CN113519718A - 一种肉鸡益生素饲料添加剂及其制备方法和应用 - Google Patents
一种肉鸡益生素饲料添加剂及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种肉鸡益生素饲料添加剂及其制备方法和应用，属于饲料添加剂技术领域。本发明的益生素饲料添加剂原料包括：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、屎肠球菌固态发酵菌剂、果寡糖、海带粉、沸石粉、米糠。制备方法为，将屎肠球菌制备成固态发酵菌剂，然后与枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、果寡糖、沸石粉混合均匀，然后加入海带粉和粉碎后的米糠，搅拌均匀，得到益生素饲料添加剂。本发明菌种复配合理，且菌种抗逆性强，添加到饲料中后，菌种进入动物肠道后不易失活，可以有效提升益生素饲料的吸收转化率，使得肉鸡增重效果显著。
Description
技术领域
本发明涉及饲料添加剂技术领域，特别是涉及一种肉鸡益生素饲料添加剂及其制备方法和应用。
背景技术
近年来，随着人民生活水平的日益提高，对肉类产品的需求量日益增加，但在肉鸡养殖中，养殖户为缩短养殖周期，降低死亡率，减少成本，大部分养鸡户往往会选择添加抗生素等药物于饲料中。长此以往，使得鸡在养殖过程中产生耐药性和抗药性，出现内源性感染，同时，鸡的免疫功能降低、抗病能力下降、鸡肉中有抗生素残留等问题。
益生素是由活体微生物制成的生物活性制剂，可通过动物消化道生物的竞争性排斥作用，抑制有害菌类的生长，形成优势菌群或者通过增强非特异性免疫功能来预防疾病，从而促进动物生长和提高饲料转化率。益生素饲料添加剂对畜产品无毒，对人类无副作用，是近十几年发展起来的一种新型绿色饲料添加剂。
虽然，益生素较抗生素具有无毒、无副作用等诸多优点，但益生素饲料添加剂依然存在菌种抗逆性差的问题，使得饲料在进入动物肠道后菌种易失活，使得菌种难以更好发挥作用，同时由于菌种复配不合理等因素使得益生素饲料的吸收循环化率低、肉鸡增重难以满足需求。
发明内容
本发明的目的是提供一种肉鸡益生素饲料添加剂及其制备方法和应用，以解决上述现有技术存在的问题，本发明的益生素饲料添加剂菌种复配合理，且菌种抗逆性强，添加到饲料中后，菌种进入动物肠道后不易失活，可以有效提升益生素饲料的吸收转化率，使得肉鸡增重效果显著。
为实现上述目的，本发明提供了如下方案：
本发明提供一种肉鸡益生素饲料添加剂，原料按重量份计，包括以下组分：
枯草芽孢杆菌0.8-1.5份，地衣芽孢杆菌0.5-1.8份，短小芽孢杆菌0.6-1.2份，屎肠球菌固态发酵菌剂1.3-1.8份，果寡糖5-8份，海带粉20-30份，沸石粉25-35份，米糠50-60份；
所述屎肠球菌固态发酵菌剂的制备方法包括以下步骤：
a.菌株的筛选驯化：无菌操作条件下，取屎肠球菌置于含有葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、酵母浸粉、氯化钠、琼脂粉、碳酸钙、柠檬酸二铵、吐温80、硫酸镁、硫酸锰的改良MRS培养基中，划线，培养，挑取典型屎肠球菌单菌落分别划线到MRS培养基中，连续纯化传代复壮；
b.一级种子液培养：无菌操作条件下，将筛选驯化后的屎肠球菌单菌落接种于含有蔗糖、葡萄糖、蛋白胨、碳酸钙、酵母浸粉、氯化钠、牛肉膏、硫酸镁、硫酸锰、磷酸氢二钾的一级种子培养液中，摇床培养，培养结束后即得一级种子液，置4℃冰箱中保存备用；
c.二级种子液培养：无菌环境下，将制备好的一级种子液接种到含有蔗糖、葡萄糖、蛋白胨、碳酸钙、酵母浸粉、氯化钠、牛肉膏、硫酸镁、硫酸锰、磷酸氢二钾的二级种子培养液中，种子罐培养，获得二级种子液；
d.固态发酵：无菌环境下，将制备好的二级种子液均匀接种到含有豆粕、米糠、麸皮、碳酸钙、酵母浸粉、硫酸镁、硫酸锰的固态发酵培养基中发酵培养；
e.烘干粉碎：发酵结束后将发酵产物烘干，粉碎后即得屎肠球菌固态发酵菌剂。
进一步地，原料按重量份计，包括以下组分：
枯草芽孢杆菌1.2份，地衣芽孢杆菌1.3份，短小芽孢杆菌0.8份，屎肠球菌固态发酵菌剂1.5份，果寡糖6份，海带粉25份，沸石粉30份，米糠55份。
进一步地，步骤a中，改良MRS培养基中含葡萄糖2.5-2.6％、蛋白胨1.3-1.5％，牛肉膏1.3％，酵母浸粉1.2-1.5％，氯化钠0.8％，琼脂粉3.1-3.3％，碳酸钙2.5-2.7％，柠檬酸二铵1％，吐温80 0.1-0.2％，硫酸镁0.1％，硫酸锰0.06％，余量为纯化水；
步骤b中，所述一级种子培养液中含蔗糖2.3-2.4％，葡萄糖2-2.1％，蛋白胨1.6-1.8％，碳酸钙5.2-5.4％，酵母浸粉1.5％，氯化钠0.8％，牛肉膏1.8-2.0％，硫酸镁0.8％，硫酸锰0.8％，磷酸氢二钾3.3-3.4％，余量为纯化水；步骤b中，所述摇床培养的温度为35-40℃，时间为72-74h。
进一步地，步骤c中，二级种子营养液中含蔗糖2.8-3.0％，葡萄糖1.3-1.5％，蛋白胨1.8-2.0％，碳酸钙4.3-4.5％，酵母浸粉1％，氯化钠0.9％，牛肉膏1.7％，硫酸镁0.8％，硫酸锰0.8-1.2％，磷酸氢二钾3.3％，余量为纯化水；
步骤c中，一级种子液的接种量为二级种子培养液体积的8-10％，所述种子罐培养的温度为35-40℃，时间为72-74h。
进一步地，步骤d中固态发酵培养基含豆粕40-43％、米糠12-13％，麸皮23-25％，碳酸钙11-15％，酵母浸粉2.7-2.8％，硫酸镁1.2％，硫酸锰1.2％，余量为纯化水；
步骤d中，二级种子液的接种量为固态发酵培养基体积的15-20％，所述发酵培养温度为35-40℃，时间为68-72h。
进一步地，步骤e中，所述烘干温度为30-50℃，烘干时间为3-6h，所述粉碎后的目数为80-100目。
本发明还提供一种上述肉鸡益生素饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将米糠粉碎；
(2)将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和屎肠球菌固态发酵菌剂与果寡糖、沸石粉混合均匀，得混合物；
(3)在步骤(2)得到的混合物中加入海带粉和粉碎后的米糠，搅拌均匀，得到益生素饲料添加剂。
进一步地，步骤(1)中米糠粉碎后过60-80目筛。
本发明还提供一种上述肉鸡益生素饲料添加剂在饲料中的应用。
进一步地，所述肉鸡益生素饲料添加剂在饲料中的添加量为饲料总重量的0.9-1.2％。
本发明公开了以下技术效果：
1.本发明将屎肠球菌与枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和短小芽孢杆菌进行复配后添加于益生素添加剂中，菌种复配合理，能够提升益生素饲料的吸收转化率，肉鸡增重效果显著。
2.屎肠球菌固态发酵菌剂在提高幼年畜禽体增重、提高动物免疫力、调节肠道微生态平衡，提高营养吸收等方面均有很好的效果，但其抗逆性较差,在饲料生产加工中不能有效的保持活性，进而影响其效果。本发明对屎肠球菌进行了驯化筛选，显著提高了屎肠球菌的抗逆性，同时，枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和短小芽孢杆菌同属芽孢杆菌，其自身抗逆性强，在动物肠道内也能保持较高的活性，总体上保证了菌种均具有较强的抗逆性，提高了其在进入动物肠道后的存活率。
3.海带粉中富含碘、海藻多糖、甘露醇等营养成分及多种生物活性物质，可以提高肉鸡免疫能力并明显改善肉质；海带粉同时还富含褐藻胶体物质，可以在饲料表面形成一层海藻胶膜，增加了添加剂和饲料间的粘合作用，并提高了添加剂的利用率。
4.本发明在益生素饲料添加剂中添加果寡糖，果寡糖进入肉鸡消化道后会优先被益生素所利用，并在其增殖过程中，能产生大量有益于益生菌繁殖生长的物质，促使其大量繁殖，大大增强益生菌竞争力，迅速激活有益菌群。
5.沸石粉为铝硅酸盐矿物，其中含有钙、磷、钾、钠等多种常量和微量元素，可以提高饲料营养价值，提高机体的抗病能力，促进肉鸡生长；同时，沸石粉还具有良好的吸附性和离子交换性，吸氨固氮，延缓营养物质通过消化道的时间，并吸附肠道有害物质，改善消化机能。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
本发明中所述的“份”如无特别说明，均按质量份计。
本发明所用枯草芽孢杆菌保藏编号为CGMCC No.3665，购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；
所用地衣芽孢杆菌保藏编号为CGMCC No.7388，购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；
所用短小芽孢杆菌保藏编号为CCTCC No.M2014008，购自中国典型培养物保藏中心；
所用屎肠球菌保藏编号为CGMCC No.7274，购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
实施例1
1)屎肠球菌固态发酵菌剂的制备：
a.菌株的筛选驯化：无菌操作条件下，取屎肠球菌置于含有葡萄糖2.5％、蛋白胨1.4％，牛肉膏1.3％，酵母浸粉1.3％，氯化钠0.8％，琼脂粉3.2％，碳酸钙2.6％，柠檬酸二铵1％，吐温80 0.1％，硫酸镁0.1％，硫酸锰0.06％，余量为纯化水的改良MRS培养基中，划线，37℃培养24h，挑取3-5个典型屎肠球菌单菌落分别划线到MRS培养基中，连续纯化传代复壮3次，最后挑取复壮后屎肠球菌进行生理生化鉴定，鉴定为屎肠球菌后，选取最优屎肠球菌单菌落作为种子菌株，做一级种子液菌种；
b.一级种子液培养：无菌操作条件下，挑取筛选驯化后屎肠球菌单菌落接种于包括蔗糖2.3％，葡萄糖2％，蛋白胨1.6％，碳酸钙5.2％，酵母浸粉1.5％，氯化钠0.8％，牛肉膏2.0％，硫酸镁0.8％，硫酸锰0.8％，磷酸氢二钾3.4％，余量为纯化水的一级种子培养液中，以40℃温度在转速为250r/min的摇床中培养72h，培养结束后即得一级种子液，置4℃冰箱中保存备用；
c.二级种子液培养：无菌环境下，以10％v/v的接种量，将制备好的一级种子液接种到包括蔗糖2.9％，葡萄糖1.4％，蛋白胨1.90％，碳酸钙4.4％，酵母浸粉1％，氯化钠0.9％，牛肉膏1.7％，硫酸镁0.8％，硫酸锰1.0％，磷酸氢二钾3.3％，余量为纯化水的二级种子培养液中，在38℃温度下，在转速为320r/min的种子罐培养73h获得二级种子液；
d.固态发酵：无菌环境下，以20％v/v的接种量，将制备好的二级种子液均匀接种到包括豆粕43％、米糠13％，麸皮23％，碳酸钙11％，酵母浸粉2.7％，硫酸镁1.2％，硫酸锰1.2％，余量为纯化水的固态发酵培养基中，在35℃发酵培养68h。
e.烘干粉碎：发酵结束后将发酵产物置于50℃下烘干6h，再粉碎至100目即得屎肠球菌固态发酵菌剂。
2)益生素饲料添加剂的制备
枯草芽孢杆菌1.2份，地衣芽孢杆菌1.3份，短小芽孢杆菌0.8份，屎肠球菌固态发酵菌剂1.5份，果寡糖6份，海带粉25份，沸石粉30份，米糠55份。
(1)将米糠粉碎后过70目筛；
(2)将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和屎肠球菌固态发酵菌剂与果寡糖、沸石粉在250r/min转速下混合3min，混合均匀，得混合物；
(3)保持转速不变，在步骤(2)得到的混合物中加入海带粉和粉碎后的米糠，搅拌5min，使其混合均匀，得到肉鸡益生素饲料添加剂。
实施例2
1)屎肠球菌固态发酵菌剂的制备：
a.菌株的筛选驯化：无菌操作条件下，取屎肠球菌置于含有葡萄糖2.6％、蛋白胨1.5％，牛肉膏1.3％，酵母浸粉1.5％，氯化钠0.8％，琼脂粉3.1％，碳酸钙2.7％，柠檬酸二铵1％，吐温80 0.2％，硫酸镁0.1％，硫酸锰0.06％，余量为纯化水的改良MRS培养基中，划线，37℃培养73h，挑取3-5个典型屎肠球菌单菌落分别划线到MRS培养基中，连续纯化传代复壮3次，最后挑取复壮后屎肠球菌进行生理生化鉴定，鉴定为屎肠球菌后，选取最优屎肠球菌单菌落作为种子菌株，做一级种子液菌种；
b.一级种子液培养：无菌操作条件下，挑取筛选驯化后屎肠球菌单菌落接种于包括蔗糖2.3％，葡萄糖2％，蛋白胨1.7％，碳酸钙5.3％，酵母浸粉1.5％，氯化钠0.8％，牛肉膏1.9％，硫酸镁0.8％，硫酸锰0.8％，磷酸氢二钾3.3％，余量为纯化水的一级种子培养液中，以35℃温度在转速为180r/min的摇床中培养73h，培养结束后即得一级种子液，置4℃冰箱中保存备用；
c.二级种子液培养：无菌环境下，以9％v/v的接种量，将制备好的一级种子液接种到包括蔗糖2.8％，葡萄糖1.3％，蛋白胨1.8％，碳酸钙4.3％，酵母浸粉1％，氯化钠0.9％，牛肉膏1.7％，硫酸镁0.8％，硫酸锰0.8％，磷酸氢二钾3.3％，余量为纯化水的二级种子培养液中，在35℃温度下，在转速为350r/min的种子罐培养72h获得二级种子液；
d.固态发酵：无菌环境下，以18％v/v的接种量，将制备好的二级种子液均匀接种到包括豆粕42％、米糠12％，麸皮24％，碳酸钙13％，酵母浸粉2.8％，硫酸镁1.2％，硫酸锰1.2％，余量为纯化水的固态发酵培养基中，在38℃发酵培养72h。
e.烘干粉碎：发酵结束后将发酵产物置于30℃下烘干3h，再粉碎至80目即得屎肠球菌固态发酵菌剂。
2)益生素饲料添加剂的制备
枯草芽孢杆菌0.8份，地衣芽孢杆菌0.5份，短小芽孢杆菌1.2份，屎肠球菌固态发酵菌剂1.8份，果寡糖7份，海带粉20份，沸石粉30份，米糠50份。
(1)将米糠粉碎后过60目筛；
(2)将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和屎肠球菌固态发酵菌剂与果寡糖、沸石粉在290r/min转速下混合4min，混合均匀，得混合物；
(3)保持转速不变，在步骤(2)得到的混合物中加入海带粉和粉碎后的米糠，搅拌6min，使其混合均匀，得到肉鸡益生素饲料添加剂。
实施例3
1)屎肠球菌固态发酵菌剂的制备：
a.菌株的筛选驯化：无菌操作条件下，取屎肠球菌置于含有葡萄糖2.5％、蛋白胨1.3％，牛肉膏1.3％，酵母浸粉1.2％，氯化钠0.8％，琼脂粉3.1％，碳酸钙2.5％，柠檬酸二铵1％，吐温80 0.1％，硫酸镁0.1％，硫酸锰0.06％，余量为纯化水的改良MRS培养基中，划线，37℃培养24h，挑取3-5个典型屎肠球菌单菌落分别划线到MRS培养基中，连续纯化传代复壮3次，最后挑取复壮后屎肠球菌进行生理生化鉴定，鉴定为屎肠球菌后，选取最优屎肠球菌单菌落作为种子菌株，做一级种子液菌种；
b.一级种子液培养：无菌操作条件下，挑取筛选驯化后屎肠球菌单菌落接种于包括蔗糖2.3％，葡萄糖2.1％，蛋白胨1.7％，碳酸钙5.2％，酵母浸粉1.5％，氯化钠0.8％，牛肉膏1.9％，硫酸镁0.8％，硫酸锰0.8％，磷酸氢二钾3.4％，余量为纯化水的一级种子培养液中，以36℃温度在转速为200r/min的摇床中培养74h，培养结束后即得一级种子液，置4℃冰箱中保存备用；
c.二级种子液培养：无菌环境下，以8.5％v/v的接种量，将制备好的一级种子液接种到包括蔗糖2.9％，葡萄糖1.4％，蛋白胨1.9％，碳酸钙4.4％，酵母浸粉1％，氯化钠0.9％，牛肉膏1.7％，硫酸镁0.8％，硫酸锰0.9％，磷酸氢二钾3.3％，余量为纯化水的二级种子培养液中，在35-40℃温度下，在转速为340r/min的种子罐培养73h获得二级种子液；
d.固态发酵：无菌环境下，以20％v/v的接种量，将制备好的二级种子液均匀接种到包括豆粕41％、米糠12％，麸皮24％，碳酸钙14％，酵母浸粉2.7％，硫酸镁1.2％，硫酸锰1.2％，余量为纯化水的固态发酵培养基中，在37℃发酵培养70h。
e.烘干粉碎：发酵结束后将发酵产物置于50℃下烘干6h，再粉碎至100目即得屎肠球菌固态发酵菌剂。
2)益生素饲料添加剂的制备
枯草芽孢杆菌1.5份，地衣芽孢杆菌1.8份，短小芽孢杆菌0.8份，屎肠球菌固态发酵菌剂1.6份，果寡糖5份，海带粉25份，沸石粉35份，米糠55份。
(1)将米糠粉碎后过80目筛；
(2)将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和屎肠球菌固态发酵菌剂与果寡糖、沸石粉在280r/min转速下混合4min，混合均匀，得混合物；
(3)保持转速不变，在步骤(2)得到的混合物中加入海带粉和粉碎后的米糠，搅拌8min，使其混合均匀，得到肉鸡益生素饲料添加剂。
实施例4
1)屎肠球菌固态发酵菌剂的制备：
a.菌株的筛选驯化：无菌操作条件下，取屎肠球菌置于含有葡萄糖2.6％、蛋白胨1.5％，牛肉膏1.3％，酵母浸粉1.4％，氯化钠0.8％，琼脂粉3.2％，碳酸钙2.6％，柠檬酸二铵1％，吐温80 0.1％，硫酸镁0.1％，硫酸锰0.06％，余量为纯化水的改良MRS培养基中，划线，37℃培养24h，挑取3-5个典型屎肠球菌单菌落分别划线到MRS培养基中，连续纯化传代复壮3次，最后挑取复壮后屎肠球菌进行生理生化鉴定，鉴定为屎肠球菌后，选取最优屎肠球菌单菌落作为种子菌株，做一级种子液菌种；
b.一级种子液培养：无菌操作条件下，挑取筛选驯化后屎肠球菌单菌落接种于包括蔗糖2.4％，葡萄糖2.1％，蛋白胨1.8％，碳酸钙5.4％，酵母浸粉1.5％，氯化钠0.8％，牛肉膏1.8％，硫酸镁0.8％，硫酸锰0.8％，磷酸氢二钾3.3％，余量为纯化水的一级种子培养液中，以40℃温度在转速为250r/min的摇床中培养72h，培养结束后即得一级种子液，置4℃冰箱中保存备用；
c.二级种子液培养：无菌环境下，以8％v/v的接种量，将制备好的一级种子液接种到包括蔗糖3.0％，葡萄糖1.5％，蛋白胨2.0％，碳酸钙4.5％，酵母浸粉1％，氯化钠0.9％，牛肉膏1.7％，硫酸镁0.8％，硫酸锰1.2％，磷酸氢二钾3.3％，余量为纯化水的二级种子培养液中，在40℃温度下，在转速为280r/min的种子罐培养74h获得二级种子液；
d.固态发酵：无菌环境下，以15％v/v的接种量，将制备好的二级种子液均匀接种到包括豆粕40％、米糠12％，麸皮25％，碳酸钙15％，酵母浸粉2.8％，硫酸镁1.2％，硫酸锰1.2％，余量为纯化水的固态发酵培养基中，在40℃发酵培养69h。
e.烘干粉碎：发酵结束后将发酵产物置于40℃下烘干5h，再粉碎至90目即得屎肠球菌固态发酵菌剂。
2)益生素饲料添加剂的制备
枯草芽孢杆菌1.3份，地衣芽孢杆菌1.4份，短小芽孢杆菌0.6份，屎肠球菌固态发酵菌剂1.3份，果寡糖8份，海带粉30份，沸石粉25份，米糠60份。
(1)将米糠粉碎后过75目筛；
(2)将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和屎肠球菌固态发酵菌剂与果寡糖、沸石粉在300r/min转速下混合5min，混合均匀，得混合物；
(3)保持转速不变，在步骤(2)得到的混合物中加入海带粉和粉碎后的米糠，搅拌7min，使其混合均匀，得到肉鸡益生素饲料添加剂。
对比例1
与实施例1不同之处在于，将屎肠球菌固态发酵菌剂替换为乳酸菌，其余组分与制备方法同实施例1。
对比例2
与实施例1不同之处在于，屎肠球菌不经固态发酵直接添加，其余组分与制备方法同实施例1。
对比例3
与实施例1不同之处在于，将地衣芽孢杆菌替换为发酵乳杆菌，其余组分与制备方法同实施例1。
对比例4
与实施例1不同之处在于，不添加果寡糖，其余组分与制备方法同实施例1。
对比例5
与实施例1不同之处在于，不添加海带粉，其余组分与制备方法同实施例1。
对比例6
与实施例1不同之处在于，将沸石粉替换成滑石粉，其余组分与制备方法同实施例1。
喂养实验：
试验设计：选择相同生长状态、同一生长时期的三黄鸡660只，按照公母各半、体重一致的原则随机分为11个日粮处理组，每组60只三黄鸡。在34-38℃温度条件下，进行为期110天的喂养。
实验组1：向基础日粮中添加1.2wt％实施例1的肉鸡益生素饲料添加剂；
实验组2：向基础日粮中添加0.9wt％实施例2的肉鸡益生素饲料添加剂；
实验组3：向基础日粮中添加1.0wt％实施例3的肉鸡益生素饲料添加剂；
实验组4：向基础日粮中添加1.1wt％实施例4的肉鸡益生素饲料添加剂；
实验组5：向基础日粮中添加1.2wt％对比例1的肉鸡益生素饲料添加剂；
实验组6：向基础日粮中添加1.2wt％对比例2的肉鸡益生素饲料添加剂；
实验组7：向基础日粮中添加1.2wt％对比例3的肉鸡益生素饲料添加剂；
实验组8：向基础日粮中添加1.2wt％对比例4的肉鸡益生素饲料添加剂；
实验组9：向基础日粮中添加1.2wt％对比例5的肉鸡益生素饲料添加剂；
实验组10：向基础日粮中添加1.2wt％对比例6的肉鸡益生素饲料添加剂；
对照组：基础日粮,不添加肉鸡益生素饲料添加剂。
实验结束后分别记录各组三黄鸡的生长情况和鸡肉质量，统计结果见表1。
表1
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。
Claims (10)
1.一种肉鸡益生素饲料添加剂，其特征在于，原料按重量份计，包括以下组分：
枯草芽孢杆菌0.8-1.5份，地衣芽孢杆菌0.5-1.8份，短小芽孢杆菌0.6-1.2份，屎肠球菌固态发酵菌剂1.3-1.8份，果寡糖5-8份，海带粉20-30份，沸石粉25-35份，米糠50-60份；
所述屎肠球菌固态发酵菌剂的制备方法包括以下步骤：
a.菌株的筛选驯化：无菌操作条件下，取屎肠球菌置于含有葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、酵母浸粉、氯化钠、琼脂粉、碳酸钙、柠檬酸二铵、吐温80、硫酸镁、硫酸锰的改良MRS培养基中，划线，培养，挑取典型屎肠球菌单菌落分别划线到MRS培养基中，连续纯化传代复壮；
b.一级种子液培养：无菌操作条件下，将筛选驯化后的屎肠球菌单菌落接种于含有蔗糖、葡萄糖、蛋白胨、碳酸钙、酵母浸粉、氯化钠、牛肉膏、硫酸镁、硫酸锰、磷酸氢二钾的一级种子培养液中，摇床培养，培养结束后即得一级种子液，置4℃冰箱中保存备用；
c.二级种子液培养：无菌环境下，将制备好的一级种子液接种到含有蔗糖、葡萄糖、蛋白胨、碳酸钙、酵母浸粉、氯化钠、牛肉膏、硫酸镁、硫酸锰、磷酸氢二钾的二级种子培养液中，种子罐培养，获得二级种子液；
d.固态发酵：无菌环境下，将制备好的二级种子液均匀接种到含有豆粕、米糠、麸皮、碳酸钙、酵母浸粉、硫酸镁、硫酸锰的固态发酵培养基中发酵培养；
e.烘干粉碎：发酵结束后将发酵产物烘干，粉碎后即得屎肠球菌固态发酵菌剂。
2.根据权利要求1所述的一种肉鸡益生素饲料添加剂，其特征在于，原料按重量份计，包括以下组分：
枯草芽孢杆菌1.2份，地衣芽孢杆菌1.3份，短小芽孢杆菌0.8份，屎肠球菌固态发酵菌剂1.5份，果寡糖6份，海带粉25份，沸石粉30份，米糠55份。
3.根据权利要求1所述的一种肉鸡益生素饲料添加剂，其特征在于，步骤a中，改良MRS培养基中含葡萄糖2.5-2.6％、蛋白胨1.3-1.5％，牛肉膏1.3％，酵母浸粉1.2-1.5％，氯化钠0.8％，琼脂粉3.1-3.3％，碳酸钙2.5-2.7％，柠檬酸二铵1％，吐温80 0.1-0.2％，硫酸镁0.1％，硫酸锰0.06％，余量为纯化水；
步骤b中，所述一级种子培养液中含蔗糖2.3-2.4％，葡萄糖2-2.1％，蛋白胨1.6-1.8％，碳酸钙5.2-5.4％，酵母浸粉1.5％，氯化钠0.8％，牛肉膏1.8-2.0％，硫酸镁0.8％，硫酸锰0.8％，磷酸氢二钾3.3-3.4％，余量为纯化水；步骤b中，所述摇床培养的温度为35-40℃，时间为72-74h。
4.根据权利要求1所述的一种肉鸡益生素饲料添加剂，其特征在于，步骤c中，二级种子营养液中含蔗糖2.8-3.0％，葡萄糖1.3-1.5％，蛋白胨1.8-2.0％，碳酸钙4.3-4.5％，酵母浸粉1％，氯化钠0.9％，牛肉膏1.7％，硫酸镁0.8％，硫酸锰0.8-1.2％，磷酸氢二钾3.3％，余量为纯化水；
步骤c中，一级种子液的接种量为二级种子培养液体积的8-10％，所述种子罐培养的温度为35-40℃，时间为72-74h。
5.根据权利要求1所述的一种肉鸡益生素饲料添加剂，其特征在于，步骤d中固态发酵培养基含豆粕40-43％、米糠12-13％，麸皮23-25％，碳酸钙11-15％，酵母浸粉2.7-2.8％，硫酸镁1.2％，硫酸锰1.2％，余量为纯化水；
步骤d中，二级种子液的接种量为固态发酵培养基体积的15-20％，所述发酵培养温度为35-40℃，时间为68-72h。
6.根据权利要求1所述的一种肉鸡益生素饲料添加剂，其特征在于，步骤e中，所述烘干温度为30-50℃，烘干时间为3-6h，所述粉碎后的目数为80-100目。
7.一种如权利要求1-6任一项所述的肉鸡益生素饲料添加剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将米糠粉碎；
(2)将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和屎肠球菌固态发酵菌剂与果寡糖、沸石粉混合均匀，得混合物；
(3)在步骤(2)得到的混合物中加入海带粉和粉碎后的米糠，搅拌均匀，得到益生素饲料添加剂。
8.根据权利要求7所述的一种肉鸡益生素饲料添加剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中米糠粉碎后过60-80目筛。
9.一种如权利要求1-6任一项所述的肉鸡益生素饲料添加剂在饲料中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述肉鸡益生素饲料添加剂在饲料中的添加量为饲料总重量的0.9-1.2％。
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