CN113514579A - 一种依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法 - Google Patents
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Abstract
本申请涉及一种依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其包括如下步骤：往流通池中泵入释放介质，其中，所述释放介质的温度为36～37.7℃；将依托咪酯乳状注射液加入透析袋中，并置于所述流通池中；于不同时间点，取透析袋外的样品，得药物释放溶液，对所述药物释放溶液进行检测，得到依托咪酯乳状注射液的浓度；计算依托咪酯乳状注射液的释放度，并绘制释放曲线。本申请能客观模拟依托咪酯在血液内分布和吸收过程，有助于区分不同处方工艺的依托咪酯乳状注射液的质量，并提高依托咪酯BE试验通过率，降低研发风险。
Description
技术领域
本申请涉及药物分析技术领域，特别涉及一种依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法。
背景技术
依托咪酯乳状注射液作为静脉用药，在注射时，依托咪酯迅速的从油颗粒中分出来，依托咪酯的血浆蛋白结合率约为75％，主要是与白蛋白结合；在肾功能不全或者慢性肝损害患者中，蛋白结合率下降。依托咪酯迅速分布于脑及其它组织，总分布容积约为4.5l/kg。
依托咪酯乳状注射液属于O/W型特殊注射剂，其质量和活性成分在体内行为受处方和工艺的影响较大。特殊注射剂进入体内后通常存在释药过程和体液成分吸附等因素，受试药物与参比制剂处方和工艺的差异可能导致药物体内药代动力学行为发生改变，从而带来有效性和毒性的变化，可能进一步影响制剂在体内的安全性和有效性。
大多数乳状注射液在注射入血之后，制剂的释放是影响药物吸收的关键因素，乳状注射液的体外释放行为，可作为制剂产品质量评价的指标之一。首先开展受试制剂与参比制剂药学及非临床的比较研究，然后进行人体生物等效性试验。
现有技术并未建立依托咪酯乳状注射液的体外释放曲线的测定方法，未能为依托咪酯乳状注射液提供一种安全有效的评价方法。由于活性成分的不同，不同乳状注射液在体内外的释放过程和检测方法并不相同。
发明内容
本申请实施例提供一种依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，能客观模拟依托咪酯在血液内分布和吸收过程，有助于区分不同处方工艺的依托咪酯乳状注射液的质量，并提高依托咪酯BE试验通过率，降低研发风险。
本申请提供了一种依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其包括如下步骤：
往流通池中泵入释放介质，其中，所述释放介质的温度为36～37.7℃；
将依托咪酯乳状注射液加入透析袋中，并置于所述流通池中；
于不同时间点，取透析袋外的样品，得药物释放溶液，对所述药物释放溶液进行检测，得到依托咪酯乳状注射液的浓度；
计算依托咪酯乳状注射液的释放度，并绘制释放曲线。
一些实施例中，所述释放介质采用含无水乙醇的磷酸盐缓冲液。
一些实施例中，所述释放介质中，含无水乙醇的量为20％-40％(W/V)。
一些实施例中，所述释放介质的pH范围为6.8-7.5。
一些实施例中，所述释放介质的pH范围为7.0-7.5。
一些实施例中，所述透析袋的材质选自再生纤维素RC、纤维素酯CE或聚偏二氟乙烯PVDF。
一些实施例中，所述透析袋的截留分子量为8kD-15kD。
一些实施例中，所述透析袋的截留分子量为10kD。
一些实施例中，所述释放介质的流速为4mL/min-16mL/min。
一些实施例中，于不同时间点，取透析袋外的样品，得药物释放溶液，对所述药物释放溶液进行检测，得到依托咪酯乳状注射液的浓度，包括如下步骤：
取第一体积的所述释放介质，用四氢呋喃稀释至第二体积，通过微孔滤膜过滤后进行测定，得到噪音值；
于不同时间点，取第一体积的药物释放溶液，用四氢呋喃稀释至第二体积，通过微孔滤膜过滤后进行测定，并减去噪音值，得到不同时间点的依托咪酯乳状注射液的浓度。
本申请提供的技术方案带来的有益效果包括：
(1)、本申请建立了一种依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，用于评价不同处方组成、不同工艺样品的产品之间的质量差异的特性，质量区分度好，有助于提高依托咪酯BE试验通过率，降低研发风险。
(2)、本申请利用流通池可以客观地模拟人体内血液循环的特征，采取的释放介质中加入一定量的乙醇，结合流通池法，能够客观模拟依托咪酯乳状注射液在体内释放的过程，有助于区分不同处方工艺依托咪酯的质量，不仅可以用于原研药的质量一致性评价研究工作，也可以区分不同批次样品的稳定性。
(3)、本申请的体外释放测定方法，操作简单，为依托咪酯乳状注射液的质量控制提供了可靠的方法。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本申请实施例提供的依托咪酯乳状注射液体外释放曲线图。
具体实施方式
为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本申请的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
本申请实施例提供了一种依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其能客观模拟依托咪酯在血液内分布和吸收过程，有助于区分不同处方工艺的依托咪酯乳状注射液的质量，并提高依托咪酯BE试验(生物等效性试验)通过率，降低研发风险。
本申请实施例提供的依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其包括如下步骤：
往流通池中泵入释放介质，其中，释放介质采用含无水乙醇的磷酸盐缓冲液，释放介质的流速为4mL/min-16mL/min，温度为36～37.7℃；
将依托咪酯乳状注射液加入透析袋中，并置于流通池中，于不同时间点，取透析袋外的样品，得药物释放溶液，对药物释放溶液进行检测，得到依托咪酯乳状注射液的浓度；其中，可以使用气相色谱仪、液相色谱仪或紫外-分光光度计进行样品的检测，优选高效液相法，且高效液相的色谱条件为：TC-C18(4.6*250mm，5μm)，流速：1.0mL/min，柱温：40℃，检测波长：242nm。
计算依托咪酯乳状注射液的释放度，并绘制释放曲线。
释放度采用如下公式计算：
上式中，A药物释放溶液为药物释放溶液色谱图中，依托咪酯的峰面积；A药物总量溶液为药物总量溶液色谱图中，依托咪酯的峰面积。
药物总量溶液为对加入透析袋内的依托咪酯乳状注射液在0min时所取的样品。
在一些优选的实施例中，释放介质中，含无水乙醇的量为20％-40％(W/V)，更为优选地，含无水乙醇的量为30％(W/V)，通过在释放介质中，添加一定量的乙醇，能够促进药物的释放，能够客观地模拟药物在血液内的释放和吸收过程。
在一些优选的实施例中，释放介质的pH范围为6.8-7.5，更为优选地，释放介质的pH范围为7.0-7.5，为客观地模拟人体血液的pH，特别优选pH7.4。
在一些优选的实施例中，透析袋的材质选自再生纤维素RC、纤维素酯CE或聚偏二氟乙烯PVDF，更为优选地，采用再生纤维素RC。
在一些优选的实施例中，透析袋的截留分子量为8kD-15kD，更为优选地，透析袋的截留分子量为10kD。
在一些优选的实施例中，释放介质的流速为8mL/min。
在一些优选的实施例中，于不同时间点，取透析袋外的样品，得药物释放溶液，对药物释放溶液进行阿金侧，得到依托咪酯乳状注射液的浓度，包括如下步骤：
取第一体积的释放介质，用四氢呋喃稀释至第二体积，通过微孔滤膜过滤后进行测定，得到噪音值；
于不同时间点，取第一体积的药物释放溶液，用四氢呋喃稀释至第二体积，通过微孔滤膜过滤后进行测定，并减去噪音值，得到不同时间点的依托咪酯乳状注射液的浓度。其中，第一体积通常为1mL，第二体积通常为2mL。
实施例1：采用篮法-动态透析法
采用中国药典2020年版四部附录的装置，配制pH7.4的含30％无水乙醇的磷酸盐缓冲液PBS 500mL，作为释放介质，转速为100rpm/min，温度为37℃±0.5℃。将装有5mL依托咪酯乳状注射液的透析袋(截留分子量8kD-15kD)置转篮中，浸入释放介质中，分别于各取样点吸取药物释放溶液1mL，同时补充等温释放介质。
利用上述方法，测定批号为自制样品1、自制样品2、自制样品3和参比制剂1的依托咪酯乳状注射液，结果如下表1所示。
表1篮法-动态透析法释放度检测结果
表1结果显示，使用实施例1的方法，在240min时依托咪酯乳状注射液的释放仍未达到平衡，说明利用篮法-动态透析法不适用于测定依托咪酯乳状注射液。
实施例2：采用桨法-反向透析法
采用中国药典2020年版四部附录的溶出仪装置，配制pH7.4的含30％无水乙醇的磷酸盐缓冲液PBS 500mL，作为释放介质，转速为100r/min，温度为37℃±0.5℃。将装有2mL释放介质的透析袋(截留分子量8kD-15kD)，浸入释放介质中平衡2h。精密量取5mL依托咪酯乳状注射液直接加入透析袋外释放介质中，于0min取0.5mL透析袋外释放介质，作为药物总量溶液，加四氢呋喃0.5mL，混匀过滤。分别于各取样点取出透析袋，倒出袋内溶液，取0.5mL溶液作为药物释放溶液，加四氢呋喃0.5mL混匀至1mL，过滤。
利用上述方法，测定批号为自制样品1、自制样品2、自制样品3和参比制剂1的依托咪酯乳状注射液，结果如下表2所示。
表2桨法-反向透析法释放度检测结果
表2结果显示，使用实施例2的方法，参比制剂和自制样品在15min-30min时存在一个明显的释放，60min达到释放平衡，60min以后样品的溶出速度均减慢，且差别基本一致。
存在的原因之一是依托咪酯不溶于水，依托咪酯乳剂中使用的辅料大豆油也不溶于水。大豆油在乳剂中作为油相，能较好的溶解依托咪酯，但大豆油与药物之间较强的疏水作用使得药物难以离开油相后迅速释放到介质中，药物在油相和水相中的分布是动态平衡的，载药乳剂的漏槽条件下会迅速释放药物，因此，将乳液与未包裹的游离药物完全分开是比较困难的，而且溶出杯内游离的依托咪酯在一定程度上干扰检测的结果。
实施例3：采用流通池法-动态透析法
采用美国药典溶出度测定法流通池闭合***装置，22.6mm流通池，配制pH7.4的含30％无水乙醇的磷酸盐缓冲液PBS 200mL，作为释放介质，流速为8mL/min，温度为36～37.7℃。将装有2mL的依托咪酯乳状注射液的透析袋(截留分子量8kD-15kD，直径8mm)置于小池中，分别于各取样点吸取药物释放溶液1mL，同时补充等量同温释放介质。
利用上述方法，测定批号为自制样品1、自制样品2、自制样品3和参比制剂1的依托咪酯乳状注射液，结果如下表3所示。
表3流通池法-动态透析法释放度检测结果
表3结果显示，使用实施例3的方法，3组自制样品的溶出速度差别较小，溶出曲线具有一定的趋势。体外释放行为与体内药物分布具有一定的相关性。
实施例1与实施例2和实施例3进行方法对比，具有显著性差异，不具备区分力。实施例2的方法，由于溶出杯内游离的依托咪酯在一定程度上干扰体外释放的检测结果，为了解决该问题，利用实施例3流通池法溶出仪可以更好地动态模拟体液循环的特点，因此，本申请选择使用实施例3的方法进行依托咪酯乳状注射液的体外释放测定。
实施例4：取样时间点考察
(1)、释放介质配制：配制pH7.4的含30％无水乙醇的磷酸盐缓冲液，并将释放介质用水浴加热至36～37.7℃。
(2)、初始取释放介质1mL，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得空白供试品溶液。
(3)、精密量取依托咪酯乳状注射液2mL加入透析袋中，透析袋的截留分子量为10kD，并置于小池中，流通池释放介质流速为8mL/min。
(4)、分别于5min、10min、15min、30min、60min、90min、120min各取样点取透析袋外的样品1mL，得到药物释放溶液，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得不同时间点的药物供试品溶液。
(5)按高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定，精密量取空白供试品溶液10μl，测量得到噪音值，同时量取不同时间点的药物供试品溶液各10μl进行检测，并减去噪音值，得到不同时间点的依托咪酯乳状注射液的浓度，计算依托咪酯乳状注射液的释放度，得到如下表4。
表4：不同取样时间点考察
| 时间(min) | 5 | 10 | 15 | 30 | 60 | 90 | 120 |
| 释放度％ | 20.9 | 29.1 | 34.5 | 63.4 | 79.7 | 90.3 | 93.2 |
实验结果表明：依托咪酯乳状注射液在90min后释放趋于释放平衡，此时依托咪酯的峰面积基本保持不变，确定测定依托咪酯乳状注射液的释放时间为90min。
实施例5：释放介质的筛选
(1)、释放介质配制：分别配制pH7.4的含20％无水乙醇的磷酸盐缓冲液、pH7.4的含30％无水乙醇的磷酸盐缓冲液和pH7.4的含40％无水乙醇的磷酸盐缓冲液，将释放介质用水浴加热至36～37.7℃。
(2)、初始取释放介质1mL，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得空白供试品溶液。
(3)、精密量取依托咪酯乳状注射液2mL加入透析袋中，透析袋的截留分子量为10kD，并置于小池中，流通池释放介质流速为8mL/min。
(4)、于90min取透析袋外的样品1mL，得到药物释放溶液，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得不同释放介质的药物供试品溶液。
(5)、按高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定，精密量取空白供试品溶液10μl，测量得到噪音值，同时量取药物供试品溶液10μl进行检测，并减去相应的噪音值，得到依托咪酯乳状注射液的浓度，计算依托咪酯乳状注射液的释放度，得到如下表5。
表5：不同浓度释放介质的筛选
| 释放介质 | 含20％无水乙醇 | 含30％无水乙醇 | 含40％无水乙醇 |
| 时间(min) | 90 | 90 | 90 |
| 释放度(％) | 81.3 | 90.3 | 86.5 |
实验结果表明：在释放介质为pH7.4含无水乙醇30％的磷酸盐缓冲液时，依托咪酯的释放度最大，确定释放介质为pH7.4含30％无水乙醇的磷酸盐缓冲液。
实施例6：不同pH值释放介质的筛选
(1)、释放介质配制：分别配制pH6.8的含无水乙醇30％的磷酸盐缓冲液、pH7.4的含无水乙醇30％的磷酸盐缓冲液和pH7.5的含无水乙醇30％的磷酸盐缓冲液，并将释放介质用水浴加热至36～37.7℃。
(2)、初始取释放介质1mL，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得空白供试品溶液。
(3)、精密量取依托咪酯乳状注射液2mL加入透析袋中，透析袋的截留分子量为10kD，并置于小池中，流通池释放介质流速为8mL/min。
(4)、于90min取透析袋外的样品1mL，得到药物释放溶液，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得不同释放介质的药物供试品溶液。
(5)、按高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定，精密量取空白供试品溶液10μl，测量得到噪音值，同时量取药物供试品溶液10μl进行检测，并减去相应的噪音值，得到依托咪酯乳状注射液的浓度，计算依托咪酯乳状注射液的释放度，得到如下表6。
表6：不同pH值释放介质的筛选
| 释放介质 | pH6.8 | pH7.4 | pH7.5 |
| 时间(min) | 90 | 90 | 90 |
| 释放度(％) | 82.4 | 91.4 | 89.6 |
实验结果表明：在释放介质pH值为7.4时，依托咪酯乳状注射液的释放度最大，确定释放介质含30％无水乙醇的磷酸盐缓冲液的pH值为7.4时最优。
实施例7：不同流速筛选
(1)、释放介质配制：配制pH7.4的含无水乙醇30％的磷酸盐缓冲液，并将释放介质用水浴加热至36～37.7℃。
(2)、初始取释放介质1mL，，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得空白供试品溶液。
(3)、精密量取依托咪酯乳状注射液2mL加入透析袋中，透析袋的截留分子量为10kD，并置于小池中，流通池释放介质流速分别为4mL/min、8mL/min、16mL/min。
(4)、于90min取透析袋外的样品1mL，得到药物释放溶液，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得释放介质不同流速的药物供试品溶液。
(5)、按高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定，精密量取空白供试品溶液10μl，测量得到噪音值，同时量取药物供试品溶液10μl进行检测，并减去噪音值，得到依托咪酯乳状注射液的浓度，计算依托咪酯乳状注射液的释放度，得到如下表7。
表7：不同流速筛选
实验结果表明，在90min取样点，介质流速为4mL/min时产品未达到释放平衡,介质流速为16mL/min时，产品释放过快，介质流速为8mL/min时依托咪酯的释放度为90.3％，释放速度符合产品要求，因此本申请确定流速为8mL/min。
实施例8：透析袋规格的筛选
(1)、释放介质配制：配制pH7.4的含无水乙醇30％的磷酸盐缓冲液200mL，并将释放介质用水浴加热至36～37.7℃。
(2)、初始取释放介质1mL，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得空白供试品溶液。
(3)、精密量取依托咪酯乳状注射液2mL加入透析袋中，透析袋的截留分子量分别为8kDa、10kDa、15kDa，并置于小池中，流通池释放介质流速为8mL/min。
(4)、在5min、15min、30min、60min、90min、120min各取样点取透析袋外的样品1mL，得到药物释放溶液，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得透析袋规格不同的药物供试品溶液。
(5)、按高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定，精密量取空白供试品溶液10μl，测量得到噪音值，同时量取药物供试品溶液10μl进行检测，并减去相应的噪音值，得到依托咪酯乳状注射液的浓度，计算依托咪酯乳状注射液的释放度，得到如下表8。
表8：透析袋规格筛选
实验结果表明，在透析袋截留分子量为8KD时，依托咪酯在0至120min，释放未达到平衡。在透析袋截留分子量为10KD时，依托咪酯在90min，释放趋于平衡，释放度为94.4％。在透析袋截留分子量为15KD时，依托咪酯在90min，释放趋于平衡，释放度为98.4％。截留分子量为10KD和15KD时，释放度均达到90％以上，都满足本申请实验要求，本申请选择截留分子量为10KD的透析袋。
实施例9：透析袋材质筛选
(1)、释放介质配制：配制pH7.4的含无水乙醇30％的磷酸盐缓冲液200mL，并将释放介质用水浴加热至36～37.7℃。
(2)、初始取释放介质1mL，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得空白供试品溶液。
(3)、精密量取依托咪酯乳状注射液2mL加入透析袋中，透析袋材质分别为再生纤维素(RC)、纤维素酯(CE)、聚偏二氟乙烯(PVDF)，并置于小池中，流通池释放介质流速为8mL/min。
(4)、在5min、15min、30min、60min、90min、120min分别取透析袋外的样品1mL，得到药物释放溶液，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得透析袋材质不同的药物供试品溶液。
(5)、按高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定，精密量取空白供试品溶液10μl，测量得到噪音值，同时量取药物供试品溶液10μl进行检测，并减去噪音值，得到依托咪酯乳状注射液的浓度，计算依托咪酯乳状注射液的释放度，得到如下表9。
表9：透析袋材质筛选
实验结果表明，对比不同材质透析袋材质在90min和120min的释放度，结果显示聚偏二氟乙烯的透析袋在90min时未达到释放平衡。其中再生纤维素和纤维素酯透析袋在90min达到释放平衡，但对比60min的释放度，再生纤维素释放度为90.1％，更快达到释放平衡，因此透析袋材质优选再生纤维素。
实施例10、溶液稳定性考察
(1)、释放介质配制：配制pH7.4的含无水乙醇30％的磷酸盐缓冲液200mL，并将释放介质用水浴加热至36～37.7℃。
(3)、初始取释放介质1mL，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得空白供试品溶液。
(2)、精密量取依托咪酯乳状注射液2mL加入透析袋中，透析袋材质及规格：再生纤维素(RC)、截留分子质量10kDa，并置于小池中，流通池释放介质流速为8mL/min。
(4)、在90min取透析袋外的样品1mL，得到药物释放溶液，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得药物供试品溶液。
(5)、按高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定，精密量取空白供试品溶液10μl，测量得到噪音值，同时量取药物供试品溶液10μl进行检测，并减去噪音值，记录0、1、2、4、6小时的色谱图，得到如下表10。
表10：溶液稳定性试验结果
试验结果表明，在0至6小时内，依托咪酯峰面积在缓慢增大，确定溶液需现配现进。
实施例11：自制样品与参比制剂对比
(1)、释放介质配制：配制pH7.4的含无水乙醇30％的磷酸盐缓冲液200mL，并将释放介质用水浴加热至36～37.7℃。
(3)、初始取释放介质1mL，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得空白供试品溶液。
(2)、精密量取依托咪酯乳状注射液2mL加入透析袋中，透析袋材质及规格：再生纤维素(RC)、截留分子质量10kDa，并置于小池中，流通池释放介质流速为8mL/min。
(4)、于5min、15min、30min、60min、90min、120min、240min分别取透析袋外的样品1mL，得到药物释放溶液，用四氢呋喃稀释到2mL，微孔滤膜过滤后，即得不同时间点的药物供试品溶液。
(5)、按高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定，精密量取空白供试品溶液10μl，测量得到噪音值，同时量取不同时间点的药物供试品溶液各10μl进行检测，并减去噪音值，得到不同时间点的依托咪酯乳状注射液的浓度，计算依托咪酯乳状注射液的释放度。
利用上述测定方法，分别测定批号为自制样品1、自制样品2、自制样品3的依托咪酯乳状注射液，以及批号为参比制剂1、参比制剂2和参比制剂3的依托咪酯乳状注射液，测定结果如表11。
表11：各自制样品和参比制剂检测结果
根据上表11中的数据，并结合图1，可以直观地看出，基本上一致，故按本申请的技术方案进行依托咪酯乳状注射液及参比制剂的体外释放对比，可有效对不同处方工艺的产品进行质量区分。
在本申请的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本申请和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本申请的限制。除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本申请中的具体含义。
需要说明的是，在本申请中，诸如“第一”和“第二”等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
以上所述仅是本申请的具体实施方式，使本领域技术人员能够理解或实现本申请。对这些实施例的多种修改对本领域的技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本申请的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本申请将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所申请的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
Claims (10)
1.一种依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其特征在于，其包括如下步骤：
往流通池中泵入释放介质，其中，所述释放介质的温度为36～37.7℃；
将依托咪酯乳状注射液加入透析袋中，并置于所述流通池中；
于不同时间点，取透析袋外的样品，得药物释放溶液，对所述药物释放溶液进行检测，得到依托咪酯乳状注射液的浓度；
计算依托咪酯乳状注射液的释放度，并绘制释放曲线。
2.如权利要求1所述的依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其特征在于：所述释放介质采用含无水乙醇的磷酸盐缓冲液。
3.如权利要求2所述的依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其特征在于：所述释放介质中，含无水乙醇的量为20％-40％(W/V)。
4.如权利要求1所述的依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其特征在于：所述释放介质的pH范围为6.8-7.5。
5.如权利要求4所述的依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其特征在于：所述释放介质的pH范围为7.0-7.5。
6.如权利要求1所述的依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其特征在于：所述透析袋的材质选自再生纤维素RC、纤维素酯CE或聚偏二氟乙烯PVDF。
7.如权利要求1所述的依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其特征在于：所述透析袋的截留分子量为8kD-15kD。
8.如权利要求7所述的依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其特征在于：所述透析袋的截留分子量为10kD。
9.如权利要求1所述的依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其特征在于：所述释放介质的流速为4mL/min-16mL/min。
10.如权利要求1所述的依托咪酯乳状注射液体外释放曲线的测定方法，其特征在于，于不同时间点，取透析袋外的样品，得药物释放溶液，对所述药物释放溶液进行检测，得到依托咪酯乳状注射液的浓度，包括如下步骤：
取第一体积的所述释放介质，用四氢呋喃稀释至第二体积，通过微孔滤膜过滤后进行测定，得到噪音值；
于不同时间点，取第一体积的药物释放溶液，用四氢呋喃稀释至第二体积，通过微孔滤膜过滤后进行测定，并减去噪音值，得到不同时间点的依托咪酯乳状注射液的浓度。
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Citations (3)
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|---|---|---|---|---|
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20040121015A1 (en) * | 2002-12-11 | 2004-06-24 | Pfizer Inc | Controlled-Release of an active substance into a high fat environment |
| CN110736813A (zh) * | 2019-10-25 | 2020-01-31 | 广东嘉博制药有限公司 | 一种药物制剂体外释放度的测定方法 |
| CN110898011A (zh) * | 2019-11-27 | 2020-03-24 | 西南医科大学 | 一种依托咪酯纳米制剂及其制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 吴爱玲 等: "依托咪酯胶束溶液的制备及体内麻醉效果", 《医药导报》 * |
| 奉建芳 等: "《现代中药制剂设计》", 31 May 2020, 中国医药科技出版社 * |
| 沈杰 等: "丙泊酚乳状注射液体外释放一致性评价", 《中国药师》 * |
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