μL/孔，立即用行为分析仪测定1h内斑马鱼的总运动距离(S)，以斑马鱼运动距离的统计学分析结果评价本发明的胶囊对 6-OHDA诱发的帕金森氏症运动功能障碍的改善作用。统计学处理结果用 mean±SE表示。运动功能障碍的改善作用计算公式如下：

运动功能改善作用(％)＝×100％

用方差分析和Dunnett’s T-检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异。

(4)实验结果：对帕金森氏症运动功能障碍的改善作用评价

模型对照组斑马鱼运动距离为2153mm，与正常对照组(4144mm)比较p<0.001，提示模型构建成功。阳性药对照组诺米芬新1.5μg/mL浓度组斑马鱼运动距离为2977mm，与模型对照组比较p<0.01，其运动功能改善作用为41％，提示诺米芬新对帕金森氏症运动功能障碍具有改善作用。中药阳性药木丹颗粒111浓度组斑马鱼运动距离为2736mm，与模型对照组比较 p<0.05，其运动功能改善作用为29％，提示木丹颗粒对帕金森氏症运动功能障碍具有改善作用。

本发明的胶囊111、333和1000μg/mL浓度组斑马鱼运动距离分别为 3288、4631和4255mm，与模型对照组(2153mm)比较p<0.05&p<0.001 &p<0.001，运动功能改善作用分别为57％、124％和106％，提示在本实验浓度条件下，本发明的胶囊对帕金森氏症运动功能障碍具有非常显著的改善作用。本发明的胶囊各浓度组与木丹颗粒组比较，p均小于0.05，说明本发明的胶囊对于改善帕金森氏症运动功能障碍，作用强于对照的木丹颗粒。详见表2。

表2.本发明的胶囊对斑马鱼运动功能改善作用(n＝10)

与模型对照组比较：*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001；与木丹颗粒组比较：#p<0.05，##p<0.01， ###p<0.001。

(5)实验结论

上述药理实验证明本发明的中药组合物对6-(OHDA)所致的帕金森病斑马鱼的运动障碍具有极为显著的改善作用，其作用强于诺米芬新，强于木丹颗粒(含红花)。

实施例12药效学实验

1.材料

1.1实验药物

实施例6制备的胶囊剂(以下简称“本发明的胶囊”)，褐色粉末，于2020 年04月22日接收并登记，由中国中医科学院临床基础研究所提供，阴凉柜储存，现用现配。

MPTP，白色粉末，购自SIGMA公司。临用前用超纯水配制成30mM 母液，现配现用。

美多芭片，白色粉末，购自上海罗氏制药公司。碾碎成粉，阴凉柜储存，现用现配。

1.2实验动物

C57BL/6J小鼠60只，雄性，体重(19±2)g，购买自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2016-0006。饲养于北京中医药大学良乡校区动物房内，小鼠自由饮水进食，湿度适中，室温控制在18～25℃。

1.3实验仪器和试剂

ACCULAB电子天平(德国Sartorius公司)；自制行为学测试杆；100 cm×100cm×50cm旷场箱。

2.方法

2.1动物分组及给药

各组造模方法和给药方案见表3所示，根据文献报道和课题组经验，每天腹腔注射0.3％MPTP，30mg/kg/d，连续5天。将造模成功的50只小鼠(爬杆时间较正常组显著增长，P<0.05，体重无差异)随机分成5组，每组10 只，分别是模型组、美多芭组、本发明的胶囊低剂量组、本发明的胶囊中剂量组、本发明的胶囊高剂量组。另设空白对照组，每组10只。其中空白组和模型组给与蒸馏水灌胃，美多芭组给予美多芭混悬液(美多芭研粉后，分散在0.05％(w/w)羟甲基纤维素钠混悬液中)，根据临床的常用剂量，换算给药剂量是0.075g/kg/d。本发明的胶囊各组给予中药混悬液(本发明的胶囊内容物在蒸馏水中混匀并超声得到的混悬液)，按照人与小鼠体表面积换算后，低中高的给药剂量分别是1.41g胶囊内容物/kg/d、2.82g胶囊内容物/kg/d、 5.64g胶囊内容物/kg/d。

表3各组造模方法和给药方案

(2)模型制作

首先将所有的小鼠进行爬杆训练和体重测量，筛选出动作笨拙，爬杆时间明显偏长的缺陷小鼠，然后随机抽出10只作为空白对照组(体重和爬杆时间均无统计学意义)，剩余小鼠腹腔注射给药，使用生理盐水配置0.3％的 MPTP溶液，连续5d，剂量为30mg/(kg·d)，建立PD小鼠模型。

(3)实验方法

1.爬杆实验

每日观察小鼠一般活动和状态，使用爬杆实验检测各组小鼠的运动状态和协调能力。将直径15mm，高6cm的光滑不锈钢杆环形叠压缠绕上平整的医用纱布，垂直坚立，将小鼠头向下放置，使其顺金属杆自然爬下，计算小鼠爬杆所用的时间，并观察小鼠在爬行过程中的动作行为。所有小鼠于第0 天开始进行正式爬杆实验，隔日1次，共14次，直至实验期满。爬杆时间越短评分越高，表明小鼠运动障碍程度越低，协调性越好。

2.旷场实验

使用1个100cm×100cm×50cm的旷场箱，底面平均分成4×4的16 个方格，上不封顶，并在旷场箱上方约20cm高处固定一个LED台灯用来照明。观察环境为安静的暗室，观察每只小鼠5min内的自发运动，其中记录其运动距离还有爬动轨迹。

(4)实验结果

1.一般行为学观察

正常组小鼠活动正常、动作灵敏、毛色漆黑柔顺。造模小鼠在注射MPTP 后，与正常组小鼠比较，约5min后小鼠逐渐开始出现不同程度的四肢僵硬、震颤摇动、竖尾炸毛等现象并加重，注射后大约1h，造模小鼠的上述症状逐渐缓解。随着腹腔注射MPTP的次数的增加，小鼠状态的急性反应表现有所缓解，但是整体上在造模5天以后小鼠出现炸毛色暗，体重减轻，行动僵硬迟缓等表现。随着实验的进行，本发明的胶囊组小鼠体重较模型组增长快，毛发色泽较之更黑亮柔顺。美多巴组小鼠在灌胃后出现明显的激惹现象，小鼠之间相互撕咬、蹿跳等，而本发明胶囊各组没有出现激惹表现。

2.本发明胶囊对PD小鼠爬杆行为的影响

从各组小鼠不同时间点爬杆时间长短的变化趋势看(如图1，表4所示)：在注射MPTP前(第0天)各组小鼠的爬杆时间无差异，造模后的第1天，造模组小鼠的爬杆时间明显延长，有统计学意义(P<0.05)，说明造模成功，随着实验天数的推进，小鼠爬杆时间呈缩短或稳定趋势。其中正常组的爬杆时间从第0天至第11天呈逐步稳定，第11天后爬杆时间趋近稳定，在实验期中正常组的爬杆时间明显比其它4组短；模型组从第1天后至28天爬杆时间逐步缩短，但自11天起所用爬杆时间便比治疗组长；美多芭组从造模第1天开始，爬杆时间逐渐缩短，尽管在第23天偶有上升，但总体趋势是下降，且在第28天趋于正常对照组；本发明胶囊各治疗组尽管有波动但主要趋势是时间缩短，中剂量波动较大，中高剂量能够保证较为稳定的缩短小鼠爬杆的时间。

表4各组小鼠在27天的爬杆时间比较(

n＝10)

注：与正常对照组相比，^#P<0.05；与模型组相比，^*P<0.05。

3.本发明胶囊对PD小鼠旷场实验的影响

使用旷场实验观察各组小鼠5min内的自发运动，结果如表5和图2所示：模型组与正常组比较，运动距离明显降低且小鼠轨迹少经过中央区，说明造模成功，且对小鼠造成运动障碍。经过1天治疗后，美多芭组出现激惹反应，虽然较模型组运动距离有所增加，但方差过大，与模型组没有显著差异；本发明胶囊各剂量组运动距离较模型组有所增加，且高剂量组运动距离显著增加。第14天，本发明胶囊低、中剂量组与模型组相比均有显著增加，高剂量组较之增加不明显。第27天，本发明胶囊各剂量组运动距离均有所增加，且中剂量组与模型组相比有显著差异(P<0.05)。此外，与模型组和美多芭组比较，本发明胶囊各剂量组运动轨迹更多经过中央区，从穿过中央区的轨迹来看，本发明胶囊各剂量组对比模型组，小鼠探索能力有所增加，不似模型组小鼠对外界反应的紧张。

表5各组小鼠不同时间旷场运动距离表(

n＝10)

注：与正常组比较，^#P<0.05；与模型组相比，^*P<0.05。

(5)实验结论

上述药效实验证明本发明的中药组合物对MPTP所致的帕金森小鼠的运动障碍有显著的改善作用，作用强于美多芭。

总之，本发明提供了一种可以用于帕金森病的中药组合物。该组合物包括半枝莲、北败酱草、红花、金银花、马鞭草和木蝴蝶，诸药合用，共奏清热解毒、活血化瘀之功，为帕金森病患者以及医生提供了新的临床治疗选择。

Claims (7)

1.一种治疗帕金森病的中药组合物，原料由如下重量份的药材组成：

半枝莲1-25份，北败酱草1-25份，红花1-20份，金银花1-20份，马鞭草1-15份，木蝴蝶1-15份。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物的原料由如下重量份的药材组成：

半枝莲10-20份、北败酱草10-20份、红花10-15份、金银花10-15份、马鞭草5-10份、木蝴蝶5-10份组成。

3.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物的原料由如下重量份的药材组成：

半枝莲18份、北败酱草18份、红花15份、金银花9份、马鞭草9份、木蝴蝶9份。

4.一种药物，由权利要求1至3中任一项所述的中药组合物组成，或由权利要求1至3中任一项所述的中药组合物和药学上可以接受的辅料组成；

其中，所述药物为口服制剂。

5.根据权利要求4所述的药物，其特征在于，所述口服制剂选自汤剂、散剂、胶囊剂、片剂、蜜丸剂、水蜜丸剂、水丸剂、浓缩丸剂、糊丸剂、蜡丸剂、颗粒剂、口服液或滴丸剂中的一种或多种。

6.权利要求4或5所述的药物的制备方法，包括按照重量配比准备各药材，按照本领域常规制剂方法，加入或不加入药学上可以接受的辅料，制备成所述口服制剂。

7.权利要求 1至3中任一项所述的中药组合物、权利要求4或5所述的药物或按照权利要求 6所述的制备方法制备的药物在制备治疗帕金森病的药物中的应用。

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