CN113391062A - 一种***免疫荧光层析快检试纸条、制备方法及其检测方法 - Google Patents

一种***免疫荧光层析快检试纸条、制备方法及其检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种***免疫荧光层析快检试纸条、制备方法及其检测方法，包括样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸和胶板。本发明的***荧光免疫快检试纸条采用免疫竞争的原理，***和***抗原共同竞争结合垫上的与荧光微球偶联的***抗体，当裂解液中***含量依次增加时则需要更多的抗体与之结合，故可与T线上抗原结合的抗体的含量则减少，T线的亮度减弱，C线为质检线，亮度不随***含量的增减而变化。本发明的***免疫荧光快检试纸条具有体积小、质量轻、便于携带、分析速度快、操作步骤简单等优点，打破了传统检测方法的局限性。对样本量庞大的现场快速检测提供了有力的技术支持。同时也给公安人员对于现场毒品缉查和检测带来了极大的便利。

Description

一种***免疫荧光层析快检试纸条、制备方法及其检测方法
技术领域
本发明涉及定量鉴定技术领域，尤其是涉及一种***免疫荧光层析快检试纸条、制备方法及其检测方法。
背景技术
毛发中毒品定性检测是法医毒物鉴定学科中兴起的检测技术，主要对阿片类、***类、***等毒品进行定性检测。因毛发易于保存、性质稳定、易重复取样、监测时间长等优点，毛发中毒品快速检测已经广泛地应用于毒品司法鉴定、打击毒品犯罪、侦破毒品案件、遏制毒品蔓延等领域。
目前毛发中毒品含量检测的主要方法有；液质联用、质谱法、气质联用等方法该方法虽然可以用于人体毛发中***含量的测定，但由于所使用的仪器设备体积过大，设备维护费用高、检测所需时间长，检测操作步骤繁琐，对于样本量大的的现场快速检测而言，这些方法就难以实现。
发明内容
本发明研究并建立一种毛发中毒品快速检测的分析方法，以解决上述传统方法存在的检测时间长，操作步骤繁琐等局限性。
本发明采用的技术方案为：
一种***免疫荧光层析快检试纸条，包括样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸和胶板，所述的结合垫的制备方法包括以下步骤：
(1)将结合垫置于结合垫浸泡液中浸泡2小时，取出浸泡好的结合垫置于烘箱中在45下烘干2小时备用；
(2)荧光微球的活化步骤：取荧光微球超声5分钟，取超声好的荧光微球 100微升加1ml 0.05mol/LMES(PH＝5.0)溶液混合均匀，离心13000r/min、20min、弃上清液，再加1ml0.05mol/LMES混合均匀超声5分钟，离心13000r/min、20min，弃上清液，加200微升0.05mol/LMES溶液混合均匀、超声5分钟，用 0.05mol/LMES溶液配制NHS10mg/ml，取15微升加入超声好的荧光微球中，再用纯水配制EDC15mg/ml取2微升加入到上述荧光微球中，用锡箔纸包裹避光摇床反应15分钟；
(3)荧光微球与***抗体偶联物的制备:取100微升每毫克的***抗体20微升加入活化后的荧光微球中混合均匀，避光摇床反应2h，加入10微升0.1mol/L 的乙醇胺溶液混合均匀，避光摇床反应30min后离心13000r/min、10min，弃上清夜，用500微升微球稀释液(0.01mol/LPBS+1％BSA)混合均匀，超声5分钟，避光摇床反应1h，离心13000r/min、10min,弃上清液，用200微升的微球稀释液混合均匀、超声5min.在2～8度下保存；
(4)取出微球***抗体偶联物超声5分钟，取超声好的微球抗体偶联物1微升加入100微升的喷金稀释液配制成喷金混合液，将稀释好的喷金混合液再次超声5分钟让微球抗体偶联物充分的混合均匀，并防止微球抗体偶联物的聚集，取出超声好的喷金混合液，采用XYZ三维喷金划线仪，以1微升每厘米的速度在处理好的结合垫上进行喷金，将喷金后的结合垫置于烘箱中在45度下烘干1 小时备用。
优选地：所的结合垫浸泡液为PH＝7.4的0.05mol/L的Tris-HCL缓冲溶液，其中包含5％的海藻糖、0.5％BSA、0.1％Tween；
优选地：所述的喷金稀释液配方：30mmol/lPBS、0.05％PEG20000、1％BSA、 0.01％SDS、10％蔗糖、3％吐温。
优选地：所述的样品垫为CB06、SB06、RB45、KB50、SB08，所述的结合垫为VL98、VL78、SAP-Z70，所述的NC膜为JJ140、CN140，所述的吸水纸为CH37、SH27、CH27、SH37，所述的胶板为PVC、SM31-40、SMNF31-40、SMA31-40。
优选地：所述的样品垫为SB06，所述的结合垫为SAP-Z70，所述的NC膜为JJ140，所述的吸水纸为CH37，所述的胶板为PVC。
本发明的***免疫荧光层析快检试纸条的制备方法，包括以下步骤：
(1)样品垫的处理：将样品垫置于样品垫浸泡液中浸泡10分钟后取出置于烘箱中37度下烘干2小时备用；
(2)结合垫的处理：将结合垫置于结合垫浸泡液中浸泡2小时，取出浸泡好的结合垫置于烘箱中在37下烘干2小时备用；
(3)喷金稀释液的配制及喷金具体操作步骤：取出微球***抗体偶联物超声5分钟，取超声好的微球抗体偶联物1微升加入100微升的喷金稀释液配制成喷金混合液；将稀释好的喷金混合液再次超声5分钟让微球抗体偶联物充分的混合均匀，并防止微球抗体偶联物的聚集，取出超声好的喷金混合液，采用X Y Z三维喷金划线仪，以1微升每厘米的速度在处理好的结合垫上进行喷金，将喷金后的结合垫置于烘箱中在45度下烘干1小时备用；
(3)NC膜上T线和C线分别是MOP+BSA溶液和IgG溶液，将二者分别用1％蔗糖+10mmol/lPBS的稀释液进行稀释，稀释后溶液的浓度分别为0.5mg/ml 和1mg/ml,然后用XYZ三维喷金划线仪在NC膜上以1微升每厘米的速度进行划线，将划好线的NC膜放入烘箱45度烘干15分钟备用；
(4)将处理好的样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸依次贴合在PVC胶板上，贴合顺序为：先贴NC膜、结合垫压着NC膜，样品垫压着结合垫，吸水纸压着 NC膜，彼此之间叠加长度一般为1mm左右，贴合完毕以后用切刀将其斩切为宽度为4mm每条的试纸条。
优选地：所述的样品垫浸泡液的配方为：30mmol/lPBS、0.5％SDS、1％BSA、0.5％PVA；所述的T、C线的稀释液配方：1％蔗糖、10mmol/LPBS配制成的溶液。
本发明也提供了一种毛发中***含量的检测方法，使用本发明所制备的试纸条检测毛发中***含量，具体步骤如下
(1)配制一系列的浓度梯度的***标准品溶液，各取100微升加到试纸条上，跑板5分钟之后，采用干式免疫荧光检测仪测定T、C线的峰并对峰面积进行积分，进而得到T/C的值；
(2)以T/C的比值为纵坐标，***标准品的浓度作为横坐标，建立标准曲线。将绘制的标准曲线写入ID芯片，由芯片导入荧光测定仪，使用仪器测定时利用导入的标准曲线对毛发中***含量进行测定；
(3)取吸毒者的头发适量，将其剪成长短为1mm左右，向剪碎的头发中加入1ml毛发裂解液，摇晃2～3次之后静置5分钟，5分钟之后取100微升加到试纸条的样品垫上，待其跑板5分钟之后采用微型荧光仪进行***含量的测定以及阴阳性的判断。
本发明的有益效果：
本发明的***免疫荧光快检试纸条具有体积小、质量轻、便于携带、分析速度快、操作步骤简单等优点，打破了传统检测方法的局限性。对样本量庞大的现场快速检测提供了有力的技术支持。同时也给公安人员对于现场毒品缉查和检测带来了极大的便利。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为***标准品绘制的标准曲线；
图2为荧光微球粒径筛选图；
图3为喷金稀释液的筛选图；
图4为结合垫和样品垫搭配的筛选图；
图5为喷金烘干温度筛选图；
图6为结合垫浸泡和不浸泡烘干效果对比图；
图7为结合垫烘干时间筛选图；
图8为样品垫浸泡与不浸泡效果对比图；
图9为T、C线浓度分别为0.5mg/ml、1mg/ml的结果图
图10为T、C线浓度分别为0.5mg/ml、0.1mg/ml的结果图；
图11为T、C线浓度分别为1mg/ml、0.5mg/ml的结果图；
图12为T、C线浓度分别为1mg/ml、0.2mg/ml的结果图；
图13为T、C线浓度分别为1mg/ml、0.15mg/ml的结果图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1-3
一种***免疫荧光层析快检试纸条，包括样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸和胶板，其制备方法可按照如下步骤进行：
(1)荧光微球的活化步骤：取荧光微球超声5分钟，(分别选择300纳米、 200nm和100nm的荧光微球)。取超声好的荧光微球100微升加1ml 0.05mol/LMES(PH＝5.0)(用纯水配制)溶液混合均匀。离心13000r/min、20min、弃上清液，再加1ml 0.05mol/LMES混合均匀超声5分钟。离心13000r/min、20min，弃上清液，加200微升0.05mol/LMES溶液混合均匀、超声5分钟。用 0.05mol/LMES溶液配制NHS10mg/ml，取15微升加入超声好的荧光微球中。再用纯水配制EDC15mg/ml取2微升加入到上述荧光微球中。用锡箔纸包裹避光摇床反应15分钟。
(2)荧光微球与***抗体偶联物的制备:取100微升每毫克的***抗体20 微升加入活化后的荧光微球中混合均匀，避光摇床反应2h，加入10微升0.1mol/L 的乙醇胺溶液混合均匀，避光摇床反应30min后离心13000r/min、10min，弃上清夜，用500微升微球稀释液(0.01mol/LPBS+1％BSA)混合均匀，超声5分钟，避光摇床反应1h，离心13000r/min、10min,弃上清液。用200微升的微球稀释液混合均匀、超声5min.在2～8度下保存。
(3)样品垫的处理：将样品垫置于样品垫浸泡液中浸泡10分钟后取出置于烘箱中37度下烘干2小时备用，所述的样品垫浸泡液的配方为：30mmol/lPBS、 0.5％SDS、1％BSA、0.5％PVA。
(4)结合垫的处理：将结合垫置于结合垫浸泡液中浸泡2小时，取出浸泡好的结合垫置于烘箱中在37下烘干2小时备用，所的结合垫浸泡液为PH＝7.4 的0.05mol/L的Tris-HCL缓冲溶液，其中包含5％的海藻糖、0.5％BSA、 0.1％Tween；
(5)喷金稀释液的配制及喷金具体操作步骤：取出微球***抗体偶联物超声5分钟，取超声好的微球抗体偶联物1微升加入100微升的喷金稀释液配制成喷金混合液，将稀释好的喷金混合液再次超声5分钟让微球抗体偶联物充分的混合均匀，并防止微球抗体偶联物的聚集，取出超声好的喷金混合液，采用XYZ三维喷金划线仪，以1微升每厘米的速度在处理好的结合垫上进行喷金，将喷金后的结合垫置于烘箱中在45度下烘干1小时备用。(喷金速度和喷金宽度根据需要自行进行调整)；所述的喷金稀释液配方：30mmol/lPBS、0.05％PEG20000、1％BSA、0.01％SDS、10％蔗糖、3％吐温；
(6)NC膜上T线和C线分别是MOP+BSA溶液和IgG溶液，将二者分别；所述的T、C线的稀释液进行稀释，稀释后溶液的浓度分别为0.5mg/ml和 1mg/ml,然后用XYZ三维喷金划线仪在NC膜上以1微升每厘米的速度进行划线，将划好线的NC膜放入烘箱45度烘干15分钟备用，所述的T、C线的稀释液配方：1％蔗糖、10mmol/LPBS配制成的溶液；
(7)将处理好的样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸依次贴合在PVC胶板上，贴合顺序为：先贴NC膜、结合垫压着NC膜，样品垫压着结合垫，吸水纸压着NC膜。彼此之间叠加长度一般为1mm左右。贴合完毕以后用切刀将其斩切为宽度为4mm每条的试纸条。(在贴合的过程中习惯性的将NC膜上的T线靠近结合垫、C线靠近吸水纸，因为这样在测定的过程中X1/X2的值与T/C的值相对应，便于绘制标准曲线)。
一种毛发中***含量的检测方法，使用本发明所制备的试纸条检测毛发中***含量，具体步骤如下
(1)配制一系列的浓度梯度的***标准品溶液，各取100微升加到试纸条上，跑板5分钟之后，采用干式免疫荧光检测仪测定T、C线的峰并对峰面积进行积分，进而得到T/C的值；
(2)以T/C的比值为纵坐标，***标准品的浓度作为横坐标，建立标准曲线。将绘制的标准曲线写入ID芯片，由芯片导入荧光测定仪，使用仪器测定时利用导入的标准曲线对毛发中***含量进行测定；
(3)取吸毒者的头发适量，将其剪成长短为1mm左右，向剪碎的头发中加入1ml毛发裂解液，摇晃2～3次之后静置5分钟，5分钟之后取100微升加到试纸条的样品垫上，待其跑板5分钟之后采用微型荧光仪进行***含量的测定以及阴阳性的判断。
***标准品绘制的标准曲线如图1所示，其测定T/C值如表1所示。
表1***标准品测定数据
***浓度(ng/ml) T/C(T线峰面积与C线峰面积比值)
0.1 1.324
0.2 1.161
0.5 0.8734
1 0.5396
2 0.4029
5 0.1639
10 0.0279
不同荧光微球粒径筛选，微球粒径过大则会出现微球凝聚灵敏度降低的现象，微球粒径过小则会影响标记时的离心效果，从而导致结合垫喷金液释放效果差。实验选择同一厂家不同粒径的微球进行筛选，结果如图2所示，由筛选结果知Thermo Fisher公司粒径为300nm的微球效果较好。
实施例4-8
与实施例1基本相同，不同点在于：荧光微球300nm，喷金稀释液配方依次为(1)：30mmol/lPBS、0.05％PEG20000、1％BSA、0.01％SDS、10％蔗糖、 2％吐温。
(2)：30mmol/lPBS、0.05％PEG20000、1％BSA、0.01％SDS、10％蔗糖、 0.5％吐温。
(3)：30mmol/lPBS、0.05％PEG20000、1％BSA、0.01％SDS、10％蔗糖、 1％吐温。
(4)：30mmol/lPBS、0.05％PEG20000、1％BSA、0.01％SDS、10％蔗糖、不加吐温。
(5)：30mmol/lPBS、0.05％PEG20000、1％BSA、0.01％SDS、10％蔗糖、 3％吐温。
结果如图3所示，图中从上之下一次为1-5号喷金稀释液，通过筛选可知吐温含量为3％的效果最佳。
实施例9-15
与实施例1基本相同，不同点在于：荧光微球300nm，样品垫和结合垫的搭配依次为：(1)SB06样品垫和SAP-Z70结合垫。(2)：SB06样品垫和RB45 结合垫。(3)：SB06样品垫和RB65结合垫。(4)：SB06样品垫和SB06结合垫。(5)：SB06样品垫和VL78结合垫。(6)SB06样品垫和KB50结合垫。
结果如图4所示，图中从上到下依次为1-6号，由效果对比可知样品垫和结合垫分别为SB06和SAP-Z70的效果最好。其它的搭配均出现释放不完全和跑板效果不好的情况。
实施例16-18
与实施例1基本相同，不同点在于：荧光微球300nm，喷金后烘干温度分别为(1)37度烘干1小时；(2)45度烘干1小时；(3)50度烘干1小时。具体结果见图5，图中从上至下依次为1-3号。由图5可以看出37度烘干1小时和50度烘干1小时均存在结合垫释放不完全，结合垫上的***抗体与T、C 线的结合效果差，测定效果不佳等问题。虽然50度烘干1小时相对于37度释放和跑板效果有所改善但与45度烘干1小时相比任存在释放不完全的问题。故通过筛选45度烘干1小时为最佳实验条件。
实施例19-20
与实施例1基本相同，不同点在于：荧光微球300nm，(1)结合垫浸泡；(2)不浸泡。具体结果图6，图中从上到下依次为结合垫浸泡和不浸泡的跑板效果，结合垫不浸泡烘干之后会出现结合垫喷金液基本不释放，从而导致可与T、 C线结合的抗体变少测定的灵敏度大大降低。
实施例21-23
与实施例1基本相同，不同点在于：荧光微球300nm，结合垫浸泡后烘干温度为45度，时间为2h，1h和15min，结果如图7所示，图中左图从上到下依次为45度烘干2小时、45度烘干1小时。右图为45度烘干15分钟。45度2 小时烘干效果与45度1小时效果相差不大，但从工作时效角度考虑45度1小时更具有高效性。45度烘干15分钟会出现结合垫喷金液不释放，T、C线对结合垫上抗体的结合效果变差，测定结果会出现较大的误差。
实施例24-25
与实施例1基本相同，不同点在于：荧光微球300nm，样品垫浸泡与不浸泡效果对比，结果如图8所示，图中从上到下依次为未浸泡和浸泡过的样品垫，通过对比效果可知样品垫经过浸泡预处理的效果较佳，样品垫不进行浸泡预处理则会造成结合垫上喷金液释放不完全，***含量测定不准确等问题。
实施例26-30
与实施例1基本相同，不同点在于：荧光微球300nm，T、C线浓度分别为 0.5mg/ml、1mg/ml；0.5mg/ml、0.1mg/ml；1mg/ml、0.5mg/ml；1mg/ml、0.2mg/ml， 1mg/ml、0.15mg/ml。结果如图9-13所示。
使滴加***时T/C有明显的变化(即试纸条对***浓度有一定的灵敏度)，在空白跑板时T线的峰要比C线的峰高，且高度要有一定的差值，这样在空白跑板时T/C为大于零的值，当测定***时待测样中的***抗原与结合垫上的抗体结合使得能与T线抗原结合的抗体量大大的降低了，T线的峰明显降低，T/C 的值明显降低(一般小于零)，从而实现试纸条对待测样中***浓度有较高的灵敏度。通过对测定值的比较和从经济效益的角度考虑T、C线浓度分别为 1mg/ml、0.15mg/ml为较优的实验方案，该浓度的设定既可以满足测定的灵敏度又能实现一定的经济效益。
试纸条效果实验
实验例1(试纸条精密度测试)
采用实施例1所制备的试纸条，采用浓度1ng/ml的***，取100微升加到试纸条上，跑板5分钟之后，采用干式免疫荧光检测仪测定T、C线的峰并对峰面积进行积分，进而得到T/C的值，重复5次，具体结果见表2。
表2试纸条精密度测试结果
***浓度(1ng/ml) T/C的值
1 0.5294
1 0.5466
1 0.5113
1 0.5523
1 0.5391
由表2可知，本发明的试纸条具有很高的精密性。
实验例2(试纸条特异性测定)
采用实施例1所制备的试纸条，采用1ng/ml的K粉、***和***，以纯净水作为空白，各取100微升加到试纸条上，跑板5分钟之后，采用干式免疫荧光检测仪测定T、C线的峰并对峰面积进行积分，进而得到T/C的值，重复5次，具体结果见表3。
表3试纸条特异性测定结果
毒品名称 T/C的值
空白 2.135
K粉 1.932
*** 2.194
*** 2.094
由表3可知，本发明的试纸条具有很好的特异性，可以快速区分不同毒品。
实验例3(试纸条稳定性测试)
采用实施例1所制备的试纸条，采用浓度1ng/ml的***，取100微升加到试纸条上，采用不同的跑板时间之后，采用干式免疫荧光检测仪测定T、C 线的峰并对峰面积进行积分，进而得到T/C的值，重复5次，具体结果见表4。
表4试纸条稳定性测试结果
跑板时间/min T/C的值(每个时间测十次求平均)
5 0.3325
7 0.3075
9 0.2954
12 0.2933
14 0.2930
16 0.2914
18 0.2912
20 0.2902
由表4可知，本发明试纸条稳定性很好。
实验例4
取吸毒者的头发适量，将其剪成长短为1mm左右，向剪碎的头发中加入 1ml毛发裂解液，摇晃2～3次之后静置5分钟，5分钟之后取100微升加到试纸条的样品垫上，待其跑板5分钟之后采用微型荧光仪进行***含量的测定以及阴阳性的判断，具体结果见表5。
表5试纸条对样本毛发中***含量的测定结果
Figure BDA0003083166580000121
Figure BDA0003083166580000131
由上表可知，本发明的***免疫荧光快检试纸条具有体积小、质量轻、便于携带、分析速度快、操作步骤简单等优点，打破了传统检测方法的局限性。
虽然上文已经描述了本发明的实施例，但对于本领域的技术人员而言，在不偏离本发明的原理和精神的情况下所做的修改和替换，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (8)

1.一种***免疫荧光层析快检试纸条，其特征在于：包括样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸和胶板，所述的结合垫的制备方法包括以下步骤：
(1)将结合垫置于结合垫浸泡液中浸泡2小时，取出浸泡好的结合垫置于烘箱中在45下烘干2小时备用；
(2)荧光微球的活化步骤：取荧光微球超声5分钟，取超声好的荧光微球100微升加1ml0.05mol/LMES(PH＝5.0)溶液混合均匀，离心13000r/min、20min、弃上清液，再加1ml0.05mol/LMES混合均匀超声5分钟，离心13000r/min、20min，弃上清液，加200微升0.05mol/LMES溶液混合均匀、超声5分钟，用0.05mol/LMES溶液配制NHS10mg/ml，取15微升加入超声好的荧光微球中，再用纯水配制EDC15mg/ml取2微升加入到上述荧光微球中，用锡箔纸包裹避光摇床反应15分钟；
(3)荧光微球与***抗体偶联物的制备：取100微升每毫克的***抗体20微升加入活化后的荧光微球中混合均匀，避光摇床反应2h，加入10微升0.1mol/L的乙醇胺溶液混合均匀，避光摇床反应30min后离心13000r/min、10min，弃上清夜，用500微升微球稀释液(0.01mol/LPBS+1％BSA)混合均匀，超声5分钟，避光摇床反应1h，离心13000r/min、10min,弃上清液，用200微升的微球稀释液混合均匀、超声5min.在2～8度下保存；
(4)取出微球***抗体偶联物超声5分钟，取超声好的微球抗体偶联物1微升加入100微升的喷金稀释液配制成喷金混合液，将稀释好的喷金混合液再次超声5分钟让微球抗体偶联物充分的混合均匀，并防止微球抗体偶联物的聚集，取出超声好的喷金混合液，采用XYZ三维喷金划线仪，以1微升每厘米的速度在处理好的结合垫上进行喷金，将喷金后的结合垫置于烘箱中在45度下烘干1小时备用。
2.根据权利要求1所述的一种***免疫荧光层析快检试纸条，其特征在于：所的结合垫浸泡液为PH＝7.4的0.05mol/L的Tris-HCL缓冲溶液，其中包含5％的海藻糖、0.5％BSA、0.1％Tween。
3.根据权利要求1所述的一种***免疫荧光层析快检试纸条，其特征在于：所述的喷金稀释液配方：30mmol/lPBS、0.05％PEG20000、1％BSA、0.01％SDS、10％蔗糖、3％吐温。
4.根据权利要求1所述的一种***免疫荧光层析快检试纸条，其特征在于：所述的样品垫为CB06、SB06、RB45、KB50、SB08，所述的结合垫为VL98、VL78、SAP-Z70，所述的NC膜为JJ140、CN140，所述的吸水纸为CH37、SH27、CH27、SH37，所述的胶板为PVC、SM31-40、SMNF31-40、SMA31-40。
5.根据权利要求4所述的一种***免疫荧光层析快检试纸条，其特征在于：所述的样品垫为SB06，所述的结合垫为SAP-Z70，所述的NC膜为JJ140，所述的吸水纸为CH37，所述的胶板为PVC。
6.一种如权利要求1-5任一项所述的***免疫荧光层析快检试纸条的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)样品垫的处理：将样品垫置于样品垫浸泡液中浸泡10分钟后取出置于烘箱中37度下烘干2小时备用；
(2)结合垫的处理：将结合垫置于结合垫浸泡液中浸泡2小时，取出浸泡好的结合垫置于烘箱中在37下烘干2小时备用；
(3)喷金稀释液的配制及喷金具体操作步骤：取出微球***抗体偶联物超声5分钟，取超声好的微球抗体偶联物1微升加入100微升的喷金稀释液配制成喷金混合液；将稀释好的喷金混合液再次超声5分钟让微球抗体偶联物充分的混合均匀，并防止微球抗体偶联物的聚集，取出超声好的喷金混合液，采用XYZ三维喷金划线仪，以1微升每厘米的速度在处理好的结合垫上进行喷金，将喷金后的结合垫置于烘箱中在45度下烘干1小时备用；
(3)NC膜上T线和C线分别是MOP+BSA溶液和IgG溶液，将二者分别用1％蔗糖+10mmol/lPBS的稀释液进行稀释，稀释后溶液的浓度分别为0.5mg/ml和1mg/ml,然后用XYZ三维喷金划线仪在NC膜上以1微升每厘米的速度进行划线，将划好线的NC膜放入烘箱45度烘干15分钟备用；
(4)将处理好的样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸依次贴合在PVC胶板上，贴合顺序为：先贴NC膜、结合垫压着NC膜，样品垫压着结合垫，吸水纸压着NC膜，彼此之间叠加长度一般为1mm左右，贴合完毕以后用切刀将其斩切为宽度为4mm每条的试纸条。
7.根据权利要求6所述的***免疫荧光层析快检试纸条的制备方法，其特征在于：所述的样品垫浸泡液的配方为：30mmol/lPBS、0.5％SDS、1％BSA、0.5％PVA；所述的T、C线的稀释液配方：1％蔗糖、10mmol/LPBS配制成的溶液。
8.一种毛发中***含量的检测方法，使用权利要求6所制备的的试纸条检测毛发中***含量，具体步骤如下
(1)配制一系列的浓度梯度的***标准品溶液，各取100微升加到试纸条上，跑板5分钟之后，采用干式免疫荧光检测仪测定T、C线的峰并对峰面积进行积分，进而得到T/C的值；
(2)以T/C的比值为纵坐标，***标准品的浓度作为横坐标，建立标准曲线。将绘制的标准曲线写入ID芯片，由芯片导入荧光测定仪，使用仪器测定时利用导入的标准曲线对毛发中***含量进行测定；
(3)取吸毒者的头发适量，将其剪成长短为1mm左右，向剪碎的头发中加入1ml毛发裂解液，摇晃2～3次之后静置5分钟，5分钟之后取100微升加到试纸条的样品垫上，待其跑板5分钟之后采用微型荧光仪进行***含量的测定以及阴阳性的判断。
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